アルボウイルスレフ レンスセンタ 会議 2014アルボウイルスレファレンスセンター会議 2014

• デング熱、チクングニア熱輸入例情報

• Zika熱 ロスリバー熱輸入症例についてZika熱、ロスリバ 熱輸入症例について

• デング熱ドイツ人輸出症例について

• 2013年、日本脳炎患者報告について

• 日本脳炎を含む検査法に関して• 日本脳炎を含む検査法に関して

国立感染症研究所 ウイルス第一部 第2室高崎智彦、田島茂、モイ メン・リン、中山絵里、池田真紀子、小滝徹& 西條政幸

第35回衛生微生物技術協議会2014年6月26－27日 タワー船堀

EightEight aarbovirusrbovirus centers in Japancenters in JapanEight Eight aarbovirusrbovirus centers in Japancenters in Japan

Miyagi

K b

Tokyo

Kobe

Hiroshima

Kumamoto

Nagoya

MieOsaka

INFORMAL CONSULTATION  TO PREPARE A DRAFT ACTION PLAN FOR THE ESTABLISHMENT OF AN EQA PROGRAMME  FOR THE DIAGNOSIS OF DENGUE VIRUS  AND OTHER EMERGING INFECTIOUS DISEASES.

The Fifth Informal Consultation on WHO Regional and Global i li d b i i h ifi iSpecialized JE Laboratories in the Western Pacific Region, 

Tokyo, Japan, 22‐23 November, 2013

22 November 2013, Friday

Session V. JE surveillance, prevention/control and lab activities at

Time Topic Speaker

subnational level

Introduction of subnational level activities in China Provinces

Introduction of subnational level activities in Japan prefectures名古屋市衛生研究所大阪府立公衆衛生研究所

Introduction of subnational level activities in Korea

2013&2014 デング熱輸入症例

2013 2014

デングウイルス用TaqMan法の改訂3型を変更

Primer andProbe 

Sequence(5’‐3’) Size(bp) Gene

DEN‐3(4P)F GGA CTG GAC ACA CGC ACT CA

73 E prMDEN‐3(4P)C CAT GTC TCT ACC TTC TCG ACT TGT CT

DEN3 B FAM ACC TGG ATG TCG GCT GAA GGA GCT TGDEN3p‐Bar FAM‐ACC TGG ATG TCG GCT GAA GGA GCT TG‐TAMRA

3’ NTR5’ NTR 3 NTR5 NTR

NS2B NS4AC prM E NS1 NS2A NS3 NS4B NS5

TaqMan D3set 1 ATGAGATGYGTGGGAGTRGGAAAC AGATTTTGTGGAAGGYCT AGCTACGTGGGTTGAHGTGGTG 64

Forward Primer Reverse PrimerProbeTaqMan D3set 1 ATGAGATGYGTGGGAGTRGGAAAC--AGATTTTGTGGAAGGYCT------AGCTACGTGGGTTGAHGTGGTG 6410-74 D3 1 ATGAGATGTGTGGGAGTGGGAAACAGGGATTTTGTGGAAGGTCTGTCAGGAGCTACATGGGTTGACGTGGTG 72KIX13-21 D1 Tanzania 1 ATGCGATGTGTGGGAATAGGCAACAGGGACTTTGTGGAAGGACTGTCAGGAGCAACGTGGGTAGATGTGGTA 7207-88 D1 1 ATGCGATGCGTGGGAATAGGCAGCAGGGACTTCGTGGAAGGACTGACCGGGTGGATGTGGCTACTGGAGGCA 72

従来の1型では一致しない配列

古典的古典的RTRT‐‐PCRPCR用プライマー配列用プライマー配列primer sequence gene size(bps)

D1s GGACTGCGTATGGAGTTTTG E 490

D1c ATGGGTTGTGGCCTAATCAT NS1D1c ATGGGTTGTGGCCTAATCAT NS1

DV2s AGRTTYGTCTGCAAACACTCC E 231DV2c GTGTTACTTTRATTTCCTTG

New D2 プライマー

D2s GTTCCTCTGCAAACACTCCA E 230D2c GTGTTATTTTGATTTCCTTG ED2(TR)s GCATAGAGGCTAAGCTGACC E 263D2(TR)s GCATAGAGGCTAAGCTGACC E 263

D2(TR)c AAGGGGACTCACTCCACAAT E

D3s GTGCTTACACAGCCCTATTT E 320

D3c TCCATTCTCCCAAGCGCCTG NS1

D4s CCATTATGGCTGTGTTGTTT NS2a 398

D4c CTTCATCCTGCTTCACTTCT NS2bD4c CTTCATCCTGCTTCACTTCT NS2b

Dus TCAATATGCTGAAACGCGCGAGAAACCG C 511

Duc TTGCACCAACAGTCAATGTCTTCAGGTTC PreM

D1,2,3,4;dengue type 1,2,3,4 s;sense primer, c;complimentary primer, u;universal primer

日本脳炎ウイルス リアルタイムRT‐PCR（ 法）プ イ プ ブ（TaqMan法）プライマー、プローブ

P i & P b S (5’ t 3’) R iPrimer & Probe Sequence (5’ to 3’) Region 1&3型遺伝子検出共通セット

JENS5s269AF092550 GCC ACC GGA TAC TGG GTA GAJENS5s269AF092550 GCC ACC GGA TAC TGG GTA GANS5JENS5r330AF092550 TGT TAA CCC AGT CCT CCT GGA A

JENS5p294AF092550 FAM-CTG CCT GCG TCT CA-MGB 1型遺伝子検出セット

JE1&3en1052s-1082 ATG GGA ATT AYT CAG CGC AAG TEJE1en1119c 1082 GGG AGC GTT TGG AGT TAC AGT AA EJE1en1119c-1082 GGG AGC GTT TGG AGT TAC AGT AA

JEen1082pb FAM-CTC AAG CAG CAA A-MGB 3型遺伝子検出セット

JE1&3en1052s-1082 ATG GGA ATT AYT CAG CGC AAG TEJE3en1119c-1082 AGG AGC ATT GGG TGT TAC TGT AAA

JE3 1082 b FAM CCC AGG CGG CAA A MGBJE3en1082pb FAM-CCC AGG CGG CAA A-MGB

ロスリバ－ウイルスロスリバ－ウイルス realtimerealtime RTRT‐‐PCRPCR（（TaqManTaqMan法）法）プライマー、プローブプライマー、プローブ

Primer & Probe Sequence (5’ to 3’) Region

RRV/NSP3/F CCG TGG CGG GTA TTA TCA ATRRV/NSP3/F CCG TGG CGG GTA TTA TCA AT

NSP3RRV/NSP3/R AAC ACT CCC GTC GAC AAC AGA

RRV/NSP3_probe AAT AAG AGT AGT GTA GCC ATC C

Ref. Reed S. Shabman et al. JV 82. 12374‐12382, 2008,

Zika virus realtime RT‐PCR (TaqMan)( q )Primer

Genome posi on† Sequence (5′ → 3′)

Sensitivity, no. copies Specificity

ZIKV 835 835–857 TTGGTCATGATACTGCTGATTGC

100ZIKV 911 911 890 CCTTCCACAAAGTCCCTATTGC 100 ZIKVZIKV 911c 911–890 CCTTCCACAAAGTCCCTATTGC

ZIKV 860‐FAM 860–886 CGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAG

ZIKV 1086 1086–1102 CCGCTGCCCAACACAAG

25 ZIKVZIKV 1162c 1162–1139 CCACTAACGTTCTTTTGCAGACAT

ZIKV 1107‐FAM 1107–1137 AGCCTACCTTGACAAGCAGTCAGACACTCAA

Lanciotti RS, Kosoy OL, Laven JJ, Velez JO, Lambert AJ, Johnson AJ, Stanfield SM, Duffy , y , , , , , , yMR. Genetic and Serologic Properties of Zika Virus Associated with an Epidemic, Yap State, Micronesia, 2007. Emerg Infect Dis. 2008;14(8):1232‐9. 

2013年日本脳炎患者情報2013年日本脳炎患者情報

報告都道府県 検体受理日報告都道府県（推定感染地）

発病日検体受理日（感染研）

年齢（代） 転帰

熊本県 8月16日 － 60‐65歳熊本県 8月16日 60 65歳長崎県 9月7日 － 80‐85歳 死亡

三重県 9月10日 NA 70‐75歳三重県 9月10日 NA 70‐75歳熊本県 9月3日 － 85‐90歳岡山県 9月5日 10/8 75 80歳岡山県 9月5日 10/8 75‐80歳京都府 9月22日 10/2 65‐70歳兵庫県 8月30日 10/8 65 70歳兵庫県 8月30日 10/8 65‐70歳徳島県 9月6日 10/17 75‐80歳 後遺症*京都府 8月25日 11/20 70 75歳 死亡京都府 8月25日 11/20 70‐75歳 死亡

JE Patients

Subject: DENGUE VIRUS INFECTION - GERMANY ex JAPAN -

F G tél B dikt [ ilt G t l B@ ki d ] O B h lf Of IHR P tf h RKIFrom: Greutélaers, Benedikt [mailto:GreutelaersB@rki.de] On Behalf Of IHR-Postfach, RKISent: Tuesday, January 07, 2014 5:48 PMDear colleagues,we would like to inform you about a case of dengue virus infection in awe would like to inform you about a case of dengue virus infection in a German traveler returning from Japan (Honshu). Because a case of dengue fever imported from Japan was considered very unusual,

fi ti f d l ht d fi ll bt i dconfirmation from a second serum sample was sought and finally obtained in late 2013. We wanted to await the results of the second serum sample before informing you. The colleagues from the Bernhard Nocht Institute of Tropical Medicine, Hamburg, Germany, the National Reference Center for Tropical Infections, who performed the laboratory tests on the first and second serum sample, will also post this event to Promed-Mail.p , p

Contact person is Prof. Klaus Stark at the Robert Koch Institute in Berlin, Germany (starkk@rki.de).With kind regardsOn behalf of the Robert Koch InstituteOn behalf of the Robert Koch-InstituteBenedikt Greutélaers

情報提供のメール

本症例に関するまとめ（１）本症例に関するまとめ（ ）• ドイツ帰国後、3日目に発病している。

実験室診断 結果ら デ グ熱 ある と ま• 実験室診断の結果ら、デング熱であることはまず間違いがない。→中和試験で2型感染まで

確定している。（血清を分与してもらい感染研でも検査中）でも検査中）

• 往復ともに直行便である。

• 機材（航空機）は成田‐フランクフルト間以外にはニューヨーク、サンフランシスコ便として用には ヨ ク、サンフランシス 便として用いることがある。たまにドバイに使用することがあるある。

空港デングの可能性もあるが、日本で感染した可能性は高い！

本症例に関するまとめ（２）本症例に関するまとめ（２）• 多くのデング熱患者は蚊に刺された記憶がな

い。また、デング熱の潜伏期は３～7日程度

であることが多い。日本で感染したとすると旅であることが多い。日本で感染したとすると旅程の後半である京都、東京で感染した可能性も考えるべきである性も考えるべきである。

• 日本国内で患者が確認されていないが、夏期にデング熱様患者が来院しても、海外渡航歴がなければ、まず医師はデング熱を考えな歴がなければ、まず医師はデング熱を考えない。したがって10～20人程度の小流行がおこっても見過ごされる可能性はあるこっても見過ごされる可能性はある。

ま と めま と め

• 九州地方以外の地域では、急性脳炎を診察し も必ずしも 本脳炎 検査を提診察しても必ずしも日本脳炎の検査を提出しない。出しない。

• デング熱が日本国内に定着すると、デンググウイルスの検査も必要になる。海外流行地からの旅行者（観光客）によるデン行地からの旅行者（観光客）によるデングウイルス持ち込みの可能性もある。