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Instructions for use Title 馬パラチフスの血清診斷に關する研究 : 特に多糖類抗原を以てする沈降反應に就て Author(s) 平戸, 勝七; 清水, 龜平次; 佐藤, 儀平; 伊藤, 時哉 Citation 獸醫學研究, 1(1), 49-59 Issue Date 1953-01 DOI 10.14943/jjvr.1.1.49 Doc URL http://hdl.handle.net/2115/11345 Type bulletin (article) File Information KJ00000104916.pdf Hokkaido University Collection of Scholarly and Academic Papers : HUSCAP

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    Title 馬パラチフスの血清診斷に關する研究 : 特に多糖類抗原を以てする沈降反應に就て

    Author(s) 平戸, 勝七; 清水, 龜平次; 佐藤, 儀平; 伊藤, 時哉

    Citation 獸醫學研究, 1(1), 49-59

    Issue Date 1953-01

    DOI 10.14943/jjvr.1.1.49

    Doc URL http://hdl.handle.net/2115/11345

    Type bulletin (article)

    File Information KJ00000104916.pdf

    Hokkaido University Collection of Scholarly and Academic Papers : HUSCAP

    https://eprints.lib.hokudai.ac.jp/dspace/about.en.jsp

  • 馬パラチフスの血清診断に闘ナる研究

    特に多糖類抗原を以てする沈降反磨、に就〈

    三子戸勝七・清水亀平次・佐藤儀平

    く北海道大皐獣爵整部家寄生塾教室〉

    伊藤時哉

    〈北海道大事獣毘皐部家畜生化塾教室〉

    STUD1ES ON THE SEROLOG1CAL D1AGNOSIS ()F

    EQUINE PARATYPHOID.

    ESPECIALLY ON THE PRECIPITIN REACTION WITH

    THE BACTERIAL POLYSACCHARIDE ANTIGEN

    OF SALMONELLA ABORTU,ふEQUI.

    KA'fSUSHICHI HIRATO, KIHEIJI SHDUZU and GIHEI SATO

    (From the Laboratory of Veterinary Hygiene and Microbiology, Faculty of Veterinary斑edicine,豆okkaidoUniver3ity, Sapporo)

    TOKIYA IToH

    (From the Laboratory of Vetet'Inary Chemistry, Faculty of Veterinary Medicine, Hokkaido University, Sapporo.)

    L 諸 言

    民パラチフスは妊.1),)の流"毛, 1子民主!J!.掲のl!文血

    性疾患,牡誌の宰九灸その地年前,性,iIj役i引をi

    じて和々の病j設を止するものであること;工業主11の

    主であるが,以上の主iき品:;止のl明かでないi努合に

    血清反症のみを以て帯忠の千jJE~ を li今習するととは

    :JEiだi{1謝;なi!11遣で‘ある。従来との君主のH的には凝

    集反1Il!.{がl:としてJlJ¥.、られ,凝集iflの基準として

    1: 640足湯性, 1: 12幼陽性とする利之法が:実際

    にfjわれているが野外でこのFZ度の凝集誌を千fす

    る.lJ,H主主{fIる多く, しかも何ノ宰,~i~ft ,ぶ←上るJ!fとを認め

    fうないことから析かる符之主主i{立には多くの疑問が

    浅されている賞ifJ~にあるの我々はとの黙の疑義主

    i明かに L. .l.!,~パラチフス /$:f;fr上訟も合}'日的な }j法

    を検討するため,人口感染出に左ぞける感染-設約

    一挟復の過釈を通じて各旅抗体の泊長態度を把握;

    する-J;,本病流行:長村に於ける長11Jの血詰反!主

    主捻討した結3iL,l言流産品iの多焼類性分i討を抗原

    とする沈降反志がltstもよく此の訟の 11(1せに合致す

    ることをf認めたので誌にその概要を報;号する次第

    である(本論え1の要旨は H{~ 手1126 年 4 月主~ 30 Inl日

    本法墜事合NrJ'上に報去した}。

    11. 血溝反震の街式

    1.凝集反落

    抗原として同流産菌の分-議後{~ミイ長期11mの ~~h~ V-.

    s flq l株主以て許活者ベ 20持Itl1J庁長主食糧ノ'Ki手1fjj.;夜とし, 6ザC:)0分Jm熱役Htir支 lV1cFarland N o. 1

    の 1んの注実に合せて調裂した。 イ検血清をご{吾妻支

    話料し,之にノ主主の抗!前夜を)1¥1え 3iG

    C2時Im:Jmi昆一夜宅jsi放詮後成践を'同JιLた。本支J:f:t草に凝集

    !立と ifr.'1去しであるのは全部 600C:Jm熱抗原によるWrU,¥L偵を言う。又;11ミベ母美YMvアノレコール返王'ltO抗原及びプ fヨンほ長ホルマリン殺菌による註

    抗原をiJjいて常に O及び H債のiWt之を-"'1三行せし

    めた。

  • 50 獣護革研究

    Fig. 1. IsoIation of the Carbohydrate Fraction.

    Mois七cultureof S.αbortus-equi (about 213 gms.) す

    Defat by the mix七ureof equal volume of alcohol and ether. I ~nd then by chloroform.

    Extract by Aqua dest. (3 days at 370C) す

    豆emovethe protein by trichIoracetic acid. l(addM1e concentration ofラperce批 and制 d時 forabout 16 hrs.)

    Cen trlfuga tion

    J 一一一一一-一一一-一-一-一一

    2. 沈蜂反藤

    沈降反症の抗原として煮沸抽出液,

    長自分担,多摂類分却を比較した結果

    煮沸抗原は協反感が多く現われて,沈

    降主誌のm現治夫の:境界が不明確で、あり又蛍r'-l分割辻抗野i主弱く之に反して多

    横長f{分封は抗原性要員る強く反i患が鮮明

    に現われるととから,本研究に於ては

    Supern~tant fluid 同会

    Deposit

    専ら多携類分:割を抗原として本反F主主

    賓施した。

    多際類分割の作製法:湾見1)の方

    法に準じ普通寒天2壬時間培養ーの馬流産

    宣~ii長潤茜を弐去の如く庭浬して苓黄友

    白色の粉末を{'号た(第 1持i参照L

    v

    Add theラvolumesof acetone. ↓

    Deposit (raw carbohydrate fraction) ↓

    Purificatiぅnby trichloracetic a士idand acetone. !偽悶d的I討vir叫 1ed叩O位ra犯ce託tica舵ci泊di泊nvarious c∞on臼e叩ent廿ra坑tions.After removimr

    1 0 f 問 epos 比 pour acetone. This p戸r拘oc印ωed是u立m凶…r陀則吋ei刊isr尚e凶 βseveral times.)

    本物質の化率的諸性Rk,化事分析及びペーパークロマトグラブ分析法に

    よる梼成々分は第 1去に示す如くで

    ある。去の成主主二から本物質は微量の蛋

    、ψk Dialysis (4 days in tap water and 3 days in Aqua dest.)

    Wash with acetone, ether and then dry.

    Carbohydrate fraction (about 2.ラgms)

    glucosamineの構成分として存在するようである。

    なゐ本物立に泣いて誌も!iに精製操作を行い,

    r'-l及びヱーテル可溶性物質(主として

    リポイドと忠われる)を含む高級多際

    事法判断される。その討の大部分は,

    完全な純化物についてその性批誌に組戒を再確認

    し皮いと思う。

    Table 1. Chemical Characters and Analyses of the Fractionated Carbohydrate Substance.

    YelIowish grey white powder, weak alkali soluble

    Precipitation Tests (for weak alkali solution)

    With Hydでo~hloric acid .....

    CUS04 Basic Pb-acetate .......一…...............…-

    Hydrochloric phosphotungstic acid ..,…十Sulfosalycylic acid ....一….......一-一一・ー・・ 十Esbach's rea~ent …....一……ー ........υ ・一十

    CoIor Reactions

    Orcine reaction ……………………………十十Seliwanoff's (Resoreine) 円……………十

    Nyfander's " Jod-Jodkalium " Xanthoprotein "・ー..............一-ー奮い 十

    Sakaguchi's ……-…一-一一・・・・・・・ 十AdamJdewicz-Hopkins 's …・・・……… 十Neul:Sauer.;;Rhode's " ・ー・・・..,…・・・…・・・… 十

    N a-nitroprusside p-Quinone

    " "

    With Nitric acid ....一ー・'.,

    Pb-acetate . Acetic玄-ferrocyanide …-一.. . ~ .. ~…一・… 十Trichloracetic add ・...................一・・・… 十

    Acetic tannic a~id .一一-…..,・・・・・・・・・・・・・・・ 十Saturated ammonium sulfate ..'…・一・一 十

    Phloro,2;lucine reaction …...…・・・・・・…… 十すMolis~h's ・・・…・ー・・・・・・・・・…….., t!+

    Benedict's ラ,

    Biuret 一-一….........…ー・十

    剖illon's "一………・・・ 十Pauli's ・・・………..,………… 十Liebermann's 円・・・…・・・・・・・一一・・・・・・・… 十Acree-R03enheim' s ….........・・・・ー・・・ 十

    Pb-sulfide "・Ninhydrine "…

  • 千戸,諸*,佐藤,伊義一一嘉パラチフスの血涜診断に読する研究 51

    Chemical Analyses

    Water ….,....・ H ・-……-…・・………・…・・・…ー...・ H ・.,……………...]4.2詳Total N …~ .. .. .. .. .. .. .... . .. .. . .. .. .. .. .. .. .. ..…・・・・・・…...........一……............ 5.7 骨

    Protein-N ..........一…・一.... .. . .. .. ~ .. ..…......一....…・一-一一"一-一...... 0.29

    Non司 protein-N .........…・・・・・・・・・・・・………・・・・ υ …・ H …..,……・・・ 5.4

    Ether extractable N …ー……・リー・..,….......…ー一......... 0.]6

    Reducing Substances (calcurated as glucose after .

    hydrolysed with ] N HCI) ..,・ H ・..………………… 24.5

    Ether extract . .. .一・日・・・・・・・・・….......一一"一…・一...…-一...・一.., 10.6

    Ash 一..................……・・・・・・・・・ー・・・・・・・ー・・一…-一-一-一-一…...... 3.1

    Ca .一…....一...…・・・・・・….................一….............一...……・ー 1.6

    Mg . ....…υ....一..........…一.....一....…ー…・…..…...0.7

    Total P ....一一・…ー...・・・・…・・・・・・・・・・・・….............….................. 1.53

    Ether extractable P …-一・・・…-一...................一…・・ e・・ a…・ー 0.64 Ether unextractable P .... .'…....一-一.......…......一......… 0.89

    持 Percentagein Andydride

    Paper Ohromato~raphy with I N HCI-hydrolysate

    Following components were found in one dimendional paper chromatogram.

    (Solvent: Water saturated phenol, Ascending method, at 230C for 24 h路)Gluco3e, Fru~tose, Galact03e, Arabinose, Rhamn03e, Gluc03amine, Tyr03ine,

    Arginine, Histidine, Leucine, Valine, Alanine, Glutamic acid, Some peptides.

    反誌の賓施: 以上の多機雲r!.!"t分割粉末 1mg

    を京臨7J'¥.lcふに溶き 1,2分1m煮渇後遠心分唯[

    た上請をJ立原原液とする。との原液を食苦手.ノkを1.:1、

    て 1:5, 1: 10の如く倍童文稀蒋してJIjいた。 従っ

    て1:10抗原液と注多!去~J当分iE4 を 1 : 10,000に孫料

    L たととを;立叫ょする。

    反1.fl1.{の1J/ij.c¥: ~主主民法によった。 nJ 捻 J(n. 法 l工

    生のまま内科~3mm 粍度のノj、式験管に入れ抗原を

    lfi:Jrfして:.)7GC1時1m後判定した。宅j自.に 1a寺1111放置じても迂ほ、同様。成誌が符られる。

    3. 補体結合反庭

    .l.!J流産菌の告二通寒天24時ifliti?主主食糧水 1C.c

    20mgの害11にi手洗せしめ 1000C10分加熱後遠心分

    離 L,上清を抗原として夜Jljした。

    反i官三官式として KOLMER1Jf法及び CASAIβ

    法とを比較Lた結果後任がよい成訟を示 Lたの

    で,事ら CASALS法に撮ることとした。

    111. 人工惑染幼誌に於iずる

    3種抗憶の消長

    1. 費駿鷹

    民II奇反誌を観察した宣.~~~民 89J1ほì:として生

    後 6-7ヶJ:Jの幼!向(1頭のみ 19ヶJJ)でるって,

    i天11頭 (No.1)にはちn熱死荷ワクチンを叉他の 3

    !;u1 (N o. 2,4,叫にほ安}!と法2) によるクロムワクチ

    ンを犬々川111に1えって皮下諸問L, 4頭の主J照,t.s

    (No・0,.5, i, 10)とjさに同流点誌の攻撃感染を賞施

    したものである。感染付朴と Lて注.t.u流1本:!治見円1t支を fljい投興したj.-fJ流!芋:誌の宣教は 7;-)0 ~

  • 52 獣磐 革研究

    Table 2.

    Foal Number

    iE2Z322お読む泣!:?:;;t;広三 D勺Zpedlよ0312322Age 一一一一一己中関空an叩 51 i j??人 iznfe2tion to| in the inhtLd

    i I Daぬ I D蹴 IDね IDose** i S凶 ghter Animals

    Remarks

    (|i…i i i |i Killed l j l IDec.2,19ラO n i 十6 " 1 "",,, :'~'~''5.':.. _ ! Dec. 25. I 7.3 7. " 120" Vaccine I .LJ V'-'::':::~I__ ,~;;'___ 71 monthsl " • "''''"''''''''! 19ラ0:mi1lion i ' ,

    i 13, " I 40"

    I Positive I blood司I culture lon Jan. 17, 16.

    2 /A "Chrome 1" " lド7 「伐ぺη;之: i お " " 57 … 1Vaccine |!"197i lymph nodule, i3, " i 120" • QvvU'''' I 五idney勢

    4 7 Same as abov e " 52 … Same as above "ラ21 I .n 川lymphnodule骨

    9 19 " 50 i ラo

    3 "

    7

    Control "

    "

    日 edof Sepsis~ 112 daysaft~r-I generally spread ;Infection

    I Positive I blood-

    l 64 l - !c出向lon Dec.

    i 3J,Jan.l.

    . !労

    ------------~-\iM-i一一 --~-

    封。te: 後 Thebacilli were detected by enrichment culture.

    官、悶p.

    '39.5

    38.5

    37.5

    36.5

    今sgl.C.r.T.'科目.6400 3200 128ラ201600 6与 160800 ラ280 4∞ 16 40 200 8 20 100 4- 10 50 2 5 000

    告発 Toenumber of th;, ab~rtion ba:!illi in a gastri~ content of an aborted fetus was

    ca1culated, then used as a chal1enge dose.

    Infect 100 G> ED

    @ー…'.Pos1tlveBl.,od-Cultu問

    昌 t こご土ことこと晶-===唱え",_ o

    メ:とTιJYーへ\\~てこ>

  • Table 3. Titre of Agglutinin, Precipitin and Cornplernent明FixingAntibody after Preventive Inoculation and Test Infection into Foals.

    ~I.~~ j. ~I Dec.1 : I Jan. I I Feb.1 I I I Mar. r 32li32132lll I23戸29131 1 2 1 4 1 6 8 1 10 1 13 1 16 1 19 I 27 1 1 1 6 10 I 1 5 20 1リ16 1

    I 2Q? i ~ [1 ?~~~I ~~g?: [1 ~~?2 .-1..[ [1 ~~22 介 64?Qi !6400111600 I 160Jil1600 :32ω!lmD[3200l32033200i i 16001BEar6

    J-lcfljltoil!111ー土 11fool-llylγJ17-lE1tl161117111L!?-ilj?:lUPI-Tj二!?::lrl円Jljrf!?Jhjll ロtl lωl認! |11723i li話器 !?;;ぉ l認識ll211111;紙上回ぉ (;jm42;;birfr i l | l iu州 |ω|iit| |朴叶| lhil lti十|川 l什|川 村|トト I i十

    Jlffl::i: j 「 i jiji 1丁一ラ

    10 1

    :1ll一一………一 10Q'一1f1li;引iil卜し一800υ?一f円f刊O!円?γ川800円「引?γ???l!11;1[1[1? 1 l ?竺;J1r:I刊1ど口勺[:P¥??h川寸…山11「円爪片γ16吋川引γ6?引川γ円?引引γ16凶6?引11 ?七γl卜l寸引V??h引|1「r(「8I ~ I ~叩ヨ21 r"; I 1 ~22; 800 I ~~2 800:1ω2 , 1~~~ 11~~2 i1600 1600 ~~~LI ~~2 I ~~~ I ~~2 , il~~~ 1 ~山 IF~?:

    Note: A, 0, P, C rneans Widal, G-Agglutinin, Precipitin and Cornplernent-Fixing Antibody respectively. P.. -", or indicates negative or doubtful precipitate at 1 : 5 dilution of antigen. 十,十+.i,t indicates positive precipitate at 1 : 5 "'" 1 : 20, 1 : 40 "" 1 : 80, 1 : 160 dilution of antigen respectively. C. ←,or ごし indicates complete or 7ラア,:;hemolysis at 1 : 2 dilution of sera. 十+十, 1',1' indicates positive complernent fixation at 1 : 2 -1 : 4, 1: 8 "'" 1 : 16 1 : 32 dilution of sera respectively,

  • 54 獣 堕 皐 研 究

    又1111結抗休廷読者よりE互に遅れて 15日で出現し,

    徐々に増強して 34 日で最高に建~L た。 之宅抗体

    の下降態度辻犬々趣を呉にし沈降索はiえもな速に

    下降する傾向を示L, 感染後 23行で下降し始め

    54日で全く治夫した。 1rn結抗体は448から下降し

    始め沈降素消失後もな会i湯性反感を絞けた。認で宗

    宗はその下降絞慢で、あって惑習と誌の慌に却々復郎

    Lない (Fig.2)。

    主J照烏の内 No.'1及び 10ほ菌投典後 39GCI1II

    後の暫時熱がるち血像の動托a を現わしたが,臨

    床上付記すべき焚化を認め宇耐過したものであっ

    て,極めて軽訂正に麗し野外で辻寅際にとのような

    無症欺感染と見倣L侍る症例は多敢に存在するも

    のと推察される。との 2拐jで、は凝集債の上昇も桜

    めて軽微で最高 1: 800--1 : 1600に止まり,沈降素

    は No.'1に於て感染後 9",39n の 1~ll/H現 L , また

    No.10に於ては感染後 9---44日の!品i弱i場t'1:Jう至疑

    Te現p.

    39.5

    38.5

    37.5

    ASgl. e.F.T. Prec. ラ200 6斗 1601600 32 80 800 16 40 400 8 20 200 4 10 100 2 5 50 0 0

    Fig. 3.

    Infect10n

    1 10

    l場'j"tを主した。ちlJ結抗掠辻 2例共沈持素に平行仁

    て弱i湯'~I:を主したに過ぎない。

    以j上二2f例子碍tのように感染を極めて車軒:号空i2(り;度支ι向|面酎香訴f過し

    アたこもの;段主

    治失する傾向がある (Taぬb.3, Fig. 3¥ {fl. L新かる

    例で、法凝集債が{まいにも1h]らや,感染中期にはな会沈降素, trlI結抗f本共に千行Lて設明されるととは注日主要する Q

    オくにワクチンを接和した4頭のえさ駒であるが

    之竿ほ 3回の接積によって 3杭抗{本の売生は顕著

    である。4例共攻撃接和によって護熱, 1主11象の勤務

    が起り, 特に No.lの如きは感染後 13及び 21日

    に流出片1に誌を検出 L た。従って之~!Fの藻防接和

    mt主{nJれも感染妥病Lたものと解するが,攻撃接和後狩に抗体の持判長岱認められ宇,次第に下降す

    る傾向を示した。 凝集慌の下降に作なって他の抗

    体もその景を減宇る。沈降素は No.9の如き例で

    Foal No. 7.

    30 40

    、、、一一司、 一一一------ー--、~----

    50 60

    Time, in Days.

    Va.cc1ne Va.cc I詞e 司ra.cc1ne

    ~e.p'l! ! F晋.S

    事8.5

    事11'.5

    36.51. A681. 開で~ec.102400 51200 25600 主29006400 '200 1600 64 160 800 32 80 1j-oo 16 ~O 200 8 2。100 今 10ちむ 2 S o 0 0

    Fig. 4. Foal No. 2.

    t

    五 10' 20

    Time, in Days.

  • 千戸,清水,色藤,伊蕗一一足パラチフスの鹿詰診離に撰する研究 55

    は全く消失したが他の 3例 (No・1,2,4)は屠殺持ま

    でi易性を績けた。之等 4頭の体内菌分布捻宗の結

    '8.5

    '7.5

    36.5

    Agsl.ιf.T.~"c.. 102Jち0051200 25600 512 1280 12800 256 岳噴.06¥00 128 320 3200 6斗 1601600. 32 60

    Fig. 5.

    InCect10n

    F¥ .、、‘,、、司、、』・_-0‘、、

    ;果 No.9及び No.1は陰性又 No.2及び No.4では

    1,2の淋己節及び、臓器に菌が検出された (Fig.4, 5)。

    Foal No. 9.

    800 16 40 400 8 201 08 2∞ 4 101-←

    ‘・』・ー・+・一一&・"'"I C.F.T.

    100 2 5 1 0 ・ー_--4.ち0 母 a -・』叶巴且邑

    1

    4 lO 20 30 d与G 50

    Time, in Days.

    IJ、括: 感染初期に於ける 3樟抗体の tH現

    ほ一般に凝集渠の出現に始ま与,沈降素は之と ku

    時又はやや氾れ, fl¥i結抗体;主主IIに辺れてIH現ずる。

    各抗体の産生堂は感染程度の車1~~f( と平行し軽症の

    ものでは抗休の産・生長も微弱でるる。 しかL感染

    中島iに:-hれiまたとえ凝集111ほ低くても沈持素補給

    抗体共に千iÎ して 1-1日見する Oif正復基HriiffIíJJ~の車{ifi夫

    と共~L.各抗体ほ下降 L始め,特に沈降主誌の下降治

    夫は主主も?速かに行われる。沈降主誌の治欠した時期j

    に培殺した賓~f2 .1.!J (No. 5, 7, 9,でl主体内菌分信は

    全く ~~.tJtを示し屠殺時な身長t降索のJ菱ーもえ L た 1

    fダIJIt~ 2 i夕日 (No.2, 4) tこ於て 1,2 の ~1主巴節及び、臓器

    に.HJ流産荷主検出したととから沈降長の泊欠;主体

    内に於ける吾、jの治夫主意味するもののおiく推察さ

    (1るG

    IV. 罵パラチフス流行農村!こ於ける農罵の血溝反蔭

    給 U11il~上の肉付に U{神125 :'.1三12nからおの惇:~~dグf:流産, 量三fp路,事)L炎, t持afi6炎守;ο病J.!Jが続

    出したため, I1ヨ付では付iスうに吉ぞける民パラチフス

    の泣克明夫1Jとをお1るため 26年 2J:J一斉に全民から

    採血し雨L治ゑ禽を常教!斗?に故事立して来たc 我々は

    之写 519.fiJ1の.1!J品L7占に杭て 3混血清反拡を寅確し

    3種反lf正相互間の路係に就て桧討をー1111えた。

    先宇凝集債を各民L涜に就て測定し沈持及び

    fl11主主反控(を賞施して各凝集{廷に封臨する陽H't反~~{

    設を完;4去に掲げた。

    i主主集慌に;吠て見ると 1 : 200~1: 400 の低債

    を示す血清は 2歳%に最も多く,年寄;?の増加と共

    に 1:800~1: 1600耗!支の説集院をイ{するものが

    多くなる。しかしながら 1:3200以上の尚凝集慣

    を示したものは 2歳泌が訟も尚率で、 19.396を11iめ

    2I;詫おに於ける感染率が他よりも品いことを示唆

    している。又流産.l.!JI主1::1200 以上の説集偵をイJ

    するもの:18ι?ム現tO,!J(¥rjlrw,関節炎,事丸

    炎)I主的形であり,之"1;の多くのものが.UJi立高菌

    感染によるものであるととを示している。ワクチ

    ンij妄E電話の 55.9961ま 1: 3200 .L'),J二の凝集誌をこ示し

    た。

    以上各;主を通じ凝集摂と也の 2反誌の-'F-{j.性

    をき金討して見ると, 1: 6400以上では沈降素, ff!l

    i樹立体共に疋ぼ千行を示すが 1:3200では他。 2

    反恵共陰性のもの 9%を11Iめ, 1: 1600では 62.8

    Pム 1:800では 78.1おと 2反底段位の設を増し,

    ;疑楽部の低下と千1iLて沈降素,補結抗体の玄llUji主l14難となる。又 1:3200から 1:800に王る :J段

    惜の車誌に位いて沈降主誌のみ説明された設は凝集

    債の{足下と千ifLて 17.9広から1.896にi或少した

    が, rll1結抗体のみ i場i生の設立逆に 4.596から 18.996~こま骨:JJI1した (Table 5)。

  • 56 喜え器皐研究

    τable 4. Correspondence between 3 Reactions observed on Sera of almost all Horses

    in Kaminokuni Village Where Equine Paratyphoid is prevalent.

    il i lillj ljlii :l ijlil

    il j i i l i:l ii ljl:li1l !? :し1111li[jlilU-l7211:!j !?;lili(;ljll2 i ll!jljl j l l l1j

    Age Group and others

    2

    3

    4

    5 and over

    Aborting Mares

    Or~hitis, Jointill, Fistura of Withers etc.

    Vaccinated Ma1'es

    Total ACP

    QJfoo

    /む10 O O

    968

    bFう

    rb

    ラ19179 147

    Azoo--・

    312

    747i,ιU

    FAUAa

    弓J

    414・

    つ』ヲιつム

    Note: A, C, P means Agglutination,Complement Fixation and Precipitation respectively.

    Table 5. The Lack of Correspondence between the Presence of Precipitins

    and Complement-fixing Antibodies at various Agglutinin Ti七1'e8.

    C. F. and Prec. C. F. Positive C.F.aNned zative No. of Sera Agglutinin Titre

    Both Positive i !Both Nezative Pree-aNned gative Examined P1'ec. Positive

    1 : 3200 46(68.6%) 6( 9.0%) 3 ( 4.5が) 12U7.9ガ) 67

    1: 1600 33 (20.1μ) 103 (62.8μ) 20 (12.2が) 8( 4.9%) 164

    1 : 800 2 ( 1.2%) 128 (78.1 ')の 31 (18.93';) 3 ( 1.8が) 164

    C. F. = Complement fixation.

    小 話 MJパラチフス流行農村ーの会話から

    採血して昂L詰反感を賓施Lてみると,戸:j凝集ffZを

    有するものが少くない。年齢別に克ると 2或おが

    最も高率に出i凝集債を示し, .lJJ流産}去による感染

    率の高いことを示唆している。 i主主kUJ, 現症民

    〈馬パラチフス症扶)f土品凝集慣のものが長率であ

    ったG

    1 : 6400以上の尚凝集債を示す鹿市江沈降素

    補結抗体共にほぼ-"1三行して l~易性を示すが, 1: 3200

    以下で、立議集11'lの託下と千行して 2反感共珍性の

    ものが増加する。凝集fflのrihf.正に拘わらす:;2反症

    が平行して陽性である弓"合は U~ III立に主主ぺた

    質検民に於ける各抗抹の治長態度から見てとれを

    感染中期にあるものと推定L得るが 2反感共詮

  • 平戸,清水,佐藤,ヂ藤一一馬パラチアス白血清診麟に闘する研究 57

    牲を示すような場合に款ては弐立に於て考察をち11

    えることとする。

    v.考接

    .I.Mパラチフスむ流行地である上の関村の農民

    玲ど全部に説いて 3和血詰反[主を調べた結来,血

    清i多額によって451皆、のイリ号を判主することの容易ならざるととを会Il""'-.-Jた。 llllち採集部 Iこ g~: て上の

    同付の:~.UJf乙於ける分布を見れば 1 : 800---1: 1600

    を示す11Jの設は年齢の進むにつれて次第に士宮方I1L

    5歳以上の.Ihで、は 208/279.ll¥Jち 74.696に達する。

    之守;の凝集ift を告する.I.!J jt主従~~行われている宇0:1ι

    標準に従えば疑担又は感染jJJとして判定される結

    果となる。従来日J流産主iの感染とその凝集積との

    蹴係に説て泣充分な桧討が行われて民ら宇,従っ

    て現在診断の基準と主立っている撮集17iの限界に設

    ても'\葉主な吟n~を必要とするとと泣言うまでもな

    い。 1: G400 J),J二の出ji凝集慌を右するお血清は同

    時に沈降系ーや拍結抗体もよく千1]Lて;TIiI町され,宣除jJJに引いて各抗休の治以態度を桧京 Ltcn完結

    から甘口一てかカ,る:;科抗体の11~1前りている訟j民主

    約)!~\,がな ZTiit主t-Hk態にあることを.-tí!~~ιLf¥}ると必r.. ノ。

    1 : :i20ο以下の誠集ifTになると二大江Hこ他の 2

    反能;の千iよれが欠われ, 1: 800 ---1 : 1600では抱の

    2反[むはた多設に於て位十iiを示 L,慌に一部。も

    のが 2t豆J.f;Îl~~JI; ~こ li刻、t又は {nJ .r Lか ~.J;のみ|号tt反I.fl1.\

    を主ーするに過ぎない。古ーカミる r~l :然材料に於ける 3

    反誌の現われ);を吟味するには貫験i誌に於て観察

    しf!}./(こ各抗体の泊以窓!支を参考する必要がある o

    l!1lち,人工感染防 (No.5, 7, 10)の感染一設約一校

    復の各i引こ民て之写抗体の治長態度を J嘉手Jすれ

    ば, 1.感染者j旦I~には編集債の上昇と始ど fij)時又は

    ややuれて沈降素が現われ,締結ti工作のtH現は多少遅れる傾向がある。 2.感染後 2週.L:J,J-.を経過 L

    た感染 r~1 家には各抗旅立 11'.揃い,たとえ i凝集債の

    上封・が 1: 800-1 : 1600 ,乙止まワても,沈降及び;:fIll

    結抗休止i場'1'1.をJZする。 3.快復具1:には沈持率二の下

    降治夫が主主も平く,告IJ結抗体は之より遅れて治夫

    するか或法低い抗体債を持続し凝集1由主下降はするが,感染i誌のflfU乙辻却々復却しない。

    以上のような賓験民の抗体治長態度から野外

    おに於ける血清反詮;の成績を考究してみると, {笈

    集{買が 1:800,....,,1: 1600であっても抱の 2反底が

    共に陰性又段何れか一方がi揚牲の場合にはそれら

    の1[1i!休は除流産菌の活動期にあるか,'v t;;.くとも感染経過のある時期に該常するものと見倣し度い。

    しかし他の 2t乏症が共に陰性の場合には之を如何

    に解科するかがiiij題となる。かかる例に討して立

    感染をi読過して凝集素のみ残存する歌態とも鮮し

    狩るし, 又←・方との耗!支のi畳一集1}U工1¥ll11本:-:;1;::による正常採集{廷の範i主!と見倣すととも可能で、あろう。

    かくの如く凝集慣のみを目、てする血法み毒rr法

    を刀、てすれば 1: 800"-' 1 : 1600程度の慌を引する

    ものの判定に困惑せさやるを作ない。之に反して多

    i喪主r;.t't抗原を,Lj,てする沈降反庄は病勢の在移に悲じて新:UJjな詰長 rIÌJ*Jj~を抗き,感染から挟復までの

    時JP的経過をある税!支点現するものの如く見交け

    られる。l!iJち本抗作は感染初耳11には,採集債の上

    昇と iまIl'.il三行して出現し, jさ3itrt~ 耳目 i亡;主凝集 fftが

    1 : 800 --1 : 1600 tこ止圭サても ;Ki1明され, 又快復J~I'に J主訟も f{ くー下降治ヅとする。沈降系二の治たした

    時 !~I'に j与を摂役 L , 1本内 rÆ~うよ告を検主主したWIJで、は

    fuJ .rしも í~Wî を 1&I~j Lfつないのに反して,沈持者の

    な主主主;:IfJjされる時期!にf本内菌分布を検索した場合

    は l,2のi1キ己!弘文l土臓器から誌を+金IHLi'.!'た。 三

    の三と i工沈降三lj-の1fH~が{本内に於けるWAの治主btJ:

    と時d連ttを右するととを窺わしめるものと:JJきえる。

    桧とのtI的は現在その動物が博染源となるか否か

    を決定すると三とが:主体で、あるから 11争時法として

    辻常然とのH的に添う手技を選ばなければならな

    い。之等の担誌かちすると,沈降反lまは凝集反誌

    によ七ぺ1I}jかに手IJ誌を訂するものと三い作る。 i誌に

    TじLA凶 E写2)は B( )lVI~ 完杢抗原をよ文てする沈降

    反肱をチフス,パラチフスのj診訴にI試み,キょ反詑江主

    WiDAL 反J.fQ{によとぺ臨床;及び五iH菌率的所見により

    よく迫合するものとしてその珍軒Uifu'(を認めている。我々のfうた成絞は TじL:¥SNE守;の込解に;まぽ

    一致するものである。

    以上の結果から我々は多摂類性抗原を以てす

    る沈降!均的iJヰパラ Tアスの虫清;多額上賞JU1財{[を{jするととを北引UL度い。

  • 5g 獣 謹準研究

    VI.詩、 話

    幼駒パラチフス症のモデル'として生後 6--7

    ヶ月の幼駒に長流産菌を微量経口投輿し症般に

    軽重;の手tiはあるが全例に感染を成:ff?せしめ符た。

    之等の室験伊jに頭、て感染一護主E-扶-復の全粧過を逐日 ~Iせに持血し援集素,沈降素,補結抗体の治長

    を追及し本症の1血清率的診断に封する基礎知見を

    担ょうと試みた。又本症の流行ー農村の殆ど全J詰

    から採血し 3種血清反感を震施Lて賓験併に於け

    る各抗体の泊長態度から野外民血清の反底結果に

    主JL検討を加えた。以上の成績を要約すれば弐の如くでるる。

    1. 感染初期に於ける 3者抗体の出既成主主立,

    議集債の上昇と同時又はやや返れて沈降議が現わ

    れ者11結抗体は前者よち~れて出現する(第 3 表,

    第 2--5t司¥0

    2. 感染中期に珪:すれば 3程抗体は平行して

    出現し最高植を示す。{!lL抗掠摂は;m-~朕の較rJi:に

    樹{系があり,事fi{愛護病例に於ては抗体{買もf足弱で

    るる (tr~ 3去)。

    :i. 実複耳J~には各抗体慣は{nJれも下降L始次う

    るが,沈持素の降下治夫J主主主も 1,1.く,締結抗体は

    沈降素よりjl{tLて治夫し又はf迂債を持続する。凝集f買は弐第に下降するが感染誌の僚に段却々復島!?

    しない{第 3去,第 2--5f尚D。

    4. 屠殺時沈降反!志陰性の .EJ持~fスすから注 j石流

    産菌を検出し符ないのに反して,屠殺時友会沈降

    反肱i場牲を持続した 3例中 2191Jvこ於て], 2の淋巴

    笛i及び臓器から菌を捻吊した(第 2去)。

    5. 民バラチフス流行農村土.の岡村の全民に

    :~\A'.て 3 種血清反感を賓施した結果 1: 3200以上の

    尚凝集{買を示したもの辻 2歳馬に於て最も高率で

    あったが, 1: 800--] : 1600杭度の凝集積を示す馬

    は年齢と平行して増加し 5歳以上のおでは 74.6%

    が月上凝集債を示した(第 4去)。

    6. 1: 6400以上の議集債を有する血清は抱

    の 2反感もよく千行して高い抗体撰を示し,病気

    がな会活動性の扶態にあるものと推定される(第

    4:,女。

    7. 1: 3200以下の凝集債を示す血清でi土地

    の 2反底の平行性が凝集慣の低』下と千行して夫わ

    れ]: 800---1 : 16∞では退宇裁が2反車共陰性で

    ある。かかる現象の成誌iに款では更に今後の検討

    を必要とする(第 5表}。

    以上の事室かち民パラチフスの血清率的診断

    に蛍って凝集反悲をその手段とすれば, 1: 800---

    1: 1600程度の凝集摂を如何に判定するかに頗る

    国難性を感宇る。之に反して多額類抗原を以てす

    る沈降反悲は感染一愛病-快復の経過に器;じてそ

    の治長が鮮明で、あって,核復と共に沈降素法治夫

    する傾向を示す。沈降茂誌が陽性であることは感

    染から核復までの何れかの時真fjに該賞するものと

    見倣すことが出来ょう。従って沈降反悲は凝集,

    補給反悲上ちも利誌を千iし, ifJパラチフス診断の

    一手段たり得るものと考える。

    本研究ぽ支部省科事i式験研究?によったもの

    である。記して謝意を去する。な会ペーパークロ

    マトグラフ分析法に御援助を頂いた札松響大車iH商

    事教室佐々木総一氏に認識する。

    文 蔵

    1 )浸見: 琢コレラ菌毒性物質の研究1. 糖障体に就て,

    H本塁k醤塾雑誌, 5, 499 (1943).

    2) ANl)(), K. & Y. NAKM¥1じRA: Studies on the Vi an-

    tigen of typhoid bacilli IV. A new type of副 1・

    tityphoid vaccine. J,α.pan. J. E,哲:p.Med, 2う 149(19ラ1).

    3) Tuし岨NE,R. et M. A. KUHf.l¥L"tN: Etude des preci-

    pitines dans la fievre typhoide a l'aide d'antigenes

    puri告白.Rev. Imm., 5, 299(1939).

  • 2f-戸,清水,佐藤,伊蕗一一馬パテチフスの盛清診室長に闘する研究 59

    Resum会

    Equine paratyphoid is still prevalent in Hokkaido. Agglu tInation ReactIon is most widely used method

    of diagnosis, however, its interpretation in relation to the titre that may be obscrved is often difficult

    because of frequent presence of animals showing the intermediate titre such as 1 :800--1 : 1600. The

    presetlt standard of titre is considered to be positive at 1: 1280 and suspicious at 1: 640. Owing to

    diffcrences in technique, the titre of different laboratories m?y not be identical. Thus diagnosis by agglu-tmation test 1S not easy.

    The present authors carried out the following described experiments to ~ain some information on the

    present status of the dia~nosis of this disease.

    Salm・abortus-equiwith a dose of 7.:) million bacilli was administercd perorally into 8 foals aging 6"'-'7

    months (except one foal, 19 months oId¥. All of them were infectcd and some animals showed 士ypical

    symptoms and some sli~ht. One foal died of sepsis 13 days after infection. Throughout the course of

    the sickness. initial sta~e-evolution of disease-, convalescence, the rise and fall of ag~lutinins , precipitins and

    compfement-fixing antibodies were observed. Furthcrmore blood samples were taken from almost all

    horses in the village of Kamino七miwhcre equinc paratyphoid is prevalent, and the above three serum

    reactions were obsen'ed on these 519 sera.

    The results may by summarized as follows:

    1. At an initail stage of infection precipitin appears a little later or simultaneously with agglutinin

    and complement-fixing antibody rises later than the formcr (Tab. 3, .Fig. 2--5)・

    2. 1n the developing stage of infectIon the titres of the three kinds of antibodies rise to a maximum

    which is usuaIly attained between the 14th and 25th day after inoculation. However, the amount of antibody produced in response to infection varies with the slightness or severity of the symptoms. Usually

    the titre is low when the symptoms are slight (Tab.3)'

    :j. 1n the convalescent sta~e , the antibodies begin to fall. The precirtin falls most rapidly and disappears very soon. The complement-fixing antibody disappears Iater than the former or persists with a low titre.

    The agglutinin falls gradually but does not return to the titre of pre-infection (Tab. ~i , .Fig. 2--5).

    4. It should be noted that the abortion bacilli could not be detected from the foals slaughtereu when

    precipitin titre sunk to zero. On the contrary, the ba