BD Biosciences - Technical Data

BD BioCoatTM プレート バラエティパックを用いたPC12 細胞の分化比較

【材料】・ BD BioCoat プレートバラエティパック（カタログ番号：354431）

コラーゲンⅠ、コラーゲンIV、フィブロネクチン、ラミニン、ポリ-D-リシン（PDL）コート

6ウェルプレート×各1枚

・ BD Falcon 6ウェルプレート　細胞培養用（カタログ番号：353046）

・ 培養用培地：RPMI + 10% Horse Serum、5% FBS

・ 分化用培地：RPMI＋0.1% Horse Serum、0.05%FBS

・ 2.5SNGF（カタログ番号：354005）

【方法：分化アッセイ】1. PC12細胞は、培養用培地で培養した。

2. PC12細胞を培養用培地に懸濁した。

3. 各細胞外基質がコートされた、または細胞培養用6ウェルプレートの1ウェルあたり、6×104 細胞になるように細胞

を播種した。1つの基質につき、3ウェルずつ用意した。

4. 24時間培養後、分化用培地に交換し、50ng/ml NGFを添加した。

5. 3日おきに培地（分化用培地+NGF）交換し、9日間培養を行った。

【結果：分化アッセイ】付着可能な基質、コラーゲンI、コラーゲンIV、PDL、ラミニンコートで神経突起の伸長が観察されたが、PDLは、他

の3種類の基質に比較すると神経突起の伸長をあまりサポートすることができなかった。フィブロネクチンコート、細胞

培養用のプレートでは、接着、伸長共にほとんどサポートができず、分化アッセイには適さない。

BD Biosciences - Technical Data

コラーゲンI

65-095-02R0-1004

コラーゲンIV

PDL ラミニン

フィブロネクチン 細胞培養用(TC)