takara minibest …cms.takara.co.kr/file/brochure/%b0%ed%c7%b0%c1%fa_dna... · 2017. 9. 18. ·...
TRANSCRIPT
대 전 지 사 042-828-6525 고 객 (제품문의) 02-2081-2510
지원센터 [email protected] (대전•충청지역 제품주문)
Mini, but BEST
- 사이즈는 Mini, Quality는 BEST! MiniBEST!
- 목적에 따라 추출부터 다르게~
- 高순도, 高효율의 핵산 추출 및 정제!
Takara MiniBEST 시리즈 고품질의 핵산(DNA, RNA) Purification Kit!
2
Results
With PrimeSTAR GXL polymerase, products up to 30 kb could be amplified from human genomic DNA, and
products up to 40 kb were efficiently amplified from lambda DNA (Figure 2, left and middle panels). In addition,
fragments up to 13.5 kb were obtained from cDNA (Figure 2, right panel).
III. Amplification of GC-Rich Targets The performance of PrimeSTAR GXL polymerase was compared to several other commercially available high-fideli-
ty polymerases and polymerases marketed as being optimized for use with GC-rich templates.
Methods
Fragments with high GC-content were amplified from either 100 ng of human genomic DNA (lanes 1 and 2) or
10 ng of T. thermophilus HB8 genomic DNA (lanes 3 and 4). All reactions were performed according to the proto-
col recommended by each manufacturer.
Results
Under the conditions used, only PrimeSTAR GXL polymerase yielded highly specific amplification of all of the
GC-rich targets tested (Figure 3).
Conclusions
PrimeSTAR GXL polymerase outperforms other enzymes and provides highly
specific amplification in a variety of challenging PCR scenarios (i.e., long range
PCR and amplification of GC-rich sequences). With PrimeSTAR GXL polymerase,
excellent PCR results can be obtained without the need for special buffers or modifications
to the reaction conditions.
Figure 2. Amplification of long targets using PrimeSTAR GXL polymerase. Amplicons of vary-ing lengths were amplified by PCR from either human gDNA (left), lambda DNA (middle), or synthesized cDNA (right). The expected size of each product is listed beneath the gel image. In all cases, lane M contains a λ-Hind III digest molecular size marker.
M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 MM 1 2 3 4 M
PrimeSTAR GXL Company A Company B
Company B.2 (for GC-rich) Company C
Company D (for GC-rich)
Figure 3. Amplification of GC-rich targets using PrimeSTAR GXL polymerase or enzymes from other manufacturers (Companies A, B, C, or D). The Company B.2 and Company D enzymes mar-keted as optimized for GC-rich templates. Amplicons of vary-ing GC-content were amplified from either human gDNA (lane 1, APOE, 74% GC; lane 2, TBFß1, 69% GC) or T. thermophilus HB8 gDNA (lane 3, 2029 bp, 74% GC; lane 4 4988 bp, 74% GC). Lane M contains a pHY molecular size marker.
1. 0.5 kb2. 1 kb3. 2 kb4. 4 kb5. 8 kb6. 15 kb7. 20 kb8. 30 kb9. 40 kb
1. TP53 0.5 kb2. DCLRE1A 1 kb3. DCLRE1A 2 kb4. DCLRE1A 4 kb5. Beta-globin 8.5 kb6. Beta-globin 15 kb7. Beta-globin 20 kb8. Beta-globin 24 kb9. Beta-globin 27 kb10. Beta-globin 30 kb
1. Dystrophin 1 kb2. Dystrophin 2 kb3. CCND2 2.8 kb4. TFR 4 kb5. Dystrophin 6 kb6. Dystrophin 8 kb7. Dystrophin 12 kb8. Dystrophin 13.5 kb
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 MM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M M 1 2 3 4 5 6 7 8 M
Human genomic DNA Lambda DNA cDNA
C l o n i n g , 고 효 율 의 정 제 가 필 요 합 니 다 .
좋은 Ligation kit만 쓴다고 cloning 결과가 뛰어나게 좋아질까요?
<高효율 Cloning의 핵심은 高효율 정제입니다>
Plasmid DNA 정제 TaKaRa MiniBEST Plasmid Purification Kit Ver.4.0 (9760A/B)
TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0 (9761A/B)
TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0 (9762A/B)
PCR 및 제한효소
처리 산물의 정제
Agarose gel로부터
목적 DNA 밴드만 정제
샘플에 따른 Takara MiniBEST 분류
다양한 샘플
Plant
Blood
Bacteria/
Virus
기타
Plasmid Purification Kit Ver.4.0 (9760A)DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0 (9761A)
Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0 (9762A)
Plasmid Purification
PCR Clean Up,
Gel DNA extraction
Plant Genomic DNA Extraction Kit (9768A)Plant RNA Extraction Kit (9769A)
Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit (9781A)
Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0 (9763A) Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver. 5.0 (9766A)
Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 (9765A)Universal RNA Extraction Kit (9767A)
2
III. Amplification of GC-Rich Targets The performance of PrimeSTAR GXL polymerase was compared to several other commercially available high-fideli-
ty polymerases and polymerases marketed as being optimized for use with GC-rich templates.
Methods
Fragments with high GC-content were amplified from either 100 ng of human genomic DNA (lanes 1 and 2) or
10 ng of T. thermophilus HB8 genomic DNA (lanes 3 and 4). All reactions were performed according to the proto-
col recommended by each manufacturer.
Results
Under the conditions used, only PrimeSTAR GXL polymerase yielded highly specific amplification of all of the
GC-rich targets tested (Figure 3).
Conclusions
PrimeSTAR GXL polymerase outperforms other enzymes and provides highly
specific amplification in a variety of challenging PCR scenarios (i.e., long range
PCR and amplification of GC-rich sequences). With PrimeSTAR GXL polymerase,
excellent PCR results can be obtained without the need for special buffers or modifications
to the reaction conditions.
Figure 2. Amplification of long targets using PrimeSTAR GXL polymerase. Amplicons of vary-ing lengths were amplified by PCR from either human gDNA (left), lambda DNA (middle), or synthesized cDNA (right). The expected size of each product is listed beneath the gel image. In all cases, lane M contains a λ-Hind III digest molecular size marker.
M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 MM 1 2 3 4 M
PrimeSTAR GXL Company A Company B
Company B.2 (for GC-rich) Company C
Company D (for GC-rich)
Figure 3. Amplification of GC-rich targets using PrimeSTAR GXL polymerase or enzymes from other manufacturers (Companies A, B, C, or D). The Company B.2 and Company D enzymes mar-keted as optimized for GC-rich templates. Amplicons of vary-ing GC-content were amplified from either human gDNA (lane 1, APOE, 74% GC; lane 2, TBFß1, 69% GC) or T. thermophilus HB8 gDNA (lane 3, 2029 bp, 74% GC; lane 4 4988 bp, 74% GC). Lane M contains a pHY molecular size marker.
1. 0.5 kb2. 1 kb3. 2 kb4. 4 kb5. 8 kb6. 15 kb7. 20 kb8. 30 kb9. 40 kb
1. TP53 0.5 kb2. DCLRE1A 1 kb3. DCLRE1A 2 kb4. DCLRE1A 4 kb5. Beta-globin 8.5 kb6. Beta-globin 15 kb7. Beta-globin 20 kb8. Beta-globin 24 kb9. Beta-globin 27 kb10. Beta-globin 30 kb
1. Dystrophin 1 kb2. Dystrophin 2 kb3. CCND2 2.8 kb4. TFR 4 kb5. Dystrophin 6 kb6. Dystrophin 8 kb7. Dystrophin 12 kb8. Dystrophin 13.5 kb
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 MM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M M 1 2 3 4 5 6 7 8 M
Human genomic DNA Lambda DNA cDNA
고 순 도 의 R N A 추 출 을 위 한 M i n i B E S T
C l o n i n g , 고 효 율 의 정 제 가 필 요 합 니 다 .
C l o n i n g , 고 효 율 의 정 제 가 필 요 합 니 다 .
2
III. Amplification of GC-Rich Targets The performance of PrimeSTAR GXL polymerase was compared to several other commercially available high-fideli-
ty polymerases and polymerases marketed as being optimized for use with GC-rich templates.
Methods
Fragments with high GC-content were amplified from either 100 ng of human genomic DNA (lanes 1 and 2) or
10 ng of T. thermophilus HB8 genomic DNA (lanes 3 and 4). All reactions were performed according to the proto-
col recommended by each manufacturer.
Results
Under the conditions used, only PrimeSTAR GXL polymerase yielded highly specific amplification of all of the
GC-rich targets tested (Figure 3).
Conclusions
PrimeSTAR GXL polymerase outperforms other enzymes and provides highly
specific amplification in a variety of challenging PCR scenarios (i.e., long range
PCR and amplification of GC-rich sequences). With PrimeSTAR GXL polymerase,
excellent PCR results can be obtained without the need for special buffers or modifications
to the reaction conditions.
Figure 2. Amplification of long targets using PrimeSTAR GXL polymerase. Amplicons of vary-ing lengths were amplified by PCR from either human gDNA (left), lambda DNA (middle), or synthesized cDNA (right). The expected size of each product is listed beneath the gel image. In all cases, lane M contains a λ-Hind III digest molecular size marker.
M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 MM 1 2 3 4 M
PrimeSTAR GXL Company A Company B
Company B.2 (for GC-rich) Company C
Company D (for GC-rich)
Figure 3. Amplification of GC-rich targets using PrimeSTAR GXL polymerase or enzymes from other manufacturers (Companies A, B, C, or D). The Company B.2 and Company D enzymes mar-keted as optimized for GC-rich templates. Amplicons of vary-ing GC-content were amplified from either human gDNA (lane 1, APOE, 74% GC; lane 2, TBFß1, 69% GC) or T. thermophilus HB8 gDNA (lane 3, 2029 bp, 74% GC; lane 4 4988 bp, 74% GC). Lane M contains a pHY molecular size marker.
1. 0.5 kb2. 1 kb3. 2 kb4. 4 kb5. 8 kb6. 15 kb7. 20 kb8. 30 kb9. 40 kb
1. TP53 0.5 kb2. DCLRE1A 1 kb3. DCLRE1A 2 kb4. DCLRE1A 4 kb5. Beta-globin 8.5 kb6. Beta-globin 15 kb7. Beta-globin 20 kb8. Beta-globin 24 kb9. Beta-globin 27 kb10. Beta-globin 30 kb
1. Dystrophin 1 kb2. Dystrophin 2 kb3. CCND2 2.8 kb4. TFR 4 kb5. Dystrophin 6 kb6. Dystrophin 8 kb7. Dystrophin 12 kb8. Dystrophin 13.5 kb
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 MM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M M 1 2 3 4 5 6 7 8 M
Human genomic DNA Lambda DNA cDNA
G e n o m i c D N A 추 출 을 위 한 M i n i B E S T
C l o n i n g , 고 효 율 의 정 제 가 필 요 합 니 다 .
C l o n i n g , 고 효 율 의 정 제 가 필 요 합 니 다 .
다양한 샘플로부터 최적의 조건으로 RNA 추출
<RNA 추출용 MiniBEST>
* TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit (9769A/B)는 polysaccaride나 polyphenol을 다량 함유한 식물로부터 고순도의 total RNA 추출에 최적이다.
다양한 샘플에서
RNA 추출 TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit (9767A/B)
TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit (9769A/B)*
TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0 (9766A/B)
식물 세포
또는 조직에서
Virus RNA/DNA
<Genomic DNA 추출용 MiniBEST>샘플이 다르면 추출 방법도 달라야 합니다. 각 샘플에 맞는 최적의 추출 솔루션
다양한 샘플에서
gDNA 추출
TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 (9765A/B)
TaKaRa MiniBEST Plant Genomic DNA Extraction Kit (9768A/B)
TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit (9781A/B)
TaKaRa MiniBEST Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0 (9763A/B)
식물 세포
또는 조직에서
Whole blood
Bacterial DNA
추출
➜
gDNA Eraser Spin Column 적용 효과 비교
1. RNA 2. RNA 3. gDNA
Homogenized materials
Washing 단계 후 TE 또는 dH2O로 elution
gDNA Eraser Spin
Column에 gDNA가
binding됨
RNA Spin Column에
RNA가 binding됨
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
M1 ： DNA Marker
1 ： gDNA Eraser Spin Column 처리없이 정제한 RNA
2 ： gDNA Eraser Spin Column 처리한 정제된 RNA
3 ： gDNA Eraser Spin Column에 추출된 gDNA
M2 ： λ-Hind III DNA Marker
gDNA 함량이 높은 샘플에서 RNA 추출시 gDNA Eraser
Spin Column으로 gDNA를 효과적으로 제거하였다.
또한 gDNA Eraser Spin Column으로 소량의 gDNA가
추출된 것을 확인했다.
gDNA
M1 1 1 2 2 3 3 M2
• gDNA Eraser Spin Column을 이용하여 genomic DNA(gDNA) 제거!
• 배양세포나 동/식물 조직으로부터 고순도 total RNA를 20분만에 신속하게 추출
하나의 kit로 다양한 샘플에서 genomic DNA 추출가능!
TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 (9765A)
Plant sample
Gram (-)bacteria
Animal sample
BloodMammalian
cell
7
TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNAExtraction Kit Ver.5.0
Cat. #9765v201306Da
URL:http://www.takara-bio.com
1% Agarose gel electrophoresis
M: λ-Hind III digest1: Spinach genomic DNA2: Crown daisy genomic DNA3: Rape genomic DNA4: Chinese white cabbage genomic DNA
VI. Experimental Examples
Example1 : Purification of Genomic DNA from Mammalian TissuesAbout 15 μg of high-purity genomic DNA was extracted from 25 mg of mouse liver tis-sue. 10 μg of high-purity genomic DNA has been extracted from 1.2 cm of mouse tail tip, respectively (Fig. 1).
Fig. 1 Electrophoresis of Genomic DNA from mammalian tissues
Example 2 : Purification of Genomic DNA from Plant TissuesAbout 2.5 μg, 1.5 μg, 3 μg and 2 μg of highly purified genomic DNA was extracted from 25 mg of spinach, rape, crown daisy Chrysanthemum, and Chinese white cabbage, respectively (Fig. 2).
Fig. 2 Electrophoresis of Genomic DNA from plant tissues
1% Agarose gel electrophoresis
M: λ-Hind III digest 1: Fish whole blood genomic DNA2: Horse whole blood genomic DNA
Example 3 : Purification of Genomic DNA from Whole BloodAbout 12 μg and 2 μg of high-purity genomic DNA was extracted from 5 μl of fish whole blood (containing EDTA anticoagulant) and 200 μl of horse whole blood (contain-ing EDTA anticoagulant), respectively (Fig. 3).
M 1 M 2
Fig. 3 Electrophoresis of Genomic DNA from whole blood
1% Agarose gel electrophoresis
M: λ-Hind lll digest1: Mouse liver genomic DNA2: Mouse tail tip genomic DNA
M 1 M 2
1 2 3 4M
M ： λ-HindIII DNA marker
1 ： Mouse liver genomic DNA
2 ： Genomic DNA purified from HL60 culture cells
Purification of gDNA from mammalian tissues & cells
TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit (9767A)
RNA 추출의 가장 큰 걸림돌? Genomic DNA 혼입으로 인한 RNA 순도(purity) 저하는 실험 결과에 큰 영향을 줄 수 있다.
Universal
2
III. Amplification of GC-Rich Targets The performance of PrimeSTAR GXL polymerase was compared to several other commercially available high-fideli-
ty polymerases and polymerases marketed as being optimized for use with GC-rich templates.
Methods
Fragments with high GC-content were amplified from either 100 ng of human genomic DNA (lanes 1 and 2) or
10 ng of T. thermophilus HB8 genomic DNA (lanes 3 and 4). All reactions were performed according to the proto-
col recommended by each manufacturer.
Results
Under the conditions used, only PrimeSTAR GXL polymerase yielded highly specific amplification of all of the
GC-rich targets tested (Figure 3).
Conclusions
PrimeSTAR GXL polymerase outperforms other enzymes and provides highly
specific amplification in a variety of challenging PCR scenarios (i.e., long range
PCR and amplification of GC-rich sequences). With PrimeSTAR GXL polymerase,
excellent PCR results can be obtained without the need for special buffers or modifications
to the reaction conditions.
Figure 2. Amplification of long targets using PrimeSTAR GXL polymerase. Amplicons of vary-ing lengths were amplified by PCR from either human gDNA (left), lambda DNA (middle), or synthesized cDNA (right). The expected size of each product is listed beneath the gel image. In all cases, lane M contains a λ-Hind III digest molecular size marker.
M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 MM 1 2 3 4 M
PrimeSTAR GXL Company A Company B
Company B.2 (for GC-rich) Company C
Company D (for GC-rich)
Figure 3. Amplification of GC-rich targets using PrimeSTAR GXL polymerase or enzymes from other manufacturers (Companies A, B, C, or D). The Company B.2 and Company D enzymes mar-keted as optimized for GC-rich templates. Amplicons of vary-ing GC-content were amplified from either human gDNA (lane 1, APOE, 74% GC; lane 2, TBFß1, 69% GC) or T. thermophilus HB8 gDNA (lane 3, 2029 bp, 74% GC; lane 4 4988 bp, 74% GC). Lane M contains a pHY molecular size marker.
1. 0.5 kb2. 1 kb3. 2 kb4. 4 kb5. 8 kb6. 15 kb7. 20 kb8. 30 kb9. 40 kb
1. TP53 0.5 kb2. DCLRE1A 1 kb3. DCLRE1A 2 kb4. DCLRE1A 4 kb5. Beta-globin 8.5 kb6. Beta-globin 15 kb7. Beta-globin 20 kb8. Beta-globin 24 kb9. Beta-globin 27 kb10. Beta-globin 30 kb
1. Dystrophin 1 kb2. Dystrophin 2 kb3. CCND2 2.8 kb4. TFR 4 kb5. Dystrophin 6 kb6. Dystrophin 8 kb7. Dystrophin 12 kb8. Dystrophin 13.5 kb
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 MM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M M 1 2 3 4 5 6 7 8 M
Human genomic DNA Lambda DNA cDNA
고 순 도 의 R N A 추 출 을 위 한 M i n i B E S T
C l o n i n g , 고 효 율 의 정 제 가 필 요 합 니 다 .
C l o n i n g , 고 효 율 의 정 제 가 필 요 합 니 다 .
2
III. Amplification of GC-Rich Targets The performance of PrimeSTAR GXL polymerase was compared to several other commercially available high-fideli-
ty polymerases and polymerases marketed as being optimized for use with GC-rich templates.
Methods
Fragments with high GC-content were amplified from either 100 ng of human genomic DNA (lanes 1 and 2) or
10 ng of T. thermophilus HB8 genomic DNA (lanes 3 and 4). All reactions were performed according to the proto-
col recommended by each manufacturer.
Results
Under the conditions used, only PrimeSTAR GXL polymerase yielded highly specific amplification of all of the
GC-rich targets tested (Figure 3).
Conclusions
PrimeSTAR GXL polymerase outperforms other enzymes and provides highly
specific amplification in a variety of challenging PCR scenarios (i.e., long range
PCR and amplification of GC-rich sequences). With PrimeSTAR GXL polymerase,
excellent PCR results can be obtained without the need for special buffers or modifications
to the reaction conditions.
Figure 2. Amplification of long targets using PrimeSTAR GXL polymerase. Amplicons of vary-ing lengths were amplified by PCR from either human gDNA (left), lambda DNA (middle), or synthesized cDNA (right). The expected size of each product is listed beneath the gel image. In all cases, lane M contains a λ-Hind III digest molecular size marker.
M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 MM 1 2 3 4 M
PrimeSTAR GXL Company A Company B
Company B.2 (for GC-rich) Company C
Company D (for GC-rich)
Figure 3. Amplification of GC-rich targets using PrimeSTAR GXL polymerase or enzymes from other manufacturers (Companies A, B, C, or D). The Company B.2 and Company D enzymes mar-keted as optimized for GC-rich templates. Amplicons of vary-ing GC-content were amplified from either human gDNA (lane 1, APOE, 74% GC; lane 2, TBFß1, 69% GC) or T. thermophilus HB8 gDNA (lane 3, 2029 bp, 74% GC; lane 4 4988 bp, 74% GC). Lane M contains a pHY molecular size marker.
1. 0.5 kb2. 1 kb3. 2 kb4. 4 kb5. 8 kb6. 15 kb7. 20 kb8. 30 kb9. 40 kb
1. TP53 0.5 kb2. DCLRE1A 1 kb3. DCLRE1A 2 kb4. DCLRE1A 4 kb5. Beta-globin 8.5 kb6. Beta-globin 15 kb7. Beta-globin 20 kb8. Beta-globin 24 kb9. Beta-globin 27 kb10. Beta-globin 30 kb
1. Dystrophin 1 kb2. Dystrophin 2 kb3. CCND2 2.8 kb4. TFR 4 kb5. Dystrophin 6 kb6. Dystrophin 8 kb7. Dystrophin 12 kb8. Dystrophin 13.5 kb
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 MM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M M 1 2 3 4 5 6 7 8 M
Human genomic DNA Lambda DNA cDNA
G e n o m i c D N A 추 출 을 위 한 M i n i B E S T
C l o n i n g , 고 효 율 의 정 제 가 필 요 합 니 다 .
C l o n i n g , 고 효 율 의 정 제 가 필 요 합 니 다 .
다양한 샘플로부터 최적의 조건으로 RNA 추출
<RNA 추출용 MiniBEST>
* TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit (9769A/B)는 polysaccaride나 polyphenol을 다량 함유한 식물로부터 고순도의 total RNA 추출에 최적이다.
다양한 샘플에서
RNA 추출 TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit (9767A/B)
TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit (9769A/B)*
TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0 (9766A/B)
식물 세포
또는 조직에서
Virus RNA/DNA
<Genomic DNA 추출용 MiniBEST>샘플이 다르면 추출 방법도 달라야 합니다. 각 샘플에 맞는 최적의 추출 솔루션
다양한 샘플에서
gDNA 추출
TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 (9765A/B)
TaKaRa MiniBEST Plant Genomic DNA Extraction Kit (9768A/B)
TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit (9781A/B)
TaKaRa MiniBEST Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0 (9763A/B)
식물 세포
또는 조직에서
Whole blood
Bacterial DNA
추출
➜
gDNA Eraser Spin Column 적용 효과 비교
1. RNA 2. RNA 3. gDNA
Homogenized materials
Washing 단계 후 TE 또는 dH2O로 elution
gDNA Eraser Spin
Column에 gDNA가
binding됨
RNA Spin Column에
RNA가 binding됨
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
2RNA精製ガイド（マッハライ・ナーゲル社製品）
製品名 容量 製品コード （ 別）
NucleoSpin® RNA II10回
50回
250回
740955.10
740955.50
740955.250
¥8,000
¥31,800
¥136,800
NucleoSpin® RNA II細胞·組織などからのtotal RNA 調製〈簡 ·便利な高品質オールインワンキット〉
● NucleoSpin ® Filter （シュレッダ〡） を添付
ライセートの 澄化と 減で目詰まりを防止
● バッファ〡を添付 シリカメンブレンの によりDNase 理を 率アップ
● ゲノムDNA除去用rDNase I を添付 カラム上で簡便にDNase 理を 施
● そのままRT-PCRに 適用可能 高純度のtotal RNA調製が可能
■製品リスト
高純度（高RIN値）·高濃度のRNA調製 が可能
■製品仕シリカメンブレン法、ミニスピンカラム
培養細胞 ： ～5×1 06 cells、バクテリア： ～109 cells酵母 ： ～10 8 cells、動物組織： ～30 mg
200 上
14 μg（10 6 個 HeLa細胞）、70 μg（10 9 個バクテリア）
1. 9～2. 1
＞9
40～120 μl
30分
200 μg
原理、形
サンプル量
精製サイズ
量の目安
A260/280
標準的RIN
溶出液量
精製時間
結合容量
〈NucleoSpin ® RNAの操作 フロ〡〉
溶解
NucleoSpin ® Filte rによるライセ〡トの
化と粘度低減
MDB※ -洗（※Membrane Desolting Buffer）
オンカラムでDNase 理（ ）
洗
結合
RT-PCR, Northern blotting, array technology, RNase protection assays, primer extension
● そのままリアルタイムRT-PCR に
Agilent2100バイオアナライザによる解析結果例NucleoSpi n® RNA IIを用いてHeLa細胞から調製したtotal RNARIN値＝9.9
M1 ： DNA Marker
1 ： gDNA Eraser Spin Column 처리없이 정제한 RNA
2 ： gDNA Eraser Spin Column 처리한 정제된 RNA
3 ： gDNA Eraser Spin Column에 추출된 gDNA
M2 ： λ-Hind III DNA Marker
gDNA 함량이 높은 샘플에서 RNA 추출시 gDNA Eraser
Spin Column으로 gDNA를 효과적으로 제거하였다.
또한 gDNA Eraser Spin Column으로 소량의 gDNA가
추출된 것을 확인했다.
gDNA
M1 1 1 2 2 3 3 M2
• gDNA Eraser Spin Column을 이용하여 genomic DNA(gDNA) 제거!
• 배양세포나 동/식물 조직으로부터 고순도 total RNA를 20분만에 신속하게 추출
하나의 kit로 다양한 샘플에서 genomic DNA 추출가능!
TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 (9765A)
Plant sample
Gram (-)bacteria
Animal sample
BloodMammalian
cell
7
TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNAExtraction Kit Ver.5.0
Cat. #9765v201306Da
URL:http://www.takara-bio.com
1% Agarose gel electrophoresis
M: λ-Hind III digest1: Spinach genomic DNA2: Crown daisy genomic DNA3: Rape genomic DNA4: Chinese white cabbage genomic DNA
VI. Experimental Examples
Example1 : Purification of Genomic DNA from Mammalian TissuesAbout 15 μg of high-purity genomic DNA was extracted from 25 mg of mouse liver tis-sue. 10 μg of high-purity genomic DNA has been extracted from 1.2 cm of mouse tail tip, respectively (Fig. 1).
Fig. 1 Electrophoresis of Genomic DNA from mammalian tissues
Example 2 : Purification of Genomic DNA from Plant TissuesAbout 2.5 μg, 1.5 μg, 3 μg and 2 μg of highly purified genomic DNA was extracted from 25 mg of spinach, rape, crown daisy Chrysanthemum, and Chinese white cabbage, respectively (Fig. 2).
Fig. 2 Electrophoresis of Genomic DNA from plant tissues
1% Agarose gel electrophoresis
M: λ-Hind III digest 1: Fish whole blood genomic DNA2: Horse whole blood genomic DNA
Example 3 : Purification of Genomic DNA from Whole BloodAbout 12 μg and 2 μg of high-purity genomic DNA was extracted from 5 μl of fish whole blood (containing EDTA anticoagulant) and 200 μl of horse whole blood (contain-ing EDTA anticoagulant), respectively (Fig. 3).
M 1 M 2
Fig. 3 Electrophoresis of Genomic DNA from whole blood
1% Agarose gel electrophoresis
M: λ-Hind lll digest1: Mouse liver genomic DNA2: Mouse tail tip genomic DNA
M 1 M 2
1 2 3 4M
M ： λ-HindIII DNA marker
1 ： Mouse liver genomic DNA
2 ： Genomic DNA purified from HL60 culture cells
Purification of gDNA from mammalian tissues & cells
TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit (9767A)
RNA 추출의 가장 큰 걸림돌? Genomic DNA 혼입으로 인한 RNA 순도(purity) 저하는 실험 결과에 큰 영향을 줄 수 있다.
Universal
대 전 지 사 042-828-6525 고 객 (제품문의) 02-2081-2510
지원센터 [email protected] (대전•충청지역 제품주문)
Mini, but BEST
- 사이즈는 Mini, Quality는 BEST! MiniBEST!
- 목적에 따라 추출부터 다르게~
- 高순도, 高효율의 핵산 추출 및 정제!
Takara MiniBEST 시리즈 고품질의 핵산(DNA, RNA) Purification Kit!
2
Results
With PrimeSTAR GXL polymerase, products up to 30 kb could be amplified from human genomic DNA, and
products up to 40 kb were efficiently amplified from lambda DNA (Figure 2, left and middle panels). In addition,
fragments up to 13.5 kb were obtained from cDNA (Figure 2, right panel).
III. Amplification of GC-Rich Targets The performance of PrimeSTAR GXL polymerase was compared to several other commercially available high-fideli-
ty polymerases and polymerases marketed as being optimized for use with GC-rich templates.
Methods
Fragments with high GC-content were amplified from either 100 ng of human genomic DNA (lanes 1 and 2) or
10 ng of T. thermophilus HB8 genomic DNA (lanes 3 and 4). All reactions were performed according to the proto-
col recommended by each manufacturer.
Results
Under the conditions used, only PrimeSTAR GXL polymerase yielded highly specific amplification of all of the
GC-rich targets tested (Figure 3).
Conclusions
PrimeSTAR GXL polymerase outperforms other enzymes and provides highly
specific amplification in a variety of challenging PCR scenarios (i.e., long range
PCR and amplification of GC-rich sequences). With PrimeSTAR GXL polymerase,
excellent PCR results can be obtained without the need for special buffers or modifications
to the reaction conditions.
Figure 2. Amplification of long targets using PrimeSTAR GXL polymerase. Amplicons of vary-ing lengths were amplified by PCR from either human gDNA (left), lambda DNA (middle), or synthesized cDNA (right). The expected size of each product is listed beneath the gel image. In all cases, lane M contains a λ-Hind III digest molecular size marker.
M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 MM 1 2 3 4 M
PrimeSTAR GXL Company A Company B
Company B.2 (for GC-rich) Company C
Company D (for GC-rich)
Figure 3. Amplification of GC-rich targets using PrimeSTAR GXL polymerase or enzymes from other manufacturers (Companies A, B, C, or D). The Company B.2 and Company D enzymes mar-keted as optimized for GC-rich templates. Amplicons of vary-ing GC-content were amplified from either human gDNA (lane 1, APOE, 74% GC; lane 2, TBFß1, 69% GC) or T. thermophilus HB8 gDNA (lane 3, 2029 bp, 74% GC; lane 4 4988 bp, 74% GC). Lane M contains a pHY molecular size marker.
1. 0.5 kb2. 1 kb3. 2 kb4. 4 kb5. 8 kb6. 15 kb7. 20 kb8. 30 kb9. 40 kb
1. TP53 0.5 kb2. DCLRE1A 1 kb3. DCLRE1A 2 kb4. DCLRE1A 4 kb5. Beta-globin 8.5 kb6. Beta-globin 15 kb7. Beta-globin 20 kb8. Beta-globin 24 kb9. Beta-globin 27 kb10. Beta-globin 30 kb
1. Dystrophin 1 kb2. Dystrophin 2 kb3. CCND2 2.8 kb4. TFR 4 kb5. Dystrophin 6 kb6. Dystrophin 8 kb7. Dystrophin 12 kb8. Dystrophin 13.5 kb
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 MM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M M 1 2 3 4 5 6 7 8 M
Human genomic DNA Lambda DNA cDNA
C l o n i n g , 고 효 율 의 정 제 가 필 요 합 니 다 .
좋은 Ligation kit만 쓴다고 cloning 결과가 뛰어나게 좋아질까요?
<高효율 Cloning의 핵심은 高효율 정제입니다>
Plasmid DNA 정제 TaKaRa MiniBEST Plasmid Purification Kit Ver.4.0 (9760A/B)
TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0 (9761A/B)
TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0 (9762A/B)
PCR 및 제한효소
처리 산물의 정제
Agarose gel로부터
목적 DNA 밴드만 정제
샘플에 따른 Takara MiniBEST 분류
다양한 샘플
Plant
Blood
Bacteria/
Virus
기타
Plasmid Purification Kit Ver.4.0 (9760A)DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0 (9761A)
Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0 (9762A)
Plasmid Purification
PCR Clean Up,
Gel DNA extraction
Plant Genomic DNA Extraction Kit (9768A)Plant RNA Extraction Kit (9769A)
Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit (9781A)
Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0 (9763A) Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver. 5.0 (9766A)
Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 (9765A)Universal RNA Extraction Kit (9767A)