LINFOMA CUTÁNEO NO EPITELIOTRÓPICOEN UN MASTÍN ESPAÑOL

P.J. Ginel, J. Pérez*, R. Lucena,E. Mozos*

RESUMEN.

El linfoma cutáneo no epiteliotrópico (LCNE) es untumor poco frecuente, muy agresivo y de evoluciónrápida. En este trabajo se describe un caso de LCNEen un perro mastín español de 5 años de edad. Elanimal presentó inicialmente nódulos cutáneosmúltiples y lesiones arciformes en la piel de costadosy abdomen. Pocos días más tarde se observó diarreay síntomas sistémicos inespecíficos como anorexia,apatía, hipertermia y rápido deterioro del estadogeneral. En la exploración también se apreciólinfadenopatía generalizada, dolor abdominal ehipovolemia moderada. El diagnóstico se confirmómediante el estudio citohistopatológico einmunohistoquímico de las lesiones cutáneas. Seinició un tratamiento sintomático pero el perro murióa los tres días de ser examinado. La necropsiademostró la existencia de múltiples metástasis encorazón, ganglios linfáticos subcutáneos ymesentéricos, mesenterio, intestino delgado, páncreasy vejiga urinaria.

Palabras claves: Linfoma, Perro; Inmunohístoquírníca.

INTRODUCCIÓN.

Los tumores cutáneos representan el 30% de lostumores caninos y el 20% de los felinos(5).Dentrode ellos se incluye el linfoma cutáneo, un tumorde células redondas, de escasa incidencia en elperroü. 10), que puede presentarse de forma pri-maria o secundaria, según se origine directamen-te en la piel o bien sea una metástasis de linfomasprimarios de otros órqanos'U. En el perro, los lin-famas cutáneos primarios se presentan de dosformas clínica e histológicamente diferenciables:los linfamas cutáneos epiteliotrópicos (LCE) y loslinfomas cutáneos no epiteliotrópicos (LCNE).

Departamento de Medicina y Cirugía Animal;*Departamento de Anatomía yAnatomía Patológica Comparadas.Facultad de Veterinaria de Córdoba.Campus de Rabanales.Ctra. Madrid-Cádiz km 396;14014 Córdoba.

ABSTRACT.

Cutaneous non-epitheliotropic Iymphoma is araretumour with an agressive biological behaviourcharacterised by a rapid progression of the disease. Inthis article, a cutaneous non-epitheliotropiclymphoma is described in a 5-year-old Spanish Mastíndogo The dog first clinical signs were multiplecutaneous nodules and bilateral arciforrn lesions inboth flanks and abdominal skin. Few days later, thepatient developed diarrhea and non-specífíc signssuch as inappetence, lethargy and hyperthermia. Atexamination the dog also showed poor bodycondition, generalised Iymphadenopathy, abdominalpain and signs of mild hypovolemic shock. Diagnosiswas confirmad by the cytohistopathological andimmunohistochemical analyses. Symptomatictreatment was instaured but the dog died three daysafter íírst examination. Necropsy revealed multiplemetastases to the heart, subcutaneous and mesentericIymph nodes, small intestine, mesenterium, pancreasand urinary bladder.

Key words: Lymphoma; Dog; Immunohistochemistry.

Ambas formas afectan, en su mayoría, a perrosde edad avanzada. No se ha confirmado predilec-ción por un sexo o raza(1,14),aunque se ha descri-to una mayor incidencia en Boxer, Pastor alemány San Bernardouo. Los LCE están constituidospor linfocitos T neoplásicos con marcado epite-liotropismo, lo que da lugar a un acúmulo discre-to de células tumorales dentro de la epidermis(l, 5,8, 12,15).Los LCNE inicialmente se considera-ban producidos por linfocitos tumorales tanto Tcomo B que infiltran difusamente la dermis y eltejido subcutáneos. 5).Las formas no epiteliotrópicas son las menos

frecuentes en el perroü. 14)y sus manifestaciones

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Fig. 1.Aspecto de un nódulo cutáneo. La zona central de la lesión estaba ero-sionada y cubierta por un exudado serohemorrágico. El pelo ha sido cortado.

Fig. 2. Varios nódulos de pequeño tamaño junto a una característica lesiónde configuración arciforme en la piel del abdomen izquierdo.

clínicas son variadas, aunque es constante la apa-rición aguda de nódulos solitarios o múltiples.Ocasionalmente se han descrito lesiones de eri-troderma exfoliativa, lesiones ulcerativas en lamucosa oral y pruritoü. 12). La mayoría de casoscursan con manifestaciones sistémicas típicas delos linfomas, que aparecen bien en las primerasetapas de la enfermedad o bien cuando se desa-rrollan las lesiones cutáneasé'. Son tumores muyagresivos, que progresan con gran rapidez tras laaparición inicial de la lesión. El tratamiento tradi-cional mediante quimioterapia o inmunoterapiaes poco efectivoü. 5,10). Así, la quimioterapia com-binada no parece alargar el periodo de supervi-vencia del animal, que se cifra en una media de1,8 meses desde la aparición de las lesiones cutá-neas. El tratamiento quirúrgico es viable en casosde lesiones localizadas pero sólo excepcionalmen-te se consigue la remisión a largo plazo o la cura-cíónuï. El pronóstico de este tipo de linfoma esgrave(l, 14).Este trabajo ilustra las lesiones cutáneas carac-

terísticas del LCNE en un perro mastín español demediana edad.

Fig. 3. Abdomen derecho. Detalle de lesión en forma de herradura. Se apre-cia el eritema y la marcada elevación de los bordes.

CASO CLÍNICO.Un perro mastín español, macho, de 5 años deedad, se presentó en la consulta de dermatologíapor la aparición aguda de lesiones cutáneas aso-ciadas con diarrea, anorexia y depresión desdehacía una semana. En la exploración general seapreció hipertermia, astenia y dolor a la palpa-ción abdominal. En la piel, destacó la presenciade nódulos múltiples generalizados, cutáneos y/osubcutáneos, con un tamaño que oscilaba entrelos 0,5 y 4,5 cm de diámetro, cubiertos por pielnormal y apreciables sólo por palpación. En algu-nas áreas confluían para formar placas extensas,y en otras aparecían erosionados y cubiertos porun exudado serohemorrágico (Fig. 1). En la pieldel abdomen y flancos destacaban varias lesionesde gran tamaño, eritematosas, de bordes elevadosy con una llamativa configuración arciforrne (Figs.2 y 3).Las muestras obtenidas por aspiración con

aguja fina mostraron una población homogéneade células redondas, de mediano tamaño y demorfología linfoide; ocasionalmente se observa-ron neutrófilos no degenerados. El carácter tumo-ral de los linfocitos era más evidente a mayoresaumentos; se caracterizó por núcleos grandes,vesiculosos, con varios nucléolos indicativos de unalto grado de actividad metabólica (Fig. 4). No seobservaron bacterias ni otros posibles agentesetiológicos externos. El hemograma y la bioquí-mica sanguínea fueron normales, así como el tra-zado electroforético y los niveles de gammaglobu-linas.Con el fin de confirmar el carácter neoplásico delas lesiones se tomaron biopsias de las lesionescutáneas. Por condicionantes del propietario, el

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Fig. 4. Aspiración con aguja fina de uno de los nódulos. Células tumorales,redondas y de aspecto Iinfoide.

Fig. 5. Infiltración difu-sa de células Iinfoidesneoplásicas en dermissuperficial y profundasin afectar a epidermis.Hematoxilina-eosina,xlOO.

animal no pudo ser hospitalizado y en espera dela confirmación del diagnóstico se instauró un tra-tamiento provisional a base de fluidoterapia, cefa-lexina (20 mg/kg/12h) y prednisona (1 mg/kg/d).A pesar del tratamiento el estado del animalempeoró rápidamente y murió a los tres días deser examinado.

MATERIAL Y MÉTODOS.Las muestras obtenidas en las biopsias cutáneasy en la necropsia se fijaron en formol tamponadaal 10% durante 24 horas y se incluyeron en para-fina. Para el estudio estructural los cortes se tiñe-ron con las técnicas de hematoxilina-eosina yGiemsa. Para el estudio inmunohistoquímico seempleó la técnica del complejo avidina-biotina-peroxidasa (ABC) y los siguientes anticuerpos:

Fig. 6. a) Masiva infiltración difusa de células tumorales en dermis profunda,ocupando parcialmente el tejido adiposo y comprimiendo a las glándulas sudo-riparas apocrinas ( ~ ). x200. b) Detalle en el que se aprecia la morfologíairregular de las células neoplásicas, algunas de las cuales muestran diferencia-ción plasmática (.... ). x400. Hematoxilina-eosina.

anti-CD3 humano (Linfocitos T) (diluido al1:300), anti-cadenas ligeras de À.-IgG humana(À.-IgG)(diluido al 1: 1500) y anti-CD79 humano(Linfocitos B) (diluido al 1:50). Los tres anticuer-pos fueron obtenidos de los laboratorios Dako(Glostrup, Dinamarca) y en los tres se ha descritoreacción con antígenos caninos (Ferrer et al.,1993, Milner et al., 1996, Fournel-Fleury et al.,1997). Como anticuerpos secundarios y reactivoterciario se utilizó un kit prediluido de los labora-torios Vector (Burlingame, CA, USA). Como con-troles positivos se utilizaron cortes de ganglios lin-fáticos caninos normales. Como controlesnegativos se emplearon cortes seriados en los quelos anticuerpos policlonales anti-CD3 y anti cade-nas ligeras lambda- IgG fueron sustituidos porsuero no inmune de conejo, y el anticuerpomonoclonal anti-CD79 humano fue sustituido porsuero no inmune de ratón.

RESULTADOS.El estudio histopatológico de las biopsias cutá-neas confirmó la infiltración masiva y difusa decélulas linfoides neoplásicas desde la dermissuperficial hasta el tejido subcutáneo y desplazan-do o comprimiendo a los folículos pilosos y glán-dulas sebáceas de la zona (Fig. 5). En algunasáreas la epidermis mostraba ulceración e infiltra-do local de neutrófilos. En ninguna de las mues-tras se observó infiltración de la epidermis porcélulas neoplásicas. En cuanto a las característicasde las células tumorales, éstas eran redondeadas opoliédricas, con morfología y tamaño variable; elnúcleo era esférico o escotado y vesiculoso, fre-cuentemente con dos o más nucleolos muy evi-dentes (Fig. 6). El citoplasma era de tamaño

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Fig. 7. À-IgG. La mayoría de las células tumorales localizadas en dermis pro-funda presentan intensa inmunorreacción. ABC, x200.

variable, acidófilo o anfófílo. Algunas células neo-plásicas eran de pequeño tamaño, núcleo esféricoy muy basófilo y citoplasma escaso. De forma oca-sional algunas células tumorales presentaban carac-terísticas similares a células plasmáticas. El índicemitótico era elevado en la mayoría de las muestrasanalizadas. En áreas intratumorales se observaroncon frecuencia células neoplásicas en necrosis, ais-ladas o en pequeños grupos. El patrón histopatoló-gico de las lesiones cutáneas coincidió con el de unlinfoma cutáneo no epiteliotrópico. Las caracterís-ticas cito-histológicas de las células tumorales coin-cidieron con las descritas para los linfamas inmu-noblásticos de alto grado de maliqnidad'?'.En la necropsia del animal se apreció que las

lesiones cutáneas no sólo afectaban a la piel, sinoque de forma difusa invadían tejido subcutáneo yfrecuentemente planos musculares de la paredabdominal. Al corte, estas lesiones eran de con-sistencia media, uniformes, de color blanco-grisá-ceo con focos hemorrágicos ocasionales. Losganglios linfáticos subcutáneos y .mesentèricospresentaban un gran aumento de tamaño y colo-ración homogénea blanco-grisácea al corte. Enepicardio se observaron numerosos nódulos blan-quecinos de 0,2-1 cm de diámetro, algunos de loscuales afectaban también al miocardio. En elmesenterio y la serosa de intestino delgado, enpáncreas y en la pared de vejiga urinaria tambiénse observaron múltiples nódulos de 0,2-2 cm dediámetro, que a veces confluían para formar lesio-nes mayores. No se observaron lesiones macros-cópicas en el resto de órganos.El estudio histopatológico de las lesiones cutá-neas confirmó los hallazgos de las biopsias pre-vias. En epicardio y miocardio, ganglios linfáticosmesentéricos y subcutáneos, páncreas, mesente-rio y en la pared de intestino delgado y de vejigaurinaria se observó una invasión masiva y difusa

de células neoplásicas de características morfoló-gicas similares a las descritas en las lesiones cutá-neas. El bazo mostró una discreta deplección delinfocitos maduros.En el estudio inmunohistoquímico las célulasneoplásicas, en una proporción superior al 60%,presentaron una intensa inmunotinción citoplas-mática, principalmente en la membrana celular,frente al anticuerpo À-IgG (Fig. 7). Con los anti-cuerpos CD3 y CD79 no se observó inmunorre-acción de las células tumorales.

DISCUSIÓN.El LCNE del perro es una entidad bien conocidaen dermatología veterinaria y citada con frecuenciaen estudios retrospectivos sobre problemas linfo-proliferativos del perro(6, 13,14).Sin embargo, y alcontrario de lo que ocurre con el LCE o micosisfungoides, son muy escasos los estudios que des-criban de forma detallada los aspectos clínicos deltumor(1,9). El principal interés de este trabajo esilustrar las lesiones cutáneas características delLCNE. También puede destacarse la descripción,por primera vez, del LCNE en la raza mastínespañol y a una edad inferior a la descrita habí-tualmenteü' .Los linfomas cutáneos representan el 3-8% detodos los linfomas del perro. El LCE es la formamás frecuente y existen numerosos casos clínicospublicadosü. 8, 10).Las lesiones cutáneas son varia-bles e incluyen eritema, nódulos, placas, desca-mación, pápulas y ulceración en piel y mucosas;también puede haber prurito'ü. Las manifestacio-nes del LCNE son menos variadas; Beale y Balan(1993) describieron la aparición de nódulos yúlceras en el 100% y 55,6% respectivamente deuna serie de 9 casos. El resto de lesiones descritasen el LCNE (placas, eritema y descamación) asícomo el prurito, se presentaron de forma ocasio-nal. Coincidiendo con esta descripción, las lesio-nes cutáneas en este caso clínico se limitaron anódulos múltiples en ocasiones ulcerados. Tam-poco hubo afección de mucosas ni prurito y,como es característico del LCNE, el desarrollo delesiones cutáneas fue seguido de la aparición desíntomas sistémicos inespecifícos'>. 10,12,14).Las lesiones cutáneas más llamativas de estecaso se caracterizaron por su configuración arci-forme o en herradura con bordes elevados. Enalgunos casos de LCE se han descrito lesionesanulares de bordes elevados, mientras que sólo enun caso de LCNE se presentaron lesiones nodula-

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res de configuración serpiginosaü'. Estas lesionesson similares a las observadas en nuestro caso ydada su particular morfología puede atribuírselesun alto valor diagnóstico en la clínica del linfomacutáneo primario.Las manifestaciones sanguíneas del linfoma sonescasasü. 10,14).Aunque el LCNE es una neoplasiade linfocitos tipo B, en pocas ocasiones se ha des-crito su asociación con gammapatías monoclona-les o políclonalese. 14).En nuestro caso, el hemo-grama y la bioquímica sanguínea no revelaronningún dato de interés, y tanto los niveles de gam-maglobulinas como el trazado electroforético fue-ron normales.La citología es un medio rápido para apoyar undiagnóstico provisional de linfoma cutáneo, aun-que el diagnóstico definitivo requiere del estudiohistopatológico de las lesiones. La citología reve-ló una población homogénea de células redondasde mediano tamaño y de morfología linfoide. Lacaracterización inmunofenotípica de los linfamascaninos ha sido difícil al no disponerse de anti-cuerpos específicos para el perro(14). Sin embar-go, actualmente existen en el mercado anticuer-pos monoclonales que reaccionan con loslinfocitos T caninos'ê. 14).Mediante estos anticuer-pos, se sabe que la mayor parte de los linfomasson de células B, mientras que los linfamas tipo Trepresentan del 10-38% del total de casos(14).El inmunofenotipo del linfoma descrito en elpresente estudio (CD3-, CD79- y À-IgG+)es pococomún, ya que entre los linfamas malignos cen-troblásticos e inmunoblásticos considerados comolinfomas de células B, el 82,7% expresan el antí-geno CD79, y el 65,5% expresaron IgM de

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superficie. La ausencia del antígeno CD79 endichos linfomas caninos, así como en linfomas decélulas B humanosé- 7,11), se ha asociado a unadiferenciación plasmocitaria o inmunoblástica conelevada expresión de inmunoglobulinas de super-ficie. Estos hallazgos coinciden con los observa-dos en nuestro caso, ya que se trataba de un lin-fama maligno inmunoblástico CD79-, con unaelevada expresión de IgG de superficie, aunque ladiferenciación plasmática sólo se apreció en algu-nas áreas del tumor. Estos resultados contrastancon los observados en otro estudio sobre LCNE,donde 8 de 10 linfomas expresaron CD3 y sólouno À-IgGt4).La rápida evolución clínica y el carácter agresivodemostrado por el tumor son también caracterís-ticos del LCNE(l). Las lesiones cutáneas tuvieronun curso agudo y la evolución se completó en sólodos semanas. El tratamiento de los linfomas cutá-neos se basa en la quimioterapia salvo que se pre-senten lesiones nodulares únicas. En general, elpronóstico del LCNE es más grave que el delLCE. En una serie de 9 casos, no se obtuvo res-puesta a la quimioterapia y tampoco se consiguióprolongar significativamente el periodo de super-vivencia del animalü'.En conclusión, el linfoma cutáneo no epiteliotró-pico es un tumor de escasa incidencia en el perro.Las lesiones en forma de herradura junto con laaparición de nódulos múltiples pueden considerar-se de gran valor diagnóstico, aunque se requiere elanálisis citohistopatológico para su confirmación.La rápida evolución de estos tumores linfoidesjunto con la escasa respuesta al tratamiento hacenque el pronóstico del LCNE sea muy grave.

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