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Sofia RSV FIA Seite 1 von 29

NUR ZUM GEBRAUCH MIT DEM SOFIA UND SOFIA 2 Komplexität der CLIA: Moderat für pädiatrische Patienten von 7

bis unter 19 Jahren Komplexität der CLIA: OHNE AUFLAGE für Kinder unter 7 Jahren

Zur In-vitro-Diagnose. Eine Bescheinigung über die Befreiung ist erforderlich, um diesen Test in einer Umgebung durchzuführen, die die CLIA-Auflagen nicht erfüllen muss. Dieser Test kann auch von Laboren verwendet werden, die Untersuchungen von moderater und hoher Komplexität durchführen. Wenden Sie sich bitte an das staatliche Gesundheitsministerium, um eine Bescheinigung über die Befreiung zu erhalten. Zusätzliche Informationen über die Befreiung von CLIA-Auflagen stehen auf der Medicare- und Medicaid-Website unter www.cms.hhs.gov/CLIA zur Verfügung bzw. sind von Ihrem staatlichen Gesundheitsministerium erhältlich. Nichtbeachtung der Anleitung bzw. Änderung der Testsystemanleitung führt dazu, dass der Test den Anforderungen für die Klassifizierung ohne Auflagen nicht mehr entspricht.

BESTIMMUNGSGEMÄSSER GEBRAUCH Der Sofia RSV FIA nutzt Immunofluoreszenz für den Nachweis von RSV-(respiratorischem Syncytial-Virus)-Nukleoprotein-Antigen vom Nasenrachenabstrich und von Nasenrachenaspirat/ -spülflüssigkeitsproben von symptomatischen Patienten. Dieser qualitative Test dient als Hilfsmittel zur raschen Diagnose von akuten RSV-Infektionen pädiatrischer Patienten. Negative Ergebnisse schließen eine RSV-Infektion nicht aus und sollten nicht als alleinige Basis für die Behandlung oder andere Patienten-Management-Entscheidungen dienen. Ein negatives Ergebnis ist möglich, und es wird empfohlen, diese Ergebnisse durch eine Virenkultur oder durch einen von der FDA zugelassenen molekularen RSV-Assay zu bestätigen.

Der Sofia RSV FIA kann mit dem Sofia oder Sofia 2 verwendet werden.

ZUSAMMENFASSUNG UND ERLÄUTERUNG RSV ist ein Erreger der äußerst ansteckenden, akuten Virusinfektion der Atemwege bei Kindern und älteren Bevölkerungsgruppen. Das respiratorische Syncytial-Virus (RSV) ist ein einzelsträngiges RNA-Virus.1 Fast die Hälfte aller Kinder infizieren sich in ihrem ersten Lebensjahr mit RSV. Es ist außerdem die Hauptursache für nosokomiale Erkrankungen bei Kindern, die sich aus anderen Gründen bereits im Krankenhaus aufhalten.2 Laut Schätzungen ist das RSV in den USA für jährlich 73.400 bis 126.300 Krankenhausaufenthalte wegen Bronchiolitis und Lungenentzündung allein bei Kindern unter einem Jahr verantwortlich.3 Bei einer Analyse der viralen Überwachungs- und Mortalitätsdaten der USA wurde das respiratorische Syncytial-Virus (RSV) als die häufigste virale Todesursache bei Kindern unter fünf Jahren angegeben, verglichen mit Influenza-A H1N1, Influenza-A H3N2 und Influenza-B.4 Bei Kindern, die sich wegen einer RSV-Infektion im Krankenhaus aufhalten, beträgt die Sterberate schätzungsweise 0,3 bis


1,0 %3, 5 und bei Kindern mit einer zugrunde liegenden Herz- oder Lungenerkrankung beträgt sie ca. 2,5 bis 4,0 %.3, 5, 6

TESTPRINZIP Der Sofia RSV FIA-Test nutzt die Immunofluoreszenz-Technologie, die für den schnellen Nachweis von RSV-Antigenen mit dem Sofia und Sofia 2 – eingesetzt wird. Der Sofia RSV FIA-Test umfasst den Virusaufschluss und den Nachweis von Nukleoproteinen im Virus. Die Patientenprobe wird in das Reagenzröhrchen gegeben; in dieser Zeit werden die Virusteilchen in der Probe aufgeschlossen und enthüllen interne virale Nukleoproteine. Nach Aufschluss wird die Probe in die Probenvertiefung der Testkassette gegeben. Die Probe wandert aus der Probenvertiefung durch einen Teststreifen mit verschiedenen spezifischen chemischen Umgebungen. Wenn RSV-Antigene vorhanden sind, werden sie an einer bestimmten Stelle eingefangen.

Der Benutzer kann zwischen zwei methoden auswählen und entweder die Testkassette in den Sofia oder Sofia 2 einsetzen, damit eine automatisch regulierte Entwicklung ausgeführt wird (Modus „WALK AWAY“), oder die Testkassette auf eine Ablage bzw. einen Labortisch legen, damit eine manuell regulierte Entwicklung ausgeführt und die Testkassette anschließend zum Scannen in den Sofia oder Sofia 2 eingesetzt wird (Modus „READ NOW“).

Der Sofia und Sofia 2 scannt den Teststreifen und misst das Fluoreszenzsignal durch Verarbeitung der Ergebnisse mithilfe methodenspezifischer Algorithmen. Der Sofia und Sofia 2 zeigt die Testergebnisse (Positiv, Negativ oder Ungültig) auf dem Bildschirm an.

REAGENZIEN UND MATERIALIEN IN DER PACKUNG 25-Stück-Test-Kit: Einzeln verpackte Testkassetten (25): Maus-monoklonale Anti-RSV-Antikörper Reagenzröhrchen (25): Lyophilisierter Puffer mit Detergenzien und Reduktionsmitteln Reagenzlösung (25): Ampullen mit Kochsalzlösung Sterile Nasenrachentupfer (25) Kleine (120 µl), durchsichtige Fixvolumen-Pipetten (25) Große (250 µl), rosafarbene Fixvolumen-Pipetten (25) RSV-Positiv-Kontroll-Tupfer (1): Der Tupfer ist mit nicht-infektiösem RSV-Antigen beschichtet Negativ-Kontroll-Tupfer (1): Der Tupfer ist mit hitzeinaktiviertem, nicht infektiösem Streptokokken-

C-Antigen beschichtet. Packungsinhalt (1) Kurzanleitung (1) Qualitätskontrollkarte (auf der Verpackung) Druckerpapier (1)

NICHT IM KIT ENTHALTENE MATERIALIEN Sofia oder Sofia 2 Kalibrationskassette (im Lieferumfang des Sofia Installation Pack oder des Sofia 2 enthalten) Zeitgeber oder Uhr für die Verwendung im Modus „Read Now“ Probenbehälter Sterile Kochsalzlösung für die Entnahme von Nasenrachenaspirat- oder Spülflüssigkeitsproben Für die Entnahme von Nasenrachenaspirat- oder Spülflüssigkeitsproben erforderliche Geräte


WARNHINWEISE UND VORSICHTSMASSNAHMEN Zur In-vitro-Diagnostik. Den Inhalt nicht nach Ablauf des Verfalldatums, das außen auf der Packung aufgedruckt ist,

verwenden. Bei der Entnahme, Handhabung, Lagerung und Entsorgung von Patientenproben und dem Inhalt von

benutzten Kits entsprechende Vorsichtsmaßnahmen befolgen.7 Es wird empfohlen, beim Umgang mit Patientenproben Nitril- oder Latexhandschuhe (oder

gleichwertige Handschuhe) zu tragen.7 Die gebrauchte Testkassette, Fixvolumen-Pipetten, Reagenzröhrchen, Lösungen und Kontrolltupfer

nicht wieder verwenden. Die Testkassette muss bis kurz vor ihrer Verwendung im Folienbeutel versiegelt bleiben und darf

erst dann der Umgebung ausgesetzt werden. Beschädigte Testkassetten und Materialien dürfen nicht verwendet und müssen entsorgt werden. Die Reagenzlösung enthält eine Kochsalzlösung. Wenn die Lösung mit Haut oder Augen in Berührung

kommt, mit viel Wasser abspülen. Um genaue Ergebnisse zu erhalten, müssen die Anweisungen auf der Packungsbeilage befolgt

werden. Zwischen den Tests muss die Kalibrationskassette im mitgelieferten Schutzbeutel aufbewahrt

werden. Falsche oder ungeeignete Probengewinnung, -lagerung und -transport können zu falschen

Testergebnissen führen. Bei ungenügender Erfahrung mit der Probengewinnung und -handhabung muss der Laborant

diesbezüglich geschult werden oder Hilfeleistung von erfahrenen Personen erhalten. Verwenden Sie das in dieser Packungsbeilage empfohlene Virustransportmedium, um optimale

Ergebnisse zu erzielen. Bei der Entnahme einer Nasenrachenabstrichprobe den im Kit enthaltenen Nasenrachentupfer

verwenden. Die entsprechende Fixvolumen-Pipette gemäß Testverfahren verwenden:

Die kleine, durchsichtige 120-µl-Fixvolumen-Pipette ist zum Hinzufügen der Patientenprobe zur Testkassette bestimmt.

Die große, rosafarbene 250-µl-Fixvolumen-Pipette ist für Testverfahren für Aspirat/Spülflüssigkeit bzw. Testverfahren für Virustransportmedien bestimmt, wenn die Patientenprobe vom Sammelbecher in das Reagenzröhrchen übertragen wird.

Keine Proben aus dem Reagenzröhrchen in die Probenvertiefung der Testkassette füllen. Die Patientenprobe mit der kleinen, durchsichtigen 120-µl-Fixvolumen-Pipette zur Testkassette hinzufügen.

Nicht auf den Barcode der Testkassette schreiben. Anhand dieses Barcodes erkennt der Sofia und Sofia 2 den Typ des auszuführenden Tests sowie die jeweilige Testkassette, so dass verhindert wird, dass dieselbe Testkassette ein zweites Mal vom selben Sofia oder Sofia 2 gelesen wird.

Nicht versuchen, eine Testkassette mehrmals zu scannen. Der Barcode auf der Testkassette enthält eine eindeutige Bezeichnung, die verhindert, dass der Sofia und Sofia 2 eine bereits gescannte Testkassette erneut scannt. Wenn eine Testkassette mehr als einmal gescannt wird, erscheint eine Fehlermeldung.

Da es sich bei dem Nachweisreagenz um eine fluoreszierende Substanz handelt, bilden sich keine sichtbaren Ergebnisse auf dem Teststreifen aus. Zur Ergebnisauswertung muss der Sofia oder Sofia 2 verwendet werden.

Testverfahren in Bereichen mit angemessener Belüftung durchführen. Behälter und ungenutzte Inhaltsstoffe gemäß den geltenden Vorschriften entsorgen. Bei der Handhabung der Kitkomponenten geeignete Schutzkleidung, Schutzhandschuhe und

Schutzbrille/Gesichtsschutz tragen.


Nach Gebrauch Hände gründlich waschen. Bitte lesen Sie das Sicherheitsdatenblatt (SDB) auf quidel.com, um weitere Informationen zu

Gefahrensymbolen, Sicherheit, Handhabung und Entsorgung der Komponenten in diesem Kit zu erhalten.

AUFBEWAHRUNG UND STABILITÄT DES KITS Das Kit bei Raumtemperatur (15 bis 30 °C) und vor direktem Sonnenlicht geschützt aufbewahren. Der Inhalt des Kits ist bis zu dem auf der Schachtel aufgedruckten Verfalldatum stabil. Nicht einfrieren.

QUALITÄTSKONTROLLE Bei dem Sofia oder Sofia 2 und der Testkassette kommen drei Qualitätskontrolltypen zum Einsatz: Sofia-Kalibrierprüfung, integrierte Verfahrenskontrollfunktionen und externe Kontrollen.

Sofia-Kalibrierprüfung Hinweis: Hierbei handelt es sich um eine „Kalibrierprüfung“.

Die Kalibrierprüfung sollte alle 30 Tage durchgeführt werden. Der Sofia kann leicht eine Erinnerung zur Durchführung der Kalibrierprüfung ausgeben, wenn er entsprechend eingestellt wurde.

Bei der obligatorischen Kalibrierprüfung werden die Optik und die Berechnungssysteme des Sofias mithilfe einer hierfür vorgesehenen Kalibrationskassette überprüft. Diese Kalibrationskassette ist im Lieferumfang des Sofias enthalten. Für Einzelheiten zur Kalibrierprüfung siehe das Sofia-Benutzerhandbuch.

Wichtig: Zwischen den Tests muss die Kalibrationskassette zum Lichtschutz im mitgelieferten Schutzbeutel aufbewahrt werden.

1. Um die Kalibration des Sofias zu überprüfen, wählen Sie „Kalibration“ aus dem Hauptmenü.

2. Die Kalibrationskassette entsprechend den Bildschirmaufforderungen in den Sofia einsetzen und das Schubfach schließen. Innerhalb von 2 Minuten führt der Sofia automatisch die Kalibrationsüberprüfung durch, wobei keine Benutzereingaben erforderlich sind.


Wenn die Kalibrierprüfung abgeschlossen ist, gibt der Sofia eine entsprechende Meldung aus. Wählen Sie OK, um zum Hauptmenü zurückzukehren.

HINWEIS: Falls die Kalibrierprüfung nicht erfolgreich ausgeführt werden konnte, benachrichtigen Sie bitte den Laborleiter vor Ort, oder wenden Sie sich an den Technischen Support von Quidel unter der Rufnummer 800 874 1517 (innerhalb der USA) oder +1 858 552 1100 (außerhalb der USA), Montag bis Freitag zwischen 7 und 17 Uhr pazifische Zeit; Fax: +1 858 455 4960; [email protected] (Kundendienst); [email protected] (Technischer Support), oder wenden Sie sich an Ihr Vertriebsunternehmen vor Ort.

Sofia 2-Kalibrierprüfung

Die Kalibrierprüfung muss alle 30 Tage durchgeführt werden. Der Sofia 2 kann so eingestellt werden, dass der Benutzer an die Kalibrierprüfung erinnert wird.

Die Kalibrierprüfung ist eine vorgeschriebene Funktion, die die Optik und Berechnungssysteme des Sofia 2 mithilfe einer bestimmten Kalibrationskassette prüft. Die Kalibrationskassette ist im Lieferumfang des Sofia 2 enthalten. Nähere Informationen zur Kalibrierprüfung finden Sie im Benutzerhandbuch zum Sofia 2.

Wichtig: Achten Sie darauf, dass die Kalibrationskassette zum Lichtschutz im bereitgestellten Schutzbeutel aufbewahrt wird, wenn sie nicht in Gebrauch ist.

1. Um die Kalibrierung des Sofia 2 zu überprüfen,

wählen Sie im Hauptmenü „Kalibrierung ausführen“.

2. Die Kalibrationskassette entsprechend den Aufforderungen in den Sofia 2 einsetzen und das Schubfach schließen. Der Sofia 2 führt innerhalb einer Minute automatisch die Kalibrierprüfung durch, wobei keine Benutzereingaben erforderlich sind.

Wenn die Kalibrierprüfung abgeschlossen ist, gibt der Sofia 2 eine entsprechende Meldung aus. Wählen Sie

, um zum Hauptmenü zurückzukehren .

HINWEIS: Falls die Kalibrierprüfung nicht erfolgreich ausgeführt werden konnte, benachrichtigen Sie bitte den Laborleiter vor Ort, oder wenden Sie sich an den technischen Support von Quidel, Montag bis Freitag zwischen 7 und 17 Uhr pazifische Zeit: 800.874.1517 (in den USA); 858.552.1100 (außerhalb der

USA); Fax: 858.455.4960; [email protected] (Kundendienst); [email protected] (technischer Support), oder wenden Sie sich an Ihr Vertriebsunternehmen vor Ort.


Integrierte Verfahrenskontrollen Der Sofia RSV FIA enthält integrierte Verfahrenskontrollfunktionen. Bei jeder Durchführung eines Tests im Sofia oder Sofia 2 scannt der Sofia oder Sofia 2 die Verfahrenskontrollzone, und das Ergebnis wird auf dem Sofia- oder Sofia 2-Bildschirm angezeigt.

Der Hersteller empfiehlt, die Ergebnisse dieser integrierten Verfahrenskontrollen täglich bei der Durchführung des ersten Tests zu dokumentieren. Diese Dokumentation wird automatisch zusammen mit dem Testergebnis im Sofia oder Sofia 2 protokolliert.

Durch ein gültiges Ergebnis der Verfahrenskontrollen wird bestätigt, dass der Test ordnungsgemäß durchgeführt wurde und die Testkassette voll funktionsfähig ist. Die Verfahrenskontrollen werden vom Sofia oder Sofia 2 ausgewertet, nachdem sich die Testkassette 15 Minuten lang entwickelt hat. Falls der Test nicht ordnungsgemäß durchgeführt wurde, zeigt der Sofia oder Sofia 2 an, dass das Ergebnis ungültig ist. Überprüfen Sie in diesem Fall den Ablauf, und wiederholen Sie den Test mit einer neuen Patientenprobe und einer neuen Testkassette.

Externe Qualitätskontrolle Anhand externer Kontrollen kann auch nachgewiesen werden, dass die Reagenzien richtig reagieren und der Test korrekt durchgeführt wurde.

Quidel empfiehlt die Durchführung der externen Positiv- und Negativ-Kontrollen wie folgt:

einmal je ungeschulter Bediener

einmal je neue Kit-Lieferung – vorausgesetzt, dass jedes einzelne Los der Lieferung getestet wird

So vorgehen, wie unter Berücksichtigung Ihrer internen Qualitätskontrollverfahren und im Einklang mit regionalen und staatlichen Bestimmungen oder Akkreditierungsanforderungen als zusätzlich erforderlich erachtet wird.

Beispiel: Diese Anzeige zeigt ein ungültiges Ergebnis am Sofia.

Beispiel: Diese Anzeige zeigt ein ungültiges Ergebnis am Sofia 2.


Um die externen Kontrollen zu testen, muss der Benutzer zuerst aus dem Hauptmenü von Sofia- oder Sofia 2 „Run QC“ auswählen. Dann die QK-Karte (in der Kitverpackung) scannen, wenn eine entsprechende Aufforderung angezeigt wird. Diese Karte liefert Informationen über die jeweilige Kit-Charge einschließlich Chargennummer und Verfalldatum.

Der Benutzer wählt den gewünschten Modus (WALK AWAY oder READ NOW) und führt dann die externen Kontrolle.

Externe Positiv- und Negativ-Kontrolltupfer werden im Kit mitgeliefert und müssen nach dem in dieser Packungsbeilage oder der Kurzanleitung beschriebenen Abstrichtestverfahren getestet werden. Der Positiv-Kontrolltest muss vor dem Negativ-Kontrolltest durchgeführt werden.

Wenn die QK abgeschlossen ist, werden die einzelnen Ergebnisse für die positive und negative Kontrolle am Sofia als „Bestanden“ oder „Nicht bestanden“ oder am Sofia 2 als oder angezeigt.

Keine Patiententests durchführen oder Patiententestergebnisse melden, wenn einer der Qualitätstests fehlschlägt. Wiederholen Sie den Test, oder wenden Sie sich an den technischen Support von Quidel, bevor Patientenproben getestet werden.

Wenn sowohl die positive als auch die negative Kontrolle nicht bestanden werden, wiederholen Sie den Test mit neuen positiven oder negativen Kontrollen. Wenn nur eine einzelne Kontrolle nicht bestanden wird, kann der Benutzer beide Kontrollen (positiv und negativ) ODER nur die nicht bestandene Kontrolle wiederholen. Der Benutzer kann auf der Sofia-Anzeige „Überspringen“ bzw. auf der Sofia 2-Anzeige wählen, um den zuvor bestandenen Kontrolltest zu überspringen. In den QK-Ergebnissen werden übersprungene Ergebnisse auf Sofia als „unbekannt“ bzw. auf Sofia 2 als angezeigt. Weitere externe Kontrolltupfer sind separat erhältlich. Wenden Sie sich dazu bitte an den Kundendienst von Quidel unter der Rufnummer 800 874 1517 (innerhalb der USA) oder +1 858 552 1100.

PROBENENTNAHME UND HANDHABUNG PROBENENTNAHME

Nasenrachentupfer Den im Kit enthaltenen Nasenrachentupfer verwenden. Um eine Nasenrachenabstrichprobe zu entnehmen, den Tupfer vorsichtig in das Nasenloch einführen, das nach Augenschein das meiste Sekret enthält. Den Tupfer nahe unten an der Nasenscheidewand halten, während der Tupfer vorsichtig in den hinteren Nasenrachenbereich eingeführt wird. Den Tupfer mehrmals drehen und dann aus dem Nasenrachenbereich nehmen.

Nasenrachenaspirat-/-spülflüssigkeitsprobe Zur Entnahme von Nasenrachenaspirat-/-spülflüssigkeitsproben das Protokoll Ihrer Einrichtung beachten. Die geringste Menge Kochsalzlösung verwenden, die Ihr Verfahren erlaubt. Falls Ihre Einrichtung über kein Verfahrensprotokoll verfügt, das nachfolgende klinische Verfahrensprotokoll befolgen.

Entnahme einer Nasenrachenaspirat-Probe: Einige Tropfen sterile Kochsalzlösung in die Nasenöffnung geben, die abgesaugt werden soll. Den elastischen Kunststoffschlauch unten entlang der Nasenöffnung, parallel zum Gaumen einführen. Nachdem der Schlauch in den Nasenrachenbereich eingeführt wurde, die Sekrete aspirieren, während der Schlauch bewegt wird. Falls die aus der ersten Nasenöffnung


aspirierte Sekretmenge unzureichend ist, sollte das Verfahren für die andere Nasenöffnung wiederholt werden.

Entnahme einer Nasenrachen-Spüllösungsprobe: Das Kind sollte mit dem Gesicht nach vorne auf dem Schoß des Elternteils sitzen und den Kopf an der Brust des Elternteils anlegen. Die Spritze oder den Aspirationsballon mit dem Mindestvolumen an Kochsalz füllen, das auf Grundlage der Größe und des Alters des Patienten erforderlich ist. Die Kochsalzlösung in eine Nasenöffnung träufeln, während der Kopf nach hinten geneigt wird. Die Spülflüssigkeitsprobe zurück in die Spritze oder den Aspirationsballon aspirieren. Die aspirierte Spülflüssigkeitsprobe weist wahrscheinlich ein Volumen von ca. 1 ml auf.

Alternativ dazu kann der Kopf nach dem Einträufeln der Kochsalzlösung nach vorne geneigt werden, um die Kochsalzlösung in einem sauberen Sammelbecher aufzufangen.

PROBENTRANSPORT UND -LAGERUNG Die Proben sollten möglichst bald nach der Entnahme getestet werden. Wenn die Proben jedoch transportiert werden müssen, wird eine minimale Verdünnung der Probe empfohlen, da eine Verdünnung die Testempfindlichkeit mindern kann. Nach Möglichkeit sollte 1 Milliliter oder weniger verwendet werden, um eine übermäßige Verdünnung der Patientenprobe zu vermeiden. Die folgenden, in Tabelle 1 aufgeführten Virustransportmedien wurden mit Sofia RSV FIA und Sofia getestet und als kompatibel eingestuft:

Tabelle 1 Empfohlene Virustransportmedien

Virustransportmedien (VTM) Empfohlene Lagerungsbedingungen

2 bis 8 °C 25 °C Universelles Copan-Transportmedium 24 Stunden 24 Stunden Hank ausgeglichene Kochsalzlösung 24 Stunden 24 Stunden Liquid Amies Medium 24 Stunden 24 Stunden M4 24 Stunden 24 Stunden M4-RT 24 Stunden 24 Stunden M6 24 Stunden 24 Stunden Stuart modifiziertes Flüssigkeitsmedium 24 Stunden 24 Stunden Kochsalzlösung 24 Stunden 24 Stunden Starplex Multitrans 24 Stunden 24 Stunden Phosphat-gepufferte Kochsalzlösung 24 Stunden 24 Stunden

Hinweis: Bei der Verwendung von Virustransportmedium (VTM) muss gewährleistet werden, dass das VTM, das die Probe enthält, auf Raumtemperatur erwärmt wird. Kalte Proben fließen möglicherweise nicht richtig und können zu falschen oder ungültigen Ergebnissen führen. Es dauert mehrere Minuten, um eine kalte Probe auf Raumtemperatur zu bringen. Die erforderliche Zeit hängt von der bereits existierenden Raumtemperatur, dem Probenvolumen, dem Behältertyp mit der Probe und anderen Faktoren ab. Der Bediener wird aufgefordert, die erforderliche Zeit mit kaltem VTM, das im entsprechenden Labor am häufigsten verwendet wird, experimentell zu ermitteln. Kalte Proben sind zu vermeiden.


DURCHFÜHRUNG DES TESTS Alle Proben – einschließlich Proben im VTM – müssen Raumtemperatur aufweisen, bevor mit dem Assay begonnen wird.

Verfalldatum: Vor dem Gebrauch ist das Verfalldatum auf jeder einzelnen Testverpackung oder Außenverpackung zu überprüfen. Nach Ablauf des auf dem Etikett aufgedruckten Verfalldatums darf der Test nicht mehr verwendet werden. _____________________________________________________________________________________

Testverfahren für Nasenrachenabstrich 1. Sicherstellen, dass der Sofia oder Sofia 2 auf den gewünschten Modus

eingestellt wurde: „WALK AWAY“ oder „READ NOW“. Weitere Informationen entnehmen Sie bitte dem Abschnitt „Verwenden des des Sofia und Sofia 2“.

2. Vorbereitung der Reagenzien: a) Gegen das Reagenzlösungsfläschchen klopfen bzw. es schütteln, damit

sich die gesamte Flüssigkeit im Kolben ansammelt. b) Die Lasche aufdrehen. c) Die gesamte Reagenzlösung langsam in das Reagenzröhrchen geben. d) Das Reagenzröhrchen vorsichtig schwenken, um den Inhalt aufzulösen.

3. Die Abstrichprobe des Patienten in das Reagenzröhrchen einführen. Den

Tupfer mindestens 3 Mal rollen, während die Spitze gegen den Boden und die Seite des Reagenzröhrchens gedrückt wird. Den Tupfer 1 Minute lang im Reagenzröhrchen belassen.

4. Die Tupferspitze innen gegen das Reagenzröhrchen rollen, während die Tupferspitze herausgenommen wird. Den gebrauchten Tupfer in einem Behälter für biologisch gefährlichen Abfall entsorgen.

5. Die mitgelieferte kleine, durchsichtige 120-µl-Fixvolumen-Pipette mit der Patientenprobe aus dem Reagenzröhrchen füllen. Zum Füllen der Fixvolumen-Pipette mit der Patientenprobe: a) Den oberen Pipettenballon FEST zusammendrücken. b) Während des Drückens die Pipettenspitze in die Patientenprobe

einführen. c) Während sich die Pipettenspitze in der Patientenprobe befindet, den

Druck langsam vom Pipettenballon nehmen, um die Pipette zu füllen.


Hinweis: Zum Dispensieren der Patientenprobe in die Testkassette MUSS die bereitgestellte Pipette verwendet werden.

6. Den oberen Ballon fest zusammendrücken, um den Inhalt aus der kleinen,

durchsichtigen 120-µl-Fixvolumen-Pipette in die Probenvertiefung der Testkassette zu dispensieren. Zusätzliche Flüssigkeit im Überlauf-Ballon sollte zurückgelassen werden. HINWEIS: Die Fixvolumen-Pipette ist dazu bestimmt, die korrekte Patientenprobenmenge zu sammeln und zu dispensieren. Die Pipette in einem Behälter für biologisch gefährlichen Abfall entsorgen.

7. Umgehend mit dem nächsten Abschnitt „Verwenden des Sofia und Sofia 2“ fortfahren, um den Test durchzuführen.

Testverfahren für Nasenrachenaspirat/-spülflüssigkeit oder -proben in Virustransportmedien

1. Sicherstellen, dass der Sofia oder Sofia 2 auf den gewünschten Modus eingestellt wurde: „WALK AWAY“ oder „READ NOW“. Weitere Informationen entnehmen Sie bitte dem Abschnitt „Verwenden des Sofia und Sofia 2“.

2. Vorbereitung der Reagenzien: a) Gegen das Reagenzlösungsfläschchen klopfen bzw. es schütteln, damit

sich die gesamte Flüssigkeit im Kolben ansammelt. b) Die Lasche aufdrehen. c) Die gesamte Reagenzlösung langsam in das Reagenzröhrchen geben. d) Das Reagenzröhrchen vorsichtig schwenken, um den Inhalt aufzulösen.

3. Die mitgelieferte große, rosafarbene 250-µl-Fixvolumen-Pipette mit der Patientenprobe aus dem Sammelbecher füllen.

Füllen der Fixvolumen-Pipette mit der Probe: a) Den oberen Pipettenballon FEST zusammendrücken. b) Während des Drückens die Pipettenspitze in die Patientenprobe

einführen. c) Während sich die Pipettenspitze in der Patientenprobe befindet, den

Druck langsam vom Pipettenballon nehmen, um die Pipette zu füllen.

4. Den oberen Ballon fest zusammendrücken, um den Inhalt aus der großen, rosafarbenen 250-µl-Fixvolumen-Pipette in das Reagenzröhrchen zu dispensieren. Zusätzliche Flüssigkeit im Überlauf-Ballon sollte


zurückgelassen werden. Das Reagenzröhrchen vorsichtig schwenken, um den Inhalt zu mischen.

HINWEIS: Die Fixvolumen-Pipette ist dazu bestimmt, die korrekte Patientenprobenmenge zu sammeln und zu dispensieren. Die Pipette in einem Behälter für biologisch gefährlichen Abfall entsorgen.

5. Die mitgelieferte kleine, durchsichtige 120-µl-Fixvolumen-Pipette durch langsames Ablassen des Ballondrucks mit der Patientenprobe aus dem Reagenzröhrchen füllen. Hinweis: Zum Dispensieren der Patientenprobe in die Testkassette MUSS die bereitgestellte Pipette verwendet werden.

6. Den oberen Ballon fest zusammendrücken, um den Inhalt aus der kleinen, durchsichtigen 120-µl-Fixvolumen-Pipette in die Probenvertiefung der Testkassette zu dispensieren. Zusätzliche Flüssigkeit im Überlauf-Ballon sollte zurückgelassen werden. Die Pipette in einem Behälter für biologisch gefährlichen Abfall entsorgen. HINWEIS: Die Fixvolumen-Pipette ist dazu bestimmt, die korrekte Patientenprobenmenge zu sammeln und zu dispensieren. Die Pipette in einem Behälter für biologisch gefährlichen Abfall entsorgen.

7. Umgehend mit dem nächsten Abschnitt „Verwenden des Sofia und Sofia 2“ fortfahren, um den Test durchzuführen.

VERWENDEN DES SOFIA UND SOFIA 2 Modus WALK AWAY/READ NOW Eine Gebrauchsanleitung finden Sie im Benutzerhandbuch für den Sofia oder Sofia 2. Der Sofia und Sofia 2 kann auf zwei verschiedene Modi eingestellt werden (WALK AWAY und READ NOW). Die Verfahren für jeden Modus sind unten beschrieben. WALKAWAY-Modus Im WALKAWAY-Modus legt der Benutzer sofort die Testkassette in den Sofia oder Sofia 2 ein. Die Entwicklungszeit ist beim Sofia und Sofia 2 unterschiedlichverschieden. Sofia – Der Sofia stellt die Testentwicklungszeit automatisch ein und zeigt die Ergebnisse nach 15

Minuten an. Sofia 2 – Sofia 2 scannt während der Testentwicklungszeit regelmäßig die Testkassette. Positive

Ergebnisse werden nach 3 bis 15 Minuten angezeigt. Negative Testergebnisse werden nach 15 Minuten angezeigt.


Modus „READ NOW“ Unbedingt beachten: Den Test die GESAMTEN 15 Minuten lang entwickeln lassen, BEVOR er in den Sofia und Sofia 2 eingesetzt wird. Nach dem Dispensieren der Patientenprobe in den Probenport muss der Benutzer die Testkassette zuerst 15 Minuten (außerhalb des Sofia oder Sofia 2) auf eine Ablage oder den Labortisch legen und die Zeitdauer des Entwicklungsschritts manuell messen. Für ein genaues Ergebnis MUSS die Testkassette 15 Minuten lang stehen. Dann fügt der Benutzer die Testkassette in den Sofia oder Sofia 2 ein. Im Modus „READ NOW“ wird der Sofia und Sofia 2 scannen und das Testergebnis nach 1 Minute anzeigen. Hinweis: Die Ergebnisse bleiben nach einer empfohlenen Entwicklungszeit von 15 Minuten für einen weiteren Zeitraum von 15 Minuten stabil. Tipps zur Durchführung von Chargentests Je nach Arbeitslast kann aus mehreren Testoptionen ausgewählt werden, um die Durchführung von Chargentests zu erleichtern. Der Benutzer kann die Reagenzlösung in eine oder mehrere Reagenzröhrchen geben, die Reagenzröhrchen mit einem Deckel verschließen und ohne Aktivitätsverlust bis zu 4 Stunden lang bei Raumtemperatur (RT) auf dem Labortisch aufbewahren, bevor die Probe(n) hinzugefügt wird/werden. Alternativ dazu kann der Benutzer nach dem Hinzufügen der Reagenzlösung Tupfer- oder Flüssigproben im Reagenzröhrchen verarbeiten. Nach der Entnahme des Tupfers (falls zutreffend) das Röhrchen mit einem Deckel verschließen und ohne Aktivitätsverlust bis zu 4 Stunden lang bei Raumtemperatur stehen lassen, bevor der Test durchgeführt wird.

Von entscheidender Bedeutung: Die Testkassette muss bis kurz vor ihrer Verwendung im Folienbeutel versiegelt bleiben und darf erst dann der Umgebung ausgesetzt werden.

TEST MIT SOFIA AUSFÜHREN 1. Benutzer-ID mit dem Barcode-Scanner einlesen oder manuell über das Tastenfeld eingeben.

HINWEIS: Falls versehentlich ein falscher Barcode eingescannt wurde, das Feld mit den Pfeiltasten auf dem Sofia-Tastenfeld erneut hervorheben. Anschließend einfach einen neuen Scanvorgang mit dem richtigen Barcode durchführen. Der alte Barcode wird durch den richtigen Barcode überschrieben.


2. Patienten-ID oder Bestellnr. mit dem tragbaren Barcode-Scanner einlesen oder manuell über das Tastenfeld eingeben.

3. Test starten drücken. Dadurch wird automatisch das Sofia-Schubfach geöffnet.

4. Sicherstellen, dass der korrekte Entwicklungsmodus („WALK AWAY“ oder „READ NOW“) eingestellt wurde. Die vorbereitete Patienten Testkassette in das Sofia-Schubfach einsetzen und das Schubfach schließen.

5. Der Sofia startet automatisch und zeigt wie im Beispiel unten den Fortschritt an. Im Modus „WALK AWAY“ werden die Testergebnisse nach ca. 15 Minuten am Bildschirm angezeigt. Im Modus „READ NOW“ werden die Testergebnisse innerhalb von ca. 1 Minute am Bildschirm angezeigt. Siehe Abschnitt „Auswertung der Ergebnisse“.


AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE MIT DEM SOFIA Nach Abschluss des Tests werden die Ergebnisse am Sofia-Bildschirm angezeigt. Die Ergebnisse werden automatisch auf dem integrierten Drucker gedruckt, wenn die entsprechende Option aktiviert ist. Die fluoreszenten Testlinien sind mit dem bloßen Auge nicht zu erkennen.

Der Sofia-Bildschirm zeigt die Ergebnisse für die Verfahrenskontrolle als „gültig“ oder „ungültig“ an und liefert ein positives oder negatives Ergebnis für RSV. Wenn die Verfahrenskontrolle „ungültig“ ist, ist ein Wiederholungstest mit einer neuen Patientenprobe und neuen Testkassette durchzuführen.

Positive Ergebnisse:

Negative Ergebnisse:

Beispiel: Dieser Bildschirm zeigt ein gültiges positives Ergebnis für RSV. HINWEIS: Ein positives Ergebnis schließt Koinfektionen mit anderen Erregern nicht aus.

Beispiel: Dieser Bildschirm zeigt ein gültiges negatives Ergebnis für RSV. HINWEIS: Ein negatives Ergebnis schließt eine RSV-Infektion nicht aus. Es wird empfohlen, negative Ergebnisse durch eine Virenkultur oder einen von der FDA zugelassenen Molekular-Assay für RSV zu bestätigen.

Beispiel: Der Bildschirm in der folgenden Abbildung zeigt für den Test im Modus „WALK AWAY“ eine verbliebene Zeit von 12 Minuten und 13 Sekunden an. Der Sofia liest die Ergebnisse nach 15 Minuten ab und zeigt sie an.


Ungültige Ergebnisse:

DURCHFÜHREN DES TESTS MIT DEM SOFIA 2 1. Die Benutzer-ID mit dem Barcode-Scanner einlesen oder manuell über das Tastenfeld eingeben.

HINWEIS: Falls versehentlich ein falscher Barcode eingescannt wurde, das Feld erneut auswählen, um es hervorzuheben. Anschließend einfach den richtigen Barcode einscannen. Der alte Barcode wird durch den richtigen Barcode überschrieben.

2. Die Patienten-ID und ggf. die Auftragsnummer mit dem Barcode-Scanner einlesen oder manuell

über das Tastenfeld eingeben.

Beispiel: Diese Anzeige zeigt ein ungültiges Ergebnis. Ungültiges Ergebnis: Wenn das Ergebnis ungültig ist, muss der Test mit einer neuen Patientenprobe und einer neuen Testkassette wiederholt werden.


3. Sicherstellen, dass der richtige Entwicklungsmodus, WALK AWAY oder READ NOW, eingestellt wurde. Auf drücken und das Schubfach des Sofia 2 öffnen .

4. Die vorbereitete Testkassette in das Schubfacht des Sofia 2 einlegen und das Schubfach schließen.

5. Der Sofia 2 startet automatisch und zeigt den Fortschritt wie im Beispiel unten gezeigt an. Im „WALK

AWAY“-Modus werden die Testergebnisse nach 3 bis 15 Minuten auf dem Bildschirm angezeigt. Im „READ NOW“-Modus werden die Testergebnisse nach 1 Minute auf dem Bildschirm angezeigt. Siehe Abschnitt „Auswertung der Ergebnisse“ des Sofia 2.

Beispiel: Dieser Bildschirm zeigt für den Test im Modus „WALK AWAY“ eine verbleibende Zeit von 12 Minuten und 34 Sekunden an. Der Sofia 2 liest die Ergebnisse nach 3 bis 15 Minuten ab und zeigt sie an.


AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE MIT DEM SOFIA 2 Nach Abschluss des Tests werden die Ergebnisse am Bildschirm des Sofia 2 angezeigt. Die fluoreszenten Testlinien sind mit dem bloßen Auge nicht zu erkennen.

Auf dem Sofia 2-Bildschirm wird angezeigt, ob die Verfahrenskontrolle „ “ oder „ “ ist, und es wird jeweils ein „ “ oder „ “ Ergebnis für RSV ausgegeben. Wenn die Verfahrenskontrolle „ “ ist, den Test mit einer neuen Patientenprobe und einer neuen Testkassette wiederholen. Wenn ein Drucker angeschlossen ist, können die Ergebnisse manuell ausgedruckt werden. Hierzu das Drucksymbol auswählen, während die Ergebnisse auf dem Bildschirm angezeigt werden.

Positive Ergebnisse:

Negative Ergebnisse: Ungültige Ergebnisse:

Beispiel: Dieser Bildschirm zeigt ein gültiges positives Ergebnis für RSV. HINWEIS: Ein positives Ergebnis schließt Koinfektionen mit anderen Erregern nicht aus.

Beispiel: Dieser Bildschirm zeigt ein gültiges negative Ergebnis für RSV. HINWEIS: Ein negatives Ergebnis schließt keine virale Influenza-Infektion aus. Es wird empfohlen, negative Ergebnisse durch eine Virenkultur oder einen von der FDA zugelassenen Molekular-Assay für RSV zu bestätigen.

Beispiel: Diese Anzeige zeigt ein ungültiges Ergebnis. Ungültiges Ergebnis: Wenn das Ergebnis ungültig ist, muss der Test mit einer neuen Patientenprobe und einer neuen Testkassette wiederholt werden


EINSCHRÄNKUNGEN Dieser Test ist ausschließlich für die pädiatrische Bevölkerungsgruppe (unter 19 Jahren) geeignet.

Für den Einsatz bei Patienten über 19 Jahren sowie immungeschwächten Patienten wurden keine Leistungsmerkmale bestimmt.

Der Inhalt dieses Kits dient dem qualitativen Nachweis von RSV-Antigenen von Nasenrachentupfern und Nasenrachenaspirat-/-spülflüssigkeitsproben.

Dieser Test weist sowohl lebendes als auch nicht lebendes RSV nach. Die Aussagekraft des Tests ist abhängig von der Virusmenge (Antigen) in der Probe und kann mit Viruskulturergebnissen derselben Probe korrelieren oder auch nicht.

Ein negatives Ergebnis kann zustande kommen, wenn die Antigenkonzentration in einer Probe unter der Nachweisgrenze des Tests liegt oder wenn eine Probe falsch entnommen oder transportiert wurde.

Eine falsche Durchführung des Tests kann die Aussagekraft des Tests beeinträchtigen und/oder die Ergebnisse ungültig machen.

Die Testergebnisse müssen in Verbindung mit anderen dem Arzt zur Verfügung stehenden klinischen Daten beurteilt werden.

Positive Testergebnisse schließen zusätzliche Infektionen mit anderen Erregern nicht aus. Negative Testergebnisse sind nicht dazu bestimmt, andere virale oder bakterielle Nicht-RSV-

Infektionen einzuschließen. Die positiven und negativen prädiktiven Werte hängen stark von der Prävalenz ab. Falsch negative

Testergebnisse sind während der Spitzenaktivität wahrscheinlicher, wenn die Prävalenz hoch ist. Falsch positive Testergebnisse ergeben sich häufiger in Zeiträumen mit geringer RSV-Aktivität, wenn die Prävalenz moderat bis niedrig ist.

Monoklonale Antikörper sind evtl. nicht in der Lage, RSV-Viren, die geringen Aminosäureänderungen in der angezielten Epitoperegion unterzogen wurden, nachzuweisen bzw. sie weisen sie mit geringerer Empfindlichkeit nach.

Mit Vollblut kontaminierte Proben >1 % können die Testauswertung beeinträchtigen. Dem Augenschein nach blutige Proben sollten nicht verwendet werden.

Mycoplasma pneumoniae bei Konzentrationen >1x105 KbE/ml können zu einer Kreuzreaktivität führen bzw. die Testaussagekraft beeinträchtigen.

Die Aussagekraft dieses Tests bei Patienten ohne Anzeichen und Symptome einer Atemwegsinfektion wurde nicht beurteilt.

ERWARTETE WERTE Der Anteil der bei RSV-Tests beobachteten Positivität ist abhängig von der Methode zur Probenahme, vom eingesetzten Handhabungs-/Transportsystem, von der angewandten Nachweismethode, von der Jahreszeit, vom Alter des Patienten und von der Prävalenz.

LEISTUNGSMERKMALE Die folgenden Studien wurden mit dem Sofia durchgeführt. Sofia RSV FIA Performance versus Zellkultur Die Aussagekraft des Sofia RSV FIA-Tests mit dem Sofia wurde mit Methoden zum Anlegen von Viruszellkultur gefolgt von DFA in einer multizentrischen klinischen Feldstudie von Februar bis April 2012 und Oktober bis Dezember 2012 in den USA verglichen. Diese Studie wurde von medizinischen Fachkräften an 17 verschiedenen Orten in verschiedenen geografischen Regionen in den USA durchgeführt. In dieser multizentrischen Point-of-Care-Feldstudie wurden jeweils zwei (2) Nasenrachenabstriche oder Nasenrachenaspirat-/-spülflüssigkeitsproben von jeweils 1.736 Patienten entnommen. Ein Paar Nasenrachen-Abstrichproben wurde von 972 Patienten bereitgestellt, und eine


Nasenrachenaspirat-/-spülflüssigkeitsprobe wurde von 764 Patienten bereitgestellt. Alle klinischen Proben wurden von symptomatischen Patienten (unter 19 Jahren) entnommen: 55 % waren männlich und 45 % waren weiblich.

Vor-Ort-Tests einer Nasenrachenabstrichprobe oder eines Teils einer Nasenrachenaspirat-/ -spülflüssigkeitsprobe wurden mit dem Sofia RSV FIA vom medizinischen Personal in der Arztpraxis oder in der Krankenhauseinrichtung durchgeführt. Die Proben waren frisch entnommen und getestet. Die verbleibende Probe wurde zum Anlegen einer Kultur in ein Virustransportmedium gegeben. Die gepaarten Abstrichproben wurden in Bezug auf die Reihenfolge der Tests im Sofia RSV FIA im Vergleich zur Kultur randomisiert. Die Viruszellkultur wurde entweder an einem klinischen Labor am Teststandort angelegt, oder die Proben wurden über Nacht innerhalb von 48 Stunden kalt auf Eispackungen (nicht gefroren) an ein Zentrallabor transportiert, um dort eine Zellkultur anzulegen. Die Ergebnisse sind Tabelle 2 und 3 zu entnehmen.

Tabelle 2 Sofia RSV FIA Nasenrachenabstrich-Ergebnisse im Vergleich zur Kultur

(Alter 0 – <19 Jahre) Kultur

Pos. Neg. Sens. = 126/146 = 86 % Sofia Pos. 126 25 (95 % VI 80-91 %)

Sofia Neg. 20 801 Spez. = 801/826 = 97 % Gesamt 146 826 (95 % VI 96-98 %)

Tabelle 3

Sofia RSV FIA Nasenrachenabstrich-/Spülflüssigkeitsergebnisse im Vergleich zur Kultur (Alter 0 – <19 Jahre)

Kultur Pos. Neg. Sens. = 57/64 = 89 % Sofia Pos. 57 12 (95 % VI 79-95 %)

Sofia Neg. 7 688 Spez. = 688/700 = 98 % Gesamt 64 700 (95 % VI 97-99 %)

Reproduzierbarkeitsstudien Die Reproduzierbarkeit des Sofia RSV FIA mit dem Sofia wurde in drei (3) verschiedenen Laboren beurteilt. Zwei (2) verschiedene Bediener an jedem Standort testeten eine Reihe codierter, arrangierter Proben, die in negativer klinischer Matrix vorbereitet waren und sich hinsichtlich RSV auf niedrig negativ bis moderat positiv beliefen. Die Übereinstimmung zwischen den Laboren (Tabelle 4) betrug 98-100 % für negative Proben und 98-100 % für positive Proben.


Tabelle 4 Sofia RSV FIA Reproduzierbarkeitsstudie – Übereinstimmung zwischen den Laboren

Standort Niedrig neg. (kein Virus)

Hoch negativ (C5)

Niedrig positiv (C95)

Mod. Positiv (C3X LoD)

1 30/30 28/30 30/30 30/30

2 30/30 30/30 28/30 30/30

3 30/30 30/30 30/30 30/30

Gesamt 90/90 88/90 88/90 90/90

% allgemeine Übereinstimmung

(95 % KI)

100 % (95-100 %)

98 % (92-100 %)

98 % (92-100 %)

100 % (95-100 %)

Nachweisgrenze und analytische Reaktivität Die Nachweisgrenze (LoD) für den Sofia RSV FIA mit dem Sofia wurde anhand von insgesamt vier (4) RSV-Stämmen, zwei (2) Isolaten von RSV A und zwei (2) Isolaten von RSV B ermittelt (Tabelle 5).

Tabelle 5 Nachweisgrenze mit humanen Isolaten von RSV A und B

Virusstamm Niedrigster

nachweisbarer Wert (TCID50/ml)

RSV A-2 3153

RSV A Lang 372

RSV B CH93-18(18) 476

RSV B Washington/18537/62 32.3

TCID50/ml = 50 % Gewebekultur-Infektionsdosis. TCID50-Konzentrationen wurden anhand der Reed-Muench-Methode ermittelt.

Die analytische Reaktivität wurde anhand von zwei (2) weiteren RSV B-Stämmen nachgewiesen: West Virginia-Stamm/14617/85 bei 163 TCID50/ml und RSV 9320 bei 8,7 TCID50/ml. Analytische Spezifität Kreuzreaktivität Die Kreuzreaktivität des Sofia RSV FIA-Tests mit dem Sofia wurde mit insgesamt 32 bakteriellen und pilzlichen Mikroorganismen und 42 Nicht-RSV-Virusisolaten bewertet. Keine der in Tabelle 6 aufgeführten Organismen oder Viren wiesen Anzeichen von Kreuzreaktivität im Test auf. Als dieselben Organismen aus Tabelle 6 mit RSV vorgemischt und im Sofia RSV FIA getestet wurden, waren alle Ergebnisse positiv. Dies weist darauf hin, dass die potenziellen Kreuzreaktanten keinen Einfluss auf den Nachweis von RSV hatten.


Tabelle 6 Analytische Spezifität und Kreuzreaktivität

Organismus/Nicht-RSV-Virus Konzentration* Acinetobacter baumannii 2,32x106 KbE/ml Bacteroides fragilis 2,32x106 KbE/ml Bordetella pertussis 2,32x106 KbE/ml Candida albicans (Hefe) 2,32x106 KbE/ml Corynebacterium diptheriae 2,32x106 KbE/ml Escherichia coli 2,32x106 KbE/ml Haemophilus influenzae 2,32x106 KbE/ml Klebsiella pneumoniae 2,32x106 KbE/ml Lactobacillus plantarum 2,32x106 KbE/ml Legionella pneumophila 2,32x106 KbE/ml Moraxella catarrhalis 2,32x106 KbE/ml Mycobacterium avium 2,32x106 KbE/ml Mycobacterium intracellulare 2,32x106 KbE/ml Mycobacterium tuberculosis 2,32x106 KbE/ml Mycoplasma pneumoniae 1x105 KbE/ml Neisseria meningitides 2,32x106 KbE/ml Neisseria mucosa 2,32x106 KbE/ml Neisseria sicca 2,32x106 KbE/ml Neisseria subflava 2,32x106 KbE/ml Pseudomonas aeruginosa 2,32x106 KbE/ml Serratia marcescens 2,32x106 KbE/ml Staphylococcus aureus 2,32x106 KbE/ml Staphylococcus aureus (Cowen 1) 2,32x106 KbE/ml Staphylococcus epidermidis 2,32x106 KbE/ml Streptococcus mutans 2,32x106 KbE/ml Streptococcus pneumoniae 2,32x106 KbE/ml Streptococcus pyogenes Gruppe A 2,32x106 KbE/ml Streptococcus sanguis 2,32x106 KbE/ml Streptococcus sp. Gruppe B 2,32x106 KbE/ml Streptococcus sp. Gruppe C 2,32x106 KbE/ml Streptococcus sp. Gruppe F 2,32x106 KbE/ml Streptococcus sp. Gruppe G 2,32x106 KbE/ml Adenovirus 3 2,32x105 TCID50/mL Adenovirus 4 2,64x104 TCID50/mL Adenovirus 5 8,98x105 Adenovirus 7A 2,32x105 Adenovirus 11 2,32x105 Coronavirus OC43 2,32x105


Organismus/Nicht-RSV-Virus Konzentration* Coronavirus 229E 2,32x105 Coxsackievirus B5 (Faulkner) 2,32x105 Cytomegalovirus AD-169 2,32x105 Cytomegalovirus Towne 2,32x105 Echovirus Typ 3 2,32x105 Herpes-Simplex-Virus 1 2,32x105 Herpes-Simplex-Virus 2 2,32x105 Humanes Metapneumovirus A1 2,32x105 Humanes Metapneumovirus A2 2,32x105 Humanes Metapneumovirus B1 2,32x105 Humanes Metapneumovirus B2 2,32x105 Influenza A H1N1 (Mexiko/4108/2009) 2,32x105 Influenza A H1N1 (Denver/1/57) 2,32x105 Influenza A H1N1 (FM/1/47) 2,32x105 Influenza A H1N1 (New Jersey/8/76) 2,32x105 Influenza A H1N1 (PR/8/34) 2,32x105 Influenza A H3N2 2,32x105 Influenza B Hongkong 2,32x105 Influenza B Panama 2,32x107 Influenza C/Taylor/1233/47 2,32x105 Masern (Edmonston) 2,32x105 Metapneumovirus VR-03-00181 UIHC 2,32x105 Mumps (Enders) 2,32x105 Parainfluenza-Virus 1 2,32x105 Parainfluenza-Virus 2 2,32x105 Parainfluenza-Virus 3 2,32x105 Parainfluenza-Virus 4A 2,32x105 Parainfluenza-Virus 4B 2,32x105 Rhinovirus Typ 1B 2,32x105 Rhinovirus Typ 2 2,32x105 Rhinovirus Typ 3 2,32x105 Rhinovirus Typ 7 2,32x105 Rhinovirus Typ 15 2,32x105 Rhinovirus Typ 18 2,32x105 Rhinovirus Typ 37 2,32x105 Varicella-Zoster-Virus 3,55x104

*Die Bakterienkonzentrationen wurden mittels Grenzverdünnung, bakteriellen Kulturen und Kolonienzählung ermittelt, um den KbE/ml-Wert zu bestimmen (KbE = koloniebildende Einheit). Virenkonzentrationen wurden mit Standardvirologiemethoden (Reed-Muench) bestimmt.


Störsubstanzen Vollblut, Mucin und mehrere rezeptfreie (OTC) Produkte und herkömmliche Chemikalien wurden mit dem Sofia RSV FIA mittels Sofia beurteilt. Es wurden keine Störungen mit den unten angegebenen Mengen beobachtet (Tabelle 7).

Tabelle 7 Nicht störende Substanzen

Substanz Konzentration Acetamidophenol 23 mg/ml Acetylsalicylsäure 23 mg/ml Albuterol 26 mg/ml Chlorphenamin 4 mg/ml Dextromethorphan 4 mg/ml Diphenhydramin 3 mg/ml Guajacol 46 mg/ml Mucin 9 mg/ml Nasenspray Nr. 1 (Vicks) 23 % Nasenspray Nr. 2 (4-Way) 23 % Nasenspray Nr. 3 (Equate) 23 % Rezeptfreies Mundwasser Nr. 1 (Listerine) 58 % Rezeptfreies Mundwasser Nr. 2 (Crest Pro-Health) 58 % Rezeptfreies Mundwasser Nr.3 (Scope) 58 % Rezeptfreie Hustenbonbons Nr. 1 (CVS) 19 % Rezeptfreie Hustenbonbons Nr. 2 (Ricola) 15 % Rezeptfreie Hustenbonbons Nr. 3 (Halls) 34 % Phenylephrin 11 mg/ml Rimantadin 116 µg/ml Vollblut 1 %

Befreiung von CLIA-Auflagen – Studien Im Rahmen der oben im Abschnitt „Leistungsmerkmale“ beschriebenen Studie wurde die Fehlerfreiheit des Sofia RSV FIA mit dem Sofia bei der Verwendung an Proben pädiatrischer Patienten im Alter von 0 – <7 Jahren durch ungeschulte Bediener an Standorten ohne CLIA-Auflagen ausgewertet. Die Testergebnisse des Sofia RSV FIA-Tests wurden mit den Ergebnissen der Viruszellkultur verglichen. Diese Studie wurde an 16 Standorten ohne CLIA-Auflagen mit 37 ungeschulten Bedienern durchgeführt, die repräsentativ für Umfelder ohne CLIA-Auflagen sind.

Die Studie umfasste 2193 Probanden: 1.057 Probanden stellten ein Paar Nasenrachentupfer zur Verfügung und 1.136 Probanden stellten Nasenrachenaspirat-/-spülflüssigkeitsproben zur Verfügung.

Die klinische Sensitivität und Spezifizität des Sofia RSV FIA beim Alter von 0 – <7 Jahren im Vergleich zur Viruskultur (die Vergleichsmethode) wird nachfolgend in Tabellen 8 und 9 dargestellt.


Tabelle 8 Sofia RSV FIA vs. Kultur (Nasenrachentupfer)

(Alter 0 – <7 Jahre) Kultur

Pos. Neg. Sens. = 134/154= 87 % Sofia Pos. 134 34 (95 % VI 81-92 %)

Sofia Neg. 20 869 Spez. = 869/903= 96 % Gesamt 154 903 (95 % KI 95-97 %)

Tabelle 9

Sofia RSV FIA vs. Kultur (Nasenrachenaspirat/Spülflüssigkeit) (Alter 0 – <7 Jahre)

Kultur Pos. Neg. Sens. = 141/154= 92 % Sofia Pos. 141 22 (95 % KI 86-95 %)

Sofia Neg. 13 960 Spez. = 960/982= 98 % Gesamt 154 982 (95 % VI 97-99 %)

Eine zweite Studie wurde zum Nachweis geführt, dass ungeschulte vorgesehene Anwender den Test unter Verwendung schwach reaktiver Proben einheitlich und präzise durchführen konnten. Die Studie bestand aus drei (3) verschiedenen Standorten ohne CLIA-Auflagen, an denen der Sofia RSV FIA mit Sofia mithilfe codierter, randomisierter Testplatten mit simulierten Proben durchgeführt wurde. Die Proben enthielten eine (1) schwach positive Probe (C95 – eine Konzentration am Assay-Cutoff) sowie eine (1) schwach negative Probe (C5 – eine Konzentration knapp unter dem Assay-Cutoff ). An jedem Standort prüften zwei (2) oder mehr Bediener (8 Bediener insgesamt) die Testplatte an jeweils zehn (10) Tagen über einen Zeitraum von etwa zwei (2) Wochen. Die Leistung des Sofia RSV FIA mit Proben in der Nähe des Assay-Cutoffs war akzeptabel, wurde dieser durch ungeschulte vorgesehene Anwender durchgeführt. Die prozentuale Übereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen bei der jeweiligen Probe wird in Tabelle 10 dargestellt.

Tabelle 10 Sofia RSV FIA-Leistung in Cutoff-Nähe (alle Standorte)

Probenlevel

Ungeschulte vorgesehene Anwender

Prozentuale Übereinstimmung mit

erwarteten Ergebnissen* 95 % Konfidenzintervall

Schwach RSV-positiv (C95) 85 % (51/60) 74-92 %

Schwach RSV-negativ (C5) 93 % (56/60) 84-98 %

*Die erwarteten Ergebnisse für „schwach positive“ Proben sind „positiv“, während die erwarteten Ergebnisse für „schwach negative“ Proben „negativ“ sind.


Leistung des Sofia RSV FIA mit dem Sofia 2 Die folgenden Studien wurden durchgeführt, um die Gleichwertigkeit zwischen dem Sofia und dem Sofia 2 bei der Untersuchung klinischer Proben mit dem Sofia RSV FIA nachzuweisen. Vergleich der Methoden Die Leistung des Sofia RSV FIA bei Verwendung mit dem Sofia i. Vgl. zum Sofia 2 wurde anhand einer Testplatte mit 250 klinischen Proben untersucht. Die erste Feldstudie wurde unter Verwendung identischer Testplatten mit bekannt positiven und negativen klinischen und arrangierten Proben in Virustransportmedium (VTM) an 3 beabsichtigten Benutzerlaborstandorten durchgeführt. Jeder Standort verwendete in der Studie 4 Sofia und 4 Sofia 2 mit insgesamt jeweils 12 Instrumenten. Es wurden einhundert (100) positive und einhundert (100) negative Proben in die Panels aufgenommen. Die Testplattenproben wurden so angefertigt, dass eine breite Auswahl negativer und positiver Proben gleichmäßig über den dynamischen Bereich des Assays verteilt waren. Alle Proben wurden codiert und zur Anfertigung der randomisierten Testplatten verwendet. Insgesamt wurden 200 Proben pro Standort mit insgesamt 600 Ergebnissen getestet. Der Vergleich der Ergebnisse von Sofia und Sofia 2 ist in Tabelle 11 dargestellt. Die Übereinstimmung für RSV-positive Proben betrug 97 %; für negative Proben 96 %.

Tabelle 11 Methodenvergleich Sofia i. Vgl. zu Sofia 2

Sofia Pos. Neg. positiv in % =

Übereinst. f. = 97 % (314/323) (95 % KI = 94.7-98.6 %) Sofia Pos. 314 10

Sofia Neg. 9 267 negativ in % = Übereinst. f. =

96 % (267/277) (95 % KI = 93.4-98.1 %)

Gesamt 323 277 Insgesamt gab es 19 widersprüchliche Ergebnisse zwischen Sofia und Sofia 2; bei allen Ergebnissen wurde ermittelt, dass sie zum Zeitpunkt der Durchführung der Studie zum Methodenvergleich Analytkonzentrationen nahe beim Cutoff oder darunter enthielten. Reproduzierbarkeit Mit dem Sofia RSV FIA und Sofia 2 wurde an drei verschiedenen Laboren, von denen eines Quidel war, eine Reproduzierbarkeitsstudie durchgeführt. Zwei verschiedene Bediener an jedem Standort testeten ein aus neun Elementen bestehendes Panel von entwickelten Proben, die in einer negativen klinischen Matrix hergestellt wurden, mit negativen bis moderat positiven RSV-Konzentrationen. Jeder Bediener testete ein Panel an 5 verschiedenen Tagen im Verlauf von ca. 1 Woche. Insgesamt wurden bei dieser Studie 10 Sofia und Sofia 2-Geräte eingesetzt. Die Übereinstimmung zwischen den Laboren (Tabelle 12) für dem Sofia RSV FIA für alle Proben reichte von 100 %.


Tabelle 12 Reproduzierbarkeitsstudie für Sofia RSV FIA

Übereinstimmung zwischen Laboren

Standort Negativ für RSV

Schwach positiv für RSV (1X NWG)

Moderat positiv für RSV (2-3X NWG)

1 30/30 30/30 30/30

2 30/30 30/30 30/30

3 30/30 30/30 30/30

Gesamt 90/90 90/90 90/90 Gesamtübereinst. in %

(95 % KI) 100 %

(95-100 %) 100 %

(95-100 %) 100 %

(95-100 %)

Nachweisgrenze Eine Nachweisgrenzenstudie wurde mit dem Sofia RSV FIA parallel auf dem Sofia und Sofia 2 durchgeführt. Hierbei wurden insgesamt vier (4) RSV, zwei (2) Isolaten von RSV A und zwei (2) Isolaten von RSV B ermittelt (Tabelle 13).

Tabelle 13 Nachweisgrenze mit humanen Isolaten von RSV

Virenstamm Plattform Niedrigster

nachweisbarer Wert (TCID50/ml)

RSV A Long Sofia 471

Sofia 2 467

RSV A-2 Sofia 5511

Sofia 2 5950

RSV B CH93-18(18) Sofia 585

Sofia 2 620

RSV B Washington/18537/62 Sofia 78,6

Sofia 2 91,1

TCID50/ml=50 % Gewebekultur-Infektionsdosis. Die TCID50-Werte wurde entweder mit der Reed-Muench-Methode.

Studie in der Nähe vom Cutoff zur Befreiung der CLIA-Auflagen Es wurde eine Studie durchgeführt, um nachzuweisen, dass ungeschulte Benutzer den Test mit schwach reaktiven Proben mit dem Sofia Influenza RSV FIA unter Verwendung des Sofia 2 gleichbleibend und korrekt durchführen konnten. Die Studie umfasste drei (3) verschiedene CLIA-freigestellte Standorte, an denen der Sofia RSV FIA unter Verwendung codierter randomisierter Testplatten mit arrangierten Proben beurteilt wurde, darunter eine (1) schwach positive Probe (C95–eine Konzentration am Grenzwert des Assays), und eine negative Probe. An jedem Standort testeten mindestens drei (3) Bediener (insgesamt 10 Bediener) die Testplatte täglich an 10 Tagen über einen Zeitraum von rund 2 Wochen. In Tabelle 14 ist die Übereinstimmung in Prozent mit den erwarteten Ergebnissen für jede Probe aufgeführt.


Tabelle 14 Sofia RSV FIA-Leistung in Cutoff-Nähe (alle Standorte)

Probenstufe

Untrained Intended Users

Prozentuale Übereinstimmung mit

dem erwarteten Ergebnis*

95 % Konfidenzintervall

RSV Schwach Positiv (C95) 97% (70/72) 90-100 %

RSV Negativ (C0) 100% (72/72) 94-100 % *Die erwarteten Ergebnisse für „schwach positive“ Proben sind „positiv“, während die erwarteten Ergebnisse für „negative“ Proben „negativ“ sind.

Analytische Flex-Studien wurden mithilfe der Risikoanalyse als Leitfaden durchgeführt. Die Studien zeigten, dass der Test unempfindlich ist gegenüber Belastungen durch Umweltbedingungen und potenzielle Anwenderfehler.

KUNDENDIENST Falls Sie Fragen zur Verwendung dieses Produkts haben oder einen Testsystemfehler melden möchten, wenden Sie sich bitte telefonisch an den Technischen Support von Quidel unter der Rufnummer 800 874 1517 (in den USA) oder +1 858 552 1100, Montag bis Freitag, 7 bis 17 Uhr pazifische Zeit. Außerhalb der USA wenden Sie sich bitte an Ihr Vertriebsunternehmen vor Ort oder gehen Sie zu [email protected]. Probleme mit dem Testsystem können ferner der FDA über das MedWatch-Programm gemeldet werden (Tel.: 1-800-FDA-1088; Fax: 1-800-FDA-0178; http://www.fda.gov/medwatch).

LITERATURVERWEISE 1. Red Book, American Academy of Pediatrics, 28. Auflage (2009) S. 560–569. 2. Macartney K. et al. Nosocomial Respiratory Syncytial Virus Infections: The Cost-Effectiveness and

Cost-Benefit of Infection Control. Pediatrics, 2000 Sep; 106(3):520–526. http://pediatrics.aappublications.org/cgi/content/full/106/3/520.

3. Collins P., Chanock R., Murphy B. Fields Virology. 4. Auflage. Band 1. Kapitel 45 –Respiratory Syncytial Virus. Lippincot Williams and Wilkins (2001).

4. Thompson W. et al. Mortality Associated With Influenza and Respiratory Syncytial Virus in the United States. JAMA, 2003 Jan; 289(2):184.

5. Navas L., Wang E. et al. Improved outcome of respiratory syncytial virus infection in a high risk hospitalized population of Canadian children. Pediatric Investigators Collaborative Network on Infections in Canada. J Pediatr. 1992 Sep; 121(3):348–54.

6. Moler F.W. et al. Respiratory syncytial virus morbidity and mortality estimates in congenital heart disease patients: a recent experience. Crit Care Med. 1992 Oktober; 20(10):1406–13.

7. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, 5th Edition. U.S. Department of Health and Human Services, CDC, NIH, Washington, DC (2007).

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