毛包上皮腫におけるケラチン発現の免疫組織化学的...
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日皮会誌:108 (6), 837^841, 1998 (平10）
毛包上皮腫におけるケラチン発現の免疫組織化学的検討
背 青 大西 誉光 黒谷篤之
要 旨
10例の毛包上皮腫(epithelioma adenoides
cysticum 5例，単発例５例）について，22種類の抗ケ
ラチンモノクローナル抗体を用いて免疫組織化学的に
検討を行った．腫瘍胞巣および角質嚢腫の染色態度は
各々正常毛嚢の外毛根鞘と漏斗部と同様であった.
ＣＫ８および19の発現は毛嚢では固定部と変動部の移行
部付近の外毛根鞘最外層にみられ,同部にはfollicular
stem cellが含まれていると考えられるが，自験例も
種々の割合で腫瘍胞巣辺縁が染色された．以上より毛
包上皮腫はまず固定部と変動部の移行部の外毛根鞘最
外層へ分化し，一部はそれ以外の毛嚢組織へ分化して
いるものと推測された．また，多発例と単発例の間に
染色性の顕著な差は認められなかった．
はじめに
サイトケラチンは中間径フィラメントの一つで，上
皮細胞の細胞骨格を形成する蛋白である1).現在21種
類のサイトケラチンが確認されており，その発現の組
み合わせは発達・分化や炎症などの状態によって変化
することが知られている．そのためケラチン発現パ
ターンを検討することは上皮細胞の分化や状態を知る
有用な手掛かりになると考えられる．
毛包上皮腫の組織発生は未だに確定されておらず，
ケラチン発現パターンの検討も２，３の報告をみるの
みである2)-4)そのうち詳細な毛包上皮腫のケラチン
発現の報告はDemirkesen et al.*'によるもののみであ
る．そこで我々は毛包上皮腫の単発例および多発例に
ついてそれぞれのケラチン発現パターンを免疫組織化
学的に検討し，正常毛嚢における染色態度と比較検討
した．
対象および方法
対象症例として10例の毛包上皮腫を帝京大学皮膚科
より集積した．その内訳は５例が多発例いわゆる
epithelioma adenoides cysticum で，そのうち１例に
帝京大学医学部皮膚科学教室（主任 高橋 久教授）
平成９年Ｕ月19日受付，平成10年１月26日掲載決定
別刷請求先:（〒173-8605)板橋区加賀2－11－ 1 帝
京大学医学部皮膚科学教室 渡辺 晋一
渡辺 晋一
表１ 使用した抗体
抗 体 特異性 製造元
34βB4
AE3
KLl
34βE12
215B8
6B10
MNF116
LP34
RCK102
OV-TL12/30
Ks7.18
35βH11
4.1.18
CAM5.2
NCL5D3
DE-KIO
AEl
Ksl3.1
Ksl8.04
RCK108
170.2.14
KsW.l
Involucrin
Cytokeratin 1
Cytokeratins 1-8
Cytokeratins 1,2,5-8,11,14,16-18
Cytokeratins 1,5,10,14
Cytokeratin 4
Cytokeratin 4
Cytokeratins 5,6,8,17,
probably 19
Cytokeratins 5,6,18
Cytokeratins 5,8
Cytokeratin 7
Cytokeratin 7
Cytokeratin 8
Cytokeratin 8
Cytokeratins 8,18
Cytokeratins 8,18,19
Cytokeratin 10
Cytokeratins 10,14-16,19
Cytokeratin 13
Cytokeratin l8
Cytokeratin 19
Cytokeratin 19
Cytokeratin 19
Involucrin
ENZO
Boehringer
Immunotech
ENZO
Boehringer
Sigma
Dakopatts
Dakopatts
SANBIO
Dakopatts
PROGEN
ENZO
Boehringer
Becton-Dickinson
SANBIO
Dakopatts
Boehringer
Boehringer
PROGEN
SANBIO
Boehringer
PROGEN
Biomedical Tech.
明らかな遺伝歴がみられた．残りの５例は典型的な
solitary trichoepithelioma で,全例が直径10mm程度
までの小腫瘍が顔面に単発したものであった．
ホルマリン固定パラフィン包埋ブロックより組織切
片を作製し, ABC法で免疫組織化学染色を行った．一
次抗体に表１に示した22種類の抗ケラチンモノクロー
ナル抗体を用い，二次抗体にはビオチン化した抗マウ
スlgGもしくはｌｇＭ抗体を用いた．発色にはDAB
(diaminobenzidine)を用い，核染をメチルグリーンで
行った．いくつかの抗体では前処置として脱パラ後に
20～40分間のトリプシン処理を施行した．コントロー
ルとして一次抗体もしくは二次抗体を除いて染色を
行った．
838 背
図１ 組織像
真皮内に一部飾状を呈する腫瘍胞巣と角質嚢腫がみら
れる. (HE染色，25倍）
結 果
病理組織学的所見
ＨＥ染色による組織像では，腫瘍は真皮内の主に節
状を呈する腫瘍胞巣と角質嚢腫より構成されていた
(図１)．角質嚢腫は症例により数に差があり，大きさ
も種々であった．大きな角質責腫では内層は有棟細胞
よりなり，ケラトヒアリン穎粒が一部にみられた．腫
瘍胞巣は基底細胞様細胞より構成され，その辺縁には
柵状配列がみられたが，周囲の問質との間には裂隙は
みられなかった．さらに一部の胞巣では毛球に類似し
た構造がみられた(図２)．腫瘍の問質は幼若な膠原線
維よりなり，結合縁性毛包に類似した様相を呈してい
た．
免疫組織化学的所見
involucrinの発現は角質嚢腫の内層にのみ認められ
た.
AE3 (against CKs 1～8), 34βE12 (against CKs
1, 5, 10, 14), MNF116 (against CKs 5，6, 8, 17
and probably 19), LP34 (against CKs 5， 6, 18),
RCK102 (against CKs 5， 8), AEl (against CKs 10，
14～16, 19)の各抗体ではほとんど全ての腫瘍細胞が
陽性を示した．しかしながら, RCK102抗体では角質嚢
腫の内層は陰性であった.
34βB4 (against CK 1), KLl (against 1， 2，5～8，
11, 14, 16～18), DE-KIO (against CK 10)の各抗体
ではいくつかの角質嚢腫は最外層の一層を除いて染色
された(図3).
4.1.18 (against CK 8), Ksl9.1, 170.2.14(against
CK 19)の各抗体は正常毛嚢の固定部と変動部の境界
付近の外毛根鞘最外層を染色する5)が，腫瘍胞巣の最
青ほか
図２ 組織像
腫瘍胞巣の一部には毛球に類似した構造がみられる．
(ＨＥ染色，66倍)
外層のみが染色された(図４)．しかし，このような染
色態度を示す腫瘍胞巣の割合は症例により，ばらつき
かおり，一定していなかった．すなわち，ほぽ全ての
腫瘍胞巣の最外層が染色された例が４例で，部分的に
同様の染色態度がみられた例が１例，胞巣の内層まで
染色されたが最外層が比較的強く染色された例(図５)
が３例，ほとんどの胞巣が染色されなかった例が２例
であった.
215B8, 6B10 (against CK 4), Ksl3. Kagainst CK
13)抗体は角化する前の正常内毛根鞘を染色するが，
１例でごく一部の胞巣の内層に陽性所見がみられた．
単層上皮型ケラチンを認識するOV-TL12/30,
Ks7.18 (against CK 7), 35βHll (against CK ８)，
CAM5.2 (against CKs 8，18), NCL5D3 (against CKs
8, 18, 19), Ksl8.04(against CK 18), RCK108(against
CK 19)の各抗体では腫瘍細胞は染色されなかった．
上述の通り症例により若干のvariationがあるもの
の，その差は病型によるものではなく，単発例と多発
例の間には顕著な染色性の差は認められなかった．
以上の染色結果を表２に示す．
考 察
毛包上皮腫(trichoepithelioma)は1892年にBroo-
ke6)によって報告された良性の皮膚付属器腫瘍で，角
質嚢腫と基底細胞様細胞よりなる飾状の腫瘍胞巣を特
徴とする．本症は付属器のうちでも毛嚢系への分化を
示す腫瘍と考えられており，今回はケラチン発現パ
ターンを免疫組織化学的に検討し，正常毛嚢における
染色態度5)と比較検討した．
毛包上皮腫における最も特徴的な染色所見は, CK8
および19の腫瘍胞巣の最外層での発現であった．
毛包上皮腫におけるケラチン発現
図３ 免疫染色像
34βB4抗体では角質嚢腫の内層が染色される. (66倍）
Demirkesen et al.‘)も同様の染色態度を報告してい
る. CK8および19は単層上皮型ケラチンで皮膚では主
に汗腺組織に発現されるが7)，正常毛嚢の固定部と移
行部の境界付近の外毛根鞘最外層にも発現することが
知られている,)．分化型ケラチン(ＣＫ １，10)は正常
毛嚢では漏斗部のsuprabasal cellに発現されるが,毛
包上皮腫では角質朧朧の最外層を除いた全層に発現が
みられた．以上より，毛包上皮腫では角質嚢腫の染色
態度は毛嚢漏斗部，それ以外の腫瘍胞巣は固定部と変
動部の移行部の外毛根鞘と同一であることが判明し，
同部への分化が推測された．他の抗体による染色所見
も上記の考えに矛盾しない結果が得られた．しかしな
がら，今回の研究では, CK8およびCK 19の染色性に
症例により若干の差が認められた点が特異であった．
すなわち，ほぼ全ての腫瘍胞巣の最外層が染色された
例が４例で，部分的に同様の染色態度がみられた例が
１例，胞巣の内層まで染色された例が３例，ほとんど
の胞巣が染色されなかった例が２例みられた. CK8お
よびCK 19の発現がみられない胞巣では分化型ケラチ
ンの発現もみられず，その染色態度は移行部の最外層
以外の外毛根鞘と一致していた．同様に毛母様構造を
とる部分も移行部の最外層以外の外毛根鞘と同じ染色
態度で，正常毛母とも染色態度が一致していた．
一方, follicularstem ｃｅ１りよ外毛根鞘の毛隆起部に
存在するとされており8)~10)同部ではCK 19の発現が
確認されている11)基底細胞癌(ＢＣＣ)では同様にCK
19の発現が報告されているが12)13)，ＢＣＣは多分化能を
有する細胞(pluripotential ce11)14)もしくはprimary
epithelial germ celP5)から発生すると考えられてい
る．つまりCK19の発現はfollicular stem cell とplu-
ripotential cellやprimary epithelial germ cellに共
839
図４ 免疫染色像
4.1.18抗体では腫瘍胞巣の最外層が染色される. (66
倍）
図５ 免疫染色像
一部の例では4.1.18抗体により腫瘍胞巣全体が染色さ
れる. (66倍）
通してみられることから，これらCK I9陽性の細胞は
follicular stem cellと同様の性質，すなわち多分化能
を有していると考えられる．毛包上皮腫でも胞巣全体
が染色される例がみられ,これらはＢＣＣと同様のhis-
togenesisを有し,外毛根鞘など毛嚢組織への完全な分
化を示さない例であると考えられた．また，他の毛包
上皮腫でも同様にこのCK 19陽性の細胞から発生し，
他の毛嚢各部への分化を示したとも推論されるが,CK
19陽性の細胞は単なる腫瘍の一部分の分化である可能
性も否定できず，推測の域を出ない.
ＢＣＣは局所侵襲性の強い悪性腫瘍で,毛包上皮腫と
はかなり予後の面で異なっている．さらに両者とりわ
けkeratotic typeのＢＣＣと毛包上皮腫は組織学上の
鑑別が困難な場合も多く，免疫組織学的な両者の鑑別
が多数の学者によって試みられている. Smoller et
al.""によればbcl-2の発現がＢＣＣのみにみられると
840
表２ 免疫組織化学染色結果
頁
抗 体腫瘍胞巣 角質嚢腫
最外層 外層 内層 外層 内層
34βB4
AE3
KLl
34βE12
215B8
6B10
MNF116
LP34
RCK102
0V･TL12/30
Ks7.18
35βH11
4.1.18
CAM5.2
NCL5D3
DE-KIO
AEl
Ksl3.1
Ksl8.04
RCK108
170.2.14
Ksl9.1
Involucrin
－
＋
－
＋
－
－
＋
＋
＋
－
－
－
(十¨*)
－
－
－
＋
－
－
－
(十¨*)
(十¨゛)
－
－
＋
－
＋
－
－
＋
＋
＋
－
－
－
(十¨*)
－
－
－
＋
－
－
－
(十*¨)
(十¨゛)
－
－
＋
－
＋
(十¨)
(十**)
＋
＋
＋
－
－
－
(十*･*)
－
－
－
＋
(十¨)
－
－
(十***)
(十*¨)
－
＋＊
＋
＋＊
＋
－
－
＋
＋
＋
－
－
－
－
－
－
＋＊
＋
－
－
－
－
－
－
＋
＋
＋
＋
－
－
＋
＋
－
－
－
－
－
－
－
十
十
－
－
－
－
－
＋
＋,十/－,－:陽性，弱陽性，陰性
十*：最外層は陰性．（十”）：１例のみ陽性．（十¨’）：３例
が陽性．５例は最外層のみ．２例はほとんど染色されない．
文
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5) Watanabe Ｓ，Wagatsuma Ｋ， Takahashi H.:
Immunohistochemical localization of cytoker-
青ほか
され，レクチンが両者の鑑別に有用とするものもい
る17)~"'. Kirchmann et al.2o)によれば毛包上皮腫の間
質部にCD34が陽性になりＢＣＣとは鑑別されるとし
ているが,例外も認められるとの報告21岫ある．そこで
我々も以前検討したＢＣＣのケラチン発現パターン22)
と毛包上皮腫の比較を試みたが，ケラチン発現パター
ンに顕著な差は認められなかった．同様の報告が
Schirren et al.23)によってもなされている．しかしなが
ら, BCCではＣＫ８および19の発現が腫瘍巣全体にび
まん性にみられるのに対し，毛包上皮腫では胞巣の最
外層に発現する傾向がみられた．両者の絶対的な鑑別
法ではないが，参考になる所見と考えられた.
ＣＫ４およびCK 13は粘膜上皮型のケラチンである
が，正常毛嚢では角化する前の内毛根鞘にも発現して
いる5).ＤｅｍｉｒｋｅＳｅｎet al."'の報告ではCK ４， 13の発
現はみられていないが，自験の１例のみに胞巣の内層
に陽性所見がみられ，外毛根鞘に加えて内毛根鞘への
分化が推測された．
以上をまとめると毛包上皮腫は正常毛嚢の固定部と
変動部の境界付近の外毛根鞘最外層への分化を示し，
さらに角質嚢腫は漏斗部へ，腫瘍胞巣は移行部最外層
以外の外毛根鞘へ分化しているものと推測された．さ
らに一部の腫瘍胞巣では内毛根鞘への分化を伴うもの
もみられた．このような染色態度の若干の差は単発も
しくは多発の病型によるものではなく，症例による差
であった．
献
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Immunohistochemical study of Keratin Expression in Trichoepitheliomas
Jia Qing, Takamitsu Ohnishi, Atsushi Kurotani and Shinichi Watanabe
Department of Dermatology, Teikyo University School of Medicine
(Director: Prof. Hisashi Takahashi)
(Received November 19，1997; accepted for publication January 26，1998)
Immunohistochemical analysis of keratin ｅχpressionin １０cases of trichoepithelioma were performed
to investigate their histogenesis. Five cases of epithelioma adenoides cysticum and ５ cases of classical
solitary trichoepithelioma were retrieved. Immunoreactivities of the nests and keratinous cysts in these
tumors were similar to those of the outer root sheath and infundibulum of normal hair follicles,respec-
tively.Ｅχpression of CK ８and １９，which were recognized in the outermost layer of the outer root sheath
between the lower part of permanent portion and the upper part of transient portion of normal hair
follicles,were observed variably in the epithelial cords and the peripheral layers of the tumor nests. There
were no significant differenｃｅｓ１ｎimmunoreactivities between the two types of trichoepithelioma.
Therefore, we speculated that both may differentiate firsttoward the outermost layer of the outer root
sheath between the lower part of permanent portion and the upper part of transient portion and then into
various other parts of the follicles.
(Jpn J Dermatol 108: 837～841, 1998)
Key words: immunohistochemistry. cytokeratin, trichoepithelioma