interceptação do wheat mosaic virus (w mo v) no brasil em sementes de milho provenientes dos...

Interceptação do Wheat mosaic virus (WMoV) no Brasil em

sementes de milho provenientes dos Estados Unidos

Márcio Martinello SanchesEmbrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia

Caracterização do Problema

Vírus em Poaceae

● Hospedeiros de importância econômica

● Vetores

● Sintomas similares

● Vírus transmitidos por Aceria tosichella:

Wheat streak mosaic virus (WSMV)Wheat mosaic virus (Wmov) = High plains virusTriticum mosaic virus (TriMV)

Caracterização do ProblemaComplexo Aceria tosichella – vírus transmitidos“Patossistema em expansão na América do Sul”

Argentina: A. tosichella (2005) WSMV (2002), WMoV (2008), TriMV (2012) Brasil: A. tosichella (2006) WSMV (2010)

Uruguai: A. tosichella (2007)

Fotos: Douglas Lau

Wheat mosaic virus

Skare et al., 2006

Desenvolvimento métodos diagnose

Projeto cooperação bilateral Embrapa-INTA

Vírus transmitidos por semente (quarentena)

Testes de validação - WmoVPCR convencional (Lebas et al., 2005) – baixa sensibilidade

Real-time PCR – (presente trabalho)

WSMV- Detecção a partir de semente de trigo (PCR convencional) (Botelho et al., 2016)

PCR em tempo real- SYBR green

● Primers desenhados para WMoV

HPVFW414 5’ GAGTGCTGGTTTTTCTAAGGAGCACA 3’

HPVREV565 5’ CTGACCATAGGTGCCACAAGGTCTGA 3’

Amplificação até diluição 10-8 ng/μl

Análises quarentenárias

Interceptação de WMoV

Teste Elisa – absorbância limite

qPCR – Ct 30 e 35

Melting analysis – single peak

Sequenciamento: 99% - 100% de identidade com isolados do GenBank

Importância Econômica

● Milho: 50-60% das plantas infectadas não produzem espigas ou espigas possuem sementes imaturas; Redução produção até 75% em híbridos suscetíveis (E.U.A.);

● Infecta trigo, aveia, cevada e centeio;

● Sintomas podem ser mais severos que de WSMV, especialmente em infecções mistas;

● Doença emergente – 1°relato “High Plains” E.U.A. (1993) (relatos: Austrália, Argentina, Chile, China, Israel);

● Aumento na taxa de transmissão por semente em milho (4% nos E.U.A.)

● Até o momento, não há relatos da presença de WMoV no Brasil;

● O WMoV possui sintomas difíceis de se identificar, necessitando de analises sorológicas e moleculares para confirmação;

● Tem potencial de causar grandes danos à economia agrícola nacional.

Perspectivas

Redes de Monitoramento ?

Truol et al., 2009

Melhoramento preventivo?

Projetos de cooperação internacional

Lista de pragas quarentenárias ausentes

Inclusão?Monitoramento prévio?

Agradecimentos

Stephanie BotelhoMacária DuarteAndreza Barbosa

Douglas Lau – Embrapa Trigo

Denise Návia – Embrapa Cenargen

Graciela Truol – INTA/Argentina

Fernanda Rausch Fernandes – Embrapa Quarentena

Apoio Financeiro – Embrapa/INTA

Obrigado marcio.sanches@embrapa.br