7/26/2019 260110140095_FAMI FATWA_MODUL 5

1/9

Analisis Rhodamin dalam Sediaan Kosmetik Eye Shadow

Menggunakan Metode Standar Adisi dengan

Spektrofotometri UV-Vis

Fami Fatwa

260110140095

Universitas Padjadjaran, Sumedang, Jawa Barat,

IndonesiaAbstrak

Analisis rhodamin dalam sediaan eye shadow menggunakan metode standar adisi

dengan spektrofotometri us-vis dengan tujuan agar mahasiswa memahami cara

penentuan kadar dalam spektrofotometri uv-vis dengan metode standar adisi.

Praktikum ini memiliki prinsip spektrofotometri uv-vis dan standar adisi. Analisis

rhodamin dalam kosmetik dilakukan dengan analisis kualitatif dan kuantitatif.

Pada analisis kualitatif dengan KLT didapatkan hasil nilai Rf 0,86 untuk rhodaminbaku dan pada sampel tidak terdeteksi adanya bercak. Dalam analisis kuantitatif

didapatkan kadar rhodamine dalam kosmetik 0,299%.

Kata Kunci : rhodamin, analisis, KLT, spektrofotometri, kadar

Rhodamine Analysis in Preparation Cosmetics Eyeshadow

Using Standard Addition method with

UV-Vis Spectrophotometer

Abstract

Analysis of rhodamine in the preparation of eye shadow using standard methods

adducts with us-vis spectrophotometry with the aim to make students understand

the determination of the uv-vis spectrophotometry with standard addition method.

This practicum has a uv-vis spectrophotometry principles and standards adducts.

Analysis of rhodamine in cosmetics made with qualitative and quantitativeanalysis. In qualitative analysis by TLC showed Rf value of 0.86 for the raw

rhodamine and on samples detected no presence of spotting. In the quantitativeanalysis of the levels found in cosmetics rhodamine 0.299%.

Keywords : rhodamin, analysis, TLC, spectrophotometry, level

7/26/2019 260110140095_FAMI FATWA_MODUL 5

2/9

Pendahuluan

Analisis rhodamin dalam

sediaan eye shadow menggunakan

metode standar adisi dengan

spektrofotometri us-vis dengan

tujuan agar mahasiswa memahami

cara penentuan kadar dalam

spektrofotometri uv-vis dengan

metode standar adisi. Praktikum ini

memiliki prinsip spektrofotometri

uv-vis dan standar adisi.

Spektrofotometri sinar

tampak (uv-vis) adalah pengukuran

energi cahaya oleh suatu sistem

kimia pada panjang gelombang

tertentu. Sinar uv memiliki panjang

gelombang 200-400 nm dan sinar

tampak (visible) mempunyai panjang

gelombang 400-750 nm (Day, 2002).

Pengukuran absorbansi

dengan menggunakan

spektrofotometer UV dapat

digunakan untuk analisis kualitatif

dan kuantitatif. Panjang gelombang

serapan merupakan perbedaan

ukuran tingkat-tingkat energi dari

elektron yang tereksitasi. Oleh

karena itu, puncak absorpsi (!) dapat

dihubungkan dengan jenis-jenis

ikatan yang ada dalam spesies.

Daerah panjang gelombang untuk

UV hampa adalah 10-200 nm dan

UV dekat 200-380 nm (Agustina,

2006).

Metode standar adisi

merupakan teknik analisis kuantitatif

dimana sejumlah analit dengan

jumlah yang diketahui ditambahkan

ke dalam sampel dengan variasi

volume kemudian diencerkan hingga

volumenya sama agar matriks sampel

dan matriks standar sama (Khoppar,

1990).

Berdasarkan Keputusan

Direktur Jenderal POM Nomor

00386/C/SK/II/90 tentang zat warna

tertentu yang dinyatakan sebagai

bahan berbahaya dalam obat,

makanan dan kosmetika terdapat

beberapa zat warna yang dilarangnya

penggunaannya; merupakan pewarna

untuk tekstil, dalam sediaan

kosmetika karena berpengaruh buruk

terhadap kesehatan sang pemakai.

Zat warna tersebut salah satunya

adalah Merah K10 (Rhodamin B,

C.I. Food Red 15, D&C Red No. 19)

(Depkes RI, 1990).

Metode

Alat yang digunakan dalam

percobaan ini adalah beaker glass,

7/26/2019 260110140095_FAMI FATWA_MODUL 5

3/9

chamber, corong, gelas ukur, kertas

saring, labu ukur, pipet tetes, plat

KLT, dan spektrofotometri UV-Vis.

Bahan yang digunakan dalam

percobaan ini adalah amonia, aseton,

aquadest, etanol, N-Heksan,

kosmetik, silica gel dan rhodamin

baku.

Preparasi Sampel

Sampel yg ditimbang

sebanyak 200 mg. Sampel kemudian

diekstraksi awal dgn n-heksan 5 mL

sebanyak dua kali. Filtrat kemudia

dipisahkan dari larutan n-heksan

dengan menggunakan kertas saring.Jika larutan n-heksan berwarna,

diekstraksi kembali dengan 5mL

pelarut campur (amonia 2% dalam

etanol 70%).

Identifikasi dengan KLT

Disiapkan eluen dengan

campuranAseton:Amonia:Aquades=

45:1:4. Eluen dibuat sebanyak 100

mL. Sampel yang telah diekstraksi

diambil 5 mL kemudian diuapkan

hingga kental. Sampel kemudia

ditotolkan pada plat KLT dan

dibiarkan didalam chamber

Penentuan Kadar dengan

Spektrofotometri UV-Vis

Sampel hasil ekstraksi

dimasukkan ke dalam labu ukur

kemudian di add hingga 25 mL.

Kemudian diambil kedalam lima

buah labu ukur 10 mL masing-

masing sejumlah 2 mL. Kedalam

labu ukur ditambahkan masing-

masing 1,2,3,4,5 mL larutan baku

rhodamin, kemudian ditambahkan

pelarut campuran (Ammonia 2%

dalam etanol 70%). Masing-masing

sampel diukur pada serapan 400

700 nm. Ditentukan absorbansi

maksimum dan dihitung kadar darisampel.

7/26/2019 260110140095_FAMI FATWA_MODUL 5

4/9

Hasil

1. Identifikasi Menggunakan KLT

Rf Baku : 0,86

Rf Sampel : tidak terdeteksi

2. Penentuan Kadar Rhodamin B menggunakan Spektrofotometri UV-

Vis

Vsto Panjang

Gelombang

Absorbansi

1

Absorbansi

2

Abosrbansi Rata-Rata

Absorbansi

1 548 0,3 0,2993 0,2987 0,29933

2 549 0,4693 0,4694 0,4693 0,46933

3 549 0,6592 0,6591 0,659 0,6591

4 549 0,8433 0,8428 0,8429 0,843

5 549 1,0249 1,0253 1,0252 1,025133

Cso =!"#$

!

!"#$

!"#

=

!

!!!"#$

!"#

! # $%&'()* + $%&&&,

-. # $%///0)

$

$%)

&

&%)

$ ( 1 ,

!"#$%"&'#(

*$+,-. /0&'1&% 2-+3

4,%5& 6&7,

-23245232

6789572:8;

-23245232

6789572:8;?

7/26/2019 260110140095_FAMI FATWA_MODUL 5

5/9

=

!!!!!"

!!!"#$

!

!"!!"

!

!"= 15,29 ppm

Ppm =!"!!!"#$%&

!"#$%&!"!#

15,29 =!"!!!"#$%&

!"!!"!!

Mg Rhodamin = 0,6116 mg

% Rhodamin =!!!""!

!"#!!!!""#= 0,299 %

Pembahasan

Praktikum ini dilakukan

untuk menganalisis rhodamin yang

terdapat dalam sediaan kosmetik.

Kosmetik yang dianalisis kali ini

adalah eye shadow. Dalam pengujian

dilakukan dengan kromatografi lapis

tipis dan spektrofotometri uv-vis, uji

dengan kromatografi lapis tipis

merupakan uji kualitatif yaitu dengan

melihat dan membandingkan nilai Rf

sampel dengan rhodamin baku. Ujikuantitatif dilakukan dengan

menggunakan spektrofotometri uv-

vis dengan metode standar adisi.

Dilakukan analisis rhodamin

karena rhodamin di dalam kosmetik

dilarang keberadaanya. Berdasarkan

Keputusan Direktur Jenderal POM

nomor 00386/C/SK/II/90 tentang zat

warna tertentu yang dinyatakan

sebagai bahan berbahaya dalam obat,

makanan dan kosmetika terdapat

beberapa zat warna yang dilarangnya

penggunaannya; merupakan pewarna

untuk tekstil, dalam sediaan

kosmetika karena berpengaruh buruk

terhadap kesehatan sang pemakai.

Zat warna tersebut salah satunya

adalah Merah K10 (Rhodamin B,

C.I. Food Red 15, D&C Red No. 19).Rhodamin sejatinya

merupakan pewarna tekstil dan

bukan merupakan pewarna yang

boleh digunakan dalam makanan

maupun kosmetik. Namun,

penggunaan rhodamin masih banyak

karena rhodamin dapat menghasilkan

7/26/2019 260110140095_FAMI FATWA_MODUL 5

6/9

warna yang menarik bagi konsumen.

Rhodamin dapat menyebabkan iritasi

pada kulit dan saluran pernapasan

rhodamin juga bersifat karsinogenik.

Rhodamin B dalam konsentrasi

tinggi apabila terkonsumsi dapat

menyebabkan kerusakan pada hati.

Sebelum dilakukan analisis

preparasi sampel dilakukan yaitu

dengan melarutkan 200 mg sampel

ke dalam 5 mL N-heksan. Hal ini

merupakan ekstraksi padat-cair yang

dilakukan untuk memisahkan antara

rhodamin dalam sampel dengan

eksipien atau pembawa pada sampel

eye shadow tersebut. Digunakan N-

heksan dalam ekstraksi ini karena

pada umumnya matriks dalam

sediaan kosmetik bersifat nonpolar

yang sesuai dengan sifat dari N-

heksan itu sendiri. Filtrat yang

didapat dari proses ekstraksi padat

cair lalu dilarutkan kembali dalam

pelarut campur (amonia 2% dalam

etanol 70%). Didapatkan larutan

sampel yang berwarna merah.

Larutan sampel berwarna merah ini

kemudian disaring menggunakan

kertas saring yang bertujuan untuk

menyaring senyawa rhodamine dari

pengotor-pengotor yang akan

mengganggu hasil analisis. Larutan

sampel juga ada yang diambil 5 mL

lalu diuapkan hingga larutan sampel

menjadi kental. Larutan kental ini

yang akan ditotolkan pada plat KLT.

Analisis yang pertama kali

dilakukan adalah analisis kualitatif

menggunakan kromatografi lapis

tipis. Analisis dengan menggunakan

KLT dilakukan untuk mencari nilai

Rf yang akan dibandingkan antara

sampel dan rhodamin baku. Prinsip

dari kromatografi adalah kepolaran

dan menggunakan prinsip like-

dissolve-like yaitu sampel akan

dibawa atau diikat dengan pelarut

yang memiliki sifat kepolaran yang

dekat atau sama dengan sampel. Oleh

karena itu pelarut yang digunakan

merupakan kombinasi sehingga

mendapatkan kepolaran pelarut yang

pas.

Larutan kental yang sudah

didapatkan ditotol ke plat dan

dimasukkan ke dalam chamber yang

sudah jenuh. Penjenuhan ini

dilakukan untuk mengoptimalkan

naiknya eluent karena fasa gerak

yang sudah terdistribusi merata pada

seluruh bagian chamber. Chamber

sudah berisi eluen yang merupakan

7/26/2019 260110140095_FAMI FATWA_MODUL 5

7/9

campuran aseton : amonia : aquades

dengan perbandingan 45 : 1 : 4.

Digunakan campuran eluen ini

karena rhodamin merupakan zat semi

polar sehingga digunakan aseton

sebagai eluen yang konsentrasi nya

mendominasi. Sehingga eluen bisa

membawa zat sampel dalam plat

KLT. Dilihat nilai Rf yang

didapatkan, nilai Rf merupakan

ukuran daya pisah suatu zat dengan

kromatografi planar. Nilai Rf

optimum yaitu berada pada rentang

0,5-0,8. Setelah dilakukan prosedur

pengujian didapatkan nilai Rf pada

rhodamin baku adalah 0,86

sedangkan pada plat sampel tidak

terdeteksi adanya bercak rhodamin.

Hal ini bisa disebabkan karena kadar

rhodamin yang terlalu sedikit

sehingga tidak terbawa oleh eluen.

Analisis selanjutnya yang

dilakukan yaitu analisis kuantitatif

dengan menggunakan

spektrofotometri uv-vis. Analisis ini

bertujuan untuk mengetahui kadar

rhodamin dari sampel yang diuji.

Dilakukan metode spektrofotometri

uv-vis karena rhodamin B memiliki

gugus kromofor dan gugus

auksokrom sehingga dapat dianalisis

pada spektrofotometri uv-vis. Dalam

pengujian dengan spektrofotometri

uv-vis menggunakan prinsip hukum

lambert beer yatu konsentrasi suatu

zat berbanding lurus dengan cahaya

yang diabsorbsi oleh sampel yang

diuji. Zat rhodamin B memberikan

serapan pada daerah visible yaitu

pada panjang gelombang 400-700

nm sehingga dapat digunakan

instrumen spektrofotometri uv-vis.

Pada praktikum kali ini

digunakan metode standar adisi

karena diperkirakan konsentrasi

rhodamin B yang sedikit dalam

sampel. Metode standar adisi

digunakan agar matriks sampel dan

matriks standar sama. Metode

standar adisi dilakukan dengan

menambahkan larutan baku pada

sampel, pada penambahan bisa

dilakukan variasi konsentrasi

ataupun variasi volume.

Praktikum kali ini digunakan

metode standar adisi dengan variasi

volume larutan baku. Volume larutan

baku 1, 2, 3, 4 dan 5 mL dimasukkan

ke dalam labu ukur yang telah berisi

2 mL larutan sampel. Setelah

dimasukkan larutan baku, larutan di

ad sampai 10 mL dengan pelarut

7/26/2019 260110140095_FAMI FATWA_MODUL 5

8/9

campuran. Lalu larutan ini

dimasukkan ke dalam kuvet dan

diukur menggunakan

spektrofotometri uv-vis. Setelah

dilakukan pengukuran didapatkan

absorbansi maksimal berada pada

panjang gelombang 548 dan 549

nm. Hasil ini sesuai dengan literatur

karena panjang gelombang

maksimum rhodamin pada pelarut

amonia dalam etanol adalah 547 nm

dan menurut Farmakope Indonesia

edisi 4 menyatakan bahwa

penyimpangan kurang lebih 3 nm.

Absorbansi yang didapatkan

dimasukkan ke dalam persamaan

garis yang didapatkan yaitu y =

0,1825 x +0,1116. Setelah dilakukan

perhitungan sampel, kadar rhodamin

dalam sampel merupakan 0,187%.

Hal ini berarti kosmetik tersebut

menyalahi peraturan yang tidak

memperbolehkan adanya rhodamin

dalam sediaan kosmetik.

Simpulan

Analisis rhodamin dalam

kosmetik dilakukan dengan analisis

kualitatif dan kuantitatif. Pada

analisis kualitatif dengan KLT

didapatkan hasil nilai Rf 0,86 untuk

rhodamin baku dan pada sampel

tidak terdeteksi adanya bercak.

Dalam analisis kuantitatif didapatkan

kadar rhodamine dalam kosmetik

0,299%.

Daftar Pustaka

Agustina, Ira. 2006.Metode Cepat

Untuk Kuantifikasi Teofilin

Dalam Sediaan Farmasi

Secara Spektrofotometri

Derivatif Ultraviolet. Bogor :

Departemen Kimia Fakultas

Matematika dan IlmuPengetahuan Alam Institu

Pertanian Bogor.

Day, R.A. dan A.L. Underwood.

2002. Analisis Kimia

Kuantitatif Ed. Keenam.

Jakarta : PT Gramedia.

Depkes, RI. 1990. Permenkes RI No.

376/Menkes/Per/1990 tentang

Bahan, Zat Warna, Pengawet

dan Tabir Surya pada

Kosmetika. Jakarta :

Departemen Kesehatan

Republik Indonesia.

Khoppar, S.M. 1990.Konsep Dasar

7/26/2019 260110140095_FAMI FATWA_MODUL 5

9/9

Kimia Organik. Jakarta : UI

Press.