PROPIEDAD ANTIBACTERIANA Y FUNGICA DE MACERADOS ETANÓLICOS Y EN AGUA DE ANDRES WAYLLA, WIRA WIRA Y LAMPAYA

1. INTRODUCCION

Los medicamentos herbarios ancestrales siguen utilizándose ampliamente en la actualidad y tienen una importancia en el comercio internacional (I). Las plantas medicinales son importantes para la investigación farmacológica ayudando a la Microbiología Médica e incluso Parasitología frente al desarrollo de propiedades antibacterianas, fúngicas y parasitarias fundamentadas en base a ciencia e Investigación y no solo por sus usos terapéuticos conocidos tradicionalmente, sino también porque son fuentes potenciales para la síntesis de medicamentos, pero que actualmente derivan de productos naturales (12,13), pero sin uso Industrial ni patentas y mucho peor determinado frente a qué agente causal patógeno puede actuar como ser Cocos Gram (+),Gram (+),Staphylococcus spp, o Enterococcus y Candida albicans(Hongo).

Bolivia cuenta con elevadas ventajas comparativas en relación al uso de plantas medicinales. Entre estas se pueden citar a la gran biodiversidad y el conocimiento sobre su uso y manejo dado por la Medicina Tradicional y el conocimiento étnico (III). Ese tesoro boliviano que son sus Medicinas autóctonas, ese conocimiento y habilidad que dio origen al nombre mismo del país en el incario pues se llamo Qollasuyo, que significa Región de Médicos y Medicinas, están actualmente en franca decadencia y en vías de desaparición y deben ser revalorados

y rescatados por nosotros mismos, los bolivianos.(5).

Las hojas, los cogollos tiernos y aun las flores del Cestrum Parqui L´Herit Hierba santa (Tarija), Hediondilla, Andres Waylla (aymara y quechua), Nariswaylla (aymara quechua), Wajchi (aymara), Jasq`o (aymara –Larecaja), Siruntilla (callawaya), Rama verde (Vallegrande), Juimonejá (chiriguano) se emplean como desinfectantes en forma de cataplasma en los abscesos; la infusión de un cogollo tierno en una taza de agua hirviente para las inflamaciones gástricas y para las inflamaciones biliosas .De las hojas tiernas y molidas se prepara una pomada para curar la sarna tiña, eczemas, etc. En Cochabamba el cocimiento de las hojas se emplea como excelente sudorífico; las hojas aplicadas exteriormente sirven para curar las ulceras y edemas. (5)

Las propiedades medicinales de este arbusto que, en la región de Torotoro (Norte Potosi) y el río Caine se conoce con el nombre de Andres waylla reportan su uso para hacer secar las ampollitas y granos que salen en el cuerpo a causa de algunas enfermedades de la piel, las hojas tiernas molidas y aplicadas como pomada curan las

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caracha-sarna, la tina o Qara, El Pajtu o Llipira (fuego en los labios), etc. (11).Es necesario decir que en el departamento de Cochabamba las variedades

más comunes de esta especie vegetal son dos: una con flores de color café casi negro, que es venenosa; y otra con flores amarillas que, como mencionamos tiene muchos usos medicinales. (11)

Ejemplo el Andres wuaylla se usa en caso de la sarna o escabiosis es una ectoparasitosis de tipo familiar que ha afectado al hombre desde la antigüedad. En 1687 cuando se relaciona con la presencia de un acaro en la piel. Sin embargo, sólo a fines del siglo XIX se aceptó que el Sarcoptes scabiei es su agente causal. (1)

La sarna es una ectoparasitosis cosmopolita, más frecuente en países templados y fríos. Por ser su mecanismo de transmisión directo, es una enfermedad de tipo familiar o de grupos cerrados, en los cuales se observa que la posibilidad de contagio es de un 73-85%, siendo, por lo tanto, importante los factores de hacinamiento y promiscuidad. La posibilidad de infección a través de fómites es escasa. (1)

2. PLANTEAMIETO DEL PROBLEMA

¿Cuál de las plantas medicinales utilizadas tendrán mayor actividad antibacteriana y fúngica?

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3. ANTECEDENTES

Los factores socioeconómicos en barrios periurbanos y comunidades rurales son de mayor importancia de Cochabamba inciden en infecciones de heridas, o Candida albicans, Sarcoptes scabiae, o bacterias que ocasionan enfermedades Humanas comunes de índole sistémico como ser Staphylococcus spp, o Enterococcus dentro de la familia Gram positivos.

La información etnobotánica evidencia el uso de Cestrun Parqui L‘Herit para el tratamiento de Sarcoptosis, además esta especie es apreciada por sus propiedades cicatrizantes y antibacterianas sobre la piel, Lampaya (Lampaya medicinalis F. Phil) usos tradicionales en afecciones renales, vías urinarias y de la próstata; afecciones hepáticas; dispepsia, wira wira (Pseudognaphalium viravira (Mol.) A. Anderb.) de uso tradicionales tos, asma, bronquitis, resfrío; fiebre.

Considerando que la población de estas zonas tiene por tradición una mayor aceptación en el uso de plantas medicinales frente a los tratamientos comerciales de sarcoptosis, se elaboraron formas farmacéuticas alternativas y a bajo costo en basea extractos de Cestrun Parqui L‘Herit.

Las pruebas in vitro evidenciaron que los extractos etanólicos y agua de Cestrun Parqui L‘Herit,(Andres Wuaylla), Lampaya (Lampaya medicinalis F. Phil) wira wira (Pseudognaphalium viravira (Mol.) A. Anderb.) Presentan actividad antibacteriana frente A Staphylococcus spp, o Enterococcus dentro de la familia Gram positivos y actividad antifúngica frente a Candida albicans (ATCC 96934) e inhibición contra el ácaro Sarcoptes scabiae. Se formularon titulaciones a diferentes concentraciones del extracto. Se realizó el control de calidad fisicoquímico y microbiológico de los productos y pruebas preliminares de sensibilidad.

Los mejores resultados se obtuvieron con formulaciones solución madre 1:1 100 ul Inhibicion dentro de los estándares del CIM, ½,1/4,1/8.

Palabras clave: Gram (+),Staphylococcus spp, o Enterococcus, etnobotánica, antifúngica, pruebas in vitro, formulaciones galénicas.

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4. JUSTIFICACION

Los cocos Gram positivos son un grupo heterogéneo de bacterias. Las características que tienen en común son su forma esférica, su reacción a la tinción de Gram y la ausencia de endoesporas.

La presencia o ausencia de actividad catalasa es una prueba sencilla que se utiliza para subdividirlas en varios géneros. Las catalasas son enzimas que catabolizan peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno gaseoso. Cuando se pone en contacto una gota de solución de peróxido de hidrógeno con una colonia productora de catalasa, aparecen burbujas a medida que se forma oxígeno gaseoso. En este trabajo de investigación se exponen los géneros aerobios catalasa-positivos (como Staphylococcus (Bacteria de Ensayo), Micrococcus, Kocuria, Kytococcus y Alloiococcus); mientras que los géneros aerobios catalasa-negativos (Streptococcus, Enterococcus y microorganismos relacionados) se especifican Staphylococcus aureus,Staphylococcusepidermidi, Staphylococcussaprophyticus, Staphylococcus lugdunensis, Staphylococcus haemolyticus son la enfermedades Cutáneas (carbuncos, foliculitls, forúnculos, impétigo infección de heridas); mediadas por toxinas (intoxicación alimentaria, síndrome de la piel escaldada, síndrome del shock tóxico); otras (artritis séptica, bacteriemia, empiema, endocarditis, osteomielitis, neumonía), Bacteriemia; endocarditis; heridas quirúrgicas; infecciones del tracto urinario; infecciones oportunistas de los catéteres, anastomosis, prótesis y dispositivos de diálisis peritoneal Infecciones del tracto urinario; infecciones oportunistas Artritis, bacteriemia, endocarditis, infecciones del aparato genitourinario e infecciones oportunistas Bacteriemia, endocarditis, infección de heridas, Infecciones óseas y articulares, Infecciones oportunistas e infecciones del tracto urinario y en el mismo caso tenemos a los Enterococcus ssp, teniendo el potencial en plantas medicinales con un gran poder antibacteriano y Fúngico no se da la importancia respectiva que pueden ayudar en la economía de cada una de nuestras familias tanto cochabambinas o de otras regiones, dando un uso correcto de cada uno de los principios activos en concentraciones estandarizadas y puedan ser aplicables en PRO- DE LA MICROBIOLOGIA MEDICA – PARASITOLOGIA.

Por ejemplo en el caso de la sarcoptosis y/o problemas fúngicos que se presenta en la población, en diferentes regiones del cuerpo (principalmente en el pie). Los causantes de esta infección pertenecen a la familia de las cándidas, que es un caso muy común como patología, pero con tratamientos de elevados costos.

5. OBJETIVOS

5.1 Objetivo General

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Determinar el grado de propiedad antibacteriana y fúngica de macerados etanólicos y en agua de andres waylla, wira wira y lampaya frente al Enterococcus, Staphylococcus spp,candida albicans.

5.2 Objetivo Especifico

Comparar en cuál de las cepas tiene mayor actividad antibacteriana y fúngica Utilizar el extracto con mayor halo para demostrar su potencia frente a cepas

utilizadas Estandarizar las titulaciones para definir sus propiedades antibacterianas y fúngicas

de los extractos etanolicos y en agua.

6. MARCO TEORICO

6.1 Enterococcus: Los enterococos («cocos entéricos») se clasificaron previamente como estreptococos del grupo D debido a que poseen el antígeno de la pared celular del grupo D, un ácido teicoico con glicerol que se asocia a la membrana citoplásmica . A pesar de este dato, se observó que estos microorganismos diferían de los restantes estreptococos del grupo D (conocidos como estreptococos del grupo D no enterocócícos [p. ej., Streptococcus bovis]). Los grupos enterocócícos y no enterocócícos se diferenciaron inicialmente por sus propiedades fisiológicas y a través del análisis de ácidos nucleicos. En el año 1984, lo enterococos se clasificaron en el nuevo género Enterococcus, el cual consta actualmente de 29 especies. Las especies que se aislan con una mayor frecuencia y que son clínicamente las más importantes son Enterococcus faecalis y Enterococcus faecium. Enterococcus gallinarum y Enterococcus casseliflavus también constituyen frecuentes colonizadores del aparato digestivo del ser humano y revisten importancia debido a su posible confusión con E, faecium resistente a vancomicina, aunque rara vez se asocian a enfermedad en el ser humano

6.2 PATOGENIA E INMUNIDADLos enterococos son microorganismos comensales que no fabrican ninguna toxina potente ni otro factor de virulencia definido. En consecuencia, por lo general se considera que estas bacterias poseen una limitada capacidad patógena, aunque las enfermedades potencialmente mortales, en especial en sujetos hospitalizados, se han convertido en un grave problema. Estas bacterias presentan adhesinas de superficie que facilitan su unión a las células que tapizan los tejidos intestinales y vaginales del organismo anfitrión humano, y secretan enzimas extracelulares con actividad hemolítica (citolisinas) y proteolítica (p. ej., gelatinasa, serina proteasa). Normalmente, las bacterias no son capaces de evitar su fagocitosis y destrucción por parte de las células fagocíticas. Los enterococos pueden producir también bactericinas que inhiben a otras bacterias competidoras. Quizá tenga una

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mayor trascendencia la resistencia inherente de los enterococos a muchos de los antibióticos que se usan con una frecuencia mayor (p. ej: oxacilina, cefalosporinas), o bien hayan adquirido genes de resistencia (p. ej., a aminoglucósidos, a vancomicina). Por tanto, los enterococos que forman parte de la microflora normal de sujetos tratados con antibióticos de amplio espectro (y que generalmente presentan enfermedades graves) son capaces de proliferar y originar enfermedad.

6.3 DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Los enterococos crecen con facilidad en medios no selectivos como el agar sangre (en uso) y el agar chocolate. A pesar de que pueden remedar a S. pneumoniae en las muestras teñidas con la tinción de Gram, estos microorganismos se pueden diferenciar fácilmente mediante reacciones bioquímicas sencillas (p. ej., los enterococos son resistentes a la optoquina, no se disuelven cuando se exponen a la bilis y producen L-pirrolidonil arilamidasa (la prueba PYR se efectúa habitualmente como una prueba «de 5 minutos»). Son necesarias pruebas fenotípicas (p. ej., la producción de pigmento, la motilidad), bioquímicas y de secuenciación de ácidos nucleicos para distinguir entre E. faecalis, E. faecium y otras especies de Entorococcus.

6.4 Staphylococcus

El nombre del género Staphylococcus procede del griego staphylé, «racimo de uvas» .Por tanto, la designación Staphylococcus se refiere a que las células de estos cocos se desarrollan en un patrón que recuerda a un racimo de uvas; sin embargo, los microorganismos presentes en muestras clínicas aparecen como células aisladas, en pares o en cadenas cortas. La mayor parte de los estafilococos tiene un diámetro de entre 0,5 y 1 mm y son anaerobios facultativos (es decir, crecen aerobia y anaerobiamente) inmóviles capaces de crecer en un medio con una elevada concentración de sal (p. ej., cloruro sódico al 10%) y a temperaturas desde 18 hasta 40 °C. Estas bacterias están presentes en la piel y las mucosas del ser humano. En la actualidad, el género comprende 35 especies y 17 subespecies, muchas de las cuales se encuentran en el ser humano. Algunas especies se desarrollan en nichos muy específicos en los que se encuentran habitualmente. Por ejemplo, Staphylococcus aureus coloniza las narinas anteriores, Staphylococcus capitis crece en regiones con glándulas sebáceas, (como la frente) y Staphylococcus haemolyticus y Staphylococcus homínis se hallan en zonas dotadas de glándulas apócrinas. (como la axila). Las bacterias del género Staphylococcus conforman un importante grupo de patógenos en el ser humano y originan un amplio espectro de enfermedades sistémicas que pueden poner en peligro la vida, infecciones de la piel, las partes blandas, los huesos y el aparato genitourinario e infecciones oportunistas (tabla 22-2). Las especies que se asocian con

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mayor frecuencia a enfermedad en el ser humano son S. aureus (el miembro más virulento y mejor conocido del género), Staphylococcus epidermidis, S. haemolyticus, Staphylococcus lugdunensis y Staphylococcus saprophyticus. Las colonias de S. aureus son doradas debido a los pigmentos carotenoides que se forman durante su crecimiento, de ahí el nombre de la especie. Igualmente, representa la única especie colonizadora del ser humano que produce la enzima coagulasa. Cuando se suspende una colonia de S. aureus en un tubo con plasma, la coagulasa se une a un factor sérico y el complejo convierte el fibrinógeno en fibrina, lo que da lugar a un coágulo. Dado que las restantes especies estafilocócicas carecen de la capacidad de producir coagulasa, son conocidas colectivamente como estafilococos coagulasa-negativos

6.5 PATOGENIA E INMUNIDAD

Bacteriemia relacionada con el catéter, Endocarditis subaguda asociada a patología valvular previa o a válvulas protésicas, Infección de derivación en el sistema nervioso central, Infección de las heridas quirúrgicas cuando existe un cuerpo extraño (p. e¡., sutura, prótesis, soporte), Las enfermedades piógenas incluyen el impétigo, la foliculitis, losforúnculos, el carbunco y las infecciones de las heridas. Otras enfermedades sistémicas (que generalmente se asocian con bacteriemia) son la neumonía (típicamente después de una infección respiratoria viral), el empiema (complicación de la neumonía o de la intervención quirúrgica), la artritis séptica, la osteomielitis, la endocarditis aguda.

6.6 DIAGNOSTICO DE LABORATORIO EN CULTIVO AGAR SANGRE

Las muestras clínicas se deben inocular en medios de agar enriquecidas complementados con sangre. Los estafilococos crecen rápidamente en los medios no selectivos, tanto aerobia como anaerobiamente, y se pueden apreciarcolonias lisas de gran tamaño en el plazo de 24 horas . Como se ha mencionado anteriormente, las colonias de S. aureus adquieren gradualmente una coloración dorada en especial cuando los cultivos se incuban a temperatura ambiente. Casi todas las cepas de S. aureus y algunas cepas de estafilococos coagulasa-negativos producen hemolisis en el agar sangre de carnero. La hemolisis se debe sobre todo a citotoxinas, fundamentalmente la toxina a. Cuando la muestra contiene una mezcla de varios microorganismos (p. ej., una muestra respiratoria o de una herida), se puede aislar de forma selectiva S. aureus en un medio de agar complementado con cloruro sódico al 7,5% (el cual inhibe el crecimiento de la mayor parte de los microorganismos), y de manitol (fermentado por S. aureus, pero no por la mayoría de las restantes especies de estafilococos).

6.6.1 AGAR SANGRE

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Medio rico en nutrientes. Además es un medio diferencial: beta-hemólisis (Hemólisis total), Alfa Hemólisis (Hemólisis parcial), gamma (Sin Hemólisis)

6-6.2 AGAR MUELLER HILTON

Medio que se puede enriquecer añadiendo sangre.

6.6.3 CANDIDA FRENTE A LOS EXTRACTOS

Se debe tener en cuenta que hay muchos hongos que crecen en medio de agar Saboureaud y se puede identificar específicamente al agente causante. Se realizaría la investigación mediante los siguientes pasos:

Observación en microscopio con lactofenol.(LABISMED) Cultivo en agar Sabouraud (especial para fungos). Auxonograma (Se emplea para la identificación de hongos levaduriformes, para la

orientación si es C. Krusei, C. Galabrata, C. Guillermondi). (97) LABISMED Identificación mediante técnica de difusión.

Mediante estas técnicas podremos identificar a los principales causantes de estas infecciones fúngicas, lo mas resaltante se observa trabajando con la muestra identificada frente al extracto de Andres Wuaylla, (presenta actividad Fúngica).

7. MATERIALES Y METODOS

7.1 TRATAMIENTO DE LA PLANTA MEDICINAL

‹ Recolección.- Las hojas de (Cestrun Parqui L´Herit - Andres Wuaylla), Lampaya (Lampaya medicinalis F. Phil) wira wira (Pseudognaphalium viravira (Mol.) A. Anderb fueron recolectadas en zonas de valle bajo cercanas a los ríos del departamento de Cochabamba, con la colaboración de la gente del lugar.‹ Valoración.- La valoración que se realizo fue en función de los siguientes aspectos: Forma, color y olor de las hojas, de la planta conocida como Andres Waylla, Lampaya (Lampaya medicinalis F. Phil) wira wira (Pseudognaphalium viravira (Mol.) A. Anderb‹ Lavado.- El lavado se realizo primero en el lugar de recolección, posteriormente con solución diluida hipoclorito de sodio.‹ Secado de hojas.- Una vez clasificadas las hojas fueron colocadas por separado sobre laminas de papel a temperatura ambiente, protegidas del sol hasta que presenten un aspecto seco y quebradizo.

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‹ Valoración organoléptica de la muestras de hoja Entera Cestrum Parqui L`Herit. Cestrun Parqui L‘Herit,(Andres Wuaylla), Lampaya (Lampaya medicinalis F. Phil) wira wira (Pseudognaphalium vira vira

Esta valoración se realizo bajo las siguientes características:

Olor. Color. Sabor y consistencia. Valoración Microscópica

‹ Recopilación de la información medicinal de la Cestrum Parqui L`Herit. Cestrun Parqui L‘Herit,(Andres Wuaylla), Lampaya (Lampaya medicinalis F. Phil) wira wira (Pseudognaphalium viravira (Mol.) - la recopilación sobre estas plantas

que presenta actividad se realizo con los siguientes pasos:

o Primero se efectuó la búsqueda de información de plantas que presentan actividad y uso contra algunas enfermedades, en las comunidades de Cochabamba de uso tradicional y con ayuda de literatura por su propiedades químicas..

Se seleccionó la planta para realizar suestudio.

Se confirmó la identificación botánica de la planta usada en las comunidades comparándola con datos de herbarios de plantas medicinales.

7.2 PREPARACIÓN DE EXTRACTOS. Extracto etanólico al 96 %

Los extractos se prepararon por maceración a partir del material seleccionado, utilizando como solvente de extracción etanol: agua (9:3) en una relación de 1 – 10 materia prima – solvente. Después del macerado por 7 dias, se procedió al filtrado con ayuda de filtro Micropor y se hasta 1/8 del volumen para obtener un extracto blando. Se determinó el porcentaje de sólidos totales en el extracto por método

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gravimétrico.

7.3 ACTIVIDAD BIOLÓGICA

7.3.1 ACTIVIDAD ANTIBACTERIANAS Preparación del inóculo. Se preparó como inóculo una suspensión bacteriana de un cultivo de 24 horas de crecimiento en caldo Triptic Soy Broth (T.S.B.) con una turbidez semejante al tuno Nº 4 de la escala de Mac Farland.Actividad de los extractos. Una vez preparada las placas, se procedió a la adición aséptica de los extractos a probar, se colocaron 100 microlitros de extracto en cada aforación. Se usó como blanco un solvente solución de ClNa (6.5%) medio ideal para bacterias de concentración semejante al la fase líquida del extracto. Incubación y lectura. Las cajas petri, se dejaron secar a temperatura ambiente. La incubación se realizo en una estufa de cultivo a 37 º centígrados por 24 hrs., al cabo de las cuales se realizaron las lecturas. Los halos de inhibición en colonias de Staphylococcus spp, o Enterococcus y Candida albicans(Hongo), se leyeron en milímetros desde el borde del orificio hasta la zona de total inhibición.

7.3.2 ACTIVIDAD ANTIFUNGICA

Se aislaron la candida Albicans a partir del tejido infectado de una persona diagnosticada con Candida Albicans de las zonas de estudio. Los hongos se incubaron en un medio de cultivo con agar sangre. La actividad se evaluó por las tasas de sobre vivencia (Reproducibilidad) del hongo en presencia de los extractos etanólicos de Cestrum Parqui L´Herit. No llevo el Proceso de comparación con agua porque No es estable los principios de del Andres Wuaylla

7.4 SCREENING FITOQUÍMICO

Se determinó la presencia de metabolitos secundarios en los extractos etanólicos de Cestrun Parqui L´Herit Cestrun Parqui L´Herit - Andres Wuaylla), Lampaya (Lampaya medicinalis F. Phil) wira wira (Pseudognaphalium viravira (Mol.) mediante ensayos de identificación cualitativa de Flavoniodes, Alcaloides, Saponinas y Taninos.(Bioquimica – FARMACIA UMSA Laboratorio de Productos Galenicos).

Los resultados del Secreening Fitoquímico de los extractos son los siguientes: Los metabolitos secundarios presentes en los extractos pueden tener las siguientes acciones farmacológicas relacionadas con el tratamiento de la Neumonías, problemas de

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Materia

prima

Alcaloides Flavonoides Saponinas Quinonas

Cestrun

Parqui L

´Herit

+++ +++ + +

piel bacteriano y fúngico e incluso parasitario como la Sarcoptosis: Taninos. Por vía externa impermeabilizan las capas de la piel y mucosas, tienen efecto vasoconstrictor, antimicrobiano, antifúngico y hemostáticos. Algunos alcaloidestienen actividad antiparasitaria. Los flavonoides presentan actividad biológica en los procesos antiinflamatorios y antialérgicos.

7.5 RESULTADOS Y DISCUSIÓN.-

7.5.1 CARACTERIZACIÓN DE EXTRACTOS.- Los extractos sometidos a desecación a peso constante presentaron los siguientes resultados:

Materia prima

Sólidos

Color pH

Densidad

Cestrun Parqui

12.52 Verde

6.1

Fuente: UMSS - ( PROFAC)

7.5.2 PRUEBAS IN VITRO

7.5.2.1 ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA

Los resultados preliminares presentaron actividad antibacteriana del extracto etanólico – Agua frente a la cepa Staphylococcus spp, Enterococcus dentro de la familia Gram positivos y actividad antifúngica frente a Candida albicans (ATCC 96934)

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El extracto también inhibe el crecimiento de Candida albicans (ATCC 96934)

7.5.2.2 ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA Y FUNGICA

Los extractos presentaron inhibición del crecimiento en cultivos in vitro basándonos en la técnica de Inmunodifusión de la siguiente Manera:

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TITULACION EN AGUA + SOLUCION FISIOLOGICA ½.-1/4 - 1/8

TITULACION EN ETANOL + SOLUCION FISIOLOGICA ½.-1/4 - 1/8

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14

15

7.5.2.3 COMPRACION ANTIBACTERIANA EN AGUA Y ETANOL

Los extractos presentaron inhibición del crecimiento en el cultivo de diferente manera:

1:1 titulación extractos etanol y agua hasta 1/8 Enterococcus: Agar con sangre Mueller Hilton Staphylococcus spp, Sin sangre Mueller Hilton

Control de calidad Promedio Siembra de 3 por cada Bacteria para cada extracto

8. CRONOGRAMAActividades

Primera Semana de Agosto

Segunda Semana de

Agosto

Tercera Semana de

Agosto

Cuarta Semana de Agosto

L M M J V S D L M M J V S D L M M J V S D L M M J V S D LSelección de Plantas Maceración

FILTRACIONTITULACIONLECTURA DE LOS HALOS DE INHIBICI

16

ON

PRESUPUESTO: SE UTILIZO 1850.70 BS

9. BIBLIOGRAFIA

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GRAFICAS

Etapa 1

Para Staphylococcus spp: Lampaya en Etanol

Madre Titulación 1/2 Titulación ¼ Titulación 1/818 mm 16 mm 13 mm 10 mm

Etapa 2

Para Staphylococcus spp: Lampaya en Etanol

Madre Titulación 1/2 Titulación ¼ Titulación 1/818 mm 16 mm 13 mm 12 mm

Etapa 3

Para Staphylococcus spp: Lampaya en Etanol

Madre Titulación 1/2 Titulación ¼ Titulación 1/818 mm 15 mm 12 mm 11 mm

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