b1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا...

12
یاشت مواد غذای بهد دوره6 ، شماره3 اپی ، پی33 ، یز پای5331 33 تأثير سوشی مختلف از ها سرویزیهساکارومایس ستوکسينهش ميزان آف در کا هایB 1 ، B 2 ، G 1 وG 2 روح کرمي ا اسبو1 ٭رابولفتحي ، منصوره مي2 1 . ستادیار م ا ؤی کل کشور،حقيقات گياه پزشکسه ت س تهران، ایران2 . ی کل کشورحقيقات گياه پزشکسه تستاد مؤس ا، تهران، ایران* ویسنده نبات مسئول مکات: [email protected] ( دریافت مقاله: 11 / 9 / 99 ی پذیرش نهای: 9 / 9 / 99 ) چکيده سرویزیهساکارومایس س( (Saccharomyces cerevisiae یکي ازهم م تر ی ن م يرگان کروا ي سم ها یرتاسر سر مواد غذایي در تخمير درگير در جن است که ها گزارش ها یرگانيسم از اثر این ميکروا مختلفي بر جذبتوکسين آف ها منتشر شرده اسرت. رهال ایرن مل هردأثير تر سوش های مختلف سرویزیهساکارومایس س برتوکسين کاهش آف هایB 1 ، B 2 ، G 1 وG 2 بود. منظور این برای سرو ی ه هرا یاردسرتاند ا0502 PTCC و0225 PTCC اکارومایس س س سرویزیهيه و در محيط تهYeast Mold Agar ید کشت گرد. س وسراویسريون ا پان15 7 ول سل سرویزیهساکارومایس س در م ي ل ي ل ي تری مخلوط هراوول ا روی محل برتوکسرين یک از آف هرایB 1 ، B 2 ، G 2 وG 1 برا غلظرتng/ml 25 درونسفات بافر نمک ف(pH= 7.2) ه شدند اثر داد. توکسين ميزان آف ب اق ي ماندهده از روشسرتفا اول برا در محلHPLC و ستون ها یتي ایمنوافيني موردرس بر ي گرفتار قر. توکسينن کاهش آفن داد که ميزا مقایسه نتایج نشا ها وی سروشذارگرن اثر زمرا هرافاوت مت است. در زمان025 يقه سوش دق0502 وانست تتوکسين آفB1 ، B2 ، G1 وG2 را ب هتير تر2 / 11 ، 5 / 10 ، 5 / 8 و1 / 8 صرد درالي، در اهد کاهش دين مدت سوش در هم که0225 ب ه ترتي0 / 5 ، 5 / 8 ، 0 / 2 و2 / 12 رصد، د قدرت کاهشتوکسين آف ها را داشت. اضره اال نتایج مل ب ي ان کننده این مس ئ له است که سوشساکارومایسی مختلف از س ها پاسخ ها ی مختلفي بهتوکسين آف ها م يهنرد د ورای جذب ن ب ياز به زمان کافيارند د. واژه های کليدی: توکسين آف، سرویزیهساکارومایس س، ستونتي ایمنوافيني، HPLC

Upload: others

Post on 27-Oct-2020

3 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

5331پاییز ، 33، پیاپی3، شماره 6دوره بهداشت مواد غذایی

33

، B1های در کاهش ميزان آفلاتوکسين ساکارومایسس سرویزیههای مختلف از تأثير سوش

B2 ،G1 وG2

2، منصوره ميرابولفتحي٭1اسبو الله کرمي روح

ایران، تهران سسه تحقيقات گياه پزشکی کل کشور،ؤاستادیار م. 1

ایران، تهران ،استاد مؤسسه تحقيقات گياه پزشکی کل کشور. 2 [email protected]: مسئول مکاتبات نویسنده*

(9/9/99: پذیرش نهایی 11/9/99: دریافت مقاله)

چکيدهدرگير در تخمير مواد غذایي در سرتاسرر یها سميکروارگانيم نیتر مهمیکي از Saccharomyces cerevisiae)) ساکارومایسس سرویزیه

ترأثير هرد ایرن ملال ره . اسرت شرده منتشر ها آفلاتوکسين جذب برمختلفي از اثر این ميکروارگانيسم یها گزارشهان است که ج

اسرتاندارد یهرا هیسرو برای این منظور . بود G2و B1 ،B2 ،G1های کاهش آفلاتوکسين بر ساکارومایسس سرویزیههای مختلف سوش

0502 PTCC 0225و PTCC تهيه و در محيط سرویزیه سساکارومایسYeast Mold Agar 157 پانسريون اراوی وسس. کشت گردید

برا غلظرت G1 و B1 ، B2 ،G2هرای یک از آفلاتوکسرين بر روی محلول ااوی مخلوط هر تريل يليمدر ساکارومایسس سرویزیهسلول

ng/ml 25 بافر نمک فسفات درون(pH= 7.2) در محلول برا اسرتفاده از روش مانده ياقبميزان آفلاتوکسين . اثر داده شدندHPLC و

هرا زمران اثرگرذاری سروش ها و مقایسه نتایج نشان داد که ميزان کاهش آفلاتوکسين. قرار گرفت يبررس موردایمنوافينيتي یها ستون

درصرد 1/8و 5/8، 5/10، 2/11ترتير هرا ب G2و B1 ،B2 ،G1آفلاتوکسين توانست 0502دقيقه سوش 025زمان در. استمتفاوت

. را داشت ها آفلاتوکسينقدرت کاهش درصد، 2/12و 0/2، 5/8، 0/5ترتي هب 0225که در همين مدت سوش کاهش دهد، در االي

و دهنرد يم ها آفلاتوکسينمختلفي به یها پاسخهای مختلف از ساکارومایسس که سوش استله ئاین مس کننده انيبنتایج ملال ه ااضر

.دارندکافي ياز به زمان برای جذب ن

HPLC، ایمنوافينيتي ستون، ساکارومایسس سرویزیه، آفلاتوکسين: کليدی های واژه

Page 2: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

و میرابوالفتحی اسبو کرمی G2و B1 ،B2 ،G1های آفلاتوکسین زانیدر کاهش م هیزیسرو سسیساکارومامختلف از یها تأثیر سوش

33

مقدمه

ترکيبات شيميایی سنتزي حاصلل ا ها مایکوتوکسين

مختلفللی هسللتند کلله للر ر ي يهللا قللار فعاليللت

ا آلوده نملودن شوند یممحصولات کشا ر ي ایجاد

ا ين رفتن ار ش غلذایی سبب وس کیمواد غذایی ا

اعلل خسللارات اقتصللادي شللده ا سللوي دی للر

مزمن حاد ا ليله يها يماري هداشتی مانند يها انی

جهل ننتيکلی، ،یلی ا سلراان یا اثرات ثانویه مانند

.شلوند یمل ائلی مهلار سيسلتي ایمنلی الخلقله ناقص

مل ملر عا عنوان ه 1991 ها در ا ایل دهه آفلاتوکسين

وقلمون صلدها جوجله اردد در ان للي 111111

ا خلانواده آسلژرنیلو يهلا قلار . ندشناسایی شلد

آسژرنیلو فلا ،آسژرنیلو پارا یتيکو جمله

,Aspergillus flavus) آسلللژرنیلو نومينلللو

Aspergillus parasiticus, Aspergillus nominus)

سليليو ی پنل نیلو آسلژر يها گونهتعدادي دی ر ا

خطللرات .دارنللد را هللا آفلاتوکسللينتوانللایی توليللد

1999, 1919 ,1999, 1992 يها سالدر ها آفلاتوکسين

(IARC) توسط آنان تحقيق ر ر ي سراان 2119

هلا را این آنان آفلاتوکسين قرارگرفته ی ررس مورد

(1 گلر ه ي اهلا سلراان ) انسلانی ي ا سراانجز مواد

. (Siemiatycki et al., 2004) نمود ي ند ابقه

هلاي کبلدي يتومسلم معلت ایجاد ها ه آفلاتوکسين

شدید در حيوانات آ مایش اهی مختلف قوع ابيعی

عنللوان گونللاگون کشللا ر ي لله آن در محصللولات

انلد شلده شلناخته یخلو له سلت ی طيمحل کننده آلوده

(Karami-Osboo et al., 2012 .) مان ابق گزارش سلا

ملدت لنداثرات يولونیکی ( WHO) هداشت جهانی

ها عبارتند ا سميت حاد، سلراان، نلا ایی، آفلاتوکسين

,IPCS) سيستي ایمنی جه ننتيکلی کننده سرکوب

تحقيقلللات سلللياري در ملللورد اسلللتفاده ا .(2001

سللا ي یکللی شلليميایی للراي خللار هللاي فيز ر ش

هلاي اخيلر ر سلال د ،شلده اسلت ها انجلا آفلاتوکسين

دایللی هللاي يولللونیکی در توکسللين اسللتفاده ا ر ش

عنلوان یافتله اسلت له شدت افزای هها آفلاتوکسين

,.Wu et al) یک ر ش نوین در دست ررسی هسلتند

2009; Ahlberg, 2015 .) اه آفلاتوکسلين کالبتهB1

Khanafari et) شده است ها نيز گزارش سيله اکتري ه

al., 2007). شلده لر ر ي لاکتري اکثر نتایج گلزارش

لاکتو اسليل هلاي مر لوب له گونله لاکتيک ماننلد اسيد

لللاکتریو لاکتو اسللليل پر پيلللونی , يفيلللد اکتریو (Lactobacillus, Bifidobacterium, Lactococcus

Propionibacterium) املللااسلللت شلللده متمرکلللز ،

و ر د کوکلل هجمللل دی للري ا ثر ؤملل يهللا للاکتري

( Rhodococcus erythropolis) ر پلي اریتللللللل

Mycobacterium) مایکو لللاکتریو فلوراتينيلللوران

fluoranthenivorans) للاکتریودی هرینللونوکاردیللا ک

(Nocardia corynebacterioides ) فلا لللاکتریو

نيللز( (Flavobacterium aurantiacum) آ رانتيللاکو

Guan et) انلد دهکار رده شل ه B1تجزیه آفلاتوکسين

al., 2008.)

هاي سيار مهمی هسلتند کله ها ميکر ارگانيسي مخمر

توليلد مخملر .انلد استفاده قرار گرفتله توسط شر مورد

,Ashton Acton) ها تن در سال اسلت يشتر ا ميليون

ملللواد تخميلللر شلللاخه يشلللتر آن در سللله (2013

(Hammond, 1993)، تصلللفيه (Watson, 1993)

شللود در مصللرم مللی (Rose, 1993) نللانپخللت

چندین . اند کرده هاي اخير کار ردهاي جدیدي پيدا سال

غلذایی عنوان مخملر ه ساکار مایس قرن است که ا

Page 3: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

5331ییز پا، 33، پیاپی3، شماره 6دوره بهداشت مواد غذایی

31

شلود در کشورهاي آسيایی آفریقلایی اسلتفاده ملی

ساکار مایسل ه ژ یل ههلاي مخملر ل گونله ا تعدادي ذایی را له ملواد غل تخميلر در نقل اصللی سر یزیه

,Jespersen) کننلد لاکتيک ایفا ملی اسيد همراه اکتري

شلامل سلر یزیه ساکار مایس دیواره سلولی (.2003

β-1,6 لا نجيلره جلانبی β-1,3 glucan اي ا شلبکه

glucan هاي گليکلو یلات شلده پر تئيناست ه منو

فعلال سليعی را لراي اسلت سلط متصل شلده

(.Kollar et al., 1997) يلار دارد جلذب ملواد در اخت

هلاي فعلال ها تعداد یادي سلایت ها گلوکان پر تئين

هيدر ننی، یونی یا هيلدر فو يک هاي راي ایجاد پيوند

اتصلال لين . (Huwig et al., 2001) کننلد ملی ایجلاد

هاي مختلف مانند یرالنون، اکراتوکسلين مایکوتوکسين

مشلخص قلبلاا مخمر ا سط دیواره B1 آفلاتوکسين

است که یرالنون اکراتوکسين معلو شده ود شده

اما در ملورد آفلاتوکسلين شوند ها متصل می ه گلوکان

B1 نشللده اسللت انجللا منللد سللامانهنللو مطالعللات

(Piotrowska and Masek, 2015; Yiannikouris et

al., 2004) .ساکار مایسل وراد ايلور له هملراه خ سلميت آفلاتوکسلين کاه در مناسبیثير أت سر یزیه

B1 استنشان داده (Stanley et al., 1993) .

که مخمر خشک دیواره سلولی مخمر ه یک مانی

کلاه انلد، همخللوب شلد B1نسبت لا آفلاتوکسلين

ه اسلللتشلللد مشلللاهدهچشلللم يري در سلللميت آن

(Baptista et al., 2004.) هلللاي مختللللف سلللویه

B1 راي کلاه آفلاتوکسلين هسر یزی ساکار مایس

ا رخلی ررسی قرار گرفت مشاهده شلد کله مورد

را در محللول اسلتاندارد B1آفلاتوکسلين % 01ها تا آن

کاه دادند کاه آفلاتوکسين ه خاار جلذب آن

نشلده آفلاتوکسلين تجزیله در نتيجه هتوسط مخمر ود

مشلخص شلده چنلين هلي . (Shetty et al., 2007) ود

آمده ا دیلواره سللولی دست ههاي گلوکومانت که اس

هلا در توانایی جلذب مایکوتوکسلين ،ها ا مخمر رخی

. (Smith et al., 2000)دارنللد را خللوراد دا آلللوده

ساکار مایسل هلدم ررسلی اثلر تحقيق حاضلر لا

B1، B2، G1 G2ي هلا آفلاتوکسيندر کاه سر یزیه

در مراحلل ثرمؤن سویه تا در صورت یافت گردید انجا

هلا آفلاتوکسلين عنوان عامل يولونیکی کاه عدي ه

. ررسی قرار گيرد در غذا خوراد مورد

ها مواد و روش

اسلتفاده ملورد هلاي هلا، ملواد معلرم تما محلول

ا ودنللد داراي کيفيللت مناسللب للراي آ مایشلل اه

یلن اسلتفاده در ا آب ملورد .تهيه شدند Merckشرکت

الملللی اسلتاندارد لين 9هاي درجه استاندارد ا یژگی

مطا قللت داشللته للراي آ مایشللات شلليميایی 9999

;ISO/TC 47-3696) لود هلا مناسلب ساخت محللول

PTCC 9299 9192هلاي اسللتاندارد سللویه . (2011

PTCC ا سللا مان سللر یزیهساکار مایسلل مخمللر

پلودر . تهيله گردیلد ایران هاي علمی صنعتی ه پژ

خالص ا B1، B2 ،G1 G2آفلاتوکسين هاي استاندارد

غلظلت در ها هر یک ا استاندارد تهيه Sigmaشرکت

HPLC gradeدر متلانول ليتلر گلر در ميللی ميکر 11

AOACمتر لا ر ش فتو ا دست اه اسژکتر هحل شد

تعيلين غلظلت نلانومتر 999در اول مو اور کمی ه

محللولی ا سلژ ، (Nesheim et al., 1999)گردیدند

1111غلظتلی را لر ها ا آفلاتوکسين مخلوب ستانداردا

B1، B2 ،G1 هلاي وکسين راي آفلات ليتر نانوگر در ميلی

Page 4: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

و میرابوالفتحی اسبو کرمی G2و B1 ،B2 ،G1های آفلاتوکسین زانیدر کاهش م هیزیسرو سسیساکارومامختلف از یها تأثیر سوش

36

G2 شد، ا این ساخته ثانویه ذخيره ستانداردا عنوان ه

اسلتفاده آ ملون ي موردها ساخت محلول رايمحلول

.گردید

سرویزیهساکارومایسس تهيه مایه -

PTCC سر یزیهاکار مایس س هاي استاندارد سویه

Yeast Moldمحليط مرحله ا ل در در ((5269 , 5052

Agar (Merck) لراي تکثيلر انجلا ند، کشت گردید

. هللاي عللدي ا محلليط فللوه اسللتفاده شللد ررسللی

سللول در 11111محتوي يليتر ميلی 111هاي فلاسک

ن هلداري شلدند تلا تعلداد سلسليو درجه 91 يدما

نلانومتر له سلط 911 اول مو سلول تکثير شده در

ت سوسژانسيون سلول مخمر ا غلظ رسانيده 1 جذب

سللولی لا تلراکي . دونشل تهيله ليتر سلول در ميلی 119

فسفات نمک افر ليتر ميلی 11 در حجي 1 نوري جذب

، ندشلد داشته ثا ت ن هدقيقه 11مدت ه( pH=6) رقيق

للر دقيقلله د ر 0911 در دقيقلله 11مللدت سللژ لله

شستشو د ار ا افر فسفات سژ شد سانتریفيون

ملدت له ر دقيقه د ر 0911 پ ا هر ار شستشو در

.Shetty et al., 2007)) ندتریفيون شدندقيقه سا 11

شرایط کروماتوگرافي -

Watersشللرکت Breezeمللدل HPLCا دسللت اه

®Waters Nova-pak)ستون فا معکو . استفاده شد

C-18, 3.9×250 mm, 4 μm particle size) جهلت

اسلتفاده ملورد سلسيو درجه 01 جداسا ي در دماي

اسلللتونيتریل /متلللانول /مخللللوب آب. قلللرار گرفلللت

لا سلرعت جریلان یلک ( حجمی /حجمی 91/01/11)

عنوان فا متحرد در شيوه شلوی ليتر ر دقيقه ه ميلی

سا ي عد ا سلتون لا مشتق .توانی کار گرفته شد تک

شيميایی کبلري سلل انجلا شلد، ر ه ر ش الکتر

آشکارسلا ي لا ميکر ليتلر 111حجي تزریق را ر ا

هاي تا ا تلاب آشکارگر فلورسان در اول مو

(exition, emission) 991 091 نللانومتر انجللا شللد

(Karami-Osboo et al., 2012.)

ها آفلاتوکسينکاهش ميزان گيری اندازه -

هلا در محللول آفلاتوکسين کاه ميزان گيري اندا ه

سللللول 119راکي در تللل لللافر نملللک فسلللفات

تهيه شلده که قبلاا ليتر در ميلی سر یزیهکار مایس اس

ود جذ ی معادل یک را در دست اه اسژکتر متر نشان

له ایلن ،(El-Nezami et al., 1998) انجلا شلد داد،

سللول مخملر لا ليتر ا سوسژانسليون منظور یک ميلی

ng/ml 21 در سلط ،ليتلر سللول در ميللی 119غلظت

سلسليو درجه 29دماي در شد وکسين آلوده آفلات

ميلزان . شلدند مخللوب ،افقلی شليکر ر ر ي دسلت اه

مایس ساکارتما ا سلول ها در کاه آفلاتوکسين

در دقيقلله 921تللا 9در فاصللله مللانی سللر یزیه

مورد ررسی قلرار دقيقه، 921 111، 91، 9هاي مان

1001 991، 011هلاي رداري در ملان ؛ نمونهگرفت

نيز جهت ررسی ر ند اشباع شدن ميزان کلاه دقيقه

در پ ا اتما مان مخلوب کردن، ها نمونه .انجا شد

ون يه سللانتریفقللدقي 9ملدت لله للر دقيقله د ر 0911

در یلک یلال تيلره محلول ر یی رداشته شد ،شدند

یلک نشين شلده لا رگانيز ته ميکر ا .رنگ ریخته شد

11ملدت له افر شستشو داده شلد مجلدداا ترلي ميلی

سانتریفون محلول ر یلی د ر ر دقيقه 0911 در دقيقه

مرحلله ا ل ا آ ري شده محلول جمع ه رداشته شد

عبللور داده شللد mµ 09/1 ا فيلتللر گردیللد اضللافه

ا سلتون 9192مطا ق ا استاندارد مللی ایلران شلماره

در را للر منوکلونللال للادي ایمينللوافينيتی حللا ي آنتللی

Page 5: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

5331ییز پا، 33، پیاپی3، شماره 6دوره بهداشت مواد غذایی

34

؛ (ISIRI 6872/2011) عبلور داده شلد هلا آفلاتوکسلين

دسللت اه لله نهللاییا محلللول ميکر ليتللر 111سللژ

HPLC در . (سه مرتبه تکلرار شلد ها آ مون) شدتزریق

، افر نملک فسلفات اول آ مای ا یک محلول کنترل

ng/ml 21حا ي هر چهلار آفلاتوکسلين در غلظلت

نيلز هلاي جلاذب ساکار مایسل لود سللول عاري ا

جلز کلاه توسلط تلا هلر علاملی له گردیلد استفاده

.هاي ساکار مایس حذم شوند سلول

ها یافته

لر کلاه سلر یزیه ساکار مایس د سوش ثيرأت

201 ،91 ،9هلاي در مان هاي آفلاتوکسين استاندارد

( 1) هلاي نمودار دردقيقه 1001ا آن تا پ 921

خلو ی نشلان هاین نمودارها . نشان داده شده است (2)

له .هلاي متفلا تی دارد ها ر نلد ثير سوشأدهد که ت می

دقيقله 921پل ا 9199 عنوان مثلال سلوش شلماره

در داشللت، B2 آفلاتوکسللين ير يشللترین اثللر را للر

للر ر يکلله سللوش دی للر يشللترین اثللر را حللالی

هلاي ال لوي اثلر در ملان نشان داد G2 آفلاتوکسين

ه ا نمودارها مشخص کاور همان. ودمختلف متفا ت

است ميزان کاه راي هر چهار آفلاتوکسلين توسلط

دقيقله 921مخمر فرآیند نسبتاا سریع است که در ملان

پل ا آن تلا ملان رسلد ه حداکثر مقدار خود ملی

ت چشم يري در ميزان کلاه دیلده دقيقه تفا 1001

دهلد کله خلو ی نشلان ملی هایلن فراینلد ل .شلود نمی

هللاي مختلللف توانللایی متفللا تی در جللذب سللوش

در تحقيللق حاضللر یکللی ا .انللد آفلاتوکسللين داشللته

هلا نسلبت له سلوش دی لر ميلزان يشلتري ا سوش

مقایسله نتلایج را جلذب نملود Bگر ه آفلاتوکسين

ملان اثلر هلا اه آفلاتوکسلين نشان داد که ميزان ک

لی هر د سلوش در ملان ؛ اشد ها متفا ت می سوش

تفلا ت دادندمشا هی حداکثر جذب را ا خود نشان

لحلا ا ایلن داري ين د نلوع مختللف سلوش معنی

که حداکثر ميزان جذب لراي ییجا ا آن .نداشت جود

هر چهار آفلاتوکسين در صنعت ملواد غلذایی اهميلت

ایسلت الایی دارد نا راین راي نيل ه ایلن مهلي ملی

هاي مختلف این مخملر در صلنعت مخلوای ا سوش

کلله قللادر لله جللذب حللداکثر ميللزان شللودتهيلله

ر ش عنلوان یلک له ها ا محليط اشلد آفلاتوکسين

.کارگرفته شوند ه ها يولونیکی در کاه آفلاتوکسين

21حللا ي محلللول ( 2) ( 1)هللاي کر مللاتوگرا

هللا سللوش ليتللر آفلاتوکسللين نللانوگر در ميلللی

دقيقله را 91 921هاي در مان 9192ساکار مایس

.دهد نشان می

Page 6: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

و میرابوالفتحی اسبو کرمی G2و B1 ،B2 ،G1های آفلاتوکسین زانیدر کاهش م هیزیسرو سسیمختلف از ساکاروما یها تأثیر سوش

34

یک ا ليتر ا هر نانوگر در ميلی 21در محلول حا ي ( درصد) ها ميزان کاه آفلاتوکسين -(1)نمودار

9192 هسر یزی ساکار مایس توسط سوش ها آفلاتوکسين

ا هریک ا ليتر نانوگر در ميلی 21ر محلول حا ي د( درصد) ها ميزان کاه آفلاتوکسين -(2)نمودار

9299 سر یزیهساکار مایس ها توسط سوش آفلاتوکسين

Page 7: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

5331پاییز ، 33، پیاپی3، شماره 6دوره هداشت مواد غذایی ب

33

ليتلر نانوگر در ميلی 21کر ماتوگرا آفلاتوکسين ها در محلول حا ي -(1) کر ماتوگرا

دقيقه 921در مان 9192 سر یزیهساکار مایس ها سوش آفلاتوکسين ا هریک ا

ليتر ا نانوگر در ميلی 21در محلول حا ي ها کر ماتوگرا آفلاتوکسين -( 2)کر ماتوگرا

دقيقه 91در مان 9192 ساکار مایس سر یزیهها سوش آفلاتوکسينهریک ا

Page 8: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

و میرابوالفتحی اسبو کرمی G2و B1 ،B2 ،G1های آفلاتوکسین زانیدر کاهش م هیزیسرو سسیساکارومامختلف از یها تأثیر سوش

15

گيری و نتيجه بحث

یکی مایکوتوکسين ا استفاده ا يولون دایی سي

یک استراتژي شناخته شده راي ميکر ارگانيسي

.است دا مدیریت مایکوتوکسين در غذا خوراد

رنیي غذایی ممکن درگنجاندن چنين ميکر ارگانيسي

ها در حيوانات است اثرات سمی ا مایکوتوکسين

-AFB1دهد یرا یک مجتمع مزرعه را کاه می

دستر ودن سي ممکن است درميکر ارگاني

جذب آن در مایکوتوکسين را کاه داده در نتيجه

(.Gratz et al., 2007) جاندار خواهد شد دست اه گوارش

ها در صنعت غذا استفاده قرن ساکار مایس سر یزیه

هاي موجود ها گلوکان جایی که پر تئين شود ا آن

یادي راي هاي فعال سایت ساکار مایس سر یزیهدر

ایجاد انواع پيوند مانند پيوند هيدر ننی، یونی یا

لذا ،(Huwig et al., 2001) کنند هيدر فو يک ایجاد می

هاي هيدر کسيل خو ی راي اتصال ه گر ه شرایط

ا اي در مطالعه .موجود در ساختار آفلاتوکسين دارند

هاي ادا در نمونه ساکار مایس سر یزیهاستفاده ا

مينی نشان دادند که ميزان کاه این سي عد ا

ود درصد 0/90 ر 9استفاده ا این مخمر در ای

(Prado et al., 2011) .دی ري اسلا مطالعلات لر

راي ساکار مایس سر یزیهمختلف هاي سویه یتوانای

گرفتورد ررسی قرار م B1کاه آفلاتوکسين

آفلاتوکسين % 01ها تا عضی ا آنکه نمودند گزارش

B1 این کاه داد میرا در محلول استاندارد کاه

در .دليل جذب آن توسط مخمر اعلا نمودند را ه

فلاتوکسين یک پدیده فيزیکی آپدیلده اتصال نتيجه،

که در سط مخملر یعنی در دیواره سلولی آن اشد می

همانند این (. Shetty et al., 2007) افتد اتفاه می

ها نسبت حاضر نيز یکی ا سوش پژ ه در تحقيق،

ميزان يشتري ا سبب کاه ه سوش دی ر

مقایسه نتایج نشان داد در محلول گردید آفلاتوکسين

ها مان اثر سوش ها آفلاتوکسين که ميزان کاه

ين د نوع مختلف داري اما تفا ت معنی است،متفا ت

یيد أنيز ت ه دی رمطالع هاي فتهیا. نداشتسوش جود

مناسب ا مخمر که توانایی سوشگيري کار ه که کند می

رشد فعاليت ضدقارچی يشتري را داشته اشد در

ت تر اس مطلوب ،تر اشد مقا ل اثرات محيطی مقا

(Azimi et al., 2015 .)هاي گر ه آفلاتوکسينB ميزان ه

جذب شدند یهسر یز ساکار مایس يشتري توسط

يشتر ا سوش دی ر قدرت جذب این 9192سوش

هاي ا تدایی جذب در مان 9299سوش . گر ه را داشت

داشت عد ا گذشت مان توانایی جذب کمی سيار

.را پيدا نمود

گرفت،در تحقيقی که ر ر ي خوراد دا انجا

یز پو ار ساکار مایس سر یزیه نشان دادند کهتوانایی کاه ( Rhizopus oligosporus) سژر الي وا

تنهایی را دارند ساکار مایس ه B1آفلاتوکسين

ا .داد درصد آفلاتوکسين را کاه 91حد د

ميزان يشتري ا ، مان دی ر ا گذشت سوي

که ا تحقيق حاضر آفلاتوکسين کاه پيدا نمود

در .(Kusumaningtyas et al., 2006) خوانی دارد هي

، B1آفلاتوکسين توانست 9192دقيقه سوش 921 مان

B2 ،G1 G2 1/1 % 1/1، %9/19، %2/11ترتيب هرا %

9299که در همين مدت سوش کاه دهد، در حالی

قدرت جذب % 2/19 % 9/2، %1/1، %9/9ترتيب ه

که هيچ توجه ه این ا .را داشت ها آفلاتوکسينکاه

شده در این استفاده هاي سوش ي ر ر تيمار فيزیکی

Page 9: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

5331پاییز ، 33، پیاپی3، شماره 6دوره بهداشت مواد غذایی

15

رسد راي اینکه مخمر نظر می ه ،تحقيق صورت ن رفت

توانایی جذب مناسب یهزساکار مایس سر ی

ثيرات حرارت أ ایست ت را پيدا کند می ها آفلاتوکسين

تخریب ساکار مایس تهيه مانن توسط اسيد را

تيمارهاي اسيدي حرارتی توانایی . ررسی نمود

. دهند درصد افزای می 99 92ترتيب را هکاه

توان نتيجه گرفت که شرایط محيطی نيز در این می نا ر

تواند یکی دی ر ا میر ند ميزان اتصال مؤثر است

هاي تفا ت در ميزان کاه سي در مطالعات علت

غلظت ميزان . (Rahie et al., 2010) مختلف اشد

عات مختلف ا توجه ه در مطال توکسينلاکاه آف

عوامل مختلف فيزیکی، شيميایی، محيط منطقه مورد

شده کارگرفته ه ررسی نوع گونه سویه ميکر ی

,.Azimi et al) تواند متغير اشد جهت کاه سي می

استکننده این مسئله نتایج مطالعه حاضر يان (2015

سر یزیه ساکار مایس هاي مختلف ا که سوش

دهند می ها آفلاتوکسينهاي مختلفی ه جذب پاسخ

ه همين دليل تنها ا .دارند راي جذب نيا ه مان

توان استفاده نمود می سر یزیهساکار مایس سوشی ا

یژه ه )ها که در حداقل مان ممکن تواند آفلاتوکسين

که حداکثر یجای ا آن .را جذب کند B1)آفلاتوکسين

هر چهار آفلاتوکسين در صنعت مواد ميزان جذب راي

رسيدن ه این نا راین راي ،غذایی اهميت الایی دارد

هاي مختلف این ایست مخلوای ا سوش می هدم،

ر ش عنوان یک مخمر در صنعت تهيه شده ه

.کارگرفت هها يولونیکی در کاه آفلاتوکسين

منابع

Anonymous, AOAC. (1990). Official Methods of Analysis of AOAC International, 17th ed. AOAC

International, Gaithersburg, MD, USA. Official method 49.2.02.

Ahlberg, S.H., Joutsjoki, V. and Korhonen, H.J. (2015). Potential of lactic acid bacteria in aflatoxin

risk mitigation. International Journal of Food Microbiology. 207: 87-102.

Ashton Acton, Q. (2013). Saccharomycetales-Advances in Research and Treatment: Edition: Scholarly

Brief. p. 159.

Azimi, M, Gholampour A,I,, Rouhi, S. and Zaboli, F. (2015). Biological reduction of aflatoxin B1 in

wheat flour using yeast Saccharomyces cerevisiae. iranian South Medical Journal, 18(4): 701-

710.

Bata, A. and Lasztity, R. (1999). Detoxification of mycotoxin contaminated food and feed by

microorganisms. Trends in Food Science and Technology, 10: 223–228.

Baptista, A.S., Horii, J., Calori-Domingues, M.A., da Gloria, E.M., Salgado, J.M. and Vizioli, M.R.

(2004). The capacity of manno-oligosaccharides, thermolysed yeast and active yeast to attenuate

aflatoxicosis. World Journal of Microbiology and Biotechnology 20: 474–748.

El-Nezami, H., Kankaanpaa, P., Salminen, S. and Ahokas, J. (1998). Ability of dairy strains of lactic

acid bacteria to bind a common food carcinogen, aflatoxin B1. Food and Chemical Toxicology

36: 321–326.

Gratz, S., Wu, Q.K., El-Nezami, H., Juvonen, R.O., Mykkänen, H. and Turner, P.C. (2007).

Lactobacillus rhamnosus strain GG reduces aflatoxin B1 transport, metabolism and toxicity in

caco-2 cells. Applied and Environmental Microbiology, 73: 3958–3964.

Page 10: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

و میرابوالفتحی اسبو کرمی G2و B1 ،B2 ،G1های آفلاتوکسین زانیدر کاهش م هیزیسرو سسیساکارومامختلف از یها تأثیر سوش

13

Guan, S., Ji, C., Zhou, T., Li, J., Ma, Q and Niu, T. (2008). Aflatoxin B1 degradation by

Stenotrophomonas maltophilia and other microbes selected using coumarin medium.

International Journal of Molecular Sciences, 9: 1489-1503

Hammond, J.R.M. (1993) Brewer’s yeasts. In: The Yeasts, Vol. 5, Rose, A.H. and Harrison, J.S. (Eds)

Academic Presss, London, 7-67.

Huwig, A., Freimund, S., Kappeli, O., Dutler, H. (2001). Mycotoxin detoxication of animal feed by

different adsorbents. Toxicology Letters 122, 179–188.

IPCS. (2001) International Program on Chemical Safety. World Health Organization Geneva, p. 345.

Institute of Standards and Industrial Research of Iran. (2011). Food and Feed Stuffs: Determination of

aflatoxins B & G by HPLC method using immunoaffinity column clean up-Test method. ISIRI

No. 6872 [In Persian].

International Organization for Standardization (ISO), (2011). Water for analytical laboratory use -

Specification and test methods. ISO No. 3696.

Jespersen, L. (2003). Occurrence and taxonomic characteristics of strains of Saccharomyces cerevisiae

predominant in African indigenous fermented foods and beverages. FEMS Yeast Research 3,

191–200.

Karami-Osboo, R., Mirabolfathy, M., Kamran, R., Shetab-Boushehri, M. and Sarkari, S. (2012).

Aflatoxin B1 in maize harvested over 3 years in Iran. Food Control, 23(1): 271–274.

Khanafari, A., Soudi, H., Miraboulfathi, M. and Karami-Osboo, R. (2007). An in vitro investigation of

aflatoxin B1 biological control by Lactobacillus plantarum. Pakistan Journal of Biological

Sciences. 10: 1596-1603.

Kollar, R., Reinhold, B.B., Petrakova, E., Yeh, H.J., Ashwell, G., Drgonova, J. et al. (1997).

Architecture of the yeast cell wall. Beta 1, 6-glucan interconnects mannoprotein, beta 1, 3-

glucan, and chitin. Journal of Biological Chemistry. 272: 17762–17775.

Kusumaningtyas, E., R. Widiastuti and R. Maryam. (2006). Reduction of aflatoxin B1 in chicken feed

by using Saccharomyces cerevisiae, Rhizopus oligosporus and their combination.

Mycopathologia, 162: 307–311.

Nesheim, S., Trucksess, M.W. and Page, S.W. (1999). Molar absorptivities of aflatoxins B1, B2, G1,

and G2 in acetonitrile, methanol, and toluene-acetonitrile (9 + 1) (modification of AOAC

Official Method 971.22): collaborative study. Journal of AOAC International, 82(2): 251-258.

Piotrowska, M. and Masek, A. (2015). Saccharomyces cerevisiae cell wall components as tools for

Ochratoxin A decontamination. Toxins, 7(4): 1151–1162.

Prado, G., Madeira, J.E. and Morais, V.A. (2011 (. Reduction of aflatoxin B1 in stored peanuts

(Arachis hypogaea L.) using Saccharomyces cerevisiae. Journal of Food Protection; 74: 1003-

1006.

Rahie, S., Razvi, S.H. and Jomeh, E.Z. (2010). The ability of Saccharomyces cerevisiae strain in

aflatoxin reduction in pistachio nuts. Journal of Food Science and Technology, 7: 81-88. [In

Persian].

Rose, A.H. and G. Vijayahkeshima. (1993). Baker’s yeast. In: The Yeasts, Vol. 5. A.H. Rose and J.S.

Harrison (Eds), Academic Press, London, 357-397.

Shetty, P., Hald, B. and Jespersen, L. (2007). Surface binding of aflatoxin B1 by Saccharomyces

cerevisiae strains with potential decontaminating abilities in indigenous fermented foods.

International journal of Food Microbiology, 113, 41–46.

Siemiatycki, J., Richardson, L., Straif, K., Latreille, B., Lakhani, R., Campbell, S. et al. Listing

occupational carcinogens. Environmental Health Perspectives, 112: 1447-1459.

Page 11: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

5331پاییز ، 33، پیاپی3، شماره 6دوره بهداشت مواد غذایی

13

Smith, T.K., Modirsanei, M. and MacDonald, E.J. (2000). The use of binding agents and amino acids

supplements for dietary treatment of Fusarium mycotoxicoses. In: Biotechnology in the Feed

Industry. Proceedings of the 16th Annual Symposium. Lyons, T.P. and Jacques, K.A. (Eds),

Nottingham University Press, UK. pp 383-390.

Watson, D.C. (1993). Yeasts in distilled alcoholic-beverage production. In: The Yeasts, Vol. 5. Rose,

A.H. and Harrison, J.S. (Eds), Academic Press, London, 215-244.

Wu, Q., Jezkova, A., Yuan, Z., Pavlikova, L., Dohnal, V. and Kuca. K. (2009). Biological degradation

of aflatoxins. Drug Metabolism Reviews, 41(1):1-7

Yiannikouris, A., Francois, J., Poughon, L., Dussap, C.G., Bertin, G., Jeminet, G. and et al. (2004).

Adsorption of zearalenone by beta-D-glucans in the Saccharomyces cerevisiae cell wall. Journal

of Food Protection, 67: 1195–1200.

Page 12: B1 یاهنيسکوتلافآ نازيم شهاک رد هیزیورس سسیاموراکاس زا ...jfh.iaut.ac.ir/article_526824_f169de68b3cad6f446fe54841926b985.… · للعا

Journal of Food Hygiene, Vol. 6, No 23, Autumn 2016

44

Effect of different strains of Saccharomyces cerevisiae on reduction of

aflatoxin B1, B2, G1 and G2

Karami Osboo, R.

1*, Mirabolfathy, M.

2

1. Associate Professor of Iranian Research Institute of Plant Protection, Tehran, Iran

2. Professor of Iranian Research Institute of Plant Protection, Tehran, Iran *Corresponding author’s Email: [email protected]

(Received: 2014/12/9 Accepted: 2016/11/23)

Abstract Saccharomyces cerevisiae is one of the major microorganisms widely used in food fermentation, and the

ability of its strains to reduce the level of aflatoxins has been reported. The aim of this study was to test

the capability of S. cerevisiae strains on reduction of aflatoxin B1, B2, G1 and G2 levels. For this reason,

standard strains of PTCC 5052 and PTCC 5269 were cultivated on Yeast Mold Agar. Afterwards, cell

suspension containing 107 cell/ml was spiked into PBS (pH= 7.2) containing 20 ng/ml of each B1, B2, G2

and G1 aflatoxins. Aflatoxin levels were determined using HPLC and immunoaffinity columns. The

results show that different strains of S. cerevisiae reduced the aflatoxin levels in a different rate and

various durations. At the time 320 min the PTCC 5052 strain reduced the aflatoxin B1, B2, G1 and G2

levels to 11.2 , 13.9, 8.0 and 8.1%, respectively; meanwhile, these results for the PTCC 5269 strain 9.5,

8.0, 2.3 and 16.2%, respectively. Results suggested that different strains of S. cerevisiae had a different

reduction rate on aflatoxins. Moreover, the strains need to have sufficient time to absorb the maximum

amounts of aflatoxin. Key words: Aflatoxins, Saccharomyces cerevisiae, Immunoaffinity columns, HPLC