teori dasar kromatografi
TRANSCRIPT
![Page 1: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/1.jpg)
![Page 2: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/2.jpg)
The Plate Theory (Martin & Synge, 1941) Kolom terdiri dari irisan/lempeng tipis yg dikenal sebagai
HETP (Height Equivalent to Theorytical Plate) disingkat sebagai H (tinggi kolom teoritis)
H = L/N τ = σ L/tR H = σ2/L, dimana L= panjang kolom, N = jumlah lempeng pd kolom (diadopsi dari teori kolom
distilasi)
![Page 3: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/3.jpg)
N = ( tR/ σ )2 , karena W = 4 σ , maka :
N = 16 (tR/Wb)2 = 5,54 (tR/ W1/2 )2………(14)
tR
tmW1/2
tR > → N > , H <
Wb < → N > , H <
N >> sangat efisien dan kromatogram akan ramping dan tidak melebar (kolom efisien)H = L Wb2 / 16 tR
2
Pemisahan terjadi dari lempeng ke lempeng dalam kolom, semakin banyak N maka pemisahan semakin baik
W = 4 σ
![Page 4: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/4.jpg)
Kromatogram diasumsikan sbg kurva Gaussian , pd daerah 96% : μ±2σ, W=4τ,
τ = σ L/tR
Neff = N ( -------- )2
k’ = ----------- = ------
k’
k’ + 1
tR - tm
tM
tR’
tM
![Page 5: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/5.jpg)
Saat maksimum dicapai pada kurva elusi Gaussian, akan berlaku
VR = VM + KVS
di mana VR = Volume retensi, VM = Volume mati (the volume of chromatographic column that is not occupied by the solid support and stationary phase), VS = volume total fase diam dalam kolom,
K = koefisien partisi solut dalam sistem kromatografi.
Tiga asumsi yang harus dipenuhi dalam teori lempeng ini:
a. Keadaan kesetimbangan tercapai dalam sistem yang berkesinambungan.
b. Semua solut dalam sampel berada pada lempeng pertama (N = 0) pada saat awal pengembangan/elusi
c. Partisi isoterm bersifat linier dimana K harus konstan.
![Page 6: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/6.jpg)
Menggambarkan proses perebakan zona (zone broadening process) dimana lebar kromatogram dianggap sama dg 4 σ dan σ akan meningkat dengan meningkatnya akar dua dari jarak migrasi.
Persamaan Van Deemter :
H=A+B/μ +C μ …… (15)
dimana H = tinggi lempeng dan μ = laju fase gerak dalam kolom, A,B dan C = tetapan-tetapan yang akan mempengaruhi H
Teori ini dikembangkan dari random-walk model dari Gidding H = σ2/L
![Page 7: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/7.jpg)
Teori ini mengidentifikasi faktor yg berpengaruh pada pelebaran kromatogram :
Faktor pertama A disebabkan oleh difusi Eddy atau pencampuran konvektif yang dipengaruhi oleh neka alur. Hed = σ2
ed/L = 2 λ dp.L/L= 2 λ dp
dimana dp = diameter partikel fase padat dalam kolom, λ = faktor pengepakan (tergantung pada rentang ukuran partikel pada saat pengepakan, 1 (partikel kecil <50), dst.
A = 2 λ dp
![Page 8: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/8.jpg)
Faktor B dipengaruhi oleh difusi molekul longitudinal:Hlmd = σ2
lmd/L = 2γDMtM/L =2 γ DM/µ dimana µ = kecepatan linier rata-rata
aliran fase gerak, DM = koefisien difusi solut dalam fase gerak, dan γ = faktor obstruksi kolom terhadap difusi bebas, 0,7 untuk partikel kaca, dst.
B = 2 γ DM Faktor C dipengaruhi oleh tahanan
terhadap alih massa pada fase diam dan fase gerak. Hmts = σ2
mts/L + σ2mtm/L = 1/6 dp µ/DM
C = 1/6 dp /DM
![Page 9: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/9.jpg)
H
Hmin
μops
H=A + B/μ + C.μ
C.μ
B/μA
μ
Hmin = A + 2 √ BC
μops = √ B/C
A = 2λ dp , B = 2γ DM , C = 1/6 dp/DM
![Page 10: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/10.jpg)
![Page 11: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/11.jpg)
Jika H dirajah terhadap μ maka C = Cm+Cs
Hasil diferensial pers.Van Deemter :dH/dμ = - B/μ2 + C ……(16)
Pers (2) hrs = 0 utk mencapai μ optimal sehingga 0 = - B/μ2 + C,
maka μops = √B/C ….(17) Utk menghitung Hmin , pers (3)
dimasukkan ke pers (1) sehingga : Hmin = A + 2 √B/C ……(18)
![Page 12: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/12.jpg)
Buat kromatogram utk suatu puncak yg menggunakan 3 laju fase gerak yg berbeda. Diperoleh H1 utk μ1, H2 utk μ2 dan H3 utk μ3, yg ditentukan dari rumus
H = L/N = L/{16 (W/tR)2 } , L=panjang kolom Buat 3 pers.van Deemter utk ketiga H tadi, dgn μ yg
telah diketahui (ditentukan dari awal)H1 = A+B/μ1+C.μ1 ,
H2 = A+B/μ2+C.μ2
H3 = A+B/μ3+C.μ3 Hitunglah harga A,B dan C dari ketiga pers.tsbCatatan : Perhitungan ini hanya untuk berlaku utk
KG
![Page 13: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/13.jpg)
Rajah persamaan Van Deemter utk kromatografi gas dan cair :
H (mm)Krom Gas
Krom Cair
μ = cm . S-1
![Page 14: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/14.jpg)
Pada KG dan KC keduanya menunjukkan harga Hmin pada μops
Dibawah μops harga H sngt bergantung pada efek difusi (suku B) , sedangkan diatas μops , H dipengaruhi oleh tahanan alih masa (suku C)
Pada KC kenaikan H oleh pengaruh μ tidak sedrastis KG. Efisiensi kolom (Hmin) terlihat pada laju fase gerak yg rendah, jadi KC membutuhkan wkt pemisahan yg lebih lama dibandingkan KG.
Laju fase gerak (laju alir) tdk penting dlm menentukan Hmin atau efisiensi kolom N
Laju fase gerak yg tinggi tdk banyak mempengaruhi H
![Page 15: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/15.jpg)
WT 2 =WB 2 + WA 2
dimana
WT adalah lebar puncak yg teramati (dinatakan sebagai volume)
WB = pelebaran puncak oleh kolom
WA = pelebaran ekstra kolom
Sehingga WT > WB
![Page 16: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/16.jpg)
Migrasi solut melalui kolom dipengaruhi oleh distribusi spesi solut dlm fase diam dan fase gerak
Retensi dikendalikan oleh faktor yang mempengaruhi distribusi :› Komposisi fase gerak› Sifat alami fase diam› Suhu› Tekanan (secara teori tekanan mempengaruhi
distribusi solut dalam KG)
![Page 17: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/17.jpg)
Pada KG fase gerak tdk turut dlm pemisahan, hanya sbg pembawa solut berbentuk gas melalui kolom
Pada KC komposisi dan sifat fase geraklah yg mengendalikan pemisahan
Faktor yg mempengaruhi retensi dapat dipelajari melalui interaksi yg terlibat antara solut dengan fase diam dan fase gerak selama pemisahan
KROMATOGRAFI
![Page 18: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/18.jpg)
Fase gerak hanya pembawa saja, maka retensi/migrasi dikendalikan oleh interaksi antara solut dgn fase diam
Prinsip “like has an affinity for like” Utk Fase diam tidak polar : interaksi
yg terjadi adalah jenis “daya dispersi London”, atau gaya van der Waals, tidak ada interaksi coulombik (ionik), dipolar atau dipolar terinduksi
Utk Fase diam polar : interaksi dipol-dipol
![Page 19: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/19.jpg)
Molekul solut yg tidak polar akan ditahan secara kuat dibandingkan dengan mol solut yg polar. Molekul polar akan terelusi lebih awal (migrasinya cepat). Solut tidak polar akan terelusi lambat karena diretensi secara kuat
Perbedaan dlm daya dispersi terlihat pada titik didih (tekanan uap) komponen campuran yg akan dipisahkan. Dua jenis solut (polar dan tidak polar) akan terpisahkan dimana yg titik didih rendah (tek.uap tinggi) akan terelusi lebih awal dibandingkan solut yg titik didihnya lebih tinggi
Urutan elusi : retensi lemah – retensi sedang – retensi kuat
![Page 20: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/20.jpg)
Afinitas yg sangat besar akan diperlihatkan oleh molekul solut yg polar karena interaksi dipol-dipol, oleh karena itu molekul yg polar akan terelusi lambat (retensi kuat) dan molekul yg tidak polar akan terelusi lebih cepat
Molekul yg dapat terpolarisasi dpt memunculkan intraksi dipol-dipol terinduksi dan retensinya akan tergantung pada derajat interaksi yg muncul
titik didih kurang berpengaruh thp retensi dibandingkan dgn interaksi polar-polar
![Page 21: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/21.jpg)
Misalnya : metanol (lebih polar), dietileter (kurang polar) dan metil asetat (tidak polar) disuntikkan ke dalam sistem KG dengan fase diam skualan (tidak polar, hidrokarbon), maka hasilnya sbb:
1
2
3
1. Metanol
2. Dietileter
3. Metil asetatresp
on
Waktu (menit)
KROMATOGRAFI
![Page 22: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/22.jpg)
Skualan bersifat non-polar maka urutan elusi : metanol – dietileter – metil asetat
Metanol bersifat polar walaupun td=65º C (paling tinggi) tidak ditahan krn afinitasnya kecil thp skualan, jadi terelusi lebih awal
Dietileter td=36ºC dan kurang polar terelusi kemudian, dan metil asetat td=57ºC terelusi terakhir karena dietil eter lebih mudah volatil
KROMATOGRAFI
![Page 23: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/23.jpg)
Bila kolom yg digunakan adalah PEG (polar) maka urutan elusinya adalah : (1) dietileter – (2) metilasetat – (3) metanol
1
23
menit
resp
on
![Page 24: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/24.jpg)
Volatilitas adalah ratio antara fraksi mol komponen dalam bentuk uap terhadap fraksi mol dalam bentuk cairannya.
volatilitas A = [XA]vap/[XA]liq = pA/[XA]liq = poA
dimana poA adalah tekanan uap dari A murni
Volatilitas relatif campuran biner A dan B: volatilitas relatif = volatilitas A/volatilitas B α = po
A/poB
Persamaan Clausius-Clapeyron merupakan persamaan dasar Kromatografi Gas:
log [poA/po
B] = -[∆Hvap/2,3R][(1/TA) – (1/TB)]
![Page 25: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/25.jpg)
Ada 3 jenis interaksi :
Agar terpisah dgn baik, ketiga jenis interaksi tsb harus dioptimasi
Suatu solut dpt melewati kolom (fase diam) bila larut dlm fase gerak. Bila interaksi solut dgn fase gerak sangat kuat maka akan sedikit atau tdk ada yg diretensi oleh fase diam. Demikian sebaliknya
Solut
Fase diam Fase gerak
![Page 26: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/26.jpg)
Interaksi fase diam dan fase gerak umumnya tdk kuat. Jika fase diam melarut dalam fase gerak akan menimbulkan masalah. Cara mengatasinya : fase diam dibuat terikat secara kimia (BPC)
Interaksi fase diam-gerak diperlukan jika fase gerak mengandung molekul atau ion yg akan ditahan oleh fase diam, dgn cara membentuk fase diam sekunder yg selektif dalam pemisahan, misalnya pada krom.pas ion dan krom.kompleks liganda
Utk mengendalikan interaksi fase diam-gerak, perlu pengaturan komposisi fase gerak daripada mengubah sifat alamiah fase diam melalui elusi isokratik atau landaian
KROMATOGRAFI
![Page 27: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/27.jpg)
Utk suatu analit :
Log k’2/k’1 = ½ (P’1 – P’2)
Fase Normal
Fase Balik
Fase diam: polar
Fase gerak: kurang polar
Fase diam:kurang polar
Fase gerak: polar
Utk suatu analit :
Log k’2/k’1 = ½ (P’2 – P’1)
k’B < k’A, tRB < tRA
k’A > k’B, tRA > tRB
![Page 28: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/28.jpg)
Faktor retensi (k’) didefinisikan sebagai: k’ = (tR – tM)/tM dan tR = (k’ + 1)tM
Indeks polaritas campuran pelarut (P’AB) didefinisikan sebagai:
P’AB = φAP’A + φBP’B
Perubahan polaritas fase gerak terhadap faktor retensi adalah:
1. KFN log (k’2/k’1) = ½( P’1 – P’2)
2. KFB log (k’2/k’1) = ½( P’2 – P’1)
![Page 29: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/29.jpg)
Pengaruh pH fase gerak terhadap k’:1. Senyawa Asam (ionisable): k’app = k’/(1 + 10(pH - pKa))
2. Senyawa Basa (ionisable): k’app = k’/(1 + 10(pKa – pH))
dimana k’app adalah faktor retensi k’ pada pH yang dimaksud.
![Page 30: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/30.jpg)
Pemisahan yg bermutu baik berkaitan dgn kompromi antara daya pisah kromatografi (resolusi), waktu pemisahan dari banyaknya sampel yg akan dianalisis
Jenis profil kromatogram ada beberapa macam :› Simetris, dasar puncak sempit› Simetris, dasar puncak lebar› Tidak simetris
![Page 31: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/31.jpg)
W
Simetris, dasar puncak sempit
Simetris, dasar puncak lebar
Tidak simetris
12
W1
W2
![Page 32: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/32.jpg)
Gambar/profil kromatogram tergantung pada : › Kualitas fase diam› Komposisi dan polaritas fase gerak› Suhu› Solut (konsentrasi, kasaman/kebasaan)
Kualitas kromatogram tergantung pada : › Tinggi puncak› Lebar dasar puncak (diameter bercak)› Kesimetrisan
![Page 33: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/33.jpg)
Resolusi = daya pisah dua puncak/bercak dapat diukur secara kuantitatif dari kromatogram yang diperoleh
Wa Wb
A B
Rs = tRB – tRA / ½ (WB+WA)
= 2 (tRB – tRA ) /(WB+WA)
tRA
tRB
tm
![Page 34: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/34.jpg)
Rs > 1 jika 2(Δ tR) > (WA + WB)……(a)
Rs < 1 jika 2(ΔtR) < (WA + WB)…….(b)
ΔtR
WA WB
….(a)
…(b)
![Page 35: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/35.jpg)
![Page 36: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/36.jpg)
Rs dipengaruhi oleh jarak antara kedua pusat bercak dan diameter bercak
Rs = 2(Zi-Zii)/(bi+bii)
= 2ΔZ /(bi+bii)
Pada sistem A :
Rs>1 karena 2ΔZ > (bi+bii)
Pada sistem B :
Rs<1 karena 2ΔZ < (bi+bii)
![Page 37: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/37.jpg)
Selektifitas (daya pilih kolom) merupakan fungsi termodinamika proses pemisahan, yang dapat diukur dengan waktu retensi relatif :
α = tR2 – tm / tR1 – tm = t’R2 / t’R1 = k’2/k’1
Disebut juga ratio antara waktu retensi terkoreksi solut 1 dan 2, atau ratio koefisien distribusi solut 1 dan 2 (k’ juga dapat sebagai koefisien partisi, koefisien permeasi, koefisien adsorpsi, dll)
Selektifitas sangat ditentukan oleh harga k’ masing-masing solut yang akan dipisahkan. Harga k’ dpt dipengaruhi oleh komposisi fase gerak, sifat alami fase diam dan suhu serta sifat alami solut
![Page 38: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/38.jpg)
A B
tRB
tRA
WA WB
Jika WA=WB=W
Dengan perhitungan N, k’ maka
Rs = 0,25 √N (α-1/α) ( k’B/1+k’B)
Efisiensi Selektifitas Retensi
Untuk menghitung N dari Rs yang diinginkan adalah :
N = 16 Rs2 (α/α-1)2 (1+k’B / k’B)2
![Page 39: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/39.jpg)
Untuk menghitung waktu retensi dari Rs adalah :
tRB = (16 Rs2 H / μB) (α/α-1)2 (1+k’B)3 / (kB)2
Jika Rs=1,5 dan k’2 = 2 maka
(α-1) . √N = 10
Untuk solut yang migrasinya lambat dan k’nya besar maka tRB dpt dihitung sbb:
tRB = L / μB = L / μm (1+k’B)
dimana L=panjang kolom, μB = laju alir solut dan μm = laju alir fase gerak
Karena L=NH, maka
tRB = NH (1+k’B) / μm
![Page 40: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/40.jpg)
Jika digabung dengan persamaan N maka :
tRB = (16 Rs2 H / μm) (α/α-1)2 (1+k’B)3 / (k’B)2
Dari persamaan ini dpt dilihat bahwa jika α dan k’B
tetap, maka tR berbanding lurus dengan Rs2 dan H
tR1/tR2 = (Rs21)/(Rs
22) . H1/H2
![Page 41: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/41.jpg)
Harga k’2 perlu ditentukan utk memperoleh waktu pemisahan yg singkat dengan resolusi yg baik
Rs = 0,25 √N (α-1/α) ( k’2/(1+k’2))
Q
![Page 42: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/42.jpg)
Dan
tRB = (16 Rs2 H / μm) (α/α-1)2 (1+k’B)3 / (k’B)2
Jika Q dan Q’ dipertahankan tidak berubah, maka rajah antara Rs/Q dan tR(B) /Q’ terhadap k’2 dpt digambarkan
sbb:
Q’
Rs/
Q a
tau
tR/Q
’
k’20 1 2 5 10
![Page 43: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/43.jpg)
k’2 > 10 harus dihindari karena peningkatan Rs sangat kecil tetapi waktu pemisahan bertambah lama.
Waktu optimum diberikan pada k’2 = 2, tetapi utk analisis biasanya k’2 optimum diberikan antara 1 – 5 .
Dengan demikian k’2 optimum adalah :
1 ≤ k’B ≤ 5
![Page 44: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/44.jpg)
Rs berbanding lurus dengan k’/(1+k’), maka Rs dapat ditingkatkan dengan membuat k’ menjadi besar
k’ k’/(1+k’)
0 0
1 0,5
2 0,67
3 0,75
4 0,80
5 0,83
10 0,91
~ 1,00
![Page 45: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/45.jpg)
Asumsi : jika α dan k’ tidak berubah maka Rs berbanding lurus dengan √N.
Karena N berbanding lurus dengan L, maka Rs berbanding lurus dengan √L.
Jadi jika L diperpanjang 2x maka N dapat menjadi 2xlipat lebih banyak, maka Resolusinya hanya meningkat hanya 1,4x dan waktu pemisahan meningkat 2x :
Rs1/Rs2 = √N /√2N = √L /√2L = 1/√2 = 1/1,4 Rs2 = 1,4 . Rs1
![Page 46: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/46.jpg)
PEMISAHAN KROMATOGRAFI
FASE DIAM
FASE GERAK
TEKNIK ELUSI
SUHU
MODIFIER
pH
tR, Rf
W, Zb
k’, α
Rs
N
Koef variasi
Faktor yang harus dijaga/dikendalikan
Parameter pemisahan/kualitas kromatografi
![Page 47: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/47.jpg)
Φp=fraksi vol.pelarut utama
Φm=fraksi vol.pelarut modifier
T=suhu
μ=aliran pelarut (mL/menit)
d=ukuran partikel fase diam
L=panjang kolom
C=kepolaran kolom/fase diam
α=aktivitas adsorben
k’=faktor kapasitas
N=jumlah lempeng teoritis
η=viskositas fase gerak
![Page 48: Teori Dasar Kromatografi](https://reader037.vdocuments.pub/reader037/viewer/2022102406/557211b4497959fc0b8f60ef/html5/thumbnails/48.jpg)
Terima kasih