Fertility Fertility CenterCenterCardito Cardito

Dott. Vincenzo VolpicelliDott. Vincenzo Volpicelli

azoospermia secretiva o non-ostruttivaazoospermia secretiva o non-ostruttiva

assenza di spermatozoi assenza di spermatozoi insufficienza ipofisaria (basso FSH)insufficienza ipofisaria (basso FSH)o insufficienza testicolare primitiva o insufficienza testicolare primitiva

(atrofia testicolare, elevato FSH)(atrofia testicolare, elevato FSH)Rari focolai di spermiogenesi solo a Rari focolai di spermiogenesi solo a

livello testicolarelivello testicolareAssenza di spz negli epididimi Assenza di spz negli epididimi

azoospermia secretiva o non-ostruttivaazoospermia secretiva o non-ostruttiva traumi testicolaritraumi testicolari orchite post-parotiticaorchite post-parotitica varicocelevaricocele criptorchidismocriptorchidismo IperpiressiaIperpiressia S. di Klinefelter 47,XXYS. di Klinefelter 47,XXY Anorchia bilateraleAnorchia bilaterale S. del maschio 47,XYY (Jacobs)S. del maschio 47,XYY (Jacobs) S. del maschio XX (sex-reversed sindrome)S. del maschio XX (sex-reversed sindrome) S. Willi-PraderS. Willi-Prader S. di SteinertS. di Steinert

azoospermia ostruttiva azoospermia ostruttiva

assenza di cellule seminali nell’eiaculatoassenza di cellule seminali nell’eiaculato normale trofismo testicolare normale trofismo testicolare FSH nei limiti della norma. FSH nei limiti della norma. Spermatogenesi regolare Spermatogenesi regolare normale virilizzazione normale virilizzazione fisiologici livelli di testosterone.fisiologici livelli di testosterone.

PESA, Percutaneous Sperm PESA, Percutaneous Sperm AspirationAspiration

PESA, Percutaneous Sperm PESA, Percutaneous Sperm AspirationAspiration

Indicazioni:Indicazioni:

azoospermia ostruttiva, azoospermia ostruttiva,

agenesia dei deferenti (CBAVD)agenesia dei deferenti (CBAVD)

ICSI ICSI Singolo sptz lavato immerso in soluzione 10% polivinilpirrolidone che impedisce i movementi dello sptz Il flagello è eliminato (ciò causa immobilizazione e aumenta la permeabilità della membrana spermatica, aumentando la decondensazione nucleare e PR

TECNICA PRELIEVO PESATECNICA PRELIEVO PESA epididimo fra pollice ed indice epididimo fra pollice ed indice anestesia localeanestesia locale aspirazione percutanea con aspirazione percutanea con

butterfly 21butterfly 21 contaminazione ematica contaminazione ematica Scarsa quantitàScarsa quantità evita interv chirurgicoevita interv chirurgico

MESA, Microsurgical MESA, Microsurgical EpididymalEpididymal Sperm AspirationSperm Aspiration

deferenti con flogosi cronica deferenti con flogosi cronica assenza congenita bilaterale dei deferenti assenza congenita bilaterale dei deferenti

(fibrosi cistica) (fibrosi cistica) eiaculazione retrogradaeiaculazione retrograda impotenzia coeundi impotenzia coeundi

• Microscopio operatore ingrandim 10x40•Positività di recupero spz: 46%

TECNICA PRELIEVO MESATECNICA PRELIEVO MESA anestesia generale;anestesia generale; Incisione longitudinale sacca scrotaleIncisione longitudinale sacca scrotale “”””””””””””””””””””””””””””” “”””””””””””””””””””””””””””” albugineaalbuginea fuoriuscita testicolo, emostasifuoriuscita testicolo, emostasi scelta gonfiore epididimiscelta gonfiore epididimi incisione sierosa epididimoincisione sierosa epididimo microincisione epididimo o microincisione epididimo o punturapuntura aspirazioneaspirazione, dalla ostruzione alla rete testis, con catetere , dalla ostruzione alla rete testis, con catetere

collegato a siringa da insulina contenente Ham’s F10 + 2% collegato a siringa da insulina contenente Ham’s F10 + 2% albuminaalbumina

a livello della testa dell’epididimo, solitamente, si ritrovano a livello della testa dell’epididimo, solitamente, si ritrovano gli spermatozoi dotati di maggiore motilitàgli spermatozoi dotati di maggiore motilità

sutura con prolene 6/0sutura con prolene 6/0 La completa assenza di spermatozoi, dopo ripetuti tentativi, La completa assenza di spermatozoi, dopo ripetuti tentativi,

è un’indicazione all’esecuzione del prelievo dal testicolo è un’indicazione all’esecuzione del prelievo dal testicolo (TESA, TESE, microtese)(TESA, TESE, microtese)

TECNICA PRELIEVO MESATECNICA PRELIEVO MESAVantaggi:Vantaggi: prelievo intratubulare sotto diretto controllo prelievo intratubulare sotto diretto controllo

visivo, visivo, corretta emostasi corretta emostasi prelevare gli spermatozoi da più siti. prelevare gli spermatozoi da più siti.

Principale effetto collaterale:possibile contaminazione del prelievo con

cellule ematiche.

TESA-FNA, Testicular Sperm TESA-FNA, Testicular Sperm Aspiration –Fine Neddle Aspiration –Fine Neddle

AspirationAspiration

TESA-FNA, Testicular Sperm TESA-FNA, Testicular Sperm Aspiration –Fine Neddle Aspiration –Fine Neddle

AspirationAspiration

prelievo degli spermatozoi o spermatidi prelievo degli spermatozoi o spermatidi per aspirazione mediante ago G 22-23 per aspirazione mediante ago G 22-23

collegato a siringa contenente 1 ml mediumcollegato a siringa contenente 1 ml medium Asse maggiore del testicoloAsse maggiore del testicolo testicolo bloccato fra indice e pollicetesticolo bloccato fra indice e pollice Positività di recupero: 54%Positività di recupero: 54% In caso di fallimento, TESE In caso di fallimento, TESE

TESE, Testicular Sperm TESE, Testicular Sperm ExtractionExtraction

Indicazioni:Indicazioni: Azoospermia non ostruttivaAzoospermia non ostruttiva Ipospermatogenesi Ipospermatogenesi Necrospermia Necrospermia S. di Klinefelter S. di Klinefelter Sertoly-cell-only Sindrome Sertoly-cell-only Sindrome Fallimento delle precedenti tecnicheFallimento delle precedenti tecniche

TECNICA TESETECNICA TESE anestesia generale o localeanestesia generale o locale incisione scrotaleincisione scrotale incisione sierosaincisione sierosa escissione frammenti escissione frammenti

testicolaritesticolari Divisione in frammenti 0.2-05 Divisione in frammenti 0.2-05

ml al M.O.ml al M.O.

TECNICA TESETECNICA TESE

ogni quota è stratificata su gradienti ogni quota è stratificata su gradienti (90%, 70% e 50%) e centrifugata a 300 (90%, 70% e 50%) e centrifugata a 300 giri per 20 minuti.giri per 20 minuti.

recupero della frazione al 90% recupero della frazione al 90% centrifugazione a 1800 g per 5 minuti centrifugazione a 1800 g per 5 minuti

con Ham’s F10 + albumina 2% con Ham’s F10 + albumina 2% incubazione pellet + 0.05 ml medium incubazione pellet + 0.05 ml medium

fino al momento della ICSIfino al momento della ICSI No crioNo crio

TESE TESE percentualipercentuali medie di medie di recupero recupero

biopsia biopsia singolasingola 42%42%

biopsie biopsie multiplemultiple 52%52%

Rischio TESERischio TESE

cariotipo normale cariotipo normale anormalità cromosomicheanormalità cromosomiche % spz con centrosomi % spz con centrosomi

danneggiati o immaturidanneggiati o immaturi % embrioni con mosaicismi % embrioni con mosaicismi

MICROTESEMICROTESE

Prelievo microchirurgico Prelievo microchirurgico microscopio operatore 15-24xmicroscopio operatore 15-24x nei punti più irrorati nei punti più irrorati ≈≈30 microtubuli seminiferi 30 microtubuli seminiferi viene evitato il danneggiamento del viene evitato il danneggiamento del

restante tessutorestante tessuto

day-surgeryday-surgery

Congelamento Congelamento spermatozoi spermatozoi

programmare pick-upprogrammare pick-up annullare il pick-upannullare il pick-up