Lta ESPECTROMETRIA CON UV-VIS PHARO 300, OBTENCION DE LA CURVA DE TRANSMITANCIA DE RIBOFLAVINA, ANALISIS DE UNA MUESTRA PROBLEMA Y DETERMINACION DE LA CONCENTRACION DE Fe EN UNA MUESTRA DE VINO BLANCO

RESUMEN:En la prctica se calculo el coeficiente de absorcin molar de la Riboflavina el cual fue utilizando soluciones con concentraciones diferentes de analito con el fin de calcular la absorbancia, para esto se empleo el espectrofotmetro UV-Vis PHARO 300 a una longitud de onda de 451nm. Tambin se determino la concentracin del ion Fe2+ en vino blanco la cual fue de 0.127ppm mediante una valoracin espectrofotomtrica por medio de la formacin del complejo rojo-naranja. Lao-fenantrolina.

Palabras clave: riboflavina, Uv-Vis, absorbancia.

INTRODUCCION:

El anlisis colorimtrico es la variacin en la intensidad del color de una solucin con cambios en la concentracin. El color puede deberse a una propiedad inherente del constituyente mismo por ejemplo, MnO4- es prpura o puede deberse a la formacin de un compuesto colorido como consecuencia de la adicin de un reactivo adecuado [1]. Comparando la intensidad del color de una solucin de concentracin desconocida con las intensidades de soluciones de concentraciones conocidas, se puede determinar la concentracin de una solucin desconocida.[1] Para el anlisis espectrofotomtrico de la riboflavina,se obtiene el espectro de absorcin (relacionando absorbancia con longitudes de onda,til para la caracterizacin e identificacin de biomolculas) y construyendo una curva patrn para verificar la ley de Lambert-Beer, calculando luego el coeficiente . La riboflavina (Vitamina B2);es una vitamina hidrosoluble de color amarillo, constituida por un anillo de isoaloxazinadimetilado al que se une el ribitol, un alcohol derivado de la ribosa. Participa en el metabolismo energtico, y es requerida en el metabolismo de grasas, carbohidratos y protenas. Es una vitamina sensible a la luz solar y a ciertos tratamientos, como la pasteurizacin.En cuanto a la ley de Lambert-Beer, pues es una relacin emprica que relaciona la absorcin de la luz con las propiedades del material atravesado. Log (Io / I) = c l Donde Io e I son las intensidades de la luz incidente y emergente, respectivamente, l el paso ptico de la muestra absorbente (cm), c la concentracin de la especie absorbente (moles/litro) y el coeficiente de absorcin molar (M-1 cm-1) Esta ley se aplica con el fin de determinar la concentracin de molculas que absorben la luz, usando para ello el colormetro.[2]En general, una titulacin o valoracin consiste en un procedimiento analtico, que busca evaluar el momento en el que reaccionan cantidades equivalentes de un cido con una base (valoraciones cido-base), de un oxidante con un reductor (valoraciones redox), de un ion metlico con un ligando (valoraciones de complejos), etc. siendo la concentracin de una de las sustancias exactamente conocida. A veces es difcil la observacin del punto final de la reaccin por diferentes razones: cambio gradual del color del indicador, poco contraste de los dos colores del indicador, soluciones turbias, indicadores que pueden ser interferentes en la reaccin, analitos muy diluidos, mezclas de varios analtos que no permiten la observacin visual del punto final, etc. En dichos casos, se recurre a la deteccin del punto de equivalencia por mtodos electromtricos o por mtodos espectrofotomtricos.[3]

METODOLOGIA

Para calcular los coeficientes de absorcin molar de la Riboflavina y el y del Fe2+, se empleo el espectrofotmetro UV-Vis PHARO 300 se realiz un barrido desde 0 hasta 700 nm para encontrar la longitud de onda en la que se absorbe el complejo posteriormente se selecciono la longitud de onda de 451 nm

RESULTADOS Y DISCUSIONES:1. Utilizacin del espectrofotmetro:

Espectro de la riboflavina:

Tabla N1

riboflavinamLbuffer fosfato mLconcentracinAbsorbancia

05000

2480,00040,001

10400,0020,008

15350,0030,016

20300,0040,025

Grafica .1 Absorbancia Vs Concentracin de Riboflavina

Se iguala la ecuacin lineal a la absorbancia:

De la ecuacin anterior se despeja la concentracin que es igual a X.

La muestra presentaba una concentracin de 0.014M

Finalmente para encontrar el coeficiente de absorcin molar de la riboflavina se utilizo la ley de Lambert-Beer donde: A = bcPor tanto:

Se obtuvo que el coeficiente de absortividad de la riboflavina fue de

Determinacin de la concentracin de Fe2+ en vino blanco

Tabla N 2

balnconcentracin de Fe 2+ ppmAbsorbancia

10,446720,088

20,893440,187

31,340160,268

41,786880,366

Espectro del hierro

CURVA DE CALIBRACION DEL Fe

Clculos para encontrar la concentracin del hierro en la muestra diluida de un vino

Donde X es la concentracin y A es la absorbancia de la muestra.

0.025=0.204 (Xppm Fe) - 0.001

El hierro (II) reacciona con o-fenantrolina para formar un complejo de hierro rojo-naranja.Lao-fenantrolina tiene dos pares de electrones desapareados que se pueden usar en formar enlaces covalentes coordinados. La formacin del complejo de hierro se da mediante: 3C12H8N2 + Fe2+ [(C12H8N2)Fe]2+Rojo-naranjaLa intensidad de del color de este complejo es independiente de la acidez de la disolucin entre valores de pH de 3 y 9.Debido a que la velocidad de formacin es mayor en las disoluciones acidas. El hierro existente en estado de oxidacin +3 se reduce con la hidroxilamina antes de aadir la fenantrolina.se debe aadir un exceso de este para eliminar la posibilidad de interferencia provocada por oxidantes fuertes como Cu,Zn,Ni y Cd.4Fe3+ + 2NH2OH4Fe2+ + N2O + 6H+ + H2O Para discernir las diferencias en intensidad de color con exactitud razonable, se utilizo el espectrofotmetro, el cual elimina el error humano. Para la calidad de anlisis es necesario que solo exista el complejo Fe2+ por esos se agrega la hidroxilamina para que no se produzca el complejo Fe3+ el cual es dbilmente absorbente provocando una mala lectura de absorbancia. La o-fenantrolina es un ligando con propiedades acido-base .Por tanto, la formacin del complejo Fe2+ es menos favorable con pH bajos en los que se produce la protonacin de la fenantrolina y esto tambin provoca la disminucin de la absorbancia. Tambin el pH no puede ser mayor a 9 por que el grupo OH- del medio compite y la fenantrolina comienza a competir por el Fe2+ tambin disminuyendo la absorbancia.El agregar el compuesto con hierro no interfiere por que todas las muestras tienen la misma cantidad de tampn de acetato y la curva obtenida del blanco del reactivo tendr en cuenta la contribucin de esta fuente.CONCLUSIONES: Se calculo el coeficiente de absorcin molar y la concentracin de la riboflavina las cuales fueron y 0.014M respectivamente a travs de la colorimetra que sigue la ley de Lambert-Beer. Se determino la concentracin de Fe2+ por medio de la formacin del complejo rojo-naranja. Lao-fenantrolina utilizando una valoracin espectrofotomtrica que tambin sigue la ley de de Lambert-Beer.Preguntas Practica 1 y 21. Cul es la importancia metablica de la riboflavina?

La vitamina B2 (riboflavina) proporciona energa al interior de las clulas y se necesita para producir enzimas decisivas en la liberacin de la energa que tienen las grasas, los carbohidratos y las protenas que ingerimos de los alimentos. Esta vitamina B2 es hidrosoluble y vital para el crecimiento e importante en la reproduccin celular y ayuda a producir glbulos rojos sanos. Mantiene adems, la buena salud de la piel, las uas y el cabello. Incluso es muy probable que ayude a la memoria ya que las personas mayores que tienen niveles normales de vitamina B2 o Riboflavina, mantienen vivos sus recuerdos.

2. Cmo est compuesto el blanco de los reactivos?

El blanco de los reactivos es la solucin en la cual estn todos los componentes menos el que desencadena la reaccin coloreada en este caso es la solucin de buffer fosfato.

3. Por qu deben prepararse las diluciones en buffer fosfato?

Se utiliza la solucin buffer fosfato la cual es una solucin patrn de la cual ya se conocen sus caractersticas, y se utilizan para calibrar el espectrofotmetro.

4. A partir de la curva de calibracin, obtenga la ecuacin de la recta y encuentre la relacin con la ley de Beer.

Ecuacin de la recta:Y=6,6337X 0,0031 R2= 0,9692

Practica 4

1. Estructura de 1,10- fenantrolina

Ecuacin de formacin del complejo rojo-naranja.Lao-fenantrolina:

3C12H8N2+Fe2+ [(C12H8N2)Fe]2+

2. La fenantrolina: acta como base dbil; en disolucin cida, la principal especie es el in fenantrolina pH H+.El clorhidrato de hidroxilamina: acta como reductor en la disolucin para mantener el hierro en el estado +2.Acetato de sodio: se utiliza como solucin buffer o amortiguadora.Sulfato de hierro: es el analito ya que contiene el Fe2+ a analizarBIBLIOGRAFIA:[1] Skoog Douglas, Principios de anlisis instrumental, Edamsa impresiones S.A. Mxico D.C, ed. 6,2008, Pg. 335[2] Prez Pino, Prez Benito, Anlisis de elementos ion traza por espectrofotometra de absorcin molecular UV- Vis, Imprenta San Pablo,Pg. 109[3] Brown Glenn, Qumica cuantitativa, Reverte S.A, Espaa, 1977,Pg. 597