tesis: cirrosis hepatica: proliferacion celular …
TRANSCRIPT
.1. .. ···1·
UNfVERSlDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO . •' \ i ~ '~
FACULTAD DE MEDICINA
GLORIA OERTHA VEGA ROBLEDO
CIRROSIS HEPATlCA:
PROLIFERACION CELULAR ALTERADA A MITOGENOS Y SU RELACION
CON EL ZINC PLASMATICO
TESIS
DE MAESTRIA
EN CIENCIAS OIOMEDlCAS:
INMUNOLOGIA
MEXICO, 1990
TESIS CON fALt.A DE ORIGEN
. ·-~1 ',.'
UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis
Digitales Restricciones de uso
DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA
SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL
Todo el material contenido en esta tesis está
protegido por la Ley Federal del Derecho de
Autor (LFDA) de los Estados Unidos
Mexicanos (México).
El uso de imágenes, fragmentos de videos, y
demás material que sea objeto de protección
de los derechos de autor, será exclusivamente
para fines educativos e informativos y deberá
citar la fuente donde la obtuvo mencionando el
autor o autores. Cualquier uso distinto como el
lucro, reproducción, edición o modificación,
será perseguido y sancionado por el respectivo
titular de los Derechos de Autor.
INDICE
RESUMEN l
INTRODUCCION 2
MATERIAL Y METO DOS 7
TABLA I 10
RESULTADOS 12
TABLA II 14
'rABLA III 15
DISCUSION 16
BIBLIOGRAFIA 24
L..os pac:lt~nT,•?S (:on l.'::.i1-r-osis hE~pática por alcohol Lienen un.a
pr ... _::-Llispeisie:ión. elevad.a a corit...raer inf.?cciones, lo q1.ie se traduce en
;_1.lt.erac1on.F:•s de l.a inmunidad. Pr-esentan ademAs, t.tna dlsminución
impo1-t:c1nte de constituyr~nles pl2sm8ticos coino el zinc::, . .la albümina
Y la tr..?tn~:;f~?l"'rin8., que se encuent.ra.n involucrados en la respuesta
i nrnune.
estudió la transformación blastoide de linfocitos
esU.mulados in vitre_ con fitohemaqlutin.ina M y P en pacientes con
cirrosis hepática por alcc>hol y se trató de correlacionar •asta
r•:>spuesta. con los constituyentes plasmáticos mencionados. El indice
de transformación blastoide fué significativamente menor Cp<.001.)
'2'n 81 grupo de pacientes, en relación con el grupo t.estigo, pero no
se correlac.ionó directamente con la concentración de zinct
albúmina, t.ransférrlna o globulinas circulantes.
El pl.a.sma de los pacient.es inhibió __ significativament..e l;;,,
de células normales a la eslimulación con
fitohernaqlu1,.inina y cor1.:anaval.ina A; sin embargo, la transformación
blast.i:;.ide de los linfocilos de los pacient.es, no se restableció a
niveles normales cuando s~ in1:ubar·on con el plasma df? los t....es+...igos.
Los paciS>nt.es con cirrosis hep.ál.ica, pr-esenla.n niveles bajo:;
L. ma!::¡nit.ud del daf'ío tisular. Eri los pacientes con cirros.is por
~.lcohol, def i cierici .d se presenla probabl em0nt.e como
consr?CUE>ncia de i<1 falta de ingestión o de alteraciones en la
bebidas alcohólicas persistl;o~ se puede suscitar uri aurnento en sus
riSiquer i.mi.ent,,os, debido a qt.1e en el m81..abolismo del alcohol
ir·d ... erv.ir-?nt?. la deshidrogen.21sa alcohOlic¿t, enzima d8'pendienle d1?l
~ir-1<::. Exist..é ta.rnb.i1:?n un descenso de proleínas t..ransport.ador_as, qut!'
corno la t1-a!)Sferri na y la al búmi na't> son sintelizadas en el
higado. En 1 os pacientes con enfermedad hepálica descompensada, se
obsr:r va no sól amente una deficiencia cuan ti ta ti V3. de al b(Jmi na, si no
también una disminución de su afinidad por el , c4.)
zinc Poi- otra
parte, se ha visto que el zinc unido a los aminoácidos se vuelve
mas di ali zabl e, por lo que es factible. que el aumento en su
excreción urinaria, se vea favorecido por la aminoaciduria que
presentar1 1()$ paciéhLes ct:.in cirrosis ht2pátir:aca,~i,Ci,?>; además. ~r1
correJ.<ición entr<o:> €-st,e y la. excreci.ón urinari.a del zinc<O>
La d1-?fici1.~ncia ci(~ zinc puedE..~ ma.nl.t'est.arse por infecciones
ri~curren.t.i:-:?5, retraso er-i, la c:icat .. r1za.cl.ón de las heridas y las
de y pelo. i nfr::~r t·i l J. da.d, C<:t1Hbi OS
n1;_.!!r> 1 ::_,_~nsori.ale<-;, tr·asto1~no~~ m8ntales, hJposrni:::t, hipo1_;¡0usic.t, 8f"Jt?rnia.
/ v1,-_;1r>11 r1c<:t1.1r-r1;:, di·:::rnin1..tfd:.:i_t 4'9
-11
'; t:·n los riiñrJS predomin~n Ja
.t:iJ1c'l1~1-: .. ~ .. :1 :). ~ r.-?l rte:otr.:-)so en Ed c.rec1mient.o y el hipogonadisrnc} 12>.
En Los paci.E,nles con deficiencia de zinc, se han det.ectado
étlt.0raciorie" lnmunológio~as pr.incipalmento;, a nivel celular. "'ntre
oLras. involución prernat~lir:a dt.~l limo, linfocit..op.ania T, .3.nergia
cutanea. e inactivación de L;; limulina Cfactor tlmico sérico); puede
existir t;;mbi én un d.;.scenso en los nivel es de la hormoria ti mi ca
1.:it'culante'13
-14
', lo. producciór1 dE> linioc.inas y <7n la actividad
de las células asesinas naturalt:~s<t~>.
El zi ne es ~.:SE-"1nci al para T.J!) núme-ro de prOCl=?SOS
metabólicos que incluyen etapas en la sintesis de DNA, RNA y de
prole.inas116
-17
'. L.?. d1srninución d"'l mela.l en e.l organ.ismo or.igina
1 a ac umul a.ci ón de nucl ceól idos. fosfatos, aminoácidos y otros
cornpueslos'~", que afectan de man•?ra imporlanle el comparlimerrl.o
i ntracel u.lat' por la loxicidad que or::B.si ana Lal acúmulo,
pr l nci pal mr:: .. nl0 ,:1 de nuel eót l dOs nm.
El zinc •?stab.ili·z.a la configuración cuaternaria de numerosas
prote1nas, en algunas de las cuales se han idenU.ficado sil.íos
"'specifico:> de interacción prot.eina-met,a1'17
'; de esta manera, el
3
irnportant.p p:~pe.l A ni.v,¡,1
1.::.t i.nhibJ.ctc)rl d'°°! t~'Js~nt.os tan irnport.::int,~s-; como .la dt~s9ranulación d8'
c0l ul~:t. Cf~b.:-td.21 y l Z1 l.iber..:'J.ciúf.l de serotonina ' (1.9'-2J> pl aquet.ar J. a .
compl'-?mE•nt..-o y la citoli.si.na T~ ocasior1an poros sensibl12s a ,c2ttiones
dJv~lenti:s. Aunque el zinc no t?vita. la formdción de canal.es, si
d1;.splaza al ag<?nte hernoll tlco de la membraJ)a y logr.;;. mantener a los
poros con un.?i. r:onfi9t.11-ac16n cerrada'22).
Algunas de las •7nzi mas i t)vol ucr a das en 1 a di ví si ón celular
r 1..0qui er-E>n z i ne {7.tl-25> Asl se ha observado que, el zinc puede
p1-evenír c:o revertir La acción .inhibidora que ej0rce el ácido
etilendiaminotetraacét,ico sobr-•~ l;;, sintes.i.s de DNA, o la 1-10
hecho de que oCros metales· diva.lentes como el cobalto y el cobre en
ei prim'"w (26>
caso o el calcio y el magnesio én el
pr•~sontar1 un efeclo similar al del zinc.
- Ci5} segur1do ·• no
En c•.tlt-ivos de células, la slntesis de ONA se lleva a cabo de
4
011.:1 11:aner .<l 6pt1 ma. cuando 1-z.l medio se Sllf)l emen"L.3 con suer·o hum:.~no
En el m(~~di o de cul r.... i vo. la
~SLlSt i t..1.1c:i.ón d 1:?l suero hum.::1.no n.or·m.c=i.1. por P.l crnnpl '~jo
:::.1r1c.-·t.r,,:,nsf.:.~1-r1nd, t..;,.1mb.ien pr,oduc('.~ t.in;i P.st lmu.tacion dt.;- la división
Por obsr::-rvado la
Zi ric en el li rno e11 (31)
r·a"lones .
as.t como su t:°?'fr?clo mit.oqénir.::o sobre- linfocit.os'24'92
-3
m.
Los pac:ter1tes con cirrosis hepat.ica p<~r alcohol, tienen tma
suscept..ibil.idad a contraer it)f8cciones, lo que indica la existencia
dP. alteraciones en su i nmt.mi dad. Er~ ·.los paciet)t.es descompensados,
se h3 obs~.?r va.do una al t.er ac.i ón en 1 as pruebas cut.áneas de
hipe:rsensibilid<.<d t.<.<rdia y una disminución de los linfocitos T
d1? linfocilos T Gslimuladores/supresores, pues mienlra.s a.lgtmos
la encon t.1- ado sin al ter ac i. ories <99-
4 º>, ot~ros han
dt';;.>le(..:l .. ~i.dO un,::., cíismir'luci-Ot't -- en la_ .?i.ctividad de las células T
(.\1-·17.> '51 tpr e~;or as
Los. estudios
pacientes con
de prol ife1·aci.ón
c.irrosis hepat.i ca.,
c:el ul ar en l infoci t.os de
han moslrado
que la
ri.i smi nui da., suero de esLos
i. r,hi be eL creci mi en lo los linfrn;itos normales
f?S ti. mul adr.)S algunas
encaminadas a relacionar diversas variables de disfunción hepálica
con E•St~e fE?nónU?flO d8 inhibición~ moslraron ur)a corr€•lación negali va
ent.re la respu•?sl.:'< Al eslimlJlo mitogénico indtJcido con PHA y lct
r~ncontrar
rnitocy·:.•no y b1lirr1.1bir1as, TGt._J o fosfatasa alcalina circulant-es«-'·7>,
Sin emb;:,i· gr;.. queda aún por di l t1ci dar la par U. ci pací ón de muchas
variable,-;, entxe las que se enct1entra el zinc;_. que de manera t.an
irnpo1-tante y contradicloria'52-!5m participa en la respuesta inmune
y cuya disminución t.mida la de albúmina y trar1sferrina
ci r·ctilanles, cont.r.ibuye a la alteración de la membrana del
linfoc.i t.o. Esto induce ;:t supot\er que la dep1·esi ón en la respuesta
al est t mulo mi logéni co, es Lé asoc:i a.da co11 la def i (;í enci a de
const.iluyenLes pla.smál.icos es(?nciales.
Con base en 1 o -'In ter i~or y con P.l propósi t.o de encontrar una
alt..~rctc1on susceptible de rnodificarse9 que permita mejorar el
1;,sLado clini.co del paciente, se investigó la relación exísle11t,e
entre la concenl.1-ación de zi ne, Lransfe1-rina, albúmina y otros
constiluyent..o;s plasrn<clicos y L:, sintesís de DNA inducida por
6
,;1 L .~.:l-;:.hc,l .
Se est.udiaron ,;-;5 paciente:> hospitalizados, adultos, 17 Ct58%)
dql se:.co rnasr::uiir.10 y 8 C3~=:~-;;) del femenino~ cuyas edades fluctuaron
entre lus 35 y los 60 afíos CX=48), con diagnóstico clin.ico y de
L::1.bor8lorio de c.irr•.:isJ'-.; hepática por alcohol. basa.do en los
<n1leced"Jnl•o,s de'> in•JesLion cr611ica de bebidas alcohólicas y en los
da.los de i i1suf i ci enci .?\ hepát i. C'-1. e hi pert.er1si ón por tal C i'-ct.er i ci a ..
hepa t omc~g al t a , telangieclasias). La mayoria de los pac1e1~les
prt-'.'::'senta.ron. trasl1_:irnr:is de la coagtJlación que contraindica.ron la
puncicm hep.3t..ica, por· lo que sólo <?ra un tercio de los casos, el
diagnóstico se confi1·mó por biopsia. Se excluyeron de ésle grupo en
estudio, los pacientes que habian 1·eci bido transfusiones sanguineas
o ter<).pia i nnn.tnodepr esor a; con endocr i nopa.ti a, .infección,
leucopenia sever;;i., asi como los que hab1.an inqerid•.:> bebidas
alcohóficas .en los _.ú.Ltimos _cuatro ,jías. El grupo testigo es!_11vo
formado por 35 it)d.ividttos adultos, cl.inicam<?nte sanos, 20 dei sexo
masc<Jlino y 15 del f•"'menino, d<? 25 a 'm af1os d .. ) edad ()("'39).
7
D12 cad~:t .indj_viduo mantenida en ay-uno duraril1-? 12 horas~ se
r..:1ht t1v_i_eron LO m.l de- s21ngre vi::...~nc.:isa en jeringa de pláslico est.éri l y
l.~. muestra se centrifugó dur-anlt? i5
1nin1Jlos a 500 g y el pl:asma se separó en condiciones de
1~·sterili(Jad. Una pa.r·le se ut.ili.zt~ de inmedialo en las pruebas de
1~~.t.irn11.l..:1cióri mitogi:;.nica y F.~1 rest ... c1 S•? ~or'igeló para ser US2t.do
pos ter i ot" 111enle .las de ter mi na(:i ones de zinc, albúmina y
El zinc se d~Lern1i110 segu1' el mét..odo de - . ~'5!)) Dav.1es . que
al
al seguido de centrifugación; en e1
libre de partlculas se cuantificó el zinc por
ab~sorr::.iüri .?i.lóntic:, 8n Ut) especlrc1f0Lómelro CUnicam S. P. 90). La
y J \60> co . y la albumina, a.si como 1·eslo de las fracciones
proléicas. por electroforesis r;n un densitómeLro mic1·ozonal Beckman
i nmunodi C us i ón r adi al <óZ>.
8
-- '<".;·); L, '/ilJJt de est.,.rilidacl,
N. Y.) y el plasma en estudio a una
Difco) t.h-,sd>2 "'l irucio d"'l cultive) y de acuerdo con la Tabla I.
Todos los cul t. i vos se realiza ron por· Lr _t pl i c;.ido. Los l i nfoci. l.c::is se
i ncubarc:)n durante 72 horas a 37°C: eri una a:lrri;:'.>sfe.-a húmeda con co2
(5>;;); 24 hül' ;.s ar1tes de la cosecha se a9reg6 .a cada cul t,i vo 1 ¡;Ci
de ti mi dina tri tiada (3
H-TdR, Ne'"' England Nuclear Inc.. Boston
MA.). Al finalizar él tiempo de incubación. las células se lavaron
con solución salina y limidina C50 ¡1g/ml), se pre1;ipitaron con
ac11io lricloroacéLico frío al 6X y se centri~t1garon nuevamerile a
500 g_; el p.-.;,cipiLado se disolvió en 2 ml de liquido de centelleo.
La ine:cwJ:.'oc; .. u::ión de :-::H-TdR se determinó 1...!tn t.H't contador de cenleLleo
l i C..:fUi ck.i ( P~r:-k 2trd Tr 1 -Carb) .. El "1
indic.e Ü8 inc()rpor-acio11 de --H-TdR se
obt.tJvo pcw la d1!~?rE>nc1a de cuentas por m.tnut...o Ccpm) existente
los cul t.t vos es ti.mula dos con el milógeno y los no
f;.sti.mulados. Los resul t.~dos se expr0saron como L:.•l promedio de cpm ±
el err·or MSlandar.
g
TABLA I
CIRF:OSI S HEPATICA J.1.L ESTIMULU
MI TCX?HH co"'
Pl .:_..¡_srrta PHA-M b ,-
PHA-P- Cr.::iri Ad
----------
pacii.:-nt..e p:eici '-:.~nr_.~~ + NSJ·('
2 paclerile t.~;.sl 1 go + + NSH
~) T~.f7St .l go t (?St i. go 1· + NSH
¡J. Les t. i90 p~i-:--ient.e + + +
5 par.::i ente paciente r
6 lestigo testigo í
a. El cultivo de los línfocit.os y su estirnulacion nüt.ogénica se
real i :::aron corno se dt?scr l. br;. t-?11 Mat.er i al y 1::fét. ndo~.
b. PHA-M: grupos 1-6. IF'20.
c. PHA···P: grupos 1-3. n-=5; é:Jl'llp<:>o; :~c:B. n=t5.
d. Con A: grupos 3·-6, n=lO.
'~ NSH. ne"' se h.i :<.:r. ....
f. Cultivos con t. ro1 sin mi. t.ógr~no.
l(i''.·~. Si-7 inr::luyó un grupo cent.rol con f:'.-!l mismo numero de c:elt.11.as a
la us<'.lda en los p1-obl em<'.ls. El E>Sl l mulo mí togéni. co s~~ i ndliJ o cor1 l O
µ9 de PH/.\-P y 5 J19 r:ie Concanavalina A CCon A, Sigma, St. Louis
MO. ). Los cultivos se hicieron por triplicado y se procesaron como
s<? d•escr i bi ó preví amente.
Se probó también el efecto citotó:<ic.o d•?l plasma de los
pac i entf?S sobre los linfocitos normales. Con lal objeto ·~'"'
e·st.udi.os de celular en los cul tl vos
ant....E?riormentf=J de-scrilos~ la cual se df::"?terminó a los 60 minut~os y a
las ?2 hor<is de i.ncubación. Los cul t.i vos C•:>nlrol tenian el mismo
núme1-o de c8lulas ncwmales C5 X 105
) y plasma aut.ólogo (10%). La
viabilidad se d1,,ler mi no por 1 a exclusión del azul tripa ne) 164
'.
Se utilizó la p1-ueb<i de y los coeficienl.es de
cor r 81 aci On de Spe.ctr Jllf1.n y t~endal l {ó(j-ó?>.
10
con c1.rros1s n.1 ve·l e~:;
pi .;.i-:-~m.~ r. i. cris ch? :..:i ne::. a 1 búrrd. na y t.r ansfer r i. n,~ si iJni f i cat i va.mente
rn1_:;,,nor- f-?-S ( p<. Ot) qu1s- 1 os observados:; t:n los i ndi vi duos r1cirmctl es
ID. /\si mi srno, los n.1 ve.les prot ei r1.as tot. ;1.1 es
(.:H ~:::mi r1u1 dos s.ignifie:at.i vameriLI'? ( p<. 001) en los
p¿\c.1 t-?rtlf-:>S; por otra par t..e, las gl obul i n .. ts vaf' i ar·on, obser váridose
que l ;;s Ot-2 estaban Cp<. 001),
mientras qul-: las o-1 • (3 y r mosl.r aron at.tment.os ~ los que a exctapci ón
ch;.:. 1 as O. fueron si gni f'i cat.í. vo·3 Cp<. 01) en relación con los
valor· es d~? los sujetos normales C.Tabl<i. II).
Cuando los linfocitos de los pacient..es cirrót...icos
l.~·stimularon con m1tógr~nos~ se observó en 24 de li:is 25 individuos
•'-'S+.<1d i. ados, una respuest. a disminuida en compar aci ór1 a la observada
él1 suj•?l.os sanos, (Tabla III, grupos 1 y 3); est..a. clife1·encia í'u<?
significativa Cp<001). Al incubar· los linfocitos de los pacientes
con ~:l plasma. normal~ SE~ .::1preció una llger;:1 r-ecuppración en 11
(45'7;,) de los ¡:_:4 .. p.a.ci8riles ~.1'~.·ctados. r.~ro sóJ.o en 3 (12%) a.lc:anzó
val cw .o•s sum l. ar •?S a l<0s del t1;,sti. go (Tabla I I T, grupos 2 y 3). Por
olr;:t p .. ~rte. l.os linfocitos de los individuos norma.les Cr1;:;::35) qu€' se
incubaron con 1:;-l plasm:.:\ cir? los pacientes~ moslraron eri 29 (82~~) de
35 e: ~1$0S.. s1gnificativaJner1te .i rü'E:'r .i or al
•?:; t.i mula dos con FHA-M (!-".O.\). PHA-F' C p':. 01) y Con A C p<. 01), en
f'\~~l ~ 1 ~ i ón .:".t. la obt•?:in1d.a ccin el pl<i:sma ,3_ulólo90 n0rmal CTabl;)_ ITI ~
Al t~·xami r1ar 1 os resulte.dos i ndi vi dual mentt-.? ~ no se encontró una
cHrect,a encr-1--? la resp11esla celular al est.imulo
11ntor:y~nico y la di~~minuci.ór1 en lé3 c.::oncentr·3ción plasma.tica de ·zincf
,:ilburnino. y t..rar1sferrina~ así como con la dE· proleinas totales y
91.obL.11 ln.:~s 01., (~ y y. F.n t.odos los c;~sos el valcw de r fui:? menor de
o. 34-.
El plasma de los pacientes no rnost,ro efe1:to •:.i tot.óxico sobre
los linfocitos de los sujetos normales Ctest.igos). La viabilidad
celula1' d.;-t.errninada J?<)r la exclusión del. azul tripano, í'ué si~tllar
a la que se obtuvo con el plasma de los individuos normales. La
via.bilidad a los CiO minulos de incubación, fu>2 d•oo 95~; y a las 72
hor· as fui;,. de 90~~-
l2
·-·---------·-------------------·· ---------------------------~-·------
12.
de:
-----·-·------------·----
:r_:1 ne 86 :!' 4. 5 <. 01
Al btín1.i r1a 2. 3 i o . .l l 4. l :!: o. 08 ,, . OJ.
(~¡J\l.)
Tr;.Lnsf1-?rT i nd 189 :!: 1?.7. 2 286 ± 11. l <. 01
Crnq/dl)
Prot r?i nas tot.ciles 6. 'T ..- o. 24 7. 5 ± o. 08 <. 01
(g/d}')
Gl ol:-.1ul i na::'.: c:.i·-1 o. ('.~/"'" ± o. 02 o. 20 ± o. 01 ·". 001
(g/dl) c~·-2 o. fj() ± o. 03 o. tJ4. ± o. 02 <. 001
¡i 1. 34 "': o. 12 1 10 .t o. 05 MS
'" 2. 25 :': o. 18 . 1 46 :.t O. i)6 <. 01
TABLA TI I
¡:: .. ~":TT ~FiL.¡\1.:1 (l~l DE LI MFcx:1 TOS DE P/\<.:r ENTES CON C:T PROSIS HEPATI CA CON Mf TOGE~40S
c~í··r~'.:T<~· [1EL PL1\SM11 DE E:::~f(¡S PA<:I ENTES SOBRE LA PP.Ol.1 FERACI OH DE Ll. HFC>Ll TOS
Dr~ :=:uJETOS tK;PM/1LES
<.:UL TT \/\)
b F'HA-M
-----------------------~-.--~--~---------------------------
pdciente p2\ci.1=:-nte 12t30~::t194.6 2574~3±12941
2 l 642U:!:l >:.<11
~".'> tf?':-: 1. i ~JC• t,~st~ i rJO 26t.S20:t"3-348 90208t2:"=>:'.<l 7 l. (~841~ 7-t236f-J:~ 82188~tl 57g~
4 t &Si. .i ~~o p.8.t'.";i E•nl 12 J. 8t)46±'3<)60 504-40:!:C~l 569 -/()4~1-3!2~3087 ~50188±2271.:)3
d. Prnmedic· d0 10 muest.r~s ± ~rror esl~ndar.
Lo~-: resuJ.L~dos d1;. ~st..i;;a ~·st.udio indi.r:-.:::).tt qH~ lr::is linfocitos de
Jt:is pacir.?11.t ... ~·,:. cor1 cirri:isis h1;;ip,':tlica. por alcohol, presentan una
al t.eir.a.c:ión r.:ari su cap,::ic.i.dad par·a. rF"""'-:;ponder a los mi Cógenos. Esla
inca.pacicl;:i.d se ma.ni!'iF.!'3t.a por un~, d.i.sminución en la divisíon
1~-a.lul:u~~ r)¡~-terminadr:\ por la ín<:orporación de 3H-TdR. Asirnism~::.i. el
pia~.::m.~ cit? los p..: .. cienl~?s mosl.ro un efect.o inhi.bi.d(.1r sobt"'f:> la
sintPsis de DNA. en los linfocitc)S de su,jolos norm~les esi.imulados
ambas obs.er va.ci or1es coinciden con lo
e?St.Fe <':f'E,clo, S8 observó t.ambién en el plasma de; los pacienle.s
al tnar.::enaclo a -¿~oºc dur antei un año.
Le\ alteraci•'.:>n gtf<i" pres€•ntan los linfocitos de los p«ciente-s no
es rc~versi.ble en la mayorl<>. ch> los casos, pu.o•s cuando las células
se- incubaron con plasmr.t. normal, ne) obst.ante el haber mejora.do
l igerament~.;. en 11 di2 los 24 suj1::it.os af'er:t.ado$, sólo t...~n tres alcanzó
v.üores norm«les. similares a .los d•?l t6'sligo CTabla III). Lo
eint.~ri.or di. fi1?r1:::- de -lo rE.~por-t..ado por Dowd y ma,47>
Hsll , qui811es
obsf?r· v;:u- on ur1~1 respuest.8. norma.l a PHA cuando 1 as células ch? los
pétcii-.:-nt17s -:::;; .. : incubaron con plasma norm.al.
Dado que en los pacienLe-s con cirrosis hepálic.a por alcohol,
exi s lf? di sini nuci Ól""l sJgnificat..i va las concenl r ,;,ci ones
albumi.na. y (:?-Xpl.or.3H\OS i a,
d.::-.·.~: -::1 r· ...::.ir· Lt111aciZtm.-:>nt. F}, no d! r~·c·t. :::.
1ndir:t~ de ~st.imul21_ciC.Jn
!n1.t.ugr·:!nic.::'.,t E.•n cada Jndivlduo. Estos resultados son simi.larr>s a los
Duchal1: ..... ~.u<6m en suj~Los normales:-, con supl ement(::i
rata·s desnutridas, quit..~nes t.a111poco
~nconlraron una correlación enlr8 la C•lncent.ración sér·i~a de 21nc y
de inmunidad Siri
en pací~ntes con HocigkJ n,
r eiar:::1óri direct..:~J. ontr~e el i ndi CE.• de estirnulaci ón mi Lr.)r~¡énica y los
valores de zinc serico.
Es posible que los niveles circulantes del zinc no refleje!) .la
canLidad "activa" del metal, ya que en los pacientes cor1 dafio
hepálico disminuye l~°\ concentración plasmática de albúmina, qu&
·~onsti luye uno de los t.ra.nsportaclorE>s más <?ficaces del zinc. Otro
.a.car- reador qu•:- tarnbit-'>n disminuye en la circulación de estos
paciE.·nt(:•s y qtJe r?s especialmentf~ i1nportanl(-? p8r8. J?l sist.ema de los
lir1fociLüS T. t?S la cransít:-rr·ina(!:iS,?i>, protefr.1;\. a. 13 que el rnetd.l
Sf? une l?ll m1.=::inor r::.o-1nt .i d8d ~ p~r·o d8 mar1~r- a más Ct')nslante que .~-t la
~1.l bumi na y para la c1-ta.l se han r2'1Jconlrado r ecept...or·es de al l.a
df i nl diJd i os As1 el zinc, p1·obablem•?nle
c.irr::tJ.la un.ido a prote.tnas como J.a IgG y la ci1-2 m~~croglobulin.a, que
h0p0t. .it::·.~ y qtie por~ .la f'icmezZ\ o .i.rí-t-vt=.>r·sibl id~:td dE" Sll union,
t m¡:11 di::-n l ~ d.c:t u.:..c1 ón d.;.1 met...'.i.l <73-
75>,
por dist. inl<is CúUS.a.s,
<'?!lli-8 la disminución 1:.:.•n l.; p1~oliferaci6n de 1infocil.os est.imul~do~
pnr Con A y la c1~ncentracio11 de L1~ansferri1'a en st1erc1 auto.Lego, lo
qu0 no ·se obsE)rvr:i al cultiva!~ los linfoci t.os de los p3.cientes con
suer•:i 11ormal CAB), donde la 1-esp•.tesla celular se norm;).U.zó y no se
1·elacion6 con la concentración de lransferrina.
E:dsl.en otros f'acl.ores ci.rcuLantes capaces de deprimir la
tr:;:\.nsformación bl a-:!>t~oide de los linfoci \..os, .;.ntre ellos una
moléf.";ula. no incluida Gn nuest..rci est.udir .. .":l, la n.-feLo proCei.na; sin
emba1·go la canlidad ci1·cu.lanl.e de est" prQteina en la cirrosis
hE.•f-1.:Jtica sin h8p.:i.tom~~ r10 par{:oce ser suficiente p.ar8 deprimir la
l r aris f 01 rnac i óri Por otr21 parte, el <?f ect.o
inhibidor de est...e faclor se pierdl~ er~ cuando el lir¡f'oci t..o se coloca
Lo an'Lerior sugiere dos cosas: L.::.. primera, que en los
r::.on c.i..rrosis hepática al cahol pueden exisl1r
alLeracionF?s celulares que no l .. E.lvi.erten con faGi.1.idad. A este
l '3
de COfl el
Ct1ando el GTP 3.UHlf:?r1t3.
Este
ut .. .i.liza1~ .~los metabol)tos en la s1nt..:~s1s de prott?-1.nas y/o ácicic)·5
nucleicos. t..iene l;.l capacidad de est.irnu.lar
mencionados. La disminución dr~ los 1~eci71pt..c1rl'.::;.:; de.:? .ader'1osinc:i s6J o se
obsei·vo en pacienles con ci1·rc,s1s hepática poi- alcohol y no en
en fer m•:>dad hepática de otra eti ol ogi a'70
', lo que puede E-Xpl i car·
parcialment,e las diferencias observadas en estos pacientes. Por
oLra par~e, secundaria a l.a deficiencia del zinc intracelular y del
Cr)mplejo zi ne -t .. i mosi na circul~nte, puede verse afeclad.3. la
rnadtlí~lción de 1;1 ce.lula. T y l.=, ger1eraciórl de linfociriasceo-at>,
rE·duciendr:i·:.se df~ n1.21.r1et-a impo1·tante l,;i. cant.idad de~ IL-3 y su ntJ:miS•r-o
e\!.:·· las (:1-:~lul.as T .C\CLiv.~:i.das. al j_ndur::ir la exprE•sión de un nlmter·o
zinc y fierro al interior de la célula.
La $r?.'(JlJ!"'lda ubser Vc"\Ci ón que surr~e de es los r·esul tados, e~-; que
pl.asm~ de est.os pacientes hay t...ino o varios f:a.ct..ores
inhibidon;s, no <:itoló:<icos, enlre Los qu.;> se encuentran molécL1las
16
¡~ert~An~cientes al gr upo de las a--gl obul i ri..;ts. Los hepa.Locitos
i 11crt2m1:7rd.a.n lá. secrecit.Jn de las globulinas durc-.t.nt(-?' lé"' . .-s respuestas
di~ fas¡:"'-=- .~qudct y ést~s. rn0dJB.nt.e su ?Lcurnulo en los sit1os de
rJ~Sl)UéS rle la l.esiOI) t1st1la!· y la inf"eccion. Al dismint1ir Al ~1nc.
a.lgun;..s de e.! las los
linfocllüs<Ot·-D2); irih.lb¡-:_:.n as.t. lc.t ·31?Cr1.-:-cion ~:le ciertas citocinas
1~nt.re l ds qUE-? se 8nc1.1entr-a el facLor d1~· nl:::?Cf'C.'SÍ s tumoral CTNF'). que
En los pac.it~nt.es cirróticos .t\Ltrnenló slgnif.1caLivamentG l~
fracción a-1 d1-::i .las globulinas. que incluye lipo y glicoprotein._1s;
de estas; Ltl t.i mas. la ác.i dd. sE.~ reconoce como polen te i nmunosupr-esor ~
sin embargo, no erv.:oritr-amos una C()rrelacir.'.'ln ent.re la cor1cent..ración
de la fracción a-1 y la transformación blasloide de los linfocitos.
Por corit~rar10, los pací en le~::; presenLaJC-'n un descenso
si\:Jnifical.ivo df? l.-3. fr-::1.cción r:t-2 qne c.ornprc~·ndt~ entre otr;i.s a. la
1)r0Lr-c>10b1na. c . ..;,•ruloplasmina y macroglobulina; el aumento de t~st.a
úl t. ima Sf~ r-:incuentra posiblemente ~nrn.:?i.scar-ado en la C(:incentrac.ión
por la disminución tan
i.mpor·t .. 8nt.c~ ck.• los otros intf?g1~anles; tampoco se correlacionó ccin la
repli.c.'lción de los linfocitos. LE< fracción (1 aumentó, pr-obablen1enle
a ro·xpens.c,s d,, las l i poprol>O'i nas. ya que el met-abol i smo de las
qr;.1sa-:; pu~·r:h:·;o ver-::.;e afr~ctado cuando hay deficiencia de prolelnas
t.ransport.8.dciras y zinc; la marcada disminución de la LransfB>rrina
17
Asi m.L ~~rno ~ Sf? observó en estos pac10n~es ·' ~J.
t::C)rno f1C•'·:.;1bi.o<? P>q.:-1 1.ic:=-:tc.1 ón l .?t i-~-">::istenci:::s de un est1mul.n anli9é1tlco
dr.:• la f l Oí ,8. y por· l.3. r·r:cur-rencl a de
Mo t;.ncont ramos una
ccirr'"?l.?.tcion e1)t.re la cor1ct>ntración de est ... as 9lobtüinas y la
¡~.:?,"";puesla ch? los linfocitos al eslirnulo mitoqérüco, lo qr.ie difiere
e.le 1 o 1- e por- l. ~do pcir ;i.l gunos . <·l·I> autores
Otr 1.:i P•-)Si.ble inhib.tdor es el corlisoJ.. qtie aument.a en la
cirl.'°:Ul;)cir."'ln di:.~ los pacientes cirróticos: sin embargo, su e.fecl.o
y pri.r1c1pal1w?r'lt ... e 1-?n r-oedore·srn3
). En éslos se ha implicado, que el
aun1"."::-nlo d~ l ~ hor·1no11a Pos S1-':!"r..undario a la hipert~rofia suprarrenal
d;::~Lerrnin;~¡ la relación del cortisol con 1?l met..al y su efecto real
en los pac1~nl.es con ci.rrosis hepática.
La. it"lflt.tencia tan importante que ejercen el zinc, la albtJmina
y l:J. t.ransferriria sobre la i..nmu11ida.d ۥn eslos pacientes, amerita
1.8
:.._nhi..t.•1d1.Jr·s-·:::..; f:>n 1.ct •·irct.ti.:1r:ión. l.:.-:i ;:tJ tera.r~iün dl~ l1.)S 1~ec0:)ptcJre~:; de
l O'.~; F.;"..¡-S r_ Ut! i OS de i n1nurii dad . ('52-50,04 \
y z1 ne en los
rJ:i..r.:ieril~s r:.·cn) cirro'::-;is hepá.tit.::,_l y 81'1 aquellos .i.r'ldividuos con
patologla similar pero de diferenLe eliologia.
81 BLI OGRAF [ A
i. Boyett., J., Sullivan, J. D.istri.bution of prot.c;.in-bound zinc in
no1-mal and c.i r.-!iol.ic se>rllm. MG1..abolism. 19: 148, 1970.
2. SchAchl<"r, P. Giroux, J. ' Schlienger, J., Hoeni9, s ..
S_i·::>erdsma, A. Distribut.ion of serum zinc bel.ween albumin and
al r,, 2-rnaci-og.l obul in J n pat.i ent.s w.i lh decompensaled hepat.i e
cirrhosis. Europ. J. Clin. Invesl. Q: 1~7, 1976.
3. Sullivan. J., Parker, M., Boyell, J. In·~idence of' low se-rum
zi ne in nonci r· rholi e pati ents. Pro.::. Soc. Exp. Bi o.l. Med. 130:
591 .196R.
4. Me Clain. C .. Chu, Su. L. Zinc defic.íency in thf? alecholic: A
r•e>view. Alcoholism Clin. Exp. Res. 'T._: 5, 1983.
5. Goodhart, S. Trace Elements. Modern Nutrit.ion in Healt,h and
Diseas<>. L"'a <•nd Febiger. Ceds. ), Phil;,delphia, p. 382, 1977.
6. Boy•:U., J., Sullivan, J. Abnormaliti<?s of zinc-binding prolein
in the serum of cirrhot.ics. J. Lab. Clln. Med. 71: 857, 1968.
20
Sf~ruro I g ani:-J T cel 1 subpopul ~::¡_t,.i ons in al 1:ohc1l .i. e e i 1· r hr)•:; is
.:tCLer or·a.i :;:i.nt.:· t.her~J.PY (lelt.er). G;-i.sl.ro~ntt?r(".:'l. Cl1n. Biol.
J 2: '384, l 9f38.
d. Bu11ker. V .. Hinks, L .. Slansfielrl. M .. Law~on, M., Claylot), 8.
9.
elder·.ly p0opl8 ..:1nd t.he 1·el.'1ll.onship bet.wet=-n ziflc: balance ;Jnd
li:-?>ukor:.ytE? :.:inc CCWJCt;.·nlrations. Am. J. Clin. Nulr. 46: 353.
1987.
H'-llsled, j. Smith, J. Plasma-zinc in healt..h and disease.
L.ancel I.: 3é;2.. 1970.
10. Ja.ckson, M., Jones, D.~ Edw.ards, R. Tisst.Ie zinc 1.Pvels. as an
inct.~;.: of body zinc sta.lus. Clin. Physiol. ~: 333, 1.982.
11. Burch, R., Sulliv<in, J. Clinical and nuCrit.ional aspecls of
zinc de)ficiency and excess. Med. Cl in. Nort..h. Am. 60: 675,
19f'o.
12. Pr;;._sad. A. Zinc defi.ciency in rnan. Am. J. Dis. Child. 13Q_:
21
Abda.l l ah. J. • r.:.:..pL).n, J.
J.' M. S.sit .. um t.hytnt.ll in i fl human ziric
di::~f1.cl.t-~r1cy. J. Clin. Invt-:s\... t12: ·¡202. l~;i88.
t4-. ü211·dP.11ne, M. ~ Pl1:?;.;.iu. J .. Lefr.;).nc-i.er. P., Bach. J. Role of z.i.nc
,).nd ot...h12r met.als in lhe biolo9ical ac.t.ivit.y of the s~rum
15.
l6.
t.hyrnic f3ctor·. SE•2tnces Acad. Sci. t::92: 7~13, 19r'3l.
f...llen. _J,, PPrr-i, R. Me ClaLn, C., Kay, N. Alle1·acions ir1
human natural killer cell activity and monocyte cilotoxicity
induced by zinc dei"icier1cy. J. Lab. Clin. Med. JJ)2: 577, 1983.
Gaskin, F. I.Il Yi.lIS2 rnic:rol<.1bul.e assembly 1-egulaLion by
di v«.lerit. c;it.i.ot~s and nucl eotides. Bioche1n, 20: 1318, 1981.
17. Serrano. L .. Dominguez, E .. Avila, J. ídent.ificat.ion of zinc
bindlng sil<.>S •.:>f proL.,ins: zinc binds to t.hr" amino-terminal
re91on of t.ubul in. Anal. Biochem. :17<~: 210, .Ul88.
U3. Mef\.ah. S.. Prasad, A. Nt.tclec-:>tides in lymphocyl.es or humar1
subjecLs wilh zinc defic:t,,;nc'y: J:· Lab. Clin. Med. Ll_±: 114,
1989.
ls:J. Chv.apil. M. ErrecL of ::inc or1 cf'>l l.s and biom·~mbranes. Med.
Clit). Horth Amer. 60: 799, 1976.
22
r::-.f Cct2 + ,::;.nd Pe or~t-c ti 011
22. Mahad1?V~ n, D. Hdi 1·ika, A.• Vincenl, .J.' Bashford, L.'
Protection againsL membrane
mr?dialed cyloloxicit..y by r::alcium ancl zinc. Am. J. Pathol. 136:
'Ci1 :'i, 1990.
23. RUhl~ H .. Kirct1ner. H.~ Boci1arL1 G. Kir1elics of the zihc
sU.mulé1LÍ(>n or hum«n peripher;ü lymphocytes i!2 vi tro. Pre oc.
24. Pilz, F:., Wi.llis, R. Wanlass, S., Seegmiller, J. Regulation
o( human lyrnphoblast eclc.-5' -nucleot.idase by zinc. Adv. Exp.
Me.ó•d. Biol. i65 B: 147, 1984.
25. Rt..:.;.n·don, Ch., Lu1::as, D. Heavy-metal mit.ogenesis: Zn++ and
++ Hg induce celltüar cytoLoxici ty 2•.nd_ interfe1·on product..ion it)
mur i ne T 1 ymphocyles. I mrn1Jnobi ol . 1 75: 465, 1987.
26. Wi.lliarns, R., Loeb, L. Zinc requirernent, for DNA replic.;J,ion in
sU.mul."<lecl human lymphor::yt.es. J. Cr,,11. Biol. ?-ª.: 594, 1913.
,:;7. Pi1il.i.i})~:,., J., A:;:~;,.ri, P. ZJnc-t,r·ctrt~"}fe1~rin. Cr?ll Imnn.tnol. ;LQ:
Imrir-:..·~ R.' Muel l <?r·, G. Id;o;nli fic;;.t.ion of
·Lra.nsr~rr1n as ~' lyrnphr>::yt-iS> ~Jrt'1v.rth promoL~:r in human St.-:::irum.
E>:p. Coll. Re.:;. Z .. 1.: 163. 1972.
20. Spj ekE>r· ··Polel. J., Polet, H. Ident.ificat.ion oi" albumin as the
SE>r·um facl.or essPnLial io1· t..hé gr01•th of act.ivated human
l ymphocytes. j. 81 ol. Chem. ;~51: 987, 1976.
30. Ar :.~i . S. Yarnd.na. f., T.:tmK~. T., Takishima, R. Role oí' bovine
s•,.rum albumin in blasloid t.ransformat.ic)n of lymphocytes by
phyl ohemaggl u U 1ü n. Pr º'~. Soc. Exp. Bi oL Med. 154: 444, l 977.
Fraker·. P.. DePasc¡uc·d0-JardJ e1t, P. Swickl, C., Luecke,
Regeneralion of T-cell helper funclion in zinc-deficienl adult.
111i.ce. Proc. Natl. Acad. Sel. USA 75: 5660, 1978.
K1~ i shn;i, M. , Sch>?\4ar t:::. S. ~ Good, P.. Age--dependent ef .. ft?CLs of
zi ne on Lh.-: t-r·ansforma_t.ion respons1e- of human 1.ymphocyt.es to
mi t.ogens. Cell. Immunol. '~2: 270, 1979.
33. Dowd. P., Kelleher-, J. ,Waiker·. B .. Gui 11 ou. P. Nutr i Li on and
r.:ellul.ar immunity in hospital patient.s. 81·. J. Nutr. 55:51.5,
24
313.
8i l)c.":br::. .. m. 8iophys. P.r3'.s. ComrmJlt. 154: 578. 1988.
Cunningham-Ru1,dles, S. Cunningham-P.undl.f":s, B .. Good. R., Zinc
induced activation o! human 8 lyrnphocyt.es. Cl.in. Immunol.
I mmunopat hol. 16: 115, l 980.
Wrtrne1~. G. Lawrro>nC•?, D. Slimulat.ion of murine lymphocyt,e
responses by cations. Coll Irmnunol lQ;L: 425. 1986.
3'?. Kirchrtf?r, H._~ Salas~ M. Sl.i.mulat..ion of lymf)hocyt.es with z.lnc
ions. Melhods. Enzymol. 1~30: 112, 198"i'.
::38. B~r9er, N. • Skinner, A. Characteriz;ü.ion of lymphocyte
transformation induced by zinc ions. J. Cell. Biol. 61: 45,
1974.
39. Jovanovic, R., l.ymphc>cyle subpopulatioris· in patiet~l.s w.ilh
,ücoholic liv8r diseas8. Di9. D1s. Sci. 31: 125, 1986.
40. Roclriguez Feli)c, L. Mart.ín Santana. J., Gut.iérrez Fernández,
J. , Zamor ;.,-Madar i a, E. AJ. ter ;;,ci on<?s de 1 a i nrnuni dad celular y
est.ado de nutricJón en la cirr.osis hepática et.ilica. Rev.
Clin. Esp. 180 (9): 496-501, 1.987.
25
H.
4;.?;.
4 -, .:>.
Te~ mt 11r), ::;,-. Fuj i Wri.1- ;._,_.
Hi::;hjrnut·<~:\. H.
H.
..::. H.'
:.-ií."~ti·1ity 1 n p.;.l.i.enL::: '#il.h hep.at le c.i.cdiosis. Cl in. Exp.
Spinoz:.:i, F .. F.-'.c.C1.11lbotti, F'. GerJ.1, R. Cernetti, C. , Rondc)íli,
F., F'rascar-e.l l i. A.' 8er·Lc~t.to. A., Gcignani, F.
I mmu11oregul alor y T ceL ls in alcohol ir:: li ver di seas e:
dissecí.i.on of circt.!la:Ling leu 3/T4 inducer
T·-1 yrnph•xyles. J. C:l in. · Lab. I mmunol . ?..-ª: 161 , 1987.
ThesLrup-Pedersen, K. L.adefogr;.d, J. , Andersen, P. Lymphocyte
transf or·m.ati or1 t.est wi.t..h 1 i·ver specific pro+.ein and
phytoh<~fll.'il<J<JlUli.nin in p.alimils with l.iver ciiseas<~. Ctin. Exp.
Irnm1mol. 24: l, 1976.
44. N•?wberry, J., Shorey, J., S;;nford, .J., Combes, 8. Depression
of lymphocyle reaclivity lo phylohernagglulinin by serurn frorn
p<<ll8nt."; with liver dis8a.se. Cell. Irnmun•::>l. §.: 87, .1973.
45. Young, G. Dudl ey, F. . Van der Wayden. SuprE:~ssi ve effect of
.: ... 1 coho.l le 1 i ver d.i.. s1 . .:::?,:ts1-? sera 011 1 ymphocyt...i..:- l rar)sfot· m.ati on.
Gut.... 20: 8.'.33-r::39. 'l9Tfd.
2f'í
·Jt.udii.:.~.::; in f;:\mj_J 1~:i1. pr-l111..;•.1·y b.Lli..:.,ry cirrh('.JSis. Gastr·oe~'1tE.'l~oJ. _
,.-;. i¡f - Lt-evy, C. Ir1hib1l1on of PHA-sLim•.tlaled lymplHY::yt€•
trt.t.ns1·ormation by plasma frorn pat.ier"lts wíth adv.:'inced dlcoholic
•::irrhosís. Clin. E:-:p. Imm1Jnol. g: 749, :l97l.
4·8. Zett&rman, R., Sorrell, M. Inun1n--iolagical asf;n?r_:·:ts of alcoholic
41_;¡, Se hl i .-.nge•r , J. Wil lemin, 8., L;ing., North, M., Simon. C.,
M. Bockel, E. Ev;.~l ual.ion of mal nutr i t..í. on and
i. rnn1•.mi t.y í n a 1 cohol í e l i ver· di seas>-;s. Presse Med. ;LE?_: 1023,
50. Mills, P., Shenkin, A., Anthony, R .• Me Lelland, A., Main, A.,
Mac Sween, R .. Russe.ll, R. Ass.-,ssmenL o!' nutrit.ional status
and in vivo i. mmune r~sponses i r1 al cohr:il i e l i vA-r di seas e. Am.
J. Cli.n. N•Jtr. 38: 84!-'l, 1983.
51. Mutchnick, M. , Le(~, H. Imp21ired .lymphocyt.e prolifer"t.ive
response lo mit,0\y•ris ín alcoholíc patierils. Abscence of a
r·~·l¿,t.ion to liv'2r rHséase aclivíty. Alcoholísrn: Exp. Res. 12:
27
C.av(iBr·. I. ~Zinc st~atus .3..l)d 1:;.t:>llul::1.r immunity in pí~dia·crl.c
P., G. Good, F:.
::;•.?nsit.lvit~Y of T-cell and 8-·c~:>ll mitogenesis to ifl yii . .LQ. :!inc;
defi.ci¡.::.:ncy. C1~d.l. Imrn1.1nol.. ~l.: 203. 'l9Bl.
54. i.:'.'r·.dmor·. T. F'eevaluG.ttion (;f :=.1nc def.i.ciericy of l::onca11avalir1 A
.lnduc:ed rat_ spl~•en lymphocyle prolit'eration. J. Nulr. U-1:
95.3. 1 ~084.
55. Blazsek, I. ' Mal.he, G. Zinc immunily. Biom1-?'d.
l''hd.r maco t. her . ~..Q: L 87, 1 984-.
5f:i. Fr;.:i.kc~r-, P.~ J~:tr·dieu. P., Cook, J. Zinc defic1ency and immune
57.
functi•.:>n. Ar ch. D<'Jrmal.oi. 123: 1.699, 1981.
F'. ' (31-::.•r shwi ri, M.' Good, R.' Prasad,
Interrel.:;..l.1onships beCween zinc and i.mmtme funcl.ion.
Pror:-. 4~: 1474, l98b.
A.
Fed.
5~3. Coss;.:"'ck. 2. T lymphocyle disfunclion irl t..he elderly associat.ed
wi. t_ 1·1 z1 ne del í.c i .;,ne y .;.nd subnorm.?1 nuc l eoside phosphoryl ase
activ1ty: effect of zinc suppl~nentalion. Eur. J. Cancer Clin.
28
.. ,
Lnw1 .. y, O. Farr, A. . F~dnda.i 1, R. Prot..f.::in
m~~-·asur·ernent. wi.t.h thi?. Fol.i.11 phr?nol r-eagent .. _T. B.iol. Ch.em. 193:
265, 19~;)1.
61. F't)lson, A.~ Rusell, 8. A ch~r1sitc.imelr.ic method for d1S-l.er·mit)ing
Ll"P.:1 pc.)sii.iun. t.:if opLimum proportions in t.he double-diffusion
.Er1 Methods i.n Immunology and Immunochernislry,
W.illi.:.ms, C. and Ch.;,se, M. Ceds.). Academic Press, Inc. ~~ew
p. 186, 1971.
G2. Manci ni, G.' Vaét .. m-8.n, J.' C-3rbonara, A.' HEo>rmans. J.
J mmuni:>e:hemical cuantifi.cation of ant.eigens by single radial
immunc•difusi•::>n. Imrn1inochen1. ~: 235, l965.
63. Boyt1m. A. Tsol.at.ton or mo1~onuclear cells and granulocytes rrom
human blood. Isol«l.ion of rnononuc.l ear by one
1. •• e11tcifu•;i.-')t..ion Z:tlld of tJr~nulocyt~es by combir1íng ce.~nlrifugal.ion
.-::tnd sedimr~ntr.\tion at g_., Sc;i.nd. J. C:iin. Lab. Invt~St.... 21:
77, 1967.
Ph.i 1 i ps, H. Dye exclL1tion t<?st.s for vi<tb.\lily. ~O. Tissue
Cultu1·e Methods and Ap.licaLior-is. Krause and M. Pat.terson
(ecb.). Academic pt--<?SS. New York, p. 40•3, tC373.
67. :3i'-~'.J'~l ~ S. Est:..\dtsticd no pé1.r .. .:.t.11H;.lrica. TriJl;~s. CEd.), M1-'?xico,
p.14.3. l~.;l/ó.
68. Duchal.:?au~ J., Del~spl-?Ss~, G., Vereecké, P. Influer1ce of oral
zi.nc_ s1Jppl8trv2nt-atiein r.)n 1-hf~ lymphc1cytB> responsFS> lo milogens óf
rH:>rmal subject.s. Am . .J. Clin. l~ut.r. ~_1: 88, 1981.
59. Wade. S., Lt.•monrüer, D. Early nulri tional experiment.s: effect.s
on t.h~ humoral and cellular immune response in mica . .J. Nut.r.
:U..2-: i 1 31 , 19!:<3.
70. C~::...vd~.r·, A .. 8abaca.n~ E., Gozdasoglu, S .. Ei-tan, J., Cinl> S.~
/>.rcas•:iy. 1,., E1·•.em, U. Zinc and anergy .in pediat.ríc Hodgkí1~'s
71. Ev.ans. G. funct i 01~ in zinc absorplion and
t. r a.nspor t.. Pr oc. Soc. E:-:p. Bi ol. Med. 151: 77'3, 1976.
30
D. P. Ber· ma r1 ~ M. Zinc
rne-t.abol.i.srn tn hum'"'lns; a ki.n8t-ic mr:::1del. Am. J. Physlol. 237:
75. G~?t t. i ns, P. , Cunni ngham, L. A uni que pai r· of zi ne bi ndi ng
sil•o•s in Lhe humar) e12
-rnacr·oglobuli11 t.;,lrarner. 37
anr:\ Cl
NHP sl1.1dy. Bi<)Chérn. 2'3: 5004, 1986.
7tJ. Y .. :ich1)i n, s LesLer, E. I nhi bi Li on of human l yrnphocyte
l1·ansrormation by human alpha-foetoprotei11 CHAFP); comp8rison
of ÍC;E•Lal and hepaloma HAFP and \dnc?Lic sLuclies l)i LQ vilro
irnm•J11osuppr<,>sion. Clin. Exp. Immunol. f.:§: 48<L 1976.
7'7. Y¿H.::.hr1ín. S:. Do:-?monstr·:.:1Lion of the ir1h.ibit0ry E•fiecl of human
protein on .LD. l.ransfOrmalio11 of human
ly1nph,:.cytes. Prr-Y:. Natl. Acad. Sci. J..ª: 2857, 1976.
31
E-sLr· í. r1, 1-f. A.
/Li. H'2nderson, f' .. M.
lyrnphocyt,.e~s -An ()V(-:1--v1 l?'.N. Proc. :Soc. Exp. Biol. t.,.!..:.~d. D.1~: 413~
~:tn ÚU\•Jd, P.~ f·:ellehP.r·, J.~ Guíllou, P. T-lymphocyt..e subsets and
i nt.~·:,r l euk .i ri-2 r.irodt..!c: t .Í. l)n in zinc.:: dc.,.f i ci ~nt r at_ s. Br.
ni. ::.:cud~:~r~i, F. Diff·~rent..ictl F=.:>ff,-:;.c··ts of copper and zinc ori huma.r1
pr: .. rif)hF?.r·cil b.Lc1od monocyte cytokine secr~:::-liori. Cell. Irnmunol.
1 C~Q: .;91 , :L s1~;0.
82. Scud.-,ri., P .• Dorr, R .. Liddil, J., Finley, P., Meltzer, P.,
A. Rybski, J. Alpha-globul ins suppness human
leulocyte tumor necrosis í'acto1· secretiol). Eur. J. Imrnunol.
1.2: ·;.J.39, 19B9.
83. 00 F'asqua1 e--J-8..rdieu. P.~ FrakE-r ~ f·. Tht? r·ole ci( cc.1r·ti.cost0rone
in t.he loss in 1.mmun{~ funr:t.iOI) in t..he zirlc-deficienl A/.J
H\l .. )\.lSC:: ... Nut.r. l(J.B_: 184.7. :L979.
84. Fosnnre, G. Zinc. tox1cily. Arn. J. C:lin. Nutr" ~L.: 225, 1990,