Par : S / Abdessemed

Le sang, au sortir de l’organisme, est au

contact avec des surfaces mouillables

chargées négativement (comme le verre

non traité). Ce fait entraîne une

activation de l’hémostase avec, pour

issue, la prise en masse des composants

sanguins dans un réseau insoluble de

molécules de fibrine polymérisées.

Le sang doit donc immédiatement être

prélevé sur anticoagulant si l’analyse

nécessite du sang total ou du plasma.

Sur le sang total, prélevé sur

anticoagulant et homogénéisé, sont

réalisés :

1) Hémogramme = NFS (Numération-

Formule-Sanguine) Explore l'anémie,

les défenses immunitaires, les

plaquettes, les maladies du sang.

2) vitesse de sédimentation (VS) = est le

temps nécessaire aux éléments figurés du

sang pour sédimenter, Ce test est non-

spécifique mais il permet d’orienter un

diagnostic de maladies inflammatoires

comme le rhumatisme articulaire, la

péricardite.

3) Immunophénotypages.

4) Des dosages de composés biochimiques

érythrocytaires (enzymes, hémoglobines,

vitamines, oligoéléments, ions,

médicaments et toxiques).

5) Des identifications microbiologiques

(hémocultures)…

Le plasma est la fraction acellulaire du

sang. Il est obtenu à partir d’un sang

prélevé sur anticoagulant après

séparation du culot globulaire par

centrifugation.

Dans la plupart des cas, la centrifugation est réalisée avec une accélération de 2000 g pendant 10 minutes et donne un plasma dépourvu de cellules sanguines (PPP ou plasma pauvre en plaquettes).

Par contre, pour l’analyse des plaquettes

(thrombocytes), la centrifugation est

effectuée à faible accélération : 200 g

pendant 10 minutes pour obtenir un

plasma riche en plaquettes (PRP)

A u s o r t i r d e l’organisme, le sang recueilli sur anticoagulant reste liquide (par complexation ou précipitation du calcium ou par amplification d’antithrombines)

Lors du retournement du tube, le sang liquide se positionne sur le bouchon.

Puis, sous l’effet de lapesanteur (accélérée parune centrifugation), deuxphases se dégagent :une phase supérieureliquide jaunâtre : lePLASMAune phase inférieurecomposée des globulesrouges surmontée d’unmince anneau deglobules blancs etplaquettes.

Le plasma séparé, mis en présence d’ions calcium et d'activateur(s) de la coagulation (différents selon le test) va prendre en masse (coaguler) : le caillot plasmatique peut être entrainé par un crochet.

Tube de sang recueilli avec anticoagulant

Sur le plasma sont réalisés par exemple :

1) Des explorations de l’hémostase :(Taux

de Prothombine, Temps de Howell,

Dosage du fibrinogène…)

Bilan lipidique (Triglycérides,

Cholestérol total, Cholestérol HDL =

Cholestérol LDL, Apolipoproteine A1

,Apolipoproteine B) Explore le risque

cardiovasculaire

Bilan glycémique (Glycémie à jeun, Hb

A1c (Hémoglobine glyquée)) Explore le

diabète, et le risque cardiovasculaire

Bilan de la fonction rénale (Créatinine

plasmatique, Urée plasmatique)

Bilan hépatique (bilirubine,

transaminases, Gamma GT,

Phosphatases alcalines…)

Bilan de la fonction thyroïdienne(Le dosage

de la TSH, de T3 et T4) permet

l'exploration des hypo- et hyperthyroïdies

Des dosages de médicaments et de

toxiques.

Le sérum est obtenu à partir d’un sang

prélevé sans anticoagulant (en tube sec)

après séparation du caillot par

centrifugation. Celle-ci sera effectuée

une fois la coagulation achevée.

Au sortir de l’organisme etpendant 10 minutesenviron, le sangmaintenu à37°C resteliquide.

Après rétraction du caillot ou centrifugation (après activation), d’uAprès rétraction du caillot ou centrifugation (après activation), deux phases peuvent être visibles :

une phase supérieure liquide jaunâtre : le SÉRUM

une phase inférieure composée d’un polymère insoluble de fibrine emprisonnant les cellules : le CAILLOT. n polymère insoluble de fibrineEmprisonnant les cellules :le CAILLOT.

Pl Puis, il prend en masse et le tube peut être prend retourné : en

AprèsAprès 48 heures, le sang maintenu à 37°C est redevenu liquide par action de la fibrinolyse

Tube de sang recueilli sans anticoagulant ou avec un activateur de coagulation

1) De nombreuses recherches

immunologiques (dépistage des

anticorps (anti HIV, anti HCV, TPHA…),

titrages d’anticorps (ASLO…), mise en

évidence d’antigènes (Ag HBS…).

2) Des dosages biochimiques.

3) Des dosages de médicaments et de

toxiques.

Avantages Inconvénients

C’est le constituant naturel du sang. L’anticoagulant interfère avec certains dosages, EDTA complexant tous les cations divalents, inhibant, par exemple, les phosphatases alcalines et activant, par exemple, la phosphatase acide.

La séparation rapide de la phase liquide et des La présence des facteurs de la coagulation

cellules du sang par centrifugation évite la introduit une variable interindividuelle surdiffusion de molécules cellulaires vers le plasma

l’absorbance propre du liquide ainsi que sur sa

et permet de l’obtenir plus rapidement (urgence).

fluidité.

Les facteurs protéiques de la coagulation ne sont

La précipitation du calcium, sous forme d’oxalate

pas consommés : exploration possible de la de calcium, interfère dans les dosagescoagulation en différé. spectrophotométriques

Le plasma

Avantages Inconvénients

La conservation est meilleure et réalisée après Le délai d’obtention est plus grand (possibilitécongélation d’aliquotes (faibles fractions égales)

d’augmenter la surface mouillable pour accélérer

car la richesse en protéines est moindre. la vitesse de coagulation).

La coagulation n’est plus possible d’où une La difficulté de prélever dans le tube est plus

fluidité plus grande dans les tubulures des importante avec un risque plus grand deautomates et l’élimination d’une cause contamination érythrocytaire (utiliser und’obturation. séparateur pour diminuer ce risque).

Il n’y a pas d’ajout de molécules d’interférence

La coagulation utilise des molécules (glucose) et

possible avec les analyses (ex : EDTA et Mg2+).

produit des métabolites (CO2, HCO3-, acides organiques).

Le sérum