gd-muic-bf-bioinformatica 2017 18def · y bibliográficos para documentar y diseñar un abordaje...

20
ASIGNATURA BIOTECNOLOGÍA APLICADA Máster Universitario en INVESTIGACIÓN EN CIENCIAS Universidad de Alcalá Curso Académico 2017/18

Upload: buinhan

Post on 18-Oct-2018

217 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

ASIGNATURA

BIOTECNOLOGÍA APLICADA

Máster Universitario en

INVESTIGACIÓN EN CIENCIAS

Universidad de Alcalá

Curso Académico 2017/18

2

GUÍA DOCENTE

Nombre de la asignatura: Biotecnología Aplicada

Código: 202233

Titulación en la que se imparte: Máster Universitario en Investigación en Ciencias Departamento: Ciencias de la Vida / Biomedicina y Biotecnología Áreas de Conocimiento: Fisiología Vegetal / Microbiología

Carácter: Obligatoria Créditos ECTS:4

Curso y cuatrimestre: Segundo cuatrimestre

Coordinación: Mª Dolores Abarca Sanchis / Manuel Hernández Cutuli Profesorado: Mª Dolores Abarca Sanchis / Alfredo Guéra Antolín / Profesores de

la Unidad Docente de Microbiología

Horario de Tutoría: Se concertarán citas de forma individual entre el profesor y el alumno.

Idioma en el que se imparte: Español

1. PRESENTACIÓN

Podríamos definir Tecnología, en un sentido amplio, como el conjunto de conocimientos, operaciones y procesos destinados a obtener productos que satisfagan las necesidades de los seres humanos. La fuente última, a partir de la cual se van a obtener estos productos, son los recursos naturales. La tecnología surge en el paleolítico con la fabricación de las primeras armas y herramientas. En el neolítico, la humanidad comenzó a explotar de forma planificada y dirigida los recursos naturales, tanto los biológicos como los geológicos. De esa planificación dirigida a la producción estable de alimentos, surgieron la agricultura y la ganadería y con ellas las primeras civilizaciones. Si definimos a la Biotecnología como aquella parte de la Tecnología que toma como fuente de recursos a los organismos vivos, tanto la agricultura como la ganadería serían las primeras actividades biotecnológicas que realizaron los seres humanos. Así, la creación de nuevas razas de animales y nuevas variedades de plantas, junto con la utilización de procesos de fermentación en la fabricación del pan, del vino, del vinagre y la cerveza, etc., serían algunos de los primeros logros biotecnológicos de la humanidad. Estos logros se realizaron de forma intuitiva, sin conocer las bases científicas que los permitían. Actualmente, el conocimiento aportado por la Ciencia permite una base más sólida, eficaz y rápida para desarrollar aplicaciones nuevas derivadas de los seres vivos: bioelectricidad, mejora de los cultivos vegetales o de la producción animal, biorremediación, biominería, producción de biocombustibles, vacunas, anticuerpos, desarrollo de nuevos fármacos y nuevos materiales, etc. La exploración, caracterización y posterior uso de estos recursos se sustenta en el conocimiento de las bases metabólicas, fisiológicas y moleculares que determinan la producción. A partir de esta información, nuevos organismos podrán ser utilizados directamente en

3

algún proceso biotecnológico concreto o bien como fuente de nuevos genes de interés. El objetivo general de la asignatura “Biotecnología aplicada” es que el alumno obtenga una visión global acerca de las aplicaciones prácticas de los seres vivos al ámbito industrial, sanitario y agroforestal y a la conservación del medio ambiente, así como de los recursos y estrategias necesarios para plantear un proyecto de biotecnología.

Prerrequisitos y Recomendaciones (si es pertinente):

Se requieren conocimientos en Biología Molecular, Genética, Fisiología Vegetal, Fisiología Animal y Microbiología, así como un nivel de inglés adecuado para la lectura y comprensión de artículos científicos.

2. COMPETENCIAS Competencias genéricas:

1. Conocer y manejar las principales fuentes de información científica, ser capaces de buscar información relevante a través de Internet, de las bases de datos bibliográficas y de la lectura crítica de trabajos científicos, y conocer los temas de importancia y la bibliografía especializada en el campo de las ciencias.

2. Adquirir las habilidades de aprendizaje que permitan a los estudiantes continuar estudiando de un modo que habrá de ser en gran medida autodirigido o autónomo.

3. Adquirir los conocimientos necesarios para identificar y definir problemas científicos concretos de interés en el ámbito de las ciencias, así como para ubicar los resultados de una investigación dentro del acervo científico existente.

4. Ser capaces de aplicar los conocimientos y la capacidad de resolución de problemas adquiridos en entornos nuevos o poco conocidos dentro de contextos más amplios (o multidisciplinares) relacionados con su área de estudio.

5. Entender y saber aplicar las técnicas de campo y de laboratorio (instrumentales, informáticas y estadísticas) adecuadas para la resolución de problemas concretos en la investigación en ciencias.

6. Adquirir la capacidad de trabajo en equipo y así como habilidades de interacción humana.

7. Ser capaces de integrar los conocimientos de la asignatura concreta en el contexto de la actividad científica general.

8. Adquirir la capacidad de presentar un trabajo de investigación por escrito o de forma oral.

9. Ser capaces de emplear por lo menos un idioma extranjero, preferentemente el inglés, como medio de comunicación oral y escrita en el seno de la comunidad científica internacional.

4

Competencias específicas:

1. Conocer y ser capaces de utilizar las principales bases de datos moleculares y bibliográficos para documentar y diseñar un abordaje experimental en biología funcional.

2. Conocer y ser capaces de utilizar las herramientas disponibles y la metodología para la identificación, caracterización y manipulación de genes con utilidad potencial en proyectos de biología funcional.

3. Conocer los principales recursos y estrategias experimentales disponibles en los sistemas modelo más empleados y cómo usarlos para determinar la función génica, así como las técnicas para alterar la secuencia del genoma de un individuo en posiciones definidas dentro de genes de interés.

4. Conocer los principales recursos bioinformáticos para realizar estudios funcionales in silico y analizar resultados de estudios de expresión génica a gran escala.

5. Conocer las aplicaciones tecnológicas que utilizan sistemas biológicos y organismos vivos o sus derivados para la creación o modificación de productos o procesos para usos específicos.

6. Conocer y ser capaces de analizar algunos casos prácticos reales y potenciales de utilización de células humanas, animales, vegetales y microorganismos como fuentes recursos biotecnológicos.

7. Aprender a realizar caracterizaciones funcionales de procesos biológicos con objeto de seleccionar genes candidato.

8. Aprender a plantear métodos para analizar y optimizar la función de genes candidato.

9. Conocer los métodos y recursos disponibles para el análisis de caracteres complejos.

10. Aprender a diseñas sistemas para la manipulación de la composición y la producción de metabolitos en organismos modificados genéticamente.

11. Adquirir conocimiento de las aplicaciones tecnológicas que utilizan sistemas biológicos y organismos vivos o sus derivados para la creación o modificación de productos o procesos para usos específicos (agrícolas, industriales, medioambientales, sanitarios, clínicos, etc.).

5

3. CONTENIDOS

Bloques de contenido (se pueden especificarlos temas si se considera necesario)

Total de clases, créditos u horas

Bloque 1: Biotecnología microbiana • 9 h Clases magistrales

• 6 h Seminarios

Bloque 2: Biotecnología vegetal • 10 h Clases magistrales

• 6 h Seminarios

Bloque 3: Biotecnología animal • 1 h Clases magistrales

• 2 h Seminarios

Programa detallado de contenidos

Bloque 1- Biotecnología microbiana

1. Utilización de microorganismos vivos y sus enzimas en procesos industriales con el fin de reemplazar tecnologías contaminantes

2. Aplicaciones ambientales de la biotecnología en biorremediación de aguas y suelos contaminados

3. Investigación, desarrollo y producción de nuevas vacunas, Antimicrobianos, Inmunosupresores, Antitumorales, Anticuerpos, etcH.

4. Biotecnología de alimentos . Probióticos y prebióticos. Nutracéuticos.

Bloque 2-. Biotecnología vegetal

5. Micropropagación de plantas de interés agrícola, ornamental, forestal y ecológico. Plantas libres de virus.

6. Identificación y optimización de genes candidato. Sistemas modelo en biotecnología vegetal. Análisis de caracteres complejos.

7. Mejora de la productividad vegetal. Tolerancia a estrés abiótico. Resistencias a patógenos y plagas. Modificación de la post-cosecha. Modificación de la productividad de especies leñosas.

8. Ingeniería metabólica. Manipulación de la síntesis de metabolitos de la planta. Producción de sustancias exógenas. Ventajas de las plantas como sistemas de producción. Problemas fisiológicos y técnicos.

9. Obtención de biocombustibles a partir de cultivos vegetales.

10. Producción de proteínas exógenas en plantas. Planticuerpos. Vacunas. Autoantígenos. Otras proteínas de interés industrial.

11. Fitominería y fitorremediación. Detección, acumulación y eliminación de contaminantes.

6

Bloque 3- Biotecnología animal

12. Aplicaciones de la biotecnología a sistemas animales: sistemas modelo, manipulación génica, clonación. Manipulación de la productividad, obtención de proteínas recombinantes. Ingeniería de tejidos.

Cronograma (Optativo)

Semana / Sesión

Contenido

4. METODOLOGÍAS DE ENSEÑANZA-APRENDIZAJE.-ACTIVIDADES FORMATIVAS

4.1. Distribución de créditos(especificar en horas)

Número de horas presenciales: 32

Número de horas del trabajo propio del estudiante:

68

Total horas 100

4.2. Estrategias metodológicas, materiales y recursos didácticos

Actividades presenciales

- Clases magistrales teóricas:

Consistirán en la explicación de las bases teóricas por parte del profesor mediante exposición oral con apoyo de medios audiovisuales.

- Seminarios impartidos por alumnos:

Consistirán en la preparación por parte de los alumnos de presentaciones y exposiciones orales basadas en artículos científicos relacionados con los contenidos teóricos y/o la resolución de problemas biotecnológicos concretos planteados por el profesor.

Actividades no presenciales Elaboración de un proyecto de biotecnología aplicada, que se presentará y discutirá en un seminario.

Tutorías

Los alumnos recibirán atención personalizada tanto presencial como on-line para solventar dudas y recibir orientación para el aprendizaje de la asignatura.

7

5. EVALUACIÓN: Procedimientos, criterios de evaluación y de calificación1

PROCEDIMIENTO

El estudiante dispondrá de dos convocatorias por matrícula: una ordinaria y otra extraordinaria.

En la convocatoria ordinaria habrá un examen obligatorio para todos los alumnos (puntuable de 0 a 10) que supondrá hasta un 60% de la nota final. El 40% restante corresponderá a la calificación obtenida por el alumno en la elaboración y presentación del proyecto de biotecnología aplicada, así como el juicio que haya merecido a los profesores su participación en las clases: se valorará sobre todo el grado de comprensión de los temas que revelen sus aportaciones durante las discusiones sobre los artículos y casos prácticos tratados en los seminarios.

La convocatoria extraordinaria será exclusivamente para aquellos alumnos que no hayan superado la ordinaria, se hará en las fechas fijadas por la comisión docente del máster y su nota vendrá dada en su totalidad por un examen final.

Criterios de evaluación

La asignatura se evaluará en base al grado de adquisición de las competencias generales y específicas indicadas en apartados anteriores. Se tendrá en consideración:

- Capacidad de delimitación, síntesis y estructuración de los conocimientos adquiridos.

- Capacidad de análisis crítico y de síntesis de la información científica.

- Capacidad para proponer y discutir proyectos biotecnológicos

-Calidad en la expresión y comunicación oral y escrita.

Calificación

Las calificaciones se asignarán siguiendo los criterios indicados en el R.D. 1125/2003 que regula el Suplemento al Título. Se expresarán como notas numéricas con un decimal y una calificación cualitativa:

- 0,0 - 4,9 SUSPENSO (SS)

- 5,0 - 6,9 APROBADO (AP)

- 7,0- 8,9 NOTABLE (NT)

- 9,0 – 10 SOBRESALIENTE (SB)

- 9,0 – 10 MATRÍCULA DE HONOR

(limitada al 5% de los alumnos matriculados)

1Es importante señalar los procedimientos de evaluación: por ejemplo evaluación continua, final, autoevaluación, co-evaluación. Instrumentos y evidencias: trabajos, actividades. Criterios o indicadores que se van a valorar en relación a las competencias: dominio de conocimientos conceptuales, aplicación, transferencia conocimientos. Para el sistema de calificación hay que recordar la Normativa del Consejo de Gobierno del 16 de Julio de 2009: la calificación de la evaluación continua representará, al menos, el 60%. Se puede elevar este % en la guía.

8

6. BIBLIOGRAFÍA

Bibliografía Básica Altman, A., Hasegawa, P. M. 2011. Plant biotechnology and agriculture: prospects for the 21st century. Academic Press. USA. Ashihara, H., Crozier, A., Komamine, A. 2011. Plant metabolism and biotechnology. John Wiley & Sons. Reino Unido. Bertrand JC. 2015. Environmental Microbiology: Fundamentals and Applications Microbial Ecology. Springer. Holanda Buchanan, B.B., Gruissem, W., Jones, R.L. 2015. Biochemistry and molecular biology of plants (2nd edition). American Society of Plant Physiologists. USA. Glazer, AN., Nikaido, H. (2007). Microbial Biotechnology. Fundamental of Applied Microbiology. 2nd edition. Cambridge University Press. UK. Dewick, P.M. 2009. Medicinal natural products (3rd edition). Wiley & sons. Chichester U.K. Hodson, M.J., Bryant J.A. 2012. Functional Biology of Plants. Wiley & Blackwell eds. USA Kirakosyan, A. 2009. Recent advances in plant biotechnology Springer. USA. Kole, C. Michler, C.H. Abbott, A. G., Hall, T.C. 2009. Transgenic crop plants v. 1 Principles and development. Springer. Alemania. Kole, C., Michler, C.H., Abbott, A.G., Hall, T.C. 2009. Transgenic crop plants v. 2 Utilization and biosafety. Springer. Alemania. Neumann, K.-H., Kumar, A., Imani, J. 2009. Plant cell and tissue culture: a tool in biotechnology: basics and application. Springer. Alemania. Okafor, N. 2007. Modern Industrial Microbiology and Biotechnology. CRC Press. Boca Raton, USA. Polaina, J., MacCabe, AP. 2007. Industrial enzymes. Structure, function and applications. Springer. Holanda. Prado JR, Gerrit Segers, T. et al. 2014. Genetically Engineered Crops: From idea to product. Annu. Rev. Plant Biol. 65:769–90. Slater, A. et al. 2008. Plant biotechnology: the genetic manipulation of plants. Oxford University Press. Reino Unido.

9

Taiz, L., Zeiger E., Møller, I.M., Murphy, A. 2015. Plant physiology and Development. Sinauer Ass. Inc., Massachusetts. 6th Ed. Wink, M. 2010. Biochemistry of plant secondary metabolism. Wiley-Blackwell. Reino Unido. Publicaciones periódicas:

Current opinion in Biotechnology Nature reviews in drug discovery Nature Biotechnology Plant Biotechnology Journal Trends in Biotechnology

A lo largo del curso se darán referencias de artículos de investigación y revisiones que traten temas más específicos de cada lección, así como los de aquéllos que habrán de discutirse durante los seminarios.

����������

������ ��������������������������������

���������������������������������� �������������

��������!�!�!���"#�"�

�$�����#�!%&�#��'()*+),

���

�����������

��&-���!��"�����.���$��/����0��&���#���1"�#�!����"��-��"�.2��0$�#����"

�3!�.�/�'(''45

���$"�#�3�����"��6$������&1����/���������0�#��"

��1����&����/�����#����!��"����!��+���&�!�#����7�����#��"�.2� �����!������#�&�����/������"�.2����.���"�+���"�.2����"$"��

����#���/�-"�.������

��%!���������/8

�$����7�#$����&�����/���.$�!��#$����&�����

���0�����!�/��������2��!�"���&1���31�9�:#���!���!���;�+�<$"����%��9����6$�9

=�������!���$���2�/�������$���2���1�����#��"������#��#��������1������#����#���"���1��0������>������$���2������1�����#��"���������%��!�"��$"������$�"���#$�"6$���������&�!����"�#��3��#��������!����?�������!����&���!��!������#�3�>

�!��&������"�6$������&1����/���1�@�"

)>����������� �

���"��A"��&��!%#�!�����?��1��!$#�!��$����#��&������B1����#��"�!��"��!��1���-�"�!�!!� � �1"�#�#����� � ��0��&���#�� � 6$� � ��� � A��"�� � 1��� � �" � &���C� � !� � "� � ��0��&�#�3��-����!� � �� � "� � �������.�#�3� � -��"3.�#�> � �� � 1����#$"��D � �6$�""�� � 6$� � ���"�9����#$��#����!���$#"�3��!���������!��.�����!�������%��#�&��!��.���&���#�&1"����>����� � ��#$��#��� � !� � ��� � 1��#�!�� � !� � !������� � ��1�� � !� � ��.����&�� � �����1��#��������#�&���$#�������E�������A"��&���!���!���!��?����������.���&���#�&�����" � #��� � !� � "�� � ��.����&�� � ��.���"�� � :�$#"���D � 1"����!��" � 7 � &���#��!���";> � ����#��C$����!����#$��#����#��������$�������&��#����!�!�!����0��&�#�3��!��$��"�!�!����������.�#�3��-���#�D��1"�#�#������-����#��"3.�#���7����$!����!��-��!������!�!>�����0��&�#�3��!��1���-"��?���!6$���!����"���1��1��#������6$��?��1����#�!���"��$&����!��"��!�&��!��!���1"�#�#��������0��&���#���1���1�����!��"��#�&$��!�!�#����20�#����.�����"�6$��0�#�"������"����"�����!����1�#����&$7�#��#������!�1��!���!��!�"��-C�����0���"�!��#�!�����$!���1����#$"��>�������!��"���B1$����D��#�$�"&���������&1���#��!�-"�$��#���#�&������!��"���?����&�������-����0��&���#���-���#���!��$���&���.�����"1��� � 1�!�� � �-��!�� � #$�"6$��� � ���-�C� � �B1���&����" � �� � !�0������� � #�&1�� � !� � "��������.�#�3�����-��"�.2�D�6$2&�#����&%!�#�>

�" � �-C����� � .�����" � !� � ���� � ���.���$�� � !� �����0��&���#� � �1"�#�!� � � � "� � -��"�.2��$�#����" � �� � 6$� � �" � ���$!����� � �-���.� � $�� � �����!$##�3� � � � "� � 1��.��&�#�3���0��&���#� � 7 � 6$� � #���9#� � 7 � �1���!� � � � $��"�9�� � #�� � �0�#���#�� � "�� � ?����&������-����0��&���#�� � &�� � #�&A�&���� � $��"�9�!�� � �� � �" � ���"���� � !� � ��#$��#��� � !��$#"�3��!�� � 7 � �&����#�!��> � �� � ���.���$�� � ���� � �&1����!� � #�� � -����� � #"����&�.�����"�����.$�!���!���#����!�!���1��#��#��� ��"�#����!��> ��" ����$!������!�-���

'

���

����"��� � #�!� � $�� � !� � "�� � 1��-"�&�� � 1"�����!�� � ?�#���!� � $�� � !� � "�� � #�%!����1�����#��"������.��!�����"����#����!�!��F1��-"�&��7�"���#�����1��!������������-�C����1�����#��">

������6$�������7���#�&��!�#������:������1���������;/

�����6$������#���#�&������������"�.2��&�"�#$"���7�$������"�!�� ��."%���!�#$�!�1����"��"�#�$���7�#�&1�����3��!�����2#$"���#����20�#��>

'>������������

��&1����#����.��%��#��/�

)> �G$� � "�� ����$!������ �1����� � "�� �?�-�"�!�!�� �!� ��1���!�9�C� �6$� � "�� �1��&����#�����$������$!���!��!��$��&�!��6$��?�-���!���������.����&�!�!���$��!���.�!����$�3��&�>

'>�G$��"������$!�������1������7�#�&1���!���#���#�&�������6$���1������$���-����$�1���$��!�!�!���������.���"�������"�!������""��7+���1"�#�#�3��!���!���D���&��$!����$��#����B���!���������.�#�3�>

4>�G$��"������$!���������1����1"�#���"���#���#�&��������!6$���!���7��$�#�1�#�!�!�!�����"$#�3� � !� � 1��-"�&�� � �� � �������� � �$���� � � � 1�#� � #���#�!�� � !����� � !�#����B��� � &�� � �&1"��� � :� � &$"��!��#�1"������; � ��"�#����!�� � #�� � �$ � ���� � !����$!��>

8>������!���7���-����1"�#���"����%#��#���:�����$&����"��D���0��&���#���7�����!2���#��;�!�#$�!���1���� "� � ����"$#�3��!��1��-"�&���#��#��������� "�� �������.�#�3����#���#���>

5>�����#�1�9�!���&1"��� �1�� � "��&�����$�� �!��&���B����C���D �1��0������&������"��."%�D�#�&��&�!���!��#�&$��#�#�3�����"�7���#���������"������!��"��#�&$��!�!#����20�#���������#����">

H>����"�9���"��"3.�#�D�"��#�2��#��7��$��#�2��#�>

*>���������!�#$�!�&������"��B��������"$&���!����0��&�#�3���B�����������!�������0$������7���#$����>

,>��������9�������2��D�1$-"�#�#�����D���B���I

J>����-�C�������6$�1�>

)(>���&1���!���7����1�����"��!������!�!�!���1��������7�#��������>

)'>���&$��#������!�#$�!�&����/��B1����3�����"�7���#����>

4

���

��&1����#������1�#20�#��/�

)> ����#���7�����#�1�9�!��$��"�9���"���1���#�1�"���-�����!��!�����&�"�#$"�����7-�-"��.��0�#�� � 1��� � !�#$&����� � 7 � !���@�� � $� � �-��!�C� � �B1���&����" � ��-��"�.2��0$�#����">

'> ����#���7�����#�1�9�!��$��"�9���"���1���#�1�"�����#$�����-����0��&���#���1������"�9�� ����$!���� 0$�#����"��� �� ���"�#��7 ����"�9�� � ���$"��!���!�����$!��� �!��B1����3��.%��#����.������#�"�>

4> ����#���"���#���#���2���#���#�&$����!��"���"��.$�C���!��1��.��&�#�3�>

8> ����#����"�&���C��!��#�&1�"�!��������>�

5> ����#����"�&���C��!�������-"���7�1���#�1�"���0������7�#�&1���!�����-���#��!��$��"��.$�C��!��1��.��&�#�3������KK>

H> ��#��-�� ��".����&���1�����1"�#�#������!��-��"�.2�/ ��#$�#������7�&���C��!���#$��#����:�$#"�3��!������&����#�!��;>

*> �!6$�����"��#�1�#�!�!�!��!������""����1"�#�#��������&1"��>

,> ����#�� � "�� �1���#�1�"�� � 0��&���� �!� �!���� �!� ���#$��#��� �7 ���� �#�1�9�!������1������"��!�#$&����#�3���-����!��!��-�����!��!����>

J> ������ � ��#$��#��� ��-����!�� � L!� � ����M � 7 � 1$-"�#��"�� � �� ����� � !� �������������#����"��>

)(>���"�9����"����&�������."�-�"���7� "�#�"���!����#$��#����7�!�������1������ "���0��&�#�3���-����!�>

))>����#�� � �".����&�� � 7 � ��.��0�#�!� � ����!2���#� � !� � "�� � �"����&������ � !���#$��#���>

)'>���"�9������"�����-����0��&���#��!����#$��#����!���#�!����$#"��#��>

)4>���"�9����"����"�����-����0��&���#��!����#$��#����!��1����2���>

)8>�"�-�����1��7�#����!���������.�#�3��6$���&1"�6$������"�����-����0��&���#��!�!�����&�"�#$"����>

8

���

4>���������

"�6$���!��#������!�����"�!��#"����

:?����;�

��&��)/������!$##�3��7�!������""��?���3��#� � '�?����

��&��'/����.��&�#�3��1��������0��&���#� � )H�?����

��&��4/������D�-�����!��!�����7��$�&���C� � 4�?����

��&��8/����"�����-����0��&���#��1��#��#��!����#$��#����!���#�!����$#"��#��

� 8�?����

��&��5/����"�����-����0��&���#��1��#��#��!����#$��#����!��1����2���

� 4�?����

��&��H/������!$##�3���"����"�����0�"�.��%��#� � 8�?����

��&������� � 8�?����

�����.��&�

��&����+����3�

�������!��

()N � ��&��)D���&��'�7���&��4

('� � ��&��'D���&��8�7���&��5

(4N � ��&��'D���&��5�7���&��H

(8N � ��&�������

5

���

8>������������������O��P�F�������P�<�>F���������������������

8>)>�������-$#�3��!��#�%!����:��1�#�0�#������?����;

�A&����!��?�����1�����#��"��/ 4H�?����

�A&����!��?�����!�"����-�C�1��1���!�"����$!�����/�

H8�?����

����"�?���� )((�?����

8>'>��������.����&���!�"3.�#��D�&������"���7���#$�����!�!�#��#��

�#����!�!������1�����#��"��

���������F"����������%��!�"��$"������$�"/�#��1����!���������!��.�$1�

���������������"��#��#"$��3��!��"����#����!�!��F1��-"�&��1"�����!������"���#"�����1�����#��"���7�1�������#�3��!��$����0��&��������%��!��$���1"���0��&����F"���>

�#����!�!�1�����#��"

�"�����&�.�����"�����3��#��/

���������������"���B1"�#�#�3��!��"���-�������3��#���1���1�����!�"�1��0�����&�!�������B1���#�3�����"�#����1�7��!��$����!���!���7�$��1��7�#���>

����"$#�3��!���#����!�!��F1��-"�&������"��$"��!����0��&���#�/

�������#����!�!���������1"�����!���1����"�1��0��������"���#"�����1�����#��"���7����$�"����1����"����$!������&�!�������"�$���!��1��.��&�����0��&���#�����1�#20�#��D������$##������#��#������7�"��.$2��!�"�1��0����>

��&���������&1����!���1������$!������/

���������������"��1��1���#�3��1���.�$1���!�����$!�������!��$���1�������#�3��7��B1���#�3�����"�-���!��������$"��!����-����!�������"��$"��!����0��&���#����!�����2#$"���#����20�#��>

�$���2������#�3� � 1������"�9�!� � ����� � 1�����#��"#�&����F"��������?�������1������-"�#�!�>

H

���

�������.��� &���!�"3.�#��/

����#"�����&�.�����"�����3��#��/

��������������� "���B1���#�3�����"�1���1�����!�" �1��0�����!�� "���#������!���#����"�1�7��!��$����!���!��D�$��1��7�#����7�1�9����>����������#"���������B1"�#�����"����1�#����&�����"�������������"�#�3��#����"���&��6$��������������������B#�����&�����B?�$�����D � ������!� � "� � ��-��#��.� � !� � #������!��> � �� � ��"�##������� � #������!����"������� � 1��� � "� � ����"$#�3� � !� � 1��-"�&�� � ���"�� � ���&��!� � �" � ���$!����� � �1��0$�!�9���!��0��&���$�3��&������6$�""�����1�#����6$��&���"������������&�!�������#$�������0��&���#���7�-�-"��.��0�#��>

�������"$#�3��!���#����!�!��F1��-"�&������"��$"��!����0��&���#�/

���&���!�"�.2��!�#�����$��"�9�!������������1��!���#����!�!��������"��#���#�!��#�&�Q�1���!�9�C� � -���!� � �� � 1��-"�&��Q> � �� � �&1"�&����#�3� � !� � ���� � &���!�"�.2��&1"�#����6$��$��.�$1��!�����$!�������!��&�������$�3��&�D��$�6$��.$��!���1����"1��0����D�!�-������#������� "����"$#�3����$��1��-"�&��!�� 0��&��6$���" �#����.$������"���"��#����#��&������$1��!���"����#���!�!�!��-$�#��D�#�&1���!��D�����.����7�1"�#���"���#��#�1����7�&%��!����B1"�#�!������"���#"�����&�.�����"�����"�#����!��#����"�#������!��!�"�1��-"�&�>����������&���!�"�.2��!�#����D��"����$!����������"1���#�1�" �1����.������ �!�" �1��#����!������@��9�F�1���!�9�C� ��" ������ ��-"�.�!����!����0�#�� � �$� ���#���!�!�� �!� ��1���!�9�C� �7 �-$�#�� ��" � #���#�&����� �1��� �1�!������"����$��1��-"�&��1"�����!�D� "��6$�����$���9����.�����$�������#���!�!���!��1���!�9�C�>����&��&�D������&���!�"�.2��1�����!��#�����-$�����6$��"������$!������#����.������"$����$����#���!�!���!���1���!�9�C�D�#�����$����"�#���#�&������!��"�&�������7����-�C���#��1�������&����>

�"�-���#�3��!�����������F"����������%��!�"��$"������$�"/�#��1����!��������

���������� �����" �!���@��1�� �1���� �!�" �1��0���� �!��$�������� �!� � �������#��#�������"�#����!�� �#�� �#�!� �$�� �!� � "�� � ��&�� �!�" �1��.��&��1��1$����> ������ � ������6$�!���� � ��#�1�"�!�� � �� � "� � 6$� � ""�&���&�� � #��1��� � !�" � �"$&��D � !��!� � #�!����$!����������.$��!��!����!��"����0��&�#�3��6$��?���!����#������!��7���#�1�"��!�1����"������"$#�3��!��#�!��$���!��"���1��-"�&��>������#����!�!������!������""������ � .�$1��> � �" � #������!� � !� � !�#?� � #��1��� � ������� � 1��� � !�� � #$���� � !�" � ���-�C�#�����$�!�����"�9�!��1���#�!��.�$1��!�����-�C�>�=�-���$��#�"��!�����#���1����!��!���C�#$#�3��7�1"�9���!�������.��!��������>

��&���������&1����!���1���"������$!������/

����������1��1���!�����!���!$�"&�������1���.�$1���!��'���4����$!�������7��B1$��������"&����>���!���"�����&�����������!����$��0��&������&�"����"�!��$���1�������#�3����#��.������#����20�#��>��$�!$��#�3��&�B�&�������!��'(�&��$����!��"���6$��)5&��$�������!�!�#�������"���B1���#�3��1��1��&�����!�#?��7� "���#��#������������������������ � 1��� � !��#$��3� � 7 � ���"���� � !� � "� � 1�������#�3� � #�� � �" � ����� � !� � "�����$!�������7��"�1��0����>

�$���2�����!���!$�"�9�!��/

����""���"������$!�������1�!����1����������$��!$!����"�1��0�����7������&�!�����������������1�����#��"�����������%��!����������>

*

���

5>��������� �/����#�!�&������D�#���������!�����"$�#�3��7�!��#�"�0�#�#�3�)

�����������

�" ����$!������!��1��!���!��!���#����#��������1�� �&���2#$"�/ �$�����!�������7 ������B�����!������>

�����#���������!������

���"$�#�3��#�����$�/

���"$�#�3� � !� � �" � &���� � )( � 1��.��&�� � ��0��&���#�� � #���!�� � 1�� � "�� � �"$&���D#��#������7�!��#�&1"�C�!�!�#��#������6$��?�����!��!������""�!�������"�1����!��!��#����!�!����1�����#��">

���"$�#�3� � !� � ��0��&�� � !� � "�� � �#����!�!��F1��-"�&� � 1"�����!�� � �� � "�� � #"����1�����#��"�� �� � ����%� �!�" ��$"� � ����$�" � 7 � "� � �"�-���#�3� � 7 ��B1���#�3� ����" � !� � "����&�������>

��&1"�&�������&����D � �� � 1"�������� � �#����!�!�� � !� � �$�����"$�#�3� � 7 � #�F���"$�#�3�>

�B#�1#����"&����D����#����&1"������#��������!��"���1��0�������7���"�&��������#���!� � #����!����"� � ��#������D � "� � ���"�9�#�3� � !� � $�� � 1�$�-�F�B�&��> � ���� � 1�$�-�#��������� � �� � $� � #$���������� � #�� � 1��.$���� � &$7 � #��#����� � ��-�� � �#����!�!��!������""�!���1����"����$!��������"��"��.��!�"�!������""��!��"�����.���$��>

���"$�#�3�����#�����$�/

��������������$���B�&���0���">��������$!�������6$���1����1����������1��!�����"$�#�3�!�-���� � #�&$��#��"� � 1�� � ��#���� � �" � ��#����� � !� � ��"�.2� � !$����� � "� � 1��&���6$��#����!�"�#$���>������1�$�-��#�������������$��#$�����������#���1��.$�����&$7#��#����� ���-�� � "�� �#������!��� ��3��#�� �!� � "� ����.���$�� �7 ��" �!������""� �!� �$���1"�#�#�3����0��&���#���1"�#�-"�����-��"�.2�>

�����#��������B�����!������

���#����#��������B�����!�������������B#"$����&�����1�����6$�""����"$&����6$����?�7����$1���!��"����!������D����?�������"���0�#?���0�C�!���1���"��#�&���3��!�#����!�"�&������7��$���������!���!�!������$�����"�!�!�1���$���B�&���0���">

����������!�����"$�#�3�/

��� � ������� � � ����� � �� � �� ���� ��� � � � ���������� � � � � �� � ��������� � ������� � �������� ������������� ������������������ ������ ��� ������������������������ ������� ������������� �� � �� ������������� ��� ��������������� � �������������� ������� ������� ���� �������������������! � ���������� �����"���� ������ ���� �������������#��� � �� ���������$�������� ����� ��� �%�� ���� ���&�� '����� �())*������������������ ���� ������������������ � � ����+������ ���� ��&),��- �� � � � ���� �� �, �����.�/��

,

���

������.���$���������"$�������-�����" �.��!��!���!6$���#�3��!�� "���#�&1����#���.�����"���7���1�#20�#�����!�#�!�������1����!��������������1���"������$!������>������!������#����!���#�3�/

F���1�#�!�!�!��!�"�&���#�3��!��"���1��-"�&���1"�����!��>

F��$�#����"�!�!�!��"���1��.��&�����0��&���#��>

F��"�##�3��!��"��&���!�"�.2���!�#$�!���"�1��-"�&��1"�����!�>

F����!��!��#���#�&������7�$��"�9�#�3��#����#���!��"���1��.��&����!�#$�!���1����"�����"$#�3��!��#�!��1��-"�&��1"�����!�>

F � �������""� � ��.$&����" � �&1"��!� � 1��� � "� � �-���#�3� � !� � "�� � ���$"��!�� � 7#��#"$������>

F���"�!�!����"����!�##�3��7�����"�����"�����0��&��>

F��"�!�!����"���B1����3��7�#�&$��#�#�3�����">

����������!��#�"�0�#�#�3�/

�"�,(R�!��"��#�"�0�#�#�3��#�����1��!������"��&�!���1��!���!��!��"���#�"�0�#�#�����"�.��!������#�!��$���!��"����#����!�!��F1��-"�&�>��"�'(R����������#�����1��!����"��B1���#�3�����"�!��"�����&�������>

���#����!�����"�9�����$���1�$�-�F�B�&������"�����"$�#�3��#�����$�D�������$1��!��#�&��&�B�&���"�45R�!��"��#�"�0�#�#�3������">

���"�����"$�#�3�����#�����$�D��"��B�&���0���"�#������$�����"�)((R�!��"��#�"�0�#�#�3�>

����#�"�0�#�#������1���-"��������/

(D(�F�8DJ������������"����$0�#�����D���.A��"���1"�#�#�3��!��"���#���������!�����"$�#�3�>

5D(�F�HDJ�����������"��$0�#�����D���.A��"���1"�#�#�3��!��"���#���������!�����"$�#�3�>

*D(F�,DJ�����������"�&�!��D���.A��"���1"�#�#�3��!��"���#���������!�����"$�#�3�>

JD(�F�)(�����������������"��"���!��#���#�&���������3��#���7�1��#��#��D�#�1�#�!�!�!�����"�����7���0"�B�3�D#�1�#�!�!�!������.��#�3��7��1"�#�#�3��!��"���#���#�&������D�#�1�#�!�!�!��-A�6$�!�!����0��&�#�3���"���������>

JD(�S�)(��������������=��

����"�!���B#�"��#��������!���"�����1�#����&��#����!�����������&����>���&���!�D�1��"�.��"�#�3��$������������D���$��&�B�&��!�"�5R�!��"������$!�������&����#$"�!��>

J

���

H>����������

�-"��.��02�����#�

�.������D��><>D�'()4>����#��#�"�����0��&���#�>����"��!��#���#�D���T�U��V>

�?�$!?$��D � �> � ��! � W���T�#9D � �>D � '()8> � ����0��&���#� � 0�� � �.������/ � �����D����&��D � ��"�#$"�� � ���"$����D � ����-���� � ��! � ���"7��#�" � ���"�> � �"������+��D�&����!�&>

�-��V?�& � U> � �-!$��V?&���� � �!> � '()H> � ����0��&���#�> � �1!���! � ����$��� � ��!�11"�#������>�'()H>��!���!�-7���$-"��?�!�-7�����#?>�<���9����!����JD�5)(((���C�V�D�������>

��&�7D��>D���"�&�D��>���!����!�&&�D��F���!�>�'((J>�?���?7"�.����#�=��!-��V>�����#��#�" � �11���#? � �� � �?7"�.�����# � ���"7��� � ��! � =71��?���� � ������.> � '�!� �!>��&-��!.�����������7������>���&-��!.�E��W>

�������D�<>D�'()5>�����0��&���#����!��$�#�����"�����&�#�>�<�?��X�"�7���!�����D��#>D��?�#?�����D�X�����$���BD��W�E�=�-�V��D��<D����>

����!�D��>��!>�'((J>�����0��&���#��0���������6$��#�����"7���>�=$&���������>�1���.��E���T�U��V>

��#�D � �>D � "���-7D � �>D � ��! � ����D � <>D � '())> � ���� � ����Y� � �$�!�/ � ���#��#�"����0��&���#�>���&-��!.�����������7������D���&-��!.�E���T�U��V>

��&$�"����D��>D�'()'>�����&�#����!�����0��&���#�/���������!$#����������.��&&��.���"��0�����0���#��������>���&-��!.�����������7������D���&-��!.�>

���!�""�<>�'(()��.�����.����"�0�������0��&���#���$-"��?��/�Y���""7���!��

XZ��#?����D ��>D �'()4E ���&1$�������" ���"�.7/ ������#��#�" � �����!$#���� � �� ���!������#�����.���!����"7����T��?����$BD��7�G�D���!��>��1���.��D�=��!�"-��.E���T�U��V>

U����>�'()5>��KK����,�=�$��D��KK�0����.������>��!���>��T�0���!>

P��"�-�"D ��><> ���!�=��#�#VD �<>�>D �'()4> ����#������#7#"�1��!����0 �����0��&���#���!���&1$�������"���"�.7>�,4'>

)(

���

�-"��.��02����&1"�&�������

���#��#�"�������������0��&���#�>�'()8>��1���.��D���T�U��V>

W��1�"�����D��>D��$�&�"�D�<>D���&���$�D��>D�=$��D��>D���!�X��.D��>D�'()5>����F��6���� ����"7���/ ������#��#�" ��11���#?> ����������D ���7"�� �[ �����#�� ����$1D ��#������>

�����$D ��>D �'()4>�����!$#������ ����"$������7 �����&�#�> ��1���.��F���"�.D ����!�� � E��T�U��V>

\$D�<>D�'()8>���B�F�������������6$��#��./��$��������#?��"�.������!��11"�#������>���������#�!�&�#������D����0�"VD��W>

))

���V���-"��.��0�#��

01023�45�-�6���77

] #8��99:::���������������9�������9��� ;�#��

] #8�99:::�����������9��9�������9

] #8�99�������� �� �9����9<��=)))>�����

] #8�99 ������ �#�� �� �9������.� ?9�.����������@)&&A)AB

] #8��99 ������ �#�� �� �9������.� ?9�.����������@)&&A)AB

] #8��99��.� ���. �� ���:��� �����9()�@9)C9(D9 ���������.�������� ������������

���� �� ���9

] #8��99 ��:�E��E���.9:�E�9"�.������,�D,FD�G �G�,(F,(F92�� ��G�G���� �

] #8��99:::���������������9��.������.9�G ������#��

01023�45�-�6��45�$�4H��$02-�6��-��1�$��4-

� #8�99 ����������.9H���9�����9"���7��70# ��9�#�� �7D�7- � �� 74��.�� ��9D��7%����74��

.�� ��7$ �� ����I����#9

� #8��99:::�������9� � � �:�E�9�������9���������

9