Performances du test « Ammonium quaternaire » dans l’exploration des chocs anaphylactiques
aux curares
F.Bienvenu, Y.Benoit, G.Proton, P.Rouzaire, MA.Guinand, J.Bienvenu
Laboratoire d’Immunologie, Centre Hospitalier Lyon-Sud Service d’Allergo-Anesthésie - Hôpital Edouard Herriot
Réunion UniHA2 février 2010
Contexte
• Groupes « Ammonium substitué » des curares : principales structures antigéniques reconnues par les IgE des patients ayant présenté un choc aux curares
Développement d’un nouveau « Cap Ammonium IV » par couplage de la morphine (avril 2009)
Pourquoi la Morphine?
La structure de la morphine est constituée : - d’une partie cyclique hydrophobe- d’un ammonium tertiaire hydrophile similaire à l’ion ammonium IV des curares
Baldo et Fisher ont montré que : l’ ammonium tertiaire de la morphine est la structure qui se lie le mieux aux IgE des patients allergiques aux curares la morphine peut être utilisée pour détecter les IgE spécifiques des différents curares
Fisher MM, Baldo BA. Immunoassays in the diagnosis of anaphylaxis to neuromuscular blocking drugs. The value of morphine for the detection of IgE antibodies in allergic subjects.Anaesth Intens Care 2000; 28:167–70.
OBJECTIFS de L’ÉTUDE :
• Evaluer la sensibilité/spécificité du « Cap Ammonium quaternaire » dans l’exploration
des chocs anaphylactiques aux curares en comparaison avec les résultats obtenus avec le Cap Suxaméthonium
PATIENTS
• Etude rétrospective réalisée sur 20 patients ayant présenté un choc aux curares (grade 3 ou 4) :
– 14 femmes, 6 hommes (17 à 75 ans)– caractère anaphylactique de la réaction objectivé par
histamine/tryptase– Diagnostic d’allergie aux curares confirmé par des tests cutanés
positifs pour 19 patients– Pour 11 patients : choc dû au Suxaméthonium
• Groupe contrôle :
- 20 chocs anaphylactiques (grades 2-3-4) à d’autres agents (latex, antibiotiques, bleu patente)
- tests cutanés aux curares négatifs
METHODES
• Détermination (ImmunoCAP 250, Phadia)– IgE totales– IgE spécifiques Suxaméthonium– IgE spécifiques Ammonium IV(seuil de positivité des IgE spécifiques : 0,10 kU/L)
Résultats chez les 20 patients ayant présenté un choc aux curares
IgE spécifiques Suxaméthonium
IgE spécifiques
Ammonium IV
Moyenne 0,61 kU/L 1,73 kU/L
Extrêmes < 0,10 – 5,17 kU/L
< 0,10 – 9,29 kU/L
Sensibilité - Spécificité
IgE spécifiques Suxaméthonium
IgE spécifiques Ammonium IV
Sensibilité52% 81%
Spécificité 100% 85% *
*2 patients présentent des IgE totales >1500 kU/L
A noter :
Chez les patients allergiques au suxaméthonium :
Meilleure sensibilité du Cap Ammonium IV (91% )
par rapport au Cap Suxaméthonium (45%)
Conclusion
Le CAP Ammonium quaternaire :
• a une meilleure sensibilité que le CAP Suxaméthonium
dans le diagnostic de l’allergie aux curares
• plus particulièrement dans l’allergie au Suxaméthonium
• Relance l’intérêt du dosage des IgE spécifiques
dans l’allergie aux curares
Conclusions :
Proposition d’outils biologiques à privilégier dans l’investigation des chocs anaphylactiques aux curares :
Au moment du choc : IgE spécifiques Ammonium IV (FEIA) (à la place des IgE suxamethonium et tests RIA) pour imputer la responsabilité des curares dans la réaction
Lors la consultation d’allergo-anesthésie : Tests cutanés et Tests d’Activation des Basophiles pour déterminer les réactions croisées
Suxa
Se=44%Sp=100%VPP=100%VPN=67%
Rocu
Se=83%Sp=68%VPP=71%VPN=42%
Ammonium 4aire
Se=78%Sp=85%VPP=82%VPN=81%
PAPPC-RIA
Se=72%Sp=95%VPP=93%VPN=78%
Suxa Rocu QAI
1 F 48 III S 482 <0,10 0.55 5,21 0,7
2 F 39 IV S 1783 0,13 0.23 2 1,5 pos
11 M 50 IV S 50 <0,10 0.72 1,06 1,3 pos
12 F 45 III S 164 0,75 0,13 3,02 9,3 pos
13 M 67 III S 315 0,19 0,51 0,26 5,3 pos
14 F 63 IV S 416 5,17 0.52 2,6 18,7 pos
15 F 58 IV S 90 <0,10 0,22 1,81 4,8 pos
16 F 68 IV S 315 <0,10 0,79 9,29 2,3 pos
17 M 36 III S 139 <0,10 0,58 1,28 3,1 pos
18 F 59 III S 321 1,18 0,55 2,25 13 pos
19 F 43 III S 23 <0,10 0,14 <0,10 1 pos
5 M 50 III Atra 119 <0,10 <0,10 <0,10 0,3
7 F 38 III Atra 174 2,87 0,42 1,91 18,7 pos
3 F 46 III P 398 0,64 4.03 1,31 2,7 pos
8 F 12 III M 203 <0,10 0,97 0,21 0,5
9 F 35 III C 141 <0,10 <0,10 <0,10 1,5 neg
10 F 60 IV C 349 <0,10 <0,10 <0,10 0,6
4 F 21 III Alc 76 0,16 0.28 0,56 4,8 pos
S=suxamethonium; V=vecuronium; R=rocuronium; P=pancuronium; Atra=atracurium; C=cis-atracurium; M=mivacurium; Alc=alcuronium1Results of immunoglobin E (IgE) are expressed in kU/L. A result ³ 0,10 kU/L was considered positive and written in bold.2Results of RIA assay are expressed as B/T (percent). A result ³ 1% was considered positive and written in bold.
TABLE 1: Allergic population
NMBDs used during
anaesthesia
Total IgE
(kU/L)Sex
Age at the time of
shock (yrs)
Shock grade
Specific Am IV IgE2
PAPPC RIA
Inhibition tests
FEIA
Specific IgE1
TABLE 2: Control population
PAPPC RIA
Suxa IgE Rocu IgE QAI IgE
1 32 III Latex 60 < 0.10 <0,10 < 0.10 0.3
2 34 III Latex 42 < 0.10 <0,10 < 0.10 0.3
3 34 III Cefazoline 286 < 0.10 0,11 < 0.10 0.5
4 54 III Amoxicilline 101 < 0.10 <0,10 < 0.10 0.4
5 71 III Latex 1730 < 0.10 0,15 0.10 0.5
6 51 III Amoxicilline 233 < 0.10 <0,10 < 0.10 0.9
7 32 III Amoxicilline 32 < 0.10 <0,10 < 0.10 ND
8 21 II Latex 62 < 0.10 ND < 0.10 0.5
9 59 III Cefazoline 207 < 0.10 <0,10 < 0.10 0.4
10 31 II Latex 114 < 0.10 <0,10 < 0.10 0.3
11 43 IV Amoxicilline 701 < 0.10 0,14 < 0.10 0.5
12 65 IV Patent blue 5 < 0.35 <0,10 < 0.10 0.4
13 41 III Latex 237 < 0.10 <0,10 < 0.10 0.5
14 78 III Patent blue 10 < 0.10 <0,10 0.13 0.3
15 41 II Latex 73 < 0.10 0,12 < 0.10 2.7
16 25 III Cefazoline 87 < 0.10 <0,10 < 0.10 0.3
17 52 III Cefazoline 817 < 0.10 0,11 < 0.10 0.4
18 81 III Amoxicilline 22 < 0.10 <0,10 < 0.10 0.3
19 39 III Latex 257 < 0.10 <0,10 < 0.10 0.4
20 56 III Amoxicilline 10874 < 0.10 1.05 0.43 0.5
Age at the time of the
shock (years)Culprit drug
Shock grade
FEIA
Specific IgE1Total IgE (kU/L) Specific Am
IV IgE2
FEIA RIA
IgE spécifiques
SS
C
CRTH2
CD203c
CD
3
CD
203c
CRTH2
a. b.Negative control (PBS) Positive control (anti-IgE)
Suxamethonium (Célocurine®) Rocuronium (Esmeron®)
Figure 1: Basophil activation test.Gating region (A) is defined by cells expressing CRTH2 with low light scatterings. Then, among gated cells from (A), basophils were isolated after exclusion of Th2 cells on the expression of CD3.The positivity threshold was defined with the negative control, without any drug. All the results are expressed as percentage of CD203c positive cells among the basophil population. Positive control (anti-IgE) validates our experimental settings.
A
Gated on A
= 0,6 = 77
= 69 = 0,9
Partie 2 : étude des réactions croisées entre les différents curares : test d’activation des basophiles
Basophils
Hôpitaux de Lyon
CENTRE HOSPITALIERUNIVERSITAIRE
LYON-SUD165, Chemin du Grand-Revoyet69495 PIERRE-BENITE cedex
Laboratoire d’Immunologie Pr J. BIENVENU
EUROBAT GROUP
NMBDs protocol
Standardisation à l’échelle européenne du TAB aux curares :
Une technique commune Flow2Cast (Bühlmann) Identification : CCR3+ / SSC faible
Marqueur d’activation : CD63
La technique de notre laboratoire Identification : CRTH2+ / CD3- Marqueur d’activation : CD203c
Test des 7 curares… : Suxamethonium Rocuronium Vecuronium Pancuronium Atracurium Mivacurium Cis-Atracurium
… ainsi que d’un mélange de l’ensemble des molécules