Coloratii SpecialeAceste structuri se coloreaza omogen prin tehnici de coloratie simple sau complexe.1. Evidentierea peretelui celular-albastru alcian - acest colorant prezinta afinitate selectiva pentru peretele celular pe care il va colora in albastru intens, fata de citoplasma care va fi un albastru palid.Etapele:-frotiu - din cultura de Bacillus PR11 - NU SE FIXEAZA IN FLACARA; se face fixare cu FORMALDEHIDA - 5 minute; spalare cu apa de robinet, se adauga colorantul (albastru alcian) - 1 minut;spalare cu apa de robinet; uscare; vizualizare la microscop2. Evidentierea endosporului bacterianIn conditii nefavorabile de mediu, formele vegetative ale celulei bacteriene pot intra intro stare latenta trecand intro forma sporala se formeaza endospori bacterieni care reprezintade fapt forme de rezistenta la conditiile nefavorabile din mediul inconjurator (NU AU ROL IN INMULTIRE). Celulele care formeaza spori se numesc sporogene. Sporii se intalnesc la doua speciibacteriene: Bacil gram pozitiv, o specie aeroba: bacilus si o specie anaeroba: genul clostridium. Acesti spori pot avea si rol in taxonomie, tinand cont de forma si dispozitia acestuia. Astfel, sporii pot fi dispusi central (ex B. anttracis), subterminal (B. cereus), terminal (B. clostridium).Datorita invelisurilor sporale groase si particularitatilor biochimice ale acestuia, endosporul nu se coloreaza prin tehnici obisnuite. Pe coloratia gram, aceasta apare ca o zona incolorain interiorul celulei vegetative. Endosporul bacterian se coloreaza folosind solutii de colorare concentrate care sa actioneze la cald.Etapele:-frotiu - din cultura de Bacillus subtilis.- se adauga verde de malachit - 5 minute cu 3 emisii de vapori. - spalare cu apa de robinet- fucsina - 1 minut- spalare cu apa de robinet- uscare- vizualizare la microscop3. Incluziile citoplasmaticeReprezinta un material biologic inert, se formeaza in celulele bacteriene. Au rol de material de rezerva, rol in reglarea presiunii osmotice si a PH-ului intracelular. In functie de natura incluziilor, acestea poti fi: incluzii simple sau polimerice; organice sau anorganice.Incluziile organice simple sunt: incluzii de carbonat de calciu, carbonat de fier.Incluziile polimerice anorganice sunt: sunt incluzii de volutina sau polimetafosfati.Incluziile polimerice organice sunt: incluzii de glicogen, de amidon, polihidroxibutirat.Pentru incluzii se foloseste coloratia D' ALBERT - e un amestec de albastru de toluidina si albastru de metilen. Etapele:- frotiu - Bacillus cereus.- colorare D' Albert - 3-5 minute- spalare- colorare solutie lugol - 1 minut- spalare- uscare- vizualizare la microscop4. Capsula bacterianaE o structura accesorie a celulei bacteriene, extra parietala. Are rol de a concentra nutrienti din mediu, rol de protejare de uscaciune, si rol antifagocitar.Coloratie cu rosu de Congo.Etapele:- frotiu - cultura de Klebsiella sp - se face direct frotiul intro picatura de rosu de Congo, NU SE FIXEAZA IN FLACARA- se adauga mordant pentru capsula - 2 3 minute- spalare - vizualizare la microscop