Innovation with Impact

BD FACSCantoTM II フローサイトメーター

Breakthrough technology that setsthe new standard for flow cytometry

BD FACSCanto II フローサイトメーター2

ライフサイエンス研究の発展のために

フローサイトメトリーは免疫学および血液学の分野で細胞を研究する手法として育

てられてきました。細胞を研究することは、様々な生命現象や疾患を理解するため

の基礎になります。ヒトおよびマウスゲノム解析完了後、生命現象や疾患を遺伝子

や蛋白質の発現から解明するアプローチがとられてきました。これらを包括的に捕

らえるアプローチが盛んになるにつれ、遺伝子や蛋白質が細胞においてどのような

表現型として発現しどのような細胞機能を担うのかが研究されています。このよう

なライフサイエンス研究の発展の下で、フローサイトメトリーは免疫学、血液学の

みならず、がんや感染症の基礎研究および治療法開発、幹細胞研究および再生医療、

バイオテクノロジーの創薬・診断法開発への応用など多くの分野で使われています。

3BD FACSCanto II フローサイトメーター

Breakthrough technology that setsthe new standard for flow cytometry

技術革新の追及

1973年、BDバイオサイエンスはフローサイトメーターを世界で初めて商品化し、ライフサイエンス研究の飛躍的な発展に寄与しました。その後も、フローサイトメーターのイノベーションリーダーとして、画期的なテクノロジーを開発し続けています。30年以上経た現在、BD FACS製品はフローサイトメーターのゴールドスタンダードとして評価され、全世界で 14,000台以上が設置されています。BD FACSCanto IIフローサイトメーターは、この優れたテクノロジーの発展における重要なマイルストーンになるでしょう。

4 BD FACSCanto II フローサイトメーター

細胞研究においては、細胞の表現型と機能を多次元に解析し、多様な蛋白質の関係性を解き明かしていく

ことが必要になってきます。BD FACSCanto IIフローサイトメーターには、30年余年の最先端技術が凝

縮されています。最大 8つの蛍光を検出でき、更に最先端の蛍光検出システムとデジタル波形処理技術に

より、高感度を実現しています。発現レベルの低い蛋白質や、稀少な細胞を検出測定することができ、マ

ルチカラー解析に柔軟に対応することができます。さらに、技術革新は自動化を促進し操作性を高めて、

高い生産性をもたらします。

Flexibilityフレキシブルな蛍光色素の選択が可能に

●　 青色レーザーおよび赤色レーザーを標準搭載し、最大 6個の蛍光検出を可能にしています。

●　 8 colorオプション*により、最大 8個の蛍光検出が可能になります。

●　 紫色レーザーによりアプリケーションの幅が広がります。Pacific Blue、AmCyan、Alexa405®などの紫色レーザー用蛍光色素標識抗体の充実したラインナップで、マルチカラーによる多次元細胞解析が可能になりました。CFPと YFPを利用した FRET（蛍光共鳴エネルギー移動）解析、紫色レーザーで励起できる明るい Qdot®の使用なども可能です。

* 8 colorオプションには、2レーザー搭載タイプに検出器を増設するタイプと、2レーザー搭載タイプに紫色レーザーを搭載するタイプがあります。

セパレートビームスポット方式（BD FACSCanto II 方式）レーザー照射が異軸で、蛍光発光に時間差があるため、レーザー間の蛍光の影響を物理的に取り除くことができる、蛍光の漏れ込みが少ない方式です。安定した送液系、正確な Time Delayによる信号処理、レーザーの照射位置の安定性などを兼ね備えたシステムのみが提供できる方式です。

シングルビームスポット方式複数のレーザーが蛍光色素を同時に励起し、蛍光の漏れ込みが多い方式です。赤色および青色のレーザーにより励起される PE-Cy5では、APCパラメータへの漏れ込みが多くなります。また、赤色レーザーで励起される PE-Cy7 と青色レーザーで励起されるAPC-Cy7を併用した場合、どちらも Cy7の蛍光を発光するため、この 2つのシグナルを区別することは不可能です。

●　 レーザー照射を異軸に設計しており、さらに蛍光は各レーザー用のピンホールから光ファイバーへ独立した光路を通ります。レーザー間の蛍光の相互の影響を物理的に軽減することができ、蛍光色素を容易に組み合わせることができます。

セパレートビームスポット方式による高精度な蛍光検出

Quality

BD FACSCanto II フローサイトメーター 5

Productivity自動化による操作性の向上と高い生産性

●　 デジタル波形処理技術は、煩雑なコンペンセーションを自動化し、機器のセットアップを簡便化します。

●　 シース液、洗浄溶液を搭載した流路系カートを装備し、スタートアップ、シャットダウン、および洗浄サイクルを自動化します。ルーチンメンテナンスが効率化されます。

Quality

Innovation designed to driverquality, productivity, and flexibility

高感度な蛍光検出による信頼性の高いデータ

●　 デジタル波形処理技術は 10,000/秒でのイベントの取り込みを可能にし、稀少細胞の検出効率が上がります。

●　 オクタゴン・トライゴン反射法光学検出システムでは、検出器と光学フィルターを効果的に配置し、光学フィルターの反射を利用して蛍光を分離します。光学フィルターを透過しないので蛍光の減衰を抑え、蛍光を高感度に検出します。

オクタゴン・トライゴン反射法光学検出システム蛍光を光学フィルターで反射させることにより、減衰を抑えます。更に光が減衰しやすい長波長側から検出器に導く工夫がされています。

直列方式蛍光は光学フィルターを透過します。波長を分離するためには複数のフィルターを透過する必要があるため、マルチカラー解析の場合は明るい色素を選択するなどの工夫が必要です。

6 BD FACSCanto II フローサイトメーター

Advanced Applications

レーザー 蛍光検出器名 蛍光色素

488nm 固体レーザー Green FITC Alexa Fluor 488

Yellow PE

Red PE-Cy5 PerCP

Far Red PerCP-Cy5.5

Infra Red PE-Cy7

633nm HeNeレーザー Red APC Alexa Fluor 647

Far Red Alexa Fluor 700

Infra Red APC-Cy7

405nm 半導体レーザー Blue Pacific Blue Alexa Fluor 405

Cyan AmCyan

使用できる主な抗体標識用蛍光色素

Mouse T, B, NK Cell Analysis

C57BL/6Jマウス脾臓をマルチカラー染色している。7-amino-actionomycineで染色し死細胞を除去し、制御性 T細胞を解析している。Pacific Blue-A、APC-AパラメータをCD4、CD25発現パターン解析に使用することで、標識抗体製品の多い FITC-A、PE-Aパラメータをフレキシブルに使用することができる。

Mouse Regulatory T Cell Analysis

C57BL/6Jマウス脾臓を 7カラー染色した。7-amino-actionomycineで染色し死細胞を除去し（Far Redパラメータ）、T、B、NK細胞の存在比率を同時解析した。

※ レーザーおよび検出器の仕様により、使用できる蛍光色素には制限があります。詳しくは、4ページをご覧ください。

BD FACSCanto II フローサイトメーター 7

Jurkat細胞を Hoechst 33342で染色し、Pacific Blue-Aパラメータで検出した細胞周期解析。紫色レーザー励起用 Pacific Blue-Aパラメータで Cell Cycle解析ができ、青色および赤色レーザー励起用パラメータがすべて使えることによって、マルチカラー染色した特定の細胞集団の細胞周期解析、または特定の細胞集団の細胞周期解析とサイトカイン産生の関係性などを解析することが可能になる。

蛍光ビーズを用いた可溶性因子

サイトカイン、細胞内リン酸化

タンパクを検出・定量する BD

Cytometric Bead Array (CBA)

kitを解析することができます。

少量の検体から多項目のサイト

カイン・リン酸化タンパクの検

出が行えます。

BD CBA Flex Set cytokine 12-plex acquired with the BD HTS loader

BD FACSCanto II フローサイトメーター8

FACS基本性能の自己診断機能

● 全ての蛍光検出器の効率● 全ての蛍光検出器の直線性・検出領域● 光学的バックグラウンド：B● 電気回路ノイズ：SDEN

新しいGMP対応製品のセットアップビーズ試薬を用いて、

BD FACSDivaソフトウェアはサイトメーター・セットアッ

プおよび基本性能のトラッキングを行います。このシス

テムでは、蛍光の光量子をPMT（光電子倍増管）がシグ

ナルに変換する検出器効率（Qr）、レーザー散乱光などか

ら生じる光学的バックグラウンド（Br）、ならびに電子回

路上で生じる電気ノイズなど、業界標準の実行パラメー

タについて、測定・計算することが可能です。ビーズ測定

後に基本性能報告書が作成され、各蛍光検出器の状態

を基準値と比較して機器性能を自己診断します。

BD FACSDivaTM ソフトウェアは、サイトメー

ター・セットアップおよびトラッキング（CS&T）

機能が組み込まれています。これは、BD FACS

CantoTM、BD FACSCantoTM II、BDTM LSR IIの

各フローサイトメーターおよびBD FACSAriaTM

セルソーターに搭載可能であり、機器基本性能

の判定、測定における機器の調整セットアップを

全自動で行う機能を備えています。データ精確

性に関与するさまざまなFACS基本性能データを

自動測定し検証します。

BD FACSDivaTM ソフトウェア

●　 基本性能の自己診断機能

●　 機器設定条件の自動セットアップ機能

●　 性能の自動モニタリング機能

フローサイトメトリーの技術革新業界初の新機能により、データの精確性・再現性が飛躍的に向上

検出器配列が画面表示され、設置やカスタマイズが簡単になります。 サイトメーター・キャラクタリゼーションとセットアップで自動的に最適 PMT 電圧を決定します。

新しい機能

蛍光強度の異なる 3種類のビーズを使うことで、すべての蛍光検出器の基本性能を検証することができます。

9BD FACSCanto II フローサイトメーター

機器設定条件の自動セットアップ機能

● 各蛍光検出器の最適なPMT電圧の自動調整● 各レーザーのdelay値を自動調整● スケーリングファクターの自動調整

測定条件作成時にセットアップビーズの測定値から得られた

結果から、自動的に最適PMT 電圧、スケーリングファクター

およびlaser delayが調整され、base lineとして保存されます。

さらに実験当日の測定ではbase lineの測定値をもとに調整

された結果が機器設定条件fileに保存されます。サンプル測

定時にはこの機器調整条件を使用することで、測定者が機器

設定に要する時間を大幅に軽減することが可能です。

特に、サイトメーター基本性能の自己診断機能と自動セット

アップ機能により計算・設定された、各蛍光検出器の直線領

域における最適PMT電圧値は、各蛍光色素の検出感度が最

も良い条件を提示しています。

細胞測定時には、各蛍光パラメータに最適なネガティブ領域

値のマーカーが表示されます。この領域に、細胞のネガティ

ブ集団が表示されるようにPMT電圧を微調整することで、高

い精確性を保った測定を行うことができます。

ユーザー定義のアプリケーション・セッティングで、自動的にサイトメーターの測定性能の変更に対応できます。

FACS基本性能の自動モニタリング機能

● 全ての基本性能パラメータをトラッキングします。● 保存されたデータの変動係数を時系列グラフで表示できます。

セットアップビーズ測定ごとに、サイトメーターの基本性能診

断結果は保存され、Cytometer Performance Reportとして

出力することが可能です。保存されたデータは自動的に、時

系列をおってグラフ（Levey-Jennings グラフ）に表示され、

サイトメーター基本性能の推移を容易に観察することができ

ます。

自己診断機能により得られた詳細な基本性能データから、

機器の性能変動を事前に予測することが可能になり、予防的

なメンテナンスを行うことができます。自動モニタリング機

能により、サイトメーターのダウンタイムが軽減され、機器

の稼働率が向上します。

BD FACSDivaソフトウェアは、革新的な機能であるサ

イトメーター・セットアップおよびトラッキングから生ま

れる利点に加えて、パラメーターラベル、キーワードを

リストから選択できるエクスペリメントレイアウトの機

能拡張、ワークシートデータのPDF変換、並びにsnap-

to 機能によるplot位置の整列などのグローバルワーク

シートの機能向上により、測定・解析セットアップの作

業効率が改善しています。

BD FACSDiva ソフトウェアは、種種のアプリケーショ

ンにおける実験効率を向上させるだけではなく、さら

に、希少イベントの解析において、1000万細胞以上の

イベントファイルを記録することができ、ゲートされた

細胞集団をFSCファイルとして保存することができます。

BD FACSCanto II フローサイトメーター10

Plots: Dot, contour, density, histogram Templates: Experiment, Specimen (Panel), Analysis, and Plate

Data Transforms: Linear, 4 and 5 decade log, biexponential Export Formats:

Statistics – CSV, XMLData – FCS 2.0, FCS 3.0Displays/Plots – JPEG, XMLWorksheets – PDF Experiments – ZIP, XML

Data Displays: Area, height, width, time, and ratio Import Formats: Data – FCS 2.0, FCS 3.0

Calculated Performance parameters:

Detection efficiency (Qr), electronic noise, optical background (Br), laser delays, linearity, robust CVs and medians of setup reagent beads, area scaling factors

Performance Tracking Boundaries

Standard deviation, minimum, maximum

Gating Types:

Hierarchical gating including Snap-To,Autopolygon, Polygon, Rectangle, Snap-ToInterval, Autointerval, Interval, Quadrant, andTethered

Operating Systems: Windows XP (SP2)

Derived Gates: Invert, Intersect, Join, and Rest of Instruments Supported:BD FACSCanto、BD FACSCanto II、BD FACSAria、BD LSR II

Statistics:

% Parent, % Grandparent, % Total, Median,Mean, Geometric Mean, Mode, StandardDeviation (SD), % Coefficient of Variation(CV), robust % CV (rCV), robust SD (rSD),Population Maximum, Population Minimum

System Options Supported:

BD FACS Loader (for BD FACSCantoand BD FACSCanto II), HTS (for BD LSR II,BD FACSCanto, and BD FACSCanto II),BD AccuDrop (BD FACSAria only)

BD FACSDiva is for For In Vitro Diagnostic (IVD) Use when used with IVD reagents and cytometers.Cytometer Setup and Tracking is For Research Use only. Not for use in diagnostic and therapeutic procedures.

仕様BD FACSDivaTM ソフトウェア

BD FACSDivaTM

ソフトウェア

解析に使用する蛍光色素を決定し、Diva softにセットします

CS&T Baselineプログラムを実行します ～16分

CS&T Daily Performance Trackingを実行します ～3分

パラメータを設定 蛍光補正の実施Auto compersation

データ取り込み

機器設置時および

使用蛍光色素変更時

測定日ごと

個々の測定開始前

サンプルに適したback groundの補正をApplication Settingで行います（Optional）（PMT最適化：Base lineの設定）

（Cytometerの設定の標準化：Performanceの確認）

マウス脾臓のリンパ球マルチカラー解析一般的な末梢血および脾臓の免疫担当細胞解析では、CSTにより蛍光検出器の最適値および機器設定条件が自動調整されるため、蛍光の漏れこみ補正を行うだけでマルチカラー解析を行うことができます。

マルチカラー解析を行う場合に、CSTで機器設定条件が自動調整されます。さらに、Divaに標準搭載されている Auto compensation機能を組み合わせることにより、解析における機器調整操作を自動化して簡素化することができます。このワークフローではビーズによりFACS機器の基本性能が毎回モニターされるため、信頼性、再現性の高いデータを取得することが可能になりました。

11BD FACSCanto II フローサイトメーター

BD FACSCanto II フローサイトメーターはハイスループットに対応しており、用途に合わせた 2種類

のサンプルローディングシステムオプションを搭載することが可能です。サンプル測定時の検体チュー

ブ交換操作など、オペレーターが行うマニュアル作業が軽減します。これらのオプションを使用する

ことで、自動化されたサンプルローディングシステムが実現され、ラボのワークフローを最大限に効

率化することができます。

BD FACS Loader

12×75mmのBD FalconTMチューブ

40本（検体38本、洗浄用2本）か

らのサンプルロードを自動で行う

ためのオプションです。

High Throughput Sampler

96ウェル、384ウェルからのサンプルロードを自動で行うた

めのオプションです。96ウェルプレート1枚を約15分で解析

できます。（HTモード使用時）

ウェル間でのプローブ洗浄プログラムにより、Carryoverは

1%以下の精度で自動測定が行われます。

Automated sample acquisition

マルチウェルプレートからのサンプルロードを自動で行う BD FACS High Throughput Samplerオプション

カローセルに置いた試験管からのサンプルロードを自動で行うBD FACSローダーオプション

仕様BD FACSCantoTM II フローサイトメーター

64-136-03R0-0908-003-97

医療機器製造販売届出番号：07B1X00003000102

性能

　蛍光検出感度 FITC：＜100 MESF, PE：＜50 MESF

　前方および側方散乱光検出感度 ノイズから血小板を解像可能な感度

　前方散乱光検出感度 1 µm

　側方散乱光検出感度 0.5 µm

光学系

レーザーの仕様

　搭載レーザー 20 mW, 488 nm 固体レーザー

17 mW, 633 nm HeNeレーザー

30 mW, 405 nm 半導体レーザー（オプション）

励起光学系

　光学プラットフォーム レーザー照射は異軸で、照射位置調整は設置時に固定

　ビーム形状 照射位置のレーザー光サイズは9×65 µm楕円ビーム

検出光学系

　集光レンズ 光学ゲルによりフローセルと密着され一体化された構造開口率（N/A） = 1.2

　蛍光検出器 オクタゴン・トライゴン反射法光学検出システム

488 nmレーザー用PMT5個750-810 nm、670-735 nm、610-637 nm（オプション）、564-606 nm、515-545 nm

633 nmレーザー用PMT3個750-810 nm、701-723 nm（オプション）、650-670 nm

405 nmレーザー（オプション）用PMT2個502-535 nm、425-475 nm

　前方散乱光検出器 480/10 バンドパスフィルター付きフォトダイオード

　側方散乱光検出器 480/10 バンドパスフィルター付きPMT

流路系

　動作概要 自動スタートアップ、シャットダウン、および洗浄サイクル機能を搭載シース液、洗浄溶液を搭載可能な流路系カートを装備

　シース液消費量 通常測定時：1.1 L/hr

スタンバイ時：＜1 mL/hr

　サンプルのフローレート BD FACSCanto Clinicalソフトウェアにより自動制御され、アッセイにより変更可能

平均 Low = 10 µL/min、Medium = 60 µL/min、High = 120 µL/min

　サンプル取り込み速度 10,000 イベント/sec

　最大測定可能粒子サイズ 50 µm

　キャリーオーバー（平均） ＜0.1％

信号処理

　信号解像度 262,144チャンネル

　データ取り込みチャネル数 8-10パラメータ（散乱光2パラメータ、および蛍光6-8パラメータ）

　蛍光補正機能 各レーザー内、レーザー間全ての蛍光検出器間で可能

　パルス処理 すべてのパラメータについて高さ、面積、および幅の測定が可能

　時間パラメータ すべてのパラメータに対して相関可能

　Thresholdパラメータ すべてのパラメータに対して使用可能

サイトメーターの仕様

　寸法 91 cm（幅）× 61 cm（奥行）× 64 cm （高さ）

　重量 146 kg（サイトメーター単体。ローダーおよびコンピュータを除く。）

168 kg（ローダーを含む）

　電源 100/115/230 VAC、50/60 Hz

　消費電力 500 W

流路系カートの仕様

　寸法 79 cm（幅）× 61 cm（奥行）× 64 cm （高さ）

　重量 51 kg（流路系カート単体。タンクを除く。）

使用環境

　設置温度 5-40℃

　動作温度 16-31℃

　動作時相対湿度 20-80%（凝結しないこと）