diversité des branches évolutives basales du règne des
Post on 01-Feb-2017
218 Views
Preview:
TRANSCRIPT
������������ABCD ����������
ABC��D�E�F���CF����������C�������������������ABCDE�F�D�����F����CC�����F����C�
E�F�������������
����E�������E�F���CF����������C��
��C�D�C����D����D�
������������������� �!�� C�"�#
E���������E��
C�#$%�"��&�%#���E���������F�����������������������BBD�
� ��!���"��#��������������$����������%��$������&���
������������� ����������� ����������� ����������� ����������� ����������� ����������� ����������� ����������� ����������� ����������� ����������� ����������� �
��'��(��#���(�)��"�%�(�#'��*��'�()�(���(��*��+!"����(��%�,$�!"�"(���"(���(�#��(-(�+,�(�%-����%��,�*.�,���"(�$��/�"�(
%+(��(�*��"*��0���""�(��������1��&�������
��$�������'F�(���&E�������
��*���2*����*�)������F��������������*������++�,�F����F���F
C#)�(���"��*$����"��-����������+������*����.�.��#���/�,�F����F���F
&��� �"��#�C#��((����+����F�*����$�����������E�������00�,�����DC����F
%#������3�*�%�4.������F����0�����12����(,�����DC����F
2���!�(�3��)������+����F�*� #�0#2!�!�����,�����DC����F
5%���$$����"��"6���"%*-(����+����F�*����$�������������3,�DF�����F��������
�
������
��� ABC�DEF���� ���������FC�E���� B��������DB����E��E���� ���C����� �����DE�����C����
�������� �A��������� ����� ��A��D������� ����E����� �� !���C�� ��� �EF��� ��AC�����
�C�����" ��� #B���E�E���A��C A����E����� ��� ��C�AB�� �C�C��� �� ��F�� ��� #BC�DEF����� ��E�
���D��E�E��A�E�E���D����CA��D��B���E�����C�C�EC�E��������E��!��FE���"$��A�F���D�C���
D�� ����E�� A���E ��D�������%����������E��DC��E���� ��A�����C�E��� ������E���" &AE� ����
��A�E�����C�E����E��!��FE������AE��C��D�E�AEDC���������#B���E�E���A��C�EC���C�C�������
F����E������E���������C��"'���ABC��E��������E�������C�����������A����A���C��E��C���
����A��B�����B���C����C�E���D��!�������E����A������D���(������B���D������E����E���
C��A��!����C���%�����E���")����%C�C�������������A������A��CE����������������C����
��������)*+,+#$-'. D���C���������C�����������A��CE���!EC���������E��/�CDB���F��E�
!��FE���� C ��� A���� D�E��E�����EF��" '�� ���E������A��CE��� ������DD�� C�A������A����
�B��� ��� D���E� �� ��A�D���� �E� DB�����D�� #B���E�E���A��C ���� ��C��� D����E���� ���
��C�AB�� ���-��A�E��� / A� ����" '� D���� �C �E����E�� ������� �%��� DC� �E�E��� C� A�C�� ���
$DE��B�0���C ����� D�E�AEDC������ ��� ��F��� ��� 1�E�C�� �� ��� #BC�DEF���� D�E���%E� C
�FC������������������DB�����D�1D���2�C������DB�����D��C�C�����D��E�E��E���!E�E�/�C
�C�� ��� 3�E0���C" #�� ������C�� �!!���� ��� D���D�A�E��� D��� �C ���A�ED�E�� �� �����C��
��FC�E���� �EC �� ������4CF� �� F������ �� �%E�CF��E�" #�� ��FC�E���� ���� �FC������
D����������D����C�������E��������C�E���������E���AB�2���$DE��B�0���C����3�E0���C���E��
���.E0���C"
5
1����CA�
6��FE C�� ��E��E���� B��������DB� �BC� D�C� DE���C� ����� E� �������� �A�������� ������
��A��D������ ����E���� C�� !��� ��� �! �B� �C��� ��0C����EA �E��CF��" 1���F �B�� �B�
#B���E�E���A��CDB����A����E������B��C����E���FE�F��C�AB���!�B�!��FC�0E�F���C����AC�
FE��A�E�EAC�E�!���C�E���!���B��������C��E�F�!�B�!��FC�������E��C���C�EC�E��"*�7������BE�
F���DBC� �����������0��C��A����������� �B� ����� �! �B� !��FC� 0E�F������CE� D�����
��������"*���� 7����A�E���B�!��FC��E����E��7E�BC�D�AEC� E������� E�#B���E�E���A��C� �EC
���E�������C� F����EA C�C�����" 'E!!����� 0E��� �! �C�D��� 7��� A����A��� C� ���D-��C
B�����B���C������7BEABC��F����C���A���E�����C�B���D����!�E����E��BC�����E�F�����EA
��FC�E��� C�� C��� ��A��DC��E�F ����� !��FC� �E��CF��" 8� D��A��� �B� �C�C A����A���� 7�
������D�� C� ���E�� ����-!�E����� �C�C�C��� AC���� )*+,+#$-'.� A���CE�E�F ��C�E��-AB�A0��
����A��C� �C�0��� ���EAC����� !��FC� DB���F����EA ����E��" 8B�����A��C� ��D��E����C� �����
���EF���B���C���7���B����A�ED�E���! �E� DB�����D�������FE�F��#B���E�E���A��C� !����!
�B��D����AE�F��C�AB����������A�E�����!���"1��������D�A�������B��E����E������E����F���
�������B�$DE��B�0���CA�C�������C�E�������1�E�C���6��FE9 C����DB�����D��!1D���2�C
C���7�DB�����D���!�����E���FE�F��0C������7E�B����!E���D��E�E���C����E�����B�0��7�
3�E0���C�7������CE���"8B�����������!!��D���D�A�E���!���B����A�ED�E���!��7��FC�E����EC
F�����������AE�F��E�CFE�F����C����B��C��D���E�E�F!���B��������E���!�B�A��D������D
������E��C�����C�E���BED�E�$DE��B�0���C�3�E0���CC��.E0���C"
:
�����������ABCD��
�����������ABCD��
EF��A��D���� ���
��F����B��B��D���B���� ����
���DC������������B����� ���
!�"�#�D��ACD����$�$D��%���������B����� ���&
E�"�'AD��A�D�� ���&
��"�(�D������B�� ���&
#�"��)�����B� ���*
!!�"�#��A�%A��$F���AB+� ���,
E�"����DC������������B���������������D���������-�B�A��.��A� ���,
��"�����E����/���0������1���������BAB������A���B��2� ��34
#�"�-DB�B����D$���DB�������������B����� ��3�
!!!�"�5BF�D�BA$�A�%���B��� ��36
E�"�5���DB�AB���������F���������C��� ��36
��"�)�AB�AB�����������BF�D�BA$ ��3,
#�"�5BF�D�BA$���D��������D��������$����BD�� ��3,
!7�"�ED�D��������FB������C��������#���B����� ��3�
E�"�8���D�1��A�9�5B.�D1��0�����������������1�$AB���� ��3�
��"������B��$�����������0����������������D$����� �� �
#�"�:�����F������1���0�����#D1�A�1��A� �� 3
5�"������B��$�������������D��A$DB�$�����D�����D$�������;���+������� �� 6
)�"�<1��A�C����$F���ABF�����D�����BF�D�B+B��AB�����������B����� �� ,
6
�����������ABCD��
7�"�����#�1ADB�B�1��A� �� ,
E�"��B����B� �� ,
��"��D�+B��$�����B��� ��&�
�=�������1ADB���������������� ��&
3=�������1ADB�������B�B����DB� ��&&
7!�"���������B�������DB�� ��&*
E�"��D�+B��$�����B��� ��&*
��"�>���AB����$�����B���� ��&,
#�"�E���B��AB�����B�A��������B���� ��&�
5�"���������B���������������B�F��A�BD�������D1�A�� ��&�
)�"���������B���������������B�F��A�BD���+���B���� ��6&
�=�5BF�D�BA$���D��������D���������A�D���� ��6&
3=�5BF�D�BA$���D��������D��������$����BD�� ��6*
=�5BF�D�BA$���������B���������$DB��D� ��6?
&=�5BF�D�BA$������B��$���������� ��6?
�D$���A�AB���������@��AB+� ��*3
(�A$DB����A�($A����� ��*6
!�"�#D$�AB����;����������������$����$�B$����%�����1������1���$�$AB�����+���B���� ��*,
!!�"�5��B����;��D������$����BD�� ��,�
!!!�"�E���1����������BF�D�BA$�����#�1ADB�B�1��A�����B�B����1�D�A��D�� ��,*
E�"�)����AB����� ��,*
��"�8$��B������FBD������A��� ��,�
�=�)%AD��AB�������;E5A��$��B����A�A�� ��,�
*
�����������ABCD��
3=�E��B+B��AB��������C�������;E�AD��?'��F���(<3B'�?� ��?3
=�#��������������B���� ��?6
!7�"�E���1������1���$�$AB���� ��?6
E�"�E�B�����A ��?*
��"�($A���������D�����AD��AB������1���$�$AB���� ��?*
�=�A�B����D�C�B�B�� ��?*
3=�($A���������%B�����FD�B�������� ��?,
=������A���������;�D�D��B�+$D$ ��?,
&=�($A�������1$�B���� ��?,
#���BAD��� ��?�
�<D(D#-�5��0�����D�A�����A������+�D�����1�����+�+�������BF�D�BA1������F���AB��
#���BAD��3 ����,
>�������BF�D�BA1�B������������1�D�A��D�������1�A��
#���BAD�� ���3�
)�D�1��BF�D�B����D��������+�A���+������.B�����������B�A��.��A��������
B������������1�D�A��D���F��A�
5B�����B���"���D����ABF�� ���66
�$+$D�������B��B��D���B���� ���*,
,
�����������ABCD��
E���%�� ���?�
��E�ABF��D��A�B����BAB���B�D�����B���AB+B����1�D��B��B���D��D�AB���
�+�����A���DBF�����D����B�A���AE
��!�A��D�AB����+��������D�+���AB�����A�A�������1�A�B����F��0�
�D��.A�D����������+�A�D���������+���FBD����A�������B����������A�����B��
?
���������A
���������A
B�C�D��EAD����F�C�DAC�D���F�ACE����F�DACD���DC�DAC����FA�DAC�F����ACA�AC���DC������DC
DA�C�����E�D��C��F�FAEDC�DC�AC���A�CBDAC��D�F��DAC�����E�FDACE��FD��C��AEDAC���CD�D���D�C
A��C�DAC��������DACD������F �DA�C������F �DAC�C�DAC��DAC�DC����F�F��C!D�D������C��AC
�DAC����FA�DAC�DC��EAD��D��C��AC��AC�DAC��������DA�C"C���D��D�C���C�DAC��#����DA�C$�C�C���C
E�ECD��FA��EC����F�FAD�C�DAC��� �D��AC��E����F�DA�C�F�AF�C�DAC�D��EAD����F�AC�DC������DC�DC��C�FDC
��C��C%��DC��D��DA�CB���DC��D��DC��EAD��DC�DAC����FA�DAC�F����AC�D����EACD�C��FAC���F�DAC&C
'���D�F�� C �����D� C D� C (�#����� C )'������ CB� C �DE� C *++,-� C .���F C �DA C (�#������ C �D C ����D C �DAC
/�FA��#���C����D��C��F��F���D�D��C�DC����DC�DAC��F����CD�C�DC����DC�DAC�����F���A�C$�C�C
���F��D��A CE�E C����E C �D C �DA C�D�� C ����DA C A�� C ����DA C )'������ C0 C.���D� C1223-� C�� C ADF� C�DAC
/�FA���#�C�DAC4�DAC�����DACD�FA�D��C���AC �DAC �F��EDAC��A��DAC�DAC�����F���ACD�C���C��C
�F�D��C�DC��C�F�D��D��DC�DAC�����F���ACD�C�DAC��F�����C!DACF��D��F���DAC�E�DAAF�D��C����D��F�C
�DCAE �D��DAC��E����F�DAC������FA�DACADC�AF�F�����C��C�F�D��C�DC�DAC�F��EDAC��A��DAC���C
���F� C %��D C �EA��DA� C (� C D��D�� C ��� C �DA C �F��EDA C ��A��DA C �DA C �����F���A� C �DA C �E���DAC
���AD����F�CD�C��FA���F�CA��C�F�F�EDAC���C��C�DA��F��F�C�DC���D��DACDA���DA�C(�C��C�F�D�AF�EC
�DC�DAC�F��EDAC��A��DACDA�C��F��D����C���AC���DAAF��DC���C�DAC������DAC��E����F�DAC��FACA�C
E���DC�DA�DC�D�C�����EDC���C������C���C�F��EDACA��E�FD��DAC��C����DC�DAC�����F���A�C�F�AF�C�� C
�����F�C��DA���DAC�E��F�DAC���C�DAC �F��EDAC��A��DAC)FEBEC !����F�F�����CD�C5�������-CDA�C
����D�D�� C F��E�FD��D C " C �D��D C �DA C �����F���A C A��E�FD��A C )FEBEC '�AF�F������ C �A������ C D�C
6��D������-�
BDA C �����F���A C�� CA����� CE�E CE���FEA C���A C �DA CE�A�A���DA C���F�D����� CD� C F� C � CE�EC
����EC ��F�AC�C���FD��C��C�7�DC��EC���AC�DC������DC�DACE�E�D��AC���C�D��C��������DC�E�E�����DCD�C
���AC��C���AF�F�CE�A�A�E�F �DC���C�D��AC�D���F�ACA���F�F �DAC�DC�F�D�ADAC�����DA�C(�C�F�FD�C
���F�� C �DA C E���DA C A�� C �D����� C �F�A C �����EDA C D� C ��� C �D C ��D��� C D��DA C A�������D��C
��F��F���D�D��C"C�E��F�DC�D��C�F�D�AF�E�C.��AFD��AC�E���DAC��CE�ECD����EDAC���C�D���DC����DC
2
���������A
�DC�D��DC�F�D�AF�E�C��FAC�DAC������E�FA�F �DACF��E�D��DAC"C�DAC�E���DAC�F�AFC �����C�����F���AC
�D��D��C�F��F�F�DC����D��F�C����CF��D���F�DCD����A�F�C�DAC����DAC���F �DAC��EAD��A�C8DC���A�C��C
����F�EC�DACE���DAC��C���ECA��C �DAC�����F���ACA��E�FD��A�C ��FAA���C��C�F�D�AF�EC�DAC �F��EDAC
��A��DA C �D� C �E��F�D� C 9E�D��D�� C ��D C E���D C A�� C �D C �F�D�AF�E C ���F �D C ���A C �DA C �F�FD��C
������D����� C���F�A C �����A C � C�FA C D� C E�F�D��D C ��D�FA�D��D C �D C AE �D��DA C �FA����DA C �D C ��C
�F�D�AF�E C ����D C �DA C !����F�F������ C �� C �F��ED C ����� C �F�D��E C D� C ��D�F��D C �� C ����D C �DAC
�����F���A�
BDAC��D��F�AC�DC�DC�����F�C�DC���ADCA��C&C
)F- �D C �E��F�D C �� C �F�D�AF�E C �DA C !����F�F����� C �DA C�F�FD�� C ������D����� C���F�AC
�����AC���C��������DC�DC��C�E��F �DCD��F���D�D����D�
)FF- �������AD� C �DA C�D���F�A CE����F�DA C�DA C �F��EDA C��A��DA C�DA C�����F���A C��� C��DC
������DC�����E�E�F �DC��AEDCA��C�DACAE �D��DACD��F���D�D����DAC��D��DA�C
:�AC��FA�AC��������ADC �DC��C�F�D�AF�EC�DAC!����F�F�����CDA�C�D�����C���AC�����DC �DC
�D��DC�E��F�DC��E�E�D��D��C��C�F�D��C�DACAF�DAC������D�����CD�C �DC�������ADC�DC�DC������C
��A�� C �� C ����D C �DA C �����F���A C �D�� C �F�D� C " C �� C ����E�D�AF� C �D C �� C �F�D�AF�F���F� C �DAC
�����F���AC�F�DC�DAC/�FA��#����C
1+
�����������ABCDE�F��
������
�����A�BCD�E��
FF
�����������ABCDE�F��
F�
�����������ABCDE�F��
������������������������������������������������ ����!��������� ���!"�#������$�� �"� ��
� ���%$���$ �#���� �&�$'��((���$!����$ ����� �����#$��� ��#��( ����� �������������������)�*�������
������ �� � �� �� � $�� � + �&� � ���� ������ � ��� � ������"����� � ,-�+� �� � #� � ��� ��� � ��� � �#�������
!&�#$��&��������#�%$�##���#������ �$&�������#��� ��#���������$�������'�������� �#)�����$����(� ��$��
!��� ���� � #��$' ��� � #� ����� ������ ���� ���$&�##�� �������� ��� ��� � #-���#�$ ��� � #� ���&� ���! ����� ��
���'�#� !����&���$���� !�������������#����&� ���!�(��"�%$����##��%$-�##����������$��.����,�$ ���&���
$� � ���! /� � �� ���$#�� � ��$ � #�� � #�"�!�� � +���#��) � 0-���$�& � � $�� � � !��������� � �� � #-!��� � ����
������������� � �$ � #� � ���#$� � ��� � 1��� ����������� � #� � � ���� � � � �&�� � ��&� "! � �$ � �"�� � ����
������"����)�
F2
�����������ABCDE�F��
��� �"�������������"����
��3�1� ���� ���"!�! �$'�����������"����
����������"������������$����$�������#�"�!���#����#$����&� ���������$4� �����51�������F667�8�
�#��49�##� ��:FF;����������� <$��������$������" �$����#����#$������ ��������� ��������� #�$ ��
(���������&���#����$'�!�����������5=$�##� �>�0��������::7;)�*���#$����#������$�� ?#��!������%$��
���� �������������%$��� ��$���$ �����+����#!�$#���$��#��!��������� ����#�"��������� ���� ����
���$�� ��##� � 50����� �>�=$�##� � ��::7�8 �0��,��� ��� �C��� ��::6;) �@�$��(���� � #�$ �!�$���� ��$ ��$� �!�!�
�� �"!��&� �� #���!���������������������$'�5��A�� ����� �� ����C��� ��:F�;���� #���" �$����.� ���! /���
!������%$���5C�9�##��F662;��#��������$����� �������#�$ ���&� ���!����� ��������!�)
B�3�0� $��$ ��
���� ��� %$�+#��&� �!�!������ ���#�"���������A�"$ ��F;����������#������&��������+�� &!�����B�
#�� � ������"���� � 5�����4� � ��::�;) � �#� �� !������� �� ������#����� ���$'� ����� ���� �� $��$ ���C � #��
(� �� � #�&$ � � $����##$#�� � � �� � #� � (� �� � ���!#����� � �#$ ���##$#�� � � �������$!� � �-������) � ����
������"������$�! ��$ ��B����������������������������������������������!����-���D.D�� ��%$-�#��
����� ����������#��������������%$����$'����#���#$�� �������$� ���������"�������������������%$���
5��������������$�;�50��,�������C�����::6;)�1���������"������$�! ��$ �����������"$����!"�#�������� �
#��� ��$����������� $��$ ������( $���(����������� ������%$���5�����4� ���::�;)�
��3���� ��$������
����������"�������$&������� �� ��$� ���������� ����'$!���$����'$!�)����(� �����'$!������
FE
�����������ABCDE�F��
����#!� � �!#!��� ��� � �� � #� � (� �� � ���'$!� � ��� � ����#!� � ����� ���) � *-$� � ����� � �� � &$��
��'�����%$�� � #� ���� � ����B�C���C� � �� �������C��B� � ��C��F��� 5�1�F�8 �=�F��## ��� � C��� � �::G;�
��������#-$��#������������������((! �������$ �����$���������$'�����������$��(����#� �%$��#�����$'�
����������������$����#�������$��!#!��� �������� ����$)������������������ �� ��$������ ������
�$ �#��� ��$������������ �����'$!���$����'$!��%$����$&����� ��� ������(� ������((! �������������
#���B�"���� ��������� ��"����� ������B�#���H�"��������5I��������C�����::G;����#���B����� ������B�
#���1��� �����������5A#������>���#,����::6;)������ ������������ !���$'�1��� ������������!&�#�����
�#$��#� "������#����� ���! ����%$���� �� ����$'�B����� ��)�������((! �����" �$�������������"�����
� !������������$#���#����!����������������� ��������#�$ ����� ��� !�$#������-$��������������.�
#�$ ���&� ���������5�$�B�������C�����::E;)�
����������A�B�CD�EF�F��E�D��C��F�����D��B����C�������������������������D�����B��E�ED�
FJ
�����������ABCDE�F��
1�3�����#�"��
*-$�����������&$��!��#�"�%$���#���������"����������$+�%$��������#������!�!��+�� &!����������
���+ �$��� � !"���� ��$ �"#�+� �%$� � �� � ���� � �� ���#��$' � ����������# � �$ � ��!���%$� � 5���� �� � 3 � ����
������"������� ���;)�C� ��'���#�������#�����#���#���������������������$ �#���#$��" �����( �������
���#��+��������5I� �#��>������� �C$�������::�;)�1������������ "���������!�! �� ������� �����%$�����
��$ ������ � �� � ������!� � � "���%$��� � �� � �#� � ��� � � ������#����� � !�! � �!� ��� � ����� � !�����
��� �������) � �#� ������$ ��������� ������ ������5����� �� ����C��� ��:F�;� ������ �� ��+�� ������ ��$�
� �&� �����#�$ ��� ��� ����������##$#�����������������)�����((�����#���!� ������������B�������$&��� �
�#�&� �������#��� ���� "���%$�������#�'����������(� �����#$������#����%$-�#� ���$&�������$����
������#� �5C��� ����C�����::K�8������ �� ����C��� ��:F�;)�*���#$���#�$ �(������������!���������������
�!� ��$� ��-� �"��� �&!"!��#� � 5��A�� ��##$#���� � #�"����; ��$ ��-� �"��� ������#� � 5��A�� 4! ������ � �������;�
�� ��� � �� � �#� "$� � ���� � #-!��������� � ��� ���#!�$#�� � $��#���+#�� � �� � $� � �#$� � " ��� � ���+ ��
�-� "��������5D��� ����C��� ��::7;)� �#��,�$����������$�� ?#������ �#������#�����#���$��� +�������#��
����#�"�������$� �������5C��� ����C��� ��::K;�������� �$&��������� ���#�%$!�������������+ �$'�
!���$' � � ����%$�� � 5I� �#� �>���� ��� �C$����� ��::�;) ���� ��$� � � (������� � �������$ ��+#� �����
������"�����������##��� �&���������#�$ ��������������&���#����#�����)�C� ��'���#���#���#$�� ������
�#�������� ��� ����������� �#�������$�$�#������&�������A#��� ����������$ �(� �� �#������� ��B���
.�� +$��$#���5��A�� C� ���4����::K;) ���� !���$��-�����������������"�����%$��� ��������#����# �.�
�� �� ����� ��������� ������� ���$� ���#���$� ���������! �#�������� �%$�������#�����)���� ���$ ��#�� �
������"����� �<��&�����$��� +����� "���%$��50���� ����C���� �:F:;)�*-�$� ���������������+������
�&�������� "��������&!"!��$'���������$'������!"�#�������+�� &!�)�C� ��'���#���#���������"�����
����$�� ?#�������!"#�"��+#����������%$���� ��������$������"����) �1��� (�������� ����� � #����#$��
!����$�������� ��������$� ��������������$������������������$ ��$��������������� ������)�C� �
�'���#�����##���$�� !����$ ��B�EB��B���5����A�"$ ���;��$��������"�����!�������"��%$����$ ����
/� ��$��#��!��������"�������+������ ?#���-$���!��������� ����������#������5L� ����:::;)
��� � ������"���� ����� ��� � ���� � $� � #� "� � ����# � �� � (�������� � !������!��%$��� � �$ ��$��
!�$��!��������#�����#��$'�����������$')�
FG
�����������ABCDE�F��
������ ��� ��C��F������BF��C �B�� � �� �����B��E�E�
B�C��F��� �������������ABC��BDA��C����������9�"�
@ ��������##�$��'� ��������C�������C���5�::K;)�
B$���$ ����� #�$ �!&�#$������ �#� �������#����!�������+ �$'���+������ ��� ������$+����#$���$ ��
����������� ���������� ��������)�B&���������$ �$�& ���&���#�$ ���&� ���!���'�����%$�����$���##����
��$�����! ���� �.�#���#����%$-�#�����$������$���������#-� + �����#��&�����-���D.D�� ���+�� &� �%$�#��
� "��������&�&����������#�$ ���#$��� �������� ����)��
���3�1����'���!&�#$��(�
B�3���� �"�������������"����������#��" �$�������������4����
�� � #�"�!� � ��� � ������"���� � �� � #� � #�"�!� � ��� � �����$' � 5=���B��; � �� ��"��� � $�� ������� ��
!&�#$��&� � ����$�� � �&��� � #�$ � ��&� ��(������� � 5���� A�"$ � � 2;) � *� � ���+ �$��� � !�$��� � �� � �����
������!���.� !��$� ��#�� �#������%$-�##�������#-$���&��D.D&������#-�$� �����#�$ �������������������$�
����������$4� ���������$��#��������&� �������+�������������� %$�$ ����#!�$#�� ��)�B������I��� �"���
���C��� 5F662;��������� !�$����#$��" ������ �'����!��$� �"�������������"������&���#���=���B���
�#$�?��%$-�&���#�� �"��������#����������$��#������#��"�������#�����������$�D$���!� �+�����%$��5"����
���#-B�F �FK0;)�1�� !�$#��������!"�#�������+���$�#���/������!���� ���#��$(�>�C�#�� �5F662;��. �
#-���������!%$������� ��!�%$����������##����$� (����$ ��-!#��"������FM�5�ADFM;)�C#$�� !���������
#-$��#�����������" �����,�$'��������!��������(� �!���� �" �$�������5��A���$ 4�����C�����::7�8�D���#�
���C�����::6;)�����������������&����-�$� ���" �$�����#��� �"��������������"�����������������$'�
F7
�����������ABCDE�F��
(� �����#�� �������4�����51�&�#�� D0�����>�1�����F66J�8�B�# ����C�����::J;)�1�$'D����� �� !��������
��������� ���� ���%$��#�$ ������� �� ��������#��� !�������-$��(#�"�##�����! !�����! ��$ ���������#��
(� �� � ��#���� � ��� � � /��� � ��������� ��#�� ����� � �+�� &!�� � ���B � �� � ���+ �$��� � ������� � ���
��$ ������/� ��������� ���� ��������� �$'��$�" �$���51� �>���#��$(���:FF;)�����������4��������
��&����� ��� �D�#�B�� ��� �D�#�������) � ��� �D�#�B��� �" �$���� � #�� �=���B��� � ��� ��#��� � ( � � � #���
1�����(#�"�##�����#������������� ������%$�� ��� ������������B�C��������5�����%$������������������"�!��
. � $� � ��&��$ � ��'�����%$� � �$�! ��$ ;� ����� ��BC���E��B��� � ���C���DB��� ��CD�C�DBC �
�!CB!C"���#������B�C� ���#���B���#������ ��$ ������� ��� ���$�$����!%$������$�#!�����%$���-����
���� � ��������+#� � 5���" ��� �C��� ��::��8 ��$�BD@ �##� ��� �C��� ��::E�8 �0����4��� ��� �C��� ��::G8 �1� �>�
��#��$(���:FF;�5����A�"$ ��E;)
���������� �!���CE�����ED�ED�D���D�"�#��!�F���*-�� �����#��$(�5�::2;
FK
�����������ABCDE�F��
�������$���������D��B����C�����E��B�!���CE�����D�%B�DF��#�EF���E$�� ��"���������!�!�$��#��!��C�#��" �����
���#�����������$�D$���!�� �+�����%$���5FK0�����K0;��MD�$+$#���5����;����#��� ��!��������������� ��%$��6:D
4*��5E�D$%;)� ����&�#�$ ������� �+�+�#��!������! ��$ ����-��(! ��������!����������#�����$ �����"����� �
+����� �� � �$ � ��'��$� � �� � & �����+#���� � ���� � ����!�� � �$D����$� � �� � ��D�����$� � ��� � + �������
�������&�����)�������##������+ ������������ ��� ������##���$����+ ������$+����$�������$�#!�����%$���
�� ��������#���#-!���##������%$!��5:):G;)�����#�"�������������##!����� �����������$'���'�������#���������� �
���#�"!�!��%$���������� �����)�A�"$ ���'� ��������1� �>���#��$(�5�:FF;)
E$�����$'�D�#�������� � �#� ������������!���$� �"�������������"������������F$�#�� �����
50����4�������C�����::G�8��� �����C�����:F:;)�����F$�#�� ���������!�!��!�#��!������B���+�B���5����
A�"$ � � 2; � �$' �������4���� � �$��� � . � ��� � ���#���� � ���#�"!�!��%$�� ��$#��D"���� � �+$���� � 5��A��
=� �� �����C�����::7�8�0����4�������C�����::G�8���$����C�����::6;��#� ��%$��#�$ ���������������������
#�� �������4���� �+��!���$#����� ��$ � #� �"������� #-B�F �FK0���� � (��+#�������$��� �! � 5B�� �#D
H���#� ����C�����::F;)�1������������ ������������+�N���������(#�"�##!���!������������(�#�������5B�#�
�� �C��� ��::J;) �0�$#�� � #�� � #�"�!�� �+���#�� ���� �������"���� �!���� � (#�"�##!��� � #� ��� �� ��$�(#�"�##��
���+#���-/� ��� ��$������������ �����!������������B�#���F$�#�� ��������#���������"�����51� �>�
��#��$(� ��:FF;) �C� ����� �� ���� ��� ���� �� ���������##����� ��! ��!� ��-$� ����/� � � ����$�������
F6
�����������ABCDE�F��
� !����� � ���B � #�� � F$�#�� ���� � �� � ���B � #�� � ������"���� � ��� � #�"�!�� � +���#�� � ����� � #���
�!�#�������������+�N��������� ������B����� ���5A#����� �>���#,����::6;)��!�������� �&������C �
C��C�������������������B�C���������$������B���5B�#����C�����::J;����!�!� ����������!���������'���
( � � � ��� �F$�#�� ���� � �-�� �� � $�� � ���#�"!��� � �+$��� � +��!� � �$ � ���% � "�����C � FK0� � ������� � OD
�$+$#�����(����$ ��-!#��"������FM����� ��!��������������� ��%$��7:D4*��5� �9�����C�����::6;)�1-����
#����$#����������$�"�� ��&������C�����##���-��!�!����#!��%$-$�����$#��(���)��##�������� ���! ��!���� �
#��(� ��������-$����" !"�������$#����##$#�� �����(� �������%$��������!�������##$#�������+�N����
���%$��� ��$���������� ���5� �9�����C�����::6;)���(����#���������4������������$����#��" �$���( � ��
����B���+�B����������������+#��(� ���#������4����)�@�$��#����$� ����$�� ����������� �" �$�!��
�����#�����4�����51�&�#�� D0�������::6;)�@�$��(�����$���� ��������+ ������ ���������$�� ���������
��$&�������� ���$ � #����������/� ���#��!���������+�"$N�!������ #-$����$�#-�$� ��������� #�"�!���
��,�$ ��������$4� �������������������! !����������������B�C���������$4� �����5B�#����C�����::J;)�
��3�����B�$��B���C�$�����#$���$������������������+�"$P
������#$������B�$��B�������$����������#�"�!����$������������������+�"$P)�����((��������
�#���������$������������4������$��������4������-���$�/� ���!�� ���!��������� �� �+$�����&���#��
� ��!��������������� ��%$��6:D4*��5E�D$%;�50���������>�1�&�#�� D0�������::2;���� #��"�������
#-B�F �FK0 ����+��!��$�"������� #� �" �������$�D$���! � �+�����%$��5B�F ��K0; �5=� �� � ��� �C����
�::7;)�������$#������!�$�����&���#��"�������#-B�F �FK0�51�&�#�� D0�����>�1�����F66J;����$�� �
!�$����$#��D"����5B�F �FK0��B�F ��K0����������OD�$+$#�����MD�$+$#������ �E�D$% �;��$��� ��������
����� �� �+$����#-��������������B�$��B�������#����( � ������������4�����5L������C�����::G;)����
���#$������B�$��B��������������$!������$'�� � ���C � #���C#������������ 51�&�#�� D0���� ��� �C����
�::K; � �� � #�� � B�$���������� � 5L� ��& �> �=�#��4�&� � F6K6 � ���� � 1�&�#�� D0���� �> � 1���� � �:F:;)�
1�&�#�� D0�����>�1����5�:F:;����� ������ �$������#����+��!���$ �#��"�������#-B�F �FK0�$���#����
������4����QB�$���������� � �&�� � $� � �������������� � �� ����#!��%$� � ��� � C#������������
(��+#��������$���$)
�:
�����������ABCDE�F��
������ � &� � ��F� � �� �EFAB���BA� ��FBD���D�� ���
(#�"�##� � ����! ��$ � ��� � !���� � ������ � %$� � #� � (#�"�##��
���! ��$ ��#$��(��������#$����$ �)�����##��FR�)�C�����
�$ � ��� ������ � !#��� ���%$� � . � +�#���"� � �� � B)C)�
=�#��4�&��'� ��������1�&�#�� D0��������C���5�::K;)�
��� � B�$��B�� �5���� A�"$ � � J;� ���� � ��� � � "������� � �!�! �� ����� � #�+ �� � ����!���� � ��$'�
(#�"�##���C � $� � �� �"! � &� � � #-�&��� � �� � #-�$� � � � ����! � &� � � #-� �� � � 5B�# ��� � C��� � �::J;) � �#� � �����
��+��$�##������ ������ !�������$���$���������#��$��� �����������#�����#�)�����B�$��B�������$� �
����$����������#���$ �#������ !�����������#����&� ��(�������������$4� �����������%$��#��+�($ �������
��� � � #������4�������� #�����4����� 5=� �� � ����C��� ��::7;) �*������� ��"!�! �#�� �$���&�������#$��
�'��$���&� � �� � #� � ��&� ���! � �� � ��� ���� �� "������� � +���$' � �������"�!� � �� � #-��%$������� � ���
����!�����#!�$#�� �� ���� ��!������ ���� ��� ���� ��� �������$'� !��$� �� #��� �#������ �!&�#$��&���
�'���������51� �>���#��$(���:FF;)
1�3� �"����� !���+ ����������������"����
���� ���� ��������������#�� ���������!&�#$��&���-$���#�"�!�����������"�������!�!���#�$#!��
��$ ������ � � #� ���&� ��(����������� �������"��������� ��B���� �. �� +$��$#�� � 5A#��� �������;�
�&��� #� ���#������������� ���#��$'��� ��� �� ��� � #�� ��#����� � 50���� ��� �C��� �F662;) �1��������������
�������$ � #-�� #�"����#!�$#�� �� � �-���D.D�� � �$� ���$'� ��������� �. � #��"� �� ��� �����$+����$������
�-�����������!���$�����$�#!���������� ����$'���'���$��#����)��#��-�"�������������#�+ � ������ + ���
���#�"!�!��%$���.�#-������������!�����#!����#�"�%$���5(����#��;��(����-������ �$��S"���+��#$����#��
��&� "�������� ��������'���$��#����)�0��������C���5F662;�����$��#��!�F���!%$�������$�"�������#-B�F �
FK0��������������������!&�������$�����&� ��(������������A#��� ���������#�����E::���##������-���!��)�
���(����#�����������"�������� ��B����.�� +$��$#���������!�.�$����#�����5����A�"$ ��G;���� �� �$&!�
�F
�����������ABCDE�F��
�����$���!�?���!�������� ����#���$'��$��!+$�����*!&������.�������������������5��������C����F66E;�
���(� ���#�$ �� !������.��������! ������������%$��%$��#���$�$�#�������$ �����&�� �,�$!�$�� ?#��
���� �����#� �����#�����%$/����$���#��$��� ��� ���� �#����#������5��A��0�#�����>����@������F66K;)����
�((��� � ����� � ����������� � $��� � ��� � �������!� � -� !D�����!��- � . � #� � &�� � �� ��� �� � ��$�#��� � ����� �
#-$��#������������$+�����������! �#������D��#$+#����� �#���������"������.�#���������������� !�#��!��
�� �#����#������50�#�����>����@������F66K;)�1��������+������$�$�#�������$ ����/� ��+��$��$���#$��
����������$��%$������(����#������A#���#�����������$���#��$����#- ��&�����������JJ�.�G:���##���� �
�-���!����$�� �&���������!�!��������!&�����������������!�?����!�������� ����-� �"������ ������$�
� �(�����5�����4� ����C�����:::;)��
�������'� �(��B��F��ED���D��������FA������B�A���)�
�E��DD����F��E�������E�*�������!��F���1������#�����
(����#������ ��B!���S"!�����E::���##������-���!�����
!�! ����� � �� � !&������ � ���� � #� � �!�?� � �!�������� ��
��#���$'���������������������)����(#���������%$������
��##$#�� � ��������� � #�� � � +$��$#�� � �$ � ������"����)�
C������'� ����������������C���5F66E;)
�����#�+ ��������#!����#�"�%$�� �� !������$���������((��$#�!�����#������������� �#�����#�$#��
�-�� #�"����#!�$#�� �)�����!" �������������� $��$ ���#�!��.�$�����$&���������� &�������#�����##� �
��� ������%$� � �� � #� � �#$�� � � ��� � ������"���� � �� � #� ����%$� � �� � ��#!����#�"$�� � (� �!� � ���
����#�"��� ���������((���#��#������ ����������(����#���(��"�%$���%$����$&����/� �����(���$���&���
���������+���! ����������#"$��������� ��������� 5�����4� ����C�����:::�8�@��#� ����C�����::E������
�#�� ���::6;)�*���#$����� �������(� ��������"!�#�"�%$������+#����/� ���#$��(�&� �+#���%$���-�$� ���
.�#������� &���������(����#���������#���!�?���!�������� ����#���$'�����������%$������� ������
���+ �$'�(����#���(��"�%$������ ��'���#��$��1��� �����������5@��#� ����C����F66�;�������%$��#���#$��
��
�����������ABCDE�F��
�������(����#���-B�����������S"!�����E::���##������-���!���5@��#� ����C����F666;)���(�����#�����.����� �
%$-$�������� �� �!�!����� ����%$������#������������-$��(����#�������������� �$��S"�������$��.�$���
��&� "�������� ����$'���'��������$��S"�������$��.�$�����/� ������$��5�������>�B��#����::2;)�
��������!�����#!����#�"�%$���������������������.�(�$ �� ��������������� !����������#�����&���#���
��##������� � �� � (����#�� � ������#����� � ���� �� ����� � �$' � ����!�� ���#!�$#�� �� � %$� � �� � "!�! �#�
�!&�����#���������������&� ������S"����#$���������)��
B$����������&$����#!�$#�� ���������((! �����������$'�����$+����$��������� ������#�"�!����$�
��� �������� %$�$ �����#�"!�!��%$�����$&����+����� �#-���������������##���������������� ��������
������) � *��� � #� � � ���� � ���� � * $����� ��� � C��� � 5�::G; � � ����� � �� � �'���#� � �-$��#��� � $���
�!������+��!���������$ � �#S��� �#-�� #�"����#!�$#�� ��C�#�����$'�����$+����$������������(! !��.�
�� �� ��-$�� ����� �+$���� � ��������%$� �+��!� � �$ � #�� ������� ��� � ��#�+ ������ � �#� ���$&��� ����� �/� ��
��((! �������#��� #���+ ���������� #�����#�"!���) �*���� #������������� �D��4��� ����C��� 5�::F;�����
!�$���#���+�����#�!��.�#-$��#������������#$���$ ��"�������#�����$'���� ������C����(�������$�����������
���������������&� "����������!���� �#�����((! �����"���������������! ������ �#�$ ����##��#���"���� �
������!�!����&�������(�� ��#���������������������+���$�)��-!�$������D��4�������C���5�::F;�����#��
� ���� � � ���#��� � . � ������ � #�� � S"�� � ��� � ��&� "����� � (��"�%$�� � �� � $��#����� � ��� � �!%$������
� ��!�%$�� � �� � �#$���$ � � "����) � ��� � !�$#���� � �+���$� � ���� � ���� �&� �!�� � ��� � � �$� �� � �� � �#��
� ������� �������&� "����� �� �� ����������� �+�����#$������������%$�� #��� (����#�� � �� �$&!�� 5��A��
@��#� �>��� +�����::G�8�0���� ������::2;)�������&� "������(��"�%$�����,�$ �������������!����-/� ��
� ��$������#�����6GG�.�F�EJK���##������-���!�������#-� �"���������#������&���$#�� �����#�����7::���##���� �
�-���!��� ���$������������ #��C !���+ ����5D��4��� ��� �C��� ��::F;) �@��#� �>��� +���5�::G; � #�$ �
�� ������ � �-�&�� � $��#��! � ��� � ������ � �� � ��#�+ ����� � �'�� ��� � �$ � " �$�� � ��� � ������"������
���#�%$����������$'�����$+����$�������((! ����)����!"�#�������%$-D��4�������C���5�::F;�������$��#��!�
$������������������ �&� �!�����#����&� "����������#D������"�������F�J7G���##������-���!���%$��
���+�����$ �����(����#���%$�������$&����/� ��������(�!���������� ��������$��+#��5@��#� �>��� +����
�::G;) � 1��������� � �#$���$ � � !�$��� � ��� � ��#�$#! � ��� � ����������� � ����#�� ��� ����� ��� � %$� � #��
�������������� ������$'�" �$�������������"������-����� ��$�����$�C !���+ ����5����A�"$ ��7;���#���
���#$�����JJ:���##������-���!���C�C���&������C���5�::J;���&��������!%$�������$�"�������#-B�F �FK0�
�����$'���#�+ ���������((! ��������$ �#����&� "����������#D������"��������D��"�� ����C��� 5�::E;�
�2
�����������ABCDE�F��
�&�� � ��� � �!%$����� � � ��!�%$��) � *-�� �� � ��$��� � ��� � ������������ � #� � ��&� "���� � ��� � � #���
1��� ��������������#����$� ������#�����������"������-!�������� ��K62����FE�2��$�FEJK���##�����
�-���!�� � �$�� �&���� � �������&����� � C���&�� ��� � C��� 5�::J;� �� � D��4��� ��� � C��� 5�::F;)�
A#�+�#������ ������ ���&� "���� ��� ����������� �+��� ��� ������ � ����! ��$ � �. � #� � ��#��������� ��$�
��#��$��� ��� ���� �#����#�����)
�������+��,�F�F��E������������F��E���D�����C��EF�D����EC�D���E�����D�� �������(( ���(���� !(! ������$'�
�����������&� "������$��#��!�����������#�$#!���� ��#$���$ ��!�$�����5�����#�� ���::6;)����������������'����
��������$�����D�++��� ����C��� 5�::7;)������������+ !&��������C�1B�C�1!��B�N%$���=��C�=!��� ��� �B�N%$���
=B�C�=!��B�N%$�����F��C�F!�� ��� �B�N%$�)����C ��� �B�N%$������$���� ��"!�#�"�%$����"#�+!�������#��
C !���+ ���)�A�"$ ���'� ���������#�� �5�::6;)
��� � " ���� � " �$��� � ���$�#� � ��� � ������"���� � ���� � ���� � ��$� � ���� $� � �$ � C !���+ �����
��������#��C ��! �B�N%$�)�*������,�$ ���#���������"����� �� !��������#-$������" �$����#����#$� �
��&� ��(�!�������$4� ����)�F�$���##����&�� ������#��� ���������� �����#�����������������������&� ���!)
�E
�����������ABCDE�F��
����3�*�&� ���!���'�����%$�
B�3�*��� ������������$&�##����������
T�@���� ��� ������(���9��������������&� ������� �&��$�#��$���$�������+������� ���� �&������ ����$���������� �"����#�� �"#�+�#�
#�&�#������������� �&� ��+#���������� ��(������'������(��$ ��"�� �����U�D�94�9� ����::F
������+ �������$&�##�����������(��"�%$���������!���������((���#�������!���+ �+#���V��$�
#� "������#�����!������������(�%$����� ��������#�$ ���$+#�������������� �� �������$'���$&�##���
+���! ��������� #���$+#������������ ��� ������.���$'� �&$����������(�%$���51 �$�� �� �C��� ��::E;) ����
���� ������ � �� � ��$&�##�� � ������� � (��"�%$�� � ��� � � ������#����� � +��!� � �$ � #� � ��������
�� ���#�"�%$�����#-��������%$����$#�"���#�����&� "������5A� �$�����C�����::K�8����"��>�L� 4���:FF;)�
�-� �"���#��! � �� � #� � ��$��� � ��� � &�#��!� � �� � #� � �$+#������� � ��� � �� ���� �� � �� ���#�"�%$����
������#�"�%$����!��#�"�%$����$����#�"!�!��%$��� ���������������������$�����!���'�����%$�)�����
�����"��� � ��������� � �� � "!�! �# � �� � !��"� � $�� � ���"���� � �� � #���� � ����#!����!� � �-$���
���� ������������$� ����� ���� ��������"#���)��-��� �+$������-$�������-���������#$��(� ��##�������
!"#�����!���� �#� ���������B�C���C�����������C��B����C��F��� 5�1�F�8�=�F��## ����C�����::G;�
��� ���$� ���(������&! �(�� � #-��!%$��������� #-����##����������-!&��� � #��� ����������)���(����$��
��#������5��������;������/� ���!���!�������#$���$ ����##�������������$��������� �������#��)�1�����
� ��!�$ ���������������B������� ���!������������ ��������#����((! ������������� ����$'������
�-����������� �+$!��.�$���/���� "�������5�����������!�! �����%$�;��$��-$�����$���������#��
�����-���������!�!������ &!��������%$����!�!� !����"�!��.�$���$� ��"�� ���$����.������$&�##���
!�$����5������������������%$�;�5C���� ��� ����C���� �:F:;)�1�#���������$�������!%$������� �����
�$ �#-!&�#$�������$����+ ���-��������(��"�%$���������!��)
0�#���#-!�������#���#$�� !�������$�-*������� ���(�����A$�"�-�5L� 4����C�����::K;��67�KGF���������
����� �����!���������G:�:::�����#$�����$���#��� ���� ��!����������F6E2�5�#��49�##���:FF;)�*$ ����
#�� � ���!�� � �:::D�::6� � $�� � ������� � ���$�##� � �� � FF6G � ��$&�##�� � ������� � 5B�����������
������������������A#��� �������;�����!�!��!� ��������%$�����!��5D�++�������C�����::6�8�D�++����
���C�����:FF;�5����A�"$ ��K;�����%$�� ���������B�����������$� �"� ������� !�!��������!���������F��6�
�J
�����������ABCDE�F��
�� � F:67 � ��$&�##�� � ������� � ��$ � #�� � �!������� � F6K:DF6K6 � �� � F66:DF666 � �������&������
5D�94�9� �����::F;)�
1�����������#��-����������$,�$ ������%$!��#�� ����������������(( �������� �������$#������#���
������"����� -& ���- ��$��%$-�#� ���$&����� ��� �������������-�$� ���� "��������!�$��!���� � #���
����#�"$��� � ��#� � %$� � #�� ��$������B��� 5F:::DFF:: � ��������8 �A�� �D*���� ��� �C��� � �:F:;� �� � #���
�������� 5J::DK::���������8 �L ��"� ��� �C��� ��:FF;� 5L� 4 ����C���� �::K; �%$� ���$ ������������ ��#$��
������! !��������(��������� �����$���"�������������"���� ����$���������+ �$�������!��)����
������������ � �� � #� � ��&� ���! � ��'�����%$� � ��� � ������"���� � -& ���- � ��� � �#���&� � �� � ��$&����
�!�!%$�#�+ !��&� ���� ������" �$����������#������ ������������#��������"���������#������5���"��
> � L� 4� � �:FF;) � 1�#� � � � ��� � !�� �$����� � �� ����� � �$ � #� � +��#�"�� � !&�#$��&� � 5�����������
���#�"!�!��%$������!&�#$����)));������!"�#�������$ �#��+��#�"������#������� &������&���#-�����������
���#����&� ���!�(��"�%$���$ �@� ��5=$�##� �>�0��������::7;)�*��$���$���&��"�������-���!���������
���������������$�����##��"����$ �������+ �$'�����#�"$������!��#�"$���%$��#-����!&�#$!����� ��
J::�:::����6�6::�:::���������5=$�##� �>�0��������::7;)
�������-��.��/������D���BF��E���D�E�������D�
�DB0��D��E����DF�C�D���ED�1E��/���E�����)�
�2223�224� ����" ����%$���$���$�� ���� ���
#�����+ ���-���������!� ������� ����!�)����
" ����%$� � �$ � +�� � ���� � � #� � � ��� �����
�-���������!� ������� ����!��.��&�� ��$�����
$�� � �!%$���� � �$+#�!� � ���� � A�����4) � ���
��� � ���� � �� !����!�� � #�� � ������� � ������
$����$������!%$�����������A�����4�������
+#������##���%$���-����������)�A�"$ ���'� �����
���D�++�������C���5�:FF;)
�G
�����������ABCDE�F��
��3����������������#����&� ���!
�-��������������D�94�9� ���5F66F;��-$�������$�����F�J::�:::���������(��"�%$����$ �@� ��
���� #���#$������$�!�������������%$����+�����/����##��(���� #-�+,���������+ �$����� ���%$��)�
�-!�$������+�����$ �#�����+ �����������"�����������!��.������#�������$ �����W#�������$ ���)����
�������� �$�� ���� ����GCF�� �!�!��+�� &!) ������&� ���!�"#�+�#�������������"����������$����!�!�
�'� ���#!�����$��#������$������������������7:�:::��#�������$ �@� �)�*�'������#$���� ���D�94�9� �� �
!�'������������������������#��������������#" !������ "$������%$��,$���(�� ������$��� !&������.�#��
��$����5D�94�9� �����::F;�C�5F;�#�� �������� ��������"���������#��������$ ����/� ���#$��!#�&!����
��#��$ � � �����# � %$-�� � ��#��$ � ����! !�8 � 5�; � �-�$� �� � ��+����� � ��#����!� � �� � #�� � ������"�����
��& ����� �/� � �� �� �����������C � ��������� ���#� ���#��$��%$���%$�)))�8 � 52; � #�� �������� �� ����%$�� �3�
��������������%$����� ���#�"�%$�����������%$������������������������������3����+#������$ ������
���B � #�� ���� �������� � �� � 5E; � #�� � ��� ����� ���#!�$#�� �� � ��& ����� � �� ���� � � �-���!�� � �$'�
�����������D�$#��&�+#��)�C� ��'���#������#��������&�������� ��� ��������$���!�$���� ������$���
����������������$�����#�� ����������!��(�%$��"#�+�#������������"������$���#��##�������2�J::�:::�
.�J�F::�:::���������5-� �������C�����::J;)��##�������'� ���#!��.��� �� ����#-��������������#�� ��������
��!��(�%$������������"������-$����#����(� /����+���$���� �#���!%$��<�"������������� �����B�C� �
'BC���B�����(DC��B��5���!�������@0;)�*���� ��� ����#$����� !�������$�������'���!��#�"�%$�������� ����
.�0������>�=$�##� �5�::7;����� ����� �$���������������-$���#������+����������������&� ���!)��#��
#-!&�#$����.�7F��:::���������(��"�%$��������#�������)�C�$ ���#����#���������+��!���������!���
��##���!����� ������'�� ����%$��� �����������������#��+��"!�" �������#����$'��-���!���������#��
��!��(����!��-�?����������((! �������������)
1�3�*�&� ���!��� �������� ��������#!�$#�� ��
�����'�������� ���������##� ���� � #����!����$ � #� ����� ������������ ������ ��������� ���A�� #���
�� ���! ����%$����� ���#�"�%$���$��#���+#�����$ �#���#����(���������������$����+ �$���������$&����
���&� "������5�����4� ���::��8��#��49�##���:FF;)�*���#$���$����� ��������������"�����������������
�$#��&�+#�� � 5��A�� �#��49�##� � �:FF;) � �� � �!������� � ��� � ������� � . � �� �� � �-!������##����
�7
�����������ABCDE�F��
��&� ���������$'����$��#������$������ �������#!�$#�� �����!,.��������!&������������$&��$'�
" �$����(��"�%$���.����� ��"����'�����%$���!#�&!�)�B������������4�� ��$��� ����C��� 5�::�;�����
���#�(�! �. ��� �� ��� � ������ ��� ��#������ ���$' ��!%$����� �%$� � �-��� ��� �� �(���!���� ����� � #�� �
B�������������#����������������)�0���������C���5�::2;����� !&!#!�#-�'���������-$���" �������&� ���!�
���������"����������$����#������$�� �� ���$&� ��������"����� ���#�%$�##��� ������$&��$'��#�����
�$���&��$��$���$�D���#$���$����#���#����)�C� (����#���!��$&� ������������$&��$'�" �$�����+�$����.�
#������ �������(� ��##�������$&��$'��#�����������#����$&�##���#���������B ����� ��B���������%$��
���$�/� ���$#��&!������!� ����5���#��"����C�����:FF;)�*����!%$��������&� ���������#���������" �$����
%$� �!���������#!� -0��# �1#����A �$��F-� �����!�!��+���$�����$ �#��� ���� ��(������ �C� �� ����C���
5�::K;)��-��%$�������������$���������!%$��������&� ���������#����!��������������� ������#����$��
����������$ �#����#���� ����#������� ����� �#�������&���#����&� ���!�(��"�%$���$#��&!������!� ���)
�
�-��� �������#!�$#�� ����$ �!�$��� �#����&� ���!�����������"������ �����$�� ������������
�!��$&� ����-��������+��$��$���#$��!#�&!�%$��#������ ������� ���������##���5C��� ����C�����::K�8�
D�++��� ��� � C��� � �:FF;) � �-������(������� � ��� � ������� � ����� � �#� � � ����� ����� � �$ � ��� � ����!���
"!�!��%$�� � ��#!�$#�� �� � %$� � #-�� � ����##� �#�����CB � )D�BC���C� � 'C*���� � +����� 5=@��;�
5D�++��� ��� � C��� � �:FF�8 � L X"� ��� � C��� � �:F�;) � 1�#� � &� � �� � ��� � � �&�� � $�� � !&�#$���� � �$ �����
����B�C���C�����������C��B����C��F���5�1�F�8�=�F��##����C�����::G;�%$������ ��$� ������ �#�������
.����������������=@�����$ ��#������ ��������-$����$&��$���!������5D�++�������C�����:FF;)�����((����
#-���#����������$&�##��������������������"���� ��������C�� �!� �������� ���:::�����::6����� ��
%$��7E�EY��-��� ���##����-������������!%$���������������#�"��������A�����4�5D�++�������C�����:FF;�
5����A�"$ ��K;)����"!�! ����������!%$��������� !(! �������$ �#������������!,.��!� ������� ���� ����
�-�&�� �$������##�$ � ����������������� #-�&������������ #������ ���������� #����&� ���!� (��"�%$��
"#�+�#������$�������#��&� ��+�#��!�������#-���#���+�#��!������� %$�$ ��"!�!��%$���$��#��!�)
�!�������� � �$ � ��$ � � �$ � 6���� 1��" �� � ���� �������# � �� �=���#�"��� � #�� �����#�"$�� � ����
���� ! �#-��&���������� ���� �#� ���������B�C���C�����������C��B����C��F��� 5F� &�## ����C����
�:F:;)�C#$���$ ��� ���������������!�!�(������������ ��� ������!����������#���!�?��������$&��$'�
����������$���+�����������!����$+#�%$����������+#�����#�"���5D�94�9� �����::J;)�*�$'�+��������
����!�� � �'������ � �!,.� �����* � &�AB��� 5L� 4� � �:::; � �� �=���+��4 � 51 �$� ��� � C��� � �::E;) � �##���
�K
�����������ABCDE�F��
!�� �� ���� � #�� � ���� � ����!� � �$' � ������� � (��"�%$�� ������ � �C�� �� �������� � . � ����������� � #��
���� ������������� ���� ���������!�)�C�$ �#�����������##���(�������������������� ���� ��������&�����
���� �������-���� �#�����'���������������#������'��$������-$�����$&�##��������)��"�#�������#��
�$+#������� �!#��� ���%$� ���� � ���� ������� � �-������ � ��� ��#!+�����!� � 5F� &�## ��� � C��� � �:F:;) � 1�#��
(���#��� ���� #�� !�$�! ������������(� ��������&�������#����� ���A�� #����!%$�������$�#!�����%$����$ �
A�����4�5D�++��� ����C�����:FF;)����� !�##��&�#���!��������$��%$� ������� ��� ���������+#��#���
����!����������� ��������-�((� �� ������ #������$��$�!���������#�"$��� �����-���$������$ � #��
�!&�#��������������$��#������� ��"�����#�"��)�
���3�B + �����#��&����$� �"�������1�����"����
B�3�A#��� ���������*�4� ���C�����" �$�����������#!��%$��
���������$ �����#-� + �����#��&����$� �"�������������"���������!�!����(� �!���� �#-$��#��������
����� %$�$ ����#!�$#�� �����$ �#������#��������#�"!�!��%$��)�B�����#����$�� �������!�! �� ������
�$������B�������������������!�!��!�#��!���� ���$� �"�������������"�����" S���.�#-���#��������
�!%$������� ��!�%$����$�(����$ ��-!#��"�������AFDM�5��#��$(�>�*��#���#���F667;���������!%$������
�$�"�������#-B�F �FK0�5A$��� �������C����F6K7;� �������&�����)�B��$�##���������%����#����,�$ ��
�����������!��C ��������������� �B���������� �A#��� �������� �H�"���������� �1��� �����������5����
A�"$ ��6;) � �� ����#$� �A#��� �������� ��� � #� ��� ��� �� ��&�� �!�! ��!� �� � 50��XZ#� ��� �C���� �::F;)�
B$�� �&�������" �$����� ����������.�#-� � ������A#��� �#������!������#��!��� ���#���H�"�������)�
�-���#���������!%$�������$�"�������#-B�F �FK0����!���� !�#���������#�������A#��� �����������
� ������!"�#������%$-�#���� ��"����$�����/� ������$���&���#��������������������#���B���������)�
1-����#���#$������ ������ ��� $��$ ���������#-� + �����#��&�������������"�����%$������!�!�(���������
�� ��� ������!��) ��-� + �����#��&�������������"�������#�%$���� <$��$,�$ �-�$����$ ����/� ��$���
�� ��������+����!�����#�� !�#��!����#����&� ���!�����������"����)�*�((! ������!�$���� !���������� �
�� ����������� �����!&�������#[�'�����������+ �������� �(������������$��������#���B����������
5��A�� ������4�� ��$��� ��� � C��� � �::��8 � 0����� ��� � C��� � �::2; � �� � #�� � ������������� � 5��A��
�6
�����������ABCDE�F��
������4�� ��$�������C�����::�;�%$����$ �������������$� ������$&��$'����#�)
�������4��5��C���D��B����C������������������������D�����B��E�ED���������#�"�����!�!�����(�!��.��� �� ����#��
���#�"!�������\��������C��� 5�::G�;)�����+ �������" ����� �� !��������#��� �#�������(��+#�������$��� �!���
��������%$������ ��#� � �%$�� #���+ ���������� ��� �� !������� � #�� � �#������ � �+$����) ���� ����+ ������ ��
� ��������� �����������$����+ ���-���������!� �������-�� ���L� 4 ����C��� 5�::K;�����#��49�##�5�:FF;)�����
���#�������,�$���� �� !��������#����#����� !���������!� �����$��!��$&� ��)�A�"$ ���'� �������������> �
����� ���5�:FF;)
���� ������ $����������#�"!�!��%$���������$��� ��"����'�����%$����� �����������(� �$#� �
����������������$ �#���������$����������#�����(��"�%$�����,�$ �����#��� �#��������'���������� ���$')�
\���� ����C��� 5�::G�;��������+��!�#�������!��������'��� %$�$ ����#!�$#�� ���!������##���!���$ �
F66���'����(��"�%$���C�#����!%$�������$�#!�����%$�������"��������#-B�F �FK0���K0����J)K0�������
%$-�AFDM����������$�D$���!�����#-B�F���#��! �������5�,�-�����,�.;)��#������ ����%$��#���������#���
����B������������������������������������ ���+�����$��� �!����������%$����������%$���� �+� ��#���
!�$#����������$ ����C��� 5�::G;��+���$���� ��������#������$ �$����$#�"����5FK0��$ ��,�-;��$���$'�
2:
�����������ABCDE�F��
"��������+��!��5�,�-� �&�� ��,�./)�B������ �# ���!�!�� ����!����#��� �" �$�� ������$����$�D �"���
����#!�*�4� ������ !(! �����.�$����� �������#�$ ����#�����&�����������#�%$�##��#�����##$#�������
������ ���������� ���$' �����$' � 5D�++��� ��� �C��� � �::7;) � �� ����#�"!��� ��� � \���� ��� �C��� 5�::G�;�
���(� ���!"�#������#�� �" �$�����������A#��� ����������������%$���#����( � ������*�4� ��)�0��
#���#�"�!������� $���#���#$�� !�����������+#��������B�+�����!(�������#���#�"�!���+���#������#-� + � �
���#��&�������������"��������������B����� �&� �!��)
��3�����#�"�!���+���#���C������#�������$� !��#$�
����#�"�!���(��"�%$���+���#���������!� �����������$�������+#�"������$#���#����#��������
H�"�����������1��� �����������5=���$"�#�� ����C�����::6;)�*����#�$ ��#����(��������� �D�++��� ����C���
5�::7;������!�� $��$ !�#���H�"����������������%$�����#$����$ �#��� ��#���� ����%$�� ����$�D���#� �
����B�C� � ������ � ������ � ���$ � �$ � �� ���� � � ��#����#!��%$� � �� � �� � �#��� �%$�#� � %$� � ������� #���
�� %$�$ ����#!�$#�� ������#����� ��!"��������D��$��$#��D#�������#��!���5 �����@���+�����C�����::E�8�
\��������C�����::G��8���$����C�����::G�8�I��������C�����::G;)�����H�"��������������� ���! ��!���� �$��
��$'�����$��������!#�&!�����%$��� !�����#��"$���+ ������������#������#�"!�����5�����4� ���::�;)�
0�$#������� �#���������� �� ����#���������+���$����������� ����$���$������������&�����$�� #���
�� %$�$ ��5@���+� ����C�)� ��::E;)�C�$ �#���1��� ������������#���#����(������������+��$��$�����$'�
����$�) � D�++��� ��� � C��� 5�::7; � ��� � ! �"! � #-� � � � ��� � �#�����#����#�� � �$ � ��" � �� � ���#$��
�#�����#����������������#$� �����F����##������"�#�����&�����#�����#$��F����##������"������������
���+�������$ �#������#�"!��������\��������C���5�::G�;����5�::G+;)�@�$��(���������� ��� ����#$���-����
������$,�$ �� �����$�5�����>������ �����:FF;�5����A�"$ ��6�;)�
�
*�$'��#���������������$ ���-���#�����(����-!��+#� �#��� �#�������%$���'���������� ���$'����#��
�"�� � ��� � ������"���� � 5���� A�"$ � � 6;) � �� � � ���� � � #�� � ��� ���� ������ � � � $�� � ���������
���#�"!�!��%$� � ���� ����� �%$� � ��� � +��$��$� �����$�!� ����$�� ��#$� ��� � &��"� � ��� � 5\���� ��� �C����
�::G�;)�1������������� ��������+#�"���� ���$����##$#�� �����!�! �� �������������(#�"�##!��5���"��>�
L� 4���:FF;)������((��$#�!���$ �#�$ �� �$&� �����#��������#�"!�!��%$������� � !��+#����� � ���� ��.�
�����#������'��������� !����������#�$ �������!&�#$��(�5�������$'�����$�����������$�$#!����� �$���!�
��������;�� ���!#�&!)�@�$���-�+� ���#��!����� ���#����$4� �����������#���#������������&� "!����
2F
�����������ABCDE�F��
� ���� ��$������������!���������$���#�"�!��!�� "���������H�"����������������#����( � ������
*�4� ����$����� ���#����( � ������������"������#�$ ���������������� �%$�� ���-/� �� �������! !�
5�������������+�+#��" ����%$��������"��>�L� 4���:FF�8�@���+�����C�����::J;)�����������������#$������
1 �����������%$����!�!��!� �����������$&��$����#$�������&��+ ���:FF�5\��������C�����:FF+;)����
�#�����������#�"!�!��%$������#�"�!���+���#�����������B��!#�����.���$���� ��� �$��+������-��� �������
���#��"$���+ ������������$��/� ��!�� �!�5�� � ����C��� ��:F:;) �1����((����-��� ����������� #��"$���
+ ������������.�(�� ����� �" �$�� �������'�������#�"!�!��%$������!#��"�!��5C��#�����>���$ �����
F66K;�������$���$������������� �(���!������� ����!��� ��!�)�1����!�������������$&�����+�� &!�
���B � #�� � �� ������ � �� � ����� � � "!�! �#� � �� � �# � ��� � ���� � � �#$� � �� %$! � ��$ � #�� � �� �������
��� ���##$#�� ���%$�����$�$#�����#$������$���������� �$���!����������%$��#�� ���������� "��������
5��������C�����::�;)
1�3������$&��$����#$��C�#���1 ����������
���"�� ���!���C��-���� ���������$���#�"�!��+���#���$� �"�������������"������$�����������
�#����( � ��#���#$��� �����5\��������C����::G��8��::G+�8��� �����C�����:F:�8�\��������C�����:FF�;)�����
�!���C������������ ���������� ���##$#�� ����+#�"���� ������������"�����B����� �%$���5D�#���F6KF;)�
�#��������� ���! ��!���� �#�$ ��B����� ���$��(#�"�##!�������#�� ���.���$'�����1��� ������������� �$��
��������� ���##$#�� ����������#�%$�#��#���-������������� �����������$ ��������$������#��������#�$ �
�?�� � �� � ���"������� � 5D�#�� � F6KF;) � �!������� � ��� � !�$��� � ��� ����� ! � %$� � ��� � �!%$������
��&� ���������#������$��������#���$������#��$'��%$���%$���(� �������$����$&��$��#�������#$����
#�� ��!���C� 5�� � ����C�����:F:�8�\���� ����C�����:FF�;)�1����!%$��������&� ���������#���(� �����#��
�#�����L=FF�5�$��������#��� ���� ���!%$�����������" �$��;��� �&���������-$���!�$����$ �#��
(����������������������$��$�!����� �+��������-$��#���5&���D���������C����F666;)��##��������� �
#���$����!�!� �� �$&!��������������#��5��A������$#��� ����C�����::K;�������$���$���5��A����(�& �����C����
�::7�8���(�& �����C�����::K�8����� �����C�����:F:;������������!���������� ����� �(�����5��A��F�"����
���C�����:F:�8�F�"���������C�����:FF;����������&� �������������'�%$���5��A��@�4����������C�����:F:;)�
1���#�����L=FF� �" �$�!��&���#����!���C���!�!�! �"!�������#$������1 ����������������#�� �"���
����������"��������$ ��� ������� ���������#�� ����������������&� ���!����#�"!�!��%$��5\��������C����
2�
�����������ABCDE�F��
�:FF+;)�\���� ����C��� 5�:FF�;�����!�$��!�#���� �� �!�!���� $��$ �#������ �1 ��������������$��#������
��((! ������������%$�����#!�$#�� ����$ �����!������##������&� ���������$'�����%$��#�$ ����� ����
�[�'����� ��#$���$ ����������$����#�����&��)�0�$#������� ������ ���#�"���������$�/� ���+�� &!���C�
��� � B����� �� � �&�N��� � $��(#�"�##!�� � ��� � 4����� � �� � ��� � ��##$#�� � ���� � (#�"�##� � ������!�� � . � ����
������!����$�.��-�$� �����##$#��)�C�$ ������ ��� �������#��-������!�!������+#������!�� ���� ����#�$ �
��������&��������� ������ ���$���� ������)��-$������ !�$#�������,�$ ������%$-�$�$���������+�� &!�
���� !������������� ����������������#����������5���� ����� !�F�C �����������;� �$����#����##$#�����.�
#-��&� ���������%$��������$ ������� �� �$&!����B�#���������"�������$��������$���&��$�������� ���
5B�#����C�����::J;)
����� !�F�C�����������
�� � ������� � ���$ � � #-���!" ��! � �� � #� � ��##$#� � (��"�%$� � �� � ���(� � � . � #� � �� �� � $�� � (� ���
!���������.�#-!�� ����������%$��(����%$-�##���������#�%$!�������������+ �$'�� �����$��
����� � �� � �'���#� � #� � � ��������� � #� � ����$��������� � #� � �$� ����� � �� � #-���!���� � .�
�-�$� �����##$#���5��9����>�A �����::G;)��##�� �� !������F�.��Y��$��������������#���� �� �
���� #�&$ ��������� ��F:�����:Y������##� �����(� ����(�#������$����5��9����>�A ����
�::G;) � ��� � �� ��� � ��� � ������"���� � ���� � ������! !�� � ����� � ���� � �� � ������� � ���
����� ������.��-�$� ���� "�������)�����((�����##���-���������'�#$��&���$'�������"�����
�$��%$������������������������������ �� �$&!������� � #��� �"����(� ����� #����$ �����
�$�� ����� � . � #-�'�#$���� � ��� � �#����� � 5�$�BDD� � � ��� � C��� � �::�;) � @�$��(���� � #���
������"����������#�����$#��.�����!�� ��������������������������#����&������F�������#��
��&����� �� �5���� A�"$ � �F:;� ��#� � �%$� � #�� ��$� �� �� "������� ��� �����������%$-$� �������
���+ ���-��B���������#�"$����$��� �#�"$���5\�����>��� +�����:F�;)�����$�#��������
����"��������������$ �#������������������������+#���-/� ��� ��$����#� ���-$���� ���������
!&�#$��&���������������������"������$��%$��%$����������$������������������B��������
������$'����������5�$�BDD� � �����C�����::�;)��-��%$���������-$����� ��� ����������������
#�$ ����� ��������-������ �.�������+ �$'���#��$'������������$ � ��� ������ ������
5����� �� ��� � C��� � �:F�;) � 1�������� � �� ����� � ������"���� � �� ������� � #� �%$-�#� � ���� �.�
22
�����������ABCDE�F��
#-���! ��$ ��-$�����##$#���?���������"!�! �#������������� �������+�� +���������$� �������
�� ����"��������5\�����>��� +�����:F�;)�1����$ ����/� ��$���� ���� �������� �#�%$-�#��
�� ��"�����&���#��������CB���C����'���( � ��#���#$��� ���������������"������5�� �����C����
�:F:; � �$ � $�� � ���������� � �� � ���&� "���� � �$ � �� �������� � ��� ���##$#�� � � 5\���� � >�
�� +��� ��:F�; ���� !������.� #���������!������ �������?����.��!����� � #��� !���������
��������&���#�$ ������������$����� ��5����� �������C�����:F:;)�
������ � �2� � 5��C�� � �� � ������� � ��D�
����B��E�ED � �E�����EF � ��� � ���
�������E���C����F������� �� �B��B��F ���D�
���F�E� � D!EF��D�D � �DF � �EFC������ � 6 � ���
�����F��E � ��D �B�!�� � ��E�����D) ���D� � 6�
B��F �B��F �7F�� �B��� � ��D �(�!BF��!��F���
0$�����$'� !�$#������+���$���� �\������� �
C��� 5�:FF; � #�� � 1 ���������� � �����
� !����!���������!��$ &$�������������
��������������������������(� ��������� �
#�� � !�$��� � �� � ��$ �) � �� � � !����� � ����
"��������������$ �$��������������������
����!����!�!��+���$���� ������ ������
���"!�����)�A�"$ ���'� ��������\�����>�
�� +���5�:F�;)�
2E
�����������ABCDE�F��
\�����>��� +���5�:F�;������'����!���� ��!���C� ����$#�$ ����$ ���$&�� ��+�� &� �$���#$��
" �������+ �������������$����#�����&��)�B������������� ��"������ !��������������$ �������� �����
���#���������������#�$ ��� �������!�!��������!&������)�C�$ �#������ ��"������ !������������$ ���51() �
A�"$ ��FF;��#�����������-�����#$���+�� &�+#������ ���������#����$�����'�� �����"����!�����#���� ���
���%$�������� !������5\�����>��� +�����:F�;) ��-���#�����$�"!������-$������������ ��!���C� ��
!&!#!�#��� !�������-�$�������$�����������������������#����&��������5����A�"$ ��F:;�����%$���������
(�&�$ ���� #�$ ��������� �+���#� � 5\�����>��� +��� ��:F�;� *� ��#$�� � �� ��������������� ���$� �/� ��
���$�!��� �#��(����%$��#�����##$#�������!���C�� !������������(#�"�##���.�$����� �������! ��������#�$ �
���#�����&���5D�#���F6KF;)�
����������� ��F���������FFAAFF���CD��B���D�F�EF���D�
�!B��D � D�BFCD � �� ��FF���C��� 89��DF��������!��F�:��
������� ��"�������� ���������$ �������$����� ���
!������ � ��"����!� � ������ � %$� � #�� � ��� ��"�� � ���
�� ������������$ �������������$#�$ ��#�� �)�����##��
�:�R�)�C������'� ��������\�����>��� +���5�:F�;)
*�3�����#�"�!���+���#����� ���! ��!����� �#��� !�������-$��(#�"�##�
���� #�"�!�� �+���#�� ��$� #��� ��'���� ( � ��� #�� ��#$��� ��������� �������"��������� �����((���
�� ���! ��!����� �$��������-B����� �-���������$����� �������#�$ ����#�����&���5����A�"$ ��6;)�1��B�#���
1 ����������� ��!���C� � 1��� ���������� � �� � �#�����#����������� �#�� � ��� �� � ��+�#�� � �����
"!�! �#����� ���$ &$�� ��-$� � (#�"�##� � ���#���! �. � #-� �� � ��� � #� ���##$#�� �%$� � #�$ ��� ��� ��� ��� �
�!�#��� ������$����#��$��%$���%$��5D�#���F6KF�8 �\��������C�����::G+�8 �A#������>���#,����::6;)�*��
� �� � �'�������� � ���� � ��$��(��� � �+�� &!���C ��#$���$ � � (#�"�##�� � 5��A�� �� ������ � ������� � ���
���C����C���A����C;��$��������(#�"�##����$���$��5��A��0�C�BCDE�����;�5A#������>���#,����::6;)�
�����$� ������#��(��"�%$������� !���������������(#�"�##����#$���$ �����������������!�!�� ����!���
2J
�����������ABCDE�F��
�$ �#-���$ ��������#���� ����$�(#�"�##���$���$ �����#-!&�#$���������������"����)�1��������������
��((� ������#���#����� %$�$ ��"!�!��%$������#�����'����$��#��!����$ ������ $� ��#������#�"!������$ �
#��%$�##�������!�!��#��!�#[!&!������������ ������(#�"�##�)�B��������$ ����C��� 5�::G;��$""� ����%$��
�������� ����-����� ��$����$�����$#��(���)���$ ����#�"!����+��!���$ �#����� %$�$ ���,�-��� ��,�.�
�" �$���#�� �H�"�������� �&���#�� �A#��� ������� ������$���#�����������#!��%$���#$���/������
����������� ����#!��%$���&���#�� �B�������������#�� ��������������)�*�����(������#��-�����$�%$-$���
�����������$ �#���� ����$�(#�"�##��C ���� ��#�� �1��� ����������� ��� #����$� ������#��(��"�%$��) �1��
� �&��# ���!�!�����$�!��� ���� ����� �&� �!�������������� �������$�(��� �%$�� #�� �H�"�������� �����
"!�! �#������������! !����������#����#!��%$������$��#�������-�$� �����+#���"!�!��%$��������������
�-��##�$ ���#$��������! !��������$�����#$��.��� ������� ��5D�++��� ����C��� ��::7;)� \���� ����C���
5�::G�;� � �&�� ������ ��� ��� �������� ���� �%$��� �. ��$' ������!�%$� ������ ��� �� ��� � (#�"�##� � �-����
� ��$������� ��E�.�G�(���)��#����������+��!���$ �$������#�"!���� !�#��!��.��� �� ������'�"�����%$��
����%$��� � %$� � #�� �1��� ����������� �� � #�� �H�"�������� ���� � ��#����#!��%$��) �)�D������ $��
1��� ���������� ��� ��������$��#�����������#�"!�!��%$� ���((���#��.� !��$� ��� ����#��� ������������
!�$��� ���� �$� ��#��� �������! ��'�#$��&����� ��� �H�"�������� ��� �%$� ���"��� � ���$' �. �%$�� ��
!&!������� � �� ��� �� ��� � (#�"�##�) � �"�#������ � ����� ����#�"!��� � ���#$� � #�� ���� ���� ������ � ���D
(#�"�##!��� �%$� � �� �+ ������� ��&�� �#�� ��!���C� ����� � #�� � #�"�!�� �+���#�� � (#�"�##!�� � 5\���� ��� �C����
�::G�;)�1��������.�������! � ��&���� $�������$��%$��#������������������������ ���� �������-����
�����#�� ������ !��#$�5\��������C�����::G�;)���(����$����� ��� ������������� ������$����� ������
(#�"�##��%$� ����� ��$����$��������� �1��� �������������� �0�C�BCDE������ �-���������(#�"�##�) �1��
!�$#���������#$�?���$�.�#-!������##����"��������'��������� �������$��!&!����������#!)�*-��##�$ �� �
�����#��A�"$ ��6��'� �������������>������ ���5�:FF;��#����$��$ ����������(�!�#������#�"������\�����
�� � C��� 5�::G�; � �� � ����� � �##� ����� � � %$� � #� � �� �� � �� � (#�"�##� � ��� � $� � !&!������ � $��%$�) � ���
�������������������� ���� ����$ ��������#�"!��������������$���� ���%$��.�$��#��� ��&���� !��$������
�#$���$ � � ��$ ��� ��-� �$ � ��'������) � C�$ � #� ��������������� ��� � #� ��� �� ��$ � (#�"�##�� � $�� �����
(��+#������&������$�(����%$��#���#�"�!���+���#������������B���#� !��#$������ �����������������-$��
���%$� � �� � �!%$����� � �������+#��� ��$ � #�� � �� %$�$ � � "!�! �#����� � $��#��!� � ��$ � �� ��� �
#-������ ��!&�#$��&������������"����)�
2G
�����������ABCDE�F��
��3�D����������!&�#$��&����$ �#����&� ��(������������������"����
�� � ���� � � �&�� � #� � �������� � �� � #� � �������� � ��� � ��((! ����� � #�"�!�� � �� � ������"����� � #��
� !���������B����� ������B�#���� "������������#�"�!���+���#�������������"������������(�&�$ �
�-$�����&� ��(������������������"����������#��$��%$���%$��5\��������C�����::G��8����1�#&�B����C����
�::6;)�*-$����� ���#-�+����������� $��$ ����$ �$�������� ������! ���������#��� !�������-$��(#�"�##���
���#�%$� � %$� � #� � ����� ���� ���� � ��� �� � �� � #� � �� ��$����� � ����� � #��$ � ���� � $� � ��&� ���������
�%$���%$��5\��������C�����::G�;)�*-�$� ����� �������(����#������A#��� ������������������������&���
���������+���! ����� �� �$&!�������#����!����������#���$'����������� ��(� ��������������������� �
��� !&!#����$��������������������$&�������� ��$� ��%$-�����#��$��$������$��%$���%$��5@��#� ��� �
C����F667;)�\��������C���5�::G�;����� ��� %$!�%$��#���� ����$�(#�"�##����N�������&���#-���� ���������
��$&��$'����������� ��$����������������!���������������� ��)�B�������#���!�!�(�����#-����������%$� �
#���� �������"�������(#�"�##!����!�!��������!���� �#���!&�#��������������� ������ !���������
����+#����������� �� ��$ ����#��"$�������������5���1�#&�B ����C���� �::6;)�1���!&!���������$ ����
�&�� �(���#��!�#����#���������������$&��$'�!�����������������#����#��$��� ��� �)������ �� ����C���
5�:F�;�� ��������%$����.��$'��%$-$�����&� ��(������������������#����������� ��$�������� ���� �#��$�
���%$-�##��($���$�&�������#$���$ ��� ������������ ���D����������#�������#�����$'�����)��#���-���$�����
�$ � #� � (��� � %$� � #�� � #�"�!�� � �� ���� � �� � ������������ � ���#�"!�!��%$����� � �� �� � #�� � #�"�!���
����������#������ (� ���������+ �����������B���$ ���) ��� �!"�#������ ��� ���%$�������!%$������
���� ��������$'�������"���������#�"�!���+���#�������� �� �$&!�������#$��" ������+���������$�
��&��$��������������#����%$����� � ���� ���$���#��$��� ��)�
��3�����1��� ����������
B�3����#�"��
*���������������������$#��#�� �1��� ����������� ���������B���� �� �����!� ���)�1-���D.D�� ��%$��
#����� ���� ���� �� ����$'��#�����#���������������$'�F����##�"��������������%$������ !��������
27
�����������ABCDE�F��
!�!�! �"!��������#��5D�++�������C�����::7;������� ���������+� �!�)�� ��&�������#���� ���� �����������
��� ���������$��� ����������������"�������-�#"$��������#�������$��-��&� �!+ !�������$&����/� ��
���! �+�%$���(��$#����(��5\���� ����C�����::G+;)���������������������! �+�%$������#���#$����$&����
�� �$&!�������#�� $�����#������������"����(��$�#���(�������������(� ��������� ����#����� +�&� ���
5��""�����((� ��� � C��� � �:F:;) � �#� � ��� � $� � (� � � ��������# � �-$��#������� � �� � +��������#�"�� � ���� � #���
� ��!�!� � �� � (� ��������� � �� � #� � � ��$����� � �� � +���� +$ ��� � . � �� �� � �-$�� � +��������
#�"����##$#���%$�)
��� �1��� ����������� ������ � ��B���� ���� �� �� � ��&� � � ���#�"!�!��%$����� � 5\���� ��� � C����
�::G+;) � B��$�##������ � #�� � 1��� ���������� � ���� � !�� ��� � �� � ��$' � " �$���� � #� � �#���� � ����
1��� ������������ � %$� � ���� ��� � ��' � � � ���C �1��� ����#��� �0��B�##�������#�� � 5�� � � F6K:;��
���B�������#�� � 5������ ��� � C��� � �::G;�� 1#������� ����#�� � 5=�B#��D0���� ��"� ��� � C��� � �::6;��
���B���#�������#��� 5������ ����C�����::K;����+$#�������#���50������ ����C�����::6;����#���#���������
=���+#���� ���������� � 5D�++��� ��� � C��� � �::7;� %$� � �� � �������� � %$-$� � ��$# � � � �� � #���
=���+#���� ���#��) �@ ���������##�������#���" �$������'�����%$�������1��� ������������!�������
+��!���$ �#���� ���#�"������#���!&�#����������$����##��������#������#�"!�������#!�$#�� �������
���� !�%$�������� ���� ����������!������������-��(� ����������#�"!�!��%$�����+�����%$�#��!�
���� �� �������$'��� ���� ���$#� ��� $��$ �$'�����B����� ���%$��������#$������� &!��5\��������C����
�:::;) ��� � ��� $��$ ����� � �$ � ���#$� � ��� �1��� ����������� ��� � ���� � !�����) � �-� � � � ����
1��� ����#����%$������������#������%��$� ���� � �������1��� �������������������� �����#$��%$��#��
(���##� ���� �1��� ��������� 5������ ��� �C��� ��::J; ��� �%$�#%$����$� �� ��#���� �%$� ��!��������� �$���
!&���������#�$ �����!����%$��5=�B#��D0���� ��"�����C�����::6;)�
����1��� ��������������������B�����%$��#-�������##��!"�#���������� �����5#���� ���-���� ���-�
����$��#��!��� (������������ ��"�#&�$�!���$��%$-�#����#$������#$������1��� �����������#�����������
���#����$������B��;� ���� ���������&� ���F:::����������!� �����5\���� ����C��� ��::G+;)��#�������
� ��%$����$����� ������%$��������$��-������������$������� ������!������%$��5C�9�##��F662;����
%$����$ �����'�#�%$� �#�����%$���-���! /��%$��#�$ ������� �!�5\��������C�����:::;)�1�����#����$� ���
������"�������#���������������#���������������#�$ ��� ��������� /������������� ��#�����#��������#��
����4����#���"#$��������$��(� ������"#���"��������#�������!�������#��#�������� �#��&�������������� �
2K
�����������ABCDE�F��
����������%$���5BBB;) �C�$ � #��������� ���$'����������&�������!�!��+�� &!������ ���������$�
�� ������)�������#�����&����-$���� ���������������!���1�ABE�!������D�C�"�������������##$�� !������
#��(�"$ ��F�)�
�����������(!��������������������D�D�D���FAB���BDC��)�
B���D�F��������F��C�������������-��(����������'$!��5BD*;�
������ ���! ��!���� �$�����##�����#�N���$���$�#!!�5B;�%$��
�����((! ���������B����� ��"��5�;)�B� ���#�+! ������51;��#���
B����� �� � $��(#�"�##!� � 5*; � ��&������� � ���� � ��� � ���##���
���'$!� � 5B; � ���� ���� � "��!���"�� � � 5�;) � �� � �� ��$������
��'$!��5�D\;������� ���! ��!���� �#��($��������"��!���"���
" S�� � . � $� � �$+� � �� � ���,$"����� � !��+����%$� � 5A;) � ���
� ����#���� � �$ � �����$ ���" � � ���� � #� � "��!���"� � �$�
���&�$ �%$����&�����$������ ����� !���������5A;)������ ���
�-!�������� � #�� �����$' � ($�������� ��� � #� �����$ �B�"���%$��
���������((! ����!���������#���� ������5D;)�����!��������
� ��$�� � ���� � #� � �!����� ��"� � � ��$�� � �$��� � . � #��
"� ������������#����� ����� !���������5�;)�����B����� ���
���� � #�+! !�� � �� � #-�$&� �$ � � �� � #-��� �$#� � �$�
�!����� ��"��5\;)�A�"$ ���'� ���������+�#��"�����C���5�::E;)�
1���� ����� #�$ ��� ���#�"��� ����������"$�� #������� ������$�� ��%$�� �5���� A�"$ ��F2B;� %$��
������������$����� ��"�� �� ��$���$ ���$%$�#��� ��������� ��B�N����(�#������$'�5��������$�#!!;�
%$��#�$ ��� &����.��-��� � �.�#�$ ��?���������%$-.������$ � ��� ��+�� ������5������ �>�C�9�##���::�;) �
�� � #������� �������#��� ��%$������� � #�� ���##� ���� ������ ���������&� �� ������� ��"���������� #��
�� ��$������5\���� ����C��� ��::G+;)����$����#�����##����$��/� ���������� �%$� �5���� A�"$ ��F2B;��
�-���D.D�� ��%$-$������&��$�� ��$���$����$#���� ��"����$���#����� �%$��5����A�"$ ��F2�;��$������&��$�
����������!�����#$���$ ����� ��"��������$�� !���$���� ��B�N���)���(����#�����##����$��/� ��&!"!����(�
�$� �� ��$���$ �������#-����##�� �������&������B����� ��"���$�"��!���"�)����B����� ��"������
$����� $��$ �����(� �����������.��� ���������������#��� ����#������$+���������&�������� ��$������
����B����� ���5\��������C�����::G+;)�
26
�����������ABCDE�F��
B �
����������� ��F�����(�!F������!��F���;�C ��E��B�������E�C��������$�� ��%$���������� �%$���&���$��
B����� ��"��5H0;���� �$#!��-�]��� ����� #��� ��B�N���) �9�C ��C���������D�B�������� ��#����� �%$���&���
�#$���$ ����� ��"��������#��� ��B�N���)�C�������'� ���������\��������C���5�::G+;)
����B����� ������������(� ������������ ���������&���$ �$�����$ ������������5A#���������C����
�::K;)�1�������������##$#���������� ����� �����$��$��%$��(#�"�##�����#���!�����! ��$ ����� �5����
A�"$ ��FE;)� �#���-����� &������$ ����� ��$#�� ������$ ���#����#������!������ ��%$-�#������ �$&�������
� !�������-��$)�@�$��(������� ���������� ������ ��$����������B����� �������+�N���������(#�"�##� �
%$������!�#��������� ��������$ �#����$ (�����5A#����� �>���#,����::6;)�C�������#������� �����#���
B����� �� ��!������� ��� � #�$ � !�� &� �!�� "!��%$� � ,$�%$-. � �� �%$-�#� � �[��4������ � . � $� � �$+�� ���
5A#���������C�����::K;)�������� ������ !��������������%$����.��$'�� ��$������������ ����'$!���$�
���'$!���������������$����� ���!�������%$��#�$ ��� ������������������ ���������������������%$��
#�$ �������!(�&� �+#��)�����B����� ������+#�����&�� �$�� ?#������ ����������#���!����������������
#�$ �������#�"�� ��� � #�$ � !��#�"�� � ������ ������ ��'�#� !�� �%$� � #�$ � � �#������ ����#�"!�!��%$���
5A#������>���#,����::6;)�
E:
�����������ABCDE�F��
B �
��������$� ��F�D � �� � (�!F������!��F��� B�C�
�E�!DE�������B��C)���+! ���������B����� ����� �
$�� � ����##� � 5(#����;) � �� � B����� ��"� � � � $��
������ �����J:�R�)�C������'� �������������� ��� �
C��� 5�::K;)���C �#C��C�E��B����"C����)�H����� ��
�&�����$'�"#�+$#���#�����%$��)�C������'� ��������
0����������C���5�::6;)
��3�C �(�#�!��#�"�%$�
�-!�$����������� ����������#-��&� �����������#��"������!�!��!"#�"!��� �+�+#�������� ���
%$-�#�����������!������� <$���$��� ���%$-�#������!�!����(���$���&����-�$� ���� "��������5C�9�##��
F662;)�C� ��'���#��������#������������#����%$�����#������!�!����#$���� ���#���� ���������$�� ������
�&�����-/� ��������(�!������������������"�����5��(�& � ����C��� ��::7;)�*���� #�� #���! ��$ ��� �# ����
�!��$#��#-$��#��������������+ �$��������##���������$ �#����!� � ��5�����������"�����B����� �%$����
�!�! �� ������(#�"�##!�)));�����%$���� ���.����($������� ��##�����$&������"#�+� ������ "��������� ���
��((! ����)�E$�#%$�����������������$��(���� �<$��#$���-����������%$���-�$� ����� ���%$-�##�������$��
�������!������%$���$�!��#�"�%$���#$��&���+#�)�����#$��!�$��!�� ��C�BC�E�E��B��������B�C�������
�!� ��� ��� �F66K� ���� � �������+#� ��� � #� ����� ���������� ���� ������+���� ����� ��� ����+ �$����
!"������$�������5���� ���������+�+#��" ����%$��L�#��� ��4 ��� �C���� �:F:;) ��##� � �� !������ #���#$��
" ��������������(�����$�����$ �#��������+����������$ ����/� �����#�%$!�������#�$ ��!�#��)�=����
#�� ��!�������� ������� �. � #� ��� � ��� � #-�?�� ��� � ���� ���� �+��� �����$� ��� ����� � #� ������"!����
�!���������-/� � �!�$��!���������� ���#$����� �(�����) ��"�#������ #����#����� ��$�! ��$ ��������
�� ����!����� ��������� �����������(���E��B����������������%$������� �����((���#��.�! ���%$� ����
�����#������ �����$&���� ���� �&��+#���,$�%$-.�E:����������#����#)�(�������������� �&�%$��#��"�##��
&� $%$�$������#������������� ������%$��#��� ������� �� ���.�#������������������.�#��&�����5����
���������+�+#��" ����%$��C�9�##��F662;)�*����$�������'������������� ������� �%$���#������� �����
���� � �� ������ � �� � ������#������� � �-�#"$�� � �� � �-�$� �� � ������"����� � &�� � � �-�$� �� � ���� �����
����� �(�D��D�B�C � BE�!DE����� %$� � ��(���� ��E�!DE����� � �C�B�DB��� 5���� ���������
EF
�����������ABCDE�F��
+�+#��" ����%$� � �� � C�9�##� � F662;) � ��� � �$� � � (������� � !������!��%$� � ��� � ���� ���� � ��� � #��
��� ����������C � �#� � �!" ����� � #�� � ����� � �-�����$' � �� � �� � &!"!��$') � �#� � ��� � #� � �������! � ���
�!������� �������� ���#!�$#��� !��������.��-�$� ���� "�����������##���%$��#�����������#��4! ������
���#����##$#����5��A�� ��##��;�5A#����� ����C�����::K;)��� �� �$&���-��##�$ ������(����������&�������
����������#$���$�����������!%$������������((! �����!����������)
��� � ���� ���� � ���� � ����$�!���� � � �$&!� � �� � ��$ � ��$��� � ���� � #� � ��#��$ � �� �� � ���� �
!"�#�����������#�����#��� !���������! ����%$������$����$'��-�$�����!�����B�!#�&!�(�&� �+#��.�#��
����!�������������B����� ���50��� � ����C�����::7;)��#�������$+�%$���������������#����!�������+������
��$����$����#���#����$����5C�9�##��F662;)�*���!�$������ ������$ �#-�+������������������"����������
#�����#������ ����%$-���"!�! �#�#������� ������������������!����!���$��#� ��%$-�#�� �� !��������$���
������ � ( ������ � 5^F:Y; ���� � �!%$����� ��+���$��� 5A�"$ � �FJ; �5A ����� ��� �C��� ��::6;) � ��� ���$#���
�'���������(����!�����-$����������������������$��$�!��(��"�%$����� �#������� ����������������#��
+!�!(��������-$������ ���-��$���������� �#�!� .�#��(������������"��)�B�������#���������$����7KY�����
�!%$����� � (��"�%$�� ��� �B��� ���%$� ��� ����� � �$� � 5� ��"� �> �F�9����� ��::6;� � 7:Y ����� � #���
�����$����51�#� ���;����7JY������#[D���#�����!��#����5A ���������C������::6;)������������'����!��
�� �A ������ �� � C��� ���� ��!��$ &$� ��� ��#����� ��� � #� � � ��$����� �� ���� � � !�$#�� ��� � #-����&��!�
����������!��%$����� ��#"$�� �������������$��� ������+���! ����) � �#� ���� ������ �� ����!�%$�� #���
���� ���� � �-� � ������������ � " S�� � �$ � �� �������� � ��Q�$ � ��� ��������� � �$ � #�� � �#"$�� � �� � #�� �
�����+���! ������$����� ��" S���.�#���!" �����������" ����������##���� �&�������-�#���$�����#$��
(��+#��)
E�
�����������ABCDE�F��
������ � �&� � ;��E��E�� � ����F��� � ��D�
B�!��F!B�D ��� ���!F����D ���ED � ��D ���E���D�
������E�D���E�����D�������FCD���ED���D�D��D�
��ED � �E� � ����� � ���E����EE���EFD�� ����
+� �� � �-� �$ � � �� !������� � #-� �$ �
������ �����#������������� ������ !�#������
�!�� !� � ������#����� � ���� � $��
��&� �������� � ����!) � A�"$ � � �'� ���� � ���
A ���������C���5�::6;)
F;��������� ����������$���$��
�����$���$����#������� ����������$ ��$��!�!�!�$��!�������#���!�����������#����%$����]��#� �
���+#�������� �$�� ?#��� ����%$���#!)�����!�$�����+#����#��"�������#-B�F �FK0��������(#�"�##!��-����
������(�!�-��� !&!#!�$�����&� ���!�������� ������ ���!#�&!��5��(�& �����C�����::K;)�-F���������(�!�-�(����
!(! ������$'���##$#���������##����(! ��$ ��.�JR�������#����� ���� ���$#� ��� $��$ �$'������ ��������
��� �$�� � ������(������� ��$ ���� ������ �. �!��(#$� �������) � 0$ � #� ����+ � ��� � �!%$����� � ����#���
�+���$����F6Y�������((�#�!����$'�������"��������7JY������!%$������(��"�%$��������������(�!���
����� � ���� ������ � �$' � ���� ����)� �� � " �$�� � ��� �-(#�"�##!� � �!�! �� �����-�� %$� � !�����
� ���������##������ ��� ������$'�� ��������+���� �&� ��������#��$��%$���%$������������!#� "� ��$'�
������"�������� ������������� �������50���DF"���� ����C�����:FF;)����#����#������� �������$&����
�&�� �$� � ������ � ������! �+#� � �$ � #� �������%$� ��$ �������#������ �&�� � #� ��� ���������C � �#� � �����
��$&������!��(�%$����-�?������$���������(�����$'�����'� /�������&� $#�����5�+�#��"�����C�����::E�8�
L�"��� ����C��� ��::7;)�*���� !&�#�������-��(��������$�! ��$ ���.�6:Y������!�!��+�� &!���#� �����
+#������-�#"$����$���������+���! ���������#������$ �����!%$�����$���((��� ������ �#���&������
E2
�����������ABCDE�F��
����� � ��� � ���$#������ � 5L�"��� ��� � C��� � �::7;) � C� (��� � ��� � � !&�#����� � ���� �!���� �� � �����
�+�� &!�������-�'�#�%$� �������� � #��� !��������$�B���#��������$ � #������� �����5L�"��� ����C����
�::6;)�C� ��'���#���1�ABE�!������D�C�"�������5���� ����;��� �����������#"$������" ���������##���
����������B�����C��B��C�5A�"$ ��FG;��%$��#������������5B���#������;������$&������������ )�
1��D�C�"������������$ ����$�� ����#��������#�$ ��?����������B����� �����������$����+ �$�!���� �
#�����������)��#����������$��� ���(� ���-!�� "����������$� ��������$�������#��������$�B���#�������
5L�"��� ��� �C��� ��::6;) �*-�$���� ��#$�� ��� �+�����%$�#��! ��$� �������##�� ��$��%$-�#� ����� � ����� ����
�������" �����#������$ !�����! �#�����"#���"����50���DF"���� ����C�����:FF;)� �������� ��� "���%$��
��$��������/� �� ����#!�������#����#������-��$����������� ��� �#��+�$�#����� �+������5��(�& �����C����
�::K;) � ��� � ���� ���� � ��� � !"�#����� � $� � ?#� � ���� � #� � �!" ������� � �� � #� � ����� � � � "���%$��
�� ���$#�� �� � %$-�##� � ���� � �##������� � 5(�$�##��� � ��##��))); � �$ � �$�������� � 5�'$&��� � �-� �� ��������
B���#��������� �)));�5��������������+�+#��" ����%$������A#���������C�����::K�8�\�+� �����C�����:F:;)�
��$ �����&��!���� ������%$����$ ����/� ����$���$����&���#���$'�!������������!#�"�%$���%$-�##��#-��� �
�$'�����������$���#�5I��#��"���::J�>�@ ����� ���::J������\�+� �����C�����:F:;)�
��������'� <��DB���D � �� �������D�D�D��
�FAB���BDC��� �FF���CD � 6 � �� � D������ � �� � �������D�
�=F�D � �������D�B�FFA ������A) � ���F��C���
=�� ������� � !#��� ���%$� � . � +�#���"� � 5!���##��C � J�
R�;)�C������������*��4���'� �������� �L�"�������C���
5�::7;)
�;��������� ����������#��$��� ��
�� ���#��$ ��� ��� � ��$ ��-������� � �� �1��� ����������� ��� � !�! � ������(�!�� � �� � �� ���! ��!���
5A#����� ����C��� ��:FF;�C �'EC�C���E��B����ABC���CB�D���� 5F�&�## ����C��� �F666;�%$� ������� �������$�
�$�$�#���� � �-�#"$�� � �$"��� ��E��B����� � D����DE��C�� 5=X##� ��� � C��� � F666; � %$� � ��� � �� ������
EE
�����������ABCDE�F��
�+#�"���� ���-�#"$���+ $������ ��E�!DE����������B���� 50���#�� ����C��� �F66:������A#����� ����C����
�:FF; � %$� � ��� � �� ����� � (��$#����( � �-�#"$�� � &� ��� � �$ � ��� ������) � *-�$� �� � ������ � �$ � "�� ��
�E�!DE����������!"�#������!�!��!� ������������� ����������������!����� �����5A#���������C����
�:FF;) � �� � � �-��&����� �� � ��#!�$#�� �� � �� ���� � �$ � #�� ��$4� ����� �$ � #�� � ������"����� � ����
�!%$����� � �� �1��� ����������� ��� � !�! ������ � �� � !&������) � ��� � !�$��� � �� ����������� � �����
� !����!����#$������!���#������#�����+#��$'�F����2����#���� �������3������������"������� ���)�B������
#��� !���������1��� �������������!�!��+�� &!������������!������������ ����$'�5*�9����>�C�����
�::��8�0����4����C���������$+#�!;����������#-��$������ ����! �+���.���((! ������� �(����$ ��50����4�
����������� ��::2�8 �H$���� ( ����C��� ��::G�8 �0����4 ����C��� ��::G�8 ���"���+ ����C��� ��:FF�;� ����� � #��
��$�����$�! ��$ �����#����#������-��$�5=����������C�����::E;�������$��+��(�#��+���! ����.�FJ7J���
���� �(����$ �5��������C�����::7;��������!��.�$�������#��$���&��$������$ ������� ���� ��#���.�KG:�
���F�7::������� �(����$ �5���1�#&�B����C�����::6;���������#����!���������-$���$���������( �������
�!������5��E::��;���� ��:����2:������$��#���$ (����5@��#� ����C�����:F�;)������ ������C���5�:F�;�����
!�� �� �! � ��$B� � ��$&��$' � ���#������ � �� � ������"���� � �� ��� � �-����� � ,����� � !�! � �!� ����
�$�� �&������/��������#��$�����������#)�1���!�$�����-����������$����$��#��!�#����/������$�#���
�-��� ������� ���������+#������� ��$4� ���������-�$� �����!��(�%$����������������"�����5�������3�
��� � �������"���� ��� ���;� ���#� � �$""� ��%$�� #� ���&� ���! ���� �1��� ����������� �����#��$��� ���
��$ ����/� ���#$������ ������5F�"�������C�����:F:�8������ ������C�����:F�;)
�������� ��������������!�!�� �����$�!�$��!�������#��$����$ �#����������#���#$�� ���$������ �
���!" !�����������" �$����(���������#�� ��� ���#�"�%$����$���'�����%$��) �1��������� � �# ���!�!�
���� !�%$-�#����$&����,�$� �$�� ?#���#!�������� ���������������������#���!�����������#����%$���
50���DF"���� ��� �C��� � �:FF; ��� ���� ���#� ��] � #�� �� ��$���$ � �� ���� �� ��� � ���� ���� ���� ��#������
5A ����� ����C�����::6;)��-$��#������������!���������#!�$#�� ���#�����+#������������ ����!��(�%$��
��$ ����/� ��$�����������#���!�$��� ��#$��� !���!�������$ ��$ ����� �#�����((��$#�!��#�!���.�#�$ �
� ��!�������� ������!����������)
EJ
�����������ABCDE�F��
���3�����������"������� ���
B�3�C �(�#�!��#�"�%$�
�����#��$��� �������$��!����������� �����$�!�$��!��� �#�������#�"$�������� ���&�������$�
��#��$ � ����������#) � ��� � � ���� �� � �+�� &������� � !�#��!�� � �$ � _�_ � ����#�� � �������� � ������ � ���
������"�����������!��.������#"$����! �&�����&���#����$ �����$����&��������!������������5\������
�:FF;)��-!�$�������� "��� ��>������ �5F6EE;������ �+�+#��������##��%$����� !!�$����$&�#����! /��
��$ � #� �����#�"�� ��� ��� � 5L��#���� � > � L��#���� � � F676�8 � \����� � �:FF;) � �� � �'������� � ����
!������##�������+�������� "!�������$�##�����������#-��$������ ��$��'���!��$'��� !������������
���" �&��� � �#� � ��� � �+�� &! � ��� � ������"���� � ���#�"$�� � �$' � (� ��� � �� ��� �� � ���� � %$��
� !��������� ���� ������������ ��$' � ���������� ��� ���� � 5�� "��� � �>������ � �F6EE;) � 0$��� �. � ����
� �&�$'� � #� � ���+ � � �� � ������"���� � �� ��� � �!� ��� � �� � ���!� � � � �$"����! � 5L��#���� � >�
L��#���� ��F676;)�*����#-�+,����(��-!�$��� �#�� ?#�����#-�����������������"����������#��$��� ��� �
L��#���� ����L��#���� �5F676;������ ����!�$����!(��������!��#�"�%$���������(� ����(��"�%$���
�+�� &!��������#��$��� ����%$�������������,�$ ������$�!������������C�--�2����EC�D�A�����CB��� �
���AC��B�������3���DD����������B�DB���������*�����������������������CB���������CB����4� ��� �
�EC�D�A�����CB�����C����C������������B�3��������������������C�����������������BB���B������C� �
����/��������3AC��������CDC������������3���DD�B�����DB�C��������������B�DB���B�/���������� �
�CB���--�������+ �����$�#��-���������� ������+#�"���� ������������"������$�! ��$ ���������JE6�
���� �JE���$#�������!� ������� ��� #-����:::�5\����� ��:FF;) �C ������EJ:��-��� � ��##�� ����� ���� �
B�����������#����$� ���!�������������� ������$������������������������#$��" ������� �����������
�������������#�"����#���5�����������!���.�$���$+�� ������+���;������#���B���������! !�����������#���
���" �&�� � � �����#�� � 5\����� ��:FF;) � ��� ��#"$�� � �� !������� � #� � ������� !�� &�� ��-������� ����
������"���� � �� ��� � 5�$"�� � > � � �#���� � �::E;) � � � � �$&� � !"�#����� � ��� � ������� � (��"�%$���
��� ���������$��������������$ ������#�������� �����5��A��(DCB���C��,�����C;������#��$'�� �����#�
�$�����! !)�*-�$� �����������#!���.��� �� ������+#�������� �$'���-�#"$�����#��� ���������%$�##������
��##$�%$�����-�'��%$�#�������-��� �B��� ����$�����$+����-���!#����)���(�������������$'��� ����
������#���!���"���(� �����!"�#������������������������&���#���������"�����5A������C�����::K;)�
EG
�����������ABCDE�F��
����#$�� �����������������(������ �������#����&� ���!�!�$��!�����B����#���� �#������$+#���� �#����� �
�'���������$���� �������#����� $��$ ������( $���(���������$ ������$+�� ������ �����$����#������#����
�$ � ��� � ��#��$' � �� � �$#�$ �) � ��� � �!������ � ��#!�$#�� ��� � �� � �#$� � �� � �#$� � $��#��!�� � ��$ �
#-������(�������������%$����.��##����� ����������� �����!&�������������$����������������5\������
�:FF;)�
�����#��$��� ���� �(�����#���� ���� ���!�$�������+���������$ �#-�+�� &������������ $��$ ������
( $���(���������$ �����!������##�������+�����������������$'���$&� ��������#�$ !������5\�������:FF;�
�$ � �$ � #-���$+����� � �� � �!������� � �$ � �-��$ � �� � �� � ��$� � � ������ � ��+����� � 5L��#���� � >�
L��#���� � � F676;) � 1�� � ������%$�� � �� � �� ������� � ��� � �� � ����� �� � �� � #-� "������ � ��� � $��
������"��� � ����"��� � �$ ���#��$ ��� �� � � �(��� � �$ � �� � �-��� � $� � ������"��� � ������������ ������
� �&����� � �-$� � �$� � � ��+���� � 5L��#���� � > � L��#���� � � F676;) � ��� � ��� ����� � �$#�$ �#�� � ���
��#!�$#�� ��������� �����-��� �(���� � #������ ����������#����&� ���!�(��"�%$���� �����������&� ��
����������� ����.���((! ������� �(����$ ��5������D�����$�;)�*���#$��������������!��������#�"�%$���
%$����$ �������� ���� ���$'�������"����������#����� �������#��$'��� ����� �(����������!�!�����
���!&������) �C� ��'���#�� �A� ������ ��� �C��� 5�::E; ���� ����� ! �%$�� #-�'� ���������� �"��������
(C��ECB����� ���B�����C�� !���� �����(�!� ��� � #-���#���������-$���� ������ ��� ��::�=C����������
2:���.�������##$#��)���� !����������� ������!��(�%$��.�#-�$"�������������#��� ���������� ������%$��
�� � ����(���� � ������#�"�%$����� � �� � $�� �����(������� � �� � #� � ����������� � �� � #� � ���+ �����
�$""! ����#-�'������������!����������-�����������.�������&� ����������.���$���� �������������
#�����#��$'��� ����� �(�����5��������������+�+#��" ����%$�����0�����������C�����::G;)
��3�A���������!��#�"�%$��
����������"�����,�$����$�� ?#������ ���������!�������$ �����$+�� ����#�"��$'�5��A��+���;�
(#������������#���!������������� ����������#������" �&����$��-�$� ���B������?��� ���� �#���(�.�
#�$ �(��������#�"����##$#�#���%$��5D�������C����F66K;)�B�������#������$�� ?#���#!��$��%$-�#��( �����������
$� ���#��� � � ����#�'� ��� ������ � �� "���%$� ��� ���$#�� � �%$� � ��&���� �$��#���+#� ���$ ��-�$� ���
� "���������$� !���$�� ����%$�)���#-�+�� &��!"�#������������������������ ����������� +����
E7
�����������ABCDE�F��
� "���%$�������$��� ��$����� ������ "���������$��� ������5��A�� ������#������;)�*���� #�����$'�
�?��� �� � �-D�9�N� � ������ � �� � � ��$���$ � � � ���� ��� �A�� ��� � C��� 5�:F:; � ��� � �!� �� � $�� � " �����
��&� ���!��-B������������������������������,$�%$-.�F::������� �(����$ )������!�����������#�� ��
��!�!��+�� &!��$���&��$�����!������������-$�9�##��"��]�������$'�� �(���������( ������ ���������
. � #� � �$ (��� � ��� "!�� � �� � !#!����� � ���! �$' � ���$����� � $�� � �$"��������� � �� � #� � +��������
�$��� �����5A$��! �B ����C�����:FF;)�B$���&��$��$���$ �������D$�+�#���51��#�;� �A$���! �B ����C���
5�:FF;������������!&�������$���+��������(��"�%$������ ��������$��(� ����-���������������� ����
������!� � . � #� � � !����� � �-��B���� � �'� ���##$#�� �� � ��� �#���%$��) � �#� � ��� � �+�� &! � %$� � #���
������"����� !�#��������,$�%$-.�6:Y����#-��� �#�����'� ���##$#�� ���$��� +��������������!��%$��
�������� #�����������$������� ��$�����) �*���������"�������������������������������!���%$��
�$ ����� ����� � $�� � (� �� � ���#������� ����� � #� � ���#� ��$ � �� +��� � ����� � �-��� � #� � ��� � �� ���#��$�
����������#)�����������"������"��������$ �$���$� �����#��+��"!������%$�����#$�����#-�B���)��#���!�!�
���� ! � %$� � #�� � ������"���� � $��#����� � �$ � ��� ��� � ��$ � #�$ � ���� ����� � ���� � ��� � �!��������
�$+�'�%$������ ���������������.�#���!��� �(�����������! �+������#-��&� ����������� ���5\�+� �,�>�
��"�$4$�� � � �::6;) � � � �� �$&� � !"�#����� � ��� � ������"���� � �� � ���+���� � �&�� � ��� � �#"$���
��� ������%$����$����������+���! ������$��(� ������ #������� ��&��������#"$������ ������%$���
(� �����������������������+�������������������+������������ �����$����$����!���5D��� ����C����
F66K;)�*�������$��$�!��(��"�%$��������������!����&�������!���"���5A������C�����::K;�������#��-��
��� � ���� � � !�! � �!�� ���! � �� � %$�# � ���� � �[���� ������ � +��#�"�%$� � �# � �-�"��) � ��(��� � �� ������
������"������� ������������������"������-�����$'��$��-�#"$�����$&������$�� �������(��������
�!&� ���5D��� ����C����F66K;)�����*�&� ����C��� 5�::7;�����������(�!�$���#�&$ �������"����������
!���� � #-�"��� � �������+#� � �� � #� � �!�! �� ����� � ��� � ����$� � �� � �����#��� � ��$&��� � ��� �W�� � #��
�!������������#�����$#�����������#��+����������A��,�)�*���/����#���������"���������#����%$���
�����������! !�������������� ��������$���+#����$'� !��(������� ��#��$��$'�"� "�����5����A�"$ ��F7;�
�$��%$-�#����$&����� �&�%$� �����!��B���������$&�������� �.�#���� �����#����#����������##�D����������
�#$� ��'���!� �. �$� � �� ��� ���&� ���������# � 5B#4� ��� �C��� � �::F;) � 1� � ���� ���� � ������"���� �%$��
� �$���� ���� ��$+�� ��� � �� +����!� � 5��A�� �%$�#����� ��� � �� �$'� � "� "���� ����� ��$��� � (� ��������
��#��� ������%$�##��������##$�%$��)));����$ ������$ � ��������� ��� "���%$�����! �#��!��5A�#$+����� �
C�����::J;)�
EK
�����������ABCDE�F��
������ � �+� � ��F� � �� � �����E� � 8�BB�FFA ���:�
B���D�FC� � B�� � �E � ����B��E�E � �� � ��E���
������DFF���� C���� ��� � 0�4���� �C#�����"� ��'� �����
���\��������C���5�::6;)�
1�3�B��#���������+��������#�"�%$��
��� � ������"���� � ���� � ��� � ��$ ��� � ���� ������ � �� � �!��+�#���� � ����(� � �� � �� � ��$&�##���
�� $��$ ��������%$����%$����$&����/� ��$��#��!�������� ����#�"����$������#���� �����$�����$�� ��#��
5�������������+�+#��" ����%$���������((����C�����:FF;)����#���������"������� ��������� ���$#�� ������
�-$� �" ���� ���! /� ��$��%$-�#� ���� � #� ���������# ��-���� �� �$�����$&�##� ���&� ���! �+�������!��%$��
5�$"�� �>� � �#���� ��::E;) � �# �� �!"�#������!�! ����� ! �%$���� ����� �������"�������$ ������/� ��
$��#��!�����+�� !�!����������$ �#�$ �����&��!���B�����%$��#�!��.�#���!" �����������#��#�"�����5D����
�� � C��� � F66K�8 � ��"�$4$�� � � �:::;) � *�� � !�$��� � ���� � �� � ��$ � � �$ � #�$ � �������! � . � ����� � #���
��� ��� +$ ��� � �� � %$� � ��$ ��� � /� � � �'�#���! � ��$ � �!" ��� � #�� � ������ � �� � �!� �#�� � �-� �"����
���������##��5\�������:FF;)
*�3�����������"����������#�����&����� ����$�� �����
�� � ���� ������ ��� � #� ���&� ���! � ��� � ������"���� � � � !�! � ��� �(����� ��� � #-���#������� �����
������%$�����#!�$#�� ���5��A������� ���>��������::J;)�1���� �����#����#��$��� ����#��� !���������
������"������������$��� ���� �������!�!� !&!#!��.�#-������-��� �����$�#!�����%$�����!��(�%$���.�
#���!%$������$ �"�������#-B�F �FK0��$��������������$4� ����)�����#������� ��#���������"�����
E6
�����������ABCDE�F��
���+#��� � �������$� �$�� � ( ������ ������� ��� � #� � ����$��$�! ��$�� ���� � 5:�KY; ����� � #� ��� ����
�$�! ��$ �����#����#������-��$�5=�������>�C�� `�DB#�`���::K;)�C� ��'���#���$�����$#���!%$�����
5B���������;���!�!���������!&����������B�#����%$��F� ���#� ��%$��#-!�$����� �����!"�#�������$ �#��
�� ��-B#+� ������=!���� ��!�����#����� �����I����#�������0���������B��� ���%$��5*a�B ����C����
�::F;)�E$����.�=������ ����C��� 5�::E;���#������ �� �$&!�%$�� �����#����������������!������##����
� !#�&!��.�K::����$�#� "�����#��+��������#�����5����"��;����=!���� ��!��C�$�����������������$��
1��� ���������� � �� � ��$' � �!%$����� � ��$&�##�� � ����"�!�� � !������� � �$' � 1 ���������� � �� �
����� �� ��� � C��� � �:F�) � �� � ��#���� � �-��$ � �$�! ��$ � � ��� � ��$&��� � ��$& � � �� ��$� ������ � �� � #���
�$�� ����� � � !����� � ���� ���,� ���� ����� � �� !����!� � �� � ��� � $����##$#�� �� � �$��� ����� � 5#���
� ��$���$ ��� ���� ��;��$����"�� ������5����� ������C�����:F�;)��##�����������������(�&� �+#���$'�
������"�����%$�������$ ��������� ������ ���������� ���$� ���� �#�����B������!� !�!������$ �#��
��"������ � � !�!���� � #-�+�� ������ � �$ ����� � �������� � . � �� � ������� � ���� � #� ���#��$ � #�%$��� � �� �
��(($�����5����� ������C�����:F�;)�
*�����-�$� �������������� ���� �%$� ����� ��#$��!#��"�!����� #���$ (������������?�����$�%$� �
� !������� � �-�$� �� � �� ���! ����%$�� � 5��A�� ��#��$' � ���'�%$��� � ����� � ��� ���� ��$';� � #���
������"���������!"�#������!�!��!����!�����$��#������#���/���������%$��5 �������� ����$��&� ��##���
�$�� �����;)��� ���+#��$�F�� !������#����((�#�����������#�"!�!��%$���%$������!�!�������(�!���#� �����
�������#����)�
J:
�����������ABCDE�F��
.����������(��B����D�E���D��������F��ED�B�!���CECF����D���E�����D���D�DC���E��D����B�F�F�D�D��D3�E�FCD�
����D������D���F�E��D����D���CF���D������EF���������E�������!�F����ED�����C��EFD�D!DF0��D�����ED������
� !#�&������ � � !����!� � ���� � ��$� � �� � ���$ � � #�%$��� � ��$( � $� � ��$#� � #�� � ���$#�� � �� � ��#����������
�'�! ������$'�%$������������$+�� ���������((! ���������$ ������%$�������������!�$���5�`��BDA� �a� ����C����
�::2;� � ���� � �'���!� � �$ � (#$��� � ��� ���� ��# � ������� � FJ � ,�$ �) � �-�((�#������ � ���#�"!�!��%$� � ����%$!��
�� �������.� #-��������$��$�"�� ��( � ����� ��!%$��������&� ���������#����!�� ���!��� � #�� ����#�����
���#�"!�!��%$���������%$��!�$��)�$��#� ���������� �����������#-���#�������#�"!�!��%$�����!���� ������ ���
�� �C��� 5�:F�; �� ��� ��� �������� � �. � ,�$ ���� ��((�#������� �.� #-���������!%$�������!���!��������A�����4�
����! ��$ ����� � �$' � !�$��� � � �"���#��) � ��(��� � �� � ��$# � $� � ��� ��� � ���#$� � ��� � ����%$!� � #�� � �!%$������
��&� ���������#����������$����$����$&��$��#����(��"�%$��5����� ������C�����:F�;)
�!(! ���� ����#�������� F��$ �������!������##��� B((�#�����������#�"!�!��%$���
�`��BDA� �a��
���C�����::F
C����"�����* �4���
B��� ���%$�
��$������ �( �����
�#�"�� �����.�2�:::��
B����������C��5�D�����������
6C�C�����
�`��BDA� �a��
���C�����::2
0�$ ������� ���� ��#���
�$�4��0� �4��
�����=!���DB�#����%$�
=��$#��������#����������
�'�! ������$'�.�F�G6J��
B����������C��5�D�����������
6C�C�����
���� (����
(#$����Q���$������ �
��������������7�#C�C���!�C�
5����� ������C�����:F�;
0����4�
>����������
�::2
����"�����#������#���� ����
��#!����0����9��������
1����1���������D����
��$������ �
��� ��! �+���
^�.�F�J��
F�1��� ����������
��1 �����������
5����� ������C�����:F�;
0����4
���C�����::2
����������1� ������
�!�!B$�#�
��$������ ����'�%$��.
�7:��2E:����6::��
B����������C��,�����������
�C���� �"�
H$���� (�
���C�����::G
=� ��"� �(,� ���*����� 4 ��$������ ����'�%$����$��
#-��#��#����.�FK��
F�1��� �����������
5����� ������C�����:F�;
0����4����C����
�::G
����������1� ������
�!�!B$�#�
��$������ ����'�%$��
.�2E:��
J�B����������C��B�EB�������
,������������C���� �"���
��D�CB��
F�1��� �����������C������
0����4�>�����������::2
5����� ������C�����:F�;
�`��BDA� �a��
���C�����::7
0�$ ������� ���� ��#���
�����1����
�����=!���DB�#����%$�
���� (����(#$����Q���$�����
�� ���� ��7J:����6::��
5E:�D�7Jb1;
��������������7�#C�C���!�C
B����������C���B��C�������
D�����C��
JF
�����������ABCDE�F��
0$ ���� ������� ���� � �$�������' �@������ �!�!� �� �$&!� ��� � �#� ����� ����������$'����#������
���������������B�����������1��� ��������������1 ����������)�0����4 ����C��� 5�::G;����� !�#�%$!�
#-!�$������0����4����C���5�::2;����������%$����$#��$���( ����������#����&� ���!������� ��$�� ������
�&��� �!�! ��!� ���) ��� � ��������� ���$'��������#���� �$�����$#� �� �(����$ �� �!�! �!������##���!��
5��B����FK������0����4����C�����::2;�������� ����� ��� ������$�#����-��� ����5��B����$�������0����4�
���C��� ��::2;�����!�!�$��#��!������� �����-$���((� � �����!%$��<�"���#$������!%$���) �B��� �� �����
!�$#������+���$����#�����������%$-$����� �������#����&� ���!������� �D�$4� ����������� ��!�����!�.�
��������$&�##�����#������ �#�� ��������������@��� �� �$&!���� �#���� ������$�#����-��� ������� �
��$#���������EY)�B����� �%$������� �����#���������"��������%�@����$��#!������ �������!�!�
���#�(�!���� � ���� ��.�#��� ���� �����#����5����@�+#��$�F;)�*���#$�������!�$������+#����#-�����+#��
�����$4� ���������� � �������'��$���&�������� ������ ���%$��#-!������##����"���-�����������!�
,$�%$-.����$ ������5��"���+����C�����::��8�0����4����C�����::G�8������ ���>��������::J;)�
*���!�$������+#����#����$4� ���������������!���������������� !������ �(�#���'� /�������
&� ��+#������#����&� ���!�����������"�����&� ��������#�$ ��+�������$ ��� ������������5��"���+��� �
C�����::�;�.�#��� !�������'�#$��&�����#�$ ���!%$������5@�4����������C�����::G;)�*�9����>�C����5�::�;��
��� � $��#��! � ��$' � ��$�#�� � �-��� ��� � �$�� ����� � ��$ � � ������� � ��� � �!������� � �$�� (����#��
!�$�! !��.��� !��+����)������!����������$�S� ����$�C� ��B%$���%$������� 4�#���5�����D����; �
� +� ����$�������$��$�!��$�� ����������!���� �#���������"������������%$�������� ��� �������
+��$��$�������� �� !����!�������#������$��$�!��$�� ����������!���������$�#�"��������#�����
5�����D����;)�B�����#$��" ������� �(����$ �����"���+����C��� 5�::�;������ !#�&!���$'��� ���������
�!�����������'�%$����$�� (����#��5FD2��;�������%$�����#-��$� ���$& ����#-$��������$'�����������
�� ����"���$���&��$�������$ ������� ���� ��#������A$������5�:::�;)������ ��!"������#��!����
�������!�.����#�(�� �#��"�������#-B�F �FK0��&���$����$�#���-��� ����$��&� ��##����$���.��((���$� �
$������#�(���������#$����!��(�%$���&���$����$�#���-��� �����$�� ������5����� C1������!�;) �*����
���������#�����$�����$#���� ���������!������������� ���������������"�����C�� ����B�����������
��D�BA������ ���B��C������� ����B�DBC� �� � ��$' � �������������� �+����CA� �� �8�B����) � �#��
�� !������� � ��&� �� � GY � ��� � �!%$����� � �$�� ����� � �+���$�) � 1�������� � #� � � �+#��� � ���
������������� � �'�"��� � �� � ���� � �$��%$� � ��"���+ ��� � C��� 5�::�; � ��� � !"�#����� � ���#�(�! � ����
�!%$����� � �-� "������� � ������ ������ � %$� � �!��������� � $� � ���������� � ��#�� � � ��$ � #��
J�
�����������ABCDE�F��
�������������)�1���� "����������$ ������� �&��� �������������������#� �����#-!������##����"�)�
B#�� ����&������������!%$��������$ �������� �&��� ��-����&��$��%$�����������#$������(���$���4���!��
���%$���$ ��������$#!������#����#������-��$�,$�%$-.�����!���� ��$���&��$������!��������5��"���+�
�� �C��� ��::�;) �B(�� �����!� � � � #� ���&� ���! �����&� ���� #� �����$��$�!��$�� ����� ���"���+ ��� �C���
5�:FF+;������#� ���'� ����#-B�F�����#$�����#-B*F��������� � �#���� �(�#���$ �"�������#-B�F �FK0�
�+���$�����������$ ������!����������$�� �(�����5F�7J�D�2�6�����$��#���$ (���;���������!��������
�#$��� �(�����52J�F�D�27�E�����$��#���$ (���;�!������##���!���$���&��$����#���� "��������#��(������$�
C! �$)�0��#-��� �" �$�����$��#���!������##������������������!%$�����������������������%$������!�! �
�� �$&!�����,� ���� �����)��##���������/���#�����$#����!%$�������$�� �������+���$����$���&��$�
����� ����������������#����#$��� �(����)�*���#$���#���� �(�#��������&� ���!�B�F��������((! �������� �
� �(�#��B*F��#����������������� ���������$��(������,� ���� ��)������&� ���!�B�F��������� �����%$��
��$��$������-�$��� ���������#������ ��%$������� "��������������(������ �+�+#�������'�"�����
��$&����+����� �#������ ����������#����&� ���!�B*F��$�� ����������#����!��������5��"���+����C����
�:FF+;)�B�#-��&� ����@�4����������C���5�::G;��-�������!��$�$�����������������������"�� ���$��%$-�#��
�������#�(�!���'�#$��&�����������!%$����������B�D���������B�C����5#�&$ ����������������;�#� ��
�-$�� � !�$�� � ��+#��� � ��$� � #�� � �$4� ����� � ���� � #�� � �!������� � �-$� � ���� � ��� ���� ��# � ���� � ���
�!��������$�L$ �������L��##�5GE:��;)�1����������#� ���-�+�� &��������$���� ���������#���������!�
#��� !��������� ���(� ��)��#��-�&� ����%$��#����!%$�������$�"�������#-B�F �FK0��������� "��������
��&� "����� ���������� ����$��#��!�����$ �/� �����#�(�!����� ���##��D���5@�4����������C�����::G;)����
�::7��@�4������ ����C�������$��#��!�#����/������$�#����-��� �����$ �$�����������#�� �����#��+�������
0�"���) � �#� � ��� ����� ! � #� � � !��������� � . � K2�6Y � 5���� � �&�� ���##$�%$��; � �� � EE�GY � 5���� � ���� �
��##$�%$�; ���� ��!%$�������� ��B�D���������B�C���� ���� � #� �����$��$�!��$�� ����) ����� �(�#�
�-$�� � ��&� ���! � �$�� ���� � ���� � $� � ���� � ����! � �!���� � ���� � ���D��$#����� � �� � #� � ������%$��
���#��!�� � ��#!�$#�� � ���B���� �$#�$ �#�� � ���� � !"�#����� � ��� ���#!�$#�� � ��+#!�� � 5����� ��$�#���
�-��� �����B�F��B*F;)�
���� !����������������"������������!�!��!����!��#� ���-!�$������ ������$ �#����$4� �����
���� � ��&� � � �������� � �� ���) � =��� � ��� � !�$��� � ��+#��� � ��$ � #� � �#$�� � � $� � #� "� � ����� ��
���#�"!�!��%$���-� "������� ��� �� � #�� �� ������� ��� ����� #�� �������"����� � #� ����� ������ ��� � #��
��&� ���! � ��� � ������"���� � ��� � +����!�) � *$ ��� � ����� � �� ��� � � �!������� � ��� � !�$��� � ��+#����
J2
�����������ABCDE�F��
��!��(�%$������#���������"���������!�!��((���$!����� �������� �������$#�$ �#��������#!�$#�� ���
��$ ��'����� ��#$��(��������#�$ ���&� ���!��������&� ������������� ����.���((! ������� �(����$ �)
��3�����������"����������#�����&����� ���(��"�%$��
F;�*�&� ���!��� �������� �������$#�$ �#��
�� � ���� ������ � �� � #� � ��&� ���! � (��"�%$� � �&�� � ��� � ��� ����� � �$#�$ �#� � �� � ��#!�$#�� ��
��!��(�%$����$'�������"�����(����!�����-$�����&� ���!��#$������!%$��������!����$��.�$���#$��" ����
���+ �����" �$����(��"�%$���%$����##���!� ������ �#���!�$�����$ �#���������������$4� �����������
#����#��$��� ��) ������+#��$���� !����������!�$���� !�������������������$#�$ ����� #����&� ���!�
(��"�%$���$ �������������$�� �(�����5��� ��FE�����::��;������������������#$��" ������� �(����$ � �
5��� ��7::����FF�:::��;)�C#$���$ ���������-!������##������ ��������������!�!��'����!��C��!��������
���'�%$�� � �$ � ���� � �����$'� � ��$� � !������##��� � ���! �$' � �� � ��� � ���$#�� � �� � ��#����������
�'�! ������$')�*����#-�����+#�������!�$�������� !&!#!�#��� !���������(� ����(�#������$����������
#�&$ �� ���� ����#� �B��������� ��� ��������������) ��� � �&������ ��$�$�� �� !������� ���� � #�"�!���
+���#���(��"�%$����-��!�!��+���$�����$#�$ �)�
JE
�����������ABCDE�F��
.������ ���� �!�� � ��E�����D � ��D � D�����D ���F�E��D �B�� � �� ���D� � �E � ���F��� ���C���EF����ED �����ED ����
����C��EF�D�E�F���D�B�C���CD�6���D�B����E����D���������D�������������+ !&��������C��C��C���������DC���(�%$���
=B��C������=!���DB�#����%$�)
�!(! ��������#���������
>�C �(����$ �F��$ �������!������##���
B((�#��������
���#�"!�!��%$��
F�"������
���C�����::F
���������0�"�������0$ $"���
\�����5F�:::�.�FF�:::��;
0!���������$�� (����#��
B����$'
B����������
�������������
����#��
���C�����::J
=� "���$�C! �$�
5FJ:��;
0!����������� ��2:����
FJ7�����$��#���$ (���
B���������
��"�$4$�� �
���C�����::E
A���������1��"��
������������5J�6:E��;
0!����������� ��:����
27:������$��#���$ (���
B����������
B���� ����
*��� ��
���C�����::G
����������� �#�������
5E�6::�.�J�26:��;
0!���������$�� (����#� B���������
0��"��
���C�����:F:
����������� �#�������
5E�:::�.�J�7::��;
0!���������$�� (����#� B���������
�������������
A�������>�
0���������::J
0�������� ���� ��$'��=B��
5K::�.�2�FJ:��;
��$�C�2�.�J����$D����$��
�$��#����� ���!���%$�
B���������
�������������
�$ "�$��
���C�����::6
0�������� ���� ��$'��=B��
����C��
57::�.�2�GJ:��;
��$���!���������
!������##�������! �$'��
�����$'
A� ����(�#������$����C
B���������
�������������
���1�#&�B�
���C�����::6
0�������� ���� ��$'��
=B��5KG:�>�F�7::��;�
����C��5��G2:��;
B����$'�
�������##�������! �$'
B���������
�$ "�$��
���C�����:F:
0�������� ���� ��$'��=B��
���������������$�C�C���(�%$��
56::�.�2�G2:��;
��$�������$'�����$#������
��#�����������'�! ������$'��
�$������� �&����
��&$ ���C
B���������
�������������
\�+� �,�>�
��"�$4$�� ��
�::6
=� ��-B �+���
5FE�>��G��;
0!���������$�� (����#��
���! �+����
B���������
\�+� �,�
���C�����:F:
=� ��-B �+��
52���J�>��::��;
0!���������$�� (����#��
���! �+�������$
B���������
�������������
JJ
�����������ABCDE�F��
�;�*�&� ���!��� �������� ��������#!�$#�� ��
����!��������#!�$#�� �����������!&�������$�����&� ���!�(��"�%$���� ����!����$��.�$���#$��
" �������+ ��������#�� ������ B��������������������������1��� ��������������1 ����������) �����
���#� � �� �$&!� ����� � #�� � ��' �� ���� �� �!�$��� ��� ���� ��'�#$��&����� ��$ � #� ���&� ���! � (��"�%$��
�� ���������#��$�� �(�������$��#������#-��� �������#!�$#�� �������� !����!�������#����+#��$�2)�����
�� %$�$ ����#!�$#�� ����������������� ������#������#� �"�������#-B�F �FK0� 5���� ����C�����::7�8����
1�#&�B����C�����::6�8�F�"���������C�����:FF;����#����@0�5�������C�����::7�8�F�"�������C�����:F:;)�F�"����
���C��� 5�:F:;�%$� �����!"�#������$��#��!�#��"�������������$ �#-B�F �J)K0������ ��� %$!�%$��#���
���+ �$��� � �!%$����� � ���#�(�!�� � �-�&����� � ��� � �� � � ����� � �� !�������� � ���� � #� � +��� � ���
����!�������� ���������$��$������-��(� ����������#�"!�!��%$���'�#����+#�)��#������������ ����!�
�-$��#��� �#���"��������������$ �#� �"�������#-B�F �FK0�����K0�����%$-����(����F�"���������C������
�:FF)
JG
�����������ABCDE�F��
.��������� � �!�� � ��E�����D � �CF��FCD � B�� � ����B������F��E � �� ���������D ����C�������D � DBC�������D � ��/�
����B��E�ED�6�B��F�����C���EF����ED�����ED��������C��EF�D�E�F���D�B�C���CD�6���D�B����E����D���������D��
�����������+ !&��������C��C��C���������DC���(�%$���=B��C������=!���DB�#����%$�)
�!(! ��������#���������
>�C �(����$ �F��$ ������!������##���
B((�#��������
���#�"!�!��%$��
�����
���C�����::7
���&���$������ �4�
52�:::�>�E�:::��;
��$������ B����������
�������������
1��� �������������&���$�@�������
52�:::�>�2�7::��;
��$������
0������� ���� ��#��
=B��5���GE��;
0!������������$#������
��#�����������'�! ������$'
C����"�����* �4��
5�J:��J::����:::�>�2�:::��;�
��$������
A�#(�����1�#�(� ����
5F�J7J��;
���(�#��+���! �������! �+��
����
���C�����::7
=� ����1�����
52J:��KKE��F�F�2��
��6GJ�>�2�:FF��;
0!���������$�� (����#���&�������
��� ���������!������
B���������
�������������
���1�#&�B�
���C�����::6
0�������� ���� ��$'��
=B������C��
5KG:�.���G2:��;
B����$'��!������##����
���! �$'�
�������������
1��� ����������
F�"����
���C�����:F:
A������-�B$D"���9� ��
57�FFF�>�6�7G:��;
0!����������� ��:����FF:����
��$��#���$ (���
B���������
�������������
1 ����������A���������=� �������
5F:�F2F��;
0!�������
��������0�"������$���������
( ��������!������5F�F7E��;
���(�#��+���! ����
F�"������
���C�����:FF
��������0�"������$���������
( ��������!������
5K2:�.�F��::��;
0!������� B���������
�������������
�#�����#����������
1 ����������
@��#�
���C�����:F�
A�#(�����=�'�������$���������
( ��������!������5��E::��;
0!����������� ��:����2:����
��$��#���$ (���
B���������
�������������
1��� ����������
J7
�����������ABCDE�F��
2;�*�&� ���!�����������"������$�! ��$ �
��� � ����$��$�!� � (��"�%$�� � �!� ���� � %$�#%$� � ���� � #-��� ����� � ���� � � ������#������
������!������������"������$�! ��$ ��������B���������������������������������#����!%$�����������
��$&����� �����������##������������"������� ��� ���5����� �� ����C�����:F�;)�����#�&$ �������!�!�
�!� �����������#����#$�� �� !����!��� ���A��C ��B�D������� ��E��B��C� ��C����C� �9��CB�������
5��A��A�������>�0���������::J�8���������C�����::7�8����1�#&�B����C�����::6�8��$ "�$�����C�����:F:;)�
*�� � �!%$����� ���&� ���������#�� � �((�#�!�� � �$' � #�&$ �� �#C�C���!�C� ��� � ��$&��� � !�! ������ � ���
!&����������������!�$����(��"�%$����$��$�� �������� ������$ ��#$���$ ���������������������� ���)�
�##����������$����$��" �$�������#!��������� ��(� ��##��-" �$�������#�&$ ������ ���� ��#�����Q�$�
���'�%$��-�5��A��*�9����>�C������::��8��`��BDA� �a�����C�����::7�8���������C�����::7�8����1�#&�B��� �
C�����::6�8�\�+� �, ����C�����:F:�8���"���+����C�����:FF+;)�����(� ����(�#������$���� ���A��&��CB�����
��D�BA������5*DE�C�C����'������D�������������B�+���� �� !����!��������#����$#�$ ���5��A��*��� ���� �
C��� � �::G�8 � �$ "�$� ��� � C��� � �::6;) � � � #�� � �� �$&� � !"�#����� � ���� � #� � �#$�� � � ��� � !�$����
��#!�$#�� ���5��A�� �`��BDA� �a� ����C��� ��::F�8 �0����4 ����C��� ��::G�8 ����� ����C��� ��::7;)���(��������
������"���� � � ��$����� � ��� � �� $��$ �� ��$#����##$#�� �� � �� ���#��$ � ����������# � ���� � !"�#������
� !�����������#��$��� ��� ���A�� 5*���C���DB���� ���� ���B��C� 5���� ����C��� ��::7�8 ����1�#&�B ����C����
�::6�8�\�+� �,����C�����:F:;)
E;�*�&� ���!�����#�"�!���+���#��
��� � #�"�!�� � +���#�� � ��� � $��%$����� � !�! � �!����!�� � �� � #-��� ���� ���#!�$#�� � � ���� � #���
��#��$' ��� ��� � � �(���� � 5���� ��+#��$ � 2;� �] ��##�� ���$&��� � �������$� �$�� � " ���� � �� ��� ��� � #��
����$��$�!��!� ���)�*����#����!���������-$���$���������( ��������!���������#��+�������0�"����
5F�"����� ����C���� �:FF;�#������$��$�!�(��"�%$�����������!���� ������ "������������#�"�!���
+���#��)�1��%�@���(� �����$���#������$&��$��#��-" �$���+���#�����#������-�%$���� !��������!�! �
�!�� ���! � ����� � ���#�"!�!��%$����� � �#$� � � ���� � ��� ��#�����#����������� 5����� �� ��� � C����
�:F�;�������������#������������B�!#��"�!��$��%$��#-�������!�������$#���������6FY)��-$���������@�� �
�� !������JG��Y��$�����#�����%$�� ��+��%$�������#������������$!���5F�"���������C�����:FF;)����
JK
�����������ABCDE�F��
@������ ��������$�-" �$���+���#�����#������-���!"�#������!�!� �� �$&!������$��+��(�#��+���! ����
���! �+��������#��A�#(�����1�#�(� ����5��������C�����::7;)������ ������C���5�:F�;������#�$ ����#�������
#����&� ���!�����������"������� �������� ����%$��#���#$��" �������+ ���-@��������((�#�!��$'�
B���������� �� ��������������� ���� �%$� � #� ���,� ��! ���� ���$&��$' �@�� � �� ��#����� ��� �� � #���
������"���������#�"�!���+���#��)��#��������� ����%$-$��@���� �������.�$����$&��$�������"����
�� ����-�#�� !������$�������$�����2Y������&� "������&���#����!%$������������$��������#��+��� �
�������!�����#!�$#�� ���A�����4�5������ ����C�����:FF;)��#������� �$&!�%$���E�����2G���$&��$'�
@����� �����-����" �����$'�#�"�!���+���#��)�@�$��(�����#�(�$����$�� �� ��$��@��5AE66JE27;��%$� �
� �&���� ��� � #-!�$�� ��� � #� ���&� ���! � ��� � ������"���� � �� � A ����� ��� � C��� 5�::6; � �$ � ��� � ������
�� ��� ��������$�����#���$���)�*���#$���������$&��$'�@����� ��������#�"�!���+���#���������#$� �
��&� "���� ���� � �!%$����� ��� �������"���� � ����������$' ��� �A�����4 �%$� � #�� ���$&��$' �@���
�� ��� � ��� �*�4� �� � �� � �#� � ���+#��� � /� � � � �� � !#��"�!� � ��� � ������� � �$#��&!�� � �� � �!� ���� � ���
������"�����5����A�"$ ��FK;)�
����!�������$#�$ �#����� #���!��������#!�$#�� �����+#��������� �������.�������&� ���!��
��((! ������ � �� �%$� � �$""� � �%$� � #� � ����$��$�! � (��"�%$� � �� ���#��$ ��� �� � �� ��� � ���� � ��#$��
����#�'��%$����##���!� ����.����,�$ �5���1�#&�B ����C��� ��::6�8������ �� ����C�����:F�;)�*������� ��
!�$������ #������$��$�!�(��"�%$��.�������������� ���� ��$'���� #�� ����=!���DB�#����%$��5���
1�#&�B ��� � C��� � �::6;� � ��$� � �&��� � �+���$ � ��$( � ���#������ � ���� ������ � �$' ��������������� ���
1��� ����������� &�� � #[�$��# ���#!�$#�� � � ������ �%$� � #�� � ��B� � ���#������ � �$#��&!� � ���� � ��$� � ����
B���������) � \�+� �, ��� � C��� 5�:F:; � ��� � !"�#����� � �!����! ���� � �!%$����� ��-B���������� �� � ���
����������������((! ��������#���#���!���������#��!�)������((! �����������$��(������������ %$!��
�$��%$���� ���������#������������ ����������!%$���������$����������$���������$'��!������)�
�-�����������-$�����&� ���!��#$��!����$��%$����##���� <$��,$�%$-.�� !���������!"�#������ ��(� �!��
�� �#��(����%$��������$�#����-��� ������((! ������� ���������-���!�� �.������ �(�#��������&� ���! �
��((! �����5��A����"���+����C�����::��8�0����4����C�����::G�8�\�+� �,����C�����:F:;)�
J6
�����������ABCDE�F��
��������-� �*��B���������B���EF� �������C��E������B�����EF���������EF�FC��EF��� ��D�E������/�%.>D�
����ED � ��E�����D � �F � ��D � DC���E��D ��� ��0E� ��� � ��;A�� ��-5 ���D � ����B��E�ED � ��EF�E�EF��/ � �DD��D�
��C���EF����ED��E����EE���EF��/ �������� �������C��E������B�����EF���������EF�FC��EF�����D�E������/�
%.>D�����ED���E�����D��F���D�DC���E��D�����0E�������;A����-5����DB0��D��������B��E�ED����F��C�D��F �
�C���F�D� ������������� ��"���5F�&�#�=� ����A$�"��C�F=A;��� �����������$'�#�"�!���+���#��)� ����F=A�
� !������� ���� ���&��$' ��� ���((! ����� ��#$� �!#�&!� ��&�� � #�� �������� � �$#��&!�� � 5�� ��+������; �%$-�&���
#-�����+#�������!%$���������������"���������������$'�5���� ����!�;)�1�#����"��(���%$��#����((�#��������
����F=A�������#$��� ����������!%$������� �&�������-!������##������&� ���������$'��#$�?��%$����� �
��##������������$#�$ ��)������������+ !&��������C��*FB��B*F���&� ���������#�8�������+ ��������#�������8�
F=AB� � ��$&��$' � B��������� ��� ����8 � F=A�� � ��$&��$' � ������������� ��� ���) � A�"$ � � �'� ���� � ���
����� ������C���5�:F�;�
G:
�����������ABCDE�F��
*��$����������%��� ��� ������!����$�� ���$&��$����#������������������#����&� ���!�(��"�%$��
����#�"�!���+���#���&��������#���$+#������������ �&�$'���������##��������#!�$#�� ����!� �&����$���
��&� ���! �� �"���#� � ,$�%$-�#� � ���� � �$�����!�� � ���� � ��((! ���� ���#��$' � ��!���%$��) � 1�� � � �&�$'�
�(( ��� � ��� � ���� �$���!� � ��$ � #-��� �(����������� � ��� � ������������� � . � #� � (��� � �$ � $� � �#���
����!����%$������$ �$���#���(���������#)��#����$#�&����!"�#������#��%$����������#-!&�#$���������
������"�������� ��������������$���#-��!������B���"����%$����#���#�%$�##��#���������"����������
����� "������������������$'�%$���$ ��������#����� ��������� ������#����#��$��� ��)�����$D��#.��$�
�"�� � (��"�%$�� � �#� � ���� �"��� � �$ � #�� � " ���� � ��!������� � �� � �������� � ���B � #�� � �$4� �����
��������� � ��##� � ��� � � #�� � �����$' � �� � #�� � ������"���� � ����� � %$� � #�$ � � �,����� � � !&�#$��&��
�������&�)
GF
�����������ABCDE�F��
C !���������������+,����(�
1������#���!�!�&$�� !�!���������#���1��� ���������������(����#-�+,����-$�����+ ��#����!�
�-!�$���)�*���#$���#��������$ �#��%$�#��$��������������� ���$#�� ����!�!��� �!���������$���������$��
#� � (��� � �-/� � � #�! � . � #-����� ���$ � ��� � ������ �!������%$� ��$ � !���%$�) � @�$��(���� � #-!�$�� �����
1��� ������������-�����!&�#���!�� !��������������� ������!�����������" S���.�#-$��#�����������
��$&�##����!��������-���#�������#�$ ���&� ���!�����%$���� ������������$ �� �#�����((��$#�!��#��������
#�$ � ���� ������ � �� � #-�+�� &����� � �$ � #-���#�����) � B����� � �# � � � !�! ����� ! � �� � ��� � ���#���� � �� �
"!����%$�� � ��&� ���������#�� � %$� � #�� � ����$��$�!� � (��"�%$�� � !������ � �����!�� � �� � #���
1��� ����������������#���#����5��(�& � ����C�����::7�8��::K;���������#�����#�������$���������"����
5A ���������C�����::6;)�
1� � � �&��# � �-������� � . � �!� � � � #� � ��&� ���! � �$ � ���#$� � ��� � 1��� ���������� � �� � ��#��$�
��� ���� ��#��� ���� �(�������$��#����������������%$������"!����%$����&� ���������#�)�B$D��#.�
�$����#$�����#$�D�/����#-�+,����(������-���!�� �.�#����&� ���!������ "������������#�"�!���+���#���
(��"�%$�������((����#���1��� ������������������$����#�����#$��%$������&� "!����� ���� ��$� �"���
����������"��������������������������������� ��!"�%$����$ �#[��%$���������������!����� ��������
#� � ���� !������� ��� � #-������ � �!&�#$��&� ���� � ������"����) ���� �!�$�� � !����� ��� � #� ���&� ���!�
(��"�%$�������#��$���� ���� ��# �� �(�������������!&���������� ��!%$������������#������ ����
1��� �����������%$���-�&�������������� ��!�!��+�� &!��5���1�#&�B����C�����::6;)�1-������$ %$������
������-!�������������+#���� ���������$ ��'�#� � �#����&� ���!�����1��� ����������)�B(����-���#��� �
����� � ��&� ���!� � �# � � � !�! � ��� � �� � �#��� � $�� � +��� � �� � ����!�� � %$� � �������� � ��� � �� %$�$ ��
���#�"!�!��%$�� � ��$ � #� � �"�� � ��� � ������"����) � �-���! /� � � ������# � !���� � ���� � #-���#��������
�$������%$� ��� � (�#� �� ��� �%$�#��!� � ����#!����!� ��� �$� � � � ����$�# �%$� ��� ��� ��-!�� �� � #���
�!%$������� ��!��������&�#�������$ �#������#��������#�"!�!��%$��)
G�
�����������ABCDE�F��
���� �&��#��������������� !����!����#������� ���$�&�����C
=��! ��#����=!������
1������� ���� �� ������������ ���$��������#���������������$�&����$ ���$&�� � !���� ��.�#��
� �+#!����%$�)�1������#�����������!�!���� �&!����� ������ �+#������!�����#�"�%$������$'D���� �
������'���!���&���#�����#$���������#��!�����$ �#��� !��$� �)
1����� ��F
1� � ������ � � � !����� � $�� � �$+#������� � �� ���� � �$ � CDc=c1D*�� � $�� � +��� � �� � ����!���
���������������!%$��������#!�$#�� ����� ���������$��#���+#�����$ ��������#��������#�"!�!��%$����
�������������-��� �������)))��##���������$�##�����������$ �������$��������.�C��0�F�)�
1����� ���
����$+#��������������1�#&�B ����C�����::6������ !����!�������������$�� ����-$����� ���� ���
%$-�##� � ��� � . � #-� �"��� � �� � �� � � �&��# � �� � ����� ����� � !"�#����� � �� �� � %$� � ,-�� � ���� �+$! � . � ���
� ��$�������&���#����$� ����$��$ ���.��#$���$ ����&��$'�C��+�������������!%$��������#!�$#�� ����
���#���� ����#�"!�!��%$�� ��� � !������� ��$ ����$�� �� ��$+#�!) � �-�+,����( ��� ������ �!�$�� �!���� ����
�!� � ��#����&� ���!��$� �"�������������"����������#��$���� ���� ��#���$���&��$������((! ������
B���� �"!�" ����%$��) �C� �� � #�� � �!%$����� ��+���$��� � �# �� �!�! ���� ��� �!&������ ���� ��!%$������
��$&�##�������#�"�!���(��"�%$���+���#��)��
1����� ��2
1�������� ���� �������.�#���$+#��������� ��$����.��� �� ����� !�$#������+���$���$ �#����&� ���!�
����1��� ����������������#��$���� ���� ��#��� ���� �(���)�1������$+#���������������� !�� ������
��$ �#����$���� ��.�C �������"���(���������#�0��������)
G2
�����������ABCDE�F��
�
GE
�������������ABC�D
���������
������AB�C
DE
�������������ABC�D
DD
�������������ABC�D
�F������������������
BF����F��F������F����������������������F��������������������������������������� !"���
��!����!"��� ����������#� �F��������F��$!��F��������F���%�������&��' ���!��(���) � ���������%�����
������ ���%���� � �� ��F��&�� � �!%%��%�� ��!��$!���� � ���� � �*����� ���!� � �� ����F�� � �F�� � %�F%!�� �����
�!���%F�����'�����+�%��(��%������F"F�����!�����*���$!�������%���*����������,�$!���$!����������(F���'�
BF���!���������������)��������F�%�����((�%�!������!��������������F%��!����F�����������������
��$!��%�� � ����%!�F���� � (��,�$!�� � ������ � ���F������' � -!��) � ��F����(�%F���� � ��� � ��$!��%�� � ���
.����������%��F�F�F�����%��������������,����F���%������%�(�$!��)�������((����������F����F��F����!�
%���*��!��F�$!�!������%!�F����#��F�"F���F���������F���%������������%�����'���(��)����%�����������
�!�"����!��F%$!���������������������%!�F������������F�F���������F�F������������F��������*���F������ �
�����&������%���$!����!�"��!���������F+!����������((�%�!��'��,F������)������%�F����������������
������������������!�����"��F�%�'�
��/�.��F�������!����F���������������������F!*�F�F�����������,�����$!���(��,�$!��
��!� � ��� � ��+�%��(� � �� � %���� � ��&�� � ��F�� � ����!�� � �� � �F � ��"������ � ����%!�F��� � ����
.����������%��F��F�������F�������(����%��������,�����$!��)�%��F�F���%��������F�%��(����F���������
��$!��%�� � ��"����������F��� � �����!�� � F"�% � ��� � ��$!��%�� � F��F����F�� � # � ��� � ��,F�������
%!���"��������%�����F�����$!�F"�%���F!�������$!��%�����"����������F���'�������$!��%�������!�����
�������!�����!������"����0��������������F���!����F���������������!���$!��1�EFE�2��3F�45���!��
$!��� � ��!� ����� �F�����!��!���!�������F%%������) � (F%����F�� �F���� � �� � �!�"� ���� ���$!��%�� ������ � ����
��((������� � ��!���' � .�����F��) � %���� � ���%��!�� � �� � ,F�F���� � �F� � �F � $!F���� � ��� � ��$!��%�� � ���
��F%%!�!�F����������$!��%���������������������!�������!��%����F����13���,������E)�67789�:��,F���)�
D;
�������������ABC�D
67789�3���,������E)�677<9�F=4�=����)�677<)�677>9�����?@����������E)�677<9�A�����������E)�677D9�
3��F������)�677B5'�.���������F,F�������F�����((�%���������FC����F���)����������!�����(!������������
�� ���F%� �!�� ��F�� ��� �������� ��� ���$!��%�� �!�����F���� ��� ������,����) � ������ � ����� ���!���!���
%���&�������$!F����'�B�F!������F����������������*���������+#)�%�����F�������������������!��"��������) �
�E�E� ��������F!*���$!��%��������!��������,F�������"�"F����1�EFE� C��"F)�-�!���� �����E) �677;5������
�*%�!��"�� � ��!� � ,��!�� � �F*�����$!� � 1�EFE� �FF�+��) �D��4� �� ��E) � 67E75 � �! � ��%��� � ������� � #�
��������(�%F������F*�����$!��#� ��F���������� 1�EFE� FA���) ���F���4�" �����E� 67E7F5' �C��"F�F!�F�� ��!�
�������� � # � ��� � F�������) � %�����F�� � ��� � !�����F���� � ��F"&�� � %�����*� � �� � �F� � ��� � �����!��
�F*�����$!�'������) � �F��F��������������-G�G.A?B3�F�����%�������!�� ��F�F������������F������
�����,�����$!�� � �! � �&,�� � ��� � %�F���,����' � .�� � �!��� � �����(���F��$!� � F � ��� � ��F���� � ���
%���F���F�����F"�%������C��1������!�������%���%��������(���F��$!�����C���&�������F������)�������)�
H�F�%�5' � .���� � �F�� � �� � ������� � ��� � F%%������� � �!� � �� � ���� � �������� � �!�"F���I�
����IJJ�����%���',���!���'��,J'�-G�G.A?B3�(F��F�������+�����!����!���%F����������������F������
%�F������E)���!����������F��������F�����������F%���������(��%�����F�������������������������%�'�
BF���!���������������)���!*��F�$!�!�������%!�F�������������%������'�������������������,&���
��� ����A��EBC����� � �F� ��$!��%������ ��&� �%�����"�������� � ��� ���((������� �F*���) �%��$!� � �� � �����
�����!������(���F�������"��!��"������$!F����'�.�����F!�������,&��������!��������������F��������F����
����������)�%�!"�F���F�����!����&��,�F��������������,F������'������%�����������,&����!�(F%��!��
������,F�����EK�1�HE?K5) �$!� �F�������F!%�!����������$!��%���F���$!� ��!�(F�� ���������F!*����
�!�F����� � ��!� � ���"� � $!� � %��!� � �! � ,&�� � �� � ����A� � EBC) � ������ � ����!�� � ��� � ���F������
�����,�����$!���������������"�F!*��F*�����$!����!�����!��'
������F�����!�"F������������F�������$!F����(�����F��F��F(���$!��-G�G.A?B3������#�+�!��"��?#?
"���������$!��%�����,!��&�����������������!��2��3F�4'���!����F����)����$!������������C�����%�F�,��
���*��F����������$!��%����������0��#��F���������F��F��������������2��3F�4'����!���)�%�����$!��%���
�����(������������F��&���F!���F��$!����������!���F����������!��%������������!%�������$!�)� �E�E����!���
��$!��%��%����������!�������*��!%����������������������%����%!��(�)�������������F��%�����"��'�.���
(�������F!���F��$!�������������F����F���������%����%���F����������������!�)���!���((�%�!��� �!���
��F����F�!������������������$!��%��'���������!�����,!��&����������%����������������!��������F����F�
DB
�������������ABC�D
(�,!�� �6 ��! �.�F����� �E' ��"F�� � �F ����� ��� ���F%� ��� � ��!���� ��� � �F � ��%!���F���� ���� � ��$!��%���
��������������!������F�F�����������,�����$!��)����������!*��%�F�,���F"�%����$!������������C������
�! � ���! � F(�� ���F+!���� � ���!��� � �����(���F��$!� �# � �F � ��F���� � �F*�����$!�' � -F� � �*�����) �2��3F�4�
��������!����F*�������#��F���������F$!�����!���F������%��%������%������!����!��-G�G.A?B3�
��!���F���%!���F�����������$!��%��'�A�����������&��������������F!������������������2��3F�4�����
(F�� � $!� ���� � ��$!��%�� ������ ���!� � ��F�����!���� � �F*�����$!� ��� � �! � %�!�) � ����� � �� � �����!"����
%�F�������F���!���F!"F���,��!����F*�����$!���!��-G�G.A?B3'�.�������������!�������0����"���(���
# � %�F$!� ����� � # � +�!�' � �,F������) � ��!� ������ ��� � "!� � ����%������ ������,�$!�) � �� � ��� ��F�!�� � F�
��%�������!���%���F���F�%���*������������$!��%���(��,�$!���$!��F�����F%$!����F!�(!�����#����!���
����F���%�!"������!����(����������$!��%��'�-F���*�����)��F�������%��������,!��������������1 �E�E�E7�
# �E77 ��!%��������5 �F ���� � ���F�$!�� ��F�� ���!���!�� � ��$!��%�� � ���� ��! �������� � ���' ����&� �!���
��%���%���������,�F���$!�)����������F"����$!��%��������������%���������F�����#������������)�$!��������
��F����!�����&�����F��!��%��L�������%���%��F�F���%����F!*�F�,!����F���������%����)�1��E�.�F������E5'�
��F����(����������������%���F���F�%����!��������(���������$!��%���F����%������$!��!����F��������
��((���������������$!��%��'�
����������!�����F��!������-G�G.A?B3���!"��������%�F�,���������$!��%����!�,&��������!��
%���*)�$!�������%���������%���&�������$!F�����$!����!��F"������(�����1��E�.�F������E5'�.��F����(F���#�
�F�������!���F������%��%���F����F$!�����F��F�F���������!��������"�F!*��F*�����$!��)��!�����!��#�
�����&%�����#��F��������%�F%!�����$!���)������!����������!��(�%�����'(F��F�%�����F���������$!��%�� �
%���������F�����1��EH�,!���E5'�
��������,F������������������!����!�����F��!���������%�F�,�������F��,���������((�%�!���F"�%�.�FC����
M�1�F�4�������E�677;5'�.���F��,���������������F���������F���������!��%�F%!������,&���������!��
!��,��!����F*�����$!�������)��F����F�����������<77���$!��%���1��E H�,!���65' ���(��)���!�����F��!��
��!� � !������� � -G�G.A?B3 � ��!� � F��,���) � F"�% � .�FC��� �M) � ��� � ������� � ��$!��%�� � F"�% � ����
��$!��%����!�!��F��,��������*��F������-G�G.A?B3'�
D>
�������������ABC�D
��������� �ABCD��� �EF���B��E�� �FB������������DB����������C����DDB�D �EF��D�B��� � ��� ���������� �E��
�����E���F������������D������EB��� !"#"A$%&'(�
�������)� �ABCD����EF���B��C�����DB�D�
�� � ���� � E�����B�D � E�� � *��+�����
EFB��������D � D����+B���B���� � ����
!"#"A$%&'(
;7
�������������ABC�D
-G�G.A?B3��������%�!����F��������������(�F����������F�����%��F���(��%�����������F�F�����
�����,�����$!���!��&,�������%�F���,����' �B����!�) ��������F"&�����&��!���� ������F��$!����!� � ���
����,����F���%�������%!�F����������F��,��������F����������$!��%�����"����������F�����F���!��
,��!����F*�����$!�������'�C���!�����F�����F�������!���%���������F��������?��,��,�F����F"�%�����
F!���� � �F��� � �� � ������� � �*���F���� � �� � ��� � F!���� � �������� � ��F�F����� � �� � ��$!��%�� � 1�EFE
��F��,������ � ��%F� � ������� � �F� � 3��C��5' � .���� � !� � �!���� � "�!� � # � �"��!�� � �F� � ��F+�!� � ��F!�����
(��%�����F����� � 1�EFE� ��F!���� � �F�$!�!�� � ����%!�F����5 � �� � �F� � ������,�F���� � ��F!���� � ���+����
%���F���F��(�'�A!��������F"F��F,�����!����F�F����������,�����$!��$!��-G�G.A?B3����%!�����1��E
.�F������E5)��������(F%����F�������F�����$!������������C��������&��%��"�"�F��'�
���/�B���,����F���%�������%!�F����
.����F"F���%������!F����F������&���F�F��������,�����$!����"����������F�������F����!���F�
��"�����������.����������%��F)������!��������%�(�$!���������������F!������)�#�%�����%����F����� �
F���%�� � ����%!�F���� � $!� � "��� � ��������� � ��F����(��� � ��� � (�F,����� � ���BA � �� � %� � ,��!��'�
.��%���F������%���*��!��F�$!�!�)����,&����������A��EBC������������������%�����!������%F����F� �
��!�������F����������$!����%�?����!������F������.�F������E)��F����,F��������F�%��$!���������������!�
��!���� � �� � ���% � ��� � �F��� � �� � ������� � %��������� � ��&� � ��! � �� � ��$!��%�� � ��!� � ��� � F!���� �
�F�$!�!��'�
F��������&�������%�������F���%���F������((�%�!���#��F���������!���%F�������!��������!�������
�F � ��"������ � (��,�$!� � �� � �� � �F � �F,� � =�� � �! � �F���F����� � �� � �' � :��,F��� � 1B!4� � F��"������5 � I�
����IJJ==='�����,�'�!4�'��!J(!�,�J��%��F�J�������'���'����!���)����F�����"���(���$!��%���F���%���
��F�����%���F�������F"�%�����.����������%��F'�-�!��%��(F���)��F��F���%����F��,�������%���������F���
F! �����!����� �.����������%��F �F ���� � ����%�F�,�� �# ��F���� ��� �-G�G.A?B3��� � ��� ���((��������
F���%�����������F��,�����%������%������F���%�'�
;E
�������������ABC�D
,B���B����-��D��E���B��������FB����B�D�B.����B��BD�����E���A+/D��E���/��DB(�����F���%���3�3?���#�ACB�
������*��F���������F��F,��=����!��F���F����������'�:��,F����F"�%�����F���%����AC�����"��F������M���������E
1E>>75�����$!������������$!���!���F��F,��=��'���F���%���H8��F���������������F��C���������E�1E>>>5����
�6J�<��F��:F����4�����!��������E�167765'���F���%��.E87�F��������������#��F��F��'
������ ���������0F%1F�2���������3 �����DBD�E��'-��,�
3�3?�� .�2.�2..2.22�����..�2. 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F)�
���FL�F)�.��F��(�F,�����F)���"���F�F
3�3?.� .�2.�2..2.22�����..�2. 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F)�
���FL�F)���,!��)�������L�F
C�E ��..�22��2��N.J�O.�2..�2� 3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F)�-�F����)�
.�F���,�������������D�C�D
C�6� �22�22�2.��22..2 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F)�
A���%��F)����FL�F
C�8 �2...���.��.���.2 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)����FL�F)�
.��F��(�F,�����F)���,!��)�-�F����
C�D� ��2�����2�.2���.��22 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)����FL�F)�
3���L�F)�-�F����
C�;� �2�������2.�.2��2��2 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F)�
���FL�F)�.��F��(�F,�����F)���,!��)�.�����
C�B� 2��..�22�.�����.��� ��%���%��F)�.����������%��F)�%�F���,�������%���F�������)�
�!4F����F��F���������%!���"��
C�> .�2�22�2�����.� 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F�
C�E7� ���2�.�.��.�.222 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F)�
�!4F����F��F���������%!���"��
AC8 2.��2�.�22�2..�2.�2.. 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F)�
���FL�F)���"���F�F)���,!��
ACE ��.�����22����2�.22��2 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F)�
�!4F����F��F���������%!���"���
AC; 2�22.�����.�22�.�2�2��2. 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�
������L�F)��!4F����F��F���������%!���"���
ACB �..2��22�2��..�2.22� 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F)�
���FL�F)���,!��)�-�F����)�.�F���,�������������D�C�D)�A���%��F)�
.����
.E87 ��..���.��.��22����..2�2 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�
F������%�F�)�.�F���,�������������D�C�D
�H8� .���.��22�.�����2�22�� 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�3���L�F)�
.�F���,�������������D�C�D
C�B���� ��..�22�.�����.���2 ��%���%��F)�.����������%��F)���"���F�F�
�6 ��.2��22��22���2�22 3F�������%��F)���%���%��F)�.����������%��F)�2��������%��F)�
��,!��)�F������%�F��
�< 2���22.���2�2�. 3F%������)�3F�������%��F)���%���%��F)����FL�F)���,!��)�-�F����)�
.�����
;6
�������������ABC�D
����F�� � �!�"F��� � F � %������� � # � F�F���� � %�� � F���%�� � ��!� � ��F�F���� � �� � �F � ��"������ � ����
.����������%��F' � .����?#?���� � $!� � �F � ��$!��%� � ��� � F���%�� � F � ��� �����(��� � ��!� � $!����� � �����
������$!��#��F�L����%�����'���������������!������������������D����B��������F��,�F�����%F�������%������
2��3F�4�F"�% �3��C��' ������ � ��� �F���%�� �$!� �%������F��������� ��������� �F���L� (����� �F"�%�����
��$!��%������3F%����F)�����%��F��������!4F����F�F!�����$!������%�F���,��������������%F������1��E
�F���F!�E5'�B�����,�%������������,����F���%��������,F�����������!�������)������$!��-�����?3��C��
1A.3�5)�3�F%���B���,������1-�������3����(�5)����HF���-.��1-������B�,��F�5'��F���F!%!�������F���%���
����!�������F����������!��%F��������F����(�F����������F%������'������F���%��.E87�F������*%�!��"������
���������#��F����������F��,�����������.����������%��F����!����-G�G.A?B3)����%���F���!���L����
%�����"����������F!*�.����������%��F'
F����������%��F!*�%���&������F�������������������(�F,������F���L�%�!������!��0������$!��%���
#���F�����!�������$!��%�!��<E<�1��%��5'������&,�����!�"F����������,F������������!�"�����F����F�
���!����!����������I
� ����,!�!��I�������E;����6B��!%��������'
� �.������������!%�������$!��������E7����D7P����2J.'
� �F����*��������8����!�Q�����2��!�.��!�2.��!�.2���!��F!,����������((�%F%���������F���RF,�'
� �F����*��������8��$!�����%���������F��8�2J.��!���!��#�%F!�������F���F����������%�������F����'
� �������F�!�����������F�����������EE����B7S.'
� �B����*���������8������%���������F�����������������!*�F���%����!�%�!���'
� �.�F$!��F���%�����������F��0����F!��?%���������F���'
���&��F"����"���(����F�%���F�������������F���%�����!������%�!�����%������!���1��E�H�,!���85)�%�!*?%��
��� � ��� � ������ � 1��E� �F���F! � 65 � # � �F���� � �� � ��!"����� � �*��F%����� � ���BA � �!� � ��� � �%�F���������
����������F!*�$!��%��������������.����������%��F�1���.F�"�L�����E�677>5'
�������!��F���1��E� H�,!���<5������!��F"�%����%�!�����6JC�B�����������$!��%��%�!����F����
������������!�����������#��F��������F��$!�����%�������&��'�B�!�����������"!�����������,�$!�)��F�
�F���� � �! � (�F,���� � F����(�� � 1��"���� � <<7 � �F���� � �� � �F��5 � ��� � !�� � �F���� � %��"��F��� � ��!� � !��
��$!��RF,������F�����F�����<E<'�.��%�!����F����������F����(�������������������$!����!��F"�����
�����!�����%���������1���.F�"�L�����E)�677>5������!*����������������%���%��F'�
;8
�������������ABC�D
������ �1� ���+��B�E�������E�� �F���� ���� �B.�� � ��� � ������� �������.��� ��� ����� � ��B�� ��D � ��� � ��������
.B��B�����24�%453���������*����(�H�,!����*��F�������TF�������E)�E>>B'�C!��%���%���F�����������������������
F���%�������%���������F�����$!������(�F,������F����(�����F������%�!�����������'�����������F���"�F����� �I�
��)��!%��������'
����
,B���B��)������������E���B�������D��D���(
������ ���������D�������F�D�������C�����FB�C��*��BD��� ������
.E87 ����������������������������� B���,���F�!��
�6 ������������������������� ���.F�"�L�����E�677>
C�B������(��� ��������������������������� :��,F���)��F,��=��
AC;������(��� �������������������������� :��,F���)��F,��=��
C�B�����(��� ��������������������������� :��,F���)��F,��=��
3�3?.� ���������������������� :��,F���)��F,��=��
���&��"���(�%F�����F"�% �3��C��) � �F����������������%���%��F��������F�� �!���(���� � ���������F"�%�
C�B��������F"�����F���L�(F����'�B����!�)� ���%�!�����6JC�B�����������F%%�����#�!�����"�������
�*������F!�%�F�������A������4���F��!��$!�����������������������!��L�F�����������%!�����'���(��)��� �
%�!"���!����F���������F�L����"F��F����:<�$!������!���L������(���F��"���������0���!����������"!��
�����,�����$!����!���������&%������F��"���������%�������������������!%�!������%���F����������
F���L�%�����"����%�����%��L�����%�F���,�����1M!��� �����E) �67775'��F�L����:<�����F!������!��
��%!�������F!���"�F!���� ���%�F��������F,���F*�����$!�������F���������������$!�� ����L�����
���!�����F�����F!������������!�,&����������A��EBC�1C���%4�����E)�67E75'�
;<
�������������ABC�D
������ � 6� � +/������� �C�����DB�D � ��� � E�**����D�� � ��������� � ��.���������DB��� � ��D����� � B.�� � ����
���C��� �EFB������ �#!)7����8 �A�197���� ��D �#!)7��:�( ����"���) � ���� ��� ����!) � ���� � �!���,��� � ����
���������� � �����!"�� � F"�% � ��� � ����� � %�!���� � ��F���%�� � �� � �� � +F!��) � %�!* � �����!� � F"�% � �� � %�!��� �
�6JAC;����!������'��F�������,���F����������!���F��A��,����?+�����,�1T6-5�F"�%�E777������%F������
�������F��'�
;E
�������������ABC�D
�(������%������!�����!��,�F�����F��������.����������%��F)���F���%��C�B��F�������,������������!*�
"���������!��������F�����I�C�B6��1�.����2�������2��..��22���.5����C�B8��1�.����2�����.�2�
�..���2���.5'������!,��F��F�F������������!%�������������(���'���
����/���F���������F���"�����������.����������%��F���������!�����������F�
��/��%�F��������
�����%�F�������������������%!������F!��&�� ���2���,���3F������$!� � ����F���!�����F"�%�����
�$!�������F�������F������F����%����%!��!�F����#����C��C�3)�3����)�H�F�%�'������������������"���
����������((��������%F��F,����I�2F�GA�F��1E>>E5)����:���1E>>;5�����UA����1677E5'�B��!��)�����
��� � ��� � %�����"�� � �� � ������%� � ��!� � %��������%��!� � 1B�CA � EP � ,����F������5 � # � ?B7S.' � ��� �
���"�������������((�����������������������F!*�1��E���%F����E5��������!����!���F������-F%�(�$!���������
�F�����������?���F���$!��1��E�H�,!���E5'�
�������0��-��B���BD����E�����D���+/E��D+���B���E��D�C��.������D�������+B�D��������D�E���(�������!)����
��������2!F��F���!���F������-F%�(�$!��������������!,�)������������������L�2=��)��F����=)��!%4��C���4���� �
�'�'2' ��!� � �F ����� ������?���F���$!�' ���� ������� �������������� �F � (F!������%�������#�%��������' �H�,!���
�*��F���������"�������E�1677;5'
;D
�������������ABC�D
��%F����E�I���������!�����������F���F�������(���
�����%�����&��������������F!*�������������!���������,�����F�������%�F��$!��$!��%����������
# � �F � L��� � ���*�F����� � �! � ��F�%��� � �%�F��$!� � ����� � ��� � ��F$!�� � ��%����$!�� � 1�F�,�!�� �V�
H������)�677;5'�.����������%������!��!���%�FC���"��%F��$!��$!���F�%�!��� �F�����������F��&���
%�����!���!����!�����D7�777�4�����#��������(����!���"F��F��������������������6777����E777���
1�F����L?�����F ��� ��E) � 677;5' � �� � %����$!��%�) � ��� � %��������� � ���� � %F�F%�������� � �F� � !���
���%!��������F��)�!���(���������������������������F�!����F"�����F�����!*���,���'�
�������;���+��B�EF�������D���������D�E��B���EF���.���B���B����+/E��D+���B�����D�B�D������B��B���E��
�F�B��E������B.������*���E��+/E��D+���B�(�B�F��&������IJJ===',��'%��'�L'
�!���"�F!����%�������F���)�������F!��������(�������������������,�!((����F������(���!�����!�
��F�%�����%�F��$!��1��E� H�,!���D5�1��"��)�677;5'�������(����!�)����������������%���F%��F"�%����
�F,�F�$!����������I��F�������F�!���F�������F�������!�����877S.�����F�%�����������%����$!������
����(���'�B�"��!����������������!����F%���������F�%�F��!�)���������!�,���F!���"�F!��!���F�%����
�%�F��$!�'����(�!���������������&��%�F!��1�EFE�<77S.5)�F��*�$!�)�F%����1��6?85����%������������
���F!* � ��!��� � �� � ��� � %������� � ���!��� � 1�E�E� �����!�� � �����%�����5) ��EFE� ����F��) � �!�(!���
�������,&���1��"��) �677;5' ��������F������%���F%��F"�%� ���F!��������(�������� ��*�,����) � ����
���F!* � �! � (�!��� � ���%������� � �� � �� � %�������� � F"�% � ��� � �!�(!��� � ��!� � (����� � ��� � �!�(!����
;;
�������������ABC�D
���F���$!���$!� ���������%�����%�!��!���������F!�(�!���)����W� �� ��������(!��!�������� �1��E
H�,!���;5'������)�%����F��F,��%�����!���F"�%����F!����������%������F%%����!��������%�����)�%����!��
����$!�������%����$!�����F��$!�������������%����,F����������������!������,��'�����((��)�%���
����!%��!�������F�����!�������������%�����������!������!��(�*������%F����������,F��$!��������F!�
�������1�F����L?�����F�����E)�677;5'�
� 3
�������:����������������(�
-������*��F�������
�F����L?�����F�����E�1677;5'�
'����*D�B�CB�+/CD��B(�
==='F�������'���
�F�%���!�F!��������,�$!������������%��!���F�%����������&����F%����������������(�����,�F�������
�����%�?%����$!���%������!��,�F�������������F���F���1@X�,������V�3����!�)�677;5'����F�F���
��!��������*������E7P�����F�����)������F�����������"���������������������(����1�F����L?�����F���
��E) �677;5' �-F���*�����) � �F�����������?���F���$!������%F�F%���������F������%���!�F!�������
��!�������A��BC�B��D��B����D�������%��"��������������D��B������)�F�����$!���F������-F%�(�%�����
�������������F�����"����!��%����,�F�� ����������A������'��,F������)������F����������"��!��(����
��,����������������������&%���1�E�E� ��&�����BEP5'�.��%���F����F���"������)������F%������)�����
F�%�F��F%���������������������������������������!��������!����F���%�!"������F�������F������;7�
��� � ��!�%�� �����������F��� ��F����� ����(�����' � ��!��(���) � ��!� ���!�� �F ���F���� �%������� �#�
������������F%����������&�����������&"����������������!���"�������!���%���F���F��������������F�
��������������%�F��������'�B�����!���������F%�!������������������!���F������%����������!���
(��%�����'
;B
�������������ABC�D
�!�%�!������%�������&��) ���"�����>7��%�F�������������F�!������"����������������!����' � ��� �
��!"��� �0��� � ��,��!��� � ��!� ���!* � %F��,������I � ��� �����&"������ ������F!* � 1�EFE� ���%�F!* ����
�!�(!�� � ��� � %��������) � ��������� � �� � ��((������� � ���(����!��5 � �� � ��� � F���F!* � 1�EFE ������)�
��������D5'��F������������%�F������������������������F��������F���F!*�8)�<����E'
3�/�2�����$!����"����������F��
�F � ��"������ � ��� � .����������%��F � F � ���% � ��� � F������ � �F� � ��� � �������� � �� � ,�����$!��
��"����������F��)�%����?#?�����$!������%�F���,������������F�������������%!��!�����!����!"��������
������(�����F���$!��%�������"�������F�����F�������F!���F"����������BA�%�����!��F���%����%�F���������
��"����������F!*'�
E5��*��F%�����������BA�,�����$!�����F�
���BA����F��F������*��F���F"�%�����4�������*��F%�����BA�F�����F��������4���1Y�F,��5���F��&���F�
�����F!���������F���������%�����������!������!����!��&,�������%�F���,������!������0��������
���%�F�������������������F!*�1���.F�"�L ��� ��E) �677>5' ���!��(���) ���������� ���� ���� ���F�������!��
���((�%F%�����!�����F,��F!��������?��������F���F������F!�"����?����F,�'�������!*��������������F���
��� � ���!��F�� � %���F�F����) � ��!� � ����� � �� � "!� � ��F��$!� ��E�E� ��!� � �F���� � �� ������ � �!+�� � F!*�
%���F���F�����)������%�F������������������*��F����F!�"����?�����!�'��!�(��F�)�E77�,��!�E67Z����������
�����"�����!��%�F%!�������%�F��������������F%����F��������!�������6���F"�%�!�������������!�,��&�� �
18��������F�&���5'�.����!�����������!������������,������&"�������F�����FL������$!���'���� �����
���!����������F%����F������"����?�����!����!����!*�������������6���#�87L����F������F��!�����&"��
�����������F�����FL������$!���'������%�F�����������F�������F�!������&����((�������)��������������
�����*��F%������������&��"F��F���'�����((��)������!��������BA������F%��������������F������������
F�%�F��F%�����������������������)����BA�����F���F!*���F����,F��������*��F��'�
;>
�������������ABC�D
,B���B��1��-��D��E�����+B�D��������D�E���8������D��������E���B��B�CB����<=�"��=,(�
AB�CB����$��B����BC+�����<�"��=,��55��2��E�� B��*�����>�D3
��D� >�+B�D����� �BD���
3F��������2!F��F�
2G7E��(�E �������1-F������!�����!��5
2G7E��(�< �������13�F�%����5
2G78�8 �F!�(�������F!�����!���[�� ������
2G7D�D165 .F��������������������F����F��F����F%���������1E�#�E7�%�5
2G7D�;165 .F��������������������F����F��F����F%���������1E�#�E7�%�5
2G7D�;1D5 .F��������������������F����F��F����F%���������16E�#�87�%�5
2G7D�;1E5 .F��������������������F����F��F����F%���������167�#�6E�%�5
2G7D�B185 .F��������������������F����F��F����F%���������1E7�#�EE�%�5
2G7D�D185 .F��������������������F����F��F����F%���������1E7�#�EE�%�5
2GE6�6�165 .F�������������������1E�#�E7�%�5
2GE6�<�1;5 .F�������������������187�#�8E�%�5
2GE6�<1E5 .F�������������������167�#�6E�%�5
2GE6�E1D5 .F�������������������167�#�6E�%�5
2GE6�81<5 .F�������������������1EE�#�67�%�5
2GE6�E�1<5 .F�������������������1EE�#�67�%�5
2GE6�6�185 .F�������������������1E7�#�EE�%�5
2GE6�8185 .F�������������������1E7�#�EE�%�5
2GE6�<185 .F�������������������1E7�#�EE�%�5
2GE6�<1E5 .F�������������������17�#�E�%�5
2GE6�81E5 .F�������������������17�#�E�%�5
,B���B��6��-��D��E�����+B�D��������D�E���8������D��������E���B��B�CB����#��4>-(�
AB�CB����$��B����BC+�����#��4>-��55:�2��E��#�E��%�D�B�D����3
��D� >�+B�D����� �BD���
�!%4��C���4��:E?�E C!�(!���(��F��������F���%�������F���������!���
�:E?�6 2�F��F,������F�(F%���*�������[!���%�$!����������!��
����L�2=�� �:6?�6 3���F���!�%���������F���!��
B7
�������������ABC�D
,B���B��0��-��D��E�����+B�D��������D�E���8������D��������E���B��B�CB����>?$#��(�
AB�CB����$��B����BC+�����>?$#���)990��55��2��E��#�E��%�D�B�D����3
��D� >�+B�D����� �BD���
�F����=
�U>�< ���A��BC�B��D��B����D
�U>�E ���A��BC�B��D��B����D
�U>�D ���A��BC�B��D��B����D
�U>�; ���A��BC�B��D��B����D
�U>�B ���A��BC�B��D��B����D
�U>�> ���A��BC�B��D��B����D
�U>�E7 ���A��BC�B��D��B����D
�U>�EE ���A��BC�B��D��B����D13���!�5
�U>�E6 ���A��BC�B��D��B����D13���!�5
�U>�E8 ���A��BC�B��D��B����D13���!�5
�'�'2'
��F��?���F���%
2����F"����
�UEE�E1E5 ��������D��B������
�UEE�E165 ��������D��B������
�UEE�61E5 ��������D��B������
�UEE�6165 ��������D��B������
�UEE�8 ��������D��B������
�UEE�< ��������D��B������1����F*5
�UEE�E ��������D��B������
�UEE�D ��������D��B������
�UEE�; ��������D��B������1�!�5
�UEE�B ��������D��B������1�!�5
�UEE�> ��������D��B������
�UEE�E7 �AB�B����D�A����
�UEE�EE ��������D��B������
�UE8�6 C���������%��
�UE8�8 ��������D��B������
�UE8�< ��������D��B������
�UE8�E �AB�B����D�A����
�UE8�D ��������D��B������
�UE8�; �AB�B����D�A����
�UE<�6 ��������D��B������
�UE<�8 ��������D��B������
�UEE�E ���%�F!*�����!�(!�������T������
�UEE�6 ��������D��B������
�UEE�8 ��������D��B������
�����.���
�UE;�E ���%�F!*����%F����F���������!�������F%�������(��F�����!���
�UEB�E ���%�F!*��[����,�������%�!���
�UEB�< C�������
�UEB�E C�������
�UE>�E H�F,���������%F����F����F"�%�(��F�������F%�������
�!%4��C���4� �U67�E 3���!�����,�F��F,�������!�����F����F%�������(��F�����!���
BE
�������������ABC�D
65������(�%F�������!�,&����������A��EBC�F"�%��6JC�B�
�F�����F�F������F���!������%��������%�F�����������!��!����$!��RF,������F�����F�� ���<E<�
��%��������������,����F���%���(!��������'�����((��)�%������������$!��RF,����%���������F�+��%�����#�
����F���%�����!��F�F��F��!�)���!���%��������!����B�1�E�E�!�����LF��������!%���������$!�������������
��������(�������%�F�������5'���F�F��F��!��%�����������!�����$!��%���!%�������$!��$!��"F�����������#�
��F����%��������������F!*���%���������$!�����������F���$!��%��%���������F����1��E� H�,!���D5'����
%����$!��%�)������������������������$!��RF,����"��F,��������*�����$!�!��%�!������F�F��F��!�'
�������;��&�**����D����DBC���E��C/��������@B���CB�����606�E�����+�(�����(����#��F��������
��%�����������C%���%�'
B��������%���������(���F�����������!%�!������%���F������������%������((�%�!���F"�%��(����
1\!4��) � 67785 � �!� � ��� � ��((������� � %�����F����� � ��������� � ����� ��6 � �! � C�B� � �� � ��F�F��F��!��
B6
�������������ABC�D
�J%��J��B��!���F�F��F��!��3J%��J��B'��F���F�����������F����!%�!�����%���F�����������������F������
(�������$!F��� �F�����%!������ ������ ��!������?�0��' �-�!� �%��F) �!� �]2���� �%F�%!��' � �� � ��F,�� ����
������,����������$!��%����������#�������,�����$!������!��%F������F����!%�!�����%���F����1\!4��)�67785'�
-�!� � ���� � ��� � ��,F��"�) � ��!� � �F � ���!%�!�� � ��%���F��� � ��� � ��F���) � %� � $!� � ���$!� � �����0%����
��������F����������F���%��#����BA�,�����$!�'�Y!��$!���������F�F��F��!�)���F���%���6�(���������
���!%�!������%���F�������&����F������E�E�����"F��!�������$!F����F���!��(F�������F���������F�����]2^�?�E>�
T%F�J������ �]2^�?�>T%F�J������!����F�F��F��!�������3������%��"�����'�B�!*�%�!�������F���%���
(!�������� � ������ � ����� � �F� � ������ � ��������� � �� � (�F,���� � F�����!' � CF%�F�� � $!� � ��� � "F��!���
,����F������ � �������� � �� � ���%������ � �F� � F!?�����!� � �� � / � D � T%F�J���) � %���� � ������� � ���
����F�F����������%�F�����������!�����������$!��RF,�����������%��F����"��F,�F����F"�%��6JC�B�'�
��F!�������!�����%��������#�F%%��%��������F�F��F��!��J%��J��B��F����,F�����F��&����F����(�%F���������
�%�F���������1��E�H�,!���D5'�
�������F���!���������������������%�F�����������������%���������!���F"�����������%�������������
(�F,������������0�'�F��������F!�����������F���F%�������F����(�%F�����F�������F��������!���������������
��������� ���F����%��� �����!���' �����((��) � ���� ���� � ����� ���� ���((������ �%�!���� ���F���%��) � ����
��$!��%����������������!����F���!�%���F,�J��$!��RF,��%�F���$!�'��F�$!F�����������F������BA�
��$!������!��%�������%�����������F����&�����"��'�-F��%�����)���!�������$!��RF,������F������"��F,�) �
�F�$!F�����������F������BA���$!������!���F�%������!���������F��F�$!�����BA�������������1��E�H�,!���
D5��������E77��,'��
��F����(�%F���� ��! �,&�� ��� � ����A�EBC ��F� �-.� � 1�E�E� -������F�� �.�F�� ���F%����5 �F"�% � ����
F���%�� � �6JC�B�?C�B6�?C�B8� � ����� � !� � �����%��� � %�F���$!� � ��� � %�%��� � �� � ���F�!�F����)�
������F������������,F�������F��F��������������������������!��F����F���(F��F���'�����((��)���&����!�
��F����(�%F����� ���� � ��� ������!�� ��� � ����$!��� � � � F"F�� � F����(�%F����) ����� ���F�� � ��&� � (F���� � �� � �F�
�����F�����������F����F��%����F���'�F����F�������������F�!����F����%������((�%�!�����!��F+!������F�
������F�!�� � ��������F���� � �� � ��F���%�' � F�� � (��� � ���������� � �� � F����$!�� � F!* � %�%����
��F����(�%F�����%�F���$!��)������������������F����F��F�������'�-�!������������)�������!%���=��-.��
����������F������'�.���������������%��������!������)�������F!���)�����$!�����(�F,�����%�����%�����!�
�F�� � ���BA � ,�����$!� � ���F� � �*��F�� � ��� � ��&� � ��! � ����������' � .��F � %������� � # � F����$!�� � !���
B8
�������������ABC�D
������F�!�� � ��������F���� � ���%�� � �� � �F � ������F�!�� � �� � ����?���F�!�F���� � 1��5 � ������ � #�
��F���%�)��!�F����������������%�%���)���!��F!,��������F������,��%��������%�F!,��������F����%�(�%����
�����F���%�'�.��F�F���!��%����$!��%����F!,��������������������%�������!�(�F,�����F�����!'�
���!���) � �F � ������F�!�� � ��������F���� � ��� � F�F����� � ��!� � ��� � %�%��� � �!�"F��� � F(�� � ��F!,�������
���((�%F%��������F�-.�'��F���%��F���F��F�������������������!��������!�����������'
-F�� �F��!���)���!���!�������(�%F����������������������!���#�!���I � 1�5 �!������!����������BA�
�*��F���)�1��5�����%��%����F��������F���%�����((�������)�1���5�!���F!,����F������!�����������%�%���' �
�!%!������%�����!"����������F��"�����F��������!���F������F������!����������������F����(�%F����' �
��F!,����F������!�����������%�%�����F���*������F��!�0������������#�8B�%�%�����!��$!��F!?���#����
%� � ������ � F��F�F���F���� � ��� � (�F,����� � �� � �F���� � ��� � ��!�F����' � -�!� � ������ � �F � ������%��
����������!��) � ��� � -.� � %���F�� � �� � ,&�� � �� � ����A� � EDC � ��� � �F%������ � ��� � ��� � ��F�����' � B���
F����(�%F����� ���������� ����������F�F�� ���� ������!��) � �� �F ���� �%��%�!�$!�� �����BA��*��F��� ����
%������F������F������������!����!�%������������,0�����F���F%�����-.�'���(��)�����F����(�%F������F"�%�
��((�������-��?��*�HF���F(����1���%������3����%�����,���5�������������������%��������!������-��?��*�
%�������������� � (F%����F��!����� �F�-.�' ���!��(���) �%��F �F ����������������� ���!�������!��(F�����
���������F����(�%F�������!��������F����'
�!����F�)�������%�F����������������F�������(�F,����������F��F�����F�����!���������������!�����
��!���������!*��%�F������������������������!��$!�!�����!���(���'�-F��%�����)����������F�"��!F���F�����
F!*��F�����!���F?"����������%���(�F,�������!��,�����F,F�����F��&��!����F��������F!�3���13���!���
��������!�5) � ��� � ���������� � ��((������� � ��F���� � ���R!�� � ��!� � %�F%!� � ���!*) � ����$!F�� � ����
�������������F����(�%F�������((���������'�B�F!�����������������"F�!F���������F�$!F���������BA�����
F���������F����$!���)��������$!�������!%���#��BA��F!���������������1�,�����5����!�����F,��������BA�
�F� � ��%�,����' � 2���F������ � ��� � ���!��F�� � ��� � ����$!� � $!� � ��!� � ��� � F����%��� � ��F���� � # � !���
%��%����F�������(����!���#�<�,JZ�'��������F������%������������((�%!�����#���������!���F����(�%F����) �
�0�����&��(F����)� �����,��!�����������F����(�%F��������!��%������!���!����F�$!����F����%����
��!�� ���������$!��RF,�������������F����������� �!���$!F���������BA��!((��F���'� �� �F����%�����
��%���������F������!��%���F,�J��$!��RF,��#��F����������%�F��������������!��1��E�F���F!�D5'�
B<
�������������ABC�D
,B���B��;��,B���B�����BC�D��BD�*�E�����+B�D������(�
>�+B�D����� �BD��� -��B���BD��� ��*��E����2�3 &���D��� #��� A�
2GE6�<1E5 .F������������������167?6E%�5 2!F��F� 6777 E .�F���$!�
EJE7 HF���F(�
�:E�6 2�F��F,������F�(F%���*��������!���
%�$!���������E��B����D
�!%4��C���4� E;77 EJE7 .�F���$!�
EJE7 .�F���$!�
�UD�E .��"�����I��AB�B����D�A���� �F����= 6877 E HF���F(�
�UB�D .��"�����I���������D��B������ �F����= 6877 E .�F���$!�
EJE7 HF���F(�
�U>�E H�F,��������%��������1�!�(!��5 �F����= 6877 EJE7 HF���F(�
�U>�E ��������I����A��BC�B��D��B����D �F����= 6877 E .�F���$!�
EJE7 HF���F(�
�U>�B ��������I����A��BC�B��D��B����D �F����= 6877 E .�F���$!�
E .�F���$!�
�U>�> ��������I����A��BC�B��D��B����D �F����= 6877 E .�F���$!�
E .�F���$!�
�UEE�8 .��"�����I���������D��B������ �'�'2 8D<E E .�F���$!�
EJE7 HF���F(�
85�.���F,������F����%���
����F����%����������!����F����������!��(����F"�%�������������F,����$!���1�,��%�!�����-!��5�
��������������%�����!�(�!������!��'�-!��)�������������%������F"�%����"�%��!���2��?��1-����,F5��������
�F%������ � %���������� �BEK � 12��%� �3�� � ��(� � ��%�����,���5' � ��(��) � ��� � %����� � ������(� � ��� � ����
��"�����#���$!��%���12����%����)������)�H�F�%�5'
�:�/���F������-����,�����$!��
������������������,�����$!�������������!���F�%���F�F��������%F�F%�&�������%�(�$!��'�BF���
BE
�������������ABC�D
%�������!��)����%���*�F��������!�����������,����������%!�F�����$!����������������%���F��������
��$!��%������BA'�F���F�$!�!�������,�����$!���������������������%F�F%�������$!����!��F��!�F���
�����������������(���F��"����!���������F����������F�����������������F*���)���������0����1�5���������%��L�
��!�������F*������!����)� �1��5��������,!� ��E�E� �����������!���������"��������������������!��F�%0����
%���!�)�1���5�%�����"���E�E�������������������������,�����%���F�F����������������F*���'�
��/����,������
��F��,�������������$!��%�������%�!%�F���!��$!��%�����#��F���������F��F���%��F��,����$!�������
��F�������������%�����!%�����������,�����$!��'�-�!��%��F)�.�!��F��U�6'E�1�F�4�� �����E)�677;5�F�����
!���������!���((�%�!���!��F��,��������!�������,���F��)�$!��F����!������������������F�!��������'
3�/���������������%�����!%�����������,�����$!��
E5�A��,�����@�����,
���A��,�����@�����,�1A@�9�CF���!����A��)�E>B;5�����!��F�,����������F,,�����F������F����!������
����F�%�� � ����� � ��� � ��$!��%�� � ���BA � 1�E�E� !�� � F�F���� � �������$!�5) � $!� � F!������ � !� � �F!* � ���
�!�F��������((��������!��%�F%!���������F�%������!�����F*����[������&����[�����,������%!�F���'����
���&������T��!�F�#���!*��F�F�&�����1T6-5�F�����!���������!��%F�%!������������F�%��������������F���� �
���������F!*'�.[����!�����&���$!������&��������!�����!������������$![����[F,����������F����������!�
�����F��"�������'�.�������F���F�������F������F"�%�.�!��F��U�6'E�1�F�4�������E)�677;5'�
.�������������������������%F����������(F����F�����������%���������������������,����"�F�������
��������F��� � �� � ���% � ���� � ����� � �F� � F�F���� � # � ��� � ��$!��%�� � ����,����' � .���� � ��!�$!��) � ����
����������F������!������%F�F%�&���������,F�����������F����$!���'
BD
�������������ABC�D
65�������������F*��!�����"�F������F�%�
�F�������������F*��!�����"�F������F�%���"F�!�� ����F����� ����������) ����%���((��������
������&��� ��"��!��"��) ���� �������������F������ ���!� �!�����&�� ��������F�%���"��!��"� ������'�
��F����������!��������%�%��!��$!��F� �F�������!�������F����������*���$!��������������'�������&���
��%��"F���F!����!*�������������F�����%������F"�%������,�%����+����������1-��F�F�V�.�F��F���E>>B5'����
��F,����! ����&���2���12����F���������"�������5)�$!��%��������#����������������((����������������
�!�F��������������!��(��$!��%��F!����������F��F���%�)���!��%F�%!������������F�%��������������F��������
�F*���'�.�����&���������!"����!���������!�������������������F*��!�����"�F������F�%��%F�������� �
�F�!��������������������������F�F�&����'�A����!���,F�������%����,����F�"����������"��!�������� �
�������F���F��������!�����,F��F�1�F�F�&����25����%���F������������!"����0����%����������%�����
��"F��F�����1�F�F�&�����5'
�F � ��%�����!%���� ������,�����$!� ��F� � �� �������� ��� ��F*��!���� � "�F������F�%� �F �����
%F�%!����F"�%������,�%����-G���12!����������E�67E75�������������&���2��_�_2'�
85����!������������F�������(���
����F�����������!���F��%�����!*�������������"����0����F�F��������!�����!�����F����!�������
�� � ��������&�� � �"��!��"� � ��(����' � BF�� � %���� � ��!��) � �F � ��������%� � ��� � � !�� � �������� � F � ����
������������F��!�����������������%�F��������F,��I� ����������F�'����+�!�����������������F������
���%�F������������!��%������!���!��+�!��������������((��������!��%�F$!�������%F�����������F�'��F�
"F��!������������F��%����������F!���!�%���F,���[F������%������W����� !���*����'�.��F�����������
$!F���(��������%�����!������%�F%!������� !��������F�������(���'�
<5���������3F��������
�F �������� � 3F�������� � ��� � �F��� � �!� � �F � �������!���� � ��� � ����F������� � ��������!��� � 1 �E�E
%F�%!���� ���BD����B��5�����F�����������,�����$!��������!���!�"F���!�����&���%�����)�#��F��������
����F����������(����������B��'��.�����#������$!���F�����F��������!����&�������%F�%!�������(��%���������
�������)�#�����"���������F�������������F*��!�����"�F������F�%�'�-�!��%�������!��)�������&���
B;
�������������ABC�D
!���������������0���$!��%��!��!�����������F*��!�����"�F������F�%�)�#��F"����2��_�_2'�����%F�%!���
���������((�%�!���F"�%����3F����8'6'E�1���$!����V�!�������%4�67785'�
F���(����%���������F�����������,�����$!��������!�)�����������&�����"��!��"��������%���F�������!��
�*F����� � ��!� � %��,�!��%�' � .����?#?���� � $!� � ���*�����%� � ��� � � !�� � ���������� � �F� � ��� � ������
�������������"���(������!�����%�������F�����!�����!������'�
BB
��������A
��������A
��BCB�DEF������������������
���������������� ���!"���!�����
�"����!��
#$
��������A
$%
��������A
�&�'!���A
��BCB�DEF������������������
���������������� ���!"���!������"����!��
(�'��)!����*���!���������&+��������,��!�����!"���!�,����! �,���������
��� �&�)'! ���� �� )!�!�� &�����&��)�� )��!� '������ '�� ��� �''���&� ��
,��)!-����"!�����)�������������������'&��� ,�,�!-���.(��&�!/��)��-����
)��,����!���'���,��� �� +���� �0��1�A#2'������-���!�,� !����)��!"����� ���
�����!���,"����!"������������ ��!�)�������������'�,������!"!�,��������������
����,��)��,����!���'���!-���.��'������3���!��!�!�,����,-����������4,���������
�����������,�������+��!����,�'������))�����,��!���!�!-��5�BC ���!�������
�&�'!���6. 1��� �"��� ���� ��,, ��� ���� �� ����,�� '��� ��� )��-�����
'&��� ,�,�!-��� 5��1� A#2 �� �7AE86 ��� !-���3 �''��,� ��BCB�DEF�. ���� � ,�,
�,��!�,� �� ����������!�� �"�� ��� ,-�!'� �� �0���2� 5����!��� �� ���&���&� ��
!����)��!-��������+)����,���!���3������6.
(0,��'� )�*���� ����!��� 9 ��!�� )�������)��� ��� �,-������ 9 '���!�
�0��! ��)����)���!'���.�����,��'��,�,�,��!�,��"��C��!�F�&�)��.��+���:%;
��� �,-������ �,��',�,�� �'�+� �� �!���� � ����)��!-�� ��� ,�, ,����,�� '�� �� ��!
)�����.�������3#<=<�,-�������� +�����0��1���>?#�,-�������� +�����7AE8
����+������-���!�,����)�!��������!�'��!����.
$A
��������A
��BCB�DEF������ ������!���,�����!���'���� 5!6�/���!������,-����������+�
�����-���!�,'����&��������!�-'&���)���'�����������!"���/��/���)!-���35!!6
�/���!�� ��� ��! ��)���� ����!�,�,� ��))� ��! ��)���� �� �,�,�����3 5!!!6 ������ ���
��! ��)�������,-������'������������*���,����/�,-�������/���!�������BCB�DE
F�.�������������!���"!��0@�(&��'�AA'&�)�����. �������.�� A.
$:
��������A
���������ABACADEFC���A�C�C�C��A��FAC�C�����A��A�E��C�A����F����AC��A����E����A
2�,'&���C�&,A3:3C��!�F�&�)��A3:3B3 �&�)�� (� ���"�CA3:3=3 (�D�!�!�E�!����:3?3 (��)!��
2����:3?3 ���&��� ����������:3?3 D�!"!�� ����!�:3?3 ���/!� F�������A3:3 �. ���� F!���B ���
�&!�!''�G�����4����&����A3:H
A@�!"���!�,���������3�1�23@C�>==B��D��D3��)'���������!��3B=%?:������
����/37�����
:@�!"���!�,����',����������� ��3@��5����'���@�!"���!������!�����637�����
BF�'���)���������� !���2�!����3G�!*�@�!"���!��!�3�)������)3A%#A�G�)������)3
�&�1��&�������
?@�!"���!�,���������3�1�23@C�>%<?���2�3��)'���������!��3B=%?:������
����/37�����
=@�!"���!�,����!�!��3�1�23@C�>%%#3?%�"��������������!����3#>%::��!�!���
����/37�����
���FF���������ACE���FBA�E)�!��'&!�!''�."�����4����&����I��!"E������A.��
2&����!�������� �������������'&��� ����!�����!��
$B
��������A
���FCD�
D�EF������
�� ��"!���)����� ���)!�� ����!��3 ��� ! ��� �� !����!�!�� ����� �� �����!� ��!�
��-������ ��!� �!�&�� &! &�� "��!���� ��-������ �� �'��!�� �������� �� ������"��
��-�����������!�!� �&! &-���!��'&��� ����!��! ���.7���&�������3!����!�!���!����
�&� �'��!�� ��"�� �� &! &�� ��/���)!� ��"��� ���!�� �� '&��� ����!� �������� ��� �&�
���'�!�����&�'&��� ����!��'��!�������'�.
2��&������!���-�!����&����-���������J���!����!�!�������'��!���!�'���!�E������
���������. ��J�"��3)��� ������ �/!��J!�&!� �&��� '���!��� �"�!����� ��-������ ���
�&���������-�!��������!� ���������������'&��� ����!�!����'�����!��.
������������E����B�������
�� ���!�!���� '&��� ����!� !��������� ��� '&��� ����!� ���! �)���3 J� !�������� �
��� �� ��-����� ��������. �&� �������� ��BCB�DEF� ��)'�!��� ��� �� ��-������
���)E�����4�&��&�"������!�����������!������!� �����-�����-���!����!���!�.7��
�&� �!����������3�J�J!��������)����������/���)!�)��4���J����&����� �&�22@
��1� ��� �7AE8 ��� ��-������. 7����J!� �&� ����)��!� �/�����!�� ��� �!�����!��3 �
)����� �����!�� !� '�����)�� �� ��)�"� '�����)��!� ��-������ J&!�� '�����"!�
����"�����-���������������'&��� ����!�����!��.����������������!��3K:%;���&�
����)��!����� �!������ ��-������ &�"� ���� ��)�"�� ���) �&� ��������. ��
��)�������� &�J ��BCB�DEF� ��� �� �)'�����3 J� ���� � ��� �� ��"!���)�����
�&���!�!�)����� ��-������ ����!��� ���) ���' ��� ��)'���. �&!� �/���!�� ��!�������
�&� !)'���������'&��� ����!����! �)�������-���������&���&����!)'���(�2��
�����&.
$?
��������A
���E������
��BCB�DEF��������&������������������5!6�/�����&! &-���!����� ����-���������
���& �� �&� = ��� �� '&���3 �� ��� ��/���)!� ��"���3 5!!6 �/����� ������� '�����)��
��! �)����3 �� ��� �� 0��������� ��! �)����03 5!!!6 �����& ��! �)���� �� '�������
��-���������� J!�&����������.��������#<=<22@��1����>?#�7AE8 ���&! &
-���!����� ����-�����������J�"�!�����.
�&���BCB�DEF�!�������!����&��� &�&�@�(&��'�AA'&�)�����. �������.�� A.
!��A "�F��� 7�� �� �!"���!��3 22@ ��1�3 �7AE83 ��-����� ��������3 �&���!�!�)�����3
��"!���)�������-������3�����!��.
#��F��ED����
�� ������ ����� �&��� &�� ���� �� �/'�����!�� !������� !� �&� ��)��� �� ���
��-�������"�!�����!�'���!�E���������������.�&!�!��&�����������JF1��/�����!��
���&�!-��� ��� ��J ������!�� ��-������� �&�� ����J �&� �������!�� �� ���� �� ����
�'���. �� ������ �����3 �&� ��� �� )�������� ��/���)!� )��4��� �����!���� J!�&
'&��� ����!���������&����"������&�����!��������/������ ����!��!"���!��!���� !3
��'��!���� �&��� �&�� ��� ���'�!�3 ������������ �� ��� ���!�� �!��!� �!�&���� ��
)��'&��� !��� �&�������� L�. . AM. �� �&� �'��!�� �����'� !� �)'����� ��� �!"���!��
)������)����3 �����)��!�� ��� �"����!����� �������� L:M3 �� ���!�!��� )���� ��
!����!��!� �������!��3����&����)������'��!��3!���-�!���.C��������)��&������
�&� !)'�!�!� ���'�!�� �� �&� '&��� ����!� �'��!�� �����'� LBM ����� � ��������!C��
�''����& �� ���!)!� ���'� �� �� ��!�)� L�. . ?E>M. �&��4� �� '�� ���� !� ��-����!�
���&���� !������!�!����)��!�)��&���3�&�������!�������&��� �����-��������!�
��������� !� �����!"��� ���!�!���. �&!� �''����& ��� ���� �� ������������ �''�!�� ��
�� ��!�)� �&�� ��� ��� �"�!����� !� �������3 ����J!� �� �� '���'��� �&�!� �!"���!�� !�
"��!��� ��� �� &��!���� L<3#M. D� ������3 �&!� �''����& ��-�!��� �&���!� � ����"���
$=
��������A
)��������)��4��J&!�&�5!6��� ���������!���!���-�����J!�&��!)!���'��'���!����
&�)�'����5!.�.���E!�&��!����!)!���!�!��635!!6�����!������ &'&��� ����!�!����)��!��
J&!�&!��������!�!"���'����� �5!.�.�!� ����'� ������&! &��������"�� ����6.�&!�
����J�������������&�������!C��!�����'��!����&! &����/���)!���"���.
���&!������/�3�&�������� ������!� ����&��)��������!����&��!����)���1�522@
��1�6!�������������&�0���!)���0)��������)��4��L$3�����"!�JA%M.�&�22@��1�
��� !�'������ !���� �!"!� �� ��!�)�. ��� ��-����� !�&! &��������"�����J��� ��/�3
�������!� ����� �����!���� �������!��� �� �&� ��������!���� )��&!����. ������3 )���
)����!��� !� �&� 22@ ��1� ��� ��-����� ������ �&� ����!�!�� �� �&� ���������
��������� �� �&� 22@ ��1� )������� ��� �&�� �&� ���!�!���� �� '����!� ����&��!�.
7���&��)���3 �&!� ���3 �!4� ��&�� !����)��!���� ����3 �''���� �� �� ���� ���*��� ��
&��!C����� ��� ��������� ��� !� ���!�"�� �� '��"!�� ������ !��������� �� 0����0
'&��� ��!�� LAAM. ���&�� & �&� 22@ ��1� ��� ��� &�"� �)���!��'� ������ J!�&!� �
�!� �� ��� �� ���)�3 ��-����� "��!��!��� &�"� ���� �&�J� �� �� �/���)��� ��J ��
����. 7�� �/�)'�� ��EE������E�� E��������� &�� : 22@ ��1� ��'!�� ���& �� !��
�&��)���)� N��O ��E������������ E���E���3 � C!����'��!�!�3 &�� : 22@ ��1� ����
��'!�� ��� �� !�� �&��)���)� �3 �&� ��&�� �� �&��)���)� �G. �� �&��� : �����3 �&�
��'!�� �!�'��� A%%; !����!��. �&�� �&� 22@ ��1� ��� !� ��J�� ����!�!"� �� '����� �
��)'���� ��(2@��1� ������ ��2J&���"��!��!����)�� ��'!��&�"������������
�&�J�L�. .A:EA?M.
���������"���� �����!� �&�22@��1� �����-�����!�!��&� ���'��������!��!�
!�������!����'���!����������EE�����4LA=M3�C�(A�1�LA>M3FF�PLA<MEJ&!�&����J�
��)'��!�������J����J!��"��!������� ��!�)�L�����"!�JA#M.D���!���"���� �!�
�&����������&�22@��1� ���!�&! &��������"��3�&��������!�����&�'&��� ����!�
�������� !� '��� ��� ���� ��� ��� �� ���'�J!�&!�����)�����.D�&�� ����3 ���& ��
$>
��������A
�&��������!� ��� �&����� ��!�� �������7AE8 5��BA�3 ���QE�����!� 5�� A3 �� !63 ���!�
5�E�A63 �� ��� �1�'���)����� �� �����!�� 5�� A��� �� !63 ��� �� ���� �� ��������!"�
)��4���. �)�� �&��� ����3 �7AE8 ��-����� ���� ��� �&� )��� �������� ��� ����
��'��������)��������!�����&��)������22@��1�����"�!�����5!.�.�����&��<;��
�&� ����� ��)��� �� ��-������ �����!��� !� ��BCB�DEF�6. E�������� '������ �� �
�!� ����'� ���3�&��7AE8 ��� !� !�"��"�� !�'����!�����&��!�����!�'�����&! &��
)����!�� ���� �&�� 22@ ��1� ���. ������� �� �&��� ����!�����3 �7AE8 '����!�
��-������ &�"� ���� ���� �� �����"� '&��� ����!� ���!�!�!�� ���J��� ��4�����!�
�� ��!�)�LA$E:AM3���'���!������� �&��!����&�������!)��������� ! L::MC�&� ���
��-������ ����&�"� �&�'�����!�� ��&��' �����"�'&��� ����!� �����!���&!'����J���
�������������� ��� ! L:A3:BE:?M3����&�������!��&! &��'��'���!����&�)�'���!���
'��!�!�����)'������22@��1� �����-������.2���� !��!�����!����22@��1� ����
����7AE8 ��������� ������ !)'��"��&��������!���� ��� ��'&��� ����!����!�!�!��.
�� ���!�� �������� !����'����!� ���� ���) ���& �&��� ��-������ !� � 4�� ���' ��
��&!�"!� !)'��"��'&��� ����!��������!�������� !.
����E����A��A�E���DA��$E��D�A�C�C�C��AC��A���AC�%A��A���������
D�� )�*�� �������� ��� !�������!���� '���!� ��������� !� �������� '�����!�� �� ���E
�� �! !��� '��'���!�� �� )!���4�E�����!�!� ��-������ 5E�����4A�C�(AFF�P6. �&!�
'�����)3�!�������!���"�������!�������*����������)�L�. .:=EB:M3!�����)!� )���
��� )��� ��"!���3 ��� �����!��� ��)�!� ����!"�. C!���4�� &�"� �!������� ��! !��3
!�����!� � 5!6����������'��!)��!����!�!���!��L:<M3 5!!6�&��������'�������)�����
�!���������/������ ��LB%M35!!!6�!���������!���/���)��)�� �'��!��!���L:<M���A��
��"����� !� 4��J��� � �!��� �&� �!)� �&� ��-�����J�� ��'��!��� ����!� ��J���
���! ���!���L:$M35!"6�&����4��'���!�!��!��&������!'�!�����&���'��!�����-������
)�4!� �&�)��������LBBM35"6��-������������!� ���)�������������! !�5!.�.�&!)��!�
��-������63 ��� 5"!6 ��-������ �� '��� -���!�� J!�& �����!��� '��!�!���. �"�� )���
$<
��������A
'�����)��!� !� �&���������������������-������ �&��'��'� ���J!�&!��'��������
��������� ������� �� �!���� '&��� ����!� !����'�����!��. @������������3 )��� ���
)�����-��������! �)�������������������� !����!�������&����!� &���!��!� �����
��! �)��� 5!.�. �(�2�� �����&��6. ��� �&���)!���4�� &�"� �&� '�����!�� �� *��'���!C�
!����'�����!���. �&�������3 ������!� �&� ���!��!�!�� �� ��-������ !� �� !������!� ��
!)'������'����-�!�!������������.
C������&���������������!)!���"!��/'��������!��.�/'��������!��!���!�!�������&�
����!������"����)����� �&� �!���������� !� ����J� ��� �&�'������!���� ��-�����
���������3�����!�!� ��������������!������-������.������3)�������������������
�'��!��!C� !� '���!����� ��/���)!� ���'� L�. . B?M3 ������� ���� �����!���� �� ���&
�����!���!���-�����3���J��4J!�&�'��!)���"��!��������/'���������'��!���!�
'���!� ��������� �������!��� L�. . BBM. 2�"���� !)'������ �����3 ���& �� �&� �!����)��
F����������*���LB=M32�(G�LB>M3E���� ������������LB<M�/!�����!������&�������!�
��22@��1� �����-������.�'������)2�(G�3�&�������������������)�����!�����
�� ��)�"� '��� �� �&� '�����!� ��-������. ��J�"��3)����� �����!�� !� �� ������!��
��)'��������&���'��*��������&�����!)�����"��)������!� ���.
������������������������)��&������������������3����!)�����BC�DEF�������
5!6 ��"���' �� ����E��E��� ��� ��E���!����� �������� J!�& ������ ��-������ �� &! &
-���!��35!!6�����������)��������)��4����&�����J!������4��J��� ��3��)���22@
��1� ��� �7AE83 5!!!6 '������ � ����3 ����� �� ���&�� ��-������ ��"��!� �&� ��� ��
����3 �&�� ��� �� ����)��!����� �'�����3 ���� J!�& �� �/'��� �����!�� �� �&� ��J
��-������3 5!"6 '������ &! & -���!�� )���!'�� ��! �)���� ��� ��� !� ����!�
��"!���)�������-���������"����!�����&�'��&����.
$#
��������A
�C�C�C��A��FED�EF�ABA������AC��A�%���%���C����
�&� ��-������ �����!���!� ��BCB�DEF�"���!��A 57! . A6J��� ����!�"�� !�D������
:%AA ���) �&� ������� A#= �� E�����4 51���6. �&� 22@ ��1� ��� �7AE8 ����
��-������ ��� �/������� ���) �&� E�����4 ��������3 ��!� �&� �����J!� -���!���
R��� !L�� ��!�)M���5���S22@��1�S22@��1�SA#2��1�SA#2S6��� 5A>2S)!���&HS:#2S
=.#2S��2S���������������!���2'����S!��������������!����'����6T���RLD� ��!�)M���
5�7A ��'&�S�7EA ��'&�S�7AE��'&�S�7EA��'&�S�7EAE��'&�S�7A��'&�S�7A�6T. ����� �&!�
�/�����!�����'3����)��!�-���!�� �!����'���)���������''�!��.7��22@��1�3�����!�
��!���-�������&������&������&��A%%%�������!��������� ���&��:=%%�������!���
��� ��*�����. (!4�J!�� ��� �7AE8 ����3 ��-������ �&����� �&�� <%% �������!��� ���
��� �� �&�� :=%%�������!��� ��� �!�������. ���� ��-������ �����!�!� )��� �&�� A%
��������!"��������)!����������!�������/������.������!� ���&�����)��!�-���!��
��!���!�3 ��� ����'��� ��-������ ��� �&�� ������ !� � C�2U( = �����!���� ��������.
��BCB�DEF�!�����)��!������'�����?�!)����������!�)��� ������)!�!��������
��!� �&�J��!�����������"���'��J!�&���"���!��?'�� ��))!� ��� �� �.
$$
��������A
&��EF�A'AB 7��J�&����� �&����� !� �&���BCB�DEF�.�&�����J� !��!���� �&� ���J��
��� ��-������ �/������� ���) �&� E�����4 ��������3 �&��� & �&� ����)���� ���
)����� �����!�� ���'�. ��� �&� ��-������ )��� �"�!����� �� ����� &�� '����� �&� :
�����!��'��������.��������&�' ������ �&��������� 5!.�.? �!)��'�� ����63 �/'���
)����������!��!�'�����)��.
A%%
��������A
7����J!� ����)��!� �!����!� 3 �������� ��� �&�� �����E�&��4�� �� �/'��� ��������
5&��������0�/'��������!��06.C���!'����! �)�������'�����)����!� �������N:.ALB#M
���)�����-����� ���'�5V?%%��-������63J&!�&�����������������������!�� ���
-���!����! �)��������)�4��&��/'��������!��������������'���!���.2�-������
�������������)�&���! �)���������)�&���������!��)����������!� '������ !�
�&�� �����!�� ������ �� ��-����!� 5!.�. �����!�!� ��"���� �����!���!��� �&�� ��� ���
��������J&�������3 7! . :63 ������ !� �&� �������!�� 5!.�. � ��-�����J!�& ���)!�
!��!����!������� ���'37! .:63&�)�'���)��� !�����!��� 57! :63)����������)!���
�������!���57! :63�����������! �)�������"������)'��)��������-������57! .:6.
�&!� �/'��� �����!�� !� �!)� �����)!� ���������!�� ������!� ���!���� ��-���������
&! &E-���!�� ��! �)����. �� ���'�!� ���!�� ����� �� �/'��� �����!��3 ���*���!"!�� ���
)!���4������)�)!�!)��.7����J!� �/'��������!��3�'��!������������5!.�.!����!���
��-������6 !�����!���!��&�����������4��'!����)��!���������-�������! !����
����� �. �&� ������!�� �� ���!��� ��-������ ���) �&� ��! �)���� ���� ��� ������ !�
�������!�����&���-�����!� !�������!�������������.�&�����3&�J�"��3�����)�"��
���) ��BCB�DEF�. W&�� �������!��� ��� )��� ��� � !"�� ��-�����3 � ��J
�� !�����!�� ��)��� !� '��"!��� �� E�����4 ��� �/�)'��. �� �&!� ����3 �&� ���������
��-�����J!��������)��!������/�������5!.�.?�'�����'������6���J!�����/�)!���
��������&��/'�����������.
F��!� �&� ��"���')��� '������3 !� ����)� ����� �&�� ��� ����)��!� �!�����J��� ���
���!� ��� ���� & �� ����!�"� ���� �����J���&� ��-������. 7�� �/�)'��3 22@ ��1� ���
'������!�����E�!4��� !���J&!�&������������&!)��!�!�����!���.������������������
!� '���!����� �!��� �� �� ��� !3 ��'��!���� J!�&!� �!�&��E���)!� ��� ! 5����)�����6.
�&������ !����!�'����'���! &�!������!��&�22@��1� ���3������/�)'�������
!��&���/��"���E����LB$M.���&��/'��������!����� �3J����!����&���&�'��!�!����
!������J���������!������� !"��!��&���'��!�����-����������!'�!��3����&��J���
A%A
��������A
����������������&���! �)�������.W&�����-����������!�!� !������J���&�����
��-����� �� � '���!����� ����3 �&!� ��-�����J�� 4�'� ��� �&� !����� !�����!��J��
��)�"�� ���) �&� ��! �)���. D�&��J!�� �&� ��-����� J�� �!������� ���) �&�
��������. �)'���!� ��� �����!�� '�!��!'���3 J� �!������� :%$% ���!�!���� �����!����
��-������3!.�.A#;���&���-�������/����������)E�����4.
7����J!� �&������!�����'�3#<=<22@��1� �����-������&�"�����������!��&�
��BCB�DEF� 5?#=# ����)�����3 :%=> ���!�!�)�����3 B>> �&���!�!�)�����3 A%:=
E��)���)�����3 ��� ?=: X� �)�����6. ��BCB�DEF����� �����!�� >?# �7AE8 ���
��-������ 5:$A ����)�����3 A<B ���!�!�)�����3 A% �&���!�!�)�����3 :=
E��)���)�����3 ��� A?$ X� �)�����6. ������� �� �&� &����� ���!�� �)�� �&�
��)�������-������'����/���)!����43����������J�J�������!)!�����)�����
��-������������&��! �)���3�&���/���)!���"��J!�&!��&�����! �)����!�"��!����
5��)!�� �� '&���) ��"��6. W� �&������� '������� � ����� �� ����� =% 0���������0
��! �)����!���.�&������!����! �)���������!�)�!���������� �&��-������3�"��!�
����3"������ ��-������J���������&���)���� �&���&���&���.�&!�J��������
4��')�/!)�)!����)��!���"�!�����.�&!�!���'��!����������������! �!� '�!)���3���
�� !"�� ������������)���)��!'����!�������!�������.
&��EF� A ( A BA G!����!���!�� �� ��-������ ������� �� �&� )����� �����!�� �����
��! �)��� 5�������N :.A6. �&� ��-������ &! &�! &��� !� ���� !��������� �/�)'��� ��
��-������ ��)�"�� ���) ��BCB�DEF�. ������"���� ��� ��)� ���) ���������
��-����!� 5�. . ��'����� �'�63 J��� �������!�� 5�. . ��-����� ������'���!� ��
����&�������63&! &��)�������������)!����������!���3'������������ !�����!���
���!������3'��������������!��������-�����!�"���!��.
A%:
��������A
A%B
��������A
)����A"�����A���������
W����! �����BCB�DEF�J!�&�'��!�!�����������!�!�������!�����.7!�����3��������
���!�� ������ ��-������ �� ���J�!� ��� !�������� �&��� & �&� &!�����&!��� ��/���)!�
�!��� �� ������������ 5E�����4 ��/���)�63 ��� �&�� ��J����� �&�) !� � 7�2��
���)���!��.�&���)�������-������������!��&���������������&��/���)!���"��!�
!"��!�����4���.2�������3����������J���������! �)����!����!� ��!�������!����
��! �)���J!�&�&� �������&���/���)!����4��-������.2'��!��������!��)�����
'�!� �� �&� ���� �&�� ��)� ��-����� �&�������!��!�� !� ��BCB�DEF� ���)�� ���
!�&��!������)�&��/�����!����E�����4��-������.7���/�)'��3 !���)������5�. .
� ���)����!��3����'&���)������)�����63!����)��!������-��������/���)�J��
�����!�������0�����40�� !�E�����4.���"�!��&�'�����)�&���&�����-���������
)!���4����'�����!�����&����/���)!� ���'3�&��J���-���!�!����0�����!���0���&�
���'&���) ���4 !� ��BCB�DEF�. 7�� �&� ��/� ��J�� ��/���)!� ���43 �� 4��J� ��
'�����) �/!���. ��"!���)����� ��-������ &�"�3 �� ���!�!�!��3 �� ����� ��/���)!�
���4!� . �&�������3 �&�� J��� ���� -���!�!�� �� 0�����!���03 ��� ���� ���!� �&� ��J���
��/���)!� ���4. �&��� ��� !)'������ �������� �� ��4� !��� ������� J&�� ��!� �&�
��BCB�DEF�.
�&!����3�������� �����&��������W:.%��! �)�����������4E�����)'������������
�� �'����!� �&�!� �J� '������� ��-������ !� � 7�2�� �� �(1 ���)�� �!��. � ������
��BCB�DEF��������J!��������&�'���!�!�!�����������&�)���!'����! �)�������5!.�.
�������W3C@2�(�YC�7���!4���6.���������3���������&�������''�������� ���'
����-���������)�'���!�������BCB�DEF���/���)!� ���'.W����!�!'����&���&!�
����J!����"������!�!���J&����)�!���J!�&'&��� ����!��������� ��� !�"���! ��!�
�&� ��-����� �!"���!�� �� ��� �� �)'�!���� ���) �� ��"!���)����� ��)'�� �"�� ��
!����!����J��� ���!��� ��.
A%?
��������A
���������AC�ACA����A��FA�����������DA��������DC�����AC��A����F��D��
����� �� � J���E��"���'�� �&�����!��� ���'��3 '&��� ��!�� ��� �� ��)'���� ��!�
��"�����!��������''����&��L�. .?%M.7��)�)��&�)��!���'�!����"!�J3�&�)�/!)�)
�!4��!&���'&��� ����!������������!��'��"!����&�����'���!����������� !"���/'�!�!�
��-������"����!��)����.�&�)���� �&������ �!�� �&���! �����-��������������
��������3 ����� ��!� �&� '�'���� C�������� L?AM. ��&!�"!� � ��� ��! �)��� !�
�&������� �� ���)������ !)'������� ��� ��� !����'�����!��. ��! �)���� �&���� ��
���!��� ��!� Z!�������� �����!��[ �&�� ����J �&� ��)�"�� �� ����!�� ����)�� ���) �&�
)���!/ 5!.�.�������!��'��!�!��J&��� �&�'&��� ����!� �! ����!����� ���) �&� ������
'&��� ����!�!����)��!����������!��&��������6L?:M.��)������)'&��!C���&���&�
��-�����E����� !����!�!���!����!� 22@��1� �������������&��'��!����"������
&! &����/���)!���"�����'���!� ���&���� �����!�!��!��.
7����J!� �&����"������� �3J�'��"!����������!��� �&���!��!"���!�����'������
�����'�. 2�-����!� �� �&� 22@ ��1� ��� ��&!�"�� �� ��� ��!� �&���!�� ���)���'
)��!��&�����&��)����)'���5�!���6.7!���3�&���! �)�����22@��1� �����-������
�� �&� �&���!�!�)����� ���) ��BCB�DEF� J�� ���� �� ���! � �'��!�!� '�!)���
)�������.�J����������! ���'�!)���J�����"��!� �&�GB���G?"��!������ !���
��� J��� ��!����� ��� '�����-����!� � �AB% 5=0�������������EE������EB06 J!�&
2�#� 5=0�����E�����E����EE���B06 )��!�!�� ���) G!� ���� ��� J��'� �
5&��'�AAJJJ.�!��� �.��4�.���A��� !A)������A'�!)���.&�)63 ��� C�:
5=0���E��EE��EE���E�EEB06L?BMJ!�&2�#�.����&�������'�!)���3�/'���������
��!"����������� !�����'��������� ���)'�!����3J��������������C�:J!�&12<�
5=0������E����E�����E��B06 )��!�!�� ���) L??M. ��!)��� �'��!�!�!�� J�� �&��4��
J!�&���)'�����)�&�����&��)���!�����)J&!�&��"������-���������&���!��J���
����!�"��L?=M.
A%=
��������A
&��EF� A * A B 22@ ��1� '&��� ����!� '��!�!��� �� ���'E��� �&���!�!�)����� 5�������
���)!����6���� J!�&�&��������4��J��������22@��1���� ����-������.��'��� �
J����!����!� C������".B.A.:52��������%.A���!)���������!���!���'���!��3B%%%%%%
������!�����)'����"���A%% ������!���6���)��������W:.A��! �)���.�&�)����
E��\�\E&���������! �������*C��������%.A.1�����''���"�������� !"��!��&�
�����J!� ������C�/!)�)����!)���AC�/!)�)(!4��!&���5���&����������J!�&��@�
?.%QA%"���!��3 =%%��������'�6AC������. �������E�����������E������� 5(?:=:#6# �
'����!"�E�����B���������3J����������� ���'.�����E�������F������5!�!����'���
����BCB�DEF�6J������������&��'��!���&�����.�����-����������!����J!�&�&�!�
E�����4������!����)����.�&���'��� !��J������ �����5�'������)���&���!���
!��!�����!��&��! ���6.��������'"�������]=%;���!��!��������&������3��������'
"�������]<%;���!�����.�&���-����������� !� ���&� $� �����E���E��� ��)!��
���!��!�����J!�&�&�!��(�2��'������� ���)�/!)�)!����!����)'�������&��&���
���'E����&���!�!�)�����D�@�.
A%>
��������A
&��EF�A*
A%<
��������A
�&�������!� ��-������5������!����)���P1$#><:A��P1$#><:B6J��������C����!�
�&�������'���!� 0���������0��! �)���!���BCB�DEF�����&���-������&�"!� �&�
&! &����!)!���!�������!��(�2��.�&�'&��� �����)'����&! &�! &���&�'����������
��J ���' J!�&!� �&� �&���!�!�)����� '&���) 57! . B6. �&� �&��� D�@� �����3 ���&
�����!�!� ��������� ��-������J!�&&! & !����!�� ��"�� 5]$#;63 ���)�)���'&����!�
���'3J&���������������!"�!����-��������)�&� ���������E�������C�&���D�@�
�����!�������J�����!��&�(�����)�����������)!��L?>M.�(�2�������&�����&���
��"!���)����� ��-����� ������ �&������E������� ��-����� �� �&� ���� &!�3 J!�& �
)�/!)��!����!����$>;.�&�J!���������(�2�E������������!�����&���"!���)�����
��-������3 J���� ��� J!�& �� ���! ���!�� �� �����E������� F������ ��
�����E������� �'. �� �������� �� �&� '&��� ����!� ��������3 J� �������� �&�� �&���
��-������ ���) � ��J ����� J!�&!� �&� (�����)��������� ��)!��3 ����!�� �&�
�����E�������3 $� �����E�� 5)�/!)�� !����!�� $B;6 ��� ������� 5)�/!)�� !����!��
$:;6 �����. �&!� �/���!�� �&�� &! &�! &�� �&� �!����'���� ���J��� '&��� ����!����
������������!������(�2���������!��.A
���DE�����
�&� ������� �� ��BCB�DEF� !� �/'����� �� '��"!�� ��)'��&���!"� ������ �� ��� ��
��-������ ��� �J� '&��� ����!�)��4��� 522@ ��1� ��� �7AE8 ����6 ����!��� ���)
����!"���� !�������3 �� J��� �� ��"!���)����� ��)'���. �� � ������ �� ���' ��-�����
�����!� 3�&���! �����-�������"�!�����!���BCB�DEF������&! &-���!��57! .A6.��
��� 4��J��� �3 �&!� �����!�� ������ � '��"!��� � ��"�� �''����& �� �&� '�����) ��
�������� '�����!��. �� ���&3 J� ���!�!'��� �&�� !� J!�� ��)'�!)��� ��&�� �/!��!�
������������&���&�R����)��!� �&�7�� ������D�(!��T'��*���5�7�D(6L?<M3@1���
LBB.?#M���C���*�CLB?MJ&!�&��������!��������� ����-������.�7�D(����J������
�� �/����� !����)��!�� ���) ����!"���� ��� �� !������� 5)��'&��� !��� ��� )��������
����6��J�������! �)��������!���������� �� �����&��&�"������������'���!�&��.
A%#
��������A
�����!������������!���� ��2!�)���'���!����&��� &�&�J��E�����EJ��4����&��
�����7 L?$M. ��!�!����3 �&� @1��� �����) �����!��� ��2 ��� �(2@A:#2 ��1� ���
��-������ ���) ���!�!�)����� ��� ����)�����. ��2 !� ���!�"�� �� �� )���
��/���)!����� !����)��!"� �&�� 22@ ��1� ��� ��-������ ��� ������!� ���'� ��
�� ��!�)��&��&�"��)�� �� Z��������[ �������������������� L=%M3�� !� �&����� ���
����)�����������!�!�)�����.��2�������������������"�'&��� ����!������!���&!'�
�� �&� �'��!�� ��"�� �� �� �&� !�����'��!�!� ��"�� L=AM. ��J�"��3 �� ��2 �!�'���� &! &
��-����� "��!��!�!��3 �"�� J!�&!� � !"�� �� ��!�) �� !� E��)���)����� L!.�. ABM3
����!�!� ���!���� ��! �)���� J!�& �&!� )��4�� ��� �� �!��!���� L=:M. �&!� !� �������
�������� ��)'��!���� ��� &!������ �� �&� ����)������ &�)�'���� ��� �&� &! &
���-����� �� !�����!��A�����!�� �"����. �&� ��� �� �&� 22@ ��1� ��-������ !�
!�������!� �!��� ��J ���'�3 J!�&!� ��� �&� ��� �� '&��� !�����!� ����)����� ���
���!�!�)�����3�������������L!.�.A3=BM.�&�C���*�C��������&�����������22@
��1� ���������������)�����&!C����� !5E��)���)�����63J!�&�����!����)�������.
�&� �/!������ �� �&��� ��������� ��� �&� '�����!�� �)�� ���� �� ��&��� �&���� ��
������� ��.����������&���))��!����&�"������������!������-������.
7�� ��� �� ��-����� �������!��� ��� '&��� ����!� !����'�����!��� �� ��� ��
��"!���)�������-������3����� �&�)�!���"���� ������BCB�DEF� !� �� ���!�!����
�&�'�!)�����! ���������-����'&��� ����!������������)'�!�������&�J�!��&�
�/�)'�����"�57! .B6.�&��������BCB�DEF���'�����)�/'������������''������
�� ��)'��)������ �� �(�2��3 �&� ������ ����J!� �-�!�4 ���4 �� �&� -���� ��-�����
'��/!)!�� ��)'���� �� �&� �"�!����� ��-������. 7��)��� �/�)'��3J� ��� �'�������
�&�� �!������� �''����� '���'&����!� ���'� )! &� ������ !� J��� �������!��. W�
���!�!'����&���&��������BCB�DEF�J!��&��'���!)!�!��������22@��1�����7AE8
������� ���������!��'��'� ��!��!���-��������������.
A%$
��������A
�C��C������AC��A�E�EF�A��F�D�����
�&� ��BCB�DEF� !� �"�!����� "!� � J��E����� !�������� ��
&��'�AA'&�)�����. �������.�� A �� �&� E��D���� �!�!����)��!�� '������) J�� �!��.
�&�J��!��������!��!"!���!���:'����.�&��!���'���3���!����R%D�����T3!������!����
���&���)!�!��������������!������!� ����'�!)!�!� �&���������.�&�������'���3
���!����R%D�&�����T3!�'���!���������!�������������.�&!�!�J&����&���J�����!� ��
��-��������!�������!�)���'���!���.7���&���BCB�DEF��������3J�&�"��������
�� �&� 22@ ��1� ��� �7AE8 ����3 !.�. ����������!� �� �&� ��� ���)��� ��))����
���� �������C� ��� ���!"���!������"����!��.W������ �&��''�����!�� ����J�����
�'��!�!� ��-������3 ���� �� ��-������ �&���� �� ����3 ��! �)��� �!��� '��'���� ���)
��������� �&���BCB�DEF����������'�����)��-�������! �)������!� �������W
:.%. �&���/���BCB�DEF� ��������J!�� !������ 5!6 �&�'��"!�!���� ��! �)��� �!��� !�
J&!�&����!���������!���!����!�!�����)!�������������!���L?:MJ!����&! &�! &���3��
�&�� ����� ��� �&�� ������ �&��� �!��� 5!!6 ��/���)!� )��!�!���!��� J!�&!�
�&���!�!�)��������X� �)�����������!���������. 5:%%<6L=?M�������� P��������.
5:%AA6 L=M. ��BCB�DEF� J!�� ����!��� �� �/'��� J!�& ��J ����. W� ��� ���������
!�"���! ��!� QE�����!�5�� A3�� !63���!�5�E�A63����1�'���)����� �������!��5�� A
��� �� !6 �� '�����!�� !�������!� ��� ���. ��BCB�DEF� J!�� ���� �� !)'��"�� ��
!����'����!� ��� �&� �!�!�&����� �� ���)���"�!�����3��� !������!� �&��!"���!����
�������'�����))���!'����! �)����.
D+��"�����%����
W��&��4�&�E��D�����!�!����)��!���������!�!��.
,���F��D��
LAMG�����4����&�����3�������2(3(��"���32����C�4P3B��� P�W5:%%:�6.�/����!"�
��� ���!"���!��!�'���������.2�!����:$=�:%=A.
AA%
��������A
L:M���"!��3�������5:%%%6E���!� �&�)���������!��!"���!��.1�����?%=�:A:E:A$.
LBM������ PW3 P�������FP3F��4��23F��� ��3E�!���FC5:%%%6�&��� ����!��'��!��
���� �!�!������'��!�������'�!���� !.7�� E�����!��BA�:AEB:.
L?MG�����4����&���� �3 ������� �3 F��!��� �P3 W����� �P3 F��4 PC �� ��. 5:%%:�6.
����������)�����&!C�� ��))��!�� ��)'��!�!�������!����J!�& �J�'���� �'��!��
!�� ����������������).C������AA�A===EA=>?.
L=MP����3CFC37���3 �3E����&�3�3� ��3CP3����3F3����. 5:%AA6F!���"�������"��
!����)��!������)������!����&���� ���������!��.1�����?<?3:%%^:%B
L>M��J���P�3C��� &��C�3_'!4C3�!��! C�5:%AA6�"����!�������!���!����'�����)
�'����!���� �''����&�� !� '�����!� ����� !����� ����"��� ��� �� �'��!��
!�"�����!��.C������������� �:%�>==E>>>.
L<M��J4�J���&F(3����)���B5A$$<6W&����������&��������!������ !`�&���'��&
#<�###E#$A.
L#M����4J���C5:%AA6�&�7�� !�A3:3Ba=.A)!��!���'��!��`�)P���$#�?:>E?B#
L$MW������5:%%%6�����'���!� �&���!"�����'&��� ����!�����.����1�������2�!@2�
$<�#B$:E#B$>.
LA%M����1�5:%%$6C�''!� �&�������(!������ �����������'����.C!����!��� ����
C���!����"<B�=>=E=<>.
LAAM�&�!�E3F!)2�5:%%<6E������/������&��!C����� �����������.����1�������2�!
@2�A%?�??#$E??$?
LA:M���� �3 X!))��)�� �O (�� �73 �!*�!3C 5:%A%6 �����E!������ ���)� "��!��!�� !�
����������)�����&!C����� !'���!���!��&��������!'��)�.P�"���!��:B�A=A$EA=:<
LABM2��������3���C3E��''�F3�������3W!�)4���5A$$=6�����!�!���!�����!����)��
F1� '���)��'&!�)� �)�� ���J!�&!� �'���� �� �&�E��)���� E �''�!���!��� ��
��������&� ����!��!"���!��������������C�����&!C�� ��� ����))��!�!��.1�J
�&����AB%�?A$E?:<
LA?M (!) BW3 2������4 �3 (��� �3 �����J F3 B�)� ��&! �3 ����!� � 5:%%#6 F!��!� �!�&!�
AAA
��������A
&�)�4���������&�����4������!��&���!������'&����������!� '�!�!� ��������
��2'���)��'&!�)�.�����!�"��(���J��&��4$B�$$EAA%.
LA=M������F�3F����&EC!C���&!�3(!')��FP3D�����P32������W5:%AA6E�����4.1���
��!�����B$�FB:EFB<
LA>MF��!4�"��3�4&����3���������3���&��'�13���������C3����. 5:%%<6�&��C�(
�������!����-�������������!�:%%>.1�����!�����B=�FA>EF:%.
LA<MF�)!��)��3F��� ��3F���)�B3�����3C��&!)�P����. 5:%AA6FF�P'�� ����
��'���.1�����!�����B$�F::EF:<.
LA#M�"!�� P� 5:%%?6 C�������� C��4���3 1������ �!�����3 ��� �"����!��. 2���������3
C�����&�������2!����������!����.
LA$M������� 2( 5A$$$6 � �����& ��� �&� ��! !�� �� ��!)��� ��� 7�� !� ��)'��!� ���
��)�!�!� )������������.�)1��A=?�2A<#E2A##
L:%M�������2(3�� ���P3W��4E2!������3F���!���W75:%%%6�4!� ��)E��"��'&��� ���
����4����������������)�!���'����!�����.2�!����:$%�$<:E$<<
L:AM��� ���� �3 W����� �P3 B��� P�W 5:%%B6 �&��� ��� �� �&� E��)������ ���
F!"���!�'������ 57�� !� E��)���)�����6 ���) ���!� ��� ���� ��!�� ������ AE��'&�
��-������.7�C2C!����(��::$�A:<EAB:.
L::M������� 2(3 ���)�� PF 5A$$B6 ��!)��� ��� ��� ! ��� ���& ��&��� ������� �����!"���
��� ����� �"!����� ���) )���!'�� '����!��. ���� 1��� ���� 2�! @2� $%� AA==#E
AA=>:
L:BMC����F3C!����D3P�������@32�&�����(5:%%:6�&��"����!�������! !�����&���
��J 1����'&��!�) ����'&��� �'��!�� ���) ������ !��! ����� �� �&� 2���&���
��)!�'&���.C����� !�$?�>$?^<AA.
L:?M������B3 2�!4�J�C3W�������CC3 2� !��)� P 5:%%?6.C��������'&��� �����
X� �)����� ����� �� �7EA8 ��� ���A ��-������� �!)!���!��� ��� ��!�!�� ��
��������!"�)��4������F1�.C���&���"��B%�?B#E??$.
L:=M�!��������C�5:%%#6������"!� ��������!�E�����4.2�!����BA$�A>A>
AA:
��������A
L:>M��!� � �F3 ������� �P3 2'����� �C3 ����&�� E 5:%%B6 D� �&� �����!��!�!�� ��
'���!�&��F1���-������.1�J�&����A>%�?BE?#
L:<MG!� �����5:%%B6��/���)!�)!�!����!�!���!��!�'���!�F1����������.1�J�&����
A>%�?E=.
L:#M��!� ��F32'������C3��������P5:%%?6���!��!�!����������'���!�&����-�����
����.1�J�&����A>A�A=EA<
L:$M��J4�J���&F( 5:%%?6 0C!�!����!�!���!��0 !� ��� ��F1���-������������4�.1�J
�&����A>A�ABEA=.
LB%M��J4�J���& F( 5:%%$6 2�'����� ��)� ��� ��� ��0� ��/��� ��� � )�� �����
������!��.1�����?=#�:$.
LBAM�����EP������3G�b������32�&�)��&���5:%%?6D����!��!�!��.1�J�&����A>A�AAE
AB.
LB:M1!����� ��3 ����� C3 F�!��!������ �3 ������4�" F3 (������ F� �� ��. 5:%%>6
��/���)!� ���!��!�!�� �� F1� ��-������ !� '���!� ��-����� ���������� � ��� ��
'���'���!"�.���2D��A��=$.
LBBMFc�*�� @3(������F�3������4�"F31!�������3���/������P3����.5:%%=6@1�����
�������� '��"!�!� J��E����� )��&��� ��� �&� )�������� !����!�!���!�� ��
����)�����&!C����� !.1�J�&����A>>�A%>BEA%>#.
LB?M_'!4C3G�������3G�������3C����C3F�"!���P����.5:%A%6�&����!����������
C���*�C ��"���� ����� ��� ��������)!� �!���!���!�� '������� !� ����������
)�����&!C����� !5E��)���)�����6.1�J�&����A##�::BE:?A.
LB=M���� P�3W�� U3���������37!�& P3�&�!�3����. 5:%%$6�&��!����)��F�������
���*���� �)'��"����! �)���������J����� ��� ��1�������!�.1�����!�����B<�
FA?AEFA?=
LB>M��������3U�����3F�!����F37��&��C3(��J! W35:%%<62�(G�����)'��&���!"�
���!�� �������� ��� -���!�� �&��4�� ��� ��! ��� �!����)�� �1� ��-����� ����
��)'��!���J!�&���.1�����!�����B=�<A##E<A$>.
AAB
��������A
LB<MF�2���!��X3�� ��&���C�3(�����13��*��C3����!��(3F�����F3������3F���"!F3
�� �3 �������� E( 5:%%>6 E���� ����3 � �&!)���E�&��4�� A>2 ��1� E���
F����������W��4����&��)'��!���J!�&���.�''���"C!����<:�=%>$E=%<:
LB#M(��4!�C�3����4�&!����E3���J�1�3�&�����3C�E���! ��������.5:%%<6�������
W����������N"���!��:.%.�!�!����)��!��:B�:$?<E:$?#.
LB$M�&�����&����F37�!����3���)�E5:%%:6G���!����"����!�����!���� ��!��'������
�!�&��E��� �� ���'�!�����.PC���"��==�<?E#?
L?%M7��������!� P 5:%%?6 ������!� '&��� ��!��. 2!����� �����!����3 2���������3
C�����&������.
L?AM������F3��������F� 5A$$#6CDF�(��2�� ����!� �&�)������F1������!���!��.
�!�!����)��!��A?�#A<E#A#.
L?:M���E��� �3 C��!������� C3 ������� C�3 G�����4����&���� � 5:%%#6 ���������
�����!�����������'&��� ����!������������!���.C���!���"��:=�#>$E#<B
L?BMG�����4����&�����3(��"���5A$$#622@�F1���-����!� ������E�!� ��'�!��!�
��"��� ����!�"��!��!��J!�&!�E��)��)�����.C����� !�$%�<$AE<$<.
L??MW&!�� �P3 ����� �3 (�� 23 ������ P 5A$$%6 �)'�!�!���!�� ��� �!���� ��-����!� ��
��� ���!����)���1� �������'&��� ����!��.������!�C�3E������F�32�!��4�PP3
W&!�� �P ��!����. ���'��������3 � �!�� ��)��&��� ����''�!���!���. 2��F!� �3
���!����!������)!������''.BA=EB::.
L?=M(� ���"�C �3 ��� ��� E3 C�&, 23 ����!�� E3 G�����4����&���� � 5:%%$6 7�� ��
�!"���!��!����'E���&�����&��)����������)�.�''���"C!����<=�>?A=E>?:A.
L?>M2!))���F�3P�)���B3C�����73(�� ����P�5:%%$6(�����)��������3���J�����
!��&��&���!�!�)�����.C����� !������AAB�?=%E?>%.
L?<M(��C��!73F����73��/�P3C�(�� &�!�F3���!�E3����.5:%%?6����)��!� �&���� ��
������ �!���'�� ����3 �����!�!���!��3����"����!���� ����������� ���!��.�)��!��� P
���$A�A??>EA?#%.
L?#M������4�"F31!�������3(������F�3���/������P3����&����@3����.5:%A%�6.�&�
AA?
��������A
@1��� �������� ���)�������� !����!�!���!�� �� ��� ! E ������ �'����� ��� ������
'���'���!"��.1�J�&����A#>�:#AE:#=
L?$M������4�"F3��������(31!�������3G����4F32��� �3����. 5:%A%�6�����7E�W��
����� W��4����& ��� ����� !��� ��� ��/���)!� �������&3 J!�& �� D��!��
�)'��)�����!�����7�� ����22�-������.�"���!�!����)��!��>�A#$EA$>
L=%M����������3���4!���5:%%<6.F�����!�������!"���!���� !����E����)'�!�!���!��
��'����������1�)��������.PC!����C��&>#�:?#^:=B
L=AMN��3���B3W�P3("�3U!�(����.5:%%<6�&��� ����!�������!����&�2�-��������
�F1� ���������������!���2'���� 5��26���&���'&�&�����*��. PE����E���)B?�
A#%EA##.
L=:MF[���!� E3 ���&4�� �3 ����! ��CEG����� 7 5:%%>6 �W��2 �����C!� �!����)��
!���� ��!� �������!��� �'����� ����! ����!�� ��� ��/���)!� �����!���&!'�.
�!�!����)��!��::�=:<^=BA
L=BM����F3��J��3���J�13�������3F�)!��"�C����.:%%<.B�������)���)!����
��� ���!"���!��!��&����'������.���������2���:<?�B%>$EB%<<
L=?M�!�����F23�!����C3�!��&���P73����4J���C3�������7����.5:%%<6�&! &��E��"��
'&��� ����!������!�!���!�����&�7�� !.C�������AAA�=%$E=?<.
AA=
��������A
AA>
��������A
��������A
BCDEF����������
�D�������F����������F�����������
��
��������A
��!
��������A
��F�����A
BCDEF�����������D�������F����������F�����������
����� "�C�� ��� FD�"���C�� # ��D ��F�F�� �� ��$��% &�C� F��D� ������ �� �'�D�"E��� FC
�FDC����� �� ��$�� �F� ('F� ��D���)C" # ��**"��D��� "�F��� �� �F �"F���F���D ���� �'CD ��D��F�
�'�DE"D��C��'"�C��% ��D��+ ('F� �F������"# �FE"D"�F���D����",C�D����D����DD���D�F���+ FC-
FDF����������E"D"��,C����#�F�"�F����D�C�FDC�����%.���C�+����"�C��F��,C��D�"�"�)��DC�
��D�#�'���E�D�������F�F������$��%
/� ������� �D��D�F��� ��� ��F���ED�D� �FD� ��� "������$��� ����������FC- �F��D�
���*�D�� F "�" �)��DC �F� ����� "�C��% /F ��������" *�DE�,C� F "�" "�C��"� �D FDF���FD� ���
�",C�D����CE$D����'��&��!0F����*�"���F�����C��C����D�"��D�FD��#�F�����'�.&�-��F��
�'"��FD�����D�����������FC-�������C�����)��DC���F��F�����D�C��C��%&����F�FC-�D�
�"�"�"CD���������"�D��C�1�DD"��'���$���F��F���DFD�#����������D,����F*�DE�,C��%�F���
��������+����",C�D������������DDFD��F��������������������F�D�"�"F����*�"������D���CD�
�����E�D�� �F�,C"� F��� ��� ���$��� �"������% �D*�D+ CD� ����C����D �C� �F �������*��F���D ���
��F���ED�D��D�����C�F��D���������"�%
��2
��������A
�A3
APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, Oct. 2009, p. 6415–6421 Vol. 75, No. 200099-2240/09/$08.00�0 doi:10.1128/AEM.00653-09Copyright © 2009, American Society for Microbiology. All Rights Reserved.
Fungal Diversity in Deep-Sea Hydrothermal Ecosystems�†Thomas Le Calvez,1 Gaetan Burgaud,2 Stephane Mahe,1
Georges Barbier,1 and Philippe Vandenkoornhuyse2*
UMR 6553 CNRS ECOBIO, FR/90 IFR 2116 CAREN, Universite de Rennes 1, Campus de Beaulieu, 35042 Rennes Cedex,France,1 and Laboratoire de Biodiversite et Ecologie Microbienne (EA 3882), Universite de Bretagne Occidentale,
ESMISAB, Technopole Brest Iroise, 29280 Plouzane, France2
Received 19 March 2009/Accepted 18 July 2009
Deep-sea hydrothermal ecosystems are considered oases of life in oceans. Since the discovery of these ecosystemsin the late 1970s, many endemic species of Bacteria, Archaea, and other organisms, such as annelids and crabs, havebeen described. Considerable knowledge has been acquired about the diversity of (micro)organisms in theseecosystems, but the diversity of fungi has not been studied to date. These organisms are considered key organismsin terrestrial ecosystems because of their ecological functions and especially their ability to degrade organic matter.The lack of knowledge about them in the sea reflects the widely held belief that fungi are terrestrial organisms. Thefirst inventory of such organisms in deep-sea hydrothermal environments was obtained in this study.Fungal diversity was investigated by analyzing the small-subunit rRNA gene sequences amplified byculture-independent PCR using DNA extracts from hydrothermal samples and from a culture collectionthat was established. Our work revealed an unsuspected diversity of species in three of the five fungalphyla. We found a new branch of Chytridiomycota forming an ancient evolutionary lineage. Many of thespecies identified are unknown, even at higher taxonomic levels in the Chytridiomycota, Ascomycota, andBasidiomycota. This work opens the way to new studies of the diversity, ecology, and physiology of fungi inoceans and might stimulate new prospecting for biomolecules. From an evolutionary point of view, thediversification of fungi in the oceans can no longer be ignored.
Since the discovery of hydrothermal vent ecosystems 30years ago, unexpected species diversity has been revealed thathas shed light on the functional coupling between the geo-sphere and the biosphere. When submersibles dive to the sea-floor, they bring numerous organisms back to the surface, andthis has resulted in the description of nearly two new speciesper month (10). Deep-sea hydrothermal ecosystems are con-sidered hotspots of microbial diversity on the seafloor. Indeed,they are ecosystems that produce biomass using the wide rangeof chemical compounds released by the polymetallic sulfitechimneys or “black smokers” that represent the huge quantityof chemical energy that is available (26). The vent fluid, havingbeen heated close to a magma chamber, can have a tempera-ture of 400°C when it is emitted. It is also characterized by alack of dissolved oxygen, strong acidity (pH 2 to 3), a highconcentration of electron donors (i.e., reduced compoundssuch as methane and hydrogen sulfide), and the presence ofheavy metals (36). Continual mixing with the cold ocean water(2 to 4°C) that is rich in electron acceptors creates a dynamicchemical disequilibrium that is a source of energy for micro-organisms that control the rates of redox reactions (16).
Each ridge displays varied geochemistry, and the vent fluidsdiffer, even at scales as small as the fractures, pipes, and po-rosities in the black smokers, creating diverse microhabitats forbiota (10, 16, 26). Microbes have colonized these different
microsites; an impressive diversity of Bacteria and Archaea
species has been described, and even more diversity has beeninferred. Some organisms are chemolithoautotrophic primaryproducers and are at the base of the trophic web in thesehabitats. In addition to these key microorganisms, other pri-mary producers, like the photosynthetic green sulfur bacteria,reportedly are able to harvest energy from geothermal radia-tion (3). The organic compounds produced by the primaryproducers are consumed by heterotrophic microbes and ani-mals through symbioses, filtering of free-living microorgan-isms, or grazing of biofilms.
A comparison of hydrothermal vent cycling of carbon withthe carbon cycling in terrestrial ecosystems suggests that keyorganisms in hydrothermal vents, the fungi, have not beenstudied yet. Contemporary organisms living in land ecosystemsare well adapted. However, the first colonizers of land faced aharsh physical environment (29). Thus, it has been suggestedthat early colonization of land was possible only when therewas a macroevolutionary jump (i.e., acquisition of multiplecompetences during a single evolutionary step) (24, 29). It hasbeen suggested that establishment of eukaryotes on land mayhave been possible only as a consequence of the association ofa fungus and a phototroph (24, 29). The earliest known fossilfungus (460 million years) was thought to form arbuscularmycorrhizae (27). The idea that the colonization of land wasmade possible by this symbiotic association is supported thefindings of Simon et al. (31). Based on molecular clock esti-mates, some authors have suggested that fungi appeared a longtime before Devonian land colonization. The major radiationsin the fungi may even have appeared during the Precambrian(1,460 to 960 million years ago) (13), 300 million or more yearsbefore colonization of land. These analyses are currently under
* Corresponding author. Mailing address: UMR 6553 CNRS ECOBIO,FR/90 IFR 2116 CAREN, Universite de Rennes 1, Campus de Beaulieu,Bat. 14a, 35042 Rennes Cedex, France. Phone: 33-2 23 23 50 07. Fax: 33-2 2323 68 28. E-mail: philippe.vandenkoornhuyse@univ-rennes1.fr.
† Supplemental material for this article may be found at http://aem.asm.org/.
� Published ahead of print on 24 July 2009.
6415
discussion because of the absence of fossil evidence to supportthe conclusions and because of possible bias in the molecularclock estimates (34). However, assuming that the protein esti-mates are correct, it could be hypothesized that fungi emergedand diversified in water before they colonized land. An ances-tral characteristic, a flagellated gamete without a wall, is foundin old lineages of fungi. This is generally considered an advan-tage for dispersal and reproduction in water. The loss of fla-gella in fungi appears to have occurred in a single evolutionarystep (20) and has been used as an argument to support thedogma that higher fungi diversified on land before a secondarycolonization of water ecosystems, assuming that some terres-trial fungi secondarily invaded salt marshes and mangroves andadapted to life in salt and brackish water. It is a common beliefamong ecologists, microbiologists, and mycologists that fungiare found (almost) exclusively on land. A recent study showedthat the loss of flagella may have occurred at least four timesduring fungal evolution (15), which suggests an evolutionaryparadigm that is more complicated than previously thought.Despite the view that fungi diversified in terrestrial ecosystems,chytrids are considered primarily aquatic fungi. Furthermore,cultural approaches have resulted in the identification of asmall, ecologically defined group of marine higher fungi thatincludes filamentous ascomycetes, their anamorphs, and yeasts(17). We advocate an alternative hypothesis for the loss offlagella. It can be proposed that the loss of motile gametes infungi was compensated for by the resistance and long-rangedispersal of spores. We suggest that this evolutionary innova-tion in eukaryotes should have led to colonization and long-term persistence in many new environments, including land,even if the primitive transition of fungi to terrestrial lifecould have occurred without the previous loss of flagellatedspores. From the molecular clock predictions (13) and par-tially in agreement with our computations (P. Vandenkoorn-huyse, unpublished data), we suggest that this evolutionaryevent might have occurred approximately 1,200 to 1,000million years ago and, therefore, in oceans. If this is true, wewould expect to find a large variety of fungi, including fungiproducing nonflagellated spores, in oceanic samples even inisolated habitats.
Consequently, the main aim of the present work was to testfor the presence of fungi in deep-sea hydrothermal ecosystemsby establishing a culture collection and using a culture-inde-pendent approach involving direct amplification of the fungalsmall-subunit (SSU) rRNA gene from environmental samplesand then analysis and evaluation of the diversity of the fungi inthese environments. The deep-sea hydrothermal ecosystemwas an interesting target to test our hypotheses for variousreasons. First, it has been suggested that the hydrothermalecosystem is the “cradle of life” (14, 18, 39), although morerecently it has been shown that life emerged first in a meso-philic environment and diversified in thermophilic conditions(5). Second, hydrothermal conditions were very common dur-ing the Precambrian (28). Third, use of general eukaryoticprimers to perform culture-independent PCRs (ciPCRs) hasled to the detection of fungi close to hydrothermal vents pre-viously (21, 22). Fungal sequences have also been detected indeep-sea anoxic sediments (2, 8, 9), and barophilic fungalstrains have been isolated from this environment (7).
MATERIALS AND METHODS
Studied sites and sampling. Samples were collected during the following two
oceanographic cruises: (i) HERO (30 September 1991 to 4 November 1991) on
the East Pacific Rise at the Elsa site (12°48�N, 103°57�W; depth, 2,630 m) and (ii)
MARVEL (29 August 1997 to 13 September 1997) on the Mid-Atlantic Ridge at
the Menez Gwen site (37°51�N, 31°31�W; depth, 860 m) and Lucky Strike site
(37°17�N, 32°16�W; depth, 1,700 m). Deep-sea sampling was performed using
DSV Nautile. The support research vessels were R/V Nadir for the HERO cruise
and R/V Atalante for the MARVEL cruise (www.ifremer.fr/fleet//index.php).
Animals and rocks were collected using sampling boxes, washed on board,
disinfected with ethanol, and filled with sterile seawater. All the boxes were
waterproof to prevent contamination from the water column during ascent. They
were opened for sampling during dives and then closed and placed in the
insulated crate of the submersible to maintain a low temperature until subse-
quent examination on board.
Sample preparation and fungal cultures. On board in the lab, sterility was
obtained with a Bunsen burner and a vertical laminar flow hood. Solid samples
were removed from the container with sterile strips, placed on a sterile petri dish,
rinsed well with sterile seawater, and then crushed with a sterile pestle and
mortar. After this, the samples were aliquoted and preserved by deep-freeze
storage (�80°C) until they were used.
During the HERO cruise, Sabouraud chloramphenicol solid medium (AES
Laboratory) was used for aerobic enrichment cultures incubated at 30°C with
atmospheric pressure. During the MARVEL cruise, five solid culture media
were used. Ac medium contained (per liter) 5 g potato starch (Sigma), 0.5 g yeast
extract, 1 g peptone, 30 g sea salts, and 6.05 g piperizine-N,N�-bis(2-ethanesul-
fonic acid) (PIPES) buffer (Sigma). The starch was replaced by 5 g cellobiose
(Sigma) in Cc medium, by 5 g glucose (Sigma) in Gc medium, by 5 g arabic gum
and 5 g olive oil in Lc medium, and by 5 g xylan oat spelt in Xc medium. Pc
medium contained (per liter) 9 g brain heart infusion (Difco), 23 g NaCl, and
6.05 g PIPES buffer. The pH was adjusted to 7.5 with 4 N NaOH. The five media
were supplemented with (per liter) 15 g agar and 500 mg chloramphenicol.
Cultures were grown aerobically at 25°C (ambient temperature) and atmospheric
pressure. Finally, all strains were able to grow on GYPS medium containing (per
liter) 1 g glucose, 1 g yeast extract, 1 g peptone, 1 g starch, and 30 g sea salts. Pure
cultures were obtained and kept in a culture collection by continuous culture and
then freeze-dried at �80°C. More details about sampling and cultures are avail-
able in a recently published paper (6).
Extraction of DNA. Each sample was homogenized with sterile glass beads and
ground for 28 s at 30 rpm in a bead beater (MM 301; Retsch). Different methods
of DNA extraction to obtain amplifiable fungal DNA were tested. The method
chosen was an DNeasy Plant mini kit (Qiagen) used according to the manufac-
turer’s recommendations. DNA was extracted from cultivated strains with a Fast
DNA Spin kit (MP Biomedicals).
Cloning and sequencing. The fungal SSU rRNA genes were amplified by PCR
using primers MH2 (5�TTCGATGGTAGGATAGAGG3�) and MH4 (5�GTCT
CACTAAGCCATTC3�) (37) for environmental sequences and primers NS1
(5�GTAGTCATATGCTTGTCTC3�) and ITS5R (5�CCTTGTTACGACTTT
TACTTCC3�) primers for cultivated strains (40). The AU2/AU4 primer set (38)
did not amplify any of the samples analyzed. DNA was amplified by touchdown
PCR with the initial step at 94°C for 1.30 min followed by 37 cycles of 94°C for
30 s, 48°C for 1.25 min (with a 0.1°C decrease at each cycle), and 72°C for 1.5
min. The PCR amplification program ended with a final elongation step at 72°C
for 10 min. For the samples which did not yield any product we used a primer set
modified from the primer set described by Smit et al. (32), EF3 (5�TCCTCTA
AATGACCAGTTTG3�) and EF4 (5�GGAAGGGNTGTATTTATTAGAT3�),
and the same PCR conditions except for the annealing temperature (53°C in-
stead of 48°C). For these ciPCRs, a dilution of a soil DNA extract and DNA-free
water were used as positive and negative controls, respectively. The amplification
fragments were purified with a High Pure PCR product purification kit (Roche)
and were cloned in the pGEM-T vector (Promega) and DH5� competent cells
(Gibco BRL Life Technologies). For each clone library, 16 to 120 randomly
selected positive clones were sequenced (ABI-PRISM Dye Terminator cycle
sequencing Ready Reaction kit; Perkin Elmer) on both strands using primers T7
and SP6 for environmental sequences and primers NS1, NS3 (5�GCAAGTCT
GGTGCCAGCAGCC3�), and ITS5R for the culture sequences (6). The contig
of the two sequence strands was calculated using Sequencher 4.6 (GeneCodes),
and alignment uncertainties were checked manually. Chimeric artifacts were
deleted from the data set using CHIMERA_CHECK 2.7 (http://rdp.cme.msu
.edu/html/analyses.html; Ribosomal Database Project).
rRNA fungal database. A fungal SSU rRNA gene database was created so that
the detected sequences could be analyzed (http://phymycodb.genouest.org/). Al-
6416 LE CALVEZ ET AL. APPL. ENVIRON. MICROBIOL.
gorithms were used to recover SSU rRNA gene sequences for each fungal
phylum from the GenBank/EMBL/DDBJ databases. Filters were used to elim-
inate the sequences that were too short (�1,000 bp), too long (�2,500 bp), or of
poor quality or that included at least 10 consecutive undetermined nucleotides
(T. Le Calvez, L. Guillot, A. Dufresne, and P. Vandenkoornhuyse, submitted for
publication). A multiple-sequence alignment was constructed for each phylum
using Clustal X 1.81 with a matrix containing all sequences from our databases
and our hydrothermal sequences.
After using this protocol and completing the various analyses, we were able to
recover 1,733 sequences from Basidiomycota, 215 sequences from Chytridiomy-
cota, 4,117 sequences from Ascomycota, 292 sequences from Zygomycota, and
621 sequences from Glomeromycota, which represented all the different branches
of fungal phylogeny. Each phylum was then subjected to a multiple-sequence
alignment procedure, followed by neighbor-joining analyses. Phylogenetic trees
were visualized by using Treeview 1.6.6. The phylogenetic neighbors closest to
the environmental sequences analyzed were selected, and then phylogenetic
analyses were performed (see below).
Diversity and phylogenetic analyses. Rarefaction curves were computed for
each sample. The number of species was determined for 100 random combina-
tions of 1 to n sequences by using 100 bootstrap pseudoreplicates (http://viceroy
.eeb.uconn.edu/EstimateS) implemented in EstimateS. A multiple-sequence
alignment procedure was performed using CLUSTALX 1.81 (35), and the align-
ment was refined by eye. This analysis included our environmental sequences,
sequences from the fungal cultures isolated, and the most relevant representative
SSU rRNA gene sequences of the Chytridiomycota, Basidiomycota, and Ascomy-
cota (93 sequences, including 18 representative environmental sequences and 26
sequences from fungal cultures). The alignment was performed with 1,145 nu-
cleotides as described above. Other multiple-sequence alignment methods tested
gave similar results (not shown). Phylogenetic analyses were performed as fol-
lows. CLUSTALX 1.81 was used to obtain neighbor-joining (NJ-K2P) phylo-
genies with distance correction, gap omission, and 1,000 bootstrap pseudorepli-
cates. PAUP 4.0�10 was used for maximum parsimony analysis using a heuristic
tree search with 500 random-addition replicates and with tree bisection and
reconnection as the branching algorithm, with each of the 500 bootstrap itera-
tions utilizing 10 random-addition replicates and tree bisection and reconnection
branch swapping. In addition, the data were analyzed using the ML-GTR � I �
G procedure with 100 iterations. Modeltest 3.7 software (25) was used to select
the model.
After these analyses were performed, phylotypes were specified using a cutoff
of 98% (pairwise distance computed using PAUP 4.0�10).
Quantitative PCR (qPCR) assays. PCRs were performed with 10-�l (final
volume) mixtures using iQ SYBR green Supermix (Bio-Rad), which contained
SYBR green PCR buffer, 2.7 �M dATP, 2.7 �M dTTP, 2.7 �M dGTP, 2.7 �M
dCTP, and 0.42 U of iTaq DNA polymerase (Bio-Rad). Then 0.35 �M primer
MH2 (5�TTCGATGGTAGGATAG3�) and 0.35 �M primer FungqPCR1 (5�T
GTCGGGATTGGGTAATTT3�) were added to the mixture.
All reactions were performed in optical tubes (Bio-Rad); 8.5 �l of the master
mixture was added first, followed by 1.5 �l of template. The tubes were sealed
with microseal film (Bio-Rad). All reactions were performed with a Chromo 4
thermocycler (MJ Research), using an initial denaturation at 94°C for 3 min to
activate the enzyme, followed by 35 or 40 cycles of denaturation at 94°C for 30 s
and annealing-extension at 48°C for 45 s and then by plate reading. The disso-
ciation curve for temperatures from 65°C to 95°C was measured after the last
qPCR cycle. All data were analyzed using Opticon Monitor 3 (MJ Research).
This approach was used to study six samples in triplicate in two independent
runs. The three samples which exhibited the strongest signals in two preliminary
runs were compared in a final run. Seven different plasmid concentrations (109
to 103 copies in 1.5 �l) were used to construct a standard curve for absolute
quantification. The numbers of copies in the standards were calculated using the
following formula: molecules/�l a/(plasmid length 660) (6.022 1023),
where a is the plasmid concentration (in �g/�l), 660 is the average molecular
weight of one base pair, and 6.022 1023 is the molar constant.
Nucleotide sequence accession numbers. The sequences reported in this
paper have been deposited in the GenBank database under accession num-
bers EF638466 to EF638515 for sample MV2E1, EF638516 to EF638564 for
sample H18E12, EF638565 to EF638614 for sample MV2E2, EF638615 to
EF638636 for sample MV2E3, EF638637 to EF638654 for sample MV5E1,
EF638655 to EF638686 for sample MV5E2, and EF638687 to EF638706 for
cultivable strains. The matrix is available upon request from the correspond-
ing author.
RESULTS
Diversity of the culture collection. Cultivation and isolationof microbes (Bacteria and Archaea) from deep-sea hydrother-mal samples are difficult, and the procedure includes manyconstraining manipulations. Nevertheless, we were able to es-tablish a fungal collection with different samples from severalsites without using complex culture procedures, such as pres-surized fermentors (see Materials and Methods). The fungiwere isolated using a classic medium supplemented with seasalt at a pressure of 1 atm and 25°C. Physiological analysesdemonstrated that the strains were able to grow in deep-seasalinity (3% [wt/vol] NaCl) and at low temperatures (6). TheSSU rRNA gene sequence analyses revealed that all 21 isolatesin the collection belonged to the phylum Ascomycota, as didpreviously isolated marine strains (15). A subset of the culti-vated Ascomycota belonged to the classes Dothideomycetes
(Fig. 1, phylotypes 14 to 16) and Sordariomycetes (Fig. 1, phy-lotypes 17, 18, and 20), and at least one new undescribedphylotype belonging to each of these groups was discovered.Black yeasts were also detected, including two phylotypes ofExophiala (order Chaetothyriales) (Fig. 1, phylotypes 10 to 13),a group that includes pathogens and saprophytes. In a recentstudy, black yeasts were identified in mussel tissues present inhydrothermal samples from the Fidji Basin, where they ap-peared to be mussel parasites, possibly regulating the trophicchain (37). Finally, one phylotype was obtained from culturesthat clustered with the mitosporic Ascomycota (Fig. 1, phylo-type 19), which have been described as “common” pathogenicfungi in tidal seawater (4, 30). As expected based on previousinformation, the spores produced by the cultivated isolateswere not flagellated, even though some isolates appeared to bespecific to the oceanic habitat (for details about the culturecollection, physiology, and morphology, see reference 6).
Fungal diversity determined by a culture-independent ap-
proach. We investigated the fungal SSU rRNA genes fromenvironmental samples (Table 1) directly amplified by ciPCRsusing fungus-specific primers. A customized database was con-structed to analyze in depth the SSU rRNA gene sequencesdetected. This database contained all available fungal SSUrRNA sequences that passed filters for length and quality (144Chytridiomycota sequences, 266 Zygomycota sequences, 418Glomeromycota sequences, 2,327 Basidiomycota sequences,and 4,270 Ascomycota sequences), and there was at least onerepresentative of each known fungal genus in the GenBankdatabase. All of these 7,425 sequences, which represent thewhole fungal tree of life, were used to determine, with highconfidence, the phylogenetic affinities of the new sequences. Asecondary matrix of sequences was then constructed usingthese computations along with BLASTn analyses (1), whichincluded the closest relatives of the environmental SSU rRNAsequences analyzed (for each phylum, neighbor-joining phylo-genetic trees obtained using the entire data sets are shown inFig. S1, S2, S3, and S4 in the supplemental material). A totalof 20 distinct phylotypes were detected using the ciPCR resultsand the fungal culture collection (Fig. 1). The ciPCR resultsrevealed previously unsuspected diversity of fungal phylotypesin the vent ecosystems; there were nine distinct phylotypes, fiveof which were new at the genus level or a higher taxonomiclevel in the Chytridiomycota (Fig. 1, phylotypes 1 and 2; see Fig.
VOL. 75, 2009 DEEP-SEA HYDROTHERMAL FUNGI 6417
FIG. 1. Phylogenetic positions of deep-sea hydrothermal fungi. This consensus tree includes environmental SSU rRNA sequences isolated fromenvironmental ecosystems (phylotypes 1 to 9) and isolated cultures from the same samples (phylotypes 10 to 20), along with the closest knownrelated SSU rRNA fungal sequences. The tree was constructed using the neighbor-joining algorithm. Bootstrap values of �50% are indicated atthe nodes (estimated using 1,000, 500, and 50 iterations for the neighbor-joining [NJ], maximum parsimony [MP], and maximum likelihood [ML]analyses, respectively). Stars indicate the phylotypes considered new phylotypes. The scale bar indicates 0.1 change per position computed using
6418 LE CALVEZ ET AL. APPL. ENVIRON. MICROBIOL.
S4 in the supplemental material) and Basidiomycota (Fig. 1,phylotypes 3, 4, and 9).
On the one hand, the Basidiomycota phylotypes detectedbelonged to the Agaricomycotina (Fig. 1, phylotypes 3 to 8),mostly to the genus Cryptococcus, a phylotype previously de-tected in another hydrothermal area (33), and the Filobasidium
(East Pacific Rise) anamorphs, which have economic, agricul-tural, and medical importance. Phylotype 9 (Fig. 1), a closerelative of uncultured fungi, was detected previously in deep-sea and hydrothermal sediments (2) and fluids (22). Moreover,homobasidiomycete yeasts belonging to the order Auriculari-
ales (Fig. 1, phylotype 7) were also found. On the other hand,the Chytridiomycota phylotypes retrieved belonged to speciesthat have not been described previously (Fig. 1, phylotypes 1and 2; see Fig. S4 in the supplemental material) and, in par-ticular, to an apparently ancient evolutionary lineage in theorder Chytridiales. These sequences shared only 95.7% of sim-ilarity with their closest relative, Chytridium polysiphoniae (Fig.1). The phylogenetic position of C. polysiphoniae is uncertainbecause it is a pathogenic fungus (19) and such fungi tend toshow a long-branch attraction bias (Fig. 1). When C. polysi-
phoniae was removed along with the other ambiguously placedpathogenic Chytridiomycota, the new group of species formedone of the most ancient branches of the fungal kingdom (seeFig S4 in the supplemental material). It is very probable thatthe phylogenetic position of these newly discovered fungi wasdetermined correctly because the branches in this group wereshort, a result that would not be expected if the terminalorganisms were pathogens. This result is also supported by aBayesian phylogenetic reconstruction (result not shown).
Different fungal communities were discovered when the fun-gal diversities of the Mid-Atlantic Ridge and the East PacificRise were compared; these two ridges are known to havedistinct endemic animal communities (40) (Bathymodiolus
azoricus and Alvinella pompejana samples, respectively). How-ever, Agaricomycotina (Fig. 1, phylotypes 3 to 8) and Dothideo-
mycetes (Fig. 1, phylotypes 14 to 16) sequences were found in
both ecosystems. Agaromycotina fungi seem to be widely dis-tributed because they were also found in deep-sea sediments(11, 23) and methane seeps (33).
Estimation of fungal SSU rRNA gene copy number in envi-
ronmental samples. qPCR analyses were performed to indi-rectly assess the fungal SSU rRNA gene copy numbers inenvironmental samples obtained from sites on the Mid-Atlan-tic Ridge and East Pacific Rise to test the possibility of con-tamination of the environmental samples by exogenous fungi.In these samples the numbers of fungal SSU rRNA gene cop-ies would be expected to be low. Therefore, a set of specificfungal primers was designed on the basis of the diversity anal-yses, as described in Materials and Methods. Strikingly, thenumber of SSU rRNA gene copies ranged from 1.91 105 to1.35 107 per �g of genomic DNA. Thus, this analysis clearlyallowed us to reject the hypothesis that of all the fungi had anexogenous origin (i.e., that there was contamination of thesamples by the water column or during sampling and condi-tioning). As the highest level of fungi was not observed in thebodies of animals (B. azoricus or A. pompejana) but on theexterior of the shell (B. azoricus) and the surrounding rock(Table 1), we hypothesized that most of these fungi were notbiotrophic.
DISCUSSION
This study reports the first inventory of fungal diversity indeep-sea hydrothermal environments. Unsuspected diversity,including new species in three fungal phyla, was found. One ofthe main results of the study described here is the evidence ofan old Chytridiomycota lineage, unknown either at the genuslevel or at a higher taxonomic level (Fig. 1; see Fig. S4 in thesupplemental material). As protein clock analyses (13) sug-gested previously that fungi emerged in oceans approximately1 billion years ago during the Proterozoic era of the Precam-brian, deep branches, such as this unknown phylotype, wereexpected based on our working hypotheses. It is thus possible
the NJ-K2P model. The dotted lines indicate branches not recovered in all three analyses. Designations that begin with MV followed by a hyphenindicate isolates from MARVEL cruise samples (Mid-Atlantic Ridge), and designations that begin with HE followed by a hyphen indicate isolatesfrom “HERO” cruise samples (East Pacific Rise) (Table 1). The cultures obtained from sample MV2E1 are MV-1c to MV-4c, MV-21c, MV-23c,MV-FS1c, and MV-FS3c; the cultures obtained from sample MV2E2 are MV-8c, MV-10c, MV-25c, and MV-FS4c; the cultures obtained fromsample MV2E3 are MV-15c, MV-19c, MV-26c, and MV-27c; the culture obtained from sample H18E9 is HE-5c; the cultures obtained fromsample H18E11 are HE-1c to HE-3c; and the culture obtained from sample H18E12 is HE-4c. In the Ascomycota, the terminal HE-1c and HE-3ccultures were not defined as new phylotypes since their phylogenetic affinities were unclear.
TABLE 1. Samples analyzed in this study
Sample Source LocationDepth
(m)No. of
phylotypes
No. of SSUrRNA
sequences
No. of copies of rRNAper �g of genomic
DNAa
MV2E1 Exterior of B. azoricus shell Menez Gwen, Mid-Atlantic Ridge 860 8 59 1.91 105
MV2E2 B. azoricus (body) Menez Gwen, Mid-Atlantic Ridge 860 5 47 1.483 106
MV2E3 Surrounding friable rocks Menez Gwen, Mid-Atlantic Ridge 860 6 25 3.01 106
MV5E1 Sulfide of surrounding rocks Lucky Strike, Mid-Atlantic Ridge 1,700 3 18 NAb
MV5E2 Exterior of B. azoricus Lucky Strike, Mid-Atlantic Ridge 1,700 2 32 1.35 107
H18E12 A. pompejana shell (epiderm) Elsa, East Pacific Rise 2,630 2 49 NA
a Determined by qPCR.b NA, not applicable.
VOL. 75, 2009 DEEP-SEA HYDROTHERMAL FUNGI 6419
that the emergence and initial diversification of fungi occurredin a marine environment. This study supports this hypothesis,but the data are not conclusive. The loss of flagella and there-fore motility in fungal gametes, which likely occurred morethan once (15), does not invalidate our conclusion since thisloss could be compensated for in terms of fitness by the resis-tance and long-range dispersal of both mitotic and meioticspores in aquatic environments. If the molecular clock esti-mates are correct, this hypothesis implies that fungi diversifiedin oceans before they colonized the land during the late Silu-rian or early Devonian period (i.e., approximately 400 millionyears ago). In this study we found a variety of fungi belongingto three of the five fungal phyla, which supports our assump-tion even if the possibility of secondary colonizations from landto marine ecosystems cannot be excluded. This conclusioncontradicts the widely accepted hypothesis that the diversifica-tion of fungi occurred on land. The possible early colonizationof hydrothermal habitats and the ecological function of thedeeply branching Chytridiomycota (Fig. 1; see Fig. S4 in thesupplemental material) are being addressed in an ongoingmetagenomic analysis of the fungi living in deep-sea hydro-thermal ecosystems.
Fungal diversity in marine hydrothermal ecosystems. De-spite the effectiveness of the primer set used here for amplifi-cation of Ascomycota (37), we did not find any Ascomycota
when ciPCR was used. Rarefaction curves resulting from re-sampling and pseudoresampling (bootstrap) procedures indi-cated that the number of sequences analyzed might have beeninsufficient to represent the entire fungal diversity in all sam-ples. One or two additional phylotypes might be discovered(Fig. 2) by doubling the sequencing effort. We suggest that theabundance of Ascomycota in the environmental samples wasextremely low and that cultivation resulted in amplification of
these rare organisms. This could explain why ciPCR and sub-sequent sequencing failed to detect them. Should this be thecase, it is likely that the fungal diversity described here hasbeen underestimated.
The observation that a specific fungal community was foundfor each sample might be explained by the diversity of thesurrounding physicochemical conditions (i.e., gradients of tem-perature, pH, etc.). Low redundancy of phylotypes was ob-served in the samples analyzed. This allows us to argue that thediversity of fungi in hydrothermal ecosystems is high and thatthe recently reported numbers of living fungal species (12) aresubstantial underestimates. Given the high fungal SSU rRNAgene copy number obtained for a given sample (up to 1.91
105 copies/�g), it can also be suggested that the fungi might beinvolved in important ecological functions. Moreover, three ofthe phylotypes found in this work were detected by ciPCR inprevious studies (2, 22). This also argues for rejection of thehypothesis that these sequences originated from contamina-tion.
As we have no data on how the fungi identified live, harvestenergy, and interact, their roles in the hydrothermal ecosys-tems remain unclear. Fungi are considered key organisms inland ecosystems, and they could be as important in oceanicecosystems, especially at the bottom of oceans. We need moreinformation about the fungal diversity and functions in deep-sea hydrothermal habitats and, more generally, in oceans. Thenumerous uncharacterized fungi might be a new source ofdrugs and biotechnological discoveries.
ACKNOWLEDGMENTS
We acknowledge Eugene Koonin, J. Peter W. Young, and MyriamBormans for valuable comments on the manuscript and for discussionsand suggestions. We thank Laetitia Guillot (“Ouest Genopole” Bioin-
FIG. 2. Estimates of fungal community diversity as a function of sampling effort for environmental samples. Rarefaction curves were computedusing 100 bootstrap replicates (upper line), and the expected richness function (lower line) is the number of phylotypes estimated (randomsampling without replacement) from our sequence data set generated using ciPCRs. (A) MV2E2; (B) H18E12; (C) MV2E1; (D) MV2E3. Plotsfor MV5E1 and MV5E2 were not drawn since only one phylotype was found in each sample when sequence analyses of the ciPCR productsobtained using primers MH2 and MH4 were performed.
6420 LE CALVEZ ET AL. APPL. ENVIRON. MICROBIOL.
formatics) for constructing the fungal database. We are also grateful tothe “Ouest Genopole” sequencing service.
This work was supported by GIS Genomique Marine and by a grantfrom the Total Corporate Foundation for Biodiversity and the Sea.
REFERENCES
1. Altschul, S. F., W. Gish, W. Miller, E. W. Myers, and D. J. Lipman. 1990.Basic local alignment search tool. J. Mol. Biol. 215:403–410.
2. Bass, D., A. Howe, N. Brown, H. Barton, M. Demidova, H. Michelle, L. Li, H.Sanders, S. C. C. Watkinson, S. Willcock, and T. A. A. Richards. 2007. Yeastforms dominate fungal diversity in the deep oceans. Proc. R. Soc. B 274:3069–3077.
3. Beatty, J. T., J. Overmann, M. T. Lince, A. K. Manske, A. S. Lang, R. E.Blankenship, C. L. Van Dover, T. A. Martinson, and E. G. Plumley. 2005. Anobligately photosynthetic bacterial anaerobe from a deep-sea hydrothermalvent. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102:9306–9310.
4. Berbee, M. L., B. Kloeckener, and J. W. Taylor. 1992. Yeast biology. Science257:1610–1611.
5. Boussau, B., S. Blanquart, A. Necsulea, N. Lartillot, and M. Gouy. 2008.Parallel adaptations to high temperatures in the Archaean eon. Nature456:942–945.
6. Burgaud, G., T. Le Calvez, D. Arzur, P. Vandenkoornhuyse, and G. Barbier.2009. Diversity of culturable marine filamentous fungi from deep-sea hydro-thermal vents. Environ. Microbiol. 11:1588–1600.
7. Damare, S., C. Raghukumar, and S. Raghukumar. 2006. Fungi in deep-seasediments of the Central Indian Basin. Deep-Sea Res. Part I 53:14–27.
8. Dawson, R. C., and N. R. Pace. 2002. Novel kingdom-level eukaryotic diver-sity in anoxic environments. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99:8324–8329.
9. Edgcomb, V. P., D. T. Kysela, A. Teske, A. de Vera Gomez, and M. L. Sogin.2002. Benthic eukaryotic diversity in the Guaymas Basin hydrothermal ventenvironment Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99:7658–7662.
10. Fisher, C. R., K. Takai, and N. Le Bris. 2007. Hydrothermal vent ecosystems.Oceanography 20:14–23.
11. Gadanho, M., and J. P. Sampaio. 2005. Occurrence and diversity of yeasts inthe Mid-Atlantic Ridge hydrothermal fields near the Azores archipelago.Microb. Ecol. 50:408–417.
12. Hawksworth, D. L. 2001. The magnitude of fungal diversity: the 1.5 millionspecies estimate revisited. Mycol. Res. 105:1422–1432.
13. Heckman, D. S., D. M. Geiser, B. R. Eidell, R. L. Stauffer, N. L. Kardos, andS. B. Hedges. 2001. Molecular evidence for the early colonization of land byfungi and plants. Science 293:1129–1133.
14. Huber, C., and G. Wachtershauser. 1998. Peptides by activation of aminoacids with CO on (Ni,Fe)S surfaces: implications for the origin of life.Science 281:670–672.
15. James, T. Y., F. Kauff, C. L. Schoch, P. B. Matheny, V. Hofstetter, C. J. Cox,G. Celio, C. Gueidan, E. Fraker, J. Miadlikowska, H. Thorsten Lumbsch, A.Rauhut, V. Reeb, A. E. Arnold, A. Amtoft, J. E. Stajich, K. Hosaka, G. H.Sung, D. Johnson, B. O’Rourke, M. Crockett, M. Binder, J. M. Curtis, J. C.Slot, Z. Wang, A. W. Wilson, A. Schubler, J. E. Longcore, K. O’Donnell, S.Mozley-Standridge, D. Porter, P. M. Letcher, M. J. Powell, J. W. Taylor,M. M. White, G. W. Griffith, D. R. Davies, R. A. Humber, J. B. Morton, J.Sugiyama, A. Y. Rossman, J. D. Rogers, D. H. Pfister, D. Hewitt, K. Hansen,S. Hambleton, R. A. Shoemaker, J. Kohlmeyer, B. Volkmann-Kohlmeyer,R. A. Spotts, M. Serdani, P. W. Crous, K. W. Hughes, K. Matsuura, E.Langer, G. Langer, W. A. Untereiner, R. Lucking, B. Budel, D. M. Geiser, A.Aptroot, P. Diederich, I. Schmitt, M. Schultz, R. Yahr, D. S. Hibbett, F.Lutzoni, D. J. McLaughlin, J. W. Spatafora, and R. Vilgalys. 2006. Recon-structing the early evolution of Fungi using a six-gene phylogeny. Nature443:818–822.
16. Jørgensen, B. B., and A. Boetius. 2007. Feast and famine—microbial life inthe deep-sea bed. Nat. Rev. Microbiol. 5:770–781.
17. Kohlmeyer, J., and E. Kohlmeyer. 1979. Marine mycology: the higher fungi.Academic Press, New York, NY.
18. Koonin, E. V., and W. Martin. 2005. On the origin of genomes and cellswithin inorganic compartments. Trends Genet. 21:647–654.
19. Kupper, F. C., I. Maier, D. T. Muller, S. Loiseaux-De Goer, and L. Guillou.2006. Phylogenetic affinities of two eukaryotic pathogens of marine macroal-gae, Eurychasma dicksonii (Wright) Magnus and Chytridium polysiphoniaeCohn. Cryptogam. Algol. 27:165–184.
20. Liu, Y. J., M. C. Hodson, and B. D. Hall. 2006. Loss of the flagellumhappened only once in the fungal lineage: phylogenetic structure of kingdomFungi inferred from RNA polymerase II subunit genes. BMC Evol. Biol.6:74–86.
21. Lopez-García, P., H. Philippe, F. Gail, and D. Moreira. 2003. Autochtho-nous eukaryotic diversity in hydrothermal sediment and experimental micro-colonizers at the Mid-Atlantic Ridge. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100:697–702.
22. Lopez-García, P., A. Vereshchaka, and D. Moreira. 2007. Eukaryotic diver-sity associated with carbonates and fluid-seawater interface in Lost Cityhydrothermal field. Environ. Microbiol. 9:546–554.
23. Nagahama, T., M. Hamamoto, T. Nakase, H. Takami, and K. Horikoshi.2001. Distribution and identification of red yeasts in deep-sea environmentsaround the northwest Pacific Ocean. Antonie van Leeuwenhoek 80:101–110.
24. Pirozynski, K. A., and D. W. Malloch. 1975. The origin of land plants: amatter of mycotrophism. BioSystems 6:153–164.
25. Posada, D., and K. Crandall. 1998. Modeltest: testing the model of DNAsubstitution. Bioinformatics 14:817–818.
26. Ramirez-Llodra, E., T. M. Shank, and C. R. German. 2007. Biodiversity andbiogeography of hydrothermal vent species: thirty years of discovery andinvestigations. Oceanography 20:30–41.
27. Redecker, D., R. Kodner, and L. E. Graham. 2000. Glomalean fungi from theOrdovician. Science 289:1920–1921.
28. Robert, F., and M. Chaussidon. 2006. A paleotemperature curve for thePrecambrian oceans based on silicon isotopes in cherts. Nature 443:969–972.
29. Selosse, M. A., and F. Le Tacon. 1998. The land flora: a phototroph-funguspartnership? Trends Ecol. Evol. 13:15–20.
30. Shearer, C. A., E. Descals, B. Kohlmeyer, J. Kohlmeyer, L. Marvanova, D.Padgett, D. Porter, H. Raja, J. Schmit, H. Thorton, and H. Voglymayr. 2007.Fungal biodiversity in aquatic habitats. Biodivers. Conserv. 16:49–67.
31. Simon, L., J. Bousquet, R. C. Levesque, and M. Lalonde. 1993. Origin anddiversification of endomycorrhizal fungi and coincidence with vascular landplants. Nature 363:67–69.
32. Smit, E., P. Leeflang, B. Glandorf, J. D. van Elsas, and K. Wernars. 1999.Analysis of fungal diversity in the wheat rhizosphere by sequencing of clonedPCR-amplified genes encoding 18S rRNA and temperature gradient gelelectrophoresis. Appl. Environ. Microbiol. 65:2614–2621.
33. Takishita, K., M. Tsuchiya, J. D. Reimer, and T. Maruyama. 2006. Molec-ular evidence demonstrating the basidiomycetous fungus Cryptococcus cur-vatus is the dominant microbial eukaryote in sediment at the KuroshimaKnoll methane seep. Extremophiles 10:165–169.
34. Taylor, J. W., and M. L. Berbee. 2006. Dating divergences in the fungal treeof life: review and new analyses. Mycologia 98:838–849.
35. Thompson, J. D., T. J. Gibson, F. Plewniak, F. Jeanmougin, and D. G.Higgins. 1997. The Clustal_X Windows interface: flexible strategies for mul-tiple sequence alignment aided by quality analysis tool. Nucleic Acids Res.24:4876–4882.
36. Tivey, M. K. 2007. Generation of seafloor hydrothermal vent fluids andassociated mineral deposits. Oceanography 20:50–65.
37. Vandenkoornhuyse, P., and C. Leyval. 1998. SSU rDNA sequencing andPCR-fingerprinting reveal genetic variation within Glomus mossae. Mycolo-gia 90:791–797.
38. Vandenkoornhuyse, P., S. L. Baldauf, J. Straczek, C. Leyval, and J. P. W.Young. 2002. Extensive fungal diversity in plant roots. Science 295:2051.
39. Wachtershauser, G. 1990. Evolution of the first metabolic cycle. Proc. Natl.Acad. Sci. USA 87:200–204.
40. White, T. J., T. Bruns, S. Lee, and J. W. Taylor. 1990. Amplification anddirect sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics, p.315–322. In M. Innis, D. Gelfand, J. Sninsky, and T. White (ed.), PCRprotocols: a guide to methods and applications. Academic Press, NewYork, NY.
VOL. 75, 2009 DEEP-SEA HYDROTHERMAL FUNGI 6421
���
��������A
��������A
�BCDEBF�DBE��E������F�D�D���C�F�
���D�F����BF��E�E��E�
DB�EE��CE�BDC�����F�E����EC����FE��
!"
��������A
A#
��������A
����DF�EA
�BCDEBF�DBE��E������F�D�D���C�F����D�F����BF�
�E�E��E�DB�EE��CE�BDC�����F�E����EC����FE��
$E��%�&�F�F��'FEB&������E�(%F&�E�E���D�E��DF%�&�)�BE��B�D*&E�&BD�E�&�E
��&�CE������F�E����E����$E����E+���BCDEFF���BF��&�E�%�E�DBFE�����FD�B��D�,-,�D�
�E����%�EBCE�E�D�B%E�'����E���B�D*&E�EF�EB%-������&��FD�B�(����F�)�E��&�
�(�D�F�D�E %���&FD�E �E� C����D�B�B� ��B� �E �D�DE& ���DB. �E�� � ��BC% �(%F&�E �E ��
�D�E��DF%�E����F�D�D���C�F�EB�D�DE&�����F�E�������DB�����B�.
�DB�D �E�����CE���%CD�D*&E��&/���F�D�D���C�F��BF%F%�E��DB%E���&��%C�D�E
CEFFE �D�E��DF% ��� &BE �����C�E �E �%B��D*&E EB�D��BBE�EBF��E EF &BE �B����E
������%B%FD*&E�&���*&E&����%C&��D�E 01��2�.1D/�����F��E��E���F�D�D���C�F��BF
%F%�'FEB&���BF*&�F�E�E��%�EBFEBF�E�E��)CE�B�B,�%C�DFE�3CE*&D�E��)FE����D'�E
C�BB�D���BCE�ECE����&�.4E��BD)�E DB�FFEB�&E3�E������F��E��E���DFD�BB�BFEB
�E���� �& C���E �E� ��D�F����BF�3 ��D�E �& BD�E�& �E� ��CDBE� �E� 5BD��BF�3 �BF
%���E�EBF %F% �%FECF%�. �E� �%�&�F�F� ��BF��BF &BE �D�E��DF% ��D�DB��E �& BD�E�& �E�
��&�CE������F�E����E������B�E�����EBF�EB��'�E&�E��E���ECFD�E���&����E�C�D�FD�B
�E B�&�E��E� E��)CE� EF �� �%���&FD�B �E� �D�B%E� �����B�E� �E� ��D�F����BF� EF �E�
5BD��BF�.
A
��������A
������������A�B�CD�EF������C���C�������B�FC�C���
����������������C������F���C�F�������CB�B���B
1F%���BE6��%�B���D�D��E7�B�EB����B�&��E
������
�BE��F�E8��F�����E�EB�'D��D�E��DF�D�F����E�F�EE���&FD�B����E��FD�B��D�����B����
�D�DB� ����BD��� '� C�B�F�&CFDB� ������EBEFDC F�EE�. ��B�D�E�DB� F�E ��D�F����BF� C���E3 F�E
���F��� F�E �&B��� �DB�������'E�E����E�'� DBC�E��DB�F�E���EC&��� �E�C�D�FD�B�� E����
�D�E��DB� ����BD��� F� DB�E� E���&FD�B��� �E��FD�B��D�� 9���� � :����&�3 !# ;. �ECEBF��3 �B
&B�&��ECFE� �D�E��DF� �� �&B�D ��� 'EEB �E�E��E� DB �EE� �CE�BDC �����F�E���� EC����FE��
�E��DB�F�BE8E���&FD�B�������F�E�E��'�&F�&B���E�E��EBCE�B��D�E��D�DC�FD�B9$E����E+��
�BC3!##";.����E�&�F��F��F�F&��8E����F�E�D+E�F��FF�E���F�D�D���C�F�����&�3�BE��F�E
E���DE�F�&B���E���&FD�B����DBE��E�3��E���E�D�E��EF��B��E�D�&���'E�DE�E�.��D�E��EF�8E�E
�E�D�BE�F���ECD�DC��������D��F�E 01��2��EBE�'�CD���9�C�CC&�F&�E,DB�E�EB�EBF���;�B��
���DEF� �� EB�D��B�EBF�� �����E� ���� �����F�E���� EC����FE�� 8E�E �B����E�. ���DFD�E
����D�DC�FD�B�8E�E�'F�DBE�������&'�EF��F�E�E�����E�.��F��&��F�E�E*&EBCE�D�E��DF�DB�
�D�EB�����E8����83F�E���E�F�E*&EBCE��E��DBE��D�E��F�'E�E�E��E�.������EBEFDC�B����E�
�D���D��FE�F�E��E�EBCE��BDBE�����F��E�9"<=DB�D�ED�EBFDF�;.�����F�E�EC�BF�DBE��E�&B��BF
�E*&EBCE������F�E��FF8��D��E�EBF����DC�B�.1D/��F�E�'E��B�E�F�F�E���F�D�D���C�F�3F�E
����E�F������FD�B ��8�DC��E��DB�&B�B�8B�B��EE���E�EB�EBF�B�CE�BDCEB�D��B�EBF�
9�C�C �E�D�EBF�;.��EF��EE�F�E������F��E�E/�D'DFE�E�EB�EE�E�E���&FD�B���'��BC�E�.�BE
����E��B&B�B�8B�DBE��E8DF�DB��&��+���B�F�E�F�E�F8�����E��EE�E�'��BC�E�DBF�E
5BD��BF��B�����D'��:D��BF��EF�B�8B.��D�EBCE���F�EE/D�FEBCE���B�BCE�F����DBE��E��F�E
5BD��BF��&��E�F��BE���&FD�B��������D���D��E�EBF����F�E�BEC&��EBF���CCE�FE�3F�E/���DB
�D�E��D�DC�FD�B8DF�DBF�D�E���&FD�B���'��BC�.
A!
��������A
������ �!"E����
��E�&B����DB������������>��E&�����FDC�DBE��E��DB���B�8B���DF�EC����DC���&BCFD�B��
�EC�����E�3DB����E�DBF�EB&F�DEBF�B�C��'�BC�C�DB��DF��F�EC����FE��9?����E�7�B�E�
�&FFEB!##!;.�&�C&��EBF�D�D�B��F�E�&B����DB���������DB����D�EB�����F&�DE���C&�F&�E�
D����FE������E�DBFE��E�F�D��EC����FE��9�DC��������BC!# !;.��8E�E�3F�E�E�C�D�FD�B��B��E�
��ECDE����&B�DD��EBE������DB�E�E�'�F�ED��DB&FE�D+E3�������������DC���E�F&�E�DBCE�F�DB
����BD���3 �� 'EC�&�E F�E� ��E C���FDC 9�C�C �D�FDBCF ��ECDE� 8DF� F�E ���E ����������; ��
&BC&�FD��'�E 9�E�EC�E�!##!@:��C�8E�� !# ;.6��E��E�3'���� �DBE��E���E�E���E��E�EBFE� DB
C&�F&�EC���ECFD�B��B����EF�E�E���E'EEB�E����E*&EBF���F&�DE�F��BF�E&��E��&B�D9��8E��
""A@A��E����BC!###@?�DFE���BC!##B;.��D���C����B�8�E��E���&B����D�E��DF�����D�ECF
C�B�E*&EBCE��BF�EFE�FDB���E���&FD�B�������F�E�E�96&E��E��1C��DF!##<;.�D''EFF ���BC
9!##<;�&'�D��E��C����D�DC�FD�B'��E��B�ECEBF���EC&���������EBEFDC�B����E�38�DC�������E�
F�/� �E����B�E�EBF� �F �D��E�EBF F�/�B��DC �E�E��. �B ���FDC&���3 F�E '���� �DBE��E� ��E�D�&���
C�&�FE�E�DBF�E���F�D�D���C�F�����&����E&B�E���BE�D�BD�DC�BF�E�D�D�B.�B�EE�3F�E�E�&�F�
�&��E�F � ���F�D�D���C�F� ������ ������� ����&�3 �E����FE� ���� F�E BE8�� ���D��FE� �����
2E�C���D���FD����C�F��B�:���F�C���D���C�F�9A��E� ���BC !##B�3!##B';.��E��E�EBF�&B���
F�EE���D�E�B�F�/�B��DC��C����D�DC�FD�BD�'��E��B ##3###D����FE��B�C&�F&�E���ECDE�9CD����
�BC!##0;38�DC����E���B����8�DE8�����'���&B����D�E��DF�3F���DFD�B����E�FD��FE��F'EF8EEB
< !3###91C��DF�6&E��E�!##<;�B� 3D##3###9��8��8��F� "" 3!## ;.�BE���EC&�����F�
�B����D����DB�DC�FE�A.D,D. �D��D�B��ECDE�3���8DB��BE�EB��E�FE����DBC&��EBF�B�8�E��E
9�(:�DEB �� �BC !##D;. �8DB� F� F�E DBC�E��DB� B&�'E� �� ���EC&��� �F&�DE�3 �E�E��� �CDEBFD�F�
�E*&E�FF�E DBFE���FD�B��EB�D��B�EBF�����EC&�����5�9��E��FD�B����/�B5BDF�; DBF��&B���
������EBEFDCC����D�DC�FD�B9�C�C��D''EFF���BC!# @C�&�E����BC!# !;.��D�C�B�FDF&FE���FE�F�
C�B�E�FF�/�B���DBF����FE��FDC�3F�E�D�'EDB�F�DBC�&�E�B�C���D��F�EE/D�FDB�E���&FD�B���
�E��FD�B��D�����B�����BD���9�����:����&�!# ;.
AA
��������A
�B�D��B�EBF�� ���EC&��� �F&�DE� ���E ���E��� ���8B F�E E/D�FEBCE �� B��E� �&B��� C���E� DB
FE��E�F�D���B����DBEEC����FE��9�C�C�7�B�EB����B�&��E���BC!##!@:������BC!##<@1C���F��
�BC!##A@���FE����BC!##0@$E����E+���BC!##"@2���B����BC!# #;.��E�EBE8���EFECFE�C���E�
��EDBDFD�FDB��BE8E��DBF�E&B�E��F�B�DB����&B���E���&FD�B�B��D�E��D�DC�FD�B.�/FEB�D�B��
F�EC����D�DC�FD�B���FE�F�EB�D��B�EBF���E*&EBCE����&����CD�DF�FEC���&BDC�FD�BC�BCE�BDB�
�&B��� �D�E��DF� �F&�DE� �B� 8��F �����8� ���� F�E� 9�D''EFF �� �BC3 !# ;. ��D� ���FE��FDC�
������C����EDF����D'�EF��DF&�FEF�EEB�D��B�EBF���E*&EBCE���(1�D�C��BE���&� (9���FE���
�BC !##0;DB�B��E�C������C��E���D+���CEFE�DBF�E��C���C�F�����&�9����DB� ���BC !# ;.
�ECEBF��3�B���E�EB��E�FE�DBFE�E�F3F�E����F���C�F�����.B��.9A�BE����BC!# ';���'EEB
�E�C�D'E�. �F EBC������E� F�E �EB&� ����BB� 9�E�� "0 ; �B� F�E &'D*&DF�&� EB�D��B�EBF��
($C6 (C���E3��E�D�&���B��E����&C�����F�E�D��F�E*&EBCE�EF�DE�E�97�B��BBEB """;.��E
CE���C�BF�DBDB�EB�D��B�EBF���E*&EBCE�����F�D����&����E'EEB�D�&��D�E�&�DB���&��E�CEBF
�EFECFD�B�D�42����'E�'&F���EB�F�EF'EEBC&�F&�E�9A�BE����BC!# �;.��E�E����F���C�F�
����F�E�EE�E�F�E�C�D'E��&B��� �DBE��E38�DC��D�E�����E��E�'E���E���F�D�D���C�F�3F�&�
���D��DB��&�&B�E��F�B�DB��� E�����&B������D�FD�B�B��E�CE�FD�B��F�E�&B���F�EE���D�E
9A�BE����BC!# �;.
����F ���� F�E *&E�FD�B �� E���� �&B��� E���&FD�B3 F�E�E D� �� C�&��E F�E *&E�FD�B �� �&B���
�D�E��DF����BCDEBF�DBE��E�.���F�D�D���C�F����E'EEB�EFECFE�DBF�E���DBEEB�D��B�EBF'�
&�DB� ���EC&��� F���� 9$E ����E+ �� �BC3 !##";. �B�EE�3 �B�� F��EE ��ECDE� ���E 'EEB ��������
�E�C�D'E� DB ���DBE �B� '��C�D�� EC����FE�� ������������ B��������3 ��������C��F�D&�
�����B���������B�������������B��������� 9E�E���B���BC!# ;.�DC����� ���BC 9!# !;�EC���E�
01��2��EBE�E*&EBCE����&B�D�����D��E�EBF�F&�DE������DBEEC����FE���B�E/��DBE�F�ED�
������EBEFDC ���DBDFDE� 8DF� �E*&EBCE� ���� C&�F&�E� �&B�D. ���B� AB B��E� ���DBE �DBE��E�
�D���D��FE�3 9�C�C� D�EBFDF� F� C&�F&�E� �&B�D F "<=;3 !GA 'E��B�E� F� '���� �DBE��E�3 ��DB��
���F�D�D���C�F�3�B�C�B�FDF&FE�F�E���F�D�E��EBF'��BC�E�.��E�EFECFD�B�����F�D�D���C�F�
�F��FE�8DF����EC&��� E&�����FDC DB�EBF��DE�DB�D��E�EBF���DBEEC����FE���&C��� DBFE�FD���
�E�D�EBF�94�8��B���CE!##!;3��EB�E��&���CE8�FE�96����B����BC!##H;3�/��EB,�E��EFE�
�E�8�FE������BDBFE�FD�������91F�EC�����FEDB!##A;3�B�/DC�E�8�FE�DB��>���9I&EB������
AH
��������A
�BC!##B;�B�DBF�E��EB�E�91F�EC����BC!##B@���C��'���BC!# ;.��8E�E�3DB�EBE���3F�E
�E�ECFE���D�E���B���E�C�D'E��&'�EF��F�E�D�E��DF��B������DB���F&��FD�BD�B�F�FF�DBE�
9���C��'���BC3!##!@1F�EC����BC3!##B@�DC������:���3!##D;.�ECEBF��3�&B�D,��ECD�DC�F&�DE�
���E'EEBC���DE��&FDB�EE�,�E�EC����FE��.1E�E����E*&EBCE��D�B�F&�E������F�D�D���C�F�
8E�E�E���FE��&C��� �B�E��'DC'�CFE�D����F�9 D<D��E�F�3:��� ���BC !##<;3DB����CD�FD�B
8DF� ����������B���������� DB �����F�E���� �EBF�90B#��B� 3<##��E�F�3 $E����E+ ���BC
!##";�B��EF��BEC����EE��E�D�EBF�9!3H##��E�F�3����E� ���BC!# !;.��E 01��2��EBE
�E*&EBCE�����D�DE�9:��� ���BC !##<@ $E����E+ ���BC !##";�D�B�F���8�B���FC�E�8DF�
�E�C�D'E� �&B�D �B� C�B F�E�E���E 'E D�EBFD�DE� �� BE8 ���DBE �&B�D 9�DC����� �� �BC !# !;.
��BCE�B����E'EEB��DCE��'�&FF�E��D�E��&�E��B�F�E42�F���EF�C���EBF��E�C�D'E�&B���
�D�E��DF�9�C�C3'D��DB����D�DC�FD�B�&EF���D�E���ECD�DCDF������&'�EF��FE����FE42�@��C����
*&��DF� ������EBEFDC �D�B�� 8�EB&�DB� � ! 9D.E3 �BFE�B�� ���B�C�D'E�1��CE�; �� F���EFE�42�;3
�&��E�FDB�F��F�&B����D�E��DF�3DBC�&�DB����F�D�D���C�F�3DB���DBEEB�D��B�EBF�D��D�E���&C�
��E�FE�F��BC&��EBF���E��B�F��FE�92���B����BC!# #@�DC��������BC!# !;.
$E����E+ ���BC 9!##";�&��E�FE�����DBEE�E��EBCE�B��D�E��D�DC�FD�B���&B�DDB�CE�B�.?E
F�E�E���E����F�E�D+E�F��FD;���F�D�D���C�F���E���E�D�E��EF��B��E�D�&���'E�DE�E��B�DD;
�B����DB�F�D�D����F�BF�BCDEBF�&B������&�8�&���E��F��'EFFE�&B�E��F�B�DB����&B����B�
��D�F����BF� 9�C�C �BD��� �B��&B�D; ��D�DB �B��D�E��D�DC�FD�B. ?DF� F�D� �D�3 8E�E�ECFE��B�
�E�D�BE� � ��D�E� �EF ��ECD�DC F� ���F�D�D���C�F� 01 ��2� &�DB� ��J6J��,4:3 � ��F�'��E
�E�DC�FE�F��&B����E*&EBCE����������EBEFDC�B����E�96��% ���BC3�&'�DFFE�;.?E�B����E�
�����E� C���ECFE� �F ��&� �EE�,�E������F�E���� �EBF� �B F�E ���F ��CD�DC �D�E �B� F�E6D�,
�F��BFDC�D��E.?EC���EF�D��EF�������E�'EC�&�E9D;���F�D�D���C�F����'EEB ��&B�DBF�D�
EB�D��B�EBF9$E����E+ ���BC3!##";9DD;F�E�E�����F�E����EC����FE����E���E����D�E�B F�E
�CE�B �����3 9DDD; �����F�E���� C�B�DFD�B� 8E�E �&B��BE �&�DB� F�E ��EC��'�D�B 9��'E�F �
���&��D��B3!##B;�B�����'EC�&�EF�D�EB�D��B�EBFD�C�B�D�E�E��������D'�EC����E�� �D�E
9?KC�FE���K&�E�3 ""#@ �&'E� �?KC�FE���K&�E�3 ""0;. ��E�D�E��DF� �EFECFE� DB F�E��E�EBF
�F&���E�E��E��BE8�����F��E�DBF�E���F�D�D���C�F�����&��B��EE���,���DFD�BE��DBE��E�
����DB��B�BCE�F�����&�DBF�E��D�F����BF�������DB���D�FE�C���EF�F�E��D�F����BF�.
AD
��������A
#��$��% ��&���!�$%�'�!�
()�����������ABCDEF��������
1����E�8E�EC���ECFE����������F�E�����EBF��BF�E���F��CD�DC�D�EDBF�EE&�����'��DB
9!<L# (23 L!H(?;�B��BF�E6D�,�F��BFDC�D��E�F$&C��1F�D�E9A<L <(23A!L B(?;3��DB'�8
9ABL#B(23AAL (?;�B�F�E���B�,�F��BFDCEE�F���E��E9�.�.E;9!BL#0(23HHLH"(?;.��E�EF����
&�E�F�C���ECFF�E�����E���E�E�C�D'E�DB$E����E+���BC9!##";.��EB�F&�E�B���C�FD�B��F�E
�����E���E��E�EBFE�DB��'�E .��D��F�C�E�DC��CE�����D�3�����E����+EBDB�D*&D�BDF���EB8E�E
���&B�8DF��'E��'E�FE�966A# @�EF�C�;&�DB�F&B��FEB'E���9A���D��EFE�;8DF�F8�
����DB� �FE�� ��� !�B�F A#�+. 42�8�� E/F��CFE� &�DB� F�E 42E��� ���BF �DBD �DF 9MD��EB;
�CC���DB�F�F�E��B&��CF&�E�(��EC���EB��FD�B�.
��'�E N1����E����CE��E�.
�����B &C���C� !���F�(�) �����
EJ !�H9D; E&����� !### 1E�D�EBFC��E9!#,!DC�;
67D�! $&C��1F�D�E <## 6&��E�E/FE�B����E���D�E
�OB�D ��DB'�8 !A## ����������������
�O0�B ��DB'�8 !A## ����������"���B���
�O"� ��DB'�8 !A## ��D�BE������EBF9�&��D�E;
�O"�D ��DB'�8 !A## ����������B����������
�O"�0 ��DB'�8 !A## ����������B����������
�O"�" ��DB'�8 !A## ����������B����������
�O�D�A �.�.E ABHD ����������"���B���
(*)�BE����������E����AE�������E��������E�������E�
��D�E��8E�E�E�ECFE�F���ECD�DC��������D�����F�D�D���C�F� 01��2��EBE�E*&EBCE�8DF���D+E
C����FD'�E ��� HDH ���� �E*&EBCDB�3 �C�C ��B�DB� ���� HD# '� F� B## '� ����DC�B�.
���F�D�D���C�F� 01��2��EBE�E*&EBCE�8E�E��8B����E�������J6J��,4:F�FE�F�E�E���
AB
��������A
��D�E��EF�.��EC��DCE������D�DE������EBF8��������DEBFE�F�EBC������F�E7H��E�9?&�F�
���BC !###;.?EC���E 6�! 9���E��EE��EE���E�EE; 9$E����E+ ���BC !##";�B� 1�0����F�D�
9�����E�����E����EE���; ���D�DE� ���� 1�0� �&'�D��E� �B F�E 7D������ ��' 8E'���E
9�FF�NGG888.'D�����.�&�E.E�&G�&B�DG��C���'G��D�E��.�F�;F�F���EF���F�D�D���C�F�.���E���E��
���F�D�D���C�F� ���EC&��� �D�E��DF� 8�� ��/D�D�E� '� &�DB� F8� �E�EBE��FE �E��D�B� ��
1�0����F�D�3 F��F 8E C���E� 1�0!����F�D� 9�����E�����E����EE���(; �B� 1�0A����F�D�
9�����E�����E�����E���;.42�8������D�DE�'�F�&C���8B���.��E��E���� ����DE��8��
��8�B� F�E����D�DC�FD�B DBFEB�DF� 8��B�F C�B�F�BF �C���� �����E�. P�D�1��E�6 �����E6D/E�
9��DCEBF�EQ:D�FEC�B����DE�;���E�D�D����E�&�F�.�E�F�8DF�'�CFE�D�,��ECD�DC��D�E�����8E�F��F
F�E ��� �E�CFD�B� 8E�E B�F D��E�E� '� DB�D'DF��� �B� F�E 42� 8�� B�F �E����E�3 �C�C F�E
����D�DC�FD�B�D�B���8E�E�E���F��B�.?E���&�E�����F�E�E����E�CFD�B�F��FF�E42���F�D/
F���EF�8E�E�E�� �C��CE3�B�8E�E�D�&FE�'�F�E�F�E�42���F�DCE�. 1�F�E ��������&BF��
����DC�B�8��B�F�E*&EBCE�'�HDH.�B�FE��8E&�E��C����DC��C��BDB��B��E*&EBCDB��F��FE��.
����DC�B�8E�E�&�D�DE�8DF����BEFDC'E���9��EBC�&�F�6�&�E;.��E�8E�EF�EBC��BE�DBF�E
�E�6,��ECF��9����E��;�B�4�DRC���EFEBFCE���9ED'C�:�$$D�E�EC�B����DE�;3 �CC���DB�F�
F�E��B&��CF&�E�(��EC���EB��FD�B�.
(�)�������E�E���������E�
��&�FD��E,�E*&EBCE��D�B�EBF8���E�����E�8DF��$51��$O!. 9$���DB ���BC!##<;�B�F�EB
�E�DBE� '� E�E. �B�D��B�EBF�� �E*&EBCE� 8E�E ���EB�E�F� � ���F�D�D���C�F�,��D�BE���F�D/
��8B����E�������J6J��,4:96��% ���BC3 �&'�DFFE�;. ��EEB�D��B�EBF�� �E*&EBCE�8�DC�
���&�E�F��EF�E�8E�EF�EBC�EC�E����F�ED��E�CEBF��ED�EBFDF�.?�EBF�EB&C�E�FD�EC����CFE�
�D��E�EBCE8����8E�F��BA=3�E*&EBCE�8E�EC�B�D�E�E�'E��B�DB�F�����E�DB��E��5����
�D�EBC��BE�D'����.��5�8E�EF�EB��C������D�BE����DB�FEEB:�B�9:EB��B ���BC !# ;&�DB�
:$�1�BF��E�ECFF�E'E�F:$�1��DF�E*&EBCE�.��E�DB����F�D/C�B�D�FE���F�E&BD*&E��5����
E�C�C��BE�D'�������B�8DF�F�ED�'E�F:$�1��DF�E*&EBCE���F�ED�C���E�FBED��'�&��DBF�E
���F�D�D���C�F���F�D/9��J6J��,4:;3�B��E*&EBCE�C���EB�CC���DB�F�F�ED����DFD�BDB�DB
A<
��������A
F�E��D�F����BF�C���E.PDB����3 ������EBEFDC�B����E�8E�EC���DE��&F�������8�.�BED��'��,
>�DBDB�������EB�&�DB�CD�&��!�����EFE�������E��D�F�BCE8��C��C&��FE�&�DB��$51��$O!.
8DF� 3###'��F�F��� DFE��FD�B� 9$���DB �� �BC !##<;. �� �E�����F�E��/D�&��D�E�D����96$;
�B����D�38E�E�ECFE�F�E'E�F����D'�E���E�8DF�>6��E��E�F9����������B���� ""0;.��FE�F�D�
�FE�3F�E6$������EB�8��C���&FE�&�DB�F�EE��S�SE���E�8DF� 3###'��F�F���DFE��FD�B�
&�DB� ��J6$ 9E&DB��B �� �BC !##A;. � :��E�D�B ������EBEFDC �B����D� 8�� �E�����E� &�DB�
6�:��E� A.!. 9��B*&D�F ��&E��EB'EC� !##A; �B�F�E ���EE��S�SE���E�3 8DF�!3###3###
�EBE��FD�B�����E��B�������E��E*&EBC��� ##�EBE��FD�B�.
+�� %�"&�����!�!��E"�����
()�B���������
� ��B�E �� EB�D��B�EBF�� �����E� ���� �����F�E���� �EBF� 8�� FE�FE�. 2DBE �����E� 8E�E
�E�ECFE�3 E�C� 8DF� F8� �E��DC�FE� �� F�E 0��2� �EBE ����D�DC�FD�B. ���BE �D'���DE� 8E�E
C�B�F�&CFE��B�!!BC��BE�8E�E�E*&EBCE�.?DF�DBF�E�E!!BC��BE�3 AB'E��B�E�F��&B�D8DF�
A#���F�D�D���C�F�3��&���C���C�F��B�F8�:��D�D���C�F�3D!C���E���B�E�F��E*&EBCE���
��&��+���B�A0F��E*&EBCE����B&B�E�DBE����&����&�����F�.��F�E�D�E��DF�C��E�E��
����E�������FD�B��F�E�&�����F�����DB3F��BE/�ECFE�38E���F�C����E�B�&F���&����B�
F�E :D��BF�. ���������� ������"� 9E��&C����F�; D� � ���� C�B�D��FE �� DF E/�D'DF� C���E
�E��FD�B��D��8DF�F�E5BD��BF�9�����DE�,1�DF�!##H;.�F�&��D��E�F�EDBC�BF���E�FD'�EC�B�DFD�B��
��D�BDB�8DF��&���F�D/38�DC��D��F���E��F�D�D��'&FF�E�D��F���F��F�E7H��E�D��D��DC&�FF�
��D�B��F�EDBDFD���E�D/E���EB�F��E�EBFDB����&�����F�9?&�F� ���BC !###;�B�C����FD'D�DF�
�&�F 'E FE�FE�. ��E F��EE �EF���� �� �EC�B�F�&CFD�B ����&CE� C�B��&EBF F������DE�. ��E
������EBEFDC�B����E��D�B�F�EC��E��F��B�'��F�F����&����F��:��E�D�B���FE�D�����'�'D�DFDE�
���F�EDBFE�B��B��E�.2E�E�F�E�E��3F�E�EE�'��BC�E���F�E�&B����DB����8E�EC��E�EBF8DF�
�F�E��F&�DE��� 01��2��EBE�E*&EBCE�9�����DE�,1�DF������ ""D@6��ED�����BC!##<3:���
���BC!##<@�DC��������BC!# !;.�D��E�'��F�F����&����F����F�E�E�EE�'��BC�E�C�B�B��'E
�'F�DBE�8�EB�E�E������EC&�������E����EC��'DBE�9�C�CA��E����BC!##B�;.
A0
��������A
(*)�������A��E����������EA
��E�E�ECFE���D�E��EF�&CCE���&�������D�DE�F�E�EE��&B���'��BC�E�3�D��E��&B����E*&EBCE�
'EDB����E���B�F�EC��BE�9�C�C �E8E�F��BA=;.����C&��BF�E���F���F�E�&B����DB����3
��5�'E��B�DB�F���C���C�F��B�:��D�D���C�F�8E�EB�FDBC�&�E�DBF�E������EBEFDC�B����E�.
��E�E8E�E�B����C������D�BE�&�DB�:$�1�B.�BE��58����&B�DB�����E��O"�D�B��O"�09�#C
��'�E ;�B����8E��D���E�CEBF��ED�EBFDF�9T""=;8DF�6�����E+D��E��F9:��D�D���C�F�;8�DC�
���'EEBC����CFE�D+E���� (�����F�E���� �B�G���B�E��'DC �&B������&�( 9$U�E+,E��CV� ���BC
!##<;. �B�EE�3 �E*&EBCE� �� F�D� ���&� ��E ��FEB �EF�DE�E� ���� �&C� EC����FE��3 �C�C
�����F�E������&D�,�E�8�FE��D/DB$��F�DF�9$U�E+,E��CV� ���BC !##<;3�B�/DC�E�D�EBF�DBF�E
���'D�B�E�9AE'���> ���BC !# #;3�����F�E����C�D�BE������EBF9�&���D�E;DB$&C��1F�D�E9$E
����E+ ���BC !##";.��8E�E�36�����E+D��E��F���E����C�B�D�E�E�F�'EC�BFDBEBF����ECDE�.�
�EC�B���58����&B�DB�����E��OB�D�B��O"�"�B�C�&��'E���D�BE�F�F�E�E+D+���C�FDB�
C����9��C���C�F�;.
��E������EBEFDC�B����E��E�E��E�BDBE�����F��E� DBF�E�����F�E�����EBF��F&�DE�'&FF�E
�CF&��B&�'E����'E����E�.�B�EE�3F�E�D�E��DF�����5���&B�DBF�E�D��E�EBF�����E�8����83
��B�DB����� F�H�E������E'&FF�E���E�F 01��2��EBE�E*&EBCE�8�&��B�F'EC�&��F'�
F�E�F��FE��&�E��E�E�B�F�E�D�E��DF��'�E��E�DB����DC�B�E��DC�FE�8��B�F�F�DCF��D�EBFDC��.
P��E/����E3��������E�O0�B3!DC��BE�C�&�FE�E�DBF��EE�����F��E�DBF�E�D��F�E��DC�FE�B�0
C��BE�C�&�FE�E�DB�BE�����F��E3�D��E�EBF����F���EDBF�E�D��F�E��DC�FE3DB F�E�EC�B��BE.
��D��&��E�F�F��F���E�����E�������'�&������E�B&�'E�����5�.?E�D�B�F�EFECF�B�
���FDC&������E�'���E��E��FE�F�F�EB�F&�E��F�E�����E.
A"
� �
����������
ABCD�E��
F�����FB�D��������
���B��������
��������������
����
��
��
��
��
� �!
�"
���
#��$�%�&&&$'(�&&&�)���D���B
#���D���B�*��&
����������B���C�)��
���������ABCDE��FC����EF������F���B���BCDE��F������E����EF��E���F���EF��F��D������F������E������D����EDD���������BC��E�B����D���F���EF��B��
����� A������� ����� �F�� ������D�F���� ������ +��� ��B���,�� D��-�� ����.� -�D� �)������ )�� '�/��C�� (��������� 0'(1� �����D�D� 02+345421� ��� ��6D�
���,�C����-�������,�)��7%�����,�0�%1����#���D���������D�D8�#���D���B����C�D�����-�������9���'(�����%������D�D�����C�����������.&&&����������D�
���#���D����B�D�������B��)�)������D�0#��18�+��������)������D�B��D����������D���-���9����D��D����D�������C�D:�#��*&8�&.��%*�&;����'(*�&;8�F+<D�
�������,��-�������������������D�D�C�8��������"��D�,�������������������B������B�D����������������D�D�C�8�����C���)������D���9��������������D�
9����-D:�)����.���������������=�B���.����B��������=�)��-�.�������FB�D��������=�)�C�.�ABCD�E������,����.�����������8�
��������A
�������������AB��A���CD�E�C�C�D�F�B�E��D����������A��CDC��A������AB�����C��������������F��CE�D�
�AB���E��C� � ��B��C�E��C� � D���E������ � ��� � ����ABA � �� � ��C� � �B�D� ���C�� � C� � ��E����E� ��C���
�E����� � �AB���EA � F���D � �E � �BB � ��� � ���� � ��E�� � � ���� ��� �BC� !""#F�� � $C% � �AB��A�� ������
����&���D������������DC�����E����D�����ED� �� � �'�AB��A��(��C���B���BA���B���D���� � �� �
�����C���F�B�E������������D�����C)��BA��CDC�B��*��������������D��������CB���ED�+E��E����
��BB�B����D����D�����,������ ���� �!""-���.D�E�C��B��E&C��E��E��B���/��E������&��F��E� ���ED�CE�
�C�� ��B�&��C�E � ��CB� � �0�����E ��� � � !""1� � �ED � CE � �E � C���DC���D � ��E�����2�����C���D ��C���FC�B�
FC��CB�������E���� �!"�����'�AB��A��#�C���B����B���������D����CF�D���E���3 � �� � ��4E�����C���
���C��*� �� � ��� � �����F��E�D����CF�D����������C���������CE������E��B�����ED�DC�����*�
F������������C���CE���C����E�������+E��E��������C�������B�E���������ED�CE&����F������CE���CB���ED�
���������� � �5B����E ��� � � !"���� ���� ���B���B�� ��AB���E��C� ��B���C�C���C�E��� � �� � � CE � ����
��A��CDC��A������AB����C��D�F���D�� �������� �!""#�6�7CFF������� �!""8��F����������������C��*�
C���������C�������������F��C���C�E���D��CE��B�E��F��E�������C�����E�B��D��������E�������C�C�ECE��
�'�CBC� � 9 � ,����E� � �11-��� ��� � ���� � ����� � ��A��CD � �AB��A�� � �������ED � �� � �E&C��E��E��B�
�AB��A��������DC&����������D����CF�D����C����'�AB��A��:�F�B�E������������D���,�F�B��A������
����� � ���C�� � ��� � ������D � �� � ����C��� � �ED � �����A��� � CE � ��CB�* � ���CE� � �ED � �����������
�E&C��E��E����$C���E����� �!""1���.��C���B���BA���B���D�����E��E&C��E��E��B���/��E��������C���D�
�C�������F�DA���� ��� � � �� � CE � �����AD��������B ��C�� ��� ���E�)�5��E� ������ �,��
��B&�) ���� � !""1���������� ����*�C�������� ����������B������&���D�FA��������CE�������%���E�B�
������������CD���� � � �� � ���BB� ���C� ���D�� ��B�����E��CE� ��E���� � ���� ���������CE�����C���
D����CF�D������A��CDC��A����* �� � * ��� ��� � � ��� ���� �;<�� ����BC� !""#�* �� �����C������
F���E � �B���� � ��� � ��� � ������ �AB��A�� � ���� � �E&C��E��E��B � �B�D�� ���C�� � ��� � �E��B���D � ���
D����CF�D����C��*�F�������C��C��BBA�������D����F�B�E�CE�����������C)��ADC�B�����D��� �$��C���
�������C����D�������������D��������C��������B�����ED�����BB�E�D����������CE���CB���,����������BC
!""#�� �4E� ��� � ����� C� ���������E�F� B������F�* � � ����CE� � ����B���C&� �����C�� ��� ��B��� ��ED=���
�����A����5B����E ����BC� !"���* �F���E�E�����������/��E�������� �B���BA���B���D����C��� .ED��D*�
�AB��A��8����������F����E�&�B��E&C��E��E��B��B�D�*�����CE���EBA�1:>�CD�E�C�A��C��������B������
�(�
��������A
��/��E��� � '�AB��A� � # � C� � ��B���D � �� � ��/��E��� � ���� � B�+�� � ��?#(1#1:* � ,�0��E� ��� �BC� !"":6�
@A!(("":* � ,��B&�� ��� �BC� !""8�� � .E � B�+��* � ��A��CDC��A���� � ��E � ��&� � � � ����� � C���� � �E�
�A��B�E+��EC� ���B��C�E� �&C� �����C�C��� �.F�BCE�� ��� �BC� !""(6 �;����C ��� �BC� !""8� ��ED��B���
�C�EC�C��E�BA����C�C����CE�����EC����������A�BCE��CE������B���E���A���EE�����������C���FC�B�B���
�,��B&������BC�!""-���0CE�BBA*��AB��A��1�C������&���D�������C%��������ECE�����B���������C��������
���F���FC/�C�����CE��AD��������B�&�E������C�����/��E������������ED�����E���C����E�����C����'��C�C��
�C�� � �ED � �� � ��&���B � �C��� � �E� ��� ��CD2��B�E�C� � �CD��� � .E � �C&� � ���B��* � ����� � ��/��E��� ������
�����C���D � �C��� �EC��B�* ��C�C� D��2��� � ���C�� � ���������� ����FB���� � �� � D��2��� � �����B��
��������E��BF� ���������� � �ED � CE ��E� � ���B�* � ���A ����� � ���ED � CE � ��DC��E��� � ��� ��EBA � �B����
��B��C&��������E&C��E��E��B���/��E������������CE����DC��E������������������� ��E��'��+����BC
!""-���ED����C�������C��B�+��� 08D"81!��������B��������B����D��ED�D����CF�D����C���F�B�E�������� �
��C)��BA��CDC�B����ED�$C)�BB��A����B�����D�����C����EBA�1D>� CD�E�C�A���BB�������4�E������C�&�D�
������AD��������B�&�E���BC+�BA�����E�����������C��C����ED����B��C��B���������������C���D��C�������
��A��CDC��A�������%�E��C��B��B���C�C���C�E��7���&��*��������+E��B�D�����A��CDC��A���������E���
������D��������C����������������E�������BB������$�������������DC�������E��D�D����D�����CE����� �
�%��� ����B��C��B � ������ ��� � ��� ���A��CDC��A���� � ���ED������C���D ��C��� �EC��B� � CE ��AD��������B�
D��2����&�E����
������������A�BC�A�DEF���E�B
������C�C�ECE�������A���A������ED�����������4C����+�E����B�D�������E���������D�FA���F����
F��������&�B�������F�A��C�E������C�����F�FCBC�C�����C�������� ��DDC�C�E�B��AB���E��C�����+����
�C������B����C���&��F������������������B����*�����F��E��CE����D���C����E�C���E���C���������
���DC������&�BC��2$�C���9�������11:6�����C������BC�!""86��C����D�����BC�!"�!���G������C�&�D�E���
��/��E����F��E��CE���������F��������������B��4C����+�E�������*��C�����F���������������E��
����B������+E��E���B��C&��� ����F������������� ������ C� �E����C���F�������CE� ������FB�� �����
����)��E��AB��A�����������F���FC/�C��������C�����/��E������������ED��E������CD2��B�E�C� �
�CD�� ��� � ��� ���CEF����ED �����5� � �C��� � �ED ��E � ��� �C��� �'��C�C� ��C��* � �����C���D ��C��� �EC��B�*�
�(!
��������A
��DC��E�� ��� ��CE���B � ��F�������� � .� � �B�� � ��E��CE� � �E ��E&C��E��E��B � ��/��E�� � ����&���D � �����
�C���FC�B ����� ��� �D��2��� � ��BD2��� � ��DC��E�� � ���+C��C�� ��� �BC� !"�"�� �����)�� ���� � �BCDCE��
����������C���EC��BB�B�������EC�����C��������B���BB�������BC&������BA��ED����D�FA������A���C���E�
F�����C����DB����BC�!"":6���&�BC��2$�C���9������!"�"������A������F���&�D�CE���CB�*��ED�CE����CE��
�ED�������������E&C��E��E������&�BC��2$�C���9������!"�"�������)�����������E�C�B�����ED�����ED�
��� �C�+��A����DC&���C�C���C�E��ED�����DC&����E���F�����E�EEC+�E����ED�FC+�E��������C�� ����BC
!""8���������C�C�ECE�������C���AB���C����FC�������ED�D��ED���E�������B���B������+�������D��
$�&���B ����DC�� ���CE� �DC�����E� ���B���B�� ����+��� �B��� � C� ��C���E������C��C��B � ����� �F�����E�
EEC+�E����ED�FC+�E�����C�C�$������EE�9���&�BC��2$�C���!""D6�����C������BC�!""8���4E���E�BA�C��
F���D��E��-$���������&�BC��2$�C���9�������11:���ED��E��E�BA�C��F���D��E��C%���B���B������+��� �
�;C�����BC�!""#�*�����&���D�����E�����������������A�����C��������B�D����E��C����D�FA�����)���
�ED�4C����+�E����C�������F�)�������C������B�D���
�E����BA�DC&���CE��BCE�����������D���������AB��A�����AB��A�����9�!��F��E���D�F����������
4C����+�E����ED�����)����B�D���������AB���E��C����C�C�E�����&�BCD���D�F����FA�&��A��C���
F������� � ������ ��ED �F�A��C�E ������C�� ���F�FCBC�C�� ��� � ��� �E�D��� � ����� ��AB��A�� ������
CD�E�C�C�D����������DC�����E�����B����'�AB��A��!����� ������E��D�FA��C�����B�E��� CE����B��
CH-C#��ED��#��B�E���CE����B���I:C!��ED��AB��A����FA��(��B�E���CE����B���I:C!������*����A �
����BD�E���F����C���C����/��E�����.������E���D���������A�DCD�E�����D����B�E��F��E������������E�
����E�������C�C�E�D������B�E��F��E����������C�E�FC��������EBC+�BA����������/��E�����������ED�CE �
�EC��B � ���B�� � ����������C��� ��E � ��� ��CD2��B�E�C� ��CD��� ���� ��%C���E�� ��� � ���� �� � BCE���� � C��
CE��C��CE�����E���B���BA���B���D���/��E��������������E��D�CE�����5�EF�E+�D���F�����������/��E���
�C�������F����F,�$���C���������-8>�CD�E�C�A�*���C���C���B��������B�������AB���E��C��E�C��F�������C
�C�������*��������ED���������/��E���CD�E�C�C�D���������CD����B�E+��FA���B��CBB�������AD��������B��C���
�E � ��� � C��� � '��C�C� � �C�� � ���+C��C�� ��� �BC� !"�"�� � ��C� � ���C��B�� � ��/��E�� �F,�$� ��C�� � DC&�����
��A��CDC��A���� � �ED � ���� ��������� ��E��� ���BA � F��E��CE� � ��E�C � ���� � ��� � ������ � JA���A�����
�AB����7CFF��� ��� �BC� !""8� �F�� ����� CD�E�C�A ������������� B����1"21�>�� ���������E����� ���C��
�E�C�E��BCE�����������������������������DC&���C�C���C�E��C��CE�����EEC+�E���C����������B������������
�(D
��������A
���B�% � �&�B��C�E��A � �C����A� �7AD��������BC�� � ��� � �����D � �� � F� � ��ED�E� � D��CE� � ����
�����F�C�E��ED����BC������B��C��B���C�D�����F����9�������CD�E*�!"":����������������������������
��/��E�����������������AD��������B��E&C��E��E��C�������CFB���C�����B�E���&�B��C�E��A��C����A��
������E�BA������� ���/�C��D� ���F����� ��ED�����ED��AB��A�� ��* �!��ED�D � ��C�������� �����E����
�E�BA�C������BD���&CD��C�����E���B�����ED����CBC������������E�C�E�����������E+E��E�����EC����
������E��&�B��C�E��A��ED���E��C�E�B�������C&���ED��B������C������������������C�C�ECE���C��CE�
����C�+��A����D���CE�
������E������������FA����A�D�DA�A�A�A�B�E�
��C� � ���DA � ������ � ��� � �C��� ���B���B�� � CE&�E���A �D�DC����D � �� � ��E��B � F���B � BCE����� � CE ����CE��
����A�������'��&C������B���B������DC���������CE����E�C�������D��E������E�C�����E��B�+CE�D����ED�
��A��CDC��A�������/��E����������E��D��EBA������BB���F�����������D����CF�D���E��B�DC&���C�A��F����
���BC�!""86�,����B&�)����BC�!""1������������DC���CEDC����D�����������E&C��E��E��B�4�E������C�&�D�
������AD��������B����B���F�B�E��D���CEBA���������A������ED�F��CDC��A������7���*������������� �
��A��CDC��A����2���C�C���C����������&CD�D�����������B���������������DC&���C�A��������F���B���E��B�
BCE��������ED��B��*��E�%����DBA*���BC�C�D�����DC&���C�A��������EC����F��E��CE��F�����������EC��B2
��E��B � DC&����E���� �����&��* � ��BC�C���C�E � �� ������A���� � �ED �F��CDC��A���� � ��/��E��� �����
BC�C��D������DC&���C�A�D����CF�D�FA���C����������C�����C����C�CE�B����C��D����E����������E�����%�E��C� �
�B�D��F���CE&���C������D����E����B&�D�F��E������
@��������������ED��A������������������I(�������G�A������BC�!"""�*���C���C������E�F�����D�������DA�
�B���BA���B���D����C����EB��������������EC������D����B�E��F��E������.ED��D*��E����/��E���������
��� � E��BA � D����CF�D � �AB�� � ��A���A���� ����� � ����C�&�D � ����� �G� � �BC�E�D ��7! ��C�� � ����
��A���A������E&C��E��E��B���/��E����BC���D�CE��C����D����BC�!"��*��ED�B��������E��=D�����E��D�
���B������E���C������*������������BC�ECE��������BA��4E�������������ED*�����������������/��E����
DC&���� � ���� � ��� � ����� � &���C�E� � ��DC�C�D � ���� � $�-���A��CD* � ��� � �B����� � &���C�E � F�CE��
$�-!���A��CD��0����%��B�*�����������������A���A�������/��E�������D�CE������AB���EA�����E��
�((
��������A
�E����������C����������ED������E����D��CE����B�E��F��E���DC&������FA���������F��C���C�E���ED�
�E��D�B��C�E������*������EE������E�B�D������������A���A�������������E������������AD��������B�
�C�������E����0��������AB���E��C���E�BA���*�������B�D�����EE����F�����D�������A�D��E�����BC�E��C���
��A��CDC��A�������/��E�����E�����I(����C�E��0����%��B�*��F�B���������B�������B���CCD����������
�����&���E��DDC�C�E�B���BC%� CE���C��I(����C�E* � ��������B�F�E�����E�F�� �ED �!���������F���BB�
�����F�)���������C��BA�DC&����E���ED��C������CDC��D��E������������C��I(����C�E��G�A�� ����BC
!"""���@��C��������������*��ED��������E�����CE*���C���C��������C���FB�������BC�A���/��E�������� �
F��E���D��BA���
�����A�E�������E�DEF���E�E�A�EC�
��� � ��A��CDC��A���� � DC&���C�A � ����C�&�D � ���� � ���B���� � DC�����E� � ���CFB� � �&�B��C�E��A � �C����C���
��E���ECE��������B��C�E��C��F�����E���������C�B ��ED����CE�����C��� �����DC&���C�A��F���&�D� CE�
�AD��������B�&�E���C��CE������D�E����C�����������������C�A����������A��CDC��A����� �����D������
��FC������EDC�C�E����E�CD���D��E�����B��C��BBA������������B�����%�������5B����E�����B��!"�"���4EBA�
����4�E����C�C*��AB��A���(��ED�#*��C������������&��A��B���BA���B���D����D����CF�D���������C�B����C���
�C���������F��E�������C������BD����&���������A�����C����������CE�2��������C�B����E�C�C�E��CE�F����
DC����C�E���������D��F�������BC�!""86��C����D�����BC�!"�!��������������4�E����C�C���AB��A���8��ED�
1*��C�������* ��B���BA�BCE+�D�����E&C��E��E��B ���/��E�������ED�CE�������������E&C��E��E��*��B���
��������C���A�����C������A������B����A������C���������B��+����D����C�C�E���� �F���B���E�C����
������C��E���B����D����CF�D���/��E�����ED��CE�BBA*�����4�E����C�C�� �AB��A���:��ED�-*��C��������
����E��DC���E����B��C�E��C���C���D����CF�D����C����ED���������C�B��E&C��E��E��B���/��E�����G��
��+�� �����A�����C� � ���� � CE ��DDC�C�E � �� ����������CE�2��������C�B � ���E�C�C�E�* � ��� �DC����C�E����
���C�����&��B�D����B�E���C���C��B��C�E���C�������B���CE����C��C�E��&�E��� �0�����������E�*�E���
�E���� �D��� ���� ��&�CB�FB� � �� �D�����CE� �������� � ��� �������E�� ��� � ��E�C ��������D � CE ����CE��
�E&C��E��E���,����B&�) ����BC� !""1����� CE��������������C����D� ����BC� !"�!�� ������EBA�������D�
�A�����C��C����������A�������D�CE��/���C���E&C��E��E���F��������������BA�DC&���CE����E�C�DC�B�A�
��)�����C����FCB���������ED�B��+����C�B������DC�����B�� ��������BC�!""#����
�(:
��������A
��� �����C�C� �F���&C��� ��� ���AD�CDC��A���� � C� � BC+�BA ��&�����C����D �D�� � �� ��E ��E�������E��C��
�����C�E�� �.��C���B�������������BC����������������A��CDC��A�����B�A��E�C�����E����B��CE�E���C�E��
�A�BCE� ��ED� ���A� �C��� ��B�� ����������C� � ��E��C�E� CE �D��2�����AD��������B �&�E��� ������ �����
+E��E � �� � ���F��� � � � ���C��2�C�� � �C���FC�B � �����EC�A � �0C���� ��� �BC� !""8� � ������CE��
�������������A* ��C�C*� �C���F���������D���D������ED�� ���������&�E� � �B�CD� � ��� �C% � CE����EC��
���F�E�����������������������C��)2,B�D������BC�!""8�������*�����EC�����������&�CB�FB������BD�F��CE�
����C�C�E��/��E�C�A���������CE���B��C�E����������A�����;E��B�D������E���C�E���A�BCE��CE�������
����A������C�����E�A�F��������E�����B�����������E�C����BD�F��C�����E��CE���C���������
���ABCDEFAB
��C���C���������BB���D��E�CEC�C�B�D����C�C�E���������&�B��C�E��A����������������E��B�+CE�D���CE�
�AD��������B � &�E�� � �ED ����CE� � �E&C��E��E��� � �E � CE������CE� � DC&���C�A � �� � ��A��CDC��A���� � C� �
������D*�������CE��������������������C�A������D����C�E�����������C���CE���C��������ED���CE����CE��
�����A�����C�������&���B����CE�2��������C�B����E�C�C�E��D��CE�����C���&�B��C�E��A��C����A*��B�E���C���
�&CD�E�� � ��� � �&�E�� � �� � ���CE� � DC&���C�C���C�E� � 4���� � C�+��A��C� � ��/��E��� � ���� � ����C�&�D*�
��&��BCE��������FC/�C���������E����������)����0CE�BBA*���E�&�B�BCE�������������&���D���C����CBB�
��/�C��������������DA����D�����CE��C�����%�E��C��B��B���C�C���C�E��ED�FC�B��C��B��ED��A�C�B��C��B�
���������C��C����
��������A�B��CD
G�����E+��BC%������ED��CB�DC����B��ED���������C����B�����������E������C�E���������B�E��BCF���C����
E�F�E����D
�DB�$�*�$C���E��5F*�0��������*��ED����E���*��ED����E�4�*�����B�������������E����C�����B�&�B�
�B���C�C���C�E� ��� ��+��A����� �C��� �����C�� �E� ���� ��%�E��A� ��� ���C����� "�� #�F���B ��
!F$�������%�������B����:!3�D11K(:��
�(#
��������A
F���� @*� 7���� �*� F���E� �*� F����E� 7*� @��CD�&�� �*� ��� �B�� ������� ?����� ������ D��CE���� ��E��B�
DC&���C�A� CE� ���� D��� ����E��� &�����E�������������B'�������( ���B�����B ��������� !8(3�
D"#1KD"88�
F�E��E� @�*� ;�����2�C)����C� .*� ,C��E� @ *� 4���BB� *� $�A���� CG� ������� 5�EF�E+�� �F�B��� ���E�
��������D13�@D!2@D8�
FB��+��BB��������������0�E�C3��*�!*�D�����:����CBBC�E����C��L���������#�F���B���������1-3�(!#K
(D-�
�������9�F�BD����$,��!"�����������C���E���C�CE������EC��B���ED���E�C�CE������A����3�C&�B��C�E����
0�E�C��ED���E��B2BC+������EC����H.I��'M���B���$�9�GM�����A��� *��D���$�CE����7�CD�BF����
@��D������,�ED�E�����?��+�
��&�BC��2��C�����9������C��������������B�)��E�������E���C����B���D�������������E��E����������
�EC��B�*���E�C*��ED�����E��B���BB������&�����E�������������B'�������(���B�����B��������
!#�3��K#�
��&�BC��2$�C��� �� 9� ����� CC� ������� '�AB���EA� �ED� �&�B��C�E� ��� ������E�DCD�� �'����)��3�
����)���3�E�����E�����ED����C����&��������#�3�:(1K:8#�
@����E� $�� 9� '������� ������� ��&�B� +CE�D��2B�&�B� ��+��A��C�� DC&���C�A� CE� �E�%C�� �E&C��E��E����
&�����E����������������B���E�����'�������)C'C�C�113�-D!(K-D!1�
CD����F�I'*�;A��B��@�*����+���*�D��I����5���)���9�$��CE��,��������F�E��C����+��A��C��DC&���C�A�CE�
����5��A����F��CE��AD��������B�&�E���E&C��E��E���&�����E����������������B���E�����
'������������)����E'���������������113�8#:-K8##!�
CD����F�I*�4��C�G*�F�E��� *� ��E�$*����C���E��*�����B����������'���C���E��C���FC�B��F���&����A�CE�����
���C���� F��CE*� ���CFF��E�� .�� 'A����/��E�CE�� &�� $�E���� CE�C����� CE��� ���C��� �C��E����� "��
*'%!+�F���B�:3��D((K�D:#�
0C�������*���+�C�;*�,��F�C�����������7AD��������B�&�E������A�������D������������!"3��(2!D�
0�����E�;�*�����CE��'*�;��+C�@*�,AE�����*��C������$*�����B���������C&CD�E����������A��CD��D��CE����
��E��B������EC�C���CE��C��2�B�&��C�E���CB���&�����E����������������B���E�����'�������
�����)����E'��������������C��"#3��-D�:2�-D!"�
5B����E�07*�$���CD��$;�9�����E���I����������E�)�����C���������E�C������������&C&��CE��%������
�(8
��������A
�����������B��E&C��E��E��L�!���������B����(3(�8K(!:�
5B����E�07*�;<���0�* ����E� '* �'C���D�;* �5����E���������B� � ������ �J�����C� ��������E�C � CE�
���CE������A�����N3�����&C����%�������E,���-�������������#!3�D-DKD1D�
5�CED�E� $� 9� 5�����B� 4� ������� �� $C�B�*� 0���*� �ED� ��������� �B���C���� ��� C��C����� ,�����
'�AB���EC���FA���%C����,C+�BC���D��'������������B���:!3#1#K8"(�
7�F�� ���9 �GO�������O���� �5� ������� '��CD���FA����C&��C�E������CE����CD���C����4��E���C*0��$�
��������3�C�BC���C�E������������C�CE����BC����'�������!-�3�#8"2#8!�
&�E� 7�EE�E� C *� ���CP� G*� �����&�BD� �'I*� 5�E�� 7 � 9� ,��EF���+� 7 � ������� @���C���2@��ED�E��
@�&�B���E����������C���FC�B������EC�A� CE��E�C%��C��E��B�$A����N3�A��BC���C&���E�BA�C��
FA� @�E����CE�� 5��DC�E�� 5�B� CB����������C��� ���B��E ��E ��.���������B ��������B���� #:3�
!(8-K!(-(
7��+������� @,� ������� ���� ��E��B� DC��E�C�E� ��� FC�DC&���C�A3� ���EC��D�*� �C�EC�C��E��*� �ED�
��E���&��C�E��%���B�����B��������1:3�#(�2#::�
7��+������� @,� ������� ���� ���EC��D�� ��� ��E��B� DC&���C�A3� ���� �*:� �CBBC�E� ���C��� ���C�����
��&C�C��D��%���B�����B����������":3��(!!K�(D!�
7�BD���������������BB�����BB�����3��+�D��ED�2����C�C�� ��E�C���C���D����2��������C���������"��
��������B��.��-�(83�(:�K:�:�
7CFF����@$*�FCED����*�FC������� 0*�FB��+��BB��*���EE�E�'0�����B������������C����2B�&�B��AB���E��C��
�B���C�C���C�E��������0�E�C��%���B�����B������������3�:"1K:(8�
7CFF����@$�*�4���E��*�5B��)���@*����E��*�;C�+�'�9��CB���E��7��������'�������� CE���B���B����ED�
�����B��C��B���%�E�DC���&��A�CE�0�E�C��ED���C�E�����������B��B���C�C���C�E�����E&C��E��E��B�
��/��E�����,F���B���B�����.��-��!:3�D-K(8�
.F�BCE���FG*�@��F��CE��*�;����C��*��CP+�F�����*�F�����������B���������7��������C���CE������C�E��
F�����E� ����������� �A��B�E+��E� �ED� ��A��CD� ��E�C� ���A��CDC��A������� #�F���B �� &����/
B����("3�(D8K(:D�
������?*�'������@*�,��ED�����*�ICB��BA����9� �A���C����������B���B����AB���E��C������������A��C2
DC��A������������������CBC�A�����B������������B�D����CE���A��CD��A������C��������E���#�F��/
�(-
��������A
�B���������8-3�DD#KD:"�
����� �?*� ;����� 0*� $������ �,*������EA� 'F*� 7���������� I*� ��� �B�� �������� ����E������CE�� ���� ���BA�
�&�B��C�E����0�E�C���CE�����C%2��E���AB���EA�����F���((D3�-�-K-!!�
����� �?*� ,������� '�*� ,�E������ C*� ��)B�A2$��ED�CD��� $C*� '������ @�����B�� �������� �� ��B���B���
�AB���EA� ��� ���� �B���BB���D� ��E�C� ���A��CDC��A������ �ED� D����C�C�E� ��� �� E��� �AB���
�FB�����B�DC��A�������%���B�����1-3�-#"K-8��
�F���P��$*������+������*�F��E+����9�$����+����������0�E��B�DC&���C�A�CE��%A��E2D�B���D����C�E��
��� �������FC�E�$��� ��&��B�D�FA� �������D��E&C��E��E��B� ��/��E�CE�����FCE�D��C�����B�C&�2
�C�E��,!%'%�������B���!��B����8�3�D11K(�!�
�E����@�*� 0��E� .*� 5�D�B��� �*� C��E�� *� F���� @�����B�� �������� @C���&��A� ��� E�&�B� CE�����DC����
��������D��CE���������E��B���������BC�������F���(8(3�!""K!"D�
�E��� �@�*� �C����D�� ��*� 7��+������� @,� 9� F���� @� �������� I�BCD��C�E� �ED� P���C�C���C�E� ��� ����
�AB���E������������������AB��E�&��*%�,F��F��!3��8DK�8:�
;����C��*�F��CE��*�.F�BCE���FG�9�@�E+�C��������'����C�C����A��CD�3����C�����������E��A��B�E+��E�
�����EC�C����ED����D2��F�DAE��C����0�E�����B�����:8-3���DK�!1�
;C��C*�$C���E��5F�9�5������,C��������C&�B��C�E��A���B��C�E��C�����������E�D��CE�����D������
��%�E2�C����E�BA�������#�E��B�����E��D�D���E����%�B��FB�����B�����E!.�BF�����!D3�!(::K
!(##�
;C�+�'�*���EE�E�'0*��CE����@G�9�$��B���� ��������� ��������������%��������"���CDC�C�E������2
��BB�'����*�����F�CD���
;�<�����*�;�<�����*�G�B+����*�$���+CE����7�9�$��<��B������������'�AB���E��C��������E���D��������
�A������C����ED��AB���%�E��A������F����B����A�����C)�B���E�C�������AB���������C���B�&�B��
��-�����B�������1D3�18"K1-(�
;<���0�*���C���.*���BB���@5*�,�C����%2@��5����$�9�5�CBB���,��������'�AB���E��C�����CEC�C����������
��+��A��C�� ������E�� ��� ���CE�� ������B���*� !F�������� E��$����� �G�C����� ���E��� �ED�
�(1
��������A
������E�F���B�������������E��������������B��B�����!83��#:2�-(�
,��+CE���*�FB��+��C�BD��5*�F���E��'*����EE���*���5���C��E�'�*�����B����������B����B�G��ED��B����B�
H�&���C�E�!�"�����������������!D3�!1(8K!1(-�
,����B&�)��*�F�����D�5*����Q�$*�F��FC���5�9�I�ED�E+���E��A���'��������0�E��B�DC&���C�A�CE�D��2
�����AD��������B�����A����������B��E��E!�.���������B%�������B����8:3�#(�:K#(!��
,��B&���C*�F��D����*���RB��*�����C��� 20*�IC����BC��C�C�����B���������EE&�CBCE����E��B�)���B���BB��������
���F������������������C����+��A����3��&CD�E������������B���B���DC&���C�A����DA�CE���D���
�����C��C��B�+���!�.���������B%�������B����13�#�K8��
,��B&���C*�������B�F*���FB��D���9�$C��2���ED�����������������B���B���DC&���C�A���������������C�2
���+��A����� ��&��B�� �C��� �������E��� ��� ����C&�� ����C��CD�� CE� ���� B�E+��E�� &B�' ���� D3�
�!D!(�
,����E���*�STUVWX��*�YZ[\]Z���9�@�F�����@��������5�E��C��@C&���C�A����$��BB�C�+��A�����CE�,�+���
@C����CE��FA����C������C��$����������B��E!�.���������B%�������B����8�3�:1D:��
,������� '�*� '���BB� � *� ������CBB� '0� 9� ����F���� 5� ������� EB������������B� �ED� ��B���B���
�AB���E��C��D�BCE���C�E������E�����D��*�������C)��ADC�B������A��CDC��A�������%���B�����B
����������"3�-1-21�:�
,�������'�*�'���BB�� *�F����@ $*�������CBB�'0*�G�+��C�BD�G$�����B�����������C)��BA��CD�B��2��E���
��D���CE���A��CDC��A������%���B�����B����������!3��"D�2�"(-�
,^�)2����_��'*�I��������+����9�����C���@��������C�+��A��C��DC&���C�A������C���D��C������F�E�����
�ED� �B�CD2��������� CE�������� CE�,�����C�A��AD��������B� �C�BD��!�.���������B%�������B����13�
:(#K::(�
�����E���*�F�B���Q�I*�5�CBB���,�9�'�D�^�2�BC^����������'C����+��A��C��DC&���C�A�CE��E��BC������C��
������B��C������DC�D�FA���B���B����ED���B���CE������������,!%'%�������B���!��B����:"3�
!D�K!(D�
����C���@*�&�E�D���7�AD�E�$*�F����@*�,^�)25���_��'*������C�����B���������5B�F�B���+��A�����AB�2
��EA3����FCE�D����BB2��ED�B����2��F�EC���CF�����B�@�����������������E��ABA������C)�2
�:"
��������A
�C�*������C���ED�C%��&�����%�B��FB��&��B�����������E!.�BF�����((3�!::K!##�
����C���@*�&�E�D���7�AD�E�$*�F����@*�,^�)25���_��'*������C�����B���������5B�F�B���+��A�����AB�2
��EA3����FCE�D����BB2��ED� B����2��F�EC�� �CF�����B�@�����������������E��ABA������C)2
��C�*������C���ED�C%��&�����%�B��FB��&��B�����������E!.�BF�����((3�!::K!##�
���BB��� 5��9� $���C�� '� ������� 0�E��B� FC�DC&���C�A3� ����� D����� +E��L�G���� ��E���� ��DC��L�
���E�.��������E������.�������#3��K:�
����E��?*�����������*�7���D��?*���E������*���+��C�7�����B�� �������0�E��B�DC&���C�A� CE�D��2����
��DC��E���K���������E������E�&�B���E��B��������,F���B!��B����D3�D�#KD!:�
4`F�C�E�7C*�'����E�� ,*� ��+��E� �*���E��B&�� 2��9�IAB��BC�����������0�E��B������EC�A��E�BA�C��FA�
B����2���B�� ��/��E�CE������E&C��E��E��B� ���B�������B��E��E!�.���������B%�������B���
8�3�::((2:::"�
'��+� �$2 *�'��+�F2 *�'����I7*�?��E�@2�*�;C��$2;�����B����������C�����+��A��C��@C&���C�A� CE����CE��
CE&C��E��E��*��E��E�BA�C�����$�������,�A���$�DC��E������������C����$����"��#�F���B��%�/
������B����(#3�!((2!(1�
'�CBC��7�9�,����E�� ��������7������D�����D����AB���E��C�������L��F�����D��������1�������
��E �.�B�������-3�#�#K#!D�
'������ ��*� $���D�� �G*� �C)&C� ,*�����CE� �'*� $���CD�� $;�����B�� �������GCD�����D� �������E��� �ED�
�AB���E��C�� B�����E�� ��� �� ��CB� �B�E�� ����� �DD�� �� ���CE�E�� E���F��E��� ��� ���� ��E��B�
��������BC����%�B��FB��&��B�����������E!.�BF�����(#3�#D:K#((�
'���D��@�9����ED�BB�;����������4@C,�C$�3�����CE��������D�B����@�����F��C���C�E���������������
���B��������������(3�-�82-�-�
'���BB�� ��������,��+CE������A��B��A��C����� �E��������K����BC�����������CDC��A���������C&��CE�
�����E&C��E��E���%���B�����-:3��2!"�
����E� �*� ������%� 5*� ����C��� @*� �aBB��� �'*� ,^�)25���_�� '� ������� $�EBC���2C%���D� FC��CB��
�C���FC�B������EC�C�������������BBA����C���E���������E�FAB� .�EC)CE�2��DC��C�E�,�&�B���&2�'
�:�
��������A
D�!�#3��!�8#(��
���C��)2,B�D���C*�$��E+����9�5����E�����������FC�DC&���C�A��ED�FC��������A����7AD��������B�
I�E��$��C����D������������!"3D"2(��
��D��+���@������������&C�����E���E��B��&�B��C�E�F���D��E�@������+�����ED���������CB������D����/
��������%�������B�����:D3��!:K�D"�
�C����D�����9�F����@����������B���B��������ECE���������2BC&CE���C���FC�B���+��A����3�DC&���C�A��ED�
DC���CF��C�E���CE��������2�E�BA�C����F�����D��������%�������B����-3�!("K!:!�
�C����D�����*� �E����@��*�,��E��D�5�9�F����@�����������CE����E�C3����C�����B��A��ED���B���B���
DC&���C�A�����F�B��.��-��%�����'�������(3�(1:K:!!�
��F����0�9�������CD�E�������������B�����������������&����������'�����F�C�E�����E��F���D��E�
�CBC��E�C�������CE������������F���((D3�1#1218!�
��E/�C��*�0�9�7��B��EF��+*� '����������F�A��D3�F�A��C�E��AB���E��C��CE����E����ED����C%�D���2
D�B�������������������13��:8!K�:8(�
���BCE���*� ��%� 0*� ���)2����CE�)�;*� .�����+�;*�5��B���52������B�� ����������������C)��A�����3�EE2
�����CE���E��E�C�E���B��������FC/�C�������CB���E�C��'�������DDD3�-8#K-81�
$���D���G*�����CE��'*�,C��E�@��9�$���CD��$;��������$����E�B�DAE��C��������&C���BA��E+E��E�
��E��B�BCE������CE���ED�����CB���'������D"�3��D:1K�D#��
$���C�� '�9����BB��� 5�� ������� �E� ���C����� ��� ���� B����� BC�C�� ��� �B�F�B� ��E��B� DC&���C�A�����E/
�.��������E������.�������#3�11K����
$C���E�� @�*� ����� �?*� ��A��� �0� 9� ,�E������ C� ������� ,�F�B��A����B��*� �� E��� ��D��� CE� ����
��A��CDC��A������%���B�����B�����������D3�(:"2(#"�
$������EE���9���&�BC��2$�C������������'�AB���E��C���E�BA�C�������+��A�������CE������2����+���2
��CE�7�1"��#�F���B��%�B��FB��!.�BF�����:83�("-K(�1�
$����+���9�C���CE�$����������&�B�C�+��A��C��,CE������.E�����D������$��BB2$�F�EC��������E�BA����
��� 4%A��E2@�B���D� ���CE�� CE&C��E��E���� ���B��E ��E !�.���������B %�������B���� #13�
!#:82!##D�
�:!
��������A
$����+��*�7�A���D�F*���AB���5�*�I���B����9�C���CE�$$������������B�CB��'��2�C����������������2
����������C�����+��A��C��DC&���C�A�CE��E&C��E��E��B����B����&��������:83�D�K(D�
��+C��C���;*�;�+C)����*�?���CD����9�����A���������������B���B���C&CD�E��������'�AB���E��C��BBA
@C&����D��CBC������������C&��CE��C���FC�B���������@��2$�����BD2$���$�DC��E���#�F�/
��B!F $�������%�������B����:83�8#2-#�
���B����@*�I�E�@�&����,�9�ICB��BA����������������A������AB��A�������&���D��������5�B�������%2
C��� �����E�� ���� ���� CD�E�C��B� ��� �E� �E��B����D� D��2���� ��E��B� �B�D�� ����� ���� '��C�C���
,F���B!��B����:3�!8"K!8D�
I�ED�E+���E��A���'*�F�BD����$,*�,�A&�B��*�$����)�+� �9�?��E�� 'G��������C%��E�C&����E��B�DC&���C�A�
CE�B�E���������'������!1:3�!":��
GO�������O���� �5� ������� C&�B��C�E ��� � ��� � �C��� �����F�BC� � �A�B�� �&�����E���� �� ��� �������B
���E�����'��������)'�-83�!""2!"(�
G��DB��@��9�I�E�D���'����E�G7��������FC�DC&���C�A*�����A�������E��C�ECE���ED��F�&�2����ED2
F�B��2����ED�CE����E�.��������E����������F���������(�����������E���������.����,������
�*�������$�9�.E������C�'*��D���4%���D�EEC&���C�A�'�����
G�C�����*� ������?*�4b@�EE�BB�;*��������� *���E�F��?�9�$��CA���� ��������'�AB���EA��������JA2
���A�����F���D��E�E��B�����CF�����B���/��E���D�����%���B�����1-3�-8!K--(�
G�A��� *�@���CP+�'*�&�E�D��'����?*�'C��E�5*�����������'������B����������������C&���E�BA�C����������
���E� D"""� ��/��E���� ��&��B�� ���� �%C���E��� ��� ���� ���D�+E���� CE� ����� I(� ��� ��+��A��C��
���BB���F�EC���CF�����B�������F�B������E����������!-3�(#1-K(8"-�
J��ED�����*�F�E��� *� F��E+���*�F������; ��9�$����+��� �������@C&���C�A����C����������C�����+�2
�A����� F�B��� ���� ������BCE�� ��� ���� �E�%C�� ���C����� 0P��D*� @�E���+�� ,!%'%�������B���
!��B����:-3�(8#K(1��
�:D
��������A
�:(
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
�����������A�ABCDA
AE�FAB�FA�E��A�
���
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
���
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
��������������������� �!���!�� �"��
D����#$ ��%��&$�� ���'�� �!���(������!�� ��� �%���)�� �%�����*�� )�������������������+������
��,� )� ����%�&���������*��%��)������� �!��� �-��� ��%���.�C��'�/��! ����%��0���0��������%�� �
�'� �%���� ���%�� ��!��������%�&��������� #��!���� ��0��.�����'�� �*�� ��������#���#����!�%���"���
%���&� �������������!��%�� ���/����0�!#$��)����� ������ �%���!�� �1*��&���%��(�����%��%�������
2E���3�(��*�4��5��%��)�F�(�6�%...7) �������� � ��0�'�� �$ ���0����&�� ����*�� ����%�/) ��� ��� �� �
��&(���%��!�(���� ��������������#$ ��%��&$�� ��� ������������ ����8���%��&$�� ��� �C���&$�� �.�
��!��%�� )�!��%�� �����%�/�%����-����������)������ �� ������������ ����� ��!�� ����������!#$��&�
%���#�&!������)�� ������ �%���0������%������� ��� �!��&���%'�����#����������������������������� �
%�"���� ��� �������*��� ���������$� �&�0������ ����� ���.�F����/�&!��)������� ��&�� ���0���%����
��� ���� �����$� -&��) � ��� �%�&������ � �� � ��&&���� � � *����0�� � 2E��� 9���&�� �EF �CD�) � :;;<7 ����
�������0�'����!��"���� ��� ��"�����+�%�**���� ����"���/�%��������������/� ��!#�0������� �0�������
���� �%����=����%�"���.�D'�(,�� �*�%���� �� #-������ ��%��%������������%�"���� ��"����������&�0���
��"������&�� ����%����%�������$� -&���#$%�� #��&��/�&������!��*��%�)������!���������$�� �� ��
%� �� ���%��������&�����/.�D'����$���%���%��������( ��������������� ���'� ����� ����%'����(����%��
%�������!�(��0���%����0�������&�����������)�0���%��������� � ��� ���������!��%�� �!���+� �� ���
��� � � �� ��. � C����) � �� � � � � � � ���� � ��� �(��� � %� � %������ � "���� � �!���*�0��&�� � ��� �&��0������
&������������*����0���������&&�� �� �������!����������� ��� ����%��!#$���������� �"���%���������
%������ -����%��0���� �.��� ��!�� ���%���� ����%���!�����!��/������ � ���������������%���� �� #-���
� �!��!������%���!���!�� �"���%�����#���#�.
F>?6?��1�8�@������ ����!������������$����!#$������ �0����*����0���
D� �(��� �%� �%������ �F>?6?��1�8 �� �� � �&��� ��� �!���� �!��� � ��� ������� �%�� � ��0�������
*����0��� � %���� �&�� � � �����(��� � !��� � %�� � ����$��� � !#$������ �0���. � ���� � ����1�� ��% � ����
�����&�� �%������� �������%����-����!�� �����%'��*��&� ������"��� �"���&���������&�� �0�������
��A
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
��0������������ ���� �=�����"��1+1"���%�������0���� �.�A���**� )�������1������ ��/ ��� ���%'����(����%��
%�������!�(��0���%������0��������������� �%�!������������/�&���%���������� ���������� �%�0����� �
%�� ����������&�� � �%�����! �*� ���&&��!�� ��/�&!��) � �'�������&��������. �C���� � �� �$ �� �������0���
0�'������0����������������� �������� ���)����0����'��"���%��!���������"�� ������� ����� ����%����
������ ���� �%�.���!��%�� )���� �������������������� �!���%� �� �(��������0�'���������&�� �������
�"���8DC�E���� ��������)����0���!�� ������%���������!��!��� ���)�� ������������� �!����! �(����0���
����0�'�� � ������&�� �&�� �!�� � �� � �**�� ��. ����� � �� �� � ����$��) � !�-� � %� � :;B �%�� � ��0�������
����!�������!�-�����*�� ������� �&� �0��)��� �� ������ ���)����0����� �����C���"��� ����%���'� ��� ��
%��(�����%��%���������&&��F>?6?��1�8.��������� � ������ ��������&�� �����!���� ����(������!�
!�����&!�� �� ��%���(��0����%����0�������0�'�&������.
F�������� � �� ��� � (���� � %� � %������ � %� � �� � $!� � �/�� �� � � � ��� � ��&!��&�� �����. � D���
&� �"� ���� � ��� � ���0������ � ��!���� � ���� � ���� ��� � ��� � ����C � ��&������� �&��� � ��� � ��*��&� �����
0�'��������� ������ �!��"�� �D ���%�� ������+�%����������%�**���� �.�E�� �*���)��'�(,�� �*���&&���
�� �%'��%���+��������� ����� ����%�����%�"���� ��*����0���0��������� �%'���!��� �%��"��� �/���&�0�� �
�� � !#$������ �0��) � � � �'�� � �� � ���� � %���� � �"�� � ��� � �&!�� �� �� �&�%�*��� ���� � ��(��� � !�� � ���
�/���&�� � %� � �-��� � %�� � �#�&!������ � ����&&�� . � A� � �**� ) � ���� � ��&!��&�� ��� � � "��
!��(�(��&�� �!��&� ���%'�������������%�����! ����%���� ��%�"���� ��&���������&�� �%�����"���%�� �
�"�� � (������! � !��� � %� � ��(�� ����. � F�� � �/�&!��) � �� � �� � ���"��� � �#�&!����� � C���1 � ���
8���%��&$�� � ��� �%���� ) � �� � ��0���E��� �%�� ����� "� �!��&� �� �%�� ��� �� ��(��� ���� '��%�1(����'�
&�����������0�����������*��� ��+�����(����%��%���������&&�����EA�!�������*��&�������� � �
���"����� ������0���E����%'���&��0�����%'�"��� ����"��!��&� ���%�����!��� ���������������%��
�'��(���%�����"���%����#�&!�������E����"���F>?6?��1�8.����0����� ���������%��"������"���� ��%���
&$���������%'�� ������������0������������� �%�0����+����%�����! ����%�����!-���.����!���)�����#��/�
%����0���������&(������!�� ������� �����-����%�� �'CB���!�������"���� ��%��� ��*��&� �����0�'����
�!!�� �� .�
������ ����������������� ���#���� �����/��#�&!�������� ���/�!��(�-&���%'�%�� �*��� ����%���
��!-���)�����!��(�-&���%����0���E�������%��&��"���������� � �����!��"�� ����"�����!���� ����
$!���%'�������&��.������� �%'���������%���(�����%��%���������������-���0�����%���'CB�������%���
��F
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
(�� ������� �%������#��(�� ������0����� �� ������ ��� �������!��&�-���.�D����� �������������CB8���
��&&�����+�D ���%�"���!!������&������%����������<;�����%�,+�+��� ���!�0��������&(���%� �
��0�������%��!���(����� �� ������0��� �� �������������� ���� ���� ��� �&�� ��!���*�0����"�� ������
�/!���� ����2F������ �EF�CD�) �:;;A7. �A������%�!����� ��� ��%�����/�A�G��$� �.�C� ���%�**�������%��
F>?6?��1�8)������� �=���%�����0���� ���� ���������!���*�� �� ������ �&� �0������0��&�� .�CB8�� �
� �� �� ��!�������������� ����%�����!#$������������������������(�������2�����#�!� ���H7�� ���������� � ��
�( ������ ���� �����C�!���#���%�����/�!����� ������.�D��%�**�������&�,���������%��%������� �&!��
���������� � + � �'�( �� ��� � %�� � %������. � F>?6?��1�8 � �'�"-�� � D �� � !��� � ��!�%� � � � !��� � ��&!���
%'� ����� ���) ��� �0�� ��� �!��(�(��&�� �%I ���� *�� �0�'���� ���� � ��� ���� � �+ ����!��� �!� � �����!��
�/���&�0��.��
�� ��� �%����%����&�� ���0���F>?6?��1�8��� ������ �� ��%�! ��+��'� �%��%������� �����
!#$������ �0��� � �#�C � ��� � �#�&!������. � A��� � � � �� �&&�� � � � � �-� � � ��� � !��� � �� � %����� � %���
�&�����)�!����0���������1������"��� ����!��������%��!�� ���!����(���%�����%�"���� ��%�����0�������
%����#$ ��%��&$�� ��%���� ��������0���������0���������"������&�� ����.
D������&�0�����"������&�� �����!!��0������/��#$ ��%��&$�� �
��� ��"�������� � ������!��&�-���� �%��*������������������#$ ��%���%�����������$� -&��%�����
�� � � ������ � ��� � �� ��� � %� � �� � ����&�0�� � ��"������&�� ���. � A� � �**� ) � ��� � � �%�� � %� � %�"���� ��
!����%�� ���0����� �%� �� �����!��������%���#$ ��%��&$�� �)���(��� ��'����&(���%��%�&�����%���
A�G��$� � � �� � %� � �-��� � %�� � �#�&!������. � ���� � �� � !��!�� � %�� � ���) � ����� �&�� ��� � 0�� � ����
�#$ ��%��&$�� ��!����� �� �����%�"���� ������C�*��(���� ���� �!����(��%�� �.�E�� �*���)������ �+�
�� ���0����� ��&� #�%����&(������!�����%�! ���!��������%�������!���0��������� ����&� #�%���$�
*�� � ����&�� � ��*������) �E��� ��� �� �%�� �%� �%�"���� � �!�� ���� ��!!���#� ���� ����� ��� �!�� �%���
�(���"� ��������&�������!�.������!�� �"�����%��!���������*�� ����� ����0������/�%���� ��%�������
��"���(�(������!#�0��)���E������� ������&�������!�0��)�����%�**���� ���+�����������...������ ���(�����!�� �
D �� � ��%�� � ����� � �� � $!� � %'����$� -&� � �J � �� � ���"� � �� � ��&&���� � � � �%���. � A� � �**� ) � ����
�#$ ��%��&$�� ��������� �� � �� �!��������%'����!��� � ���� �&��� ���) �%��&���� ���� �������� �����
!����%�)������ �!��(�(���0�����������$� -&�������!���������&&�� �� �%�������!����� �� �!���%���
��<
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
���%� ������! �&�����!���������%�"���!!�&�� .�
��� � � ��/ � ����� � � � �( ���� � ���� � %� � �� � � #-��) � �� � (���� � �%%� ������ � ��� � + � �� �&� #�%��
&�������������� ��%� ��&���.�D����&������� �������������%'� �%���!�����������%'���!��� �%��"���
�/���&�0��������� �!���%�"����� ���%�����0�������%���-���%���'CB����F��%����#$ ��%��&$�� ��
"��0�����������0���������� ��&!��*����.�D'����%���#$!� #-������ �0�'����*�� �!�� ���%�����(���!#-���
�����0����� �%�**������+�� �%����"���������� � � ����%��(��0����%��������.����!���������0���E����%��
������������� �����&�� �&����,��0�'+��� ��� ���.�D��%�**���� ��+��( �����%����&!�������� ���� �� ����
��� � ��!� �(��� � � %� � �'�&!��*��� ��� � !�� � F�B � ���� � ��� � %�� � ����&�� � � �� � �� � *�"��� � %� � �� ��
#$!� #-��.�A���**� )� �� ��� �!��(�(���0�������� ����������&����� ����0����#$ ��%��&$�� � ��EB����
�#$ ��%��&$�� ����� �*�� �&�� �%���0����(������*�"����%����� �����������&��)�%�&����� ��������� �
!��(�(��� ��%�������� ����� ��������&������� ����&� �����%'C�����(��.�D��!$����0���E������ �����
���� ����!��!�����+��'� �%��%���� ��(���!#-��������!���0�'���!��&� �%'� ��%����'��#�� ����������
%�� � ��0������ � ,��0�'+ � �� ��� ��� � ����� � ��� � �������&�� � ��(���. � E�� �*��� � �'��� � %�� � ���%� �����
����� �����(������ ��'�( �� ����%'����0��� � ����**���� ��%'�&!�������+���0������.����!���)�� �C�
���FEB��B�)������&(����� �0���%�����������%���� ���� �%�)��'� ����� ����%��!$����0���E��������� �� ��
��!��*����������%�"���� ��!�����#�� �������� �����C�*��(��.�F������ ��)��'�&!����%����&������%���������
���)���&(�������"���%��!$����0���E�����'�"������ �!�� ���� �%������������J������#$ ��%���%�&���� �
�����&&���� ��*����0���� ���!����� �� ���������%��!��!�� ����%�� �����&&���� �������$� ��
��&&��%�����'� �%��%��9���&���EF�CD��2:;;<7.����&���-���!����!��%�� �)��'�&!����%�������&������
��&(������+�%������������&(����**������!����%����������%�"���� ��%����#$ ��%��&$�� ��%���� ��� �
$!���%'����$� -&��.
����EDDE��FE����D��E���FBCFA�E����FE�F�EDDE�E�F�C��D��C�DE�
D�������$����&� � �������! �&�0����!��&� �� ���������$���%���� ��%���'����&(���%���CB��
�/ ��� �)������!������!�������� �!��%��F�B�%�� ������&������!��"�� ���%�����%���(����)���&&��"��
!����%�&&�� .�D��!$����0���E����%'CB��%��������-����/�CB���� ���/��� ����*�&������%'CB��$�
��&!��� � ��� � &�������� � 0�� � ���������� � ��� � ��� � *��� ���� � �/������. � F�� � �'����$�� � %�� � CB���
��0����������!�� �%������� �-��*���&�� ����%�"���� �����(����%���2&����7�������&���0�����&!���� �
�������$� -&��2K�������EF�CD�)����!��!��� ���7.����&���-���!����!���!�� �"�)��"�������0��!�&�� �
��;
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
��&&� � �� � D�(�#�! � LE � 2����!��7) � �� � %�"��� � %�"���� � !����(��) � �"�� � �'�&������ ��� �%�� � �$� -&���
&����*���%�0��� �%�"���!!��) � %� � ��!���� � !��*���� �����&�� � ��� �CB�� ��F� �%'�� �&������ �%'CB��
� ��/�!�������� ����%�� �����.�F����� ��� �� ����)���E�������!������!�������� �!��%'�&!��*��� ���)����
!��*����%���� ���!����(��� ��%'�����0���E����%��&�����%'CB�.������!�����������������"������� ���
%�����! ����%�����%�"���� ���"���������"���������%.�����&��������"��������(��� ��@����������� ��%��
��(%�"��������,���%����0�������!���C�����������(����!��������� ������$��������C���������!�������� �
�� � %�%���� � �� � %�"���� �) � � � ���� � &D&�) � �� � !�� � !$����0���E���) � %�� � *���&�� � � %� � �;;1A;;�
������ �%���!��"�� �D ���!��%�� �.�D'���%���%�*������������%����%'D �����!�(���%'����$������� $!��%��
%������.
�&!�� �����%���#��/�%�����!���%'�&�����
D� �%�����! ��� �%�� �� �%�"���� � �!�� ������!!���#� �&���������� �� �&�� �� �0��� �� ��#��/ �%��
���!���%'�&�������� �%� ��&���� .���&!�����%���%�"���� ����( ������!���%������!����%'�&������
��(��� �%�����"���/� �/���&�0����%�**���� �)�������!��%�+��(���"������%�"���� ��+����&���-���%'���
�#����&�� �%'��#����� �/���&�0��.�C������"�������"�)������&������%��"�� �D ���!�� ������%'���
����� -�� ����"�����. � ���� � �/!��0�� �0�� � ��� � � �%�� ������$� ��) �0�� � !��� � �� �!��!�� � ��(��� �%���
!�� �� ��)��� �!��&� �������"�%����� ���!��������%���#�&!������. �C������"���� �� ��&�%�����) �
��&&������-����%����#�&!������)������&��������� �%���������%����%���C���������C�������"����
!����!��"��������!�����%�����0�������0���!����� �� ����%�����%��%�"���������� ��������)��������
����C�*�� .�F������ ��)�%������ ��� �%�)��'�(,�� �*�!��&����� �� �%��%����������!#$��&)������� ��
�&!�� �� �%����������� ������������C����������"�����������%�����!#$��&�&������**���&&�� �
%�"����� ��%������%���!���#��.�6�������!�� ������� ��%�����!#$��&��� �0�'������ ���"�����!��� ����
(������%���-����%����#�&!�������� �%����!���#��%�����%�"���������#�&!������1���&��/.������
�&!��0�� � %� � !�� �� � ��� � � �� ��� � !�� �����-�� � ��� � �� � %���� � %� � %�"������� � %�� � �� ��� � !#$���
*����0���)�������� �������"�� ����!����(������������M�%���� ����������/��#�&!�������� �����-����
%�� ����&��/. �D�� ������ � � �&�� ��� �0�'�**�� �"�&�� � ��� ��&����� �%�������� ���(��� �����C����
��! �� �%�����0�������%'�������&������!��� ������ �����&�� �%����#$ ��%��&$�� �.��� ��C����
�� ��������+����%�"���������#�&!������1���&��/��� �����C����0�������������� ��� �����'�� �!��� �-��
���
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
(��� � �������. � �� � �� � %��� �&�� �� � 0�� � %�� � �&����� � ��(��� � �� � ���%� � !���#� � %'��� � C��� � %��
%�"���������� �������!��� ���� ����-0���%��%�������%������%�������&�� �%���� ��C���.�D���#��/�%��
�'�&�����%� ��&����%�������%�"���� ��0����� �%���� �.�������&!��0���0�������0������%�"���� ���� �
%���� ��%�����������$� -&��%����)������1����� �%�!��%�� ��%�����!���%'�&������� ������*�- ��!���
��� � %�"���� � � �/#��� �"� � %� � �� � ��&&���� � � %'�������&�� � !����� �. � D'� ����� ��� � %� � !���������
���!����%'�&�������������&D&��&� �����&����"������&�� ���&�� ���(�������!#���&-��.�
D������%�������&�� �%�����%�"���������#�&!������1���&��/
D� � ���!�� �6>:N�BFB�#$ ��% �� �!��&�� �%� �&� �� ��� ��"�%���� � �� �!������� �%� ���0�������
%'�������&���0������(����#�� �%��&���-���(������%���������!�� #�G�� ��� N���%��&���-���(������
%��� � ��� � ���G�� �. � ��������� � ��� � C!���C��) � ��� � � �%�� � �'� ��#�� � + � �����%�� � �����
!��� �����&�� � �� � ���� � %�� � A�G��$� � � �� � ���"�� � �(�� � � + � %�� � ����� � � � ��� � ��� �����
� � �� �0��&�� )�+� �'�/��! ����%'����� �%���"��� ����-���%�� �'CB����F��2��"�����1�&� #�O��#��)�
�<<�7 �� �%'��� �����$�� �&�� �����0�� � 24�& �EF �CD�) �:;;�7. � �� � $ ��� �&�� �� �0�� � ��� �C!���C��� ���
!��� ������ � �� � ���%� � *�-�� � %�� ��!�� #��G�� � � �!�-� � �'�&(����#�&�� � %�� � C&��(�C��. �����
����� � ��&�� ��� �0�������M�%�0���!�� �������!�� #�G�� ��� �����C!���C����� �&�$����&�� �
��� ���.�F������ ������!��������%����0�������%'C!���C���%������ ���,���%��%������������!��&� �
%��%����0����������!����������&�������"�%�����%����������#�� �������%'��������#$%�� #��&������
!��� ������%��&���-����� ����������/��!�� #�G�� �.������ ������&�� �!��(�(���0����������!�����
(����#� � + � �� � (��� � %�� � ���G�� �. � E�� �*��� � ���� � �� � !��"��� � �� � ���*��&�� � �� � ��*��&�� � �� ��
#$!� #-���!���0������*���&�� �%���-���%���'CB����&!��*����'��!���!��&���%'�� ������%�����0�������
%'C&��(�C�� � + � �'������&�� ) � ������1�� � � �� � ��! � %�"����� ��. � �� � �� � *�� ) � �� � ����!� � �� � �-��
�� ������� � %� � !�� � ��� � ��*��&� ���� � 0�'�� � !�� � �!!�� �� � !��� � �����%�� � ��� � ������� � %���
�!�� #�G�� �)��"���!����/�&!������!��� �����&�� �%���C!���C��)�&���������&�� ��'�� ����� ����
�� ����������G�� ��� �����8�G�� �.
��� � � �%�� � ��&!��&�� ����� � !�������� � �!!�� �� � !��� � %'��*��&� ���� � ��� � �� � ���"����
����!�.�E�� �%'�(��%� �����0���E����%���-���%���'CB������������ ����!������ �!��&� ���%�����
��:
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
!��� �������%��&���-���!������(�� ��%�����'��(���%�����"��.�D'� ����� ����%��&��0������*��������� ��
!�������� �!��&� ���%��"���������������������&�����/0������!!�� ������ �������0���������&&��
�������� ��*�� �!�������&��������"�%�����%��!#$��&�%�����$! �&$�� ��2P���� �EF�CD�)�:;��7.�A�*��)�
�����!!���#��&����������������� �� �+���0���������������&��!��&� ��� �%��*�������������$���
!��� � !������ � %� � ��� � !��� �����&�� � !#$������ �0��) � ����� � 0�'��� � ����$�� � %� � !��%�� ��� � %��
*��� ����.
D����#$ ��%��&$�� �����&������#$%�� #��&���&�����!��*��%
D��%�"���� ��%���� ��%������ ��� �%��&�� ���0��������#$ ��%��&$�� ��!����� ��%���� ����
����$� -&���#$%�� #��&��/�� �%���)���� ���!�� ���%'���!��� �%��"��� �/���&�0���������������%��
!�� ���%��!#$��&.�A���**� ) � ������0��������( �������!!�� ������ �+ � ���� �%�����/ ���%���) ������
��&! �� ��D������� � � ��� !#$�� $!� � �� �!��� �%�"����� � �� ���"� � ��� �!�������� � �� ��) � 0�� � !������ �
���� � ����������"�����%���%���#$ ��%��&$�� �.����!��*����� ���&!���(���+����/�%���� ��%����%���
�����2D�*-"���EF�CD�)�:;;A�Q�:;;F7)������&(���%��!#$�� $!��)�&����%������ ���� �%�)������&!��� ����
�/���&�0����� �!����%�"����.������!������ �����-����0�'����"���&�� �%��%�"����*��� ����%��������
������� �(������ ��� ������ �!��%�� ��� �&����� �&����. �A� ��**� ) �%�� ���0������ ��!!�� ���� �+ �%�� �
�������&�� �%���� � � ��� � �**�� �"�&�� � �� ���"���) �&��� �%�� � ��0������ � ��"������&�� ���� ����
%�� �� �� �%�� ���!-��� �%���� �� � ��� � ����!����� ����!��� �����%��!��!�� ���. �D� � *�� �%'�"��� �����
&����� ��%'��!-����%���� ����� �����C���"��� ����%���'�(������%����������������������!#$��&.������
�'�� �!�� � �����&�� � ��� ��� � *�� �0�� ��� � ��� � �� �!��&�-�� �� �%� �%�� ��#$ ��%��&$�� � ��� �&������
#$%�� #��&���!���0������&D&�� ��%������� ��(���"����������2D�*-"���EF�CD�)�:;;A�Q�:;;F7�� �%����
���������+�#�� ���� � �%��29���&���EF�CD�)�:;;<7.�F������ ��%����-���� �%�)�:A����"���/�!#$�� $!���
�� �� � �&�� ��� ��"�%���� �� � �����&�� � ���� � � ���� �!���#�� �%� � �/��� � ������. ���!��%�� � ���
&�,��� ��%���������"��������0���������� �������!����%����������%�� �-��%�"����� �0�����&!���%�
��� � �!�C����&$�� ���� � � � ��� � B#�C�!#�$� �%�����. � D� � %�"���� � � ��&(�� � D �� � &���� � � ��%���
�/���&�0��&�� ) � �� �0�� � ���*�� � � �'#$!� #-�� �%� �%�"����*��� ��� �&�����) � ���� �!��� ��� �� � ���
���*��&��. � D'�( �� ��� �%'����&�� � ����*��&�� ��� ������� � �%�"����*��� ��� �&����� �"���%�� �%��
�'�/ �������%�����%�"���� ��%���� �)����!���!�� �� �%�**���� ������$� -&��.�
��H
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
C��� ��%�"���� ���� ���������0��� ��������������*��� ���������$� �&�0���)�� �%�����&D&��&���-������
�� ���"�����(����� ������/�� �%��.�A���**� ) � �����#$ ��%��&$�� ���� �!�������&�&�� �� ��%���� ��
��&&��� �� �%�� � ��!��!#$ �� �� �%�� �!����� ��) � ��� �%������� �� �� � �����&�� �&�,��� �����. � A��
!�� �� �%��!�����!��0�'������� �!���� �%����� �%�**�������+�� �%����%��&���-�����������)������!�� �
�'�/!��0����!������*�� �0�'���!����� ���� �!����*�����&�� �%� �� �(���!���0�'�����%�� �%����$&! =&���
��������&�� �"���(��� �� �&���� �+ � �� �&�� �%� � �'#= � � 2�(������) �:;;R7. � �� � �� �!��(�(�� �0�� � ����
�#$ ��%��&$�� � � !����� �� � %'�� ��� � �� ���� ���� �(������0��� �%��� � ��� � ����$� -&�� � ��&&� � ���
��&&�������&� � �� � ������ � �� � �$&(���� �&� ����� �) � !���0�� � �� � �������� � %�� � (����#�� � %� � ���
&�,��� ��%�����0��������( �������� �����C����� �.��� ��%�"���� �����&������#$%�� #��&�������-"��
���0��� ������������� �����*��� ������/�������� ��������� ��� ������� �%�����������%���%��!����!�-�.�
F����/�&!��)�!����'����$���%�������&�������� �!����(���%��!��%��������*��� ���������%����!������ �
�-����� ������!�� �D ���� ��%����/�*��� ������������0����!� �� �������%�������������&��.
��"����*��� ����*����0���@�&������&�����"������&������ ����� ��
D��%�"���� ��*����0������&������&�����!��*��%��� �� �%�����"���%��� ��#��0����&����������� �
%�!����0�� ���������0����.�D'����$���%��B��#��%� �EF�CD�� 2:;�:7�&�� ���0�'�������%���&(���%��
�#�&!���������!�� ���%��������C���&$�� �)�8���%��&$�� ��� ��#$ ��%��&$�� �)���� �!����� ��%����
���&������&����.����&���-�����������)�������������(�������!����� �� �����%�"��������(������!�!����
&��0�����"���������!-����%���� ���� �������0���������"������&�� ������( �����)�0���������������
%�� � ��G��$�. � ���/ � #$!� #-��� � !��"�� � D �� � *��&�����. � D� � !��&�-�� � ��!��� � ��� � �� � ����� -���
�(�0��� ��%����#�&!���������!��������� ����*�� �0�'�������� �� ��(������!�!����� �%���)�%'�J�����
!��������%��!��(�(��� ��%�������� ���"���%����%��/�����$� -&���%�**���� �.�D�������%������� �%��
�����%���� � �� � �"���&�� � %� � %�"����*��� ���) � ��� �� � ��������� � ��� � ������� � (������) � �"�� � ���
�������� ���� ����� ��.�E�� �%'�(��%)�+��'����� ���%�����!��&�-���#$!� #-��)�������������(���������� �
!�� �������� �%'�J ���� �!��� � ����%� �!��(�(��� � �%� � ����!���� �%�� � ��0������ �!��� �%�"����� ��.�
A���� �) � ��������� � ��� � ������� � (������) � �� � %�"���� � � %���� � � �� �&����� �&���� � �� � ��!�� �� � ����
�'����&(���%��!#$��&�������0���!����������������%�����G��$�)����%�"���� ��&��������&(������ ���� ��
+ � ��� ���� � ����!�� � �/���&�0���. �B��#��%� �EF �CD�� 2:;�:7 � � � 8��� �EF �CD�� 2:;;A7 �!��!���� �%���
��R
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
����� �����&�����1��� ���� ����%��������%��/�������"���%����"���&�� ��%��%�"����*��� ����%��������
%��/ �&�����/. ��� � �#$!� #-�� ��� �"���%�� ��� � �����% �%� � �'�&(���� ��� �%�� � ��0������ �%'��������
&����� � �"�� � ��� � ��0������ � %'������� � ��� ���� ���) � ����� � 0�� � ��� � ������ � %� � (����#�� � ���� ���
��������&�� ����� � ���.�F������ ��)��'#$!� #-���%'����%�"����*��� ������� ���� ��������������%'���
��&(�� �!��� � �&!�� �� �%� � ��0������ �&������ ��!!�� ���� ���/ ���G��$� �� �%'��� �!��� �����%��
!��!�� ����%����������(��������������%�����!�����!!�� ����&������&�����2B��#��%��EF�CD�)�:;�:7��� �
!���!����&��������� ��'�� �!������*��&���!������� ��"��/�%�"���!!���%������� ��"����%�� #-��.����
!��� � �� � �� � ����� �0�� � ��� � ���!��� �%'�&����� ���������&�� �� ������ �!��%����� ���� ��&!��*��� ����
(�������"����������G��$��� �%���������*�- ��!������%�"���� ��������.����*�� ��� ����������0������%���� �
��&!��� ��� � (������ � %�� � (��0��� � %� � ��0������ � !�(��0��� � �� ���� �������. � D� � ��� � %���
��$! �&$�� ���� ��� ������� �� ���� ��+�����������!���0���������'�"����!���!��%������������%�"���� � �
�"��������&������6>:N�BFB�#$ ��%.��������� ��� ������� ������&�� �%'� �������������!���%'�&������
����%�**���� ����#�� �������!����"���%����%�**���� ���$� -&���&�����)�+���&&������!������/�%�,+�
�/!�����) �!��� �!��"��� ���&!���� � ��� �!��!�� �������G��$�N������� �(������. �F���� �� �&�&�� ) � ����
#$!� #-����%��%�"����*��� ������� �����"�(����������(����!�������&��������� ���� ���0���&����.�C���� �
�'#$!� #-���%��!��� �%'����"���&�� �%�� ����� ����&�����1��� ���� ��� �%��� � ��� �%��/����� ��� �
!�����(��. � F�� � ��� ��) � ����� � ���&�� � �'�� � %��!���(�� � !��� � �� �&�&�� � !��� � %� ��&���� � ����
�&��������!�� = ���� ���� �������!�� = �&�����.�
D�� �(����#�������������%����"�� �� �%��� ��� � ��"��� � ��!����� �� ���� �%�� ����� ��"������
�&!�� �� � � %�� � �������������. � ��� � (����#�� � �&������ � %'��� � �"��� ��� � !��� � ��&!��/��
0�'�&������ �0��� �+ � �'�&������� �� � �� �%�"����*��� ��� �%�� ��!�� #�G�� �. ��� � ��"��� � ����-"� �%��
���"����� � 0��� ���� � � � ��"-�� � �� � ������� � � %� � %�"���!!�� � %�� � �**�� � � %� � ���#���#� � %��� � ���
!���!�� ����%�����%�"���� ��%����������!���(����/.�
E�� ���������%���� �� #-��)����!#$��&�%����#$ ��%��&$�� ����� ���(��%��+� ��"�������!���&��
%���'�"��� ����� ������� ��&�� ���0�'��������!���� �����!������ �� ���0���!���������&!��#�������%��
�����&!��/� ��%���'#�� ������"��� �"��%���-����%����#�&!������.���!�������&��������"�%�����%�� �
��$! �&$�� �)������� �����!��� �����������!����%� ��&���� ��!���0�'������!����� �� ����� ����� ����
�� ��������������&���� ������� �����#�&!������.��� ��� �%��!�����-�����"������"����+�%���� �%���
���
�����������A�ABCDE�EF��EB��E�F��E�
0�� � !�������� � �� � %�"���!!�� � ��� � �� � ��&!��/� � � �"��� �"� � &��� � �����&�� � ��� � �'�&!�� �����
�������0���%���� ��%�"���� ����$! �0��.�D���%�**���� ��� ��#��0����� �&� #�%�����0����������������
������%����� ��"�����**��� �������%������� �����!������� ������������� ������&(���%S�������.�
���
����������
����AB�CDE�F���
���
���
����������ABACBDE�F��B����
�������������ABC�DEF����
D���������������������F��A��������F��D����� ���!������"�� #�����#���$�%�����&�'"����'�� �#������
(��� )���*+���� � ��#�(�*�#���� �(� (+�,�� -� ��*��#� +. �#��� �� � (+#+��� .���.�*#����$� ���
����DCDEB���/012�30/-304$
D��������� ��� '� ������ A�� �������� �F�� 5������ ��� ����� �� �#� ��$� %�����&� E�+#��-�� 6��� ���� �
6������*"� (��� �*���,�*��� �� � '�����)�*� ������*"�� 7�#"� ��� B������ ).��)��#�#���� (���
�+�,���'����8+��*��$���DC��BD�F���BDB��D��F�B���12�/09-/91$
D ���:����).����DC������)���:D��D� �������D��D� ������B����#���$�%����&�'"����7�"�,"���������
*�����(�*�#���� �(� �+���;�#��� 7�#"� �)."����� ��� #"�� #�����);� �(� .��#��#�$� ��� �D���FC D�
���F��D�B� B��DABDCDE��432�<99=>4/$
D����� DE�� �)�#"�C6�?� ��)� �� %����&� �"���*#���@�#���� �(�!����EBCC�� ��"D�BB� %'"�)�?� �"+�*"&�� ��
(+�,���.�#"�,����(���������������(���*�����$�#�"�DABDCDEBF>1A2�/A4-///$
D�#�*"+� ���� �C��"�6��:������6��:;�����6��A�.)���B!� %����& �����*�A�*�� �D��,�)��#�����*"�'���$�
�D���FCD� DC���CF��BDCDE��3/42�>A<->/A$
D)�����C�##����AD������ �'D��BD����;��!�?���,���:A�%����&�'"���+*������ ��)�����2�:����.��#��#��
�#�#"�����)��-(+�,�����+� ��;$��D���FCD����F��D�B� B��DABDCDE��>02�39<-39E$
D� ������ ���E������E� %����&�B�#�*#�����(��*#���� ����� (+�,���;��'-E����).��(�*�#�����(�.��*+�����
���D�)���*+���$��D���FCD� B��DABFC ���D"��102�3>0=34<$
D#�����:�*"���� ���:*��#"+��DC�?�'�����DE� %����&�D�*;��)��� � �2�D���7�.";��,���#�*� �����,��
�)��,� #"�� .��#�@��� *�����;� ����#� � #�� #"�� *�))��� ��*��#��� �(� )�#�@������ (+�,�� �� �� �
*"����(��,����#���%�B.��#"����#��&$��D���FCD� DC���CF���DC��BD��3E0=304$
��� �+(� �A�?� E��)��#� !B� %���&� D��)���� �� � (+�,�� ���� ��*"� �#"��D�� *�����#� ����#����2� ���,�+��#�
��� ��*��(��)�)+�#�.���.��#����$���DC��BD��9A2�//440=//413$
��� �+(� �A� ?� B����##��� 6�� %����&� B��,��� �� � ����+#���� �(� #"�� ���)�� )�� �� %:;*�#�@��&$�
��D���"B�E�D�����F�BD�FC!�F"���D�$�B�����D����%�B��"$�F���D�!���B�F�9>2�/3AAE-
/19
����������ABACBDE�F��B����
/3A/3$
��� �+(� �A� %����&� D� ����*"� (��� #"�� ���,���� �(� D��)���� �� � �+�,�2� *�).����,� �� � *�)�����,�
)���*+���� �#�$�!���B�F��F���FCB���/4>2��/E0-�/00$
��� �+(��A����,���D!��6���-���(��#���B����#���6��%����&�D����, �)-������.";��,��;��(��+���;�#���
���� ����*�)���� �.��#���� �#�$�$�B�����39A2�9E3-9EE$
��� �+(��A�%���&�'"�� ��.����#���(��+���;�#��$�$�B�����<AAA�2�/EA<-/EA1$��
��� �+(��A���"�##�*"��;��B����*������!��F+,��"��#@�E��E�7��7����!��#���$�%���A&�'"��'�����(�A�(������
�������7����!����ACB�E�������D�&B��$����*��(#�!�?�B���,"+��:!��� �$�B�(�� ���������#;�
E����$�
���,"��������?�A�� ���BF�%��AA&�:������(+�,�2�'"����#�����);��� ������,;$�'F�CD�BF�/2�<94->1E$
���-F���D��:���� ����+�:��E�+���#�:D��5�� �������"+;���E�%���B&��(�+��*��(+�*#����(������+�#�
.";��,���#�*���*���#�+*#����$� DC���CF��BDCDE�F�"��DC��BD��342�019-0E<$
����� B!�� %��B�&� D�� �+#����� (��� #"�� ��*�����(�*�#���� �(� #"�� �";#�� ������� �� � (��� �� ��7� �� ���� #"��
�.�@����);*�#����$�(F�F"BF��D���FCD��D�F���402�3<0A-3<9>$
����� B�� F�7�� D�� ���7�� ��� ���#��� F�� B�)� ���� :�� �#� ��$� %����&� F���#� (��)�� �)���#�� (+�,���
������#;� ��� #"�� ��.� �*����$� ��D���"B�E�D�����D�FC$D�B����) �BDCDEB�FC ��B������ 3E>2�
<A19=<AEE$
����� B�?� ��*"�� �� 'D� %����&� '"���� �������� #�� ��-����+�#�� (+�,��� ������#;� G��� ���#"� �� � ��� #"��
�*���$H�'��EFC�BDCDE����B����342�/49=/1>$
���##;�!'��B���)����!��A��*��:'��:������D���A��,�#�D���#���$%����&�D������,�#��;�."�#��;�#"�#�*�
��*#����� � �������� � (��) � � � ��.-��� � "; ��#"��)�� � ���#$ ���D���"B�E� D� ��� �F�BD�FC
!�F"���D�$�B�����D����%�B��"$�F���D�!���B�F/A32�9<A1-9</A$
������� BD�� ����*"-:�@��*"�� �� A�.)��� B!�� B�#���� !�� ��;���� �6� %����&� C������$� ���C�B� !�B"�
����F���<92�B<3-B<E$
���#���:!�?�D;�����!�%���&�B�#��,�#"��#�����(���(�$�$�B�����<AA2�/190=/EAA$
�������:A������*���������'�;����!6�%����&�F���#������,;$�$�B�����34E2�/1/A-/1//$
�"�##�*"��;��B������ ��'��F��)��C�%����&�5��#�*�������+#���� ��� ���#��,���*��.��� ��(���*"��-(+�,���
,��+.����#���$��D���FCD� DC���CF���DC��BD��442�E>-0>$
/EA
����������ABACBDE�F��B����
�� ��#�� ��:����+���'B�����*�7����:��� 7�� ���?�'�;����D���%���B&�E��������,��**+��*;����
C������$�$�B�����</92�/1/1-/1/1$
�� ���!���F�+����F�?�����*"��;�!��%����&�:�*��������#��#�(�*�#������� ��.�;��+��� �)������
�� �)��#���(��*#��*"��,�������+�(�#�I)�#"����.��(����$�*�DABDCDE��<2�30E-394$
���*�7����:�%����&�'"���+�,�2�/��3��<�$$$�4$/�)��������.�*���J�!���B�F��D���FCD��D�F���902�>31=
><0$
������ !�� %����&� '"�� ��+�,�� �������B������D� &B��+�F� ,��� ���?��+)��� ��� � �$�B�(�� ���������#;�
E����$
����� ��� C�))��)��� �K� A��,� ���� F�L���� :� %����&� �#��-�����#�� ,���)�� �����#���� ��� ���+�*+����
);*���"�@��� (+�,�� .�����#�� ��� #"�� #����*��.#�)�$� �D���FC D� ��DC��BD�F�� �BDCDE�� 3<2/4/9-
/43E$
��+���+��� �����8+��# ��� ���*�+����D� �A��#����# ���?�C�+;�:�%���B& �E������� �� �.#�#���� �#��"�,"�
#�).���#+�������#"��D�*"��������$��F�����>412�9>3-9>4$
��7)��� �:�?� ����� �!� %���C&� '"�� �#�+*#+��� �� � �;�#"����� �(� #"�� (+�,��� *����7���$��BD���F��� 302�
E99=0A0$
��� ,�� EB�� �����#�� E!�� �.������ �:� ?� E��*"��� C� %���&� B�� #"�� +����������#;� �(� .+����"� � B�D�
��8+��*��$��������DCDEB���/1A2�><->0
��� ,���EB�?�6����� �:��%���A&�����#���.��#��(������#�)�."#"��������(+�,+����������#"��.� �
"��#����D�#��*#�*�$��DCF��BDCDE��3E2�/9A-/93
��� ,�� EB�?���7�"�)���� %����&� ����� (+�,��� *�))+��#;� *�).���#���� �#�:����B������ �� ��+#"����
)���#�)��D�#��*#�*���#���������� ��;�E����).��(�*�#������ �*�����,$�'��EFC��DCDE��32�11-E>$
���7��:6���.��,����6�?�������)���!B�%����&�E";��,��;��(�#"��G(��,�##��H�*���+�������)��)�� ��
���#�*+���������������������;�����+#�����;�����*"�7�#"���B.��#"����#�$� DC���CF��BDCDE�F�"
��DC��BD�312�3199=3EA9$
�+,���'��?������ ��:�%���A&�:�����- ����� �(+�,�2���*"�)�*���;��� ������,�*���;� �������,��+.��(�
)�*����,����)�$��F���FC��D"������D����3/2�/><=/1<$
�+�,�+ �C��A�������@�'��D�@+��B��5�� �������"+;���E�?���������C� %����&�B������#;��(�*+�#+������
)������ (���)��#�+�� (+�,�� (��)� ��.-���� "; ��#"��)��� ���#�$� ���B�D�����FC B��DABDCDE�
/E/
����������ABACBDE�F��B����
//2�/400=/1AA$
�+�,�+ �C��D�@+��B��B+��� �A����)���-������#��:-D�?���������C�%����&�:������*+�#+������;���#��
��� ��.-���� "; ��#"��)��� ���#�2� �.�*���� ��*"����� �� � ����*��#���� 7�#"� (�+��$� '� $
B��DABDCDE���DCDE��E<2�/3/=/<<$
�+��������"��*"���-'����@�����:��,��:����L������� �D��������������!�����������?�E�7��7����!�%����&�
E";��,���)�*�����"+((����#"���+���;�#�*��+.��,��+.�$��CD$D���32��E9A$
�����:�?���� �+(��A�%3A//&�'"��.��#��#������,�����(����)������ �(+�,�����'"��:;*�#�2�����+#�����(�
�+�,���� �(+�,��-�������,����)��M5$�EN,,�������?�6N�#�)�;���!��� �$��.���,���F�� �����,�
B�� ��*"#�A�� �����7�F���$
��������-�)�#"�'�?��"�����%����&�'"���.���@����D.+��)������������#� �#��#"��*�))�����*��#����(�
���)�����(+�,����� �*"����(��,����#��$���D���"B�E�D�����D�FC$D�B����)�BDCDEB�FC��B�����
31/2�/=1$
��������-�)�#"�'���"��������#�*")����D��B�#������?������������%���B&�E����)��� � ���� $����$�
%D.+��@��&2�+�#���#�+*#+�����((���#;�7�#"�)�*���+*�������.� ����#�������� � ��.� ����,��*���
7�#"���.����)�����,��$����$���D�B���/492�4<4-413$
��������-�)�#"� '� %����&�:�,�.";��,��;�� ����� �� ;� E������ D �.#���� C����2� ��+���� �� � '�)��,� �(�
�+���;�#���������� ��#����$��D���FCD����F��D�B� B��DABDCDE��412�31=<<$
��������-�)�#"� '� ?� �"��� ��� %����&� E";��,��;� �� � ����+#���� �(� D.+��)��� � �� %E��#�@��2�
D.+��@��&2���7�,�������� ��.�*���$���D�B���/1/2�4>9=4E1$
�"��� C�� ��)� �F� %����&� C������ ��#��#� �(� "���@��#��� ,���� #����(��$� ��D���"B�E� D� ��� �F�BD�FC
!�F"���D�$�B�����D����%�B��"$�F���D�!���B�F�/A>2�>>09->>9>$
����� !��� 6��,� ��� ��� ����� ��� ���"� !�� �"��� ��� �#� ��$� %����&� '"�� ������)��� B�#������ E��L�*#2�
).���� � ���,�)��#�� �� � ��7� #����� (��� ���D� ����;���$����C�B� !�B"� ����F���� <E2� B/>/-
B/>4$
���+��E6��C�)��6���#��.����!D�������#�5�?��#�,�"+���C�%���A&�:;*�����2��������������#��#����#��
��+�*"�);*���,;���#��#"��3/�#�*��#+�;$�$��"B��B� ��DCDE�4A2�/9=33$
B�)���� ��� ��,"+�+)��� �� ?� ��,"+�+)��� �� %���C&� �+�,�� ��� ��.-���� �� �)��#�� �(� #"�� ���#����
� ���������$�,���$�F����F����F��-4<2�/>=3E$
/E3
����������ABACBDE�F��B����
BDD+����C��E+�"��������� ��,+�@-5��������%���C&�6��������;@��,�������)�����#��,���*�#����*���� �
�.�*����*��(�,+��#������ �#�����)�*�����#����"�.�$��BDB��D��F�B���332�43E-4</$
B�7���� ��� ?� E�*�� ��� %����&� ������ ���, �)-������ �+���;�#�*� ������#;� ��� �����*� �������)��#�$�
��D���"B�E�D�����F�BD�FC!�F"���D�$�B�����%+$+!+�992�0<3>=0<39$
B����#��� 'C�� F+,��"��#@� E�� A������ ��� ��L��� :�� ��� ��� �A��#���$� %���C&� C����,������ �� �"�)���-
�"�*�� � /1�� ���D� C���� B�#������ �� � 6������*"� ��).�#����� 7�#"� D��$� D..��� �
�������)��#���:�*�������,;�E32�4A19-4AE3$
OP Q�@����E� ���-D������?�:���������%����&��#+ ;��(�,���#�*� ������#;��(��+���;�#�*�.�*�.����#������
�((����#��*����*� ��,������;��)���-�+�+��#� ���D�,����*�����,��� � ��8+��*��,$�!��CB�"F�"
���B�D�����FC B��DABDCDE��1E2�39<3-39>/$
B�+))�� �D!��F�� �F6��E"����.��:!�?���)��+#�D� %���C&� ������ �.";��,���#�*�� �� � �#��,�7�#"�
*��(� ��*�$��&D$�BDCDE��>2��00$
� ,*�)��5E���;�����B'��'�����D�� ��5����C�)�@�D�?���,���:A�%����&����#"�*��+���;�#�*� ������#;����
#"��C+�;)���������"; ��#"��)������#��������)��#$���D���"B�E�D�����F�BD�FC!�F"���D�
$�B�����D����%�B��"$�F���D�!���B�F�992�E140=E113$
� ,*�)��5��B����6���+�,��!��!��������"���#�������#���$�%�����&�E��#��#���)�*��������������#��;����#"��
�����*�� ������� ���������$� $� E;����8+��*��,� ��� ���,��� ����,"#�� ��#�� �.�*���� ��*"����$� ���
-$ �.D���FC�42�/<>>=/<41$
� ,*�)��5E�����+ ����B��C��#������ ���!��?�'�����D�%�����&D:�������+��+�(�*���+���;�#��2�#"��
(+�,���)�L���#;$����B�D�����FC B��DABDCDE��/<2�/E3=/0<$
�������#����!�%���A&�-�����B�E���CDE��B��$�����+���D���*��#�����+� ����� ��:����*"+��##�$
������ ���E��B�)�#����*�'�������:�?��+�#����*"���%���A&�C���)�*���.��������.�##�������
$F���F�D����������B�BF��*�����������.�����#��"�,"�"; ���#�#�*�.����+��$�'��$&�������4412�
/4<=/1A$
���"�������'��������A���������%����&�F; ��#"��)������#��*��;�#�)�$�/��F�DE�F����3A2�/>-3<$
�����-B�����D:���������������������:��E�7��7����!����������-�)�#"�'��#���$�%����&�B��.�.";��,��;�
�� �����+#�����(����)��)�+� ��%:;*�#�@��&$���D�B���/1/2�44=EA$
����)�������:��#���DE��������B��A;�*"�����:�##���:����#���$�%����&���� ��*��#"�#�*";#�� �� �)���#��
/E<
����������ABACBDE�F��B����
(+�,���*�))+��#�������"�,"-�����#���������$���D���"B�E�D�����F�BD�FC!�F"���D�$�B�����
D����%�B��"$�F���D�!���B�F+�/A12�/0</4-/0<3A$
C� ��"�� :� ?� ��).���� !E� %����&� B**+����*�� �� � ������#;� �(� ;���#�� ��� #"�� )� -�#���#�*� �� ,��
"; ��#"��)���(��� �������#"��D@�����D�*"�.���,�$� B��DABFC��DCDE��4A2�>A0=>/E$
C���C��A�����C"��,���?�6��,�C�%���B&�:���*+���� �#�*#�����(�(+�,���*�))+��#�������#"��F�7������
)������ �.��,��� $�A��B��� 0����B� �� � ��FC� F��F�F$� !��CB�" F�" ���B�D�����FC
B��DABDCDE��E>2�1A9/=1/A/$
C���C�� !�"�����C�?�6��,�C�%����&�:���*+����*"���*#���@�#�����(�#"���.�#���� ������#;��� �������
�����,����(�);*�.����#������F�7������*���#���7�#���$����-$ �.D���FC�>2�///=/3A$
C���+ � '�� ��(�R,���� C�� A�� C�*�:�� �� 5������ B:�?� F�� �:�� %���B&� �.�*��#���� ��� (+�,�$� '��EFC
*����B��F�"�BDCDE�>42�E9/=0A3$
C������� ��� ��,�)�� :�� A�(����� �� ?� ��)�-�,�� �� '� %���B&� '"�� �*���,;� �(� *";#�� �� ��� �8+�#�*�
�*��;�#�)�2����������(�� �7��� ;��)�*�$�'��EFC�BDCDE����B����332�/E=34$
C������� �F�?� A��L��B� %����&� �#�+*#+��� �� � (+�*#�����(� (+�,��� @���.����2� �*���,�*��� �).��*�#����$�
'��EFC��DCDE��32�4<=49$
C��������F���*")� #����?�:������D5�%����&�����@���.���*�#�+��(+�,��,��7�����+�����������#��)��
����#����(+���������)��#�J��1����D��BC���/>2>/E=>34$
C��������F���S..�������D)���!E��E�*�� ����C�*"����::��#���$�%����&�C���.���*�#�+��(+�,�����
)�������*��;�#�)�T2��������7$� F�B��F�"'����F�������F����132�<0<=<9<$
C��+��*� ��� �� #��� C� ?� A�� ��).���-D��+)�� � '� %����&� �� ���#"�*� (+�,�� ��� )������ �*��;�#�)�$�
����"�B� B��DABDCDE��/<2�339=3<4$
C+�� ��� �� ?� C��*+��� B� %���&� D� ��).���� ���#�� �� � D**+��#�� D�,���#")� #�� ��#�)�#�� A��,��
E";��,�������;�:���)+)�A�����"�� $�$�����F�B��BDCDE�432191=EA>$
C+� ������!F����7�� �F���,�� �D����� �����?���,���:A�%��B�&�E";��,���#�*�����#����"�.����#7����
�"����.";#���� �"�;��.";#���� �� � B�);*�#��$� ��D���"B�E� D� ��� �F�BD�FC !�F"��� D�
$�B�����D����%�B��"$�F���D�!���B�F�0>2�403<=403E$
C+#�R���@�:F�� E��#�L�� ��� '�L��� ��?� �+������� �D� %����&� '"�� ����� �(� (+�,�� ��� .��*�����,�)������
/E>
����������ABACBDE�F��B����
��,���*�)�##������#"��+.7�����,��*��;�#�)��((��"���$� F�B�������,;�/402�3A4-3/9$
F�).�� 5�� F+,� A�� A��,"� !6�� B�*��� !��� A��,� ���� ��).���� DC�� ?� ��,��� D!� %����&� E";��,���)�*�
����;���� �+..��#� #"�� )���.";�;� �(� ��*���#�� �� � �������� ����#����"�.�� �)��,� �+���;�#�*�
G�+.��,��+.�H$� ��D���"B�E� D� ��� �F�BD�FC !�F"��� D� $�B����� D� ��� %�B��"$�F��� D�
!���B�F�/A12�<049=<01>$
���� F������ �!�� :���L� 6�� D,#����� �:E5�� C���� F!� ?� A��������� F!� %����&� B�#��#+�-B�.�� ��#�
B�����.)��#��(�#"��:�*���������))+��#;� ��������.���)��#����;�#�)T2��+���#�#����D���;����
�;� B���#+���,� C�� ���#� C��� ���*#��."������$� !��CB�" F�" ���B�D�����FC �B��DABDCDE�� 142�
3>E0=3>0>
F�7��7��#"� BA� %����&� '"�� (+�,��� �)������� �(� ��� ������#;2� :�,��#+ ��� ��,��(�*��*��� �� �
*�������#���$� ��DCDEB�FC����F���942�1>/-144$
F�7��7��#"� BA� %����&� '"�� )�,��#+ �� �(� (+�,��� ������#;2� #"�� /�4� )������� �.�*���� ��#�)�#��
������#� $� ��DCDEB�FC����F����/A42�/>33=/><3$
F�7��7��#"�BA�%���A&�U:��� ��#�(�*�#����U����(+�,���B�D���8+��*�� �#������$���������DCDEB��
/1/2�/<-/4$
F�7��7��#"�BA�%����&�����������(+�,+����,��#����((����.�##����(���@����,;$��F�����><02�3AA4$
F�7��7��#"�BA�%����&���.���#����)��(���(+�,+�U�����+����#�,��)�;�*�+���*��(+����$��F����>402�
39$
F�*�)���B���C������B:���� ���������#�+((����A����� ����A��#���$�%����&�:���*+������� ��*��(���#"��
����;�*�����@�#�����(���� ��;�(+�,���� �.���#�$�$�B����39<2�//39=//<<$
F� ,�������������!���5��#+���:A�?��"���!A�%���A&�D�)���*+����#�)��*�����(��+���;�#������+#������ �
#"��������(�*�).����)+�#�*���+������(�$�� (��DC��BD�F���BDCDE��>2�3$
F�� �DD�%��B�&��D0�CCF�D0�CCD��B�2���� ��� �-.�����#�*� (+�,��7"�*"� ����-+.����#"����"��#�$����
�D�F�B�FC���B���>E2�>4/=4/4$
F��,�����'��6�#����!��F�+�,�!E6�%���&�E";��,��;��(�#"��C��)��������� �B�������.�������%�+�,�2�
C��)���);*�#�&� (��)� �*#��� �� � ����,�#���� (�*#��� /-��."�� ��8+��*��$� '�"��F�BD�D����D2
��F� B��DABDCDEB�FC$D�B��B�� B��DABDCDEB�FC&�������3392�/3E-/<3$
/E4
����������ABACBDE�F��B����
F����##�B������ ���:�����*"�((�!������*�7����:���������E���#���$�%����&�D�"�,"��-������.";��,���#�*�
*�����(�*�#�����(�#"���+�,�$� ��DCDEB�FC����F����///2�4A9=4>E$
F����##�B���B")���D�?������E:�%����&��+�,����*���,;�*�#*"���(���$��������DCDEB���/0>2�3E9-303$
F����##�B�$��B")���D��C��#@���B���+"��:�������E�?����������F�%����&�E��,����� ���)���*+������ �
)��."���,�*���#����� ��*����;�����+�,���� ��.#�����(���(��)���*�����(�*�#�����(��������)��#���
��8+��*��$�'��EFC�BDCDE����B����342�<0=>E$
F���#-!������D��5�V��#� �'�?��*"+)�*"���F�%���A&�B�����������#;$�������DCDEB���/1/2//-/<
F+��� ��� �6W*"#���"W+��� �C�%���B& �E�.#� �� ��;��*#���#�����( ��)�����*� � �7�#"��B���� %�����&��
�+�(�*��2��).��*�#�����(���#"�����,����(���(�$�$�B�����30/2�1EA-1E3$
F; �� �B�� !����� ��C�� A����� ��� E���#��,� ���� E���;#"� DB� �# ���$� %���B&� ����� �(� (+�,�� ��� )������
�*��;�#�)�$��BD"B����B��F�"(D�����F�BD��E2�//>E=//1/$
F; �� �B�� �+������� ��� E�+�+�� ��� ���+�� E6�� A��� ���#���$� %����&� B������#;� �(� ��.����*�)�*��(+�,�$�
�BD"B����B��F�"(D�����F�BD��/12�E=<4$
�����,���6��B����+���D����,�)��:����L�������:�����")�:��#���$�%���A&�F��#�.�����#����#���*#�����
��#7���� (���"7�#��� .";#�.����#��� �� � *";#�� � (+�,�� %�";#�� ��);*�#�&$� �D���FC D�
����DCDE��>A2�><E=>4<$
)"�((�!���A�����D�?�6�����!�%����&����-)����,�#"��)�*�������#����+�����(�#"���*���2���7���#+����
.�� +*#�$��BD�����DCDE�!"�F�����392�>10=>03$
#�"�'��:��#���6�?�����:�%����&�D**�����#�����(�,���)�*�����+#����*�+�� ��;���"��*� �)+#�#����
��#�� ��� �� �*���+���� �;)����#�$� ��D���"B�E� D� ��� �F�BD�FC !�F"��� D� $�B����� D� ���
%�B��"$�F����992�/39>>=/39>0$
!�)��� 'F�� E��#��� B�� A��� ��� �D�� 5��,��;�� �� ?� !�;*�� �� %����&� :���*+���� .";��,���#�*�� �(� #"��
�";#�� ��);*�#���+..��#��#"��+#���#;��(�+�#���#�+*#+���� �#�����*";#�� ��;�#�)�#�*�$�(F�F"BF�
�D���FCD��D�F���E02�<<1=<4A$
!�)��� 'F�� ��+((� ��� �*"�*"� �A��:�#"��;� E��� F�(�#�##��� 5�� �#� ��$� %���C�&� ��*���#�+*#��,� #"�� ����;�
����+#�����(��+�,��+���,������-,����.";��,��;$��F�����>><2�0/0=033$
!�)��� 'F�� A�#*"��� E:�� A��,*���� !��� :�@��;-�#�� �� ,�� ���� E��#��� B��#���$� %���C�&� D� )���*+����
/E1
����������ABACBDE�F��B����
.";��,��;� �(� #"�� (��,����#� � (+�,�� %�";#�� ��);*�#�&� �� � ��*��.#���� �(� �� ��7� .";�+)�
%����#�*�� ��);*�#�&$� ��DCDEBF�902�01A=0E/$
!�)���'F�?��������:A�%����&����L�*��#���8+��� --��7�(+�,��� �����,�� �(���� �����*� �2���*��#�;�
��*���� �@���.���*�(+�,����*����*����7���� +���,�#��."�*�."���$��BD���F���<>2�9>=/A3$
!�����L� ��� ?� ��,"+�+)��� �� %����&� D�������*� ���#��(�*�#���� ��� (+�,�� (��)� #"�� *���#��� )������
�� �)��#���((�C����� ��$� ��DCDEB�FC����F����//<2�/AA=/A9$
!�����L�������,"+�+)��������"����D�?��#��*��'�%����&��+�,��� ������#;������;,��- �.��#� ���,�����
�(� #"�� D������� ���� ������� � �;� #��,�#� � �������)��#��� ��8+��*��,� *�)���� � 7�#"�
*+�#���#���$�'� $ B��DABDCDE���DCDE��E/2�<99=>/3$
!���� � :�� ���*���� �� ?� ��)�-�,�� �� '� %����&� B������#;� �� � (+�*#����� �(� )�*���*�.�*� (+�,�2� ��
)�����,�*�).����#����.���,�*�(�� �7���$�!��F�B�$�B������E32�344=310$
!�������C�%����&���(#;�;������(�)������);*���,;$�'��EFC,B����B���4A2�E<=//3$
!�����:B:�� ����� �� C� ��"�� ��� �,���:!�� ����� B��#���$� %�����&� B��*����;� �(� ������ ��#��)� ��#��
(��)���� �(�����#"��(+�,���#�����(���(�$��F�����>E>2�3AA=3A<$
!����� :B:�� ��*"�� �� 'D�� F�7��7��#"� BA� ?� ����� B� %�����&� 5��� �#���� �� � L+�#�(�*�#���� �(� #"��
.";�+)���)��(����D���D�F�.";�$����$�- !'��E���32�/E<=/E4$
!X�,�������������#�+��D�%����& �����#��� �(�)����=�)�*������ � ��(�� ���#"�� ��.-������ $ ��F����
���B��� B��DABDCDE��42�EEA-E0/$
��,�)��:����+���D�������,���6�?�B������%����&�E�����#�*�*";#�� �2�#"�����((�*#�����.";#�.����#���
*�))+��#������ �(�� -7��� ;��)�*�$�#�"�DABDCDEBF�4E02�//<=/39$
��,�)�� :� � ��� � ����# � �� � ����,� � �6� � � � ��+�� � D � ? � 5�� � B��� � %����&� '"� � .�����#�* � *";#�� ��
C;,��"�@� �+)��(�*���#�#���#"��,��7#"��(�#"��*�� �*�����@��.����#����B�."��������*+�#+�����(�
#"����� �������,���D�#���������$� ���D���"B�E�D�����D�FC$D�B����)�BDCDEB�FC��B����� 3E>2�
/41/-/411$
��)��+)��������+,��'���� �)��F��D����F��:��"�)��!��#���$�%����&�BB�!�.��,�������.��#$����C�B�
!�B"�����F����<92�B33-B3E$
��..�����B�����������+�������:��7�� �:�?�����#�,�FC�%���B&�:���*+����.������(���#"�� �#�*#����
�(� .�#"�,���*� (+�,�� ��� #"�� .�����*�� �(� "+)��� #���+�$� �D���FC D� �"B�FC B��DABDCDE�� >E2�
/EE
����������ABACBDE�F��B����
0//=03A$
����;� ��� %����&� �"�@��."���� ��#���*#����� �� � #"���� ��.���#�#���� �(� )�*������� �,��#�� (��� #"��
�����,�*��� *��#���� �(� .���#-.�����#�*� ��)�#� ��$�!���FC ���B�� D� ����D�F��DCDE�� <02>3<-
>>/$
���.�#��*�� D:�� ���,,�� �!� ?� B��@��� E� %����&� '"�� �*���,;� �� � �).�*#� �(� *";#�� ��);*����2� ���
�)��,��,� ��������(��)."������$�����"�B���DCDE�F�"��DC��BD��342�/A9=//0$
��)������).����DC��?�C��"�)�A��%���C&�����+#�����;�����#����"�.���(�D.+��)��� ����(���� �(��)�
#����-��*"�����;�����(�1��+*�������*� � �,����$� DC���CF��BDCDE�F�"��DC��BD��3<2�3>44=
3>11$
�����E:�%����&�6��� �*�#���,+���(�<>A���(+�,�����)�����-����$� ��DCDEB�FC����F����/A>24/1-4/E$
���� �E:� ������� �E�� �:��#�� �B6�?��#��.��� � !D� %���B&� ,B��BD�F�� D� ��� ��D�F$ �/A'"� � �#���$�
���)7����E������'��7��� ,�$
��"�)�;���!�?���"�)�;�����%����&�:������);*���,;2�#"��"�,"���(+�,���D*� �)�*�E�����A�� ������$
����,��:��'�;����'��?�B�#@������%����&�'"��(��������*�� ��(�#"��E������.���);*�#���%B�);*�#�&$�
��DCDEBF�/A<2�>44=>4E$
��S,���:����S,������6����������#�*���,���F�?��*"S������D�%����&�E";��,���#�*���(����*�� �#��(���
�;�#�)�#�*���� �.";��#�����);��(����+�*+����);*���"�@���(+�,��(��)�.";�+)�#���.�*���������$�
�������DCDEB���/9<2�9EA=90>$
�S..�������:�������:+�����BC��A�����+�-B��C������?�C+����+�A�%���C&�E";��,���#�*��((���#�����(�#7��
�+���;�#�*� .�#"�,���� �(� )������ )�*����,���� ������F��F "B���D�BB %6��,"#&� :�,�+�� �� �
(����B"B���DC��B��D�BF���"�$(����DEF�B�3!CEDCDEB��3E2�/14-/0>$
A���M������A��'���F�����,����F+��,�F�?�C"�+���%����&��+�,���*�))+��#����(��)�)�#"����"; ��#�-
������,� ��.-����)�������� �)��#�������+#"��"�������$����-$ �.D���FC�/2�E41=E13$
A��,�����BD����;�������� �'��C��;�:6�?��+�,���C�%����&�'"��*�����#�+��*���+��������#������(����)���$�
(������ABDCDE��/32�/EE<=/EE0$
A��,)+����F�?�����;#"�B6�%����&�:��#���:��#��,������#"�:� -B*������ ,�$�/��F�DE�F����3A2�
E0-09$
/E0
����������ABACBDE�F��B����
A�������:�������B�?�AY.�@-C��*Z��E�%����&�'"���������)��#���*�� ��A�://��� ��D0�CCF� (��)�#"��
��.��#�����*"��,�*�� ���(�(+�,�$���D�B���/1/2�//1=/3/$
A������:D�����*��"��� ��C�����7���E���"��������:*C�##�,���ED���#���$�%����&���+�#���6��� ���+�#���
M���������3$A$��BDB��D��F�B���3<2�39>E=39>0$
A�������@�'���+�,�+ �C��:�"R������������C�?�5�� �������"+;���E�%����&��+�,��� ������#;���� ��.-
����"; ��#"��)����*��;�#�)�$�!��CB�"F�"���B�D�����FC B��DABDCDE��E42�1>/4=1>3/$
A�([���������� �#������\�������������!-���5��*�,���������#���$�%����&���������,�(+�,���@��(��,����#������
)�)������(�(���"7�#���.�*��+���;�#��2���� ��*��(��)���)���*+���� ������#;��#+ ;������ ��.�
)���)�*#�*�����$����B�D�����FC B��DABDCDE��92�1/=E/$
A�([���� ��� ��+����� ��� D)���� � ��?� ��)�-�,�� �� '� %���B&� '"��)���*+���� ������#;� �(� (���"7�#���
.�*��+���;�#�����������"�,"��**+����*���(�.+#�#����.�����#�� �� ��� #"��.����#��$��CD$D���<2�
�3<3>$
A�(���*�:��]^_`ab�D��cdefgd���?�B�������B�%����&�C���#�*�B������#;��(��)�����+���;�#������A�����
B�((����,��;�'"����'��."�*��#�#+�$�!��CB�"���B�D�����FC B��DABDCDE��E/2�49<4$�
A���� ���:B��:+���� �D�?� C�7��D�� %����&� �"�#��� �;�#"����� �� � (+�,��� .�#"�,������$� (������
/�B�BD�B� B��DABDCDE��/<2�>/1=>3<$
A�.[�����*�����:��8+���������:��,�#�!-���B�������B�?�B�)��@����%����&�5��#�*����#�+*#+����(��)����
�+���;�#��� ��� #"���� ������ #"�#� �((��� �;� #"���� #��."�*� �#�#+�2� �� 8+��#�#�#���� �..���*"$� ���
-$ �.D���FC�>2�/4A9=/4/9$
A���+���������E�.�)�*"����B��:*����������B���������������������#���$�%���B&������#� ��#)��."���*��B3�
�((�*#�������)�*������� ������#;�����*��#� �7�#"�#��)����,���.��$����B�D�����FC B��DABDCDE�
/A2�931=9>/$
A�#*"��� E:� ?� E�7���� :!� %����ED D� #�����)�*� �+))��;� �(� �";#���);*��� %�";#�� ��);*�#�&$�
��D�F1D��0>2�>>E->0E��
A�#*"���E:��E�7����:!�� �"�)����� !C�� A��,*���� !��� �"+�*"���� E�� �#���$� %����ED��#���#�+*#+���� �� �
)���*+���� ������#���� �(� #"�� �";#�� ��*���� %�";#�� �����&$� (F�F"BF� �D���FC D� �D�F�� 0<2�
/41/-/4E<$
A�#*"��� E:�� E�7���� :!�� �"+�*"���� E�� ?� �"�)����� !C� %���C&� ��#���#�+*#+���� �� � )���*+����
/E9
����������ABACBDE�F��B����
.";��,���#�*� ������#�����(�����7��� ����#"���"�@�."; ������%�";#�� ��);*�#�&$� ��DCDEB�FC
����F���//A2�090-9/4$
A�#*"���E:��E�7����:!�������B!����"+�*"����E���6���(��� �6���#���$�%���B&��"�@�."�;*#� ����-����7�
�� �������";#�� ��);*�#�$� ��DCDEB�FC����F���//32�/A</-/A>0$
A�,,���#�((��� D��� F�+���(� �F�� ��+,��� :�� ?� ���"��"� � :�� %����&� E";��,���#�*� ������#;� �� �
*�))+��#;� �#�+*#+��� �(� ��������*� ,+#� (+�,�� %.";�+)� ���*����)��#�,�);*�#�&� ��� �+)����#�
�� ����-�+)����#�"���������$D���-$ ��D���FC�>2�/334-/3<4$
A�+�F!��F� ����:��?�F�����B�%���C&�A�����(�#"��(��,���+)�"�..��� ����;���*�����#"��(+�,��������,�2�
.";��,���#�*� �#�+*#+��� �(� ���, �)� �+�,�� ��(���� � (��)� ��D� .��;)������ � �+�+��#� ,����$�
� (��DC��BD�F���BDCDE��12�E>$
A�+�F!���#�����).��'�������)����F�����,�#�A��E"���..��F�?�A��,����%����&�E";��,���)�*�����;����
.�� �*#����#��,��+.�����#����"�.��(��+*������ ���� �(+�,���� �.���.";�;��(�@;,�);*�#���7�#"�
��,��(�*��#��+..��#$�� (��DC��BD�F���BDCDE��92�3E3$
AY.�@-C��*Z��E���� �Z,+�@-5���������E� �Y�-D��Y���?�:�������B�%����&�����.�*#� � ������#;��(��)����
�+���;�#������ ��.-����D�#��*#�*�.����#��$��F�����>A92�1A<=1AE$
AY.�@-C��*Z�� E�� E"���..�� F�� C���� �� ?� :������� B� %���&� D+#�*"#"���+�� �+���;�#�*� ������#;� ���
"; ��#"��)��� �� �)��#� �� � ��.���)��#��� )�*��*�����@���� �#� #"�� :� -D#���#�*� �� ,�$�
��D���"B�E�D�����F�BD�FC!�F"���D�$�B�����D����%�B��"$�F���D�!���B�F�/AA2�19E=
EA3$
AY.�@-,��*Z��E��5����"*"����D�?�:�������B�%����&��+���;�#�*� ������#;�����*��#� �7�#"�*������#���
�� � (�+� -���7�#��� ��#��(�*�� ���A��#���#;�"; ��#"��)��� (��� $����B�D�����FC B��DABDCDE��92�
4>1=44>$
A+#@���������+((���������!��:*A�+,"����B��������C��#���$�%���A&�D���)����,�#"��(+�,���#�����(���(�2�
.��,������*�����(�*�#������� �����+#�����(��+�*���+����#���#�$ �!���B�F��D���FCD��D�F�� 9/2�
/>>1-/>0A
:��������������,+R�5��C+����+�A�?�E� �Y�-D��Y���%���A&�E�*��+���;�#�*� ������#;����������,�#��."�*�
*���#�����#���#+ �� ��;�)���*+������ �*+�#+���,��..���*"��$�'� $ B��DABDCDE���DCDE��4A2�
3</=3><$
/0A
����������ABACBDE�F��B����
:������� �� ?� E� �Y�-D��Y� �� %���B&� ��������,� ��7� )�*������� �+���;�#��� ��� #"�� �+�(�*�� �*���$�
(������/�B�BD�B� B��DABDCDE��//2�3/<=3/0$
:*A�+,"����B!��F����##�B���A+#@��������.�#�(���� !6�?�5��,��;���� %����&�'"������*"� (��� #"�� (+�,���
#�����(���(�$�����"�B� B��DABDCDE��/E2�>00=>9E$
:*������!��������������+� �#�F:��B�)�+����5��F�7��7��#"���FC+�%� �$&�%���C&��#����#�������� ���(�
��#���*�����)��*��#+���%5�������� �&2�� �.#� ��;�#"�������#���#"��#����#��������#���*���
���,���� �5������ �D+�#���� � !+�; �3AA4$ ���E���4�E��FABC�� �AC� �D$�$C$ �C��#��� �5����, ��C��
�+,,�����A��*"#���#���$2�h�i-�������/-410$
:�������B��� �AY.�@-C��*Z��E�%���&�D���"; ��#"��)������#��������(���.�����#�*�.��#��#�J�����,$
B��F�F�B�DCDE��/92441-440$�
:������� B�� ���� ��� F�; ��� ��� ����� B�� AY.�@-C��*Z�� E�� �"��� �� �# ���$� %����&� C������ �+���;�#��
.";��,��;2���)���� ��)���-� �� � ���,�-�+�+��#� ������)���B�D� #����� �+..��#�)���.";�;��(�
�"�@��������#������� ���*���#�$� DC���CF����CDE����B��F�"��DC��BD��>>2�344=311$
:�@��;-�#�� �� ,������A�#*"���E:��A��,*����!���E��#���B�?���))����B��%����&D��� �*";#������j��
��7��� ������#"���";#�� ��);*�#�+ ��DCDEB�FC����F���//<2>90=4AE$
:+������ C:�?� �*")�#� !E� %����&� �+�,��� ��� ������#;2� 7"�#� ��7�� ���7J�6"�#� *���7�� .�� �*#J�
�BD"B����B��F�"(D�����F�BD��/12�/=4$
:S����� BC�� �S..��� ��� �� � �S..��� F� %����&� �(�*#���� ��.���)��#�� ������� ���� � "��#� ���,��� �(�
�+�;*"��)�� �*������� %B�);*�#�&� �� � �";#�� �+)� .��;��."������ %�";#�� ��);*�#�&�� #7��
�+���;�#�*� .�����#��� ���)������ ���7�� ��,��� %E"���.";*���&�����DCDEB�FC ����F���� >E23/E-
33<$
��,�"�)��'��F�)�)�#��:���������'��'���)��F�?�F������"����%����&�B��#���+#������ �� ��#�(�*�#����
�(� �� � ;���#�� ��� ��.-���� �������)��#�� ���+� � #"�� ���#"7��#� E�*�(�*� B*���$�!��D�B� �F�
&�������D���0A2�/A/=//A$
��,�"�)��'��'���"��"�������,����F��D� ��-6�"���:D�?�:�;�@����:� %����&�:���*+������� ��*��
#"�#� ��.-����*"��,� (+�,�� ���� )�L��� (+�,��� *�).����#�� ��� ��.-���� )�#"���� *�� -���.�
�� �)��#�$����B�D�����FC B��DABDCDE��/<2�3<49=3<EA$
��,����F����,�"�)��'��F�#� ��F���+��+���'��'���)��F��#���$� %����&��+�,��� ������#;� ��� ��.-����
/0/
����������ABACBDE�F��B����
�� �)��#��=�#"��.�����*���(�������(+�,���,��+.�$�'��EFC��DCDE��<2�</1=<34$
���������F���;���,�:������#�����������D������������A��������F���#���$�%���C&�'�����)�*����������#;��(�
B�D���8+��*������.+���*���8+��*�� �#������2���(+�,���.���.�*#���$�EA���B���/2��49$
�������� AA�� F�7��7��#"� BA$�� E�#������ �F� ?� �� "�� � �D� %����&� :�9� � ���+�,"� ��)��*��#+���
��������$�- !'��E���/2�/><=/>E$
�;����� E�� E� ������:�?� A��,*���� !�� %/���ED ��FCF��D�����B�� E�F�BCF�BD��B"B�� %�";#�� ��);*�#�&��
,��$��#��.$����$���� ��;)���#�*����*�F�BCF�BD��B���.$�%�"� �.";*���&$��D���FCD�����DCDE��<42�
/E1-/04$
BU������F���E�����#�!A��!�*�����!D��:��*�����!-:�?�5;�,�������%����&��+�,���*�))+��#;�����;�����;�
���,�-�*���� ��8+��*��,��(� �������)��#��� ��).���$�!��CB�"F�"���B�D�����FC B��DABDCDE�
E/2�44>>-444A$
k.���:��5���#���D�� 5���#������:�����:��B������� !��#���$� %����&D'"��������� �#������:���LD:�
�������� ,������ �� � �*��;�#�)�*� ��#���+#���� .�##����� ��� ���+�*+���� );*���"�@��� (+�,��
%C��)���);*�#�&$��������DCDEB���/002�33<-3>/$
E� �����D�����������C�B����+��#����D�?���������:���%����&��+�,������+#����������#� 2��..��*�#����
�(� #"�� .�����@� � ������"�� � )�#"� � #�� �� ��;������ (+�,��� .";��,��;� .���� ��� �� ��7�
.���.�*#���� ��� .";��,���#�*� ����#����"�.�� �� � ����,��*�� �#��� �(� D�*�);*�#�� ,��+.�$�
�D���FCD� DC���CF���DC��BD��1A2�E31=E<4$
E���� ��-!��E�����-!��E"�)�5F��F����B-�����)��-���#���$�%���B&�:�*���+���;�#�*�B������#;� ���:������
�������)��#��� ��� D���;���� �(� �+�(�*�� A�;��� �� �)��#�� (��)� #"�� ���#� ���$� ��� �D���FC D�
B��DABDCDE��>12�3>>-3>9$
E�������� :� %���B&� D��+�*+���� );*���"�@�2� #"�� )�#"��� �(� .���#� ���#� �� ��;)������$� �F����
���B���+ B��DABDCDE��12�E1<=EE4$
E�##������B!�����.���!�������E:��E;����A�?���)����BE�%����&���)���������;�#��#"����,���7������,;$�
����"�B���DCDE�5��DC��BD��342�101=19/$
E��;� �C�� ����� ;� EC� ?� ��+��� 'B� %���B&� �+�,��� *�))+��#;� �*���,;2� D� ";��� � ����#� 7�#"� ��
)���*+����)��#��$��BD$�B�����402�E99=0/A$
/03
����������ABACBDE�F��B����
E"���..��F�?�A�+���#�!�%���B&�F�7�,�� ����� ��.�.";��,���#�*�#����J�(������/�B�BD�B�*����B��
F�",���CD������02�1/1=13<$
E��#��� ':�� �*"� #� �6�� ��@��� A��:��#��� DE�� �*")� #� ����#���$� %���B&�6� ��.��� � �**+����*�� �� �
.";��,���#�*�.��*�)��#��(��������*�����,��+.�� ����.��)����#���7�����*"�#��#"��(+�,���#����
�(���(�$� DC���CF����CDE����B��F�"��DC��BD��>12�1<4=1>>$
E��� ��B�?����� �����D�%���B&�:BB�A'��'2�#��#��,�#"��)� ����(�B�D��+��#�#+#���$��BDB��D��F�B�
!��CB�F�BD���D���/>2�0/E-0/0$
E�7����:!�%���&�A�����,��#�);*���,;�7�#"���!��+��(�*��=�D�,��).����#��"#�� ��);*�#����*#�������
#"���������)��#$� ��DCDEBF�042�/-3A$
E�+����� ����+��#� ��� ���##��� ��� �+*"�� �:�� A+ 7�,�6��#���$� %����&� �A5D2� �� *�).��"������� �������
����+�*��(���8+���#;�*"�*�� ��� ����,�� �������)�����D���8+��*�� �#��*�).�#�����7�#"�D��$�
���C�B�!�B"�����F����<42�E/00=E/91$
��,"+�+)�����%����&��+�,��(��)�)������"���#�#�2�����..��*�#������������)� ��#���$� ��DCDEB�FC
����F����/A>2�/333-/331
��,"+�+)��������,"+�+)�������"���+�C��C+.#���:����,�� �����#"����#���$�%���A&��+��� ����#�)�2�
*+�#+������ (+�,�� ����� ��.-���� �� �)��#� *���� (��)� #"���"�,���'���*"�� � ����B*���$�,���
$�F����F����F��-)/��F�DE�F��B�����F����F�����4/2�/E49=/E10$
��,��� :�� ���#�+�� C�� :������� B�� :X����� DE�� AY.�@-C��*Z�� E� %����&� �+���,"#-��.��� � ���(��)�
:�*���������))+��#����D�����#+����;������#��#�#���"�����;�� ���@��,-�� ��#����A�����$��&D$
/���12��3/E1>$�
��)���@-A�� �������"����':�?�C��)������%����&���� ������#;��� ����,��,��.";��(�F; ��#"��)���
5��#��.�*���$�/��F�DE�F����3A2<A->/$
�� �*����B���� ������?�C��"�)�A��%����&�C��)������(+�,��(��)�#"��B� ���*���$ �$�B����� 3092�
/93A-/93/
�� �*����B� %����&���7����7����� (+�,��� ����+#�������� ����B�D�)������� �� � #"�� (������ ��*�� $�
����F���B� B��DABDCDE��/4<2�/34=/<A$
��);�6�� '�;���� '��� F���� F�?� ���.� F� %���A&� ��+�� "+� �� -)������-;���-�� � ����*+���� ���+�*+����
);*���"�@��$� ��D���"B�E� D� ��� �F�BD�FC !�F"��� D� $�B����� D� ��� %�B��" $�F��� D�
/0<
����������ABACBDE�F��B����
!���B�F9/2�//0>/=//0><$
��*"�� ��'D�?������B�%����&�:���*+�����*������,��(�(���-�����,�)�*��������+���;�#��2� ������#;��� �
��#���+#����+���,���)�#�-����;���$�(������/�B�BD�B� B��DABDCDE��02�3>A=343$
��*"�� ��'D$��!�����:B:$��A����� �C�?������B�%����&�:������(+�,�2�#"�����*���,;��� �)���*+����
������#;$�!���FC���B��D� F�B��$�B�����>2�>94=433$
���8+��#�� �� ?� F+�������*��� !E� %���&� :���;��<2� ��;������ .";��,���#�*� ��(����*�� +� ��� )��� �
)� ���$��BDB��D��F�B���/92�/4E3=/4E>$
������,� D�� ���� ��� ��+@-:��#���@� ��� "�)���� ��� C����#� C-D � �# � ��$� %����&� D�*"����"�@�);*�#��2�
�����#"��,������*���#�*������(�+��8+�#�+�������(+�,�$�$�B�����<<<2�0E1=0E9$
�+�@-F������� !�� C��@l��@-E���#�� !:� ?� �+�@-:� ����� �� %����&� ����+#���� �� � .";��,���#�*�
����#����"�.���(�*"�#����;�#"�����(��)�;���#���� �(+�,�$�'� $6�F������F����/2�3>E=341$
�+�@-'�������� ��,����F��B�����AD���.���#� ����A�� (�� ��� ��#���$� %���A&�(F��F��D�FD��0F�0F�B� ������
�� �.�� ��#��.��#"����#������,�$�(�������BDCDE�/>2��9>1-�9>E$
���#�+� �$� ?� ����� �� %��B�&�'"�� ���,"���� !�����,� )�#"� 2� �� ��7� )�#"� � (��� ��*���#�+*#��,�
.";��,���#�*�#����$� DC���CF��BDCDE�F�"��DC��BD��>2�39<-390$
��� ������:!�%���E�:���*+���� �#��(��)�3E�.��#����� ����#��+..��#���E��*�)���������,����(���� �
.���#�$�!���B�F��D���FCD��D�F���9A2�94>-941$
�*"� #��6��:��#���DE��A�.����BD�?��*")� #����%���&���������� ;��)�*���(�.�����+��;�+����7��
(+�,��������,������#+� ��������$�$�B����<A/2�/<49=/<1/$
�*")�#� !E� ?� :+������ C:� %����&� D�� ��#�)�#�� �(� #"�� ��7��� ��)�#� �(� ,������ (+�,��� ������#;$�
�BD"B����B��F�"(D�����F�BD��/12�99=///$
�*"Sm����D���*"7��@�##�B�?�6��������%����&�D���7�(+�,���.";�+)��#"��C��)���);*�#�2�.";��,��;�
�� �����+#���$� ��DCDEB�FC�����F����/A42�/>/<-/>3/$
�������� :D� ?� A�� '�*��� �� %���B&� '"�� ��� � (����2� �� ."�#�#��."-(+�,+�� .��#����"�.J� ����"� B�
��DCDE�5��DC��BD��/<2�/4=3A$
�"�������D��B��*���������"�)�;��������"�)�;���!��:���������A��#���$�%����&��+�,������ ������#;����
�8+�#�*�"���#�#�$��BD"B����B��F�"(D�����F�BD��/12�>9-1E$
/0>
����������ABACBDE�F��B����
��)�-�,�� �� '�� A�([���� �� ?� C������� �F� %����&� F� ��� ������#;� �)��,� �8+�#�*� "�#���#��."�*�
(��,����#��2��*���,�*���.�#��#������(�@���.���*�(+�,�$�#�"�DABDCDEBF1492�4-33$
��))���� B��� !�)��� 'F�� :�;��� D�� ?� A��,*���� !�� %����&� A��+��);*�#������ �� ��7� �� ��� ��� #"��
�";#�� ��);*�#�$� ��DCDEB�FC����F����//<2�>4A->1A$
��)�� � A� � ��+�8+�# � !� � A����8+� � �� � ? � A���� � � : � %���& � B��,�� � �� � ������(�*�#��� � �(�
�� �);*���"�@���(+�,���� �*���*� ��*��7�#"����*+������� �.���#�$��F�����<1<2�1E-19$
��)���#�� ��� ��).������ ��� A�+��� �:��5�@@��D��BDD�,����:��#���$� %���C&� E��@�."���*� � �.#�#���2� ��
,���)�*�.���#��(����7$��D���FCD��BD�����DCDE��/312�//=34$
���,"�E����,"+�+)������5��)��E�?��"�+*"��F�%����&�E";��,���#�*� ������#;��(�*+�#+������(+�,��(��)�
#"�� ��.-������ �)��#���(�#"�����#����� ������������ �#"����,��7#"�*"���*#����#�*�$�'��EFC
,B����B���>A2�09=/A3$
�)�#"� ���� ��*����� ��� E�.�� �� ?� �)�#"� �D� %����&� E���#� .��(��)��*�� ��� �#����(+�� �������)��#�2�
��#��.��#��,� ��7� �� � ��#�����"� � ���7�� ,�� �(� #"�� �n���� �(� ���+�*+����);*���"�@��$��CF��
F�"$DBC�<312�<-3A$
�#�L�*"�!���B��#��*"����?���;��6�%����&���).���#����,���)�*�����;�����(� (+�,���,���)�����������
��#���-��*"���*��#���$�*��D���BDCDE��02��33<$
�#�L�*"�!����������:A�����*�7����:��F����##�B���!�)���'F��#���$�%����&�'"��(+�,�$�(�������BDCDE�
/92��0>A=�0>4$
�#�*")���� D� ?� ��������-�)�#"� '� %���&� E";��,���#�*� ����;���� �(� �+���;�#��� +���,� "��#-�"�*��
.��#����F�.9A$��D���FCD� DC���CF���DC��BD��4E2�>A0=>/9$
�#�����).��'��6��,"#�!�?���� �+(��A�%���C&�'"��.��#��#������,�����(����)������ �(+�,�$� DC���CF�
�BDCDE�F�"��DC��BD��3<2�9<=/A1$
�#��*��'�?��.�#������%���&��������+���;�#�*�A����,����(���� �(��)��)���-�+�+��#����D�D���;����
�(� B�;,��-B�.��#� � :������ �������)��#�$� !��CB�" F�" ���B�D�����FC B��DABDCDE�� 192�
314E-311<$
�#��*�� '�� '�;����C'�?� �.�#���� ��� %���&� ������ �+���;�#��� (��)� #"�� E��)����#�;�D����*� �����*��
������%�������������&$�!��CB�"F�"���B�D�����FC B�DABDCDE��192�4141-411<$
/04
����������ABACBDE�F��B����
�#��*��'��F�;7�� ����'�;����C'��5��������?��.�#������� %���C&�D�)+�#�.���E��-.��)����..���*"�#��
�**����#"��)�*���+���;�#�*� ������#;�����������)��#�����).���$���D�B���/4E2�</=><$
�#��*�� '�� ����� B�� ������ :�� �"���#��� ��� !����� :B:��# ���$� %����&� :+�#�.��� )������ .�������� #�,�
�������)��#��� B�D� ��8+��*��,� �������� �� "�,"�;� *�).���� �+���;�#�*� *�))+��#;� ���)������
�����*�7�#��$� DC���CF���DCDE��/9��+..��/2�3/=</$
'����"�#�����'�+*"�;��:�����)��� !B�?�:��+;�)��'� %���C&�:���*+������� ��*�� �)���#��#��,�#"��
���� ��);*�#�+�� (+�,+�� (����D�D���� ����F���� ��� #"�� �)����#� )�*������� �+���;�#�� ���
�� �)��#��#�#"���+���"�)��������)�#"�������.$��1����D��BC���/A2�/14=/19$
'����"�#�����F+�+����������@��������,����F�?�:��+;�)��'�%����&�B������#;��(�)�*��������+���;�#���
����� �)��#��#��� ��.-����)�#"����*�� ����.2��+���;���(�������)���B�D�����������(��)���7�
�� �)��#���).������ �#7������*")��#�*+�#+���$��1����D��BC���//2�41<=4E1$
'����"�#���������@������F��"� ��'�?�:��+;�)��'�%����&�:���*+������� ��*��#"�#�E";��,���#�*���;�
B����,� � �����#��� D��� D*#���� ��� :�*������� :�#�� �(� B��.-���� ��� -���.� �� �)��#$� �D���FC
���F��D�B� B��DABDCDE��4E2�E1-01$
'������ F�� �����7��:��6�#������::�?� �+,�;�)�� !� %���A&�:���*+���� .";��,��;� �(� C;,�);*�#��
���� ������-/o��� ��E�/���8+��*��2���)�#�#������� �+#���#;��(���#����#����)�������#���B�D$�
DC���CF����CDE����B��F�"��DC��BD��<A2�><0=>>9$
'������ F�� 6�#������ ::� ?� �+,�;�)�� ! � %����& � ����+#�����; � ����#����"�.� � �)��, � ����� � (+�,��
%�";#�� ��);*�#� � �� � C;,�);*�#�&2 � ���,"#� � (��) � )���*+��� � .";��,���#�*�$ ��D���FC D�
*����B�!��CB�" B��DABDCDE��4/2�31E-3E1$�
'�;���� '��� ��);� 6� ?� F���� F� %����&� �+�,�� (��)� #"�� ��7��� B�������� �";���� *"��#2�
�";#�� ��);*�#��$�!���B�F��D���FCD��D�F���E92�/3<<-/3>/$
'�;����'���F����F�?����.�F�%����&�D�*;�����*"���(��)�#"����7���B���������";����*"��#$�!���B�F�
�D���FCD��D�F���0>2�993-/AA>$�
'�;����'���F����F�?����.�F�%����&�'"���� ��#�(������D�*�);*�#��$��F�����<992�1>0$
'�;���� !6� ?� ������� :A� %���C&� B�#��,� ����,��*��� ��� #"�� �+�,��� '���� �(� A�(�2� �����7� �� � ��7�
����;���$� ��DCDEBF�902�0<0=0>9$
'"����� DB�� 5��� B����� �A� ?� 5��,��;�� �� %����&� D�*�);*�#�� .";��#;.��� ��*����� � (��)� �� C+�(� �(�
/01
����������ABACBDE�F��B����
:���*��)�#"�������.������ ��#�*���#�����+�*+�#+�� � ��.-����(+�,���*�� ��(��)�#"��E�*�(�*$�
'��EFC��DCDE��42�3EA=3E<$
5��� B����� �A��6�� �:��� �*�##� !A�� �� �� �7�� !�� D� ������ ���#���$� %����&� D� (+�,��� �.�@��#�*� ���
)+�������#��� ��.-����"; ��#"��)������#$� F�B����DCDE��302�4>=13$
5�� �������"+;���E����� �+(��A��A�;��������#��*@���!�?�F�+�,�!E6�%����&���#�������(+�,��� ������#;�
���.���#����#�$�$�B����3942�3A4/$
5��,��;����%���&�'�����)�*�)��� ��#�(�*�#�������.+���*�B�D� �#������$��������DCDEB���/1A2�>-4$
5��,#� �� ?� ����� E:� %����&� ��*��#� �����.)��#�� ��� #"�� #�����)�*� �((����#���� �� � .";��,���#�*�
.���#�����,� �(� (+�,�2� �).�*#� ��� �..��� � )�*�������,;� �� � �������)��#��� ���#�*"����,;$�
!��CB�" B��DABDCDE�F�"�BD�����DCDE��9A2�>/=4E$
6�����,"#� EB�� F������ C�� ��,���:A�?� �#�*���� ��� %���&�:���.";��#�*� ���,���� �(� #"��:�#�@��2� ���
����+#�����;������7�#"�(+�,�$�$�B����31A2�<>A=<>3$
6�� ���BD�?�5��� ���E+##���6F�%����&���� ������#;���*��;�#�)�(+�*#�����,��� ������-,��+� -
����7-,��+� �����BD"B����B��F�"��D�����������BD�B�E)�������B�F�"��������B���$�A����+�
:������)���?��*"�+�#��E��� �$�B�(�� ���������#;�E����$
6"�#��::�� !�)��� 'F�� BDB������� ��� ��(����:!�� '������ F�?� �+,�;�)�� !� %���C&� E";��,��;� �(� #"��
C;,�);*�#������ �����+*�����������)�����8+��*�� �#�$� ��DCDEBF�902�0E3=00>$
6+;#��!��B����L��E������ ��E����F��E�����C����+����+7�E���#���$�%����&���).���#��������;�����(�)����
#"���<AAA���8+��*�����������#"������#��*���(�#7��.��+ ����#����������5>��(��+���;�#�*��)����
�+�+��#�������)�����D$����C�B�!�B"�����F����302�>190=>EA0$
C+�� ��(� D�� �+�,�� !�� ��"���� D�� ���,��� �!D� ?� �#��*�� '� %���C&� B������#;� ��#�)�#��� �(�
)�*���+���;�#��� ����7� #"�� *"�)�*����� �(� #"�� �����*� :����,��� �L�� �� B��)���$� '� $
B��DABDCDE���DCDE��402�>E1=>9/$
C+����:� %���&�:(�� � 7��� ������� (��� �+*���*� �*� � (�� ��,� �� � ";��� �@�#���� .�� �*#���$����C�B�
!�B"�����F����</2�<>A1=<>/4$
/0E
����������ABACBDE�F��B����
/00
�������
���
��
Active root-inhabiting microbes identified by rapidincorporation of plant-derived carbon into RNAPhilippe Vandenkoornhuyse*, Stephane Mahe*, Philip Ineson†, Phil Staddon†, Nick Ostle‡, Jean-Bernard Cliquet§,Andre-Jean Francez*, Alastair H. Fitter†, and J. Peter W. Young†¶
*Centre National de la Recherche Scientifique, Unite Mixte de Recherche (UMR) 6553 EcoBio, IFR90/FR2116, Centre Armoricain de Recherche surl’Environnement, Universite de Rennes I, Campus de Beaulieu, 35042 Rennes Cedex, France; †Department of Biology, University of York, P.O.Box 373, York YO10 5YW, United Kingdom; ‡Centre for Ecology and Hydrology, Lancaster Environment Centre, Bailrigg, Lancaster LA1 4AP,United Kingdom; and §UMR 950 Laboratoire d’Ecophysiologie Vegetale, Agronomie et nutritions, Universite de Caen, Esplanade de la Paix,14032 Caen Cedex, France
Edited by James M. Tiedje, Michigan State University, East Lansing, MI, and approved September 5, 2007 (received for review June 22, 2007)
Plant roots harbor a large diversity of microorganisms that have an
essential role in ecosystem functioning. To better understand the
level of intimacy of root-inhabiting microbes such as arbuscular
mycorrhizal fungi and bacteria, we provided 13CO2 to plants at
atmospheric concentration during a 5-h pulse. We expected mi-
crobes dependent on a carbon flux from their host plant to become
rapidly labeled. We showed that a wide variety of microbes
occurred in roots, mostly previously unknown. Strikingly, the
greatest part of this unsuspected diversity corresponded to active
primary consumers. We found 17 bacterial phylotypes co-occurring
within roots of a single plant, including five potentially new
phylotypes. Fourteen phylotypes were heavily labeled with the13C. Eight were phylogenetically close to Burkholderiales, which
encompass known symbionts; the others were potentially new
bacterial root symbionts. By analyzing unlabeled and 13C-enriched
RNAs, we demonstrated differential activity in C consumption
among these root-inhabiting microbes. Arbuscular mycorrhizal
fungal RNAs were heavily labeled, confirming the high carbon flux
from the plant to the fungal compartment, but some of the fungi
present appeared to be much more active than others. The results
presented here reveal the possibility of uncharacterized root
symbioses.
ribosomal RNA � stable isotope probing � symbiosis � arbuscular
mycorrhiza � endophytes
P lants are the dominant primary producers in most terrestrialecosystems. In the soil, they are escorted by a myriad of
microorganisms living freely or in intimate interaction with theirroots (1, 2). These microorganisms can be pathogenic, parasitic,saprotrophic, or mutualistic. Among the root symbionts, arbus-cular mycorrhizal (AM) fungi are well known and have beenobserved colonizing the roots of most plant species in manyecosystems (3). Recent studies show that high diversity is thenorm even where plant diversity is low (4–6). These AM fungiare biotrophs, unable to grow in the absence of a living plant, andoften display a broad host range although there is growingevidence for differences in host preference (5–8). They havebeen demonstrated to improve plant mineral nutrition (3) andstress resistance (3). AM fungi are important for the globalcarbon cycle because up to 20% of photoassimilates can betranslocated to them (9). We also know that the diversity of AMfungi can determine plant community structure and ecosystemproductivity (10). The plant–bacteria symbioses are variablydocumented. The best studied symbiosis is the rhizobium–legume interaction, but a single plant root can harbor a largevariety of fungi (1) and bacteria (2), as well as several differentarchaea (2). So far we have no information about the functionsof most of these root-living microbes. The strategy chosenherein, stable isotope probing (SIP)–RNA analysis, enabled usto highlight an unsuspected diversity of microbes living in roots.We identified microbes that are active and direct utilizers of
photosynthetic carbon from the plant by demonstrating a dif-ferential carbon flow to them.
Results and Discussion
Several methods have been developed recently to analyze thefunctional diversity of microorganisms in situ without prelimi-nary cultivation or isolation. Here we use SIP–RNA (11) basedon the fractionation of heavily labeled [13C]RNAs from amixture after providing CO2 enriched in the stable isotope 13C.The enriched RNAs can be assigned to microbial taxon byanalyzing the small subunit ribosomal RNA (SSU rRNA). RNAbecomes labeled more rapidly and heavily than DNA becauseribosomes are more abundant and turn over faster than DNA,and transcription is not semiconservative. Hence, SIP–RNAallows analysis of shorter term responses than SIP–DNA (i.e.,primary consumers are targeted before the label can reachsecondary consumers).
We used a pulse of 13CO2 to label turfs lifted from an uplandgrassland in the United Kingdom (experiment A) and a regen-erating peatland in France (experiment B). The vegetationincluded grasses (predominantly Agrostis capillaris, Festucarubra, Poa pratensis) and white clover (Trifolium repens) for theupland grassland and Agrostis stolonifera, Eriophorum angusti-folium, and Hydrocotyle vulgaris for the peatland. The purpose ofexperiment A was to identify and compare the AM fungalcommunities associated with the co-occurring species, A. capil-laris and T. repens, and to characterize their behavior with regardto the carbon flux from the plant. Experiment B surveyed a widerrange of microorganisms (bacteria as well as AM fungi) associ-ated with the roots of A. stolonifera. To focus on the primaryconsumers of current photosynthates, the time of exposure to 13Cassimilates must be reduced to a minimum. In a previous fieldexperiment that provided a 13CO2 pulse at atmospheric concen-tration to plants, the maximum enrichment of microbial RNAwas reached 3 h after the end of a 6-h pulse (12). Furthermore,microorganisms have been demonstrated to rapidly metabolize
Author contributions: P.V., P.I., A.-J.F., A.H.F., and J.P.W.Y. designed research; P.V., S.M.,
P.S., and N.O. performed research; N.O. and J.-B.C. contributed new reagents/analytic tools;
P.V., S.M., P.I., A.H.F., and J.P.W.Y. analyzed data; and P.V., S.M., and J.P.W.Y. wrote the
paper.
The authors declare no conflict of interest.
This article is a PNAS Direct Submission.
Abbreviations: AM, arbuscular mycorrhizal; CsTFA, cesium trifluoroacetate; ML, maximum
likelihood; MP, maximum parsimony; NJ, neighbor joining; SIP, stable isotope probing; SSU,
small subunit.
Data deposition: The sequences reported in this paper have been deposited in the GenBank
database (accession nos. AF481533–AF481698, experiment A; AY273534–AY273619, ex-
periment B; EF040887–EF041036, bacteria; EF041037–EF041100, AM fungi).
¶To whom correspondence should be addressed. E-mail: jpy1@york.ac.uk.
This article contains supporting information online at www.pnas.org/cgi/content/full/
0705902104/DC1.
© 2007 by The National Academy of Sciences of the USA
16970–16975 � PNAS � October 23, 2007 � vol. 104 � no. 43 www.pnas.org�cgi�doi�10.1073�pnas.0705902104
13C-labeled primary metabolites released directly in soil (13).Bearing these results in mind, we reduced the pulse to 5 h withharvesting directly after completion.
The overall isotopic signature (� 13C) demonstrated that theroots of all three plant species were enriched in 13C immediatelyafter the end of the pulse labeling (Fig. 1). Carbon translocationwas especially rapid to the roots of T. repens, consistent with thehigh AM mycelial carbon respiration that was recently demon-strated in this species (14). It is likely that demand by rhizobiain root nodules also contributed to the early accumulation of 13Cin clover roots. By contrast, 13C built up in Agrostis roots overseveral days, although our results demonstrated that microbesstill exploited a 13C-rich pool of recent photosynthates.
To identify the AM fungal and bacterial communities colo-nizing the roots, we used primers specific for the amplificationof the SSU rRNA of AM fungi (4) and specific for bacteria(modified from ref. 15). Isopycnic ultracentrifugation of theRNA extracts by using cesium trif luoroacetate (CsTFA) wasfollowed by fractionation of the gradient and RNA precipitation.Direct PCR on each fraction showed that only low-densityfractions 1, 2, and 3 gave a positive signal indicating the presenceof DNA (data not shown). This DNA was used to assess theoverall diversity of AM fungi in the roots for experiment A. Fromthese direct PCR amplifications, it can be concluded thatfractions 4–24 did not contain detectable DNA, so any ampli-
fication in the RT-PCR reflected RNA only. In the unlabeledcontrol, RT-PCR products were seen in fractions 7–13 (Fig. 2).After the 13CO2 pulse, additional bands appeared in the higherdensity fractions (fractions 15–18 for A1 and 17–18 for A2) (Fig.2), which we interpret as being amplified from the 13C-labeled(heavy) RNA, whereas unlabeled RNA was found in fractions7–12 (Fig. 2). We argue that light RNA did not contaminate theheavy fractions because no positive clones were recovered fromfractions 17 and 18 of the unlabeled control. The gap betweenthe light and heavy RNAs (e.g., A1 fraction 14) (Fig. 2) indicatesthat the labeling was intense. This finding is supported byestimated buoyant densities of 1.78–1.80 g/ml for the unlabeledand 1.82–1.85 g/ml for the labeled RNA, comparable with valuesreported for pure [12C]rRNA and pure [13C]rRNA, respectively(16). In addition, there was no delay: heavy RNA was foundimmediately after the end of the 5-h pulse labeling. Similarresults were obtained in experiment B. The main conclusionfrom these observations is that the AM fungi were preferentiallyusing assimilates provided by plants (labeled molecules), ratherthan previously fixed carbon (unlabeled). Traces of heavy RNAwere still detected 43 h after the end of the 13CO2 pulse labeling(experiment A) (data not shown). For the bacteria, we foundsimilar results, with positive RT-PCRs and heavily labeled RNAin fraction 17 (heavy RNAs). Compared with the results for theAM fungi, the only difference is a positive signal that isuninterrupted from fractions 5–17 (experiment B) (data notshown). Thus, depending on the bacteria and their ecologicalstatus, different proportions of 13C-labeled photosynthates wereincorporated. From an ecological point of view, bacterial sym-bionts (i.e., root-inhabiting bacteria, whether mutualistic orparasitic) can be expected to be heavily labeled in the same wayas the AM fungi, whereas saprotrophic bacteria should receivelittle direct photosynthate.
Cloning and sequencing of the various PCR products identi-fied 17 phylotypes (phylogenetically related sequences) of AMfungi colonizing the roots (Fig. 3). By computing rarefactioncurves using a random resampling procedure and bootstrap (17)from the 25 to 30 sequenced clones from each clone library, wedemonstrate that we have not underestimated the diversity ofAM fungal phylotypes in any of the RNA samples [supportinginformation (SI) Fig. 5]. In the case of the DNA samples,however, a greater sampling effort probably would have uncov-ered additional phylotypes because the corresponding curveshave not reached their asymptotes (SI Fig. 5). These results wereconfirmed by using a Bayesian estimator of the diversity fornoninvasive sampling (18). All of the sequences were related torecognized Glomus, Acaulospora, and Scutellospora species, al-though none was close enough to be assigned to them. Only 4phylotypes have been reported from other field populations inprevious studies, whereas 13 phylotypes (Glo26–Glo29, Glo46,Glo57–Glo60, Acau13–Acau15, and Scut5) were potentially new(Fig. 3). In experiment A, seven phylotypes were found exclu-sively within the AM fungal community colonizing A. capillarisand three for T. repens, whereas only three were shared by thetwo plants (SI Table 1). Despite the co-occurrence of the plantspecies in the same turf, the AM fungal community compositiondiffered among host plants (SI Table 1), in agreement withprevious studies (5–7).
For both plant species in experiment A, the heavy RNAcorresponded to a subset of the diversity found in the light RNAor DNA (SI Table 1). In each T. repens sample, half of the AMfungal phylotypes were recovered from the heavy RNA andhence had received and metabolized 13C-labeled assimilates. Theactive AM fungi were different in the two root samples. GlomusGlo8, active in A1, is present in A2, but was not detected in theheavy RNA fraction, whereas Glomus Glo3 was apparentlyactive in A2, but inactive in A1. It is likely that these Glomus
A15 hours
A0control
A210 hours
DNA [12C]RNA [13C]RNA
Fractions:
Centrifugation tube
Density“light” “heavy”
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
.
1 24
Fig. 2. RT-PCR products from each fraction collected from the CsTFA gradi-
ent. RNA extracts from T. repens were amplified by RT-PCR specific for AM
fungi, using samples before (A0), immediately after (A1), and 5 h after (A2) the
5-h 13CO2 labeling period.
0 5 10 15 20 25 30 35 40 450
30
60
90
120
150
180
210
240
270Agrostis capillaris
Agrostis stolonifera
Trifolium repens
gnille
bal eslu
P
δ3
1‰
C
Time (hours)
gnil
eb
al esl
uP
Fig. 1. Isotopic signatures (� 13C‰) of roots after 13CO2 pulse labeling. Each
dot represents a mean of four measures (i.e., not true replicates). Results of �13C‰ were obtained for T. repens (squares) and A. capillaris (circles) in
experiment A and from A. stolonifera (diamonds) in experiment B. Fitted
regression curves are shown. Natural values of � 13C‰ (control before labeling)
were �35 for T. repens roots, �28 for A. capillaris, and �30 for A. stolonifera.
Vandenkoornhuyse et al. PNAS � October 23, 2007 � vol. 104 � no. 43 � 16971
EC
OLO
GY
species are using the same carbon assimilates. Hence, we canhypothesize that the observed variations in fungal communitiesare a consequence of competition among colonizers in the sameecological niche. We conclude that not only is the distribution ofAM fungi among roots of T. repens highly heterogeneous, but sois their level of activity. Analyses of relative abundance fromDNA studies, which have already revolutionized our view of the
ecology of these key symbionts (4–7), may therefore give amisleading view of the active populations. A proposed explana-tion for the stability of the AM fungi–plant mutualistic associ-ation over 450 million years is a trade exchange of resourcesbetween partners enforced by embargo by one or both membersof the symbiosis (19). Our results do not allow us to reject thishypothesis of sanction, but they also substantiate the hypothesis
0.1
C. limacisporumGlomus claroideum
Glomus etunicatumGlomus lamellosum
AF202280
Glomus mossae
Glomus sinuosum
Glomus vesiculiferum
Glomus intraradices
98/99/92
99/92/56
69/82/_
98/80/_
82/79/93
99/99/83
99/88/85
99/97/85
86/70/64
92/95/93
99/97/75
98/99/_
88/81/100
100/98/68
94/96/65
77/50/_
62/53/_
A Experiment A
B Experiment B
“Heavy RNA” phylotypes
“Light RNA” phylotypes
“Heavy and light” phylotypes
DNA phylotypes All the bootstrap values ≥ 95%
64/62/55
Glo 26
Glo 57
Glo 59
Glo 58
Scut 5
Acau 15
Acau 13
Acau 14
Glo 60
Glo 46
Glo 2
Glo 27
Glo 3
Glo 28
Glo 29
Glo 23
Glo 8
A
B
A/B
A
B
B
A
A
A
A
B
A
A
A
A
A
A
Fig. 3. Phylogenetic affinities of SSU rRNA representing Glomeromycota (AM fungi). Sequences amplified from T. repens, A. capillaris, and A. stolonifera roots
are represented, along with representatives of the relevant known groups. The outgroup is a putative choanoflagellate Corallochytrium limacisporum (L42528).
The tree was computed by NJ. (Scale bar: 0.1 substitutions per site.) The data were additionally analyzed by using MP and ML. Branches in bold were congruent
among the three phylogenetic reconstructions (at least two bootstrap values of �70%). Bootstrap values of �50% are indicated at the nodes (NJ/MP/ML
estimated from 1,000/500/100 iterations, respectively). Phylotypes are presented as colored triangles proportional to the number of clones found and their
phylogenetic depth: black, DNA fraction; yellow, heavy RNA fraction; blue, light RNA fraction; green, sequences found in both RNA fractions. A, experiment A;
B, experiment B.
16972 � www.pnas.org�cgi�doi�10.1073�pnas.0705902104 Vandenkoornhuyse et al.
of host-plant preference and competition among AM fungalcolonizers (5, 6, 20).
The A. stolonifera root-colonizing bacteria were analyzed fromRNA in fraction 7 (unlabeled) and fraction 18 (heavily labeled)of experiment B. The statistical analyses of the bacterial phylo-types allow us to conclude that the sampling was large enough todescribe the diversity for both light and heavy fractions (Fig. 4B and C). The regression curves show that one or two additionalphylotypes should be expected if the number of sequences weredoubled. The G � C composition was similar for all RNAphylotypes from both light and heavy fractions and thus shouldnot introduce any bias. The phylogenetic reconstructions segre-gate bacteria into 17 phylotypes (with �3% internal sequencedivergence, except for 6 phylotypes that were slightly moreheterogeneous). Five strongly supported phylotypes cannot beidentified because they are too distant from any published
sequences other than from environmental samples (Fig. 4).Phylotype 1 forms a particularly deep branch within the bacteria,whereas phylotypes 10–13 are within the class Betaproteobac-teria. We can argue that these bacteria are not parasitic because(i) thorough examination of the plant roots indicated that theywere healthy, and (ii) no long branches were observed in thephylogeny (typical of parasites because of higher mutation rate)(21). A number of sequences were close to the Burkholderiales,a group that includes both pathogens and symbionts. SeveralBurkholderia spp. have developed symbioses with plants and arefound in roots, leaves, and stems (22). Furthermore, they colo-nize AM fungi as endosymbionts (23), and several are describedas symbionts of Rhizopus, a fungus belonging to the Zygomycota,conferring on the fungus a certain level of pathogenicity towardplants (24). Another group of putative Burkholderiales se-quences were close to those of nitrogen-fixing Ideonella sp.isolated from rice stems and roots (25).
Number of sequences analysed
0 20 40 60 80
se
pyt
oly
hp f
o re
bm
uN
0
2
4
6
8
10
12
14
16
y = 3,6231Ln(x) – 1,6493
r² = 0,9829
Expected richness function
Bootstrap
Regression curve
Number of sequences analysed
0 20 40 60 80
se
pyt
oly
hp f
o re
bm
uN
0
2
4
6
8
10
12
14
16 Expected richness function
Bootstrap
y = 3.6734Ln(x) – 1,9348
r² = 0,9783
Regression curve
B
Cβ-proteobacteria
β-proteobacteria
γ-proteobacteria
0.1
Crenarchaeota AJ347774
Uncultured Bacteroidetes bacterium AY921927
Bacillus circulans Y13065Oscillatoria sp. AB003163
Mycoplasma phocidae DQ521597Deinococcus sp. AB087288
Acidobacteria bacterium AY921768
Spirochaeta sp. AY995150
Actinoplanes sp. AJ488567
Deltaproteobacterium AJ532712
Sphingomonadaceae bacterium AB245346Acinetobacter sp. AJ301674
Betaproteobacterium AF336362
Burkholderia sp. DQ419951
Betaproteobacterium AY297809
Uncultured Betaproteobacterium AJ582038
Ideonella sp. AB049107
Panaciterramonas fulva AB245357
100/100/100
_/53/64
58/77/67
_/61/_
50/75/87100/100/100
100/100/100
_/_/53100/100/100
100/100/100
100/98/100
97/99/99
100/100/100
100/100/100
92/82/98
95/73/91
86/74/97
98/95/100
100/100/100100/98/100
52/73/_
98/95/100
100/100/100
92/_/88
100/100/100
100/100/100
_/_/83
56/_/81
_/_/89
_/77/84
100/88/98
100/99/100
Actinobacteria
δ-proteobacteria
β-proteobacteria
β-proteobacteria
γ-proteobacteria
α-proteobacteria
Acidobacteria
Actinobacteria
β-proteobacteria
β-proteobacteria
β-proteobacteria
12
13
14
15
16
17
Unknown
δ-proteobacteria
β-proteobacteria
*
*
*
*****
*
*
*
A1
2
3
4
5
6
7
8
910
11
“Heavy RNA” phylotypes
“Light RNA” phylotypes
“Heavy and light” phylotypes
Phylotypes with
sequence homology > 97%*
Fig. 4. Phylogenetic affinities of bacterial SSU rRNA sequences and statistical analyses of sampling effort. (A) Tree derived by ML analysis of all 151 bacterial
sequences amplified from A. stolonifera roots, with representatives of major bacterial groups and the highest BLAST hit of each phylotype. The outgroup is an
uncultured crenarchaeote (AJ347774). Branches in bold were congruent among MP, ML, and NJ phylogenetic reconstructions (at least two bootstrap values of
�70%). Bootstrap values of �50% are indicated at the nodes (NJ/MP/ML estimated from 1,000/500/100 iterations, respectively). (Scale bar: 0.1 substitutions per
site.) Phylotypes are presented as colored triangles proportional to the number of clones found and their phylogenetic depth: yellow, heavy RNA fraction; blue,
light RNA fraction; green, sequences found in both RNA fractions. Asterisks indicate phylotypes in which all sequences have �97% identity. (B) Estimates of
bacterial community diversity as a function of sampling effort for A. stolonifera root samples. Rarefaction curves are computed from 100 replicates of bootstrap
(blue), and the expected richness function (red) is the number of phylotypes estimated (random sampling without replacement) from the sequences analyzed
for heavy SSU RNA (i.e., 13C-labeled). (C) Estimates of bacterial community diversity for light SSU RNA.
Vandenkoornhuyse et al. PNAS � October 23, 2007 � vol. 104 � no. 43 � 16973
EC
OLO
GY
The metagenomic approach using stable isotopes (26) has al-lowed us to describe the community diversity of AM fungi andbacteria and to relate this diversity to a functional trait, theconsumption of newly formed photosynthates. An extension of ourapproach would probably reveal the presence of additional micro-organisms, including archaea and a wider range of fungi (1).Because we have focused on highly labeled RNAs, we conclude thatthe microorganisms involved in the process are closely linked withtheir host plant and are likely to be plant-dependent. However, ourresults bring more questions than answers. We have much to learnabout the ecology of microorganisms in roots, especially of thepotentially new bacterial groups described herein.
Materials and Methods
Field Sites and Plant Growth. In experiment A, six turfs (45 � 35cm) were collected from the Natural Environment ResearchCouncil Soil Biodiversity field experiment at Sourhope nearKelso (Scotland), a seminatural grassland ecosystem (March2002). Turfs were placed in plastic containers (45 � 35 cm) andacclimated for 3 months at 18°C lit 12 h per day before labeling.
In experiment B, three turfs of the same size were collectedfrom a peatland experiment of the European research programRECIPE, located close to Baupte in Normandy (France) andacclimated similarly (March 2005).
13C Labeling and Total RNA Extraction. In experiment A, a turf in itscontainer was put into an acrylic air-f low chamber and labeledwith 13CO2 (99 atom %) at atmospheric concentration. Air flowto the turf (�5 liters/min) and CO2 delivery were controlled bymeasuring the concentration of CO2 in the vent gas, using aninfrared gas analyzer. Core samples (4.1-cm diameter) weretaken from the turf: A0, before the pulse labeling; A1, imme-diately after the 5-h labeling; and A2, A3, A4, and A5, 10, 16, 24,and 48 h after the start of the labeling, respectively. From eachcore, roots of T. repens and A. capillaris were immediately washedin tap water, three times in 0.1% Triton X-100, and five times insterilized distilled water and then frozen. All roots appeared tobe living and healthy (checked under binocular microscope).Total RNA was extracted from �30 mg (fresh weight) by usingthe RNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA). ExperimentB was conducted similarly, using roots of A. stolonifera.
Isotopic Signature. A sample of the remaining roots was dried.The 13C enrichment in root samples reported in � 13C‰ (13C:12Cratio) was calibrated relative to internal gas standards and solidreference against Pee Dee Belemnite standard. All isotopicsignatures (� 13C) were determined by continuous-f low/combustion/isotope ratio mass spectrometry. Although the in-tensity of labeling might vary with root age, samples were largeand representative enough to even out any such effect. Expo-nential regression curves were estimated by using Statistica 7.1.
Separation of Labeled RNA from Unlabeled RNA. Before the exper-iment, the time, speed, and temperature of the ultracentrifuga-tion and quantities of CsTFA and RNA were optimized toseparate [13C]RNA from [12C]RNA. The isopycnic ultracentri-fugation was performed using Quick Seal centrifugation tubes(Beckman, Fullerton, CA) filled with 13.5 ml of an aqueoussolution of 1.9 g/ml CsTFA (Amersham Biosciences, Piscataway,NJ), to which 50 ng of RNA was added (optimal quantity). Tubeswere spun at 48,000 rpm in a 90Ti rotor (Beckman) at 4°C for48 h. We noticed that RNA degradation occurs (i.e., RNA isbroken) when tubes are spun at speeds �55,000 rpm. Twenty-four fractions of the ultracentrifugation gradient were taken,starting from the top of the tube, by puncturing the wall every0.1 in (2.54 mm), using a needle, syringe, and guide. RNA wasprecipitated with two volumes of isopropanol. After centrifuga-tion, the pellet was washed in 75% ethanol, dried, and redis-
solved in 20 �l of ultrapure DNase- and RNase-free water(Sigma–Aldrich, St. Louis, MO). Densities of fractions from twogradients run under the same conditions as the experiments, butwithout nucleic acid, were estimated by weighing measuredvolumes.
RT-PCR. RT-PCR was carried out on 5 �l of each of the 24 fractionsfrom each sample (A0–5, B0–1) by using the Titan One TubeRT-PCR kit (Roche Molecular Systems, Alameda, CA), withprimers NS31 and AM1 for the specific amplification of AM fungalSSU rDNA (4) and (for experiment B) the primers Eub�519f andEub�1390r specific for bacteria (15) in the modified forms 5�-GTTTCAGCMGCCGCGGT-3� and 5�-GTTTGACGGGGT-GTGT-3�, respectively. For AM fungal sequences, reverse tran-scription at 51°C for 30 min was followed by PCR amplification with2 min denaturation at 94°C, 35 cycles of 30 sec at 94°C, 1 min at 58°Cor 52°C (AM fungi or bacteria, respectively), 50 sec at 68°C, andfinal extension for 10 min at 68°C.
Cloning and Sequencing. The RT-PCR yield was low for the latersamples (A3–5), so analysis was limited to A1, A2, and B1. Theamplified fragments were cloned in pGEM-T vector (Promega,Madison, WI) and DH5�-competent cells (Gibco/BRL, Carlsbad,CA). From each clone library, 25 to 30 randomly selected positiveclones were sequenced (ABI-PRISM Dye Terminator Cycle Se-quencing Ready Reaction Kit; PerkinElmer, Beltsville, MD) forboth strands by using primers T7 or SP6. The two sequences werealigned by using the programs Autoassembler (PerkinElmer) andSequencher (GeneCodes, Ann Arbor, MI) for experiments A andB, respectively. No chimeric artifacts were found among the clonessequenced of AM fungi, whereas 53 artifacts were detected anddeleted from the data set among 204 bacteria sequences by usingCHIMERA�CHECK 2.7 (Ribosomal Database Project II; http://rdp.cme.msu.edu).
Diversity and Phylogenetic Analyses. Rarefaction curves were com-puted for each data set. The number of species was quantified for100 random combinations of 1 to N sequences and also byperforming 100 bootstrap pseudoreplicates implemented in Es-timates (17).
Multiple alignments, one for the AM fungal phylogenetic anal-yses containing all of the sequences plus a set of eight AM fungalsequences from GenBank/EMBL/DDBJ and one for the 151bacterial sequences, were performed by using CLUSTALX 1.81(27) and refined by eye. For the two data sets, the phylogeneticanalyses were done as follows: CLUSTALX 1.81 was used forneighbor joining (NJ) phylogenies, with distance correction usingK2P and complete omission of gaps. For AM fungi and bacteria,bootstrapping was repeated 200 and 1,000 times, respectively.PAUP 4.0�10 was used for maximum parsimony (MP) by using aheuristic tree search with 500 replicates (for AM fungi, 300 forbacteria) of random addition, tree bisection and reconnection asbranching algorithm, and 15 random-addition swaps per replicate.For the bacteria, an identical likelihood score was found for theconstructions by using tree bisection and reconnection or subtreepruning-regrafting as swapping algorithms. Then, the bacterial setwas studied by using maximum-likelihood (ML) procedures underthe HKY model with 200 bootstrap iterations. For the AM fungaldata set, the ML phylogeny was constructed under the GTR � I �
G model (100 bootstrap iterations). Modeltest 3.7 software (28) wasused to select the model.
We thank Ouest Genopole and Allen Mould for the sequencing and S.Diquelou and S. Lemauviel for labeling of experiment B. This work wassupported by the Soil Biodiversity Thematic Program of the NaturalEnvironment Research Council and the Ecosphere Continentale–Fonctionnement et Dynamique de la Biosphere Continentale Programof the Centre National de la Recherche Scientifique.
16974 � www.pnas.org�cgi�doi�10.1073�pnas.0705902104 Vandenkoornhuyse et al.
1. Vandenkoornhuyse P, Baldauf SL, Leyval C, Straczek J, Young JPW (2002)Science 295:2051.
2. Chelius MK, Triplett EW (2001) Microb Ecol 41:252–263.3. Smith SE, Read DJ (1997) Mycorrhizal Symbiosis (Academic, San Diego), 2nd Ed.4. Helgason T, Daniell TJ, Husband R, Fitter AH, Young JPW (1998) Nature
394:431.5. Vandenkoornhuyse P, Husband R, Daniell TJ, Watson IJ, Duck JM, Fitter AH,
Young JPW (2002) Mol Ecol 11:1555–1564.6. Vandenkoornhuyse P, Ridgway KP, Watson IJ, Fitter AH, Young JPW (2003)
Mol Ecol 12:3085–3095.7. Husband R, Herre EA, Turner SL, Gallery R, Young JPW (2002) Mol Ecol
11:2669–2678.8. Gollote A, van Tuinen D, Atkinson D (2004) Mycorrhiza 14:111–117.9. Bago B, Pfeffer PE, Shachar-Hill Y (2000) Plant Physiol 124:949–957.
10. van der Heijden MGA, Klironomos JN, Ursic M, Moutoglis M, Streitwolf-Engel R, Boller T, Wiemken A, Sanders I (1998) Nature 396:69–72.
11. Manefield M, Whiteley AS, Griffiths RI, Bailey MJ (2002) Appl Environ
Microbiol 68:5367–5373.12. Rangel-Castro I, Killham K, Ostle N, Nicol GW, Anderson IC, Scrimgeour
CM, Ineson P, Meharg A, Prosser J (2005) Environ Microbiol 7:828–838.13. Padmanabhan P, Padmanabhan S, Derito C, Gray A, Gannon D, Snape JR, Tsai
CS, Park W, Jeon C, Madsen EL (2003) Appl Environ Microbiol 69:1614–1622.
14. Johnson D, Leake JR, Ostle N, Ineson P, Read DJ (2002) New Phytol
153:327–334.
15. Orphan VJ, Taylor LT, Hafenbradl D, Delong EF (2000) Appl Environ
Microbiol 66:700–711.
16. Whiteley AS, Thomson B, Lueders T, Manefield M (2007) Nat Protoc
2:838–844.
17. Colwell RK, Mao CX, Chang J (2004) Ecology 85:2717–2727.
18. Petit E, Valiere N (2006) Conserv Biol 20:1062–1073.
19. Kiers ET, van der Heijden MGA (2006) Ecology 87:1627–1636.
20. Fitter AH (2006) New Phytol 172:3–6.
21. Gribaldo S, Philippe H (2002) Theor Popul Biol 61:391–408.
22. Coenye T, Vandamme P (2003) Environ Microbiol 5:719–729.
23. Bianciotto V, Bandi C, Minerdi D, Sironi M, Tichy HV, Bonfante P (1996) Appl
Environ Microbiol 62:3005–3010.
24. Partida-Martinez LP, Hertweck C (2005) Nature 437:823–824.
25. Elbeltagy A, Nishioka K, Sato T, Suzuki H, Ye B, Hamada T, Isawa T, Mitsui
H, Minamisawa K (2001) Appl Environ Microbiol 67:5285–5293.
26. Dumont MG, Murrell JC (2005) Nat Rev Microbiol 3:499–504.
27. Thompson JD, Gibson TJ, Plewniak F, Jeanmougin F, Higgins DG (1997)
Nucleic Acids Res 25:4876–4882.
28. Posada D, Crandall KA (1998) Bioinformatics 14:817–818.
Vandenkoornhuyse et al. PNAS � October 23, 2007 � vol. 104 � no. 43 � 16975
EC
OLO
GY
REV I EW AND
SYNTHES I S Integration of molecular functions at the ecosystemic
level: breakthroughs and future goals of
environmental genomics and post-genomics
Philippe Vandenkoornhuyse,*
Alexis Dufresne, Achim Quaiser,
Gwenola Gouesbet, Francoise
Binet, Andre-Jean Francez,
Stephane Mahe, Myriam
Bormans, Yvan Lagadeuc and
Ivan Couee
UMR 6553 ECOBIO, Centre
National de la Recherche
Scientifique, Universite de
Rennes 1, Campus de Beaulieu,
batiment 14A, F-35042 Rennes
Cedex, France
*Correspondence: E-mail:
philippe.vandenkoornhuyse@
univ-rennes1.fr
P. Vandenkoornhuyse, A.
Dufresne and I. Couee have
contributed equally to this
work.
Abstract
Environmental genomics and genome-wide expression approaches deal with large-scale
sequence-based information obtained from environmental samples, at organismal,
population or community levels. To date, environmental genomics, transcriptomics and
proteomics are arguably the most powerful approaches to discover completely novel
ecological functions and to link organismal capabilities, organism–environment
interactions, functional diversity, ecosystem processes, evolution and Earth history.
Thus, environmental genomics is not merely a toolbox of new technologies but also a
source of novel ecological concepts and hypotheses. By removing previous dichotomies
between ecophysiology, population ecology, community ecology and ecosystem
functioning, environmental genomics enables the integration of sequence-based
information into higher ecological and evolutionary levels. However, environmental
genomics, along with transcriptomics and proteomics, must involve pluridisciplinary
research, such as new developments in bioinformatics, in order to integrate high-
throughput molecular biology techniques into ecology. In this review, the validity of
environmental genomics and post-genomics for studying ecosystem functioning is
discussed in terms of major advances and expectations, as well as in terms of potential
hurdles and limitations. Novel avenues for improving the use of these approaches to test
theory-driven ecological hypotheses are also explored.
Keywords
Biodiversity, ecosystem functioning, environmental bioinformatics, environmental
genomics, functional ecology, metagenomics, molecular ecology, systems biology.
Ecology Letters (2010) 13: 776–791
I N TRODUCT ION
All individuals and populations of individuals forming
species live and forage within space and time limits.
Understanding the interactions and functions of these
organisms within their environment is the purpose of
ecology, for which a large range of research strategies has
been developed. However, exhaustive analysis of all the
functional compartments in a given ecosystem presents a
major challenge. Microorganisms (i.e. viruses, bacteria,
Archaea and micro-eukaryotes), which are essential entities
of biogeochemical cycles on the planetary scale (e.g.
Falkowski et al. 2008), and represent approximately half of
the total carbon contained in living organisms (Shively et al.
2001), are still considered as a black box in many ecological
studies. Although we know more and more about the
importance of microorganisms in nature, the current
absence of crucial pieces of information is due not only to
the tremendous diversity of genes, metabolisms and species
of microorganisms but also to our incapacity to culture over
90% of them (Amann et al. 1995; Pace 1997). One of the
major challenges facing ecology is therefore to obtain a
holistic perception of ecosystems including a comprehensive
understanding of microbial communities. Environmental
genomics is one of the most promising approaches that can
meet this challenge.
Re-use of this article is permitted in accordance with the Terms and
Conditions set out at http://www3.interscience.wiley.com/author
resources/onlineopen.html
Ecology Letters, (2010) 13: 776–791 doi: 10.1111/j.1461-0248.2010.01464.x
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
In the wider sense, environmental genomics in associa-
tion with post-genomics (i.e. transcriptomics and proteomics; see
the glossary for italicized terms) consists in studying large-
scale sequence-based information obtained from a variety of
environmental samples, at organism, population or com-
munity levels, in order to gain novel insights into
evolutionary ecology, organism–environment interactions
and processes of ecosystem functioning. As such informa-
tion contains both synchronic (related to current function-
ing at a given point in time) and diachronic (related to
historical and evolutionary dynamics) aspects, the decipher-
ing of genomes, transcriptomes and proteomes is the most
powerful and most large-scale approach to date that may
link ecology, evolution and Earth history.
Environmental genomics and post-genomics are not
restricted to bacteria and archaea community genomics, and
can encompass studies of various other biological systems.
For example: (1) mixed prokaryotic-eukaryotic microorgan-
ism communities, (2) small-size eukaryotes, especially pico-
and nano-eukaryotes, (3) intricate multi-species networks of
higher eukaryotic organisms, such as root mats or mixed-
species insect swarms, (4) higher eukaryotic organism tissues
containing their naturally associated parasitic or mutualistic
symbionts and (5) non-model species that cannot be grown
or raised under laboratory conditions. In other fields of
research such as toxicology and ecotoxicology, environ-
mental genomics generally refers to gene–environment or
genome–environment interactions, thus including the study
of model species, such as yeast or Arabidopsis thaliana, under
strong environmental constraints (Teixeira et al. 2007) or
from an evolutionary perspective (Delneri et al. 2008), or
even studies of the human genome (Ballatori et al. 2003).
This review is focussed on environmental genomics and
post-genomics in an ecological context, where analyses of
large-scale sequence information can reveal how functions
and signals are propagated and integrated at the different
ecological levels – individual, population, community,
ecosystem – and across various temporal and spatial scales.
The aim of environmental genomics, transcriptomics and
proteomics in an ecological context is to understand the
ecosystem �dark matter� (Marcy et al. 2007) after translation
into nucleic acid and protein sequences (Fig. 1; Box S1), by
taking advantage of the fact that these sequences convey
functional information, interact with ecosystem parameters
through environmental signalling and acclimation processes,
and have been shaped by evolutionary pressures, thus
offering a glimpse of past environments.
Given the great expectations associated with this recent
field of research, we also discuss the validity of environ-
mental genomics and post-genomics for studying ecosystem
functioning, in terms of major advances and limitations, and
then explore new avenues for improving these approaches
to test theory-driven ecological hypotheses.
ENV I RONMENTAL GENOM ICS AND THE
UN I F I CAT ION OF D I F F ERENT F I E LDS OF ECOLOGY
AND B IO LOGY
Clear connections exist between the hierarchic levels of
ecological organization from individual to population to
community to ecosystem. However, ecosystem ecology,
which requires a mechanistic approach, is mainly based on
physiological ecology (e.g. measurements of C, N or P
fluxes). Ecosystem ecology is thus disconnected from the
other ecological levels, and from the rest of ecology,
although ignoring the question �who�s doing what?� could be
justified by the scale of the analysis. Along with this fact, and
as pointed out by Fitter (2005), this dichotomy in ecology
[…] has been framed in terms of functional redundancy […], thus
placing the ecological function as a cornerstone, while
Environmental exploration
Sequences
Structural, phylogenetic and functional analysis of sequences
Function hypotheses
Ecosystem functioning analysis
Post-genomic and phenotype analysis
Environmental validation
Figure 1 Real-life and ideal fluxes of analysis and information in
environmental genomics. Current throughputs of analysis and
information-processing are given as black arrows, whereas the ideal
throughputs to be achieved are shown as white arrows. Arrow
thickness reflects the efficiency of the analyses.
Review and Synthesis Environmental genomics 777
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
individuals are only considered as vectors of this ecological
function. Hence, the consequences at the ecosystem level of
changes at the population level are poorly known (Fitter
2005). Environmental genomics allows the diversity of
organisms to be linked to the functions they display by
providing the theoretical possibility of accessing at least
partially every single species of a given ecosystem. As
underlined by Ungerer et al. (2008), genomic approaches
[…] offer new insights into higher-level biological phenomena that
previously occupied the realm of ecological investigation only […]. By
removing previous dichotomies between ecophysiology,
population ecology, community ecology, and phylogenetics
on the one hand and ecosystem functioning on the contrary,
environmental genomics along with genome-wide expres-
sion approaches greatly contributes to the merging of
scientific fields and is a source of novel ecological concepts
and hypotheses (see major breakthrough & new frontiers
sections). However, linking diversity with the entire set of
functions carried out by organisms in their natural habitat
remains a major challenge.
I N T EGRAT ION OF D IV ERS I T Y AND FUNCT IONS
FROM MOLECULAR DATA
For over two decades, culture-independent molecular
analyses have been used to analyse microbial community
and population diversity, and also to study particular
functions, such as denitrification or nitrogen fixation. In
current environmental genomics studies, the metabolic and
physiological potentialities of uncultured (micro)organisms
are revealed by analyses of metagenomes (see Box S1 for
details), i.e. the collection of genomes recovered from the
same environmental sample, or from single-cell environ-
mental genomes (see �major breakthroughs� section).
Despite analytical and technological limits (Table 1),
advances in bioinformatics have improved the assembly of
large fragments of genomes, the identification of RNA and
protein-coding genes within these fragments and the
determination of their biochemical and biological potential
functions in complex mixtures of sequences from
co-occurring organisms. The general aim of these analyses
is to decipher taxonomic composition, metabolism, physio-
logy and interactions in natural consortia of organisms in
order to unravel evolutionary and ecological processes
together with biotic interactions, as well as their changes
over time and space. In other words, environmental
genomics tackles the questions �who�s doing what, how,
when and where?� Furthermore, the correlations between
the genetic and functional diversity of communities and
environmental conditions can be used to integrate this
sequence information into ecosystem processes (Box S1).
However, it must be stressed that these approaches,
although fruitful, �only� provide hypotheses which must
then be tested by other means (Figs. 1, 2). Analyses of
genome sequences do not in fact reveal which functions are
really expressed or identify the active organisms in a given
process. The relevance of functional predictions and the
validity of functional models based on genomics data can be
improved by coupling environmental genomics with
(meta)transcriptomics and (meta)proteomics approaches. It has
also been shown that environmental genomics approaches
can be coupled with direct probing or labelling of ecological
processes. In an elegant work, Mou et al. (2008) used an
experimental metagenomic approach to investigate the
assimilation and mineralization of dissolved organic carbon
by adding thymidine analogue bromodeoxyuridine as
substrate in order to detect and extract the DNA of the
individuals involved in the ecological process under study.
The authors were able to elucidate the factors controlling
heterotrophic communities (i.e. trophic interactions and
physical conditions) and the rules controlling the assem-
blages of microorganisms within the studied ecosystem.
This work presented convincing results arguing in favour of
the ecological theory which predicts that heterogeneous
environments are conducive to the establishment of
generalist species with broad ecological niches (Kassen
2002). Other experimental metagenomic analyses using
stable-isotope probing (Dumont & Murrell 2005) have
greatly advanced our understanding of the actors in methane
cycling (Cebron et al. 2007). Use of RNA stable-isotope
probing has also led to new findings and hypotheses related
to plant–microbe interactions and has highlighted that
plants interact within their roots with many more microor-
ganisms than previously believed (Vandenkoornhuyse et al.
2007). The selected studies above demonstrate that these
approaches are not a mere technological tour de force. They
provide novel insights into community structures and
generate numerous functional hypotheses. The following
section describes other striking examples of the application
of environmental genomics to develop our understanding of
ecosystem functioning.
MAJOR BREAKTHROUGHS OF ENV I RONMENTAL
GENOM ICS
One of the most innovating aspects of environmental
genomics is the capacity to predict new functions and to
infer relationships between functions, whether novel or not,
and particular species or specific communities. A classic
example is the discovery of a new class of light-driven
proton pumps in uncultured marine proteobacteria (Beja
et al. 2000). These proteins, named proteorhodopsins, might
sustain a photoheterotrophic lifestyle in many planktonic
bacteria and archaea species (de la Torre et al. 2003; Frigaard
et al. 2006) inhabiting various sunlit aquatic environments
(Beja et al. 2001; Sabehi et al. 2003; Venter et al. 2004;
778 P. Vandenkoornhuyse et al. Review and Synthesis
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
Atamna-Ismaeel et al. 2008). However, the physiological and
ecological roles of every type of proteorhodopsin need to be
fully described (Fuhrman et al. 2008).
The strength of environmental genomics was also shown
when mesophilic Crenarchaeota could be linked to ammo-
nium oxidation. Few specific bacterial groups were known
Table 1 Advantages and limitations in environmental genomics and post-genomics
Stage of analysis Advantages Limitations
Sampling No culture- or growth-related bias Spatio-temporal heterogeneity
Direct environmental sampling; large
multi-species sampling; large
multi-tissue sampling
Cost of representative or exhaustive sampling
Analysis of complex experimental designs
involving populations and communities
Careful ecological assessment of environmental
sampling and of experimental designs
Possible long-term storage of DNA, RNA,
or protein samples
Availability of reliable protocols for the extractions
of nucleic acids and proteins
Sequencing High-throughput technologies for DNA, RNA
and proteins
Possibilities of sequencing bias; poor sequencing of
less-represented genomes
Decreasing cost of sequencing and mass
spectrometry
Cost of sequencing for large sample collections, in
relation to the exhaustiveness of sampling
Long-term public databases Exponential increase of the amount of sequence
data; cost and maintenance of database
infrastructure
Information processing
and functional analysis
of organisms,
communities and
ecosystems
Biodiversity and phylogenetic analysis Taxonomic bias in databases
Functional profiling of naturally occurring
organisms and communities
Assembly of short genomic fragments giving a
partial view of organismal functional capacities
Link function and diversity and answer
the question �who is doing what?
Functional bias in database; computational demand
for bioinformatics analyses; poor quality of
annotations and amplification of annotation errors
Discovery of novel ecologically relevant
functions
Functional inferences from genomics data in the
absence of transcriptomic and ⁄ or proteomic data;
biased conclusions on the basis of apparent
absence of function
Identifying links between diversity, functional
changes and environmental variables
Experimental bottleneck of functional
characterization of new genes
Evolvability of genomics data analysis through
improvement of annotations
Computational cost of re-annotating sequences
Re-analysis of genomics data in the light of
novel environmental data
Comprehensive environment variable surveys;
environment variable databases;
environment-dedicated bioinformatics tools;
exponential increase of environmental data;
increased complexity of the comparison between
environmental data and genomics data
Comparison of present-day ecosystem
functioning with earth history and
paleo-ecosystem functioning
Combination of synchronic and diachronic
analysis
Identifying links between diversity, functional
changes and environmental variables
Confusing the reality of ecosystem functioning with
the reconstructed image from environmental
genomics
Review and Synthesis Environmental genomics 779
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
to use ammonium as an energy source. Parallel application
of environmental genomics approaches to marine plankton
and soil samples led to identification of genes encoding for
an ammonium monooxygenase on genomic fragments
affiliated to Archaea (Venter et al. 2004; Treusch et al.
2005). In an impressive follow-up study, Leininger et al.
(2006) not only showed that one subgroup of mesophilic
Crenarchaea actively catalyses ammonium nitrification but
also established that archaeal amoA genes were much more
abundant than the corresponding bacterial genes in different
soil samples, thus suggesting that they are major players in
ammonia oxidation in diverse soil ecosystems. This discov-
ery produced a downright jump-start for an enormous
number of studies of Crenarchaeota in other terrestrial and
marine environments, most of the results indicating the
prevalence of Archaea over Bacteria in this first step of
nitrification. The hypothesis that Archaea play an important
role in the overall N-cycle was therefore considerably
strengthened. These are two impressive examples of how
the detection of key protein-coding genes on a genomic
fragment can challenge long-lasting ecological paradigms.
In the above studies, the authors sequenced long
fragments of DNA bearing taxonomically or functionally
informative genes. In contrast, community-centered
approaches, followed for instance by Tyson et al. (2004)
and Venter et al. (2004), have demonstrated the possibility
of inferring the structure and the potential activity of
microbial assemblages using shotgun sequencing.
The biofilm analysed by Tyson and co-workers flourishes
at the surface of highly acidic, metal-rich drainage waters in
an iron mine. Because of the very reduced biodiversity in
this extreme environment, the authors were able to
reconstruct two near-complete genomes and they deduced
the potential biological functions of the organisms in the
biofilm in relation to water chemistry. In particular, they
were able to hypothesize that bacteria of the Leptospirillum
group III, which were relatively sparse in the biofilm, were
probably the only group of N2-fixing organisms and
therefore the single possible point of entry of nitrogen in
the biofilm.
Environmental genomics tools have also been applied to
ecosystems harbouring more diverse microbial communi-
ties. In one of the largest environmental genomics study
ever undertaken, Rusch et al. (2007) produced a total of 7.7
million reads from samples of surface waters collected
during the Global Ocean Sampling expedition off the
eastern American coast, in the Gulf of Mexico, the Panama
canal and in the eastern part of the equatorial Pacific Ocean.
Despite a strong sequencing effort, 53% of the reads
remained unassembled, which could be ascribed to the high
levels of diversity within the samples. However, despite this
high level of genetic polymorphism, this impressive dataset
was dominated by very few genera of bacteria such as
Pelagibacter, Prochlorococcus and Synechococcus, which were found
at many sites along the transects. Two other abundant
genera, Burkholderia and Shewanella, only appeared in the
Sargasso sea (Venter et al. 2004). These five genera were also
found to be among the most abundant in the dataset when
16S rRNA sequence clusters were used to characterise the
diversity. A large fraction of the diversity fell within
ribotypes, with the presence of distinct populations in
different environments. Likewise, computations of the
similarities between community genomes were used to
Environmental genomics, transcriptomics and / or proteomics
Bioinformatics analysis of genes and functions
Metabolic reaction pathways and networks
Networks of metabolic pathway regulations
Networks of protein-ligand binding and signal transduction
Mathematical modelling and property analysis
Complex network analysis
Metabolic control analysis
Correlative coherence analysis
Genome-scale metabolic modelling
Hypothesis generation and testing
Experimental approaches : physiological, biochemical and molecular
responses to environmental, nutritional and stress forcing
Environmental data : biochemistry, geochemistry, population and
community dynamics, biodiversity dynamics
Figure 2 Mathematical modelling in environmental genomics
analysis. Reconstructed networks from environmental genomics
data (Box S2) can be analysed by various methods of mathematical
modelling (Getz 2003; Feist et al. 2008; Westerhoff & Palsson
2008; Fuhrman 2009), that can assess and quantify their dynamic
properties and generate hypotheses on community and ecosystem
functioning. Hypothesis testing can then be carried out by
experimental and environmental verification approaches, with the
subsequent possibility of iterations between the different steps of
the process. The main steps in this flowchart are derived from the
description of the systems biology paradigm by Palsson (2006).
780 P. Vandenkoornhuyse et al. Review and Synthesis
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
assess genetic distances between sampled environments.
Samples from unique habitats such as a hypersaline pond
and a freshwater lake were the most distant in terms of
genomic composition whilst similar habitats such as the
Sargasso sea or tropical open ocean waters contained more
similar microbial metagenomes.
Environmental constraints exert a strong selection
pressure on living (micro)organisms. These factors drive
the selection of guilds that are best adapted for habitat
colonisation. Thus, application of environmental genomics
on a �global� scale (e.g. through sampling along a gradient of
environmental fluctuation or through comparison of differ-
ent ecosystems) offers an unprecedented way of linking
environmental parameters with the specific and functional
diversity of microbial assemblages (see also Tringe et al.
2005; Dinsdale et al. 2008).
Metagenomic studies have offered a broad view of the
organization of genetic diversity in various microbial
communities as well as insights into the metabolism of
their dominant members. However, the paucity of fully
assembled genomes from metagenome sequencing has
hampered our ability to link diversity and functions. The
need to target specific groups of organisms in an
environmental sample has led to the development of
numerous methods and protocols for isolating populations
ranging from a few thousand cells to only one cell and for
obtaining enough DNA template for sequencing (Rodrigue
et al. 2009; Woyke et al. 2009). Recently, Zehr et al. (2008),
by deciphering the genome sequence of a new group of
unicellular nitrogen-fixing marine cyanobacteria dubbed
UCYN-A, have provided an excellent example of how the
combination of isolation techniques and environmental
genomics helps to link ecosystem functioning with the
genetic makeup and metabolic features of organisms.
UCYN-A cyanobacteria were first detected through the
amplification of transcripts of the nifH gene (dinitrogenase
reductase subunit of nitrogenase; Zehr et al. 2001) in
environmental samples. Unlike other unicellular diazo-
trophic cyanobacteria, UCYN-A cyanobacteria express the
nifH gene during daytime when oxygen production by
photosystem II (PSII) inhibits nitrogen fixation (Church
et al. 2005). Despite repeated efforts, no member of this
group could be maintained in culture. The authors used
flow cytometry to isolate about 5000 cells from a natural
population of the UCYN-A group and subjected the
genomic DNA to isothermal whole genome amplification
and pyrosequencing. As expected for a diazotroph, the
UCYN-A metagenome encodes a complete nitrogen
fixation pathway. Surprisingly, although numerous se-
quences of Photosystem I genes were detected, no genes
coding for the PSII proteins were found. The authors
provided strong evidence that cyanobacteria of the UCYN-
A group do not possess a complete photosynthetic
apparatus and also seems to lack all the genes necessary
for CO2 fixation. Thus, the UCYN-A group appears to be
the sole known cyanobacterial lineage unable to produce
oxygen. This would explain how UCYN-A cyanobacteria
concomitantly perform N2 fixation and photosynthesis.
Several studies had suggested that members of the UCYN-
A group were abundant in oceans and might contribute
markedly to biological nitrogen fixation (Montoya et al.
2004). The inability of some marine diazotrophs to fix CO2
will certainly require a refinement of established models of
N and C cycling in oceans as it deviates from the
stoichiometrical relationships previously assumed for
biological N fixation and photosynthetic C incorporation
(Mahaffey et al. 2005).
Environmental genomics has become a standard approach
in the study of aquatic habitats, owing to their relative
simplicity. In comparison, soils and sediments appear to be
more spatially heterogeneous and phylogenetically diverse.
Estimates of soil diversity are often in the range of hundreds
to thousands of microbial species per gram of soil (Torsvik
et al. 2002). Soil and sediments are often considered to
constitute one of the largest reservoirs of microbial diversity
on Earth. Notwithstanding the difficulties of obtaining
representative samples or limitations associated with DNA
extraction and purification (Table 1), sequencing of metage-
nomes from soil communities also requires much greater
effort to obtain significant sequence coverage. Consequently,
terrestrial habitats have mainly been targeted by metage-
nomic studies in the prospect of finding new molecules of
biomedical or agricultural interest (Daniel 2005). Interna-
tional programs such as TerraGenome have been started
with the aim of sequencing the metagenomes of reference
soils (see http://www.terragenome.org/).
The use of high-throughput sequencing technologies
has also led to tremendous progress in understanding the
intricate associations between symbiotic microorganisms
and their eukaryotic hosts. Woyke et al. (2006) described
the functioning of a complex symbiosis between the
marine oligochaete Olavius algarvensis and a microbial
consortium consisting of two sulphur-oxidizing gamma-
proteobacteria and two sulphate-reducing delta-proteobac-
teria. The worm is characterized by the complete absence
of a digestive apparatus and a reduced excretory system.
Thus, nutrition of the host, as well as the degradation of
toxic by-products of its metabolism, is entirely dependent
on the activity of the bacterial consortium. Analysis of the
metagenomic data provided valuable insights into the
metabolism of the different bacterial partners and into the
network of interactions established between the worm and
its symbionts. The host is supplied with C, N, S and P
compounds by the symbiotic bacteria, and host organic
osmolytes and waste products are used as C and N
sources for symbiont metabolism. Analysis of the
Review and Synthesis Environmental genomics 781
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
protein-coding genes of the symbionts has confirmed the
existence of syntrophic cycling of sulphur elements
between the sulphur-oxidizing and the sulphate-reducing
symbionts.
Finally, organism-centered studies of isolable multicellular
eukaryotes (Martin et al. 2008; Vera et al. 2008; Rasmussen
& Noor 2009) have shown the usefulness of environmental
genomics for analysing such organisms in their ecological
and evolutionary context. Altogether, these examples of
function-, organism-, community- or environment-centered
approaches shed light on how environmental genomics and
post-genomics allow the integration of molecular data with
ecological metrics and open new windows on the complex
interplays between genomes, phenotypes, populations and
environment. All these results, which have already induced
advances in ecology, are based on a battery of bioinformat-
ics tools (see Box S2 for details) to analyse sequence data.
However, there are still limitations, which are discussed
below, along with recommendations to avoid mis-analyses
and mis-interpretations.
CURRENT L IM I TAT IONS OF ENV I RONMENTAL
GENOM ICS FUNCT IONAL IN T EGRAT ION
Sampling and sequencing
Technological and conceptual limitations of environmental
genomics (Table 1) are not trivial, and require thorough
consideration to further improve analyses. Confrontation
with various environmental samples (such as seawater,
freshwater, soils, sediments, bacterial mats, plant and
animal tissues) has resulted in the considerable improve-
ment of extraction protocols and methods, and of sample
preparations, which must be environment-compatible,
contamination-free, non-degradative, non-combinatorial,
and complete. Considerable progress has also been made
in the quality of massive sequencing in terms of through-
put, cost, read length, and read quality. Current sequencing
methods can generally yield deep and representative
environmental sequences of high quality. Moreover, these
methods are constantly improving and bioinformatics
analysis of sequences is constantly reducing sequencing
noise and bias (Quince et al. 2009). However, the quality
and representativity of sequencing may remain hampered
by the complexity of some environmental samples, in terms
of organism diversity and abundance as well as size and
composition (e.g. percentage of repeats) of the individual
genomes.
Gene identification and functional characterisation
The first task of finding genes in environmental genomics or
metagenomics data is sometimes compounded by the great
diversity of genomes that is revealed and by the myriad
novel genes they contain (Table 1). Whereas gene identifi-
cation has become less and less problematic for bacteria and
archaea genomes, the difficulties must not be underesti-
mated in the case of higher eukaryotic genomes (Levasseur
et al. 2008) due to the modular nature of eukaryotic genes
and to the short sequences produced by second-generation
sequencing platforms which complicate the prediction of
open-reading frames.
Another major challenge in environmental genomics is
the subsequent step of correctly identifying functions on the
basis of sequence data. Classically, the identification of gene
functions is heavily dependent on comparisons, using
standard tools such as BLAST (Basic Local Alignment
Search Tool, Altschul et al. 1997), with sequences from
other organisms or metagenomes present in genome
databases such as GenBank. The inference of gene function
is then derived from functional annotations of these similar
sequences. Bioinformatics analyses are thus becoming a
major bottleneck in environmental genomic studies (Fig. 1),
as the production of sequences outpaces the computational
capacities available in most laboratories. Moreover, as
highlighted by Palsson (2006), ‘‘it should be emphasised that
every gene annotation based on in silico methods is hypothesised and
such annotation is subject to revision, until the gene has been cloned,
expressed, and the function of the gene product directly evaluated’’.
Thus, most bona fide annotations are derived from genes of
model organisms, where biochemical analysis and reverse
genetics can readily be carried out. Furthermore, the
sequenced organisms available in databases represent a
small and strongly biased subset of the biodiversity revealed
by cultivation-independent methods. However, it is worth
noting that several recent initiatives such as the Moore
Foundation Marine Microbial Genome Sequencing Project,
the Genomic Encyclopedia of Bacteria and Archaea Project,
or the Fungal Genome Initiative will contribute to improve
the list of sequenced organisms and to obtain a better
coverage of the known biodiversity.
This duality between the great phylogenetic diversity of
environmental genes (Yooseph et al. 2007) and the limited
number of well-characterised genes in the databases is likely
to result in high proportions of genes with �unknown� or
�hypothetical� functions in environmental genomes. This
may also cause a strong bias towards identification of the
best-known, and maybe most straight-forward, functions,
such as those related to central metabolism. Finally,
numerous causes of incorrect annotations in model species
have been identified (Galperin & Koonin 1998). This is why
some authors have voiced concern that comparison of
environmental genomes with imprecise or erroneous anno-
tations in databases may lead to exponentially amplified
errors and inappropriate functional predictions (Lopez-
Garcıa & Moreira 2008).
782 P. Vandenkoornhuyse et al. Review and Synthesis
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
The concept of function and the difficulty of function
assignment
Most studies of gene-function relationships have focussed
on the cell and organismal levels. Even at these levels, the
difficulty of precisely defining the multi-faceted concept of
function has been emphasised (Danchin et al. 2004) and
gene functions may be more complex than those hypoth-
esised from database annotations. A well-annotated gene,
with a well-defined function, may yield various products
through alternative splicing and post-translational modifica-
tions, and ⁄or multi-functional products. For instance, a gene
may code for multiple enzymatic activities, with multiple
subcellular localizations (Silva-Filho 2003), or with com-
bined enzymatic and regulatory functions (Takeda et al.
2009). Complete understanding and annotation of gene
product functions are therefore extremely difficult to
achieve (Danchin et al. 2004).
Moreover, many annotations that are based purely on
sequence homology are likely to be incorrect, since
biochemical characterization of gene products previously
identified by similarity searches has often yielded surprises,
especially in terms of ligand ⁄ substrate specificities or of
subcellular targeting. Conversely, an apparent absence of
gene families on the basis of homology searches does not
necessarily mean an absence of function since independent
emergence of catalytic processes can occur in independent
protein phylogenetic backgrounds, thereby creating sets of
analogous enzymes (Galperin et al. 1998). Finally, whereas
homologous identification can be extremely precise on the basis
of short sequences, as in the identification of short
expressed tags vs. genome data from the same organism,
heterologous identification of unknown genes vs. gene databases
from more or less related organisms can be hazardous.
Thus, as an exaggerated example, BLASTX analysis (search
of protein databases for all the translated possibilities of a
DNA sequence) of the complete gene sequence of
Nicotiana tabacum ornithine decarboxylase (polyamine bio-
synthesis pathway) versus the Arabidopsis thaliana protein
database yields a significant identification with diamino-
pimelate decarboxylase (lysine biosynthesis pathway). This
instance of heterologous mis-identification between related
species may be ascribed to the fact that Arabidopsis thaliana
lacks an archetypal ornithine decarboxylase (Hummel et al.
2004).
It is clear that all the above-described situations are likely
not only to occur but also to be compounded at the
ecosystem level where multiple environmental variables
drive the expression of gene functions and direct the role
played by organisms in ecosystem processes. Furthermore,
our ability to determine the links between biodiversity and
ecosystem functioning might be hampered by the impor-
tance of horizontal transfers of protein-coding genes – for
instance through viruses or plasmids – between phyloge-
netically distant Bacteria and Archaea (Koonin & Wolf
2008).
Genome–environment interactions and the plasticity of
gene expression
Although identification of a given function at the gene level
may indicate selection of this gene in the organisms present
in the ecosystem, it does not give information on the
patterns of gene expression. In other words, there are always
important differences between who is there in the ecosys-
tem and who is at work in the ecosystem. As far as possible,
genomics data must be complemented with transcriptomics
or proteomics data, which correspond to measurements of
steady-state levels of transcripts or proteins (Box S2; Fig. 2).
Although its adaptive value has been subjected to
criticism (Feder & Walser 2005), mRNA expression is an
important step in gene-to-functional protein expression
(Stranger et al. 2007), and an important response to the
perception of environmental clues (Hummel et al. 2004).
Improvement of RNA isolation and application of massive
sequencing to the analysis of cDNA from environmental
samples (Frias-Lopez et al. 2008) or non-model species
(Vera et al. 2008) have circumvented the limitations of DNA
array technologies. In spite of some successful applications
(Parro et al. 2007), DNA array technologies cannot be
readily applied to most environmental samples, since they
imply a priori knowledge of the species and communities
under investigation. It must be kept in mind however that
environmental transcriptomics suffers from some draw-
backs, such as the variable half-lives of mRNA, and the fact
that, in bacteria and archaea, mRNAs represent a small
proportion of the total RNA and cannot be enriched by
poly-dT affinity, since they lack the polyA tail found in
eukaryotic mRNA. Moreover, functional characterization of
cDNAs is confronted with the same limitations of
annotation as those described above for gene function
analysis (Table 1). Finally, transcriptomics generally gives a
comprehensive view of expression levels across the indi-
viduals of the sampled population (Stranger et al. 2007).
More detailed analysis of environmental transcriptomics
data should eventually take into account the impact of
individual genetic variations on gene expression (Stranger
et al. 2007).
Analysis at the protein level may provide the most
representative snapshots of organism or community func-
tionalities. Proteomics and metaproteomics approaches have
indeed been carried out with success on environmental
samples (Ram et al. 2005). Nonetheless, reliable extraction
of proteins from natural environments can be more
challenging than for nucleic acids, especially in terms of
the quality and quantity of the sampled proteomes. High
Review and Synthesis Environmental genomics 783
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
throughput analysis of metaproteomes can be carried out by
mass spectrometry, which however requires comparison
with databases containing gene sequences originating from
the same organisms or from very closely related organisms,
as mass spectrometry data are very sensitive to changes in
protein sequences. Thus, metaproteomics studies must be
coupled to metagenome sequencing to detect significant
numbers of protein matches (Ram et al. 2005).
From environmental genomics to environmental
phenotypes
As most metabolic and functional schemes of ecosystem
functioning are dependent on heterologous comparisons
with databases containing significant numbers of in silico
annotated genes, such schemes should be clearly labelled as
hypothetical (Fig. 2). This hypothetical nature does not
undermine the core value of such analyses, but should be
taken as an incentive to validate hypotheses and integrate
these hypothetical schemes into further ecosystem-level
studies. In other words, caution must be taken not to
indulge in direct integration of sequence analysis, which may
short-circuit important validation steps (Fig. 1). Moreover,
due to regulatory, biochemical and supramolecular interac-
tions, the number and scope of organism and ecosystem
functions derivable from a single genome or from commu-
nity genomes does not scale with the mere catalogue of
genes contained in those genomes.
The identification of new environmental genes should be
followed by further functional, biochemical, and physio-
logical characterization. This can first be carried out on
candidate genes, selected on the basis of their outstanding
interest or representativity in relation to ecosystem knowl-
edge. This was the case for proteorhodopsin genes. They
were identified in analyses of environmental DNA, and
their products were biochemically characterised after over-
expression (Beja et al. 2000). Furthermore, environmental
genomics data can be complemented with laboratory
organism-centered approaches, not only in the case of
isolable multicellular eukaryotic organisms, but also in the
case of microbial communities. Thus, enrichment cultures
and the cultivation of selected microbial strains may be
useful for further genomic and physiological characterisa-
tion (Giovannoni et al. 2005) or to test important physi-
ological and ecosystemic hypotheses (Lopez-Garcıa &
Moreira 2008). In this context, important progress has
been made to develop culture protocols and media to
cultivate recalcitrant microorganisms of ecological interest
(Ben-Dov et al. 2009).
More generally, environmental genomics results must be
critically confronted with ecological ecosystem knowledge
(Mou et al. 2008; Zehr et al. 2008) and ⁄or tested through
modelling procedures (Roling et al. 2007). Procedures for
environmental validation, corresponding to a kind of
ecosystem phenotype characterization, should be better
defined, in the same way that model species genomics
should be complemented with organism phenotype char-
acterisation (Fig. 2). However, it may be extremely difficult
to carry out high-throughput post-genomics functional
characterisation, such as protein over-expression and
biochemical analysis, mutant-based gene ⁄ function analysis
or natural variation-based gene ⁄ function analysis, in the
context of environmental genomics (Wullschleger et al.
2007). However, it has to be stressed that bioinformatics
approaches and tools can yield broad and useful informa-
tion, especially functional information, even with a
genome coverage as low as 0.1X (Rasmussen & Noor
2009), when long enough sequence tags are obtained from
random pyrosequencing. This is true even for communities
of organisms that do not correspond to any available
genomic sequence in the databases. Moreover, novel
ideas and methods are constantly improving the relevance
of environmental genomic analyses to address ecological
questions.
IMPROVEMENT OF GENOM ICS APPROACHES
FROM AN ECOLOG I CAL PO INT OF V I EW
The importance of ecological and evolutionary criteria for
functional identification
The difficulties of homology-based functional identification
have been recognized for some time, but various improve-
ments using protein domain detection and gene context
approaches (Singh et al. 2009) have been made. Phylogenetic
analyses have been particularly valuable in going beyond
basic homology comparisons and accounting for the
evolutionary history of genes (Levasseur et al. 2008). Thus,
combinations of phylogenetic tree construction, integration
of experimental data and differentiation of orthologs and
paralogs, have been proposed to address annotation errors.
As a result, a number of software platforms and databases
have been developed recently (see Box S2). These enable
phylogenetic analysis and utilisation of gene clusters, such as
COGs (clusters of orthologous groups; Tatusov et al. 2003),
to infer gene function by superimposing experimental
information on the phylogenetic trees (Levasseur et al.
2008). The use of phylogenetic data for functional recon-
struction from environmental genomics is particularly
interesting in the light of relationships between community
phylogenetic structure and ecosystem processes (Prinzing
et al. 2008). However, the quality of this kind of phylogeny-
based analysis is strongly dependent on the scope of the
initial phylogenomics database and on relationships between
the environmental species under study and the set of species
present in the databases.
784 P. Vandenkoornhuyse et al. Review and Synthesis
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
The importance of bioinformatics and statistical controls
Given the unfinished status of gene and protein databases, it
may be important to develop experimental bioinformatics
controls, especially when the species in the environmental
genomics data do not have phylogenetically related coun-
terparts in the databases. Thus, controls can be carried out
with artificially-reconstructed genomes (Yang & Bennetzen
2009) or communities (Quince et al. 2009). In robustness
controls, a known genome of a control species could also be
re-analysed by comparison with gene and protein databases
from which this given species, its genus, or its family would
be artificially removed. This approach could be used to
estimate the accuracy of functional assignments when an
unknown genome is compared with phylogenetically unre-
lated genomes, and thus to select the most robust functional
assignments. Environmental genomics approaches often
imply the parallel comparative analysis of various samples
corresponding to gradients of ecological factors, such as
light, salinity, or anthropic pressure (Raes et al. 2007;
Dinsdale et al. 2008; ). The complexity of environmental
genomics data therefore requires the specific development
and ⁄or adaptation of statistical analysis tools as described in
Rodriguez-Brito et al. (2006).
Expected improvements of functional annotations and
genome assembly
As described above, a great number of functional annota-
tions are hypothetical and subject to revision. Conversely,
continuous revision can be expected to improve environ-
mental genomics data analysis. However, systematic and
standardized processes for database revision are still lacking,
and need to be developed for all the different genomics
approaches, whether model-species-based or environmental,
in order to avoid possible erroneous revisions. Moreover,
novel methods, such as those taking into account not only
the nature of direct gene products but also regulatory
interactions, protein-protein interactions, and protein-
metabolite interactions (Palsson 2006), are likely to improve
annotations. Developing comparisons of metagenomics data
with metatranscriptomics and metaproteomics data can also
be expected to improve in silico identification of genes and
annotations. Finally, full and accurate annotation of model
species genomes, corresponding to different major phyla,
remains to be carried out and may further improve
environmental genomics data analyses. However, the
diversity and variability encountered in environmental
genomics data may eventually surpass the range of model
species genomics data and even modify the very concept of
species and of model species (Medini et al. 2008). Moreover,
model species databases will be progressively complemented
with databases for single-species genomes of ecological
interest, especially if single-cell genomics (Marcy et al. 2007;
Rodrigue et al. 2009; Woyke et al. 2009) can be developed in
an ecological context. These environmental genomics data
on single species, obtained through direct sampling of
individuals, cultivation or single-cell approaches, will be
extremely useful not only for annotation but also to
assemble metagenomics data.
Further analysis of the complete wealth of environmental
genomics data
In the same way that they can be re-analysed in the light of
improved annotations, stored environmental genomics data
can be re-analysed to extract meaningful new information.
For instance, the comparative analysis of promoter sequences,
which are involved in gene expression regulation, has been
extremely limited in the case of environmental genomics
data. Promoter sequences involve consensus sequences and
regulatory cis-acting elements that can be highly conserved across
species or highly variable, depending on evolutionary
constraints and selection pressures (Zhu & Snyder 2002).
Furthermore, databases of promoters are being developed
(Zhu & Snyder 2002). Therefore, it could be possible to
classify gene sets from environmental genomics data
according to the cis-acting regulatory elements that are
present in their promoters, thereby generating classes of co-
activated or co-inhibited genes. Insofar as cross-species
consensus sequences are available for use, such classification
could point to co-regulated genes at the community level.
Moreover, such information on co-regulation at the
ecological level could lead to experimental verification using
ChIP-on-chip approaches on the proteins that regulate these
networks of co-regulated genes (Buck & Lieb 2004).
Similarly, it will be possible in the future to carry out
deeper analyses of environmental genomics data for other
regulatory levels, such as the generation of multiple
transcripts from a single gene (Mereau et al. 2009) or the
systematic analysis of regulatory RNAs (Shi et al. 2009).
Finally, in parallel to environmental genomics, the minia-
turization and automation of sensors and probes have also
resulted in the development of powerful analytical tools that
make it possible to carry out high-frequency temporal, as
well as proximal, monitoring of natural habitats. Such tools
are essential to monitor environment variables at scales of
time and space relevant to community activities and
molecular functions. Analytical microsensors are able to
monitor fine variations or gradients of various physico-
chemical parameters (Krawczyk-Barsch et al. 2008). Like-
wise, isotopic (nanoSIMS) and microscopic techniques
(FISH, TEM) can measure the activities of (micro)organ-
isms in their habitats (Dekas et al. 2009). Progress has also
been achieved in the setting-up of controlled experiments,
in which the complexity of communities and the geochem-
Review and Synthesis Environmental genomics 785
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
ical environments can be manipulated. The use of environ-
mental genomics approaches that combine accurate mon-
itoring and experimentally controlled environments may
contribute to build appropriate models of ecosystem
functioning (Fig. 2).
Present and future importance of mathematical modelling
for environmental validation
Environmental genomics data are complex in scale and
scope. Even the pivotal task of inferring community-level
functions from individual functions of genes requires the
parallel analysis and integration of hundreds or thousands of
genes and individual functions, and an understanding of
their functional and regulatory interactions. For the reasons
given above, genomics-based data must be compared and
integrated with higher-level environmental data, such as
experimental data or fluxes of biogeochemical cycles. The
richness and complexity of these data raise the problem of
transforming functions into equations. However, it is
important to be able to describe reconstructed functional
networks mathematically, in order to analyse their properties
in greater detail (Palsson 2006). Mathematical properties can
be used to generate functional hypotheses (Fig. 2) through
complex networks analysis (e.g. Fuhrman 2009), metabolic
control analysis (Westerhoff & Palsson 2004), correlative
coherence analysis (Getz 2003), or genome-scale metabolic
modelling (Feist et al. 2008). These hypotheses can then be
tested experimentally or tested for their fit to environmental
data, such as geochemical fluxes, biodiversity fluctuations,
or biomass production. Finally, models of reconstructed
networks can be improved by iterative interactions between
modelling, experimental results and ecosystemic data
(Fig. 2).
NEW FRONT I ERS OF ENV I RONMENTAL GENOM ICS
The present state-of-the-art shows that environmental
genomics has already generated new concepts and tackled
questions that were impossible to address before. Improve-
ment of multidisciplinary integration of bioinformatics,
genetics, statistics, physiology, ecology, and evolutionary
sciences, is likely to raise further questions and to offer the
possibility to reinvestigate existing paradigms.
Environmental genomics is leading to a better under-
standing of diversity at different ecological scales ranging
from population to ecosystem by demonstrating that the
environmental gene pool is several orders of magnitude
greater than previously believed (Yooseph et al. 2007). It is
clear, from these findings, that the availability of one
complete genome sequence for each described taxon would
be insufficient to explain the complexity of species (Medini
et al. 2008). Despite the fact that species are considered as
fundamental units of biology and are thus as important as the
cell or individual, the definition of a species and the adoption
of a unified species concept is still under debate, although
interesting essays on this topic have been published (Mishler
& Brandon 1987; de Queiroz 2007). Ribosomal RNA gene
analyses have been long considered as sufficient tools to
describe diversity because (1) these genes are shared by all
living organisms, (2) they contain robust phylogenetic
information and (3) they are useful, easy-to-apply tools for
application of the phylogenetic species concept (Mishler &
Brandon 1987). Environmental sequencing has recently
provided a global �one-does-all� method providing a deep
insight into the molecular list of all the sampled
(micro)organisms, and describing the genes and functions
displayed in more or less complex communities. From this, it
becomes possible to consider a genome as a trait and to
delimit species as �separately evolving metapopulation lineages (or,
more properly, segments thereof)� (de Queiroz 2007) by analysing
this trait rather than core genes, such as ribosomal RNA
genes. It also has to be stressed that the adoption of an
explicit species concept directly affects the actual assessment
of diversity and thus the fit of (1) models of community
dynamics and (2) theories of species assembly. The use of the
genome as a trait to describe a species could involve, among
other criteria, gene synteny and the level of similarity. However,
at present, this can be envisaged only for small-genome
organisms, such as bacteria, archaea and some eukaryotes.
Besides these considerations, novel fields of research that
cannot be studied by other means than environmental
genomics are now open to investigation. Pioneer papers, at
the intersection of ecology and evolutionary biology, have
paved the way for the genomics of co-evolution including
mutualism, symbioses and parasitism. For instance, Martin
et al. (2008) analysed mycorrhizal symbiosis and provided
important insights into the behaviour and capacities of the
fungal symbiont. In a similar line of research, the
behavioural evolution and capacities of insect heritable
bacteria have been explored (e.g. Moran et al. 2008). Such
studies have demonstrated the existence of obligate and
facultative mutualists displaying functions ranging from
nutrition, protection against biotic or abiotic stresses, to
symbiont-manipulating reproduction regimes. The local
biotic environment of these bacteria may promote specia-
tion as a result of reproductive and ecological isolation
(Moran et al. 2008). These studies thus (1) address new
questions of co-evolution and macroevolution, and (2)
further our understanding of the responses of the partner-
ship to biotic or abiotic environmental stresses.
To date, functional and mechanistic objectives have not
taken into account variation at the population level although
this information is generally accessible in a number of
environmental genomics projects. Usually, deep sequence
coverage can detect single nucleotide polymorphisms
786 P. Vandenkoornhuyse et al. Review and Synthesis
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
(SNPs) and structural variations, such as copy number
variants (CNVs) (Stranger et al. 2007), which can affect
individual fitness. However, the field of population genom-
ics (i.e. population studies analysing genome-wide genetic
markers) is mainly developing apart from environmental
genomics, despite the fact that the theoretical corpus of
population genetics is well adapted to deal with environ-
mental genomics data. Reciprocally, predictions and hypoth-
eses can be derived from genomic neutrality tests of
population differentiation due to environmental changes
(i.e. population differentiation shown through association(s)
between an environmental constraint and specific genetic
markers). In this case, the genetic marker can be supposed
to be a genetic trait of adaptation (Schmidt et al. 2008),
which can thus be regarded and tested as a possible factor
involved in individual fitness. This kind of idea may be
considered as one of the purposes of comparative genomics
or metagenomics projects.
One major result of environmental genomics projects is
the possibility of reconstructing and modelling potential
metabolic and regulatory networks. However, these data
cannot be readily used to formalise models of ecosystem
functioning, as no data can be directly assigned to parameter
variables: spatio-temporal variations must be taken into
account if ecosystem functioning is to be comprehensively
modelled from three-dimensional data matrices, as shown in
Fig. 3. Experimental metagenomics, metatranscriptomics
and metaproteomics projects testing the consequences of
different environmental constraints on physico-chemical
measurements can define the most important variables to
include in a formal model of ecosystem functioning.
Statistical modelling of a given ecosystem requires the kind
of data presented in Fig. 3 and metadata, such as biogeo-
chemical analyses, must be included to help the interpre-
tations. It is also possible to model environmental genomics
data from a stoichiometric approach or from a kinetic
Figure 3 Spatio-temporal three-dimensional
organisation of sequence-derived datasets.
The set of environmental genomic, cDNA,
or protein sequences (grey bars) is ascribed
to a set of i Species (S), thus resulting in
species-labelled sequences (colour bars). The
aim of functional analysis and profiling is to
ascribe species-labelled sequences to a set of
j functional categories (F), thus resulting in a
�potential function · species� understanding
of the ecosystem. The third dimension of
the matrix corresponds to spatio-temporally
replicated samples, such as samples sub-
jected to various environmental constraints,
or samples at different points in time. This
kind of dataset can be analysed not only to
understand the mechanisms induced by a
forcing variable, but also to select and
parameterize the components that have to
be included in a model.
Review and Synthesis Environmental genomics 787
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
approach (e.g. Roling et al. 2007). Incorporation of spatio-
temporal variations into the model would, in itself, lead to a
change of scale. Even if environmental genomics is generally
focussed at a small scale, it can be speculated that the data
contain fractal properties of self-similarity (i.e. sub-units at
multiple levels reflecting the structure of the whole object)
and fractional dimensionality. These fractal properties could
be tested to allow further rescaling at higher levels. As far as
we know, such approaches have not yet been used. Such a
model could in return be a source of testable hypotheses of
ecosystem functioning, and could be used to predict changes
in a given ecosystem.
ACKNOWLEDGEMENTS
This work was supported at least partially by funding from
the Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS,
EC2CO funding programme), the Centre armoricain de
recherches en environnement (CAREN, Rennes), the Total
Corporate Foundation for Biodiversity and the Sea, and the
Brittany regional council. For fruitful and ground-breaking
discussions, the authors wish to thank the participants at the
CNRS summer school �High-throughput methods of molec-
ular biology in the environmental sciences� (Roscoff, France
2005) and the CNRS Jacques Monod conference �Environ-
mental Genomics� (Roscoff, France 2007), with special
thanks to Eric Allen, Oded Beja, Catherine Boyen, Frederi-
que Barloy-Hubler, Francoise Bringel, Ana Caicedo, Daniela
Delneri, Patrick Forterre, Francis Martin, Frederic Partensky,
and Peter Young. The three anonymous referees are also
acknowledged for their insight and valuable comments.
RE F ERENCES
Altschul, S.F., Madden, T.L., Schaffer, A.A., Zhang, J., Zhang, Z.,
Miller, W. et al. (1997). Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new
generation of protein database search programs. Nucleic Acids
Res., 25, 3389–3402.
Amann, R.I., Ludwig, W. & Schleifer, K.H. (1995). Phylogenetic
identification and in situ detection of individual microbial cells
without cultivation. Microbiol. Rev., 59, 143–169.
Atamna-Ismaeel, N., Sabehi, G., Sharon, I., Witzel, K.P., Labrenz,
M., Jurgens, K. et al. (2008). Widespread distribution of prote-
orhodopsins in freshwater and brackish ecosystems. ISME J., 2,
656–662.
Ballatori, N., Boyer, J.L. & Rockett, J.C. (2003). Exploiting genome
data to understand the function, regulation, and evolutionary
origins of toxicologically relevant genes. Environ. Health Perspect.,
111, 871–875.
Beja, O., Aravind, L., Koonin, E.V., Suzuki, M.T., Hadd, A.,
Nguyen, L.P. et al. (2000). Bacterial rhodopsin: evidence for a
new type of phototrophy in the sea. Science, 289, 1902–1906.
Beja, O., Spudich, E.N., Spudich, J.L., Leclerc, M. & DeLong, E.F.
(2001). Proteorhodopsin phototrophy in the ocean. Nature, 411,
786–789.
Ben-Dov, E., Kramarsky-Winter, E. & Kushmaro, A. (2009). An in
situ method for cultivating microorganisms using a double
encapsulation technique. FEMS Microbiol. Ecol., 68, 363–371.
Buck, M.J. & Lieb, J.D. (2004). ChIP-chip: considerations for the
design, analysis, and application of genome-wide chromatin
immunoprecipitation experiments. Genomics, 83, 349–360.
Cebron, A., Bodrossy, L., Chen, Y., Singer, A.C., Thompson, I.P.,
Prosser, J.I. et al. (2007). Identity of active methanotrophs in
landfill cover soil as revealed by DNA-stable isotope probing.
FEMS Microbiol. Ecol., 62, 12–23.
Church, M.J., Short, C.M., Jenkins, B.D., Karl, D.M. & Zehr, J.P.
(2005). Temporal patterns of nitrogenase gene (nifH) expression
in the oligotrophic North Pacific Ocean. Appl. Environ. Microbiol.,
71, 5362–5370.
Danchin, E., Vitiello, V., Vienne, A., Richard, O., Gouret, P.,
McDermott, M.F. et al. (2004). The major histocompatibility
complex origin. Immunol. Rev., 198, 216–232.
Daniel, R. (2005). The metagenomics of soil. Nat. Rev. Microbiol., 3,
470–478.
Dekas, A.E., Poretsky, R.S. & Orphan, V.J. (2009). Deep-sea
archaea fix and share nitrogen in methane-consuming microbial
consortia. Science, 326, 422–426.
Delneri, D., Hoyle, D.C., Gkargkas, K., Cross, E.J.M., Rash, B.,
Zeef, L. et al. (2008). Identification and characterization of high-
flux-control genes of yeast through competition analyses in
continuous cultures. Nat. Genet., 40, 113–117.
Dinsdale, E.A., Edwards, R.A., Hall, D., Angly, F., Breitbart, M.,
Brulc, J.M. et al. (2008). Functional metagenomic profiling of
nine biomes. Nature, 452, 629–632.
Dumont, M.G. & Murrell, J.C. (2005). Stable isotope probing –
linking microbial identity to function. Nat. Rev. Microbiol., 3, 499–
504.
Falkowski, P.G., Fenchel, T. & Delong, E.F. (2008). The microbial
engines that drive Earth�s biogeochemical cycles. Science, 320,
1034–1039.
Feder, M.E. & Walser, J.C. (2005). The biological limitations of
transcriptomics in elucidating stress and stress responses. J. Evol.
Biol., 18, 901–910.
Feist, A.M., Herrgard, M.J., Thiele, I., Reed, J.L. & Palsson, B.O.
(2008). Reconstruction of biochemical networks in microor-
ganisms. Nat. Rev. Micro., 7, 129–143.
Fitter, A.H. (2005). Darkness visible: reflections on underground
ecology. J. Ecol., 93, 231–243.
Frias-Lopez, J., Shi, Y., Tyson, G.W., Coleman, M.L., Schuster,
S.C., Chisholm, S.W. et al. (2008). Microbial community gene
expression in ocean surface waters. Proc. Natl Acad. Sci. USA,
105, 3805–3810.
Frigaard, N.U., Martinez, A., Mincer, T.J. & DeLong, E.F. (2006).
Proteorhodopsin lateral gene transfer between marine plank-
tonic Bacteria and Archaea. Nature, 439, 847–850.
Fuhrman, J.A. (2009). Microbial community structure and its
functional implications. Nature, 459, 193–199.
Fuhrman, J.A., Schwalbach, M.S. & Stingl, U. (2008). Proteorho-
dopsins: an array of physiological roles? Nat. Rev. Microbiol., 6,
488–494.
Galperin, M.Y. & Koonin, E.V. (1998). Sources of systematic error
in functional annotation of genomes: domain rearrangement,
non-orthologous gene displacement and operon disruption.
In Silico Biol., 1, 55–67.
788 P. Vandenkoornhuyse et al. Review and Synthesis
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
Galperin, M.Y., Walker, D.R. & Koonin, E.V. (1998). Analogous
enzymes: independent inventions in enzyme evolution. Genome
Res., 8, 779–790.
Getz, W.M. (2003). Correlative coherence analysis: variation from
intrinsic and extrinsic sources in competing populations. Theor.
Popul. Biol., 64, 89–99.
Giovannoni, S.J., Tripp, H.J., Givan, S., Podar, M., Vergin, K.L.,
Baptista, D. et al. (2005). Genome streamlining in a cosmopol-
itan oceanic bacterium. Science, 309, 1242–1245.
Hummel, I., Bourdais, G., Gouesbet, G., Couee, I., Malmberg, R.L.
& El Amrani, A. (2004). Differential gene expression of
Arginine Decarboxylase ADC1 and ADC2 in Arabidopsis thaliana:
characterization of transcriptional regulation during seed
germination and seedling development. New Phytol., 163, 519–
531.
Kassen, R. (2002). The experimental evolution of specialists, gen-
eralists, and the maintenance of diversity. J. Evol. Biol., 15, 173–
190.
Koonin, E.V. & Wolf, Y.I. (2008). Genomics of bacteria and ar-
chaea: the emerging dynamic view of the prokaryotic world.
Nucleic Acids Res., 36, 6688–6719.
Krawczyk-Barsch, E., Grossmann, K., Arnold, T., Hofmann, S. &
Wobus, A. (2008). Influence of uranium (VI) on the metabolic
activity of stable multispecies biofilms studied by oxygen mic-
rosensors and fluorescence microscopy. Geochim. Cosmochim.
Acta, 72, 5251–5265.
Leininger, S., Urich, T., Schloter, M., Schwark, L., Qi, J., Nicol,
G.W. et al. (2006). Archaea predominate among ammonia-oxi-
dizing prokaryotes in soils. Nature, 442, 806–809.
Levasseur, A., Pontarotti, P., Poch, O. & Thompson, J.D. (2008).
Strategies for reliable exploitation of evolutionary concepts in
high throughput biology. Evol. Bioinform. Online, 4, 121–137.
Lopez-Garcıa, P. & Moreira, D. (2008). Tracking microbial bio-
diversity through molecular and genomic ecology. Res. Microbiol.,
159, 67–73.
Mahaffey, C., Michaels, A.F. & Capone, D.G. (2005). The
conundrum of marine N2 fixation. Am. J. Sci., 305, 546–595.
Marcy, Y., Ouverney, C., Bik, E.M., Losekann, T., Ivanova, N.,
Martin, H.G. et al. (2007). Dissecting biological ‘‘dark matter’’
with single-cell genetic analysis of rare and uncultivated TM7
microbes from the human mouth. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 104,
11889–11894.
Martin, F., Aerts, A., Ahren, D., Brun, A., Danchin, E.G.J.,
Duchaussoy, F. et al. (2008). The genome of Laccaria bicolor
provides insights into mycorrhizal symbiosis. Nature, 452, 88–92.
Medini, D., Serruto, D., Parkhill, J., Relman, D.A., Donati, C.,
Moxon, R. et al. (2008). Microbiology in the post-genomic era.
Nat. Rev. Microbiol., 6, 419–430.
Mereau, A., Anquetil, V., Cibois, M., Noiret, M., Primot, A., Vallee,
A. et al. (2009). Analysis of splicing patterns by pyrosequencing.
Nucleic Acids Res., 37, e126.
Mitra, S., Klar, B. & Huson, D.H. (2009). Visual and statistical
comparison of metagenomes. Bioinformatics, 25, 1849–1855.
Montoya, J.P., Holl, C.M., Zehr, J.P., Hansen, A., Villareal, T.A. &
Capone, D.G. (2004). High rates of N2 fixation by unicellular
diazotrophs in the oligotrophic Pacific Ocean. Nature, 430,
1027–1032.
Moran, N.A., McCutcheon, J.P. & Nakabachi, A. (2008). Genomics
and evolution of heritable bacterial symbionts. Annu. Rev. Genet.,
42, 165–190.
Mou, X., Sun, S., Edwards, R.A., Hodson, R.E. & Moran, M.A.
(2008). Bacterial carbon processing by generalist species in the
coastal ocean. Nature, 451, 708–711.
Pace, N.R. (1997). A molecular view of microbial diversity and the
biosphere. Science, 276, 734–740.
Palsson, B.O. (2006). Systems Biology, Properties of Reconstructed Networks,
1st edn. Cambridge University Press, Cambridge, New York.
Parro, V., Moreno-Paz, M. & Gonzalez-Toril, E. (2007). Analysis
of environmental transcriptomes by DNA microarrays. Environ.
Microbiol., 9, 453–464.
Prinzing, A., Reiffers, R., Braakhekke, W.G., Hennekens, S.M.,
Tackenberg, O., Ozinga, W.A. et al. (2008). Less lineages - more
trait variation: phylogenetically clustered plant communities are
functionally more diverse. Ecol. Lett., 11, 809–819.
de Queiroz, K (2007). Species concepts and species delimitation.
Syst. Biol., 56, 879–886.
Quince, C., Lanzen, A., Curtis, T.P., Davenport, R.J., Hall, N.,
Head, I.M. et al. (2009). Accurate determination of microbial
diversity from 454 pyrosequencing data.Nat. Methods, 6, 639–641.
Raes, J., Foerstner, K.U. & Bork, P. (2007). Get the most out of
your metagenome: computational analysis of environmental se-
quence data. Curr. Opinion Microbiol., 10, 490–498.
Ram, R.J., Verberkmoes, N.C., Thelen, M.P., Tyson, G.W., Baker,
B.J., Blake, R.C. et al. (2005). Community proteomics of a nat-
ural microbial biofilm. Science, 308, 1915–1920.
Rasmussen, D.A. & Noor, M.A.F. (2009). What can you do with
0.1x genome coverage?: A case study based on a genome survey
of the scuttle fly Megaselia scalaris (Phoridae). BMC Genomics, 10,
382.
Rodrigue, S., Malmstrom, R.R., Berlin, A.M., Birren, B.W., Henn,
M.R. & Chisholm, S.W. (2009). Whole genome amplification
and de novo assembly of single bacterial cells. PLoS ONE, 4,
e6864.
Rodriguez-Brito, B., Rohwer, F. & Edwards, R. (2006). An appli-
cation of statistics to comparative metagenomics. BMC Bioin-
formatics, 7, 162.
Roling, W.F., van Brekelen, B.M., Bruggeman, F.J. & Westerhoff,
H.G. (2007). Ecological control analysis: being(s) in control of
mass flux and metabolite concentrations in anaerobic degrada-
tion processes. Environ. Microbiol., 9, 500–511.
Rusch, D.B., Halpern, A.L., Sutton, G., Heidelberg, K.B., Wil-
liamson, S., Yooseph, S. et al. (2007). The Sorcerer II Global
Ocean Sampling expedition: northwest Atlantic through eastern
tropical Pacific. PLoS Biol., 5, 77.
Sabehi, G., Massana, R., Bielawski, J.P., Rosenberg, M., Delong,
E.F. & Beja, O. (2003). Novel Proteorhodopsin variants from
the Mediterranean and Red Seas. Environ. Microbiol., 5, 842–849.
Schmidt, P.S., Serrao, E.A., Pearson, G.A., Riginos, C., Rawson,
P.D., Hilbish, T.J. et al. (2008). Ecological genetics in the North
Atlantic: environmental gradients and adaptation at specific loci.
Ecology, 89, 91.
Shi, Y., Tyson, G.W. & DeLong, E.F. (2009). Metatranscriptomics
reveals unique microbial small RNAs in the ocean�s water col-
umn. Nature, 459, 266–269.
Shively, J.M., English, R.S., Baker, S.H. & Cannon, G.C. (2001).
Carbon cycling: the prokaryotic contribution. Curr. Opin. Micro-
biol., 4, 301–306.
Silva-Filho, M.C. (2003). One ticket for multiple destinations: dual
targeting of proteins to distinct subcellular locations. Curr. Opin.
Plant Biol., 6, 589–595.
Review and Synthesis Environmental genomics 789
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
Singh, A.H., Doerks, T., Letunic, I., Raes, J. & Bork, P. (2009).
Discovering functional novelty in metagenomes: examples from
light-mediated processes. J. Bacteriol., 191, 32–41.
Stranger, B.E., Forrest, M.S., Dunning, M., Ingle, C.E., Beazley, C.,
Thorne, N. et al. (2007). Relative impact of nucleotide and copy
number variation on gene expression phenotypes. Science, 315,
848–853.
Takeda, K., Komuro, Y., Hayakawa, T., Oguchi, H., Ishida, Y.,
Murakami, S. et al. (2009). Mitochondrial phosphoglycerate
mutase 5 uses alternate catalytic activity as a protein ser-
ine ⁄ threonine phosphatase to activate ASK1. Proc. Natl Acad. Sci.
USA, 106, 12301–12305.
Tatusov, R.L., Fedorova, N.D., Jackson, J.D., Jacobs, A.R.,
Kiryutin, B., Koonin, E.V. et al. (2003). The COG database: an
updated version includes eukaryotes. BMC Bioinformatics, 4, 41.
Teixeira, M.C., Duque, P. & Sa-Correia, I. (2007). Environmental
genomics: mechanistic insights into toxicity of and resistance to
the herbicide 2,4-D. Trends Biotechnol., 25, 363–370.
de la Torre, J.R., Christianson, L.M., Beja, O., Suzuki, M.T., Karl,
D.M., Heidelberg, J. et al. (2003). Proteorhodopsin genes are
distributed among divergent marine bacterial taxa. Proc. Natl
Acad. Sci. USA, 100, 12830–12835.
Torsvik, V., Øvreas, L. & Thingstad, T.F. (2002). Prokaryotic
diversity–magnitude, dynamics, and controlling factors. Science,
296, 1064–1066.
Treusch, A.H., Leininger, S., Kletzin, A., Schuster, S.C., Klenk, H. &
Schleper, C. (2005). Novel genes for nitrite reductase and Amo-
related proteins indicate a role of uncultivated mesophilic cre-
narchaeota in nitrogen cycling. Environ. Microbiol., 7, 1985–1995.
Tringe, S.G., von Mering, C., Kobayashi, A., Salamov, A.A., Chen,
K., Chang, H.W. et al. (2005). Comparative metagenomics of
microbial communities. Science, 308, 554–557.
Tyson, G.W., Chapman, J., Hugenholtz, P., Allen, E.E., Ram, R.J.,
Richardson, P.M. et al. (2004). Community structure and
metabolism through reconstruction of microbial genomes from
the environment. Nature, 428, 37–43.
Ungerer, M.C., Johnson, L.C. & Herman, M.A. (2008). Ecological
genomics: understanding gene and genome function in the
natural environment. Heredity, 100, 178–183.
Vandenkoornhuyse, P., Mahe, S., Ineson, P., Staddon, P., Ostle, N.,
Cliquet, J.B. et al. (2007). Active root-inhabiting microbes iden-
tified by rapid incorporation of plant-derived carbon into RNA.
Proc. Natl Acad. Sci. USA, 104, 16970–16975.
Venter, J.C., Remington, K., Heidelberg, J.F., Halpern, A.L.,
Rusch, D., Eisen, J.A. et al. (2004). Environmental genome
shotgun sequencing of the Sargasso Sea. Science, 304, 66–74.
Vera, J.C., Wheat, C.W., Fescemyer, H.W., Frilander, M.J., Craw-
ford, D.L., Hanski, I. et al. (2008). Rapid transcriptome charac-
terization for a nonmodel organism using 454 pyrosequencing.
Mol. Ecol., 17, 1636–1647.
Westerhoff, H.V. & Palsson, B.O. (2004). The evolution of
molecular biology into systems biology.Nature Biotech., 22, 1249–
1252.
Woyke, T., Teeling, H., Ivanova, N.N., Huntemann, M., Richter,
M., Gloeckner, F.O. et al. (2006). Symbiosis insights through
metagenomic analysis of a microbial consortium. Nature, 443,
950–955.
Woyke, T., Xie, G., Copeland, A., Gonzalez, J.M., Han, C., Kiss, H.
et al. (2009). Assembling the marine metagenome, one cell at a
time. PLoS ONE, 4, 5299.
Wullschleger, S.D., Leakey, A.D.B. & St Clair, S.B. (2007). Func-
tional genomics and ecology–a tale of two scales. New Phytol.,
176, 735–739.
Yang, L. & Bennetzen, J.L. (2009). Structure-based discovery and
description of plant and animal helitrons. Proc. Natl Acad. Sci.
USA, 106, 12832–12837.
Yooseph, S., Sutton, G., Rusch, D.B., Halpern, A.L., Williamson,
S.J., Remington, K. et al. (2007). The Sorcerer II Global Ocean
Sampling expedition: expanding the universe of protein families.
PLoS Biol., 5, e16.
Zehr, J.P., Waterbury, J.B., Turner, P.J., Montoya, J.P., O-
moregie, E., Steward, G.F. et al. (2001). Unicellular cyano-
bacteria fix N2 in the subtropical North Pacific Ocean. Nature,
412, 635–638.
Zehr, J.P., Bench, S.R., Carter, B.J., Hewson, I., Niazi, F., Shi, T.
et al. (2008). Globally distributed uncultivated oceanic N2-fixing
cyanobacteria lack oxygenic photosystem II. Science, 322, 1110–
1112.
Zhu, H. & Snyder, M. (2002). ‘‘Omic’’ approaches for unraveling
signaling networks. Curr. Opin. Cell Biol., 14, 173–179.
GLOSSARY
cDNA: complementary DNA, reverse-transcribed or copied
from an RNA template.
ChIP-on-chip approaches: a method combining Chrom-
atine Immuno Precipitation (ChIP) with microarray
(chip) technology to study interactions between proteins
and DNA. Mainly used to determine the locations of
binding sites, and to understand gene expression and
regulation.
Environmental genomics: analysis of large-scale sequence-
based information (such as DNA) obtained from a variety
of environmental samples, at cell, organism, population, and
community levels.
Environmental post-genomics: gene functional characterisation
approaches and genome-wide expression analyses in an
environmental context. Includes transcriptomics (analysis of
the complete set of transcripts), mainly by mass sequencing
of transcript-derived cDNA, through the development of
second-generation sequencing machines, and proteomics
(analysis of the complete set of proteins), mainly by coupled
liquid or gas-chromatography ⁄ tandem mass spectrometer
(LC and GC-MS-MS) for de novo identification. Along with
the metagenome, the metatranscriptome and the metaproteome
can be analysed, when considering a community of
organisms.
Fosmid: particular vector designed for the insertion of
large-size DNA fragments.
Gene synteny: The order of genes on a chromosome region
and its conservation.
Homologous and heterologous identification: similarity-based
analysis of unknown genes by comparison with same-
species (homologous) or cross-species (heterologous)
sequences.
790 P. Vandenkoornhuyse et al. Review and Synthesis
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
Insert: a DNA fragment of interest that has been cloned
within a vector, such as a plasmid (non-chromosomal
bacterial DNA) or a fosmid.
Large insert libraries: collections of cloned DNA inserts of
long size (>20 000 bp).
Metagenomics: analysis of a mixed set of genomes from a
community of organisms.
Microarray, DNA array, DNA chip: membrane or glass-
slide surface where known DNA sequences are fixed, each
at specific XY coordinates, to act as anchors for their
complementary sequences. Mainly used for simultaneous
expression surveys of a great number of genes.
Microfluidics: devices designed to manipulate and analyse
microliter volumes of fluids in order to assay the compo-
sition within small samples.
Open reading frame: nucleotide sequence located between a
start codon and a stop codon, thus potentially translatable
into a polypeptide.
Orthologs: homologous genes found in different genomes
and resulting from the duplication of an ancestral sequence
during a speciation event.
Overexpression: molecular biology method resulting in the
enhanced expression of a gene of interest in order to
characterise its product or its impact on phenotype
Paralogs: homologous sequences resulting from an internal
duplication event and belonging to the same species genome.
Promoter: sequence region upstream of a gene, to which
RNA polymerase binds for gene transcription, and involved
in gene expression regulation. Promoters can work in
concert with other regulatory elements.
Regulatory cis-acting element: short DNA sequence in a
promoter interacting with transcription factors to regulate
expression of the downstream gene.
Shotgun sequencing: random sequencing of a high number of
short anonymous fragments of genomes
SUPPORT ING IN FORMAT ION
Additional Supporting Information may be found in the
online version of this article:
Box S1 Strategies in environmental genomics.
Box S2 Selection of bioinformatics tools for analysing
environmental genomics data.
As a service to our authors and readers, this journal provides
supporting information supplied by the authors. Such
materials are peer-reviewed and may be re-organized for
online delivery, but are not copy-edited or typeset. Technical
support issues arising from supporting information (other
than missing files) should be addressed to the authors.
Editor, Nancy Johnson
Manuscript received 19 October 2009
First decision made 16 November 2009
Second decision made 31 January 2010
Manuscript accepted 24 February 2010
Review and Synthesis Environmental genomics 791
� 2010 Blackwell Publishing Ltd/CNRS
top related