Проведение поведенческих

экспериментов в условиях SPF вивария

Заведующий виварно-эксперименальным комплексом

НИИ Митоинженерии МГУ, к.б.н. Ловать М.Л.

Исследование поведения животных

• Доклиника:специфическая активностьскрининг

• Фундаментальные исследования:ЭтологияНейробиологияФармакология

Специфика постановки поведенческих опытов

•Плотный контакт с животными•Большая продолжительность работ•Большое количество животных•Громоздкое оборудование, непосредственно контактирующее с животными•Риск инфицирования исследователя и животного•Физическая, психическая нагрузка

•Необходимость поддерживать одинаковые условия в течение всего эксперимента (требования к помещению)•Жесткие временные рамки опыта (протокол)•Высокая субъективность измерений (СОПы)•Невозможность повторения опыта (отклонения)•Сложность интерпретации поведения (комиссия по биоэтике)

Решающее значение следования принципам GLP:

Проблемы в содержании животных

Проблемы микроклимата:

• Колебания температуры, влажности

• Плохая вентиляция• Неравномерное

освещение• Отсутствие нормального

суточного ритма у животных

Проблемы ухода за животными:

• отсутствие воды, • некачественный корм и

нестандартная вода, • пылящая подстилка, • запах аммиака• нерегулярное посещение

животных• заболевания животных

(диарея, клещ, гепатит мышей и крыс и т.п.)

Искажение результатов научных исследований

ID 001 002 003Customer ID 11. 12. 13.RAT ASSESSMENT PLUSELISA SEND - - -ELISA PVM - - -ELISA SDAV/RCV - - +

ELISA KRV - - -ELISA H-1 - - -ELISA GD-7 - - -ELISA RE0-3 - - -ELISA MPUL - - +ELISA LCMV - - -

ELISA MAD 1+2 - - -

ELISA HANT - - -ELISA CARB - - -ELISA CPIL - - +ELISA ECUN - - -ELISA NS-1ELISA NS-1 - - +IFA SDAV/RCV

IFA SDAV/RCV ++

IFA KRVIFA KRV ++IFA MPULIFA MPUL +IFA CPILIFA CPIL ++

IFA RPV

IFA RPV +++

Что для нас означают стандарты GLP: (Good Laboratory Practice -надлежащая лабораторная практика)

• Система норм, правил и указаний, для получения достоверного и воспроизводимого результата лабораторных исследований.

• Животное = биологическая модель для получения таких результатов

• Главная задача GLP - обеспечить возможность полного прослеживания и восстановления всего хода исследования по бумагам.

Оптимально работать на животных SPF категории* SPF (Specific Pathogen Free) – категория животных с контролируемой микрофлорой

Конвенциональные животные – здоровые животные, содержащиеся по стандартам GLP, у которых микрофлора не мониторируется (а не с помойки)

ПОДДЕРЖАНИЕ SPF-СТАТУСА ВОЗМОЖНО ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ:•Гнотоизолятора

•Системы индивидуально вентилируемых камер (IVC)

•Вивария барьерного типа

1. Достаточно большое пространство для проведения эксперимента

2. Защита от заражения в процессе тестирования, транспортировки,

манипуляций

3. Сведение различий в условиях содержания и опыта к минимуму

(минимальность адаптации животных)

4. Возможность проведения нескольких тестов одновременно (в том числе

в хронических экспериментах)

5. Возможность работы нескольких экспериментаторов одновременно

Требования к блоку исследования поведения:

Еженедельная дезинфекция оборудования, помещений

Мы: виварно-экспериментальный комплекс НИИ Митоинженерии МГУ - барьерного типа

Три технологически разделенных блока, общей площадью 610 кв.м.

1.Административно-бытовой комплекс2.Технологический сектор3.SPF-зона

В виварии контролируются условия содержания животных :

избыточное давление в SPF зоне- 7-15 Павоздухообмен – 10-12 объемов/час

температура – 22+2Свлажность - 30-70%

световой день - 12 часов

системаGLP-SCADA (параметры микроклимата,

перемещения, доступ)

Резервирование, мониторинг всех

процессов:

водавоздухэл-во

материалылюди

Особенности оснащения помещений для поведенческих экспериментов

• Зонирование лаборатории SPF• Соседство с технологической

зоной (СО2 наркоз, компьютер, установки)

• Возможность дезинфекции помещений и крупного оборудования (УФ, Н2О2)

Контроль качества дезинфекции:

Экспресс АТФ- тестМикробиологический мониторингHeath monitoring сентинел

! Большие затраты !

Разборный модуль для исследования поведения

ООО «НПК Открытая Наука»

- Оснащенность «под ключ»-Быстрая сборка в любом помещении-Простота монтажа-Легкость обслуживания-Стандартность условий- Взаимозаменяемость установок (например,хирургия-поведение-эмбриология)-Относительно невысокая цена

! Для поддержания SPF- статуса должна комплектоваться системой обеспечения и дезинфекции

«SPF –капсула» площадью 18 м2 (пример)

1.- поведенческие установки2. стол операторов3. зона передержки и манипуляции с животными (ламинар)4. Склад «чистый»5. Стол, мойка и стеллажи для «грязных» предметов и манипуляций6. Банкетка (переобувание) и вешалка (внутренняя одежда) 7. Душ

фильтрфильтр

приток

приток

вытя

жка

56

7

Сопутствующее оснащение:

1.Мойка большая2.Стиральная машина

3.Стерилизатор4.Склады5.Архивы

6.офис

• Компактное, разборное (складное)• Не содержит хрупких, мелких,

пористых деталей, полостей (легко моется),

• Не боится стерилизации (едких р-ров или температуры),

• Соответствует стандартным методикам эксперимента

Требования к оборудованию

Спасибо за внимание!