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(19) 한민 특허청(KR)
(12) 등 특허공보(B1)
(45) 공고 2014 09월01
(11) 등 10-1433095
(24) 등 2014 08월18
(51) 특허 (Int. Cl.)
A01H 5/00 (2006.01)(21) 원 10-2014-0082833
(22) 원 2014 07월03
심사청 2014 07월03
(56) 행 사문헌
KR1020090121633 A
KR1020050036363 A
KR1020130083630 A
KR1020070063179 A
(73) 특허
시아진지 한 사
주 역시 28 7-4 ( 동)
(72)
변동
주 역시 상무 32
(74) 리
규
체 청 항 : 2 항 심사 : 민
(54) 신 진지
(57) 약
본 식물체 가 1~3 cm, 엽 가 0.5~1.2 cm, 엽 색 진한 색 RHS(Royal Horticultural
Society) 134A, 엽신 가 1~3 cm, 엽신 색 진한 색 RHS(Royal Horticultural Society) 141A 지하포복
경에 는 뿌리 가 30~50 cm 특징 가지 , 엽 엽신에 없고, 색 지 간 12월 지
지 고, 내습 강하여 하 2 업에도 병변 상 없 식 하게 진행 고, 주 식
태는 지상포복경 또는 지하경 양 식 , 또한 씨앗 아에 해 도 식하는 신 진지(Gin
gi)에 한 것 , 색도가 고 낮게 는 특 어 가 필 없고 매트 우 하여
개 지, 공원, 경 또는 골프 과 같 피복 또는 필 하는 지역에 하게 사 할 , 나
아가 우 한 한 해 한 산업에도 하게 사 는 과가 다.
도 - 도4
등록특허 10-1433095
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특허청
청 항 1
하 (a) 내지 (f) 태 특징 가지 , 엽 엽신에 없고, 색 지 간 12월 지 지 고,
내습 강하여 하 2 업에도 병변 상 없 식 하게 진행 고, 주 식 태는 지상
포복경 또는 지하경 양 식 , 또한 씨앗 아에 해 도 식하는 신 진지(Gin gi)( 탁
: KCTC 12616BP):
(a) 식물체 : 1~3 cm
(b) 엽 : 0.5~1.2 cm
(c) 엽 색: 진한 색 RHS(Royal Horticultural Society) 134A
(d) 엽신 : 1~3 cm
(e) 엽신 색: 진한 색 RHS(Royal Horticultural Society) 141A
(f) 지하포복경에 는 뿌리 : 30~50 cm.
청 항 2
삭
청 항 3
1항에 어 , 상 신 진지는 열 1 프 사 하여 RAPD(Random Amplified
Polymorphic DNA) 하는 경우 1.5kb 1.8kb 특 드 나타내지 않고, 열 2 프 사
하여 RAPD 하는 경우 1.3kb 2.2kb 특 드 나타내지 않고, 열 3 프 사 하여
RAPD 하는 경우 1.0kb 2.7kb 특 드 나타내지 않는 것 특징 하는 신 진지.
야
본 신 진지에 한 것 , 욱 상 하게는 식물체 가 1~3 cm, 엽 가 0.5~1.2[0001]
cm, 엽 색 진한 색 RHS(Royal Horticultural Society) 134A, 엽신 가 1~3 cm, 엽신 색 진한 색
RHS(Royal Horticultural Society) 141A, 지하포복경에 는 뿌리 가 30~50 cm 특징 가지 ,
엽 엽신에 없고, 색 지 간 12월 지 지 고, 내습 강하여 하 2 업에도
병변 상 없 식 하게 진행 고, 주 식 태는 지상포복경 또는 지하경 양 식 , 또한
씨앗 아에 해 도 식하는 "신 진지(Gin gi)"에 한 것 다.
경
본과 다 생 식물 질감 매우 본식물 짧게 상태 지 고 는 것과 원[0002]
지 말한다. 계 난 , , 한 지역에 리 포 어 거 600 (genus)에 약
5000여 (species) 재하고, 후 건에 내한 강약에 해 난지 (warm season
turfgrass) 한지 (cool season turfgrass) 다. 난지 는 남 하고 건 하거나 습
한 지 에 주 재 는 한지 는 고 건 하거나 습 한 지 에 주 재
다. 난지 는 내에 많 생하는 한 (Zoysia grass)가 고, 한지 는
블루그 (Kentucky bluegrass), 트그 (Bentgrass) 등 양 가 에 한다.
한 (Zoysia grass)는 난지 한 포함한 극동아시아에 리 생하고 고, 한 에는 들[0003]
(Zoysia japonica), (Zoysia matrella), 비 드 (Zoysia tenuifolia), 갯 (Zoysia sinica),
(Zoysia macrostachya) 등 5~6 가 포 어 는 것 보고 어 다. 들 는 생 강하고,
한 에 사 하는 차지한다. 엽 비는 4~7㎜ 고, 는 10~20㎝ 다. 한
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는 우리나 후에 가 합한 , 다 한지 양 난지 보다 경 뛰어날 뿐
만 아니 특 내건 , 내답압 , 내한 , 내 , 내염 등 강한 것 알 다.
근에 늘 도가 빠 고 한 , 생 지 간 , [0004]
등 각 에 합 는 다양한 개 실하게 고 , 러한 시키 해
다 양계 신 들 등 하고 다. 미 경우 1905 한 에 심 갖고 미 무 과 학
들에 한 연 하여‘에 드(Emerald; 1955 )', ' 어(Meyer; 1951 )', '미드웨 트(Midwest;
1963 )' 등 양 식 과 ' 니 (Zenith)', 'J37', 'J36' 등과 같 식 (Ruemmele Engelke,
Grounds Maintenance, April, 92-126, 1990) 만들어 보 고 다. 그러나 내 경우 안양 지,
트 7, 건 , 등 뿐 개 에 한 연 는 에 비해 미미한 실 다.
도가 빠 고 한 , 생 지 간 , 등 각 에 [0005]
합 는 다양한 개 실하게 고 , 러한 건에 합할 뿐만 아니 내 양에
가 알맞고, 색 간 짧 단 극복하여 체할 는 특 가진 우 한 한
신 에 한 실 고 다.
뿐만 아니 근에는 후 변 에 해 난 사 등 경에 한 계 심과 민생 변 해[0006]
도시 경 경 하 는 시도들 고 어 색도시 도가 가함에 에 필 한
질 가 가하고 다.
한 등 특허 1016249 에는 '한 신 천' 개시 어 고, 한 공개특허 2013-0083630 에는[0007]
' 신 그린 아'가 개시 어 나, 본 신 진지에 해 는 개시 가 없다.
내
해결하 는 과
본 상 같 에 해 도 것 , 주 남 근지역에 한 시 우[0008]
해 신 하고, 태 학 특 비 하여, 엽색 진한 색(RHS(Royal
Horticultural Society) 141A) , 색 간 고 지상 에 식물체 가 3 cm 하 할 뿐
아니 매트 우 한 하고 난지 신 '진지'(Gin gi) 하여 본 하
다.
과 해결 단
상 과 해결하 해, 본 하 태 특징 가지 , 엽 엽신에 없고, 색 지 간[0009]
12월 지 지 고, 내습 강하여 하 2 업에도 병변 상 없 식 하게 진행
고, 주 식 태는 지상포복경 또는 지하경 양 식 , 또한 씨앗 아에 해 도 식하는
신 진지(Gin gi) 공한다:
(a) 식물체 : 1~3 cm[0010]
(b) 엽 : 0.5~1.2 cm[0011]
(c) 엽 색: 진한 색 RHS(Royal Horticultural Society) 134A[0012]
(d) 엽신 : 1~3 cm[0013]
(e) 엽신 색: 진한 색 RHS(Royal Horticultural Society) 141A [0014]
(f) 지하포복경에 는 뿌리 : 30~50 cm.[0015]
과
본 에 신 진지는 색도가 고 낮게 는 특 어 가 필 없고 매[0016]
트 우 하여 개 지, 공원, 경 또는 골프 과 같 피복 또는 필 하는 지역에 하게
사 할 , 나아가 우 한 한 해 한 산업에도 하게 사
는 과가 다. 또한, 뿌리가 튼튼하고 어 사 지하는 도 다.
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도 간단한
도 1 신 진지 러 (A) 신 (B) 한 사진 다.[0017]
도 2는 신 진지 포 경 나타내는 사진(상) 진지 포 경 사진 근 한 사진(하) 다.
도 3 신 진지(상) (하) 생 상태 비 하여 나타내는 사진 다. 진지는 지상 식
물체 가 3 cm 내 할 필 가 없 진한 색 지하는 , 는 게
색 나타낸다.
도 4는 신 진지(상) 비 (하) 포복경 생 양 비 하여 나타내는 사진 다. 진지
보다 가 2 상 다.
도 5는 신 진지(상) 비 (하) 매트(mat) 실험 포 경 나타내는 사진 다. 진지
는 엽 가 리만 약간 말리는 상 는 , 는 엽신과 엽 후 엽신 말리는
상 었다.
도 6 신 진지(상) (하) 1 한 후 생 상태 비 하여 나타내는 사진 다.
진지는 여 할 필 가 없 진한 색 , 는 색 고 뿐만 아니 엽
도가 매우 빠 것 알 다.
도 7 신 진지 포 생 상태 나타내는 사진 다. 진지 (상) 가 찰 지 않 나,
개체(하)는 가 맺 는 생 주 하여 씨앗에 한 식도 가능함 하 다.
도 8 신 진지 포 생 상태 나타내는 사진 다. 2013.11.14에 한 것 늦가 에도 하
고 는 짙 색 고 다.
도 9는 진지(1), (2) 들 (3) 에 게 DNA 동 사진(A) Nanodrop
한 DNA 그 프도(B) 나타낸 것 다.
도 10 진지, 들 상 특 프 (OPB-7, OPB-8, OPB-11) 한 RAPD(Random
amplified polymorphic DNA) 통해 상 한 특 드 찰한 결과 나타낸 것 다.
실시하 한 체 내
본 달 하 하여, 본 하 태 특징 가지 , 엽 엽신에 없고, 색[0018]
지 간 12월 지 지 고, 내습 강하여 하 2 업에도 병변 상 없 식 하게
진행 고, 주 식 태는 지상포복경 또는 지하경 양 식 , 또한 씨앗 아에 해 도 식하는
신 진지(Gin gi) 공한다:
(a) 식물체 : 1~3 cm[0019]
(b) 엽 : 0.5~1.2 cm[0020]
(c) 엽 색: 진한 색 RHS(Royal Horticultural Society) 134A[0021]
(d) 엽신 : 1~3 cm[0022]
(e) 엽신 색: 진한 색 RHS(Royal Horticultural Society) 141A [0023]
(f) 지하포복경에 는 뿌리 : 30~50 cm.[0024]
본 신 진지는 2014 7월 1 한 생 공학연 원에 탁 KCTC 12616BP 탁 었다.[0025]
본 에 신 진지는 주 역시 남 근지역에 한 , 지 들[0026]
시 , 들 다 묽 합식재하는 식 재 한 것 취사 택과 연
가 가능하도 하는 식 도하고 우 해 실험 통하여 얻어진 들 변
체 하여 하 다.
본 에 신 진지는, 지상포복경과 지하경 양 식하고, 씨는 [0027]
맺 지 않 나, 개체에 는 씨가 늦가 지 맺 는 생 주 하여 양 식
에 생 건 맞 지 에 도 씨앗에 한 식도 가능하 다. 또한 당업계에 주지 어 는 직 양
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등에 해 무 복 생식시킬 다.
상 진지는 주 역시 지역에 12월 지 색 지하여 색 지 간 고, 11월 지 지상포복경[0028]
하고, 내습 강하여 하 2 업에도 병변 상 없 식 하게 진행 었다.
또한, 본 신 진지는 지상 식물체 가 3 cm 상 하지 않아 할 필 가[0029]
없고, 지상 식물체 색 착색 도가 비 하여 연하게 별 도 진한
색(RHS(Royal Horticultural Society) 141A) , 엽 엽신 찰 지 않고, 질감(Textur
e) 고, 튼튼하 , 엽신 단독포 할 는 엽과 90˚ 지하나 도가 아 매트(mat) 진행
시에는 각도가 아지고, 는 엽신과 엽 후 엽신 말리는 상 나 원
엽 가 리만 약간 말리는 상 고, 색도가 계 변 에 진해지 , 지하 포복경에
는 뿌리 가 30~50 cm 었다.
본 에 어 , 상 신 진지는 열 1 프 사 하여 RAPD 하는 경우 1.5kb [0030]
1.8kb 특 드 나타내지 않고, 열 2 프 사 하여 RAPD 하는 경우 1.3kb 2.2kb
특 드 나타내지 않고, 열 3 프 사 하여 RAPD 하는 경우 1.0kb 2.7kb 특
드 나타내지 않는 것 특징 한다.
본 에 RAPD 결과는 본 진지가 다 뚜 별 는 료[0031]
다.
상 RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA)는 PCR- 마커 고 할 는 , 는 게 DNA 상에 약[0032]
10-mer 프 PCR에 해 폭하여 하는 마커다. 는 RFLP(Restriction
Fragment Length Polymorphism) 는 달리 폭 DNA량 하여 동 원 (radioisotope) 학 지
(chemically-labelled) 프 브(probe) 필 하지 않고, 리 상에 에티듐 브 마 드(ethidium
bromide) 처리하여 과 없 DNA 변 할 다.
하, 본 실시 에 해 상 한다. 단, 하 실시 는 본 시하는 것 뿐, 본 [0033]
내 하 실시 에 한 는 것 아니다.
<실시 1> 신 진지 과 집[0034]
하 1에 재한 같 , 주 역시 남 근지역에 색 착색 도가 강한 별하여[0035]
신 하고 하 다. 개체 엽색 진한 집한 결과 5 한 들 2
하여 2009 7월 2012 5월 지 별 다 묶어 합 식재하고, 연
도하 다. 체 2009 도 10월 경 매해 5 들 2 척 후 다
하여 실 묶 후에 지에 식재하 묶 다 다시 폼 에 식하고 실내 실에 4
월 말 지 재 하여 없앴다. 게 함 씨앗 찰할 없다는 한계
극복할 었다. 경여건 하여 연 루어질 게 한 것 한
들 다 실내에 는 3월 동 시 에 찰하 다. 키가
연 리 하여 2012 5월 계통 하게 었 상 연 특 하게
지 하 다. 들 는 주 역시지역( 평동)에 재한 포 에 양 식 식
하 다.
1
집지역[0036] 남도
남도 하
남도 삼
남도 삼계
도 고창 고창
주 역시 평동
집 엽색 RHS(Royal Horticultural Society) 134 보다 진한
집 7 (5 들 2 )
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2012 ~2013 과 에 한 차 도 병 해에 지 않았 , 체가 지 않고 동 체만 [0037]
식하여 안 보하고 고, RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA) 통한 신 진지
생물학 변 료에 검 는 같 한 들 는 연하게 차 보 는 것
별 가지고 다. 그리고 상 균 ( 도, 색 등) 지하 다. 또한, 포 에
2 하는 포 과 하지 않 포 생리 해는 생하지 않았 나 한 포
2 상 하 다. 내습 강하여 하 2 업에도 병변 상 없 식 하게 진행
었다. 도 해 는 4월 말 후 는 주 가 필 하나 동 (12월-3월
말)에는 1주 에 1 도가 한 것 었다.
상 특 사 DNA 마커 개 하여 얻어진 , 진지 직 양(식물 포 양 러[0038]
(callus))하여 개체 특 연 과 행한 후, 한 생 공학연 원에 2014 7월 1 탁하 다
( 탁 KCTC 12616BP).
러 도는 다 과 같 행하 다. 보한 시료 는 물에 척한 다 마[0039]
가 단하 다. 단 시료 10% 상업 액에 약 20 간 들어주 살균
실시하 다. 살균 마 시료 균 3 척하 다. 상 시료 무균 업 내에
균 여과지 하여 남아 는 거한 다 하여 약 5 mm 크 단하여 지에
상함 러 도하 다. 러 도 지는 MS (Murashige & Skoog) 지에 2,4-D 1 mg/l가 첨가
지 본 지 사 하 다. 마 편 각 지에 상한 다 약 1주 간격 러 여
미경하에 찰하 다. 아울러 마 편 신 도 해 마 편 MS (Murashige &
Skoog) 지에 BA가 1 mg/l 첨가 지에 양 개시하 다. 각각 양 25-26℃ 항 에 암 양 실
시하 다. 약 4주 양 후 2,4-D가 첨가 지에 양 마 편 색 포 가 었
후 동 한 지에 계 양 통해 러 식하 다(도 1).
<실시 2> 신 진지 태 변 [0040]
상 실시 1에 별 한 들 변 신 진지 태 특 포[0041]
에 실험 찰하 , 그 결과 하 2 도 2 내지 8에 나타내었다.
2
신 진지 간 태 특징 비[0042]
특징 진지 ( ) 비고
식물체 3 cm 하 5~7 cm 짧
어린식물 태 0.5~1 cm 1~3 cm
엽 1.2 cm 하 1.5 cm 하
엽 색 green group 134A green group 134B 남 업 원RHS(Royal
HorticulturalSociety) 챠트
하여
엽 도 찰 가 약간 드문
엽신 3 cm 하 3~10 cm
엽신 비 4 mm 하 4 mm 하
엽신 색 착색 도 green group 141A green group 134A
엽신 도 드문 약간 드문
엽신 도 찰 가 약간 드문
엽신 엽과 각도 간 사진 참
엽 3 cm 하 3~10 cm
엽 비 4 mm 하 4 mm 하
2 cm 하
비 2 mm 하
경 지 과 직립각도 직립 90°
삭 2 cm 하
등록특허 10-1433095
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삭 10~16
한 삭 안 시아닌 착색도
RHS(RoyalHorticulturalSociety) 152c
미 한 삭 안 시아닌 착색도
RHS(RoyalHorticulturalSociety) 150d
양 10~16
꽃 10~16
암꽃 10~16
약 5 mm 하
약 비 5 mm 하
5 mm 하
암 3 mm 하
1 mm 하
열매 태
씨 연 찰 가하여 상 타가 누 .[0043]
본 신 진지는 지상 식물체 아 에는 사하나 한 개체는 들[0044]
지 특 하 다. 상 사한 , 후 , 들 , 지
상 하 다.
사 결과, 진지는 지상포복경과 지하경 양 식하고, 지상 식물체 가 3cm 상 하지 않아[0045]
할 필 가 없고, 지상 식물체 색 착색 도가 비 하여 연하게 별
도 진한 색(RHS(Royal Horticultural Society) 141A) 변하지 않고 함 하 다(도 2
내지 8).
진지 경우에는 엽 엽신 찰 지 않고, 질감(Texture) 고, 튼튼하 , 지하 포복경에 [0046]
는 뿌리 가 30~50 cm 특징들 었다( 2 도 4).
도 5에 보 는 같 진지 엽신 단독포 할 는 엽과 90° 지하나 도가 아 매트[0047]
(mat) 진행시에는 각도가 아지고, 는 엽신과 엽 후 엽신 말리는 상
나 신 엽 가 리만 약간 말리는 상 었다.
또한, 진지는 씨가 맺 지 않 나, 개체에 는 씨가 늦가 지 맺[0048]
는 생 주 하여 양 식 에 생 건 맞 지 에 도 씨앗(seed)에 한 식도 가능함
하 다(도 7). 진지는 색도가 색 간 고, 11월 지 지상포복경 하 , 색도가 계 변
에 진해 다(도 8).
<실시 3> 신 진지 게 DNA [0049]
진지, 들 채취한 후 막 사 에 액체 질 합하여 쇄하 다. 쇄 1.5ml [0050]
브에 고 DNeasy Plant Mini kit(Qiagen) 프 에 거해 DNA 하 다. 간단 재하 , 쇄
에 400㎕ AP1 4㎕ RNase A 액(100mg/ml) 주 하고 합한 후 65℃ 양 에 10 동안
하 다. 130㎕ P3 주 하고 얼 에 5 동안 양한 후, 14000rpm 5 동안 원심 리하 다.
QIAshredder Mini spin column에 물 주 하고 14000rpm 2 동안 원심 리하 다. 450㎕ 액
1.5ml 브에 675㎕ AW1 에 첨가하고 합하 다. 650㎕ 합물 핀 컬럼에 주 하여 8000rpm, 1
동안 원심 리 후에 액 다. 핀 컬럼에 리 DNA 척 해 500㎕ AW2 주 하고
8000rpm, 1 동안 원심 리하 다. 다시 14000rpm 2 동안 원심 리하여 핀 컬럼 막 건 하 다.
핀 컬럼 1.5ml 브에 고 100㎕ AE 에 주 하여 상 에 5 동안 한 후 8000rpm 원심 리
하여 게 DNA 하 다. 게 DNA 1.5%(w/v) 아가 겔에 하여 재여 하고(도
9A), 그 결과 3 도 9B에 보 는 같 Nanodrop 하여 게 DNA 피크가 었고,
는 상 DNA가 었 미한다.
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3
연[0051] 시료 DNA 도(ng/㎕) 260/280 260/230 양(ng)
1 진지 30.1 1.86 3.07 1505
2 29.4 1.74 3.61 1470
3 들 18.9 1.76 2.78 945
<실시 4> RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA) 통한 신 진지 생물학 변 [0052]
들 , 본 신 진지 상 특 프 한 RAPD 통해[0053]
진지 학 특징 규 하고 하 다. 상 실시 에 한 게 DNA RAPD 한 PCR 주
사 하 다. PCR Minicycler(MJ Research Inc.) 사 하여 한 DNA 폭하 다. PCR 액
10ng DNA, 2uM 프 , 2x Multiplex PCR Master Mix Q-Solution 액 합하여 양 25㎕
하 다. PCR 건 95℃(5 ), [95℃(1 ), 38℃(1 30 ), 72℃(2 ), 45cycle], 68℃(10 )
었다. 5㎕ PCR 산물과 1㎕ Gelstar 핵산 염색액 합한 에 1x TAE가 포함 1.5%(w/v) 아가 겔에
50 볼트 3시간 동한 후 Gel document 시 (Vilber) 폭 DNA 했다.
상 PCR에는 한 학 지 24 2 ( , 2010) 문 근거 하여 OPB-07(5'-GGTGACGCAG-3'; 열[0054]
1), OPB-08(5'-GTCCACACGG-3'; 열 2) OPB-11(5'-GTAGACCCGT-3'; 열 3) 프
(Bioneer) 별하여 사 하 다.
신 진지 RAPD PCR 결과는 하 4 도 10에 약하 다. OPB-07 한 결과에 진지[0055]
는 들 에 비해 "b, c"가 찰 지 않았다. OPB-08 한 결과에 진지는 들
에 비해 "b, c"가 찰 지 않았다. OPB-11 한 결과에 진지 는 들 에 비해 "a,
d"가 찰 지 않았다. 합 OPB-07, OPB-08 OPB-11 사 하여 할 경우 진지는 들
다 게 DNA 찰 어 신 것 었다.
4
신 진지 RAPD 결과 얻 다 드 타[0056]
OPB-7 OPB-8 OPB-11
a b c a b c a b c d
진지 1 0 0 1 0 0 0 1 1 0
1 1 1 1 1 1 0 1 1 1
들 1 1 0 1 0 1 1 1 0 0
1 드 재, 0 드 재하지 않 . [0057]
탁
[0058]
탁 : 한 생 공학연 원
탁 : KCTC12616BP
탁 : 20140701
등록특허 10-1433095
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도
도 1
도 2
등록특허 10-1433095
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도 3
도 4
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도 5
도 6
등록특허 10-1433095
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도 7
도 8
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도 9
도 10
열
<110> Zoysia Gingi limited liability company
<120> Zoysia japonica Steud Gin gi
<130> PN14128
<160> 3
<170> KopatentIn 1.71
<210> 1
<211> 10
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220><223> OPB-07 primer
<400> 1
ggtgacgcag 10
<210> 2
등록특허 10-1433095
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<211> 10
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220><223> OPB-08 primer
<400> 2
gtccacacgg 10
<210> 3
<211> 10
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220><223> OPB-11 primer
<400> 3
gtagacccgt 10
등록특허 10-1433095
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