pengaruh kombinasi ekstrak herba sambiloto dan ekstrak propolis terhadap kadar kolesterol total...
DESCRIPTION
Pengaruh Kombinasi Ekstrak Herba Sambiloto dan Ekstrak Propolis Terhadap Kadar Kolesterol Total Darah Tikus HiperkolesterolemiaTRANSCRIPT
v
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT yang telah
menganugerahkan kemudahan dan kelancaran sehingga skripsi ini dapat
diselesaikan. Shalawat serta salam semoga senantiasa tercurahkan kepada
Rasulullah SAW beserta keluarga dan sahabatnya hingga akhir zaman. Penuh rasa
syukur, penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul Pengaruh Pemberian
Kombinasi Fraksi Kurkuminoid Rimpang Curcuma xanthorrhiza Roxb.
dengan Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak Etanolik Herba Andrographis
paniculata (Burm.f.) Nees Terhadap Kadar Kolesterol Total Tikus Wistar
Jantan Resisten Insulin sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar sarjana
pada Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Penelitian dan penyusunan skripsi ini dapat diselesaikan oleh penulis dengan
izin Allah SWT dan bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu penulis ingin
mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Prof. Dr. Marchaban, DESS., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi UGM
atas segala fasilitas dan kemudahan yang telah diberikan selama penulis
melakukan penelitian dan penyusunan skripsi ini.
2. Prof. Dr. Suwidjiyo Pramono, DEA., Apt., selaku dosen pembimbing
utama yang telah memberikan bimbingan, motivasi, bantuan, serta
mendanai penelitian ini.
3. Dr. Agung Endro Nugroho, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing
pendamping yang telah membimbing dan mengarahkan selama
penyusunan skripsi ini.
4. Prof. Dr. Sugeng Riyanto, M.Si., Apt., yang telah memberikan saran
berharga sehingga skripsi ini menjadi lebih berisi.
5. Dr.rer.nat. Nanang Fakhrudin, M.Si., Apt., yang telah memberikan saran
berharga sehingga skripsi ini menjadi lebih berisi.
6. PT. Phapros Semarang yang telah memberikan bantuan bahan penelitian.
7. Pimpinan dan segenap staf Bagian Biologi Farmasi Fakultas Farmasi
UGM serta LPPT UGM Unit Pengembangan Hewan Percobaan atas
segala kerja sama dan fasilitas selama penelitian.
8. Seluruh staf dan karyawan Perpustakaan Fakultas Farmasi Universitas
Gadjah Mada yang telah memberikan bantuan pencarian literatur selama
penyusunan skripsi.
9. Ibu, Bapak, atas segala doa, dukungan, dan cinta kasih serta adik-adikku
yang telah memberikan semangat.
10. Pak Mohamad Andrie, yang telah memberikan saran dan bantuan literatur
untuk perbaikan skripsi ini.
11. Gina, Yayan, Rasun, Sweta, Zakki, Firman, Nia, Hana, dan Christine atas
kerja samanya selama penelitian.
12. Teman-teman golongan IV: Rasun, Cumcum, Dewi, Ami, Ihsan, Mahda,
Dhika, Putri, Irvan, Zakki, dan Ai Eva.
13. Keluarga Muslim Alumni Padmanaba, atas ukhuwah dan pelajaran hidup
selama 4 tahun yang sangat berharga ini.
vi
14. Saudara-saudara satu lingkaran, tempat saya menimba ilmu, merasakan
ukhuwah, dan berbagi suka duka dari SMP sampai sekarang.
15. Teman-teman KKN Sub Unit Tegalsari, Kendalsari, Klaten atas
pengalaman yang menyenangkan selama KKN.
16. Teman-teman di KMMF UGM dan PIOGAMA yang telah memberi warna
pada kehidupan saya di kampus.
17. Teman-teman seperjuangan skripsi: Amrina, Siti, Astri, atas motivasi dan
bantuannya dalam menyelesaikan skripsi ini.
18. Teman-teman seangkatan Fakultas Farmasi UGM 2008 atas segala
kebersamaan dan kekompakannya.
19. Berbagai pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu, penulis
mengucapkan terima kasih untuk semua bantuan, dukungan, dan doa.
Akhir kata, penulis menyadari bahwa skripsi ini masih memiliki banyak
kekurangan karena keterbatasan pengetahuan dan pengalaman. Untuk itu penulis
mengharapkan kritik dan saran yang membangun. Semoga skripsi ini dapat
bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.
Yogyakarta, Agustus 2012
Penulis
(
N
o
r
m
a
l
i
t
a
E
k
a
vii
DAFTAR ISI
HALAMAN SAMPUL ........................................................................................ i
HALAMAN JUDUL ............................................................................................ ii
HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. iii
HALAMAN PERNYATAAN ............................................................................. iv
KATA PENGANTAR ......................................................................................... v
DAFTAR ISI ........................................................................................................ vii
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... x
DAFTAR TABEL ................................................................................................ xi
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xii
DAFTAR SINGKATAN ..................................................................................... xiii
INTISARI ............................................................................................................. xiv
BAB I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah ........................................................................... 1
B. Rumusan Masalah .................................................................................... 3
C. Tujuan Penelitian ..................................................................................... 3
D. Manfaat Penelitian ................................................................................... 4
E. Tinjauan Pustaka ...................................................................................... 4
1. Temulawak ......................................................................................... 4
a. Sistematika .................................................................................... 4
b. Morfologi ...................................................................................... 5
c. Kandungan kimia .......................................................................... 6
d. Efek farmakologi ........................................................................... 6
2. Sambiloto ........................................................................................... 7
a. Sistematika .................................................................................... 7
b. Morfologi ...................................................................................... 8
c. Kandungan kimia .......................................................................... 9
d. Efek farmakologi ........................................................................... 9
3. Ekstraksi .............................................................................................. 10
4. Ekstrak ................................................................................................ 11
5. Kromatografi lapis tipis ...................................................................... 12
6. Diabetes melitus ................................................................................. 13
a. Definisi .......................................................................................... 13
b. Klasifikasi ..................................................................................... 14
c. Diagnosis ....................................................................................... 16
d. Patogenesis diabetes melitus tipe 2 resisten insulin ...................... 17
e. Metabolisme lemak pada diabetes ................................................ 19
7. Kolesterol ........................................................................................... 20
8. Hiperlipidemia..................................................................................... 22
9. Obat-obat antilipidemik ...................................................................... 24
10. Induksi fruktosa ................................................................................... 25
11. Pengukuran kadar glukosa darah menggunakan pereaksi GOD-PAP 27
12. Pengukuran kadar kolesterol total darah menggunakan pereaksi
CHOD-PAP ......................................................................................... 28
viii
F. Landasan Teori ......................................................................................... 29
G. Hipotesis .................................................................................................... 31
BAB II. METODOLOGI PENELITIAN
A. Bahan dan Alat Penelitian ......................................................................... 32
1. Bahan penelitian ................................................................................. 32
2. Alat penelitian .................................................................................... 33
B. Jalannya Penelitian .................................................................................... 34
1. Identifikasi tanaman ............................................................................ 34
2. Pembuatan fraksi tak larut heksan ekstrak etanolik herba sambiloto . 34
3. Analisis kualitatif ............................................................................... 35
a. Penetapan kandungan andrografolid dalam fraksi tak larut
heksan ekstrak etanolik herba sambiloto ....................................... 35
b. Penetapan kandungan kurkumin dalam fraksi kurkuminoid
rimpang temulawak ....................................................................... 36
4. Analisis kuantitatif ............................................................................. 36
a. Penetapan kadar andrografolid dalam fraksi tak larut heksan
ekstrak etanolik herba sambiloto ................................................... 36
b. Penetapan kandungan kurkumin dalam fraksi kurkuminoid
rimpang temulawak ....................................................................... 36
5. Penetapan dosis sediaan uji ................................................................. 37
6. Induksi resisten insulin ........................................................................ 37
a. Pengelompokan hewan uji ............................................................. 37
b. Pembuatan pakan tinggi lemak dan larutan fruktosa ..................... 38
c. Penetapan kadar glukosa darah preprandial dan kolesterol total
darah .............................................................................................. 38
1) Preparasi serum ...................................................................... 38
2) Penetapan kadar glukosa darah preprandial .......................... 39
3) Penetapan kadar kolesterol total darah ................................... 39
7. Uji aktivitas FKRT, FTLHEEHS, dan kombinasinya terhadap kadar
kolesterol total darah ........................................................................... 40
a. Pengelompokan hewan uji ............................................................. 40
b. Pemberian sediaan uji .................................................................... 40
c. Penetapan kadar glukosa preprandial darah dan kolesterol total
darah .............................................................................................. 41
C. Analisis Data ............................................................................................ 41
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Identifikasi Tanaman ................................................................................. 43
B. Pembuatan Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak Etanolik Herba Sambiloto 40
C. Analisis Kualitatif ..................................................................................... 45
1. Penetapan kandungan andrografolid dalam fraksi tak larut heksan
ekstrak etanolik herba sambiloto .......................................................... 45
2. Penetapan kandungan kurkumin dalam fraksi kurkuminoid rimpang
temulawak ............................................................................................. 47
D. Analisis Kuantitatif ................................................................................... 49
1. Penetapan kadar andrografolid dalam fraksi tak larut heksan ekstrak
etanolik herba sambiloto ..................................................................... 49
ix
2. Penetapan kadar kurkumin dalam fraksi kurkuminoid rimpang
temulawak ........................................................................................... 50
E. Uji Farmakologi ........................................................................................ 51
1. Induksi resisten insulin ........................................................................ 51
a. Penetapan kadar glukosa darah preprandial ................................. 52
b. Penetapan kadar kolesterol total darah .......................................... 53
2. Pengaruh pemberian FKRT, FTLHEEHS, dan kombinasinya
terhadap kadar kolesterol total darah .................................................. 55
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN
A. KESIMPULAN ........................................................................................ 59
B. SARAN .................................................................................................... 59
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 60
LAMPIRAN ......................................................................................................... 65
x
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Rimpang Temulawak ....................................................................... 5
Gambar 2. Struktur Kurkuminoid pada Spesies Curcuma ................................ 6
Gambar 3. Herba Sambiloto .............................................................................. 8
Gambar 4. Struktur Kimia Andrografolid ......................................................... 9
Gambar 5. Struktur Kimia Kolesterol ................................................................ 20
Gambar 6. Sintesis Kolesterol di Dalam Tubuh ................................................ 21
Gambar 7. Transpor Kolesterol di Dalam Tubuh .............................................. 22
Gambar 8. Metabolisme Fruktosa di Hati .......................................................... 26
Gambar 9. Pembentukan Senyawa Kuinoimin pada Reaksi Glukosa dengan
Reagen GOD-PAP ........................................................................... 27
Gambar 10. Pembentukan Senyawa Kuinoimin pada Reaksi Kolesterol dengan
Reagen CHOD-PAP ........................................................................ 28
Gambar 11. Kromatogram Ekstrak Herba Sambiloto .......................................... 46
Gambar 12. Kromatogram Fraksi Kurkuminoid Rimpang Temulawak dan
Standar Kurkumin ............................................................................ 48
Gambar 13. Kadar Glukosa Darah Preprandial Setelah 35 Hari Pemberian
Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa ..................................................... 52
Gambar 14. Kadar Kolesterol Total Darah Setelah 35 Hari Pemberian Diet
Tinggi Lemak dan Fruktosa ............................................................. 53
Gambar 15. Histogram Hati Hewan Uji .............................................................. 54
Gambar 16. Kadar Kolesterol Total Darah Rata-rata Hari Ke-0, 35, 60, dan 75 56
xi
DAFTAR TABEL
Tabel I. Kategorisasi Kadar Glukosa Darah ................................................... 17
Tabel II. Komposisi Larutan Uji Kadar Glukosa Darah .................................. 39
Tabel III. Data hRf dan Warna Bercak Standar Andrografolid dan Ekstrak
Herba Sambiloto yang Diperoleh dari KLT ....................................... 47
Tabel IV. Data hRf dan Warna Bercak Standar Kurkumin dan Fraksi
Kurkuminoid Rimpang Temulawak yang Diperoleh dari KLT ......... 49
Tabel V. Kadar Andrografolid dalam Ekstrak Etanolik Herba Sambiloto ....... 50
Tabel VI. Kadar Andrografolid dalam Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak
Etanolik Herba Sambiloto .................................................................. 50
Tabel VII. Kadar Kurkumin dalam Fraksi Kurkuminoid Rimpang Temulawak . 51
Tabel VIII. Persentase Perubahan Kadar Kolesterol Total Darah Hari ke-60 dan
75 ........................................................................................................ 57
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi Tanaman ....................................... 65
Lampiran 2. Perhitungan Rendemen Ekstrak Etanolik dan Fraksi Tak Larut
Heksan Ekstrak Etanolik Herba Sambiloto ................................... 66
Lampiran 3. Densitogram Standar Andrografolid, Ekstrak Etanolik Herba
Sambiloto, dan Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak Etanolik Herba
Sambiloto ........................................................................................ 67
Lampiran 4. Densitogram Standar Kurkumin dan Fraksi Kurkuminoid
Rimpang Temulawak ...................................................................... 69
Lampiran 5. Perhitungan Kadar Andrografolid Ekstrak Etanolik Herba
Sambiloto dan Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak Etanolik Herba
Sambiloto ....................................................................................... 71
Lampiran 6. Perhitungan Kadar Kurkumin Fraksi Kurkuminoid Rimpang
Temulawak .................................................................................... 72
Lampiran 7. Pembuatan Pakan Tinggi Lemak ................................................... 73
Lampiran 8. Pembuatan Larutan Fruktosa .......................................................... 75
Lampiran 9. Perhitungan Volume Pemberian dan Penyiapan Sediaan Uji ........ 72
Lampiran 10. Hasil Analisis Statistik Kadar Glukosa Darah Preprandial Hari
Ke-0 (Baseline) Semua Kelompok ................................................. 77
Lampiran 11. Hasil Analisis Statistik Kadar Kolesterol Total Darah Hari Ke-0
(Baseline) Semua Kelompok .......................................................... 78
Lampiran 12. Hasil Analisis Statistik Kadar Glukosa Darah Preprandial Hari
ke-0 dan Hari ke-35 Kelompok Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa . 79
Lampiran 13. Hasil Analisis Statistik Kadar Kolesterol Total Darah Hari ke-0
dan Hari ke-35 Kelompok Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa ......... 80
Lampiran 14. Hasil Analisis Statistik Berat Badan Tikus .................................... 81
Lampiran 15. Hasil Analisis Statistik Kadar Kolesterol Total Darah Hari ke-60 . 82
Lampiran 16. Hasil Analisis Statistik Kadar Kolesterol Total Darah Hari ke-75 . 84
Lampiran 17. Hasil Analisis Statistik Persentase Perubahan Kadar Kolesterol
Total Darah (PPKK) ....................................................................... 86
Lampiran 18. Kadar Glukosa Darah Preprandial (mg/dL) .................................. 88
Lampiran 19. Kadar Kolesterol Total Darah (mg/dL) .......................................... 89
Lampiran 20. Persentase Perubahan Kadar Kolesterol Total Darah (%) .............. 91
Lampiran 21. Data Berat Badan Hewan Uji ......................................................... 93
Lampiran 22. Surat Keterangan Selesai Penelitian Skripsi di Bagian Biologi
Farmasi Fakultas Farmasi UGM ..................................................... 95
Lampiran 23. Surat Keterangan Selesai Penelitian Skripsi di LPPT UGM Unit
Pengembangan Hewan Percobaan .................................................. 96
xiii
DAFTAR SINGKATAN
µL : mikroliter
ACC : Acetyl CoA Carboxylase
ANOVA : Analysis of Variance
dl : desiliter
FAS : Fatty Acid Synthase
FKT : Fraksi Kurkuminoid Rimpang Temulawak
FTLHEEHS : Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak Etanolik Herba Sambiloto
g : gram
GLUT-2 : Glucose Transporter-2
HDL : High Density Lipoprotein
HMG-CoA : 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA
ILDL : Intermediate Low Density Lipoprotein
kg BB : kilogram berat badan
KLT : Kromatografi Lapis Tipis
LDL : Low Density Lipoprotein
mg : miligram
mL : milliliter
PAI-1 : Plasminogen Activator Inhibitor type 1
PPAR-α : Peroxisome Proliferator-Activated Receptor- α
SCD : Stearoyl CoA Desaturase
SPSS : Statistical Product and Service Solution
SRE : Sterol Responsive Elements
SREBP : Sterol Regulatory Element Binding Protein
TLC : Thin Layer Chromatography
UV : ultraviolet v/v :
volume/volume
VAT : Visceral Adipose Tissue
VLDL : Very Low Density Lipoprotein
WHO : World Health Organization
xiv
INTISARI
Hiperkolesterolemia merupakan kondisi yang sering terjadi pada penderita
diabetes melitus tipe 2 resisten insulin. Hiperkolesterolemia dapat meningkatkan
risiko terjadinya penyakit kardiovaskular yang memerlukan pengobatan jangka
panjang sehingga dibutuhkan terapi dengan efek samping yang relatif kecil.
Penelitian menggunakan bahan alam terus dilakukan untuk mencari terapi yang
efektif dengan efek samping relatif kecil. Oleh karena itu dilakukan penelitian
menggunakan kombinasi fraksi kurkuminoid rimpang temulawak (FKRT) dan
fraksi tak larut heksan ekstrak etanolik herba sambiloto (FTLHEEHS).
Induksi resisten insulin dilakukan dengan memberikan diet tinggi lemak dan
fruktosa 180 mg/100 g BB per oral satu kali sehari. Hewan uji dibagi dalam 5
kelompok masing-masing sebanyak 7 ekor tikus, yaitu kontrol normal air suling,
FKRT 45 mg/200 g BB, FTLHEEHS 58,55 mg/200 g BB, kombinasi FKRT 45
mg/200 g BB dengan FTLHEEHS 58,55 mg/200 g BB, dan kontrol positif
metformin 9 mg/200 g BB. Sediaan uji diberikan selama 40 hari dengan tetap
memberikan diet tinggi lemak dan fruktosa. Kadar kolesterol total darah diukur
pada hari ke-0, 35, 60, dan 75.
Analisis perubahan kadar kolesterol total darah dilakukan dengan
membandingkan selisih perubahan kadar kolesterol total darah sebelum dan
sesudah pemberian sediaan uji. Hasil uji ANOVA satu jalan tidak menunjukkan
adanya perbedaan bermakna antara kombinasi dengan bentuk tunggalnya. Hal ini
menunjukkan bahwa kombinasi FKRT dengan FTLHEEHS tidak menunjukkan
potensi penurunan kadar kolesterol total darah yang lebih efektif dibanding bentuk
tunggalnya.
Kata kunci: kurkuminoid, sambiloto, kolesterol total, resisten insulin