-caténine/voie wnt impliquées dans lactivité transcriptionnelle cellules cancéreuses activité...
TRANSCRIPT
L’ACTIVATION DE ERK INDUITE PAR EGF PROVOQUE LA DISSOCIATION DE L’HETERODIMERE -CATÉNINE /-CATENINE ET LA TRANSACTIVATION DE LA -CATENINE VIA CK2
INTRODUCTION
-caténine/voie Wnt impliquées dans l’activité transcriptionnelle
Cellules cancéreuses Activité accrue voie Wnt Quantité accrue de -caténine dans le noyau
ARTICLE :Rôle d’EGF, ERK et CK2 : dissociation
hétérodimère caténine et transactivation B-caténine
VOIE WNT
Nucléaire : Tcf/Lef-1 activés par B-caténine
Facteurs de transcription Sous membranaire : complexe E-
cadhérine/a-caténine/B-caténine Dissociation par phosphorylation de a-
cat
ACTION D’EGFR ACTIF SUR LE COMPLEXE CAT
Dissociation du complexe ~ temps d’exposition à EGF
ACTION D’EGFR ACTIF SUR LE COMPLEXE CAT
EGF : Dissociation du complexe a-cat/b-cat
Membrane: diminution de b-cat Cytosol : augmentation de a-cat Noyau : augmentation de b-cat
ACTION D’EGFR ACTIF SUR LE COMPLEXE CAT
Traitement EGF 24 h : B-cat : accumulation nucléaire A-cat : présence membranaire et cytoplasmique Absence de colocalisation a-cat/b-cat
ACTION D’EGFR ACTIF SUR LE COMPLEXE CAT
Augmentation a-cat : inhibition internalisation b-cat (après exposition EGF)
ACTION D’EGFR ACTIF SUR LE COMPLEXE CAT
EGF augmente l’activité transcriptionnelle de TCF/Lef-1 En présence d’a-cat, activitié transcriptionnelle moindre
ACTION D’EGFR ACTIF SUR LE COMPLEXE CAT
shRNA : déplétion en a-cat Contrôle : activité transcriptionnelle élevée en présence d’EGF A-cat shRNA : activité transcriptionnelle forte en présence et en
absence d’EGF
ACTION D’EGFR ACTIF SUR LE COMPLEXE CAT
A-cat et b-cat sans stimulation par EGF : complexe sous membranaire
Activation EGFR : dissociation du complexe Translocation nucléaire de b-cat Activation tcf/Lef-1 par b-cat dans le noyau
PHOSPHORYLATION DE A-CATENINE PAR CK2
Après stimulation par EGF Phosphorylation sur sérine en position 641 de l’a-cat
PHOSPHORYLATION DE A-CATENINE PAR CK2
(résultats in vitro) En absence de CK2 : pas d’a-cat phosphorylée En présence de CK2 : a-cat phosphorylée en position 641
PHOSPHORYLATION DE A-CATENINE PAR CK2
(in vivo) Phosphorylation de a-cat WT par CK2 A-cat mutée (S641A) non phosphorylée par CK2
PHOSPHORYLATION DE A-CATENINE PAR CK2
Traitement par EGF (30 minutes) Augmentation de la quantité d’a-cat phosphorylée aux niveaux
membranaire et nucléaire
PHOSPHORYLATION DE A-CATENINE PAR CK2
Traitement par EGF Interaction FLAG-WT a-cat/CK2 ~ temps d’exposition à EGF
PHOSPHORYLATION DE A-CATENINE PAR CK2
Déplétion en CK2 par shRNA (non totale) Exposition à EGF : Contrôle : phosphorylation de S641 (a-cat) Cellules shRNA CK2 : pas de phosphorylation
PHOSPHORYLATION DE A-CATENINE PAR CK2
EGF induit la phosphorylation de a-cat en S641 par activation de CK2
LA PHOSPHORYLATION D’A-CAT L’EMPECHE DE SE LIER À B-CAT
Ajout de CK2 provoque la dissociation du complexe a-cat (WT)/b-cat
Dissociation du complexe, quelle que soit la quantité d’a-cat A-cat mutée : pas de dissociation par CK2
LA PHOSPHORYLATION D’A-CAT L’EMPECHE DE SE LIER À B-CAT
Inactivation de CK2 : augmentation de la liaison a-cat/b-cat
LA PHOSPHORYLATION D’A-CAT L’EMPECHE DE SE LIER À B-CAT
Déplétion de CK2 par shRNA et action de EGF Pas de dissociation de l’hétérodimère
LA PHOSPHORYLATION D’A-CAT L’EMPECHE DE SE LIER À B-CAT
Cellules transfectées avec a-cat WT, S641A ou S641D/pas d’exposition à EGF
S641A : liaison a-cat/b-cat augmentée S641D : liaison a-cat/b-cat moindre Idem aux niveaux membranaire et nucléaire
LA PHOSPHORYLATION D’A-CAT L’EMPECHE DE SE LIER À B-CAT