色谱分析应用手册 · 2015-03-06 · electrode having a unique potential setting. this...

神经科学

色谱分析应用手册分析方法灵敏度高、选择性好，并已被验证

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液相色谱系统

色谱分析应用于神经科学研究

神经科学分析完整解决方案

多重神经化学分析

单胺类和代谢物

神经活性氨基酸

氨基硫醇类

乙酰胆碱

游离 D- 丝氨酸和

D- 天门冬氨酸

推荐的系统配置

同行评议周刊参考

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液相色谱系统






氨基硫醇类

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D- 天门冬氨酸



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液相色谱系统

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4 Advances in Neurochemical Profiling of Brain Tissue Samples Using HPLC with a Novel Four-Channel Electrochemical Array Detector

0.1 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 9.0 9.5 10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 12.5 13.0 13.5 14.0 14.5 15.0-20.0

-15.0

-10.0

-5.0

0.0

5.0

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15.0

20.0

25.0

30.0

35.0

40.0

45.0

50.0nA

min

4

3

2

1

VMA

Tyro

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DO

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5HIA

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3MT 5H

T

Tryp

toph

an

HVA

550 mV400 mV

250 mV

100 mV

Advances in Neurochemical Profiling of Brain Tissue Samples Using HPLC with a Novel Four-Channel Electrochemical Array DetectorBruce Bailey, Nicholas Santiago, Ian AcworthThermo Fisher Scientific, 22 Alpha Road, Chelmsford, MA, USA

Conclusions

• The method for biogenic amines, their metabolites, and precursor amino acidswas both highly sensitive and rapid. All compounds were analyzed within15 minutes and with limits of detection of less than 10 picograms on-column.

• Voltammetric resolution offers better insights into the proper identification ofindividual compounds since each will have a unique but reproducible pattern across the four electrode channels.

• Neurochemical profiles of brain tissue samples can be easily obtained using readily available instruments, columns, and mobile phases.

OverviewPurpose: In order to obtain the maximum information from biological samples,neuroscientists require a sensitive approach that can measure numerous keyneurochemicals, simultaneously. A simple, rapid, and accurate method wasdeveloped for the analysis of biogenic amines, their metabolites, and precursor amino acids using isocratic chromatography with a multichannel electrochemical detector. This enables both chromatographic and voltammetric resolution of manycompounds, thereby enhancing the identification and accurate quantification ofthese compounds.

Methods: Profiling of biogenic amines, their metabolites and precursor aminoacids using HPLC chromatographic techniques with a multichannel electrochemical instrument and readily available column and mobile phaseis described.

Results: The method enables the rapid separation of various neurochemical compounds at trace levels and without significant matrix interferences.

IntroductionThe ability to measure low levels of many different neurochemicals simultaneouslyis challenging due to detector sensitivity and the chromatographic issue ofresolving analytes with similar chemical structures. Most of the biogenic aminesand metabolites can be oxidized electrochemically so the use of electrochemical detection is routine for the analysis of these compounds. Chromatographictechniques have advanced over the years, however, even with the use of UHPLCcolumns, baseline resolution of many different analytes still remains difficult due tothe constraints of isocratic HPLC mode for their separation. Although gradientelution would improve analyte resolution, electrochemical detection is typically onlyused with isocratic approaches due to adverse effects of changes in mobile phasecomposition on detector performance. A new modular electrochemical detector hasbeen developed that uses multiple coulometric electrodes in series, with each electrode having a unique potential setting. This voltammetric approach providesadditional resolution of analytes beyond their chromatographic separation. The detector is fully compatible with gradient HPLC techniques and provides anautoranging feature that enables the simultaneous measurement of low and highlevel analytes. Qualitative information is thereby enhanced while still maintainingquantitative sensitivity requirements for specific analytes at low concentrations.Examples illustrating the content of biogenic amines and acid metabolites in brain tissue samples are presented, using a four channel electrochemical arraycombined with UHPLC chromatographic separation.

Methods

.

© 2013 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved.

PEEK is a trademark of Victrex PLC. Peeksil is a trademark of SGE International Pty Ltd. Allother trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries. This information is not intended to encourage use of these products in any manners that mightinfringe the intellectual property rights of others.

Results and Discussion

Flow: Isocratic at 0.50 mL/min.Temperature: 35 °CColumn: Thermo Scientific™ Hypersil™ BDS C18 column, 3 µm,

3 × 150 mm; Thermo Scientific Hypersil BDS guard column (28103-013001); Thermo Scientific™ UniGuard™ guard cartridge holder (852-00)

Inj. Volume: 5 µL (standards) – 10 µL (tissue samples, partial loop)Mobile Phase: Thermo Scientific™ Dionex™ Test Phase (70-3829)EC Cell: Thermo Scientific™ Dionex™ model 6011RS ultra Coulometric

Analytical cell: E1: +100 mV: E2: +250 mV, E3: +400 mV,E4: +550 mV vs. Pd reference electrode

Animals: Male Sprague Dawley rats weighing 175–200 grams were administered vehicle (saline) via i.p. injection. One hour later animals were sacrificed by carbon dioxide asphyxiation and thebrains rapidly removed, dissected, and frozen at -70 °C.

Sample Preparation:

Brain tissue samples (10–25 mg) were prepared in 0.3 N perchloricacid, sonicated to disrupt the tissue and centrifuged at 13,000 RPMfor 10 min. The clear supernatant was transferred into an autosampler vial and placed on the autosampler at 10 °C.

Biogenic Amines and Metabolite Analytical Conditions

An instrumental prerequisite for trace analysis is that the HPLC system must be inert in order to achieve optimal sensitivity using an electrochemical detector. The system shown above in Figure 1A uses biocompatible materials in the flow pathto reduce the influence of metal that can contribute to elevated background currentsat the electrochemical cell. The recent introduction of the ECD-3000RS detector enables multiple electrodes to be attached in series after the HPLC column. Use ofthe 6011RS cell (Figure 1B) provides coulometric electrochemical efficiencies. Thisplatform provides both chromatographic and voltammetric resolution of compounds.New nanoViper (Figure 1C) fingertight fittings were employed to cope with the higher pressures due to smaller column particles. These fingertight, virtually zero-dead-volume (ZDV) capillaries can operate at pressures up to 14,500 psi and are much safer to use than PEEK™ tubing which can slip when using elevated pressures. They are made of PeekSil™ tubing and are available in small internal dimensions to minimize chromatographic band spreading. Capillaries used on thissystem were 150 micron ID for all connections made prior to the autosampler valve and 100 micron ID for those made after the injector valve.

Analysis of Biogenic Amines and Acid Metabolites

A common assay used for brain tissue samples is the analysis of importantbiogenic amines norepinephrine (NE), dopamine (DA), and serotonin (5HT), amino acid precursors tyrosine and tryptophan and metabolites including dihydroxyphenyl acetic acid (DOPAC), 5-hydroxyindole acetic acid (5HIAA), kynurenine (KYN),homovanillic acid (HVA), and 3-methoxytyramine (3MT). A method is described which allows the complete separation of these compounds in less than 15 minsusing a 3 micron column (Figure 2). Good linearity of response was obtained since the correlation coefficients ranged from R2 = 0.9991–0.9999 for the 12 compoundsevaluated (Table 1) over a concentration range of 5─500 ng/mL. These data used the signals obtained at the dominant channel for each compound. The percentrelative standard deviation (%RSD) for the calibration curves (seven concentrationsin duplicate) is also shown in Table 1. The RSD values ranged from 0.98% to 5.48%, indicating that the coulometric electrodes provided good stability during thisanalysis.

FIGURE 1A. Inert HPLC system for trace neurochemical analysis.FIGURE 1B. 6011RS ultra Coulometric Analytical CellFIGURE 1C. Specialized Thermo Scientific™ Dionex™ nanoViper™ capillaries

In Figure 3, the section of the chromatographic trace shows both chromatographicand voltammetric resolution between the compounds 3MT and 5HT. Note thatserotonin show a response at lower potentials of 100 and 250 mV, due to theoxidation of the 5-hydroxy group, and one at higher potentials of 550 mV due to theoxidation of the indole ring nitrogen. Voltammetric resolution offers superior insightsinto the proper identification of individual compounds since each will have a unique but reproducible pattern across the four electrode channels.

FIGURE 4. Neurochemical profiling of brain tissue sample (corpus striatum)

Peak NameRT

(min)Rel. Std. Dev %

CorrelationCoeff. R2

DominantChannel

1 VMA 2.15 1.40 0.9999 22 Tyrosine 2.60 0.94 0.9999 43 NE 2.65 2.08 0.9998 24 EPI 2.98 1.89 0.9999 25 DOPAC 3.60 5.48 0.9991 16 DA 4.25 5.22 0.9992 17 5HIAA 5.00 3.73 0.9996 48 Kynurenine 6.10 1.15 0.9999 49 HVA 7.00 0.98 0.9999 3

10 3MT 7.85 3.81 0.9997 211 5HT 8.20 1.831 0.9999 412 Tryptophan 13.3 2.88 0.9997 4

6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 8.1 8.2 8.3 8.4 8.5 8.6 8.7 8.8 8.9 9.0-70-50

-25

0

25

50

75

100

125

150

175

200225

250275

300 nA

min

4

321

HVA

3MT

5HT

FIGURE 3. Chromatographic and voltammetric resolution of compounds(100 ng/mL)

A

C

B

The analysis of tissue samples is illustrated in Figures 4 and 5. These demonstratethat picogram sensitivity can be obtained using this technique. Brain tissues fromvarious regions were analyzed using this method including the corpus striatum and frontal cortex.

FIGURE 6. Neurochemical concentrations of regional brain tissue samples(corpus striatum vs. frontal cortex region)

FIGURE 7. Amino acid precursor concentrations of brain tissue samples

550 mV

400 mV

250 mV

100 mV

0.1 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 9.0 9.5 10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 12.5 13.0 13.5 14.0 14.5 15.0-20.0

-15.0

-10.0

-5.0

0.0

5.0

10.0

15.0

20.0

25.0

30.0

35.0

40.0

45.0

50.0nA

min

4

3

2

1

VMA

Tyro

sine

DA 5H

IAA

KYN

3MT 5H

T

Tryp

toph

an

DO

PAC

550 mV

400 mV

250 mV

100 mV

FIGURE 5. Neurochemical profiling of brain tissue sample (frontal cortex)

0.00

1000.00

2000.00

3000.00

4000.00

5000.00

6000.00

VMA DOPAC DA 5HIAA Kyn HVA 3MT 5HT

ng/g

tiss

ue w

etwe

ight

Corp Striat Frontal Cortex

0.002000.004000.006000.008000.00

10000.0012000.0014000.0016000.0018000.0020000.00

Tyrosine Tryptophan

ng/g

tiss

ue w

etwe

ight

Striatum Frontal Cortex

The levels of neurochemicals found in regional tissue samples are presented inTable 2. These data indicate that the corpus striatum has higher levels of the majority of neurochemicals measured, except for serotonin which was slightlyelevated in the frontal cortex sample.

Region VMA DOPAC DA 5HIAA KYN HVA 3MT 5HT

Striatum 873 5235 4108 342 146 1086 202 115Frontal Cortex 611 443 453 246 139 156 20 122

Region Tyrosine Tryptophan

Striatum 18472 14624Frontal Cortex 13326 12158

Table 2. Levels (ng/g tissue wet weight) of measured neurochemicals inregional brain tissues

FIGURE 2. Neurochemical profiling with a four-channel electrochemical array

Thermo Scientific™ Dionex™ UltiMate™ 3000 SR-3000 Solvent Rack (withoutdegasser). It is recommended that solvents should be degassed daily via vacuumdegassing (this ensures highest possible sensitivity)Thermo Scientific™ Dionex™ UltiMate™ 3000 ISO-3100BM PumpThermo Scientific™ Dionex™ UltiMate™ 3000 WPS-3000TBSL Analytical AutosamplerThermo Scientific™ Dionex™ UltiMate™ 3000 ECD-3000RS Electrochemical Detector with integrated temperature controlled column compartmentThermo Scientific™ Dionex™ Chromeleon™ CDS software, version 6.8

PO70531_E 01/13S

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液相色谱系统






氨基硫醇类

乙酰胆碱


D- 天门冬氨酸



为从生物样品中获取最多信息，神经科学家需要灵敏的方法

来同时测量多种关键神经化学物质。由于检测器灵敏度和分

离化学结构相似的分析物的色谱问题，同时测量低浓度的多

种不同神经化学物质的能力越来越具有挑战性。生物胺和代

谢物可被电化学氧化，因而电化学检测法成为分析这些化合

物的常规方法。

在本例中，展示了一种简单、快速又准确的方法，即采用等

度色谱和多通道电化学检测器分析生物胺、其代谢物和前体

氨基酸。这样能促使对多种化合物进行色谱和电化学分离，

由此加强这些化合物的鉴别和精确定量。


条件

流速：等度洗脱，流速为 0.50 mL/min。

温度： 35 ℃

色谱柱： Thermo ScientificTM HypersilTM BDS C18 柱，3 μm、3×150 mm;Thermo Scientific Hypersil BDS 保护柱（28103-013001）；

Thermo ScientificTM UniGuardTM 保护柱芯套（852-00）

进样体积： 5 μL（标准品）- 10 μL（组织样品，部分定量环）

流动相： Thermo Scientific Dionex 供试流动相（70-3829）

检测器：电化学检测器—UltiMate 3000 电化学检测器，配有 2 个内置 6011RS ultra Coulometric 分析池：E1：+100mV、E2：+250mV、E3：+400mV、E4：+550mV vs. Pd 参比电极

图 1. 采用 4- 通道电化学阵列检测器得到的神经化学分析图谱

下载应用说明 1060：脑组织样品综合神经化学分析

色氨酸

通道 1

通道 2

通道 3

通道 4

酪氨酸

0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00-0.50

1.00

2.00

3.00 011912 #1 CCIII_Ch_1nA

min

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液相色谱系统






氨基硫醇类

乙酰胆碱


D- 天门冬氨酸



许多不同的化合物都可作为神经递质，包括诸如去甲肾上腺

素（NE）、多巴胺（DA）和 5- 羟色胺（5HT）的单胺类。

本例展示了一种快速灵敏的高通量多巴胺与 5- 羟色胺分析方

法。根据描述，此法采用一种短（50 mm）UHPLC 色谱柱，

在不到 5 分钟内对 DA 和 5 HT 进行分析，改善了时间分辨率，

以评价可能的神经化学变化。


图 2. 微透析样品中的多巴胺与 5- 羟色胺的快速分析

下载海报说明：改善 HPLC 与电化学检测进行的超痕量神经化学分析的时间分辨率

条件


温度： 32 ℃

色谱柱： Thermo ScientificTM AcclaimTM RSLC PA2，2.2 μm、2.1 x 50 mm

进样体积： 10 μL 部分定量环

流动相： 150 mM 磷酸二氢钠一水合物、4.76 mM 柠檬酸一水合物、3 mM 十二烷基硫酸钠（SDS）、50 µM EDTA、15% 乙腈、10% 甲醇，采用 99.99% 的半导体级氢氧化钠（14 N 溶液），调至 pH=5.60。

检测器：电化学检测器—Thermo ScientifcTM DionexTM CoulochemTM III 检测器，配有 5041A 高灵敏度分析池和玻碳电极；12 µm BoPet 垫片，

E：+225 mV vs. Pd 参比电极。

样品：用位于大鼠脑部前额皮质中的 3 mm 微透析电极，以 1 µL/min 的速度采集人造脑脊液（aCSF）10 分钟。

2: 5

-羟色胺

1: 多

巴胺

单胺类

0.0 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 8.8 10.0 11.3 12.5 13.8 15.0 17.0-50

500

1,000

1,500 MD6 ECD_2nA

min

1

2: G

LU3 4 5

6: G

LN7

8: A

RG

910

: GLY

11: T

HR

12 13: T

AU

14 15: G

ABA

16: T

YR

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液相色谱系统






氨基硫醇类

乙酰胆碱


D- 天门冬氨酸



神经活性氨基酸为 CNS 中的兴奋和抑制分子。采用 HPLC 与全自动在线柱前衍生化，然后进行分离和电化学检测，可

以非常快速地完成基底纹状体微透析灌流液中这些低浓度氨

基酸的测定。本例是一种快速稳定的等度方法，用于分析

CNS 中起神经递质作用的这些氨基酸。这一 UHPLC 方法可

在 ng/mL 水平上进行检测，在 17 分钟内完成微透析样品中

的神经活性氨基酸的分析，与先前的方法相比，其检测时间

降低了 2 到 5 倍。


图 3. 大鼠纹状体微透析样品中的神经活性氨基酸分析。

下载海报说明：改善 HPLC 与电化学检测进行的超痕量神经化学分析的时间分辨率

条件


温度： 45 ℃

色谱柱： Thermo ScientifcTM AccucoreTM PhenylHexyl，2.6 µm、

3×100 mm、Accucore Ph/Hex、2.6 µm、3.0×10 保护柱和 Uniguard 保护柱套

进样体积： 5 µL 部分定量环

流动相： 100 mM 无水磷酸氢二钠、22% 甲醇、3.5% 乙腈，用 H3PO4 调至 pH=6.75。

检测器：电化学检测器—Coulochem III 检测器，配有 6011 ultra Coulometric 分析池：E1：+150 mV、E2：+550 mV vs. Pd 参比电极

样品：用位于大鼠脑部纹状体中的 3 mm 微透析电极，以 1 µL/min 的速度采集 aCSF 样品 15 分钟。

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液相色谱系统






氨基硫醇类

乙酰胆碱


D- 天门冬氨酸



体内产生大量具有生化重要性的含硫化合物，包括诸如胱氨

酸、谷胱甘肽（GSH）和高胱氨酸的氨基硫醇类。这些氨基

硫醇类发挥多种生理学作用。GSH 是一种重要的细胞抗氧化

剂，并且是谷胱甘肽过氧化物酶的一种辅因子。谷胱甘肽过

氧化物酶是一种对过氧化氢和脂质氢过氧化物具有解毒作用

的酶。GSH/GSSG 的高比值使细胞保持在还原环境中，这种

环境是其存活所必需的。此比值的降低与包括神经退化（例

如帕金森病）在内的多种疾病中的细胞毒性相关。本例展示

了一种快速稳健的 UPHLC 方法，该方法采用掺硼金刚石电

极来测量各种氨基硫醇类。

氨基硫醇类

图 4. 采用 BDD 电极测定全血中的氨基硫醇水平。

下载应用说明：采用掺硼金刚石电化学检测器进行的简单快速氨基硫醇分析

条件


色谱柱： Accucore RP-MS 色谱柱，2.6 µm、2.1×150 mm

温度：色谱柱：50 ℃；柱后：25 ℃

进样体积： 2 µL 标准品；4 µL 样品

流动相： 0.1% 五氟丙酸、0.02% 氢氧化铵、2.5% 乙腈、97.4% 水

检测器：电化学检测器—UltiMate 3000 电化学检测器，配有 6041RS ultra Amperometric 分析池与 BDD 电极；E：+1600 mV vs. Pd 参比电极。

样品： 5-20 µL 全血 + 200 µL 0.4 N PCA，以 13,000 的转速混合并旋转 10 分钟。将上清液转移到自动进样器小瓶中，并置于温度为 10 ℃的自动进样器中。

全血

0 1.0 2.0 3.0 4.0

(200 fmol)

EHCAch

(20 fMole)

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液相色谱系统






氨基硫醇类

乙酰胆碱


D- 天门冬氨酸



乙酰胆碱（ACh）是大脑中的一种关键神经递质。遗憾的是，

这种物质仅在细胞间隙有极少量存在，因而很难被检测到。

为研究体内的胆碱能神经传递，需要一种易于使用的稳定方

法。虽然 ACh 没有电化学活性，但是可以采用酶将其转换成

一种易于检测的产物。

这个 5 分钟的 UHPLC 实例显示改善分离度和使峰变尖锐能

提高这种重要被分析物的灵敏度。由于 UltiMate 3000 电化学

检测器的灵敏度高、噪音低，可采用在线固相反应器（SPR）产生的过氧化氢提供适宜的电化学活性部分，该部分可轻松

检测，这样能测得相应的微透析样品中 20 fmol 低水平的活

性 ACh。

乙酰胆碱

图 5. 低飞克水平的乙酰胆碱快速测定。

下载海报说明：采用电化学检测扩展 HPLC 的用途

条件


温度： 40 ℃

色谱柱： Hypersil BDS C18 色谱柱，2.4 µm、2.1×50 mm （28102-052130）；柱后固相乙酰胆碱反应器：ACH-SPR (70-0640)

进样体积： 10 μL

流动相： 100 mM 磷酸氢二钠、0.8 mM 1- 辛烷磺酸钠盐、0.005% MB 试剂（70-1025），用 H3PO4 调至 pH 7.0 ± 0.2。

检测器：电化学检测器—UltiMate 3000 电化学检测器，配有 6041RS ultra Amperometric 分析池与 Pt 电极；E：+400 mV vs. Pd 参比电极。

胆碱

分钟

电流

0 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 8.8 10.0 11.3 12.5 13.8 15.0 16.3 18.0-1.96E+07

0

9.42E+07

D-Asp

L-As

L-Gl

L-Asn

D-Ser

L-Ser L-Gln

L-Asp

L-Glu

L-Ser

L-Gln

目录

液相色谱系统






氨基硫醇类

乙酰胆碱


D- 天门冬氨酸



D-氨基酸对映异构体曾被认为仅在低等生物中常见，现在，

即使在其大量相应 L- 对映异构体存在的情况下，也易于在哺

乳动物组织匀浆中被定量检测到。我们快速的 UHPLC 方法

涉及简单样品提取，以及供飞克水平检测用的自动柱前衍生

化，且其分辨率增强，超过了其他 HPLC 方法。

下面的实例展示了一种在大量相应的 L- 对映异构体存在的情

况下检测 D-Asp 和 D-Ser 的方法，采用 UltiMate 3000 荧光

检测器，对 D-Ser 的检测限为 200 fg，对 D-Asp 的检测限为 400 fg。此 UHPLC 法将运行时间减少至不到 20 分钟，而采

用 HPLC 法为 30 - 60 分钟，并且增强了 D- 和 L-Asp 之间

的分离度，这可以更准确地测定生物样品中的 D-Asp 水平。

游离 D- 丝氨酸和 D- 天门冬氨酸

图 6. 安非他明治疗前后大鼠脑干组织匀浆中测定的氨基酸水平比较：

上图中的红线。

下载应用说明 1071：同时测定大脑组织提取物中的游离 D- 天门冬氨酸和 D- 丝氨酸的快速 UHPLC 方法

分钟

计数

对照样品

安非他明治疗的样品

条件

流速：梯度洗脱，流速为 0.25 mL/min0–6 min 3% B；6.5–10 min 20% B；11–14 min 80% B；在 3% B 平衡 7 分钟

温度： 35 ℃

色谱柱： Thermo ScientifcTM Hypersil GOLDTM 1.9 µm×2.1 mm，

P/N 25002-202130

进样体积： 2 µL

流动相： A：50 mM 磷酸二钠，pH 6.5；B：甲醇

温度： 35 ℃

检测器：荧光检测器—Thermo Scientifc Dionex UltiMate 3000 荧光检测器（FLD-3400RS）激发波长：340 nm、发射波长：450 nm、灵敏度 4

推荐的高灵敏度等度分析神经递质的系统：


目录

液相色谱系统






氨基硫醇类

乙酰胆碱


D- 天门冬氨酸



UHPLC+ 液相色谱模块与附件

泵：用于电化学检测系统的 UltiMate 3000 Biocompatible Isocratic Analytical Pump（ISO-3100BM） 5042.0011

自动进样器： UltiMate 3000 Analytical Biocompatible Split-Loop Thermostatted Well Plate Autosampler（WPS-3000TBRS） 5841.0020

溶剂架： UltiMate 3000 Solvent Rack，无内置脱气装置（SR-3000） 5035.9200

数据系统： Chromeleon CDS Chromeleon 7.2

检测器：电化学检测器

UltiMate 3000 电化学检测器（ECD-3000RS）

增加 1 个 DC 直流模块扩展 1 或者 2- 通道操作能力，或增加 2 个直流模块扩展具有双内置库伦传感器的 4- 通道操作。5070.0010

UltiMate 3000 电化学检测器所需的附件：

恒电位模块、DC、双通道，用于 ECD-3000RS 检测器 6070.1400

UltiMate 3000 电化学检测器用电化学传感器

流通双电极 ultra Coulometric 分析传感器（6011RS）与 ECD-3000RS 检测器联用 6070.2400

薄层单电极ultra Amperometric 分析传感器（6041RS）带附件和垫圈

（从下面选择工作电极）6070.3000

安培型传感器用工作电极（6041RS）

用于神经递质和有关的分析物高效玻碳工作电极，与 6041RS 传感器联用 6070.3200

用于硫醇、二硫化物和相关分析物掺硼金刚石工作电极，与 6041RS 传感器联用 6070.3100

UHPLC 手紧接头与毛细管套件

nanoViper 连接套件 ECD-3000RS 检测器用 nanoViper 毛细管连接套件 6041.5105

目录

液相色谱系统






氨基硫醇类

乙酰胆碱


D- 天门冬氨酸



同行评议期刊参考

UHPLC+ 液相色谱模块与附件

泵： UltiMate 3000 Quaternary Bio-RS Rapid Separation Pump（LPG-3400RS） 5040.0036

自动进样器： UltiMate 3000 Analytical Biocompatible Split-Loop Thermostatted Well Plate Autosampler（WPS-3000TBRS） 5841.0020

溶剂架： UltiMate 3000 Solvent Rack，无内置脱气装置（SR-3000） 5035.9200

柱室： UltiMate 3000 Rapid Separation Thermostatted Column Compartment（TCC-3400RS） 5730.0000

数据系统： Chromeleon CDS Chromeleon 7.2

检测器：荧光检测器

UltiMate 3000 快速分离荧光检测器（FLD-3400RS）（无流通池） 5078.0010

UltiMate 3000 电化学检测器所需的附件：

流通池： FLD-3000 系列检测器用分析流通池，SST、体积 8 µL 6078.4230

目录

液相色谱系统

神经科学分析色谱法





氨基硫醇类

乙酰胆碱


D- 天门冬氨酸



HPLC 电化学检测参考书目

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