PENGARUH JENIS PELARUT EKSTRAKSI TERHADAP TOTAL KADAR POLIFENOL DAN AKTIVITAS BIOLOGIS DARI TAMARIX APHYLLA (L.) Karst.

AbstrakMetabolit sekunder dari pohon arabo - Sahara Tamarix aphylla ( L. ) Karst . Di ekstrak dari serbuk daun kering dengan pelarut yang berbeda : metanol air ; etanol air , aseton air dan air suling . Kandungan total fenolik dari empat ekstrak ditentukan dengan metode Folin Ciocalteu dan aktivitas antioksidan mereka diuji melalui aktivitas radikal secara in vitro menggunakan DPPH assay . Hasil penelitian menunjukkan bahwa campuran air - metanol lebih baik daripada air - etanol , air - aseton dan air untuk ekstraksi senyawa bioaktif khususnya jumlah polifenol dari daun Tamarix aphylla . Total rata-rata kadar fenol ekstrak metanol air ini 262.26 mg GAE/100g berat kering ekstrak lyophilized. Meskipun semua ekstrak adalah inhibitor radikal bebas tetapi ekstrak aseton air lebih kuat daripada ekstrak etanol air dan dua ekstrak lainnya. Dalam rangka efektivitas ( EC50 ) , inhibitor yang ampuh berasal dari ekstrak air - aseton ( 0.080mg/ml ) > ekstrak air etanol ( 0.140mg/ml ) > ekstrak air ( 0.173mg/ml ) > Air - metanol ( 0.911mg/ml ) KATA KUNCI Tamarix aphylla, polifenol, radikal bebas, DPPH, aktivitas antioksidan

PENDAHULUANPenelitian telah meningkat di seluruh dunia dan sebagian besar dari bukti telah dikumpulkan untuk menunjukkan potensi besar tanaman obat yang digunakan dalam berbagai cara tradisional. Nilai medis tanaman ini terkait dalam komponen fitokimia mereka yang menghasilkan kegiatan fisiologis tertentu pada tubuh manusia. Yang paling penting dari komponen ini adalah alkaloid , tanin , flavonoid dan senyawa fenolik. Beberapa herbal telah dilaporkan menunjukkan aktivitas antioksidan dan sumber potensi besar dari antioksidan adalah polifenol. Pelarut dan variabel proses harus hati-hati dipilih untuk mengoptimalkan ekstraksi mereka. Hasil ekstraksi dan aktivitas antioksidan ekstrak sangat tergantung pada polaritas pelarut yang menentukan keduanya, baik kuantitatif dan kualitatif senyawa antioksidan yang diekstraksi.Kadar polifenol dan senyawa fitokimia di Tamarix aplylla Aljazair tidak diselidiki . Ini adalah laporan pertama pada kadar polifenol dan aktivitas biologis dari pohon Sahara Aljazair; Tamarix aphylla ( L. ) Karst. Jenis ini oleh penduduk lokal disebut " Tarfa " atau " Athl " ; ini adalah pohon cemara yang cepat tumbuh , gurun pasir populer dan itu didistribusikan seacara luas di sahara Aljazair . T. aphylla digunakan sebagai obat-obatan herbal seperti diuretik , karminatif , anti - inflamasi dan untuk pengobatan hematoma intern. Benih bernama " Takormest " yang merupakan Galle dari kupu-kupu kecil digunakan untuk mencoklatkan kulit . Dalam jurnal ini, kami mempelajari ekstraksi polifenol dan aktivitas antioksidan dari etanol , metanol , acetonic dan ekstrak air dari daun Tamarix aphylla dan mendiskusikan beberapa hasil ekstraksi polifenol dan DPPH aktivitas pengumpulan, yang dipengaruhi oleh beberapa jenis pelarut. Penelitian kami dilakukan untuk mengoptimalkan kondisi ekstraksi dari total kadar fenolik menggunakan Folin Ciocalteu Metode .BAHAN DAN METODEBahan tanaman Daun Tamarix aphylla ( L. ) Karst . ( Keluarga : Tamaricaceae ) dikumpulkan dari Adrar ; daerah Sahara di Selatan Aljazair .EkstraksiDaun dikeringkan dalam oven dan digiling menjadi serbuk kering yang seragam . Ekstrak disiapkan menggunakan empat pelarut : etanol ( 70 % ) , methanol ( 70 % ) , aseton (70 %) dan air suling . Secara singkat untuk masing-masing pelarut , 100g serbuk kering diekstraksi dengan 1000ml pelarut secara maserasi pada suhu kamar selama 48 jam . Kemudian, filtrasi masing-masing campuran melalui N 1 kertas whatman dan kertas saring ( 0.45m porositas). Filtrat yang terkumpul dikeringkan secara terpisah pada suhu 50 C menggunakan Laborota 4000 rotary evaporator. Residu dari masing-masing ekstrak pelarut dilarutkan dalam air , bekukan dan lyophilized ( CHRIST - ALPHA 1-4 Lyophilizator ) . Air, aceton air, methanol air, etanol air, dan serbuk kasar ekstrak digunakan untuk menyelidiki senyawa fitokimia , penentuan total kadar fenol dan untuk skrining antioksidan .Skrining fitokimiaKomponen fitokimia ekstrak yang berbeda dari T. aphylla disaring menggunakan metode Farnsworth, Harbone, Rizk , Alyahia dan Silva dan al. komponen yang dianalisis adalah : flavonoid , tanin , alkaloid , antrakuinon , saponin , kuinon bebas , glikosida jantung , sianogen glikosida , steroid , terpenoid , mengurangi gula dan getah.Jumlah kadar fenolTotal Kandungan fenol (TPC) dari berbagai macam ekstrak daun Tamarix, ekstrak air-metanol (WME); ekstrak air-aseton (WAE); ekstrak air-etanol (WEE) dan ekstrak air (WE) dilakukan dengan uji kolorimetri sesuai dengan metode yang dijelaskan oleh Velioglu dan al. menggunakan reagen Folin Ciocalteu fenol yang memiliki absorbansi dari pengembangan zat warna ditetapkan sebesar 725nm. Secara singkat , untuk masing-masing ekstrak , 1ml ekstrak kasar dilarutkan dalam methanol dicampur dengan 7.5ml reagen FC ( diencerkan 10 kali lipat ) , campuran dibiarkan pada suhu 22 C selama 5 menit , kemudian ditambahkan 7.5ml Na2CO3 ( 60g / l ). Absorbansi dibaca setelah 90menit dalam spektrofotometer UV / Vis . ( Shimadzu UV Mini 1240 ) . Total senyawa fenol yang ditentukan dengan menggunakan kurva standar disusun dengan asam Galat . Hasil dinyatakan sebagai mg GAE ( Setara Asam Galat ) per 100g kering berat ekstrak kasar terliofilisasi. isi fenol dilakukan dalam tiga rangkap.Aktivitas antioksidan : Uji DPPH Liofilisasi ekstrak air-metanol (WME); ekstrak air-aseton (WAE); ekstrak air-etanol (WEE) dan ekstrak air (WE) dan dilarutkan dalam metanol . Uji antioksidan ditentukan dengan DPPH . Larutan DPPH dibuat dengan melarutkan DPPH dalam metanol , untuk setiap 3.9ml ekstrak dari 6x10-5 M metanol DPPH ditambahkan ekstrak 0.1ml ( konsentrasi yang berbeda di uji ) . Absorbansi ditentukan setelah 30 menit pada 515nm menggunakan spektrofotometer . Aktivitas penghambatan persentase dihitung dari { [ ( Ac - Di ) / Ac ] x100 } , di mana Ac adalah absorbansi kontrol dan At adalah absorbansi ekstrak . penghambatan kurva disiapkan dan nilai-nilai IC50 didefinisikan sebagai jumlah antioksidan yang diperlukan untuk mengurangi DPPH awal ditentukan konsentrasi sebesar 50 %.HASIL DAN PEMBAHASANTotal rata-rata kadar ekstrak fenol Tamarix aphylla diuji untuk setiap jenis pelarut terdapat dalam tabel 1. Ekstrak fenolik tanaman selalu mengandung komposisi yang berbeda tiap golongan fenol , yang dapat larut dalam suatu pelarut. Penggunaan suatu larutan alkohol memberikan hasil yang memuaskan untuk process ekstraksi . Pelarut Alkohol cair adalah pelarut terbaik untuk ekstraksi senyawa fenolik dari daun Tamarix aphylla. Pekarut cair Aseton dan air tidak efisien untuk ekstraksi jumlah fenol dari tanaman daun diteliti. Rata-rata kandungan total fenol ( mg GAE / g ekstrak kasar ) ekstrak metanol encer secara signifikan besar ( 262.26mg / g ) dibandingkan cairan aseton , ekstrak air ( 165.12mg / g , 115.37mg / g ) dan lebih baik dari ekstrak cairan etanol ( 199.54mg / g ) . Penggunaan campuran alkohol dan air memberikan keuntungan dari modulasi polaritas pelarut alkohol , juga meningkatkan kelarutan polifenol terutama tergantung pada gugus hidroksil, ukuran molekul dan panjang molekul.

tabel 1Kandungan perbedaan total ekstrak fenol dari daun aphylla T.Hasil penyaringan fitokimia menunjukkan tidak adanya alkaloid dalam semua ekstrak, maka kehadiran yang luar biasa dari tanin dalam tanin terhidrolisa. Metabolit lainnya dan senyawa bioaktif diidentifikasi seperti flavonoid, glikosida jantung, steroid dan terpenoid. Juga tidak mendeteksi glikosida sianogen dan saponin (Tabel 2). tabel 2Senyawa fitokimia diidentifikasi dalam ekstrak yang berbedaPengamatan lain yang luar biasa adalah bahwa hasil yang lebih tinggi dari ekstrak ditunjikan dengan pelarut air metanol , dilanjutkan dengan pelarut air . Hasil ini ( Tabel 1 ) memberikan rincian dan menjelaskan total senyawa fenolik yang lebih tinggi ketika menggunakan pelarut organik pelarut ( alkohol )polaritas dimodifikasi dengan air . Campuran ini menjadi ideal dan selektif untuk ekstrak sejumlah besar bioaktif senyawa fenolik . Sedangkan air memberikan hasil yang lebih baik, tetapi hanya tidak baik untuk mengekstrak polifenol . Ekstrak air hanya larut dalam air senyawa bioaktif ; apalagi banyak sisa zat lainnya dan pengotor yang hadir dalam ekstrak air . Tampaknya dari pekerjaan kita bahwa beberapa fenolik senyawa dan lain-lain senyawa memiliki efek farmakologi yang menarik dari daunTamarix aphylla yang tidak hanya diekstraksi dengan air adalah mengapa campuran hydroalcoolic cocok untuk mengekstrak bioaktif yang berbeda senyawa . Dalam pekerjaan kami , campuran metanol dengan air adalah pelarut terbaik dari campuran etanol dengan air untuk mengekstrak senyawa fenolik dari daun Tamarixaphylla.Radikl stabil , difenil pikrilhidrazil ( DPPH ) Telah banyak digunakan untuk penyaringan zat dengan aktivitas potensial. Antioksidan diukur sebagai efek pewarna setelah menjebak elektron dari gangguan DPPH . nilai yang lebih rendah IC50 menunjukkan aktivitas antioksidan tinggi . Hasilnya ditunjukkan pada gambar 1 . Semua ekstrak disajikan melalui suatu kegiatan pembersihan yang baik, tetapi maserasi menggunakan aseton cair sebagai pelarut , cairan etanol dan air menunjukkan aktivitas antioksidan yang kuat . Kegiatan ini dalam urutan menurun berikut adalah : ekstrak cairan aseton ( 0.080mg/ml 0,00064 ) > cairan etanol ( 0.140mg/ml 0,00129 ) > ekstrak air ( 0.173mg/ml 000.103 ) > ekstrak metanol air ( 0.911mg/ml 0,01188 ) . Dalam pekerjaan kami , ekstrak minyak mentah daun Tamarix aphylla diperoleh dengan cairan aseton memiliki Kapasitas pembersihan yang kuat dan kuat terhadap uji DPPH radikal bebas , Sedangkan dengan pelarut yang sama , kami mencatat isi terendah polifenol dibandingkan dengan pelarut lain diperoleh dengan metode Folin Ciocalteu. Sebaliknya, ekstrak metanol air memiliki kandungan total fenol lebih tinggi dari air etanol, air dan ekstrak aseton cair, tapi itu tidak menunjukkan aktivitas antioksidan tertinggi dari tiga ekstrak lainnya. Hal ini memungkin dalam konteks ini senyawa fenolik yang ada dalam ekstrak aseton cair memiliki struktur yang ideal untuk pembilasan radikal bebas karena mereka menyajikan sejumlah hydroxyls yang bertindak sebagai donatur hidrogen yang membuat mereka penting dan antioksidan yang sangat kuat.Gambar 1Pembilasan dari keempat kapasitas ekstrak daun T. aphylla dinyatakan dalam persentase yang berbeda pada konsentrasi (a : ekstrak air ; b : ekstrak etanol cair , c : ekstrak metanol cair ; d : ekstrak aseton cair )Penelitian kami menjelaskan dengan jelas mengapa untuk setiap pelarut diambil secara individual , kandungan total fenol ditentukan oleh uji FC menunjukan dengan baik sebuah hubungan dengan aktivitas antioksidan , tetapi tidak untuk membandingkan antara ekstrak yang diperoleh dengan berbagai pelarut . Hasil yang berbeda ditemukan dalam literatur , sedangkan beberapa penulis menemukan hubungan antara total konten fenolik dan aktivitas antioksidan , namun yang lain tidak menemukan hubungan aktivitas antioksidan . Ekstrak sangat tergantung pada pelarut karena potensi antioksidan yang berbeda dari senyawa memiliki polaritas yang berbeda dan uji FC memberikan Perkiraan kasar dari total senyawa fenolik yang terkandung dalam ekstrak . Tetapi tidak spesifik untuk polifenol , banyak senyawa campur dapat bereaksi dengan reagen memberikan peningkatan konsentrasi yang nyata dari fenolik . Selain itu , berbagai senyawa fenolik memberikan respon berbeda dalam pengujian ini , tergantung pada sejumlah kelompok fenolat yang di miliki dan kandungan total fenolik tidak memberikan antioksidan yang pasti yang mungkin terkandung dalam extrak . Dalam penelitian ini jika metanol muncul maka ideal untuk ekstrak dengan jumlah senyawa fenolik yang tinggi, aseton adalah pelarut ideal untuk ekstrak bioaktif senyawa dari daun Tamarix aphylla dengan aktivitas antioksidan yang potensial.KESIMPULANDalam setiap penelitian Phytotherapy ,hal ini diperlukan untuk memilih pelarut yang sesuai dengan aktivitas biologis yang diperlukan dan bukan memberikan jumlah yang tertinggi pada senyawa bioaktif . Dari sinilah ekstrak kasar atau fraksi menyatakan kapasitas biologis yang baik yang menunjukkan bahwa substansi biologis yang kuat dengan efek yang ada dalam ekstrak dan harus diisolasi dan dimurnikan untuk memastikan farmakologi dan medis yang digunakan.