metode hplc untuk pemisahan obat
DESCRIPTION
Analisis kimiaTRANSCRIPT
![Page 1: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/1.jpg)
Metode High Performance Liquid
Chromatography untuk Pemisahan
NSAIDs dan Analgesik Opioid padaNSAIDs dan Analgesik Opioid pada
Sistem Penghantaran Obat dan
Plasma Manusia
Larasati
![Page 2: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/2.jpg)
Pendahuluan
• Penanganan rasa sakit telah berkembang
• Kombinasi NSAIDs dan analgesik opioid sering
diresepkan untuk mengurangi rasa sakit yang
hebat, misalnya pada kanker dan pascahebat, misalnya pada kanker dan pasca
operasi
• Penting untuk mengetahui kadar analgesik di
dalam darah untuk memonitor efek klinis dan
ketoksikannya
![Page 3: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/3.jpg)
Pendahuluan
• Na diklofenak (derivat asam arilpropionat)
adalah NSAIDs yang memiliki efek analgesik,
antipiretik, dan antiinflamasi
• Mekanisme aksi yaitu menghambat COX dan• Mekanisme aksi yaitu menghambat COX dan
menekan biosintesis prostaglandin
• Flurbiprofen (derivat asam propionat) adalah
NSAIDs untuk menangani rematik
• Tramadol HCl adalah agonis opioid yang
memblok reseptor µ
![Page 4: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/4.jpg)
Struktur kimia sampel
DFS = Na diklofenakDFS = Na diklofenakFLP = FlurbiprofenTMD = Tramadol HCl
![Page 5: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/5.jpg)
Sistem dan kondisi kromatografi• The Sykam GmbH HPLC system consisted of S-2100 solvent
delivery system (Germany)
• VE 3210 variable UV/Vis detector
• Rheodyne sample injector with a 20 µl loop
• Hypersil ODS column (250mm x 4.6mm); 5µm particle size of
internal packinginternal packing
• S 4011 column thermo controller (30˚C)
• Pemisahan isokratik dengan komposisi fase gerak yang telah
dioptimasi
• Fase gerak asetonitril-bufer NaH2PO4 (pH 3.5; 10mM) :
asetonitril (33 : 67 v/v)
• Flow rate 1.0 ml/minute
• 242 nm (0-5 min) dan 274 nm (5-11 nm)
![Page 6: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/6.jpg)
Penyiapan Larutan Baku
• Larutan standar DFS, FLP, TMD 100 µg/ml
dibuat dengan melarutkan 100 mg @ obat
dalam 100 ml asetonitril
• Range pengenceran baku 10 ng/ml – 20 • Range pengenceran baku 10 ng/ml – 20
µg/ml untuk DFS dan 20 ng/ml – 10 µg/ml
untuk FLP dan TMD
• Pengenceran plasma manusia setelah di-
spiking dengan konsentrasi obat tertentu
![Page 7: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/7.jpg)
Penetapan kadar analgesik dalam obat
paten
• 10 tablet DFS, FLP, TMD dan 10 kapsul
sustained release DFS, FLP ditumbuk,
ditimbang setara dengan berat tertentu, dan
dilarutkan dalam 100 ml asetonitrildilarutkan dalam 100 ml asetonitril
• Sampel disonikasi 5 menit dan disaring
dengan filter 0.45 µm
• 1 ml filtrat dilarutkan 50 ml asetronitril
• 20 µl diinjeksi ke sistem HPLC
![Page 8: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/8.jpg)
Penetapan kadar analgesik dalam
sistem penghantaran obat
• Microcapsule (liposom) DFS, FLP, TMD setara
dosis tertentu ditimbang, dilarutkan dengan
asetonitril, disentrifugasi, dan disaring dengan
filter 0.45 µmfilter 0.45 µm
• 1 ml filtrat dilarutkan 50 ml asetronitril
• 20 µl diinjeksi ke sistem HPLC
![Page 9: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/9.jpg)
Penetapan kadar NSAIDs dalam
plasma manusia
• Sampel darah diambil, disentrifugasi, dan
disimpan pada suhu -20˚C
• Sampel diekstraksi dan supernatanSampel diekstraksi dan supernatan
diinjeksikan ke dalam HPLC
![Page 10: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/10.jpg)
Hasil dan Pembahasan
Pemilihan sistem
kromatografi
![Page 11: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/11.jpg)
Penetapan kadar analgesik dalam sediaan obat
Akurasi dan presisi within day
![Page 12: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/12.jpg)
Penetapan kadar analgesik dalam sediaan obat
Akurasi dan presisi inter day
![Page 13: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/13.jpg)
Penetapan kadar analgesik dalam sediaan obat
Recovery
![Page 14: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/14.jpg)
Penetapan kadar analgesik dalam plasma
Linearitas Kurva Baku
![Page 15: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/15.jpg)
Penetapan kadar analgesik dalam plasma
Akurasi dan presisi within day
![Page 16: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/16.jpg)
Penetapan kadar analgesik dalam plasma
Akurasi dan presisi inter day
![Page 17: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/17.jpg)
Penetapan kadar analgesik dalam plasma
stabilitas
![Page 18: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/18.jpg)
Penetapan kadar analgesik dalam plasma
stabilitas
![Page 19: metode hplc untuk pemisahan obat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022073103/55cf92d1550346f57b99d15b/html5/thumbnails/19.jpg)
Conclusion
• A simple and inexpensive simultaneous HPLCmethod for the determination of analgesicsemploying UV detection was developed and foundsuccessful in analysis of marketed brands, drugdelivery systems and human plasma samples.delivery systems and human plasma samples.
• The validation parameters were also found inacceptable limits of FDA and ICH.
• The method was found accurate, precise and stablethat makes it applicable for quality controloperations in pharmaceutical industry,pharmacokinetics studies and therapeutic drugmonitoring of these drugs in clinical settings.