Dr. Fodor Marietta

AnalitikaiAnalitikai kkmiamia

lelmiszeranalitika lelmiszermrnk hallgatk

Analitikai kmia biomrnk hallgatk

1., Eladsok ltogatsa ajnlott2., Gyakorlatokkal kapcsolatos elrsok s balesetvdelem megbeszlse:ppnteken 7nteken 7--n 13n 130000--kor K2 teremkor K2 terem. MEGJELENMEGJELENS KS KTELEZTELEZ

3., Ajnlott knyvek a felkszlshez:(i) POKOL GYRGY, GYURCSNYI E. RBERT,SIMON ANDRS, BEZR LSZL,HORVAI GYRGY, HORVTH VIOLA,DUDS KATALIN MRIA

ANALITIKAI KMIABudapesti Mszaki s Gazdasgtudomnyi EgyetemVegyszmrnki s Biomrnki Kar, Szervetlen s Analitikai Kmia Tanszkhttp://www.tankonyvtar.hu/hu/tartalom/tamop425/0028_PokolGy_Analitikai-kemia/adatok.html

(ii) LSZAY GYRGYN FODOR MARIETTA

LELMISZER-ANALITIKA I, s LELMISZER-ANALITIKA GYAKORLAT I.NAKVI, Kzpfok agrrszakkpzs tanknyve, 3. kiads 2013

(iii) Gyakorlathoz felkszlst segt krdsekhttp://alkalmazottkemia.uni-corvinus.hu kpzsek/letlthet oktatsi segdanyagok

(iv) rsbeli vizsghoz ttelsor http://alkalmazottkemia.uni-corvinus.hu kpzsek/letlthet oktatsi segdanyagok

Dr. Fodor Marietta

Eladsok tematikja

1., Febr. 03. Bevezets, alapfogalmak

2., Febr. 10. Titrimetria alapjai. Sav/bzis titrlsok 1.

3., Febr. 17. Sav/bzis titrlsok 2.

4., Febr. 24. Argentometria

5., Mrc. 03. Komplexometria

6., Mrc. 10. Redoximetria

7., Mrc. 17. Gravimetria

8., Mrc. 24. Fkomponens analzis

9., Mrc. 31. Elektroanalitika

10., pr. 07. Kromatogrfia 1.

11., pr. 14. Kromatogrfia 2.

Spektroszkpia 1.

12., pr. 28. Spektroszkpia 2.

13., Mjus 05. VIZSGA

Analitikai kAnalitikai kmia cmia cljalja: - minsgi (kvalitatv)- mennyisgi (kvantitatv)

Minta Minta mintavmintavtel tel mintaminta--elelkkszszttssMintavtel ltalnos alapelvei:

Mintavtel cljatlagsszettel meghatrozsa (tr, id)F-, mellk-, nyomelem, specici meghat. (ppm, ppb, ppt)Teljes, vagy rszleges analzis

A mintavtel hibja ksbb nem korriglhat! Rossz mintavtel esetn a mrst nem szabad folytatni A minta csak ltszlag homogn Reprezentatv mintavtel

Mintavteli stratgia, terv

1.,Minta minsge:

illkony, fnyrzkeny, hrzkeny, reaktv, mikrobiolgiailag instabil

2., Analitika clja: mit szeretnk meghatrozni s mirt

3., Analitikai mdszer kivlasztsa validlt mdszer, teljestmnyjellemzk

4., Minta-elkszts mdja

5., Szksges mintamennyisg (prhuzamos mrsek, vakminta, ellenminta)

6., Mintavteli szabvny: EU szabvnyok

7., Mintavteli eszkzk: - megfelel mret = megfelel mintamennyisg

- nem szennyezi a mintt

- nem lp reakciba a mintval

8., Minta jellse mintavteli napl, mintaszm, jells mdja (tr, id)

9., Minta trolsa hts (kell? Tilos?)

- kmiai stabilits (kell-e savanytani?)

Vgs cl: REPREZENTATV MINTA

MintavMintavteli terv teli terv sszesszellllttssnak szempontjai:nak szempontjai:

Dr. Fodor Marietta

Dr. Fodor Marietta

Vgrehajts szempontjbl: manulis - automatikus szakaszos idszakos folyamatos

Vgrehajts clja szempontjbl:statisztikusan szrprbaszeren = eredmnye pszeudo-tlag minta

vletlenszer (random): egyforma rszletek, rtegminta vtel, szisztematikus: pl. id, tmeg, trfogat szerint vett m

ltalnos ellenrzs szelektven; konkrt problmra vizsglni

az objektum egy rszletnek vizsglatra alkalmas minta vtele (loklis, pillanatn

MintavMintavtel mtel mdjadja

Szilrd mintblszrcsap

Gz mintbl malac

Korszer mintavev PET palack

folyadk mintbl

MintavMintavteltelnegyedelnegyedelsselssel

MintaMinta--elelkkszszttss mmveleteiveletei

Fizikai mFizikai mveletekveleteko mrlegels,o kevers, homogenizls,o trzsoldat-kszts,o hgts, koncentrls, tisztts,o beprls, szrts,o extrakci: folyadk-szilrd, folyadk-folyadk, szilrd-folyadk,o szrs, centrifugls

KKmiai mmiai mveletekveleteko pH-bellts,o kivonat kszts, o feltrs,o reagens hozzads, o kicsaps, o szrmazk kszts,o ioncsere

Dr. Fodor Marietta

Kiolds: extrakciOldhatsg klnbsgen alapul elvlaszts

Forrspont-klnbsgen alapul elvlaszts

Elvlaszts: desztillci

Felolds (mindig a gyengbb oldszerrel kezd)

Oldszer: vz, HCl, hg HNO3, HCl+HNO3,HNO3+H2O2,lgos mleszts

Feltrs/felolds hatkonysgnak nvelse:

9 Hmrsklet9 Nyoms9Mikrohullm Teflonbombs feltrs

Similis simili gaudet: Hasonl a hasonlnak rl.

Vndorlsi sebessg-klnbsgen alapul elvlaszts

Sztvlaszts: kromatogrfia

Dr. Fodor Marietta

Dr. Fodor Marietta

EXTRAKCI

Oldhatsg klnbsgen alapul elvlasztsFogalmak: extrahl szer = kivon szerextraktum = kivont anyag + extrahl szerraffintum = eredeti kzeg + maradk komponensCsoportosts - hmrsklet alapjn (hideg = macerls, meleg = digerls)- fzis alapjn (mibl/mivel)

szilrd/szilrdszilrd/folyadk = kilgozs, szorpcis extrakciszilrd/lgnem = szuperkritikus extrakcifolyadk/folyadk = szolvens extrakci

Clja: - elvlaszts - tisztts- dsts

EREDMEREDMNYEK MEGBNYEK MEGBZHATZHATSSGAGAMegbMegbzhatzhatssgg = fggetlen, ismtelt vizsglatok egyezse = szrs

Mrsi eredmny befolysol tnyezk hibkAnalitikai eredmny = valdi rtk + hiba

Rendszeres hibaVletlen hiba

Rendszeres hiba tRendszeres hiba tpusaipusai:Eszkzhiba, emberi hiba, mdszeres hiba

- mdszer sajt hibja- csepphiba- indiktorhiba

1., sszefggs a valdi rtkkel2., sszefggs a ksr anyagok koncentrcijval Ksr komponensek = mtrix

InterferenciaMtrixhats (rzkenysg cskken)

Dr. Fodor Marietta

VVletlen hibletlen hibkkHatsukat az eredmnyek szrsa jelziValsznsg szmts, matematikai statisztika

Plda: a hmrsklet befolysolja a pH-t-minimlis ingadozsa mindig van, ez vvletlen hibaletlen hiba-a mrt pH rtk mell a T feltntetse = rendszeres hibarendszeres hibaMrtke, eljele nem jsolhatZajZajDetektortl, ms elektronikai rsztl szrmaz idszakos jelingadozs (ezt is a szrssal jellemezzk)HHttttrrA zaj s a mrt jelnek a mrend komponens tvolltben mrhet lland rsze.Sok esetben a vakmintval kzelthetMaximlis jel/zaj viszonyra treksznk

StabilitStabilitssA vlaszjel hossztv ingadozsa. Max-min/tlag arnyban adjk meg

VAK MINTAVAK MINTAMinta nlkli oldat, minden olyan vegyletet tartalmaz, amelyet a minta mrsnl is felhasznlunk.

ANALITIKAI MANALITIKAI MDSZEREK DSZEREK RVRVNYESNYESTTSE SE VALIDVALIDLLSASA

A j laboratriumi gyakorlat:good laboratory practice=GLP j mdszer mdszerek helyes megvlasztsa, ellenrzstechnikai, szervezeti httr: szemlyzet, labor, biztonsg, mintk kezelse(azonosts, trols, nyilvntarts), mszerek karbantartsa megvalsts

krlmnyei

A mdszervalidls egy eljrs, amiben megfogalmazzuk az analitikai feladat kvetelmnyeit s igazoljuk, hogy a vizsglt mdszer rendelkezik azokkal a teljestmnyjellemzkkel, amit az adott alkalmazs megkvetel. A validls sorn a mdszeralkalmassg (Fitness to Purpose of Analytical Method) komplex rtkelse kell megtrtnjen.

gygyszergyrtshoz kapcsold validlsi szablyok: ICH Harmonised Tripatite Guideline International Conference on Harmonisation of Technical Requrements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (1996) Validlsi ajnlsanalitikai mdszerek validlsa, kmiai laboratriumokban: The Fittnes for Purpose of Analitical Methods A Laboratory Guide to Method Validation and Related Topics (ld. EURACHEM honlap) EURACHEM Working Group ( A laboratriumok minsgbiztostsnak eurpai szervezete)analitikai mdszerek validlsa: Harmonized Guidelines for Single Laboratory Validation of Methods of Analysis IUPAC Technical Report (A kmikusok nemzetkzi szervezete)

szakmai terszakmai terletenkletenkntnt

TELJESTELJESTMTMNYJELLEMZNYJELLEMZK meghatK meghatrozrozsasa

TeljesTeljestmtmnyjellemznyjellemzk:k:1., Azonossg, szelektivits, specifikussg2., Kimutatsi hatr3., Mrsi/meghatrozsi hatr 4., Mrsi tartomny5., Analitikai fggvny/kirtkel fggvny jellemzse

linearits vizsglatNem lineris fgv. Illeszkedsnek vizsglata

6., Helyessg, pontossg7., Precizits (ismtelhetsg, reproduklhatsg)8., Mrsi bizonytalansg9., Robusztussg

SZELEKTIVITSZELEKTIVITS, SPECIFICITS, SPECIFICITS, AZONOSSS, AZONOSSGG (Selectivity, specifity, identity)(Selectivity, specifity, identity)Milyen mrtkben kpes a mdszer a kvnt alkot meghatrozsra egyb zavarhatsok mellett. Az a mdszer, amely a meghatrozand alkotra szelektv, specifikusnak nevezzk. specifikus = csak egy komponenst mrszelektv = tbb komponenst is mr, de a komponenseket megklnbztetiAzonossg: a jel csak a meghatrozand anyagtl szrmazik, nem valami ahhoz fizikailag vagy kmiailag hasonl anyagtl

Dr. Fodor Marietta

KIMUTATKIMUTATSI HATSI HATR (Limit of DetectionR (Limit of Detection, LoDLoD; Detection Limit, DL; ; Detection Limit, DL; cLcL , , mLmL))Az a legkisebb koncentrcija a mrt alkotknak, amely az adott mdszerrel mg jl megklnbztethet a vak minttl mennyisgileg mr nem meghatrozhatrtke fgg a mtrixtl!

MMRRSI HATSI HATR (Limit of Quatitation, LoQ)R (Limit of Quatitation, LoQ)A mennyisgi meghatrozs hatra vagy meghatrozsi hatr (LoQ) az a legkisebb koncentrci, amelynl egy adott, elfogadhat ismtlkpessg (RSD %), shelyessg rhet el a mdszerrel. Az a legkisebb koncentrcija a mrt alkotknak, amely mg elfogadhatmegbzhatsggal hatrozhat meg

MMRRSI TARTOMSI TARTOMNY (Range)NY (Range)A komponens koncentrcijnak az a tartomnya, melyben a helyessg s precizits megfelel. Als hatra a mrsi hatr (LoQ), fels hatrt az rzkenysg s a szrs arnynak alakulsa szabja meg.A mrsi tartomny jellemzen a mintaoldat koncentrcira vonatkozik nem a mintakoncentrcira (szilrd minta, trzsoldat).

ANALITIKAI FANALITIKAI FGGVGGVNY/KINY/KIRTRTKELKEL FFGGVGGVNY JELLEMZNY JELLEMZSESEA mrsi tartomnyon bell lehet egy lineris tartomny, ahol a cA jel fggvny lineris,amit a mrsi tartomny vizsglata sorn hatrolunk be. Az elemz grbe milyen megbzhatsggal egyenesLinearits ellenrzsre:- regresszi szmts, (R) megadsa nem elgsges. (R) nem nagyon alkalmas, nem jelezelg rzkenyen;- az illeszts jsgnak vizsglata szksges (kalibrci vizulis ellenrzse)- a rezidumok vizulis rtkelse;- objektv statisztikai tesztek, F-prba

Dr. Fodor Marietta

Precz, de pontatlan Pontos, de nem precz

Pontos, S preczNEM pontos, NEM precz

MEGBMEGBZHATZHATSSG, PRECIZITG, PRECIZITS (Precision)S (Precision)A vletlen hibkkal van sszefggsben. A mdszer annl preczebb, minl jobban megegyeznek az azonos mintbl kapott eredmnyekA precizits az azonos, homogn mintk mrse kzti klnbsget fejezi ki. Jellemzrtkknt a mrsek szrst hasznljk

A helyessg vizsglatnak fbb mdszerei:(1) Hiteles v. tanstott referencia mintk vizsglata (CRM, SRM, RM)(2) sszevets fggetlen mdszerrel(3) sszevets ismert helyessg mdszerrel(4) Interkalibrcis vizsglatok, krvizsglatok(5) Visszanyers vizsglat standard anyag addcijvalA mdszerek alapveten abban klnbznek, hogyan nyerjk a referencia rtket (xref)

ISMISMTELHETTELHETSSG (REPEATIBILITY) G (REPEATIBILITY) Precizits ismtelhet krlmnyekkel: azonos labor, mdszer, mszer, vegyszerek, emberek REPRODUKREPRODUKLHATLHATSSG (Reproducibility)G (Reproducibility)Precizits reproduklhat krlmnyekkel: azonos mdszer, DE eltr labor, mszer, vegyszerek, emberek

ROBUSZTUSSROBUSZTUSSG (G (RobustnessRobustness)Azt mutatja meg, hogy a mdszer mennyire tri a zavar hatsokat; a mrsi paramterek (pl. pH, ionerssg, hmrsklet stb.) megvltoztatsa mennyire befolysolja a kapott jel nagysgtA robosztussg vizsglat az egyes lpsek sorn bekvetkez vletlen ingadozsok szerept vizsglja a pontossgra, ismtlkpessgre, visszanyersre, a mdszert jellemz egyb paramterekre (felbonts stb.)Clja, hogy megismerjk a vizsglat kritikus lpseit, a kritikus faktorokat s ezt az ismeretet felhasznljuk a mdszer javtsra, helyes alkalmazsra

Dr. Fodor Marietta