タンパク質分解 - microsoftタンパク質分解特集 ub ユビキチン p.3...

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No.687 9 / 1 2019 p.03 p.31 研究室のフナコさん オススメ ATCC 汎用株化細胞 ペプチド合成受託サービス p.20 p.23 タンパク質分解 Ubiquitin Proteasome System and Autophagy degraded y Proteasome U i q u i t i n t r a n s f e r c a s c a d e

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  • No.6879/12019

    ▼ p.03

    p.31研究室のフナコさん

    オススメATCCⓇ汎用株化細胞ペプチド合成受託サービス

    p.20

    p.23

    タンパク質分解Ubiquitin Proteasome System and Autophagy

    degraded yProteasome

    U iquitin

    transfe

    r cascade

  • タンパク質分解特集Ub

    ユビキチン p.3

    蛍光標識ユビキチン/ユビキチン様タンパク質 p.3

    DUB 阻害用ユビキチン p.4

    ポリユビキチン鎖 p.4~5

    E1 E1 酵素 p.6

    E2E2 酵素 p.6~7

    E2scan Kit p.7

    E3E3 酵素 p.8

    E3 Ligase TR-FRET Ubiquitination Kit p.9

    DUB脱修飾酵素 p.10

    DUBscan Kit p.11

    ユビキチン関連プロテアーゼ p.11

    プロテアソーム

    プロテアソーム p.12

    プロテアソーム基質 p.12

    プロテアソーム活性測定キット p.13

    プロテアソーム阻害物質 p.13

    抗体ユビキチン関連抗体 p.14

    ユビキチン関連抗体アレイ p.14

    分解 システム

    NEWActive Degrader(PROTAC) p.15

    NEW標的タンパク質の分解誘導システム Piranha p.16

    オートファジー

    オートファジー誘導ペプチド p.17

    オートファジー/細胞毒性測定キット p.18

    オートファゴソームの構造を可視化するキット p.18

    オートファジー関連抗体 p.19

    オートファジー関連化合物 p.19

    細胞ATCC® 汎用株化細胞 NEW p.20セルストレーナー pluriStrainer NEW p.21

    ELISA

    CD274 / PD-L1 ELISA Kit NEW p.27CGRP ELISA Kit p.28PLBL2 ELISA Kit p.28Epidermal FABP ELISA Kit NEW p.28LCAT ELISA Kit NEW p.28遺伝子

    アデノウイルス/AAV 作製受託サービス p.21カスタム siRNA 合成受託サービス NEW p.22

    バイオ プロダクション

    Bioprocess Contaminant Analysis Kit NEW p.29

    ペプチド/タンパク質

    ペプチド合成受託サービス NEW p.23pET ベクターとコンピテントセルのセット p.24タンパク質発現用コンピテントセル p.24ゲル中のタンパク質を染色する試薬 QuickBlue p.25N 末端 6×His タグに対する抗体 p.25無細胞タンパク質合成キット p.25TEV Protease NEW p.26

    小型機器

    プログラマブルキーボード NEW p.29熱安定性に優れた保温装置 保温くん NEW p.30手をかざすとフタが開く小型廃棄缶 NEW p.30実体顕微鏡用 LED 照明装置 NEW p.32

    抗体蛍光免疫染色にオススメの蛍光標識二次抗体 NEW p.26サポリン標識 抗 p75 抗体 p.27FITC 標識 抗 CD38 抗体 p.27

    天然物 植物由来天然物の抽出・精製受託サービス p.31

    その他研究室のフナコさん p.31実施中のキャンペーン情報 p.31

    新製品・オススメ製品

    フナコシニュース2019年 9月 1日号(No.687)funakoshi news

    NOTE※本紙に記載されている価格は,2019 年 9 月 1 日現在です。表示価格に,消費税等は含まれていませ

    ん。一部価格が予告なく変更される場合がありますので,あらかじめご了承下さい。※本紙に掲載されている製品は研究用です。医薬品,診断用医薬品,食品,食品検査等の用途には使

    用できません。※ 印の製品は,「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律

    (通称:カルタヘナ法)」使用規制対象となりますので,ご使用に際しては規制に則し,適切にお取り扱い下さい。

    ※ 印の製品は,取り扱いに厳重な注意を要する製品であり,ご購入時に「使用目的確約書」が必要になります。ご注文の際は,「使用目的確約書」に直筆でご記入の上,販売店経由で当社までお送り下さい。確約書受領後に製品を発送させていただきます。また,これらの製品をご購入後は,鍵の掛かる場所での保管をお願いいたします。

    ※ 印の製品は,「毒物及び劇物取締法」に基づく医薬用外毒劇物です。法規制に従って,保管,廃棄等して下さい。

    ※ 印の製品は,毒性があるため,取り扱いに注意または厳重な注意が必要です。製品は,鍵の掛かる場所に保管して下さい。添付されているデータシートや商品ラベルをよくお読み下さい。

    ※ 印の製品には安全にご利用いただくための警告ラベルが貼られています。表示に従って安全対策を実施して下さい。

    ※ 印は,液体窒素中での保存を要する製品です。ドライアイス包装で配送していますが,製品到着後,直ちに液体窒素中で保存して下さい。

    ※ 印は,-80℃ での保存を要する製品です。ドライアイス包装で配送していますが,製品到着後,直ちに-80℃ のフリーザー等に保存して下さい。

    ※#以下の英数字は,商品コードを示します。※外観・仕様は改善のため,予告なく変更することがあります。※R&D Systems はテクネ コーポレイションの登録商標です。

    使用に当たっては同社の許可が必要な場合があります。※記載されている会社および商品名は,各社の商標または登録商標です。※本紙には各メーカーから提供された画像・図表が掲載されています。なお,画像・図表の著作権は

    各メーカーが保有しています。※ご注文の際は,[品名,メーカー,商品コード,包装,数量]をお知らせ下さい。

  • ユビキチン成熟型ユビキチンの組換え体タンパク質です。ユビキチン化アッセイに使用できます。

    ユビキチンは 76 アミノ酸からなる翻訳後修飾因子で,真核生物のすべての組織に広く発現しています。ユビキチン修飾(ユビキチン化)は,プロテアソームによるタンパク質分解,シグナル伝達,炎症応答,DNA 損傷修復などの生体内プロセスに関与しています。ユビキチン化反応は 3 つの酵素(E1 酵素,E2 酵素,E3 酵素)により段階的に触媒されます。

    M E M O

    Web ページ番号検索64982

    ユビキチン�

    蛍光標識ユビキチン/蛍光標識ユビキチン様タンパク質C末端に蛍光を標識したユビキチン/ユビキチン様タンパク質です。切断を受け,蛍光色素が遊離すると蛍光を発します。

    Web ページ番号検索67797

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Ubiquitin-AMC, Human, RecombinantSBB SBB-PS0043 50�μg�/ 42,000 SBB580430

    Ubiquitin-Rhodamine110, Human, RecombinantSBB SBB-PS0001 50�μg�/ 52,000 SBB580010

    NEDD8-AMC, Human, RecombinantSBB SBB-PS0044 50�μg�/ 52,000 SBB580440

    NEDD8-Rhodamine110, Human, RecombinantSBB SBB-PS0003 50�μg�/ 65,000 SBB580030

    SUMO1-Rhodamine110, Human, RecombinantSBB SBB-PS0028 50�μg�/ 65,000 SBB580280

    ●�生物種:Human●�産生:E.�coli●�分子量:44~150�kDa

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    p53 Protein, Ubiquitinated, His-tagged, Human, RecombinantSBB SBB-US0012 20�μg�/ 81,000 SBB080120

    Ubiquitin-AMC

    ●�生物種:Human●�産生:E.�coli●�分子量:8.6�kDa

    本製品をウェスタンブロットにより確認した。

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Ubiquitin, Human, RecombinantSBB050130 SBB SBB-UP0013 10�mg�/ 17,000

    N-terminus

    Lysine 63

    Lysine 48C-terminus

    関連製品 ユビキチン化 p53

    Ubiquitin-Rhodamine110

    フナコシニュース2019年 9月 1日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

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    掲載品はすべて研究用です

    3

  • DUB阻害用ユビキチン

    Web ページ番号検索67797

    Web ページ番号検索5609

    脱ユビキチン化酵素(DUB)を阻害するよう C 末端を様々に修飾されたユビキチンです。脱ユビキチン化酵素ファミリー UCH,USP,OTU,MJD は阻害しますが,JAMM metalloprotease は阻害しません。

    Ubiquitin-Aldehyde�

    Ubiquitin-Propargylamide�

    Ubiquitin-Vinyl Methyl Ester�

    Ubiquitin-Vinyl Sulfone�

    Ubiquitin-AMC を用いて脱ユビキチン化酵素 UCHL3 の酵素活性を測定した。Ubiquitin�Aldehyde の濃度を上げると,酵素活性が阻害される。

    0.1 nM Ub-Aldehyde17.5 nM Ub-Aldehyde

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Ubiquitin-Aldehyde, Human, RecombinantSBB580310 SBB SBB-PS0031 50�μg�/ 27,000

    Ubiquitin-Propargylamide, Human, RecombinantSBB580340 SBB SBB-PS0034 50�μg�/ 38,000

    Ubiquitin-Vinyl Methyl Ester, Human, RecombinantSBB580330 SBB SBB-PS0033 50�μg�/ 48,000

    Ubiquitin-Vinyl Sulfone, Human, RecombinantSBB580320 SBB SBB-PS0032 50�μg�/ 48,000

    ポリユビキチン鎖7 種類の異なるリジン残基を介した,ポリユビキチン鎖製品です。E1 酵素,E2 酵素,E3 酵素,DUB など,ユビキチン相互作用モチーフを有するタンパク質による,ユビキチンの認識や結合に関するメカニズムの解明に有用です。

    各種ユビキチン修飾による生体機能制御

    マーカー

    コントロール

    Ataxin-3

    A20

    BAP1

    USP5

    UCH-L1

    UCH-L3

    USP2

    USP7

    USP14

    DUB3

    6

    14

    (kDa)

    ←モノユビキチン(Ub)

    ←ジユビキチン鎖(Ub2)

    特 長�●�7 種類のリジン残基を介したポリユビキチン鎖のほか,ユビキチンN末端を介するリニア結合型ポリユビキチン鎖もあります。

    ●�イソペプチド結合で連結したポリユビキチン鎖です。●�アミノ酸変異はありません。

    K63 結合型ポリユビキチン鎖を USP5 で処理した例

    各種 DUB で加水分解した K48 結合型ジユビキチンの電気泳動像K48 結合型ジユビキチンを脱ユビキチン化酵素で加水分解した。

    タンパク質分解プロテアソーム

    タンパク質分解プロテアソーム?

    非タンパク質分解

    ユビキチン化タンパク質

    モノユビキチン K63 K48 K29 K6, K11

    トラフィッキングエンドサイトーシス遺伝子発現遺伝子サイレンシング

    DNA損傷寛容トラフィッキング翻訳キナーゼ活性化非タンパク質分解

    ( ) ( )

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

    TEL 

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  • 品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Di-Ubiquitin, Lys6-Linked, Recombinant, Carrier-free 〈Ub2, K6-Linked〉

    RSD982554 RSD UC-11B-025 25 μg / 30,000産生:E. coli,M.W.:17 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Di-Ubiquitin, Lys11-Linked, Recombinant, Carrier-free 〈Ub2, K11-Linked〉

    RSD982546 RSD UC-40B-025 25 μg / 30,000産生:E. coli,M.W.:17 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Di-Ubiquitin, Lys27-Linked, Recombinant, Carrier-free 〈Ub2, K27-Linked〉

    RSD982247 RSD UC-61B-025 25 μg / 30,000産生:E. coli,M.W.:17 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Di-Ubiquitin, Lys29-Linked, Recombinant, Carrier-free 〈Ub2, K29-Linked〉

    RSD982541 RSD UC-81B-025 25 μg / 30,000産生:E. coli,M.W.:17 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Di-Ubiquitin, Lys33-Linked, Recombinant, Carrier-free 〈Ub2, K33-Linked〉

    RSD982557 RSD UC-101B-025 25 μg / 30,000産生:E. coli,M.W.:17 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    ■K6 結合型ジユビキチン

    ■K11 結合型ジユビキチン

    ■K27 結合型ジユビキチン

    ■K29 結合型ジユビキチン

    ■K33 結合型ジユビキチン

    ■K63 結合型ポリユビキチン鎖

    ■その他のポリユビキチン鎖

    ■リニア結合型ポリユビキチン鎖

    ■K48 結合型ポリユビキチン鎖品  名

    メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)Di-Ubiquitin, Lys48-Linked, Recombinant, Carrier-free

    〈Ub2, K48-Linked〉RSD982551 RSD UC-200B-025 25 μg / 14,000

    産生:E. coli,M.W.:17 kDa,純度:>98%(SDS-PAGE)

    Tri-Ubiquitin, Lys48-Linked, Recombinant, Carrier-free 〈Ub3, K48-Linked〉

    RSD982549 RSD UC-215B-025 25 μg / 16,000産生:E. coli,M.W.:26 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    Tetra-Ubiquitin, Lys48-Linked, Recombinant, Carrier-free 〈Ub4, K48-Linked〉

    RSD982550 RSD UC-210B-025 25 μg / 23,000産生:E. coli,M.W.:34 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    Poly-Ubiquitin(1-7), Lys48-Linked, Recombinant, Carrier-free〈Ub1-7, K48-Linked〉

    RSD993389 RSD UC-240-100 100 μg / 24,000産生:E. coli,純度:>95%(SDS-PAGE)

    Poly-Ubiquitin(2-7), Lys48-Linked, Recombinant, Carrier-free〈Ub2-7, K48-Linked〉

    RSD993390 RSD UC-230-100 100 μg / 31,000産生:E. coli,純度:>95%(SDS-PAGE)

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Poly-Ubiquitin(3-7), Lys48-Linked, Recombinant, Carrier-free〈Ub3-7, K48-Linked〉

    RSD UC-220-100 100 μg / 31,000 RSD993391産生:E. coli,純度:>95%(SDS-PAGE)

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Di-Ubiquitin, Lys63-Linked, Recombinant, Carrier-free 〈Ub2, K63-Linked〉

    RSD UC-300B-025 25 μg / 14,000 RSD982548産生:E. coli,M.W.:17 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    Tri-Ubiquitin, Lys63-Linked, Recombinant, Carrier-free 〈Ub3, K63-Linked〉

    RSD UC-315B-25 25 μg / 16,000 RSD982442産生:E. coli,M.W.:26 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    Tetra-Ubiquitin, Lys63-Linked, Recombinant, Carrier-free 〈Ub4, K63-Linked〉

    RSD UC-310B-025 25 μg / 23,000 RSD982547産生:E. coli,M.W.:34 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    Poly-Ubiquitin(1-7), Lys63-Linked, Recombinant, Carrier-free〈Ub1-7, K63-Linked〉

    RSD UC-340-100 100 μg / 24,000 RSD993380産生:E. coli,純度:>95%(SDS-PAGE)

    Poly-Ubiquitin(2-7), Lys63-Linked, Recombinant, Carrier-free〈Ub2-7, K63-Linked〉

    RSD UC-330-100 100 μg / 31,000 RSD993381産生:E. coli,純度:>95%(SDS-PAGE)

    Poly-Ubiquitin(3-7), Lys63-Linked, Recombinant, Carrier-free〈Ub3-7, K63-Linked〉

    RSD UC-320-100 100 μg / 31,000 RSD993382産生:E. coli,純度:>95%(SDS-PAGE)

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Tetra-Ubiquitin, Mixed Linkage, Recombinant, Carrier-free 〈Ub-K63-Ub-K48-Ub-K63-Ub〉

    RSD UCM-210-025 25 μg / 32,000 RSD993372産生:E. coli,M.W.:34 kDa,純度:>90%(SDS-PAGE)

    Tetra-Ubiquitin, Mixed Linkage, Recombinant, Carrier-free 〈Ub-K48-Ub-K63-Ub-K48-Ub〉

    RSD UCM-310-025 25 μg / 32,000 RSD993371産生:E. coli,純度:>95%(SDS-PAGE)

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Di-Ubiquitin, Linear Linkage, Recombinant, Carrier-free 〈Ub2, Linear Linkage〉

    RSD UC-700B-025 25 μg / 14,000 RSD982543産生:E. coli,M.W.:17 kDa,純度:>95%(SDS-PAGE)

    Tetra-Ubiquitin, Linear Linkage, Recombinant, Carrier-free 〈Ub4, Linear Linkage〉

    RSD UC-710B-025 25 μg / 23,000 RSD982542産生:E. coli,M.W.:34 kDa,純度:>90%(SDS-PAGE)

    Web ページ番号検索5609

    フナコシニュース2019年 9月 1日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

    TEL 03 -5684 -1620 FA

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    5

  • E1 酵素 E2酵素

    E1 酵素(ユビキチン活性化酵素)は ATP 依存的にユビキチンC末端をアデニル化し,チオエステル結合を形成します。続いて E1 酵素は E2 酵素(ユビキチン結合酵素)上のシステイン残基にユビキチンを移します。ヒトにおいて代表的な E1 酵素はUBA1とされています。UBA1は118 kDaのタンパク質で,活性化状態ではホモダイマーを形成します。

    ユビキチンを結合した E2 酵素(ユビキチン結合酵素)は,続いて基質タンパク質を認識する E3酵素(ユビキチンリガーゼ)と結合し,ユビキチンを基質タンパク質へ移します。ヒトにおいて E2酵素は約 40種類存在します。

    [参考文献:PMID 27002219]

    ● 生物種:Human● 産生:昆虫細胞● 分子量:118 kDa● 純度:>95%(SDS-PAGE)

    本製品をウェスタンブロットにより確認した。

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Ubiquitin Activating Enzyme, Human, Recombinant〈UBA1〉SBB240110 SBB SBB-CE0011   50 μg / 53,000

    ATP+

    E1

    E1Ub

    E2

    E2

    AMP+PPi

    DUB

    DUBE3

    E3

    Ub

    Substrate

    Substrate

    Substrate

    Degradation (26S)IKK ActivationDNA RepairEndocytosis

    Protein SortingSubnuclear TraffickingGene ExpressionEndocytosis ATP+

    E1

    E1Ub

    E2

    E2

    AMP+PPi

    DUB

    DUBE3

    E3

    Ub

    Substrate

    Substrate

    Substrate

    Degradation (26S)IKK ActivationDNA RepairEndocytosis

    Protein SortingSubnuclear TraffickingGene ExpressionEndocytosis

    Web ページ番号検索64983

    Web ページ番号検索64983

    UBE2D1 UBE2D1 は多数の E3酵素と結合し,異常タンパク質をポリユビキチン化することにより分解に導きます。UBE2D1 は Parkin と相互作用することが分かっており,PINK1 を介したマイトファジーを調節します。

    ● 生物種:Human● 産生:E. coli● 分子量:17 kDa● 純度:>95%(SDS-PAGE)

    本製品をウェスタンブロットにより確認した。UBE2D1 はユビキチンとチオエステル結合を形成する。DTTの添加によりチオエステル結合形成が阻害される。

    UBE2D2 

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    UBE2D1, Human, RecombinantSBB SBB-CE0021 100 μg / 51,000 SBB240210

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    UBE2D2, Human, RecombinantSBB SBB-CE0027 100 μg / 51,000 SBB240270

    ● 生物種:Human● 産生:E. coli

    ● 分子量:17 kDa● 純度:>95%(SDS-PAGE)

    フナコシニュース2019年 9月 1日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

    TEL 

    03- 5

    684-

    1620

     FA

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    84- 1

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    o.jp

    掲載品はすべて研究用です

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  • UBE2D3�

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    UBE2D3, Human, RecombinantSBB240190 SBB SBB-CE0019 100�μg�/ 51,000

    ●�生物種:Human●�産生:E.�coli●�分子量:17�kDa●�純度:>95%(SDS-PAGE)

    本製品をウェスタンブロットにより確認した。

    UBE2L3�UBE2L3 は HECT 型 E3 酵素または RBR 型 E3 酵素に対して特異性を示す E2 酵素です。UBE2L3 は RBR 型 E3 酵素 LUBAC と相互作用し,IkB 複合体のNEMOをユビキチン化することで免疫応答を調節します。

    複数の E2 酵素が入ったアッセイプレート

    E2scan Kit

    Web ページ番号検索8448

    E1 酵素・E3 酵素・ユビキチン化基質などを混合して,ユビキチン化アッセイを行うことができます。基質特異性の解析や酵素活性の測定などに最適です。

    プレートレイアウトE2 酵素が入っているウェル(2セット)(0.05�nmol�E2/well�in�10�μl)

    Buffer�control  Positive�control  空のウェル

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    UBE2L3, Human, RecombinantSBB240200 SBB SBB-CE0020 100�μg�/ 51,000

    UBE2Kは E3酵素なしにK48結合型ユビキチン鎖を形成することができます。K48 結合型ユビキチン鎖を形成したUBE2K は,E3 酵素 TRIM6と相互作用し,IKKε�のキナーゼ活性を活性化します。

    ●�生物種:Human●�産生:E.�coli

    ●�分子量:18�kDa●�純度:>95%(SDS-PAGE)

    UBE2K�

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    UBE2K, His-tagged, Human, RecombinantSBB240220 SBB SBB-CE0022 100�μg�/ 51,000

    ●�生物種:Human●�産生:E.�coli

    ●�分子量:22�kDa●�純度:>95%(SDS-PAGE)

    1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

    A

    B

    C

    D

    E

    F

    G

    H

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    E2scan Kit version 2UBI 67-0005-001 � 1�kit�/ 104,000 UBI670050

    使用例�Plus NEDD4.2 (anti-hDCNL1 Western blot detection)

    Minus NEDD4.2 (anti-hDCNL1 Western blot detection)

    2A 2B 2C 2D1

    2D2

    2D3

    2D4

    2E1

    2E2

    2E3

    2F 2G1

    2G2

    2H 2I 2J12J22K 2L3

    2L6

    2M 2N 2N/2V1

    2N/2V2

    2Q 2Q2

    2R1

    2R2

    2S 2T 2V1

    2V2

    2W 2Z

    2A 2B 2C 2D1

    2D2

    2D3

    2D4

    2E1

    2E2

    2E3

    2F 2G1

    2G2

    2H 2I 2J12J22K 2L3

    2L6

    2M 2N 2N/2V1

    2N/2V2

    2Q 2Q2

    2R1

    2R2

    2S 2T 2V1

    2V2

    2W 2Z

    141728384962

    98kDa

    Marker

    141728384962

    98kDa

    Marker

    E1酵素(Ube1),E2酵素(本製品),E3酵素(NEDD4),基質タンパク質(hDCNL1),ATP,ユビキチンを混合し,基質のユビキチン化アッセイを行った。

    キット内容�●�E2scan�plate●�Ube1(E1�enzyme)●�CHIP(E3�enzyme)●�Ubiquitin●�ATP●�Ubiquitylation�assay�buffer●�96�well�plate�sealing�mat

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    7

  • E3 酵素

    ATP+

    E1

    E1Ub

    E2

    E2

    AMP+PPi

    DUB

    DUBE3

    E3

    Ub

    Substrate

    Substrate

    Substrate

    Degradation (26S)IKK ActivationDNA RepairEndocytosis

    Protein SortingSubnuclear TraffickingGene ExpressionEndocytosis

    Webページ番号検索64984

    [メーカー:UBI]

    製品の種類 タグ 商品コード 包装 価格(¥)

    CRL

    UBI630000 Cul1/Rbx1 - 63-1000-025�カ 25�μg 74,000

    UBI630011 Cul1/Rbx1/Skp1 - 63-1001-025�カ 25�μg 89,000

    UBI630043 Cul2/Rbx1 - 63-1004-025�カ 25�μg 74,000

    UBI630032 Cul3/Rbx1 - 63-1003-025�カ 25�μg 74,000

    UBI630021 Cul5/Rnf7 - 63-1002-025�カ 25�μg 74,000

    DCUN/DCNL

    UBI630012DCNL1

    GST 63-2001-025 25�μg 29,000

    UBI630001 His 63-2000-025 25�μg 29,000

    UBI630022DCNL2

    GST 63-2002-025 25�μg 29,000

    UBI630042 His 63-2004-025 25�μg 29,000

    HECT

    UBI630420 HUWE1 GST 63-0042-025 25�μg 65,000

    UBI630380 NLEL GST 63-0038-025 25�μg 65,000

    UBI630270 SMURF1 GST 63-0027-025 25�μg 68,000

    UBI630460 SMURF2 GST 63-0046-025 25�μg 65,000

    UBI630330 WWP1 GST 63-0033-025 25�μg 68,000

    IAP

    UBI630150 BIRC2 GST 63-0015-025 25�μg 65,000

    IPAH

    UBI630180 IPAH9.8 GST 63-0018-025 25�μg 28,000

    RING/RBR

    UBI630040 CBL GST 63-0004-010 10�μg 33,000

    UBI630440 IDOL His 63-0044-025 25�μg 74,000

    UBI630470 MuRF1 - 63-0047-025 25�μg 74,000

    UBI630480 Parkin - 63-0048-025 25�μg 89,000

    UBI630210 RNF8 GST 63-0021-025 25�μg 45,000

    UBI630240 RNF11 GST 63-0024-025 25�μg 28,000

    UBI630290 TRIAD1 His 63-0029-025�カ 25�μg 45,000

    UBI630400 ZNRF1 GST 63-0040-025 25�μg 89,000

    UBI630410 ZNRF2 GST 63-0041-025 25�μg 89,000

    UBOX

    UBI630030CHIP

    - 63-0003-020 20�μg 38,000

    UBI630020 GST 63-0002-025 25�μg 28,000

    保存温度:

    カ:

    Cul1/Rbx1/Skp1[untagged]●�生物種:Human●�産生:Sf9 細胞●�分子量:Cul1: 約 89.9�kDa     Rbx1: 約 12.3�kDa     Skp1: 約 18.3�kDa●�純度:>95%(SDS-PAGE)●�酵素活性の検証方法:GST-DCNL1,Ube2M~NEDD8 を用いた NEDD8化アッセイ

    Parkin[untagged]●�生物種:Human●�産生:E.�coli●�分子量:約 51.6�kDa●�純度:>90%(SDS-PAGE)●�酵素活性の検証方法:MBP-PINK1 を用いたユビキチン化アッセイ

    CHIP[untagged]●�生物種:Human●�産生:E.�coli●�分子量:約 35�kDa●�純度:>90%(SDS-PAGE)●�酵素活性の検証方法:CHIPのオートユビキチン化アッセイ

    188

    kDa

    ─ Cul1

    ─ Skp1

    ─ Rbx1

    98

    62

    49

    38

    28

    17

    14

    1 2

    Lanes

    Cul1-NEDD8Cul1

    kDa

    T0 T2

    98

    62

    Cul1 / Rbx1 / Skp1

    1 2 3

    + + ++ - ++ + +

    GST-DCNL1Ube2M~NEDD8

    ─ Parkin

    kDa

    188

    98

    62

    49

    38

    28

    1714

    1 2

    ─ATP0

    kDaMBP-PINK1-Ub

    MBP-PINK1

    Parkin

    188

    98

    62

    49

    38

    Lanes

    0.5 1.0 2.0 2.0

    1 2 3 4 5

    MBP-PINK1(μg)

    anti-PINK1

    anti-Parkin

    CHIP

    kDa188

    98

    62

    49

    38

    28

    17

    141 2

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    8

  • E3 酵素の自己ユビキチン化を TR-FRET によりリアルタイムで測定

    E3 Ligase TR-FRET Ubiquitination Kit

    Webページ番号検索66035

    従来のウェスタンブロット法による検出系に比べ,簡便かつハイスループットな解析が可能です。E3酵素の作用機序の解析や,E3酵素の自己ユビキチン化の促進/阻害物質の探索スクリーニングに有用です。※TR-FRET=Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET=蛍光共鳴エネルギー移動

    Assay buffer, Mg-ATPE1 酵素 E2 酵素 E3 酵素 TR-FRET 用ユビキチンミックス

    Eu3+-Cryptate(FRET ドナー)

    Cy5(FRET アクセプター)

    キット内容

    キットには FRET ドナーまたは FRET アクセプターを標識したユビキチンと,未標識ユビキチンの混合物が含まれており,ポリユビキチン鎖が形成されると FRET が誘導されます。Eu3+-Cryptate は安定かつ蛍光寿命が長いため,TR-FRET に最適です。TR-FRETにより非特異的な蛍光を排除できるため,高感度な検出が可能となります。

    測定原理

    測定波長:励起 304 nm/蛍光 620 nm(FRET ドナー),665 nm(FRET アクセプター)

    MDM2 E3 Ligase TR-FRET Kit(#SBB-KF0030)を用いて MDM2 の自己ユビキチン化レベルを観察した。

    左:TR-FRET の測定結果MDM2 濃度(12.5~200 nM)に依存した自己ユビキチン化が観察された。

    右:Z’ factorいずれの MDM2 濃度においても 30~45 分程度でZ’>0.8 に達している。

    [メーカー:SBB]

    ファミリーキットに含まれる酵素

    商品コード 包 装 価格(¥)E1酵素 E2酵素 E3酵素

    RINGUBA1 UBE2D3 MDM2 SBB-KF0030 1 kit 167,000 SBB050300

    UBA1 UBE2D3 XIAP SBB-KF0057 1 kit 167,000 SBB050570

    RBR UBA1 UBE2D3 Parkin SBB-KF0036 1 kit 167,000 SBB050360

    HECTUBA1 UBE2L3 ITCH SBB-KF0035 1 kit 167,000 SBB050350

    UBA1 UBE2L3 NEDD4 SBB-KF0056 1 kit 167,000 SBB050560

    ※推奨蛍光プレートリーダー:Molecular Devices M5e,PerkinElmer EnVision

    MDM2

    MDM2 Auto-ubiquitination (real-time)

    MDM2

    MDM2 Auto-ubiquitination Z’ (real-time)

    キット内容と測定原理

    使用例

    製品ラインナップ

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    9

  • 脱修飾酵素

    ATP+

    E1

    E1Ub

    E2

    E2

    AMP+PPi

    DUB

    DUBE3

    E3

    Ub

    Substrate

    Substrate

    Substrate

    Degradation (26S)IKK ActivationDNA RepairEndocytosis

    Protein SortingSubnuclear TraffickingGene ExpressionEndocytosis

    Webページ番号検索64985

    [メーカー:UBI]

    製品の種類 タグ 商品コード 包装 価格(¥)

    USP

    UBI640400 USP1/UAF1 His/- 64-0040-050�カ 50�μg 86,000

    UBI640140 USP2(isoform�4) GST 64-0014-050 50�μg 59,000

    UBI640010 USP4 His 64-0001-050 50�μg 86,000

    UBI640020 USP5 His 64-0002-050 50�μg 59,000

    UBI640450 USP6�CD(529-1406) GST 64-0045-050�カ 50�μg 86,000

    UBI640030 USP7 His 64-0003-050 50�μg 59,000

    UBI640530 USP8 - 64-0053-050 50�μg 86,000

    UBI640180 USP14 His 64-0018-005 5�μg 18,000

    UBI640260 USP15(isoform�2) - 64-0026-050 50�μg 59,000

    UBI640220 USP19-TM(1-1290) GST 64-0022-050 50�μg 86,000

    UBI640390 USP20 GST 64-0039-050�カ 50�μg 86,000

    UBI640370 USP21�CD(196-565) GST 64-0037-050 50�μg 86,000

    UBI640230 USP25 GST 64-0023-050 50�μg 59,000

    UBI640100 CYLD His 64-0010-050�カ 50�μg 59,000

    OTU

    UBI640470 A20�CD(1-366) GST 64-0047-050 50�μg 59,000

    UBI640360 OTU1 GST 64-0036-050 50�μg 86,000

    UBI640110 OTUB1 GST 64-0011-050 50�μg 59,000

    UBI640120 OTUB2 GST 64-0012-050 50�μg 59,000

    UBI640350 OTUD3 GST 64-0035-050 50�μg 86,000

    UBI640380 OTUD6A His 64-0038-050 50�μg 86,000

    UBI640280 OTUD6B GST 64-0028-050 50�μg 86,000

    UBI640480 OTULIN GST 64-0048-050 50�μg 59,000

    UCH

    UBI640070 UCHL1 His 64-0007-050 50�μg 59,000

    UBI640270 UCHL3 GST 64-0027-050 50�μg 59,000

    UBI640080 UCHL5 GST 64-0008-050 50�μg 59,000

    Josephin

    UBI640330 Ataxin-3 GST 64-0033-050 50�μg 59,000

    UBI640340 Ataxin-3L His 64-0034-050 50�μg 59,000

    UBI640310 JOSD1 His 64-0031-050 50�μg 59,000

    UBI640320 JOSD2 His 64-0032-050 50�μg 59,000

    JAMM

    UBI640420 AMSH�CD(252-424) GST 64-0042-050 50�μg 59,000

    UBI640290 AMSH-LP�CD(264-436) GST 64-0029-050 50�μg 59,000

    保存温度:

    カ:

    USP15 isoform 2[untagged]●�生物種:Human●�産生:E.�coli●�分子量:約 111�kDa●�純度:>53%(SDS-PAGE)●�酵素活性の検証方法:Ubiquitin-Rhodamine110-Glycine を用いた脱ユビキチン化アッセイ

    CYLD[His-tagged]●�生物種:Human●�産生:Sf21 細胞(バキュロウイルス使用)

    ●�分子量:約 110�kDa●�純度:>75%(SDS-PAGE)●�酵素活性の検証方法:Ubiquitin-Rhodamine110-Glycine を用いた脱ユビキチン化アッセイ

    OTU1[GST-tagged]●�生物種:Human●�産生:E.�coli●�分子量:約 65�kDa●�純度:>98%(SDS-PAGE)●�酵素活性の検証方法:Ubiquitin-Rhodamine110-Glycine を用いた脱ユビキチン化アッセイ

    Ataxin-3[GST-tagged]●�生物種:Human●�産生:E.�coli●�分子量:約 69�kDa●�純度:>98%(SDS-PAGE)●�酵素活性の検証方法:Ubiquitin-Rhodamine110-Glycine を用いた脱ユビキチン化アッセイ

    ─ USP15

    kDa

    188

    98

    62

    49

    38

    28

    1714

    1 2

    kDa188

    98

    62

    49

    38

    28

    17

    1 214

    ─ His-CYLD

    kDa188

    98

    62

    49

    38

    28

    1714

    1 2

    ─ GST-OTU1

    kDa

    188

    98

    62

    49

    38

    28

    1714

    1 2

    ─ GST-Ataxin-3

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    10

  • 複数の脱ユビキチン化酵素(DUB)が入ったアッセイプレート

    DUBscan Kit

    ユビキチン関連プロテアーゼ

    Web ページ番号検索8449

    Web ページ番号検索67797

    ユビキチン化タンパク質や脱ユビキチン化酵素阻害物質などを混合して,脱ユビキチン化アッセイを行うことができます。基質特異性の解析や酵素活性の測定に最適です。

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    UCHL3, Human, RecombinantSBB SBB-DE0023 50 μg / 42,000 SBB340230産生:E. coli,純度:>95%(SDS-PAGE),分子量:26 kDa

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    NEDP1, His-tagged, Human, RecombinantSBB SBB-DE0025 50 μg / 42,000 SBB340250産生:E. coli,純度:>95%(SDS-PAGE),分子量:26.5 kDa

    UCHL3

    NEDP1

    SENP1

    UCHL3(Ubiquitin C-terminal Hydrolase L3)は,ユビキチン前駆体をプロセシングすることで細胞内のユビキチン濃度を調節するプロテアーゼです。ユビキチン C 末端グリシンのペプチド結合を加水分解します。

    NEDP1(NEDD8-specific protease 1)は,ユビキチン様タンパク質 NEDD8-基質タンパク質間のイソペプチド結合を加水分解するプロテアーゼです。NEDD8 化タンパク質からNEDD8 を脱修飾します。

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    SENP1, His-tagged, Human, RecombinantSBB SBB-DE0026 50 μg / 42,000 SBB340260産生:E. coli,純度:>95%(SDS-PAGE),分子量:31.5 kDa

    SENP1(SUMO/Sentrin Specific Peptidase 1)は,ユビキチン様タンパク質 SUMO(Small Ubiquitin related Modifier)を脱修飾するプロテアーゼです。SUMO を全長タンパク質から成熟型へとプロセシングする機能も有します。

    1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

    A

    B

    C

    D

    E

    F

    G

    H

    プレートレイアウト

    IL-1 で刺激した HEK2932 細胞の細胞ライセートに抗 IRAK1 抗体を混合し,インキュベートした。次に,Protein G-Dynabeads を加えてインキュベートし,Dynabeads 複合体を洗浄した。これを DUBscan plate に加え,インキュベートした。試料を還元条件下で変性 4-20% SDS-PAGE で電気泳動した後,ウェスタンブロッティングを行った。

    キット内容 ● DUBscan plate      ● ATP      ● EDTA● Ubiquitylation assay buffer● Auto-ubiquitylation control reaction● Mono and polyubiquitylated conjugates, mAb(FK2)● SDS-PAGE sample buffer● 96 well plate sealing mat品  名

    メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)DUBscan Kit

    UBI670060 UBI 67-0006-001 1 kit / 74,000

    Kit Enzymes Kit Controls User ControlsBuffer Buffer

    空のウェルPositive Control

    Negative Control

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    11

  • プロテアソーム プロテアソーム基質20S Proteasome, Human RBC�

    26S�Proteasome は,プロテアーゼ活性を有する 20S�Protea-someと,制御因子19Sから構成されています。20S�Proteasomeは,4つのリング構造から成り,1つのリングが 7つのサブユニットから構成されています。

    M E M O

    time

    signal

    3,000

    ■ 20S Proteasome■ 20S Immunoproteasome

    LLVY-AMC/Chemotrypsinlike Activity

    PAL-AMC/β1i Activity/PSMB9

    LLE-AMC/β1C Activity/PSMB6

    WLA-AMC/β5C Activity/PSMB5

    ANW-AMC/β5i Activity/PSMB8

    2,500

    2,000

    1,500

    1,000

    500

    RFU/min

    ●�C 末端に AMCを標識したプロテアソーム基質です。プロテアソームにより切断を受け,AMCが遊離すると蛍光を発します。

    ●�測定波長:�励起 345�nm/�蛍光 445�nm

    各基質に対するプロテアソーム活性の特異性

    Ac-ANW-AMC20S�Immunoproteasomeの�キモトリプシン様活性を測定できる

    Ac-WLA-AMC20S�Proteasomeの�

    キモトリプシン様活性を測定できる

    Z-LLE-AMC20S�Proteasomeの�

    カスパーゼ様活性を測定できる

    Ac-PAL-AMC20S�Immunoproteasomeの�カスパーゼ様活性を測定できる

    Suc-LLVY-AMC20S�Proteasomeの�

    キモトリプシン様活性を測定できる

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Ac-ANW-AMC〈Ac-Ala-Asn-Trp-AMC〉SBB SBB-PS0009 2�mg�/ 31,000 SBB580090

    Ac-PAL-AMC〈Ac-Pro-Ala-Leu-AMC〉SBB SBB-PS0007 2�mg�/ 31,000 SBB580070

    Ac-WLA-AMC〈Ac-Trp-Leu-Ala-AMC〉SBB SBB-PS0008 2�mg�/ 31,000 SBB580080

    Suc-LLVY-AMC〈Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC〉SBB SBB-PS0010 2�mg�/ 16,000 SBB580100

    Z-LLE-AMC〈Z-Leu-Leu-Glu-AMC〉SBB SBB-PS0006 2�mg�/ 31,000 SBB580060

    Web ページ番号検索64986

    Web ページ番号検索64986

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    20S Proteasome, Human RBCSBB550050 SBB SBB-PP0005 50�μg�/ 39,000

    由来:赤血球,純度:>95%(SDS-PAGE),分子量:>700�kDa

    Immunoproteasomeは,26S�Proteasomeと構造的に類似したプロテアソームです。Immunoproteasome では,β1,β2,β5 サブユニットが,β1i,β2i,β5i サブユニットに置き換えられています。

    M E M O

    20S Immunoproteasome, Human PBMC�

    β1iβ2i

    β5i

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    20S Immunoproteasome, Human PBMCSBB550040 SBB SBB-PP0004 25�μg�/ 55,000

    由来:末梢血単核細胞,純度:>95%(SDS-PAGE),分子量:>700�kDa

    O

    NH2

    HNN

    HO

    O

    O

    HNN

    HO

    OONH

    O

    HN

    NH

    O

    O

    HN O

    OO

    N

    O

    HN

    NH

    O

    HN

    NH

    O ONH

    OON

    N

    H

    HO

    O

    O

    ON

    N

    H

    N

    H

    H

    OO

    O

    O

    HO

    HO

    NNO

    H

    HO

    ON

    N

    H

    H

    OO

    O

    O

    COOH

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

    TEL 

    03- 5

    684-

    1620

     FA

    X 0

    3-56

    84- 1

    775 

     rea

    gent

    @fu

    nako

    shi.c

    o.jp

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    12

  • プロテアソームの活性を測定するための基質や阻害物質などのセット

    Proteasome Kit

    Web ページ番号検索68032

    ●1 キットで,100アッセイ分の試薬が含まれています(50μl の反応系の場合)。

    ●測定波長:励起345nm/蛍光445nm(カイネティックモード)

    2,000

    1,500

    1,000

    500

    0

    20S プロテアソームの活性の測定例

    [メーカー:SBB]

    キット名 20S Proteasome Kit 20S Immunoproteasome Kit

    商品コード SBB-KP0038 SBB-KP0037 SBB050380

    包装/価格(¥) 1kit/83,000 1kit/105,000 SBB050370

    キット内容

    精製 プロテアソーム 20SProteasome 20SImmunoproteasome

    基 質● LLVY-AMC● LLE-AMC● WLA-AMC

    ● LLVY-AMC● PAL-AMC● ANW-AMC

    コントロール用 阻害物質 MG-132 ONX-0914

    その他● Reactionbuffer● SDSinH2O● FreeAMCstandard

    ※別途,黒色または不透明で,少容量タイプのプレートをご用意下さい。

    プロテアソーム阻害物質

    Web ページ番号検索64583

    Salinosporamide A Bortezomib

    [メーカー:KOM]

      品 名 CAS 番号 商品コード 包 装 価格(¥)

    Salinosporamide A 20S プロテアソームのキモトリプシン様活性,トリプシン様活性,カスパーゼ様活性を阻害する。 437742-34-2AG-CN2-0444-C100 100μg 43,000 KOM994808

    AG-CN2-0444-M001 1mg 202,000 KOM993012

    Bortezomib〈PS-341〉20S プロテアソームのキモトリプシン様活性およびカスパーゼ活性を阻害する。 179324-69-7AG-CR1-3602-M005 5mg 12,000 KOM995048

    AG-CR1-3602-M025 25mg 34,000 KOM995047

    Clasto-Lactacystin β-Lactone

    20S プロテアソームのキモトリプシン様活性,トリプシン様活性,カスパーゼ様活性を阻害する。 154226-60-5 AG-CN2-0442-C100 100μg 59,000 KOM994446

    Z-Leu-Leu-Nva-CHO 〈MG-115〉

    プロテアソームのキモトリプシン様活性を特異的に阻害する。 133407-86-0

    AG-CP3-0015-M001 1mg 5,000 KOM995066

    AG-CP3-0015-M005 5mg 18,000 KOM995065

    Z-Leu-Leu-Leu-CHO 〈MG-132〉

    プロテアソームを阻害する。 133407-82-6AG-CP3-0011-M001 1mg 4,000 KOM998204

    AG-CP3-0011-M005 5mg 13,000 KOM998203

    Z-Leu-Leu-Leu-B(OH)2〈MG-262〉

    プロテアソームのキモトリプシン様活性,カスパーゼ様活性を阻害する。 179324-22-2

    AG-CP3-0024-C200 200μg 50,000 KOM995051

    AG-CP3-0024-M001 1mg 209,000 KOM995050

    OH

    O

    CH3

    O

    O

    Cl

    H H

    HN

    OH

    CH3

    CH3

    O

    OH

    B

    OHN

    NH

    N

    N

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

    TEL 03 -5684 -1620 FA

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    13

  • ユビキチン関連抗体

    ●適用:ELISA,IHC,WB●交差性:モノユビキチン化タンパク質,

    ポリユビキチン化タンパク質,フリーのユビキチン

    抗ユビキチン鎖抗体

    ウェスタンブロットでの使用例レーン 1:分子量マーカー,レーン 2:HeLa 細胞抽出物

    ユビキチン関連タンパク質の ユビキチン化レベル検出用抗体アレイ

    Proteome Profiler Human Ubiquitin Array

    Web ページ番号検索63225

    ニトロセルロースメンブレンに,ユビキチン関連タンパク質に対する抗体が,二重にスポットされています。

    検出可能なユビキチン関連タンパク質

    使用例

    A20/TNFAIP3 ATF4 Bcl-2

    β-TrCP1/BTRC Caspase-8 CBL

    CyclinD1/CCND1 CD44 cIAP-1/HIAP-2

    cIAP-2/HIAP-1 COX-2/PTGS2 EGFR

    ER-α/NR3A1 ErbB2 ErbB3

    ErbB4 FASN F-boxprotein15/FBXO15

    FBXW7/Cdc4 FGFR2 HGFR/c-Met

    HIF-1α HSP70 HSP90AA1/HSP90A

    IGF-IR IκBα IκBε

    IKKγ/NEMO InsulinR IRAK1

    IRF3 IRS1 M-CSFR

    MSPR/Ron Nrf2/NFE2L2 NIK/MAP3K14

    p21/CDKN1A/Cip1 p53 PDGFRα

    PDGFRβ RIP1 SCFR/c-Kit

    TfR TNFR1/TNFRSF1A TRAF-2

    TRAF-3 TRAF-6 TrkA

    VEGFR3/Flt-4 Ubiquitin

    Untreated

    Epoxomicin Treated

    RS RS

    RS

    23

    4

    5 6

    78

    1

    1

    23

    4

    5 6

    78

    HCT-116 Untreated vs. Epoxomicin Treated

    Mean Pixel Density

    60,000

    50,000

    40,000

    30,000

    20,000

    10,000

    0

    Bcl-2

    CBL

    Cox-2

    FBX015

    HGF R

    HIF-1α

    IRS-1

    TrkA

    1

    2

    3

    45

    6

    78

    UntreatedEpoxomicin Treated

    本製品を用いたユビキチン化タンパク質の検出例試料:プロテアソーム阻害物質 Epoxomicin で処理したヒト結腸がん細胞HCT-116 のライセート※RS:ReferenceSpots

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Proteome Profiler Human Ubiquitin ArrayRSD ARY027 1kit/ 114,000 RSD984680

    ●適用:WB,免疫沈降,蛍光染色

    抗SUMO-2/3抗体

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Anti-Multiubiquitin Chain, Mouse-Mono(FK2)CAY014220 CAY 14220 100μg/ 53,700CAY114220 CAY 14220 500μg/ 170,700

    [上図]中期HeLa 細胞の蛍光染色像赤色:SUMO-2/3青色:DAPI緑色:微小管

    [下図]ウェスタンブロットでの使用例(試料:HeLa 細胞)レーン 1:分子量マーカーレーン 2:ヒートショックによる SUMO化誘導レーン 3:未処理レーン 4:shRNAにより SUMO-2 ノックダウン

    抗Parkin抗体

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Anti-SUMO-2/3, Mouse-Mono(12F3)CYO180230 CYO ASM23-S 25μl/ 22,000CYO180231 CYO ASM23 2×100μl/ 81,000

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Anti-Parkin, Sheep-PolyUBI680180 UBI 68-0018-100 100μg/ 89,000

    ※略号:Mono(Monoclonal),Poly(Polyclonal),IHC(Immunohistochemistry),WB(WesternBlotting)

    1

    11697

    66

    55

    3631

    21

    14

    2 3 4

    50 kDa

    Vec HA-Parkin

    Vec lysate

    HA-Parkin lysate

    IP:HA Parkin IP:HA Parkin

    37 kDa

    ●適用:WB,免疫沈降●交差性:Human,Mouse,Rat

    ウェスタンブロットでの使用例試料:HA-Parkin 過剰発現 HEK293 細胞ライ

    セート

    フナコシニュース2019年 9月 1日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

    TEL 

    03- 5

    684-

    1620

     FA

    X 0

    3-56

    84- 1

    775 

     rea

    gent

    @fu

    nako

    shi.c

    o.jp

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    14

  • AT 1

    TL 12-186

    CM 11 THAL SNS 032

    ARV-825

    dBRD9 dTRIM 24

    特定のタンパク質の分解を誘導する化合物

    Active Degrader(PROTAC)NE

    W

    ユビキチン・プロテアソーム系を利用して,細胞内の標的タンパク質の分解を誘導する低分子化合物 PROTAC(Proteolysis Targeting Chimera)をご紹介します。

    Ub

    E2

    E3 ligase

    標的タンパク質PROTACリサイクル

    PROTACNH2Ub

    UbUbUb

    UbE2

    E3 ligase

    NH2

    NH2

    ポリユビキチン化プロテアソーム

    分解

    PROTAC は,E3 ユビキチンリガーゼと標的タンパク質とを結びつけ,三者複合体を形成する。続いて,標的タンパク質はポリユビキチン化され,ユビキチン化タンパク質はプロテアソームにより分解を受ける。ポリユビキチン化反応後,PROTAC は三者複合体から離脱し,新たな標的タンパク質と E3 リガーゼとの結合を繰り返すことにより,触媒的に作用する。

    M E M O

    O

    Cl

    HO

    HN

    O

    O

    NHN

    NN

    NN

    NS

    S

    O

    S

    HN

    OH

    HO

    NH

    HN

    O

    O

    N

    NN

    S

    S

    O

    O

    O

    O

    NH

    HN

    N

    OO

    O

    OO

    O

    NH

    2HCl

    NH

    O

    O

    N N

    HN

    N

    N

    O O

    O

    O

    O O

    O

    O

    O

    NH

    NH

    N

    O

    O

    O

    O

    O

    N

    NS

    N

    O

    HN

    NH

    O

    O

    S

    O

    O

    O

    OH

    NH

    NH

    NH

    O

    NH

    N

    N

    N

    N

    SO O

    N

    O O

    Cl

    HN

    O O

    O

    O

    OO

    OO

    H

    N

    NN

    N

    SN

    N

    N

    N

    H

    O

    OCl

    H

    O

    O

    OO

    OO

    NN

    S

    N

    N H

    H

    NN N

    N

    NS

    H O

    O

    Cl

    O

    O OH

    MZ1

    PROTAC の種類

    標的となるE3 酵素

    標的となる 基質タンパク質 CAS 番号 メーカー 商品コード 包 装 価格(¥)

    AT 1 von Hippel-Lindau(VHL) BRD4 2098836-45-2 RSD 6356/5 5 mg 110,000 RSD063560

    CM 11* pVHL30 pVHL30 - RSD 6416/5 5 mg 110,000 RSD064165

    dBRD9 NEW cereblon BRD9 2341840-98-8 RSD 6606/5 5 mg 113,000 RSD660605

    dTRIM 24 NEW von Hippel-Lindau(VHL) TRIM24 2170695-14-2 RSD 6607/5 5 mg 110,000 RSD660607

    THAL SNS 032 NEW cereblon CDK9 2139287-33-3 RSD 6532/5 5 mg 110,000 RSD065325

    TL 12-186 NEW cereblon 様々なキナーゼ 2250025-88-6 RSD 6524/5 5 mg 110,000 RSD065245

    ARV-825 NEW cereblon BRD4 1818885-28-7CAY 21109 500 μg 7,700 CAY021109

    CAY 21109 1 mg 14,500 CAY121109

    MZ1 NEW von Hippel-Lindau(VHL) BRD4 1797406-69-9CAY 21622 500 μg 7,500 CAY021622

    CAY 21622 1 mg 14,100 CAY121622

    O

    O

    O

    O

    OOO

    O

    O

    N

    N

    N

    O

    S

    S

    NH

    HN

    HN

    N

    NH

    Tocris 製品検索63923

    Cayman 製品検索4978

    *VHL の自己分解を誘導する Homo-PROTAC

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

    TEL 03 -5684 -1620 FA

    X 03 -5684 -1775 

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    15

  • 直接的に標的タンパク質の分解を誘導できるシステム

    Piranha Targeted Protein Degradation SystemNE

    W

    Webページ番号検索68094

    「TRIM21 をベースとした Piranha タンパク質」と「標的タンパク質に対する抗体」により,標的タンパク質をノックダウンできるシステムです。

    タンパク質をすみやかに ノックダウンできる

    抗体を使用するため 翻訳後修飾されたタンパク質も

    ターゲティングできる

    遺伝子操作不要のため 初代細胞にも使える

    1.Piranha 遺伝子をmRNAとして細胞導入する。(または Piranha 安定発現細胞株を用意する)

    2.標的タンパク質に対する抗体を,エレクトロポレーションにより細胞に導入する。

    3.抗体が標的タンパク質と結合し,Piranha が抗体に結合する。

    4.Piranha-標的タンパク質複合体が,プロテアソームにより分解される。

    操作方法概略

    ユビキチンリガーゼ TRIM21をベースとしたタンパク質“Piranha”は抗体の共通領域と結合する性質を持っています。

    Control

    8hrs 1day 2days 3days

    Relative Luciferase Activity Piranha siRNA phosphorylated AKT

    Total AKT

    GAPDH

    Negative

    Control

    Anti-phospho-

    antibody

    lgG Control

    Cell

    mRNA

    Cell

    IκBα をノックダウンした例PiranhamRNA と抗 IκBα抗体をエレクトロポレーションで同時にMDA-MB-231 乳がん由来細胞へ導入した後,IκBα活性を NFκBルシフェラーゼレポーターアッセイで測定した。(IκBα活性が低くなると NFκB レポーターの活性が高くなる)siRNA よりも Piranha システムのほうが,タンパク質ノックダウンが早い。

    リン酸化 AKT(pSer473)をノックダウンした例Piranha 安定発現細胞に,抗 AKT(pSer473)抗体をエレクトロポレーションで導入した後,細胞ライセートを調製しウェスタンブロットを行った。

    [メーカー:SBI]

    手 法 製 品 商品コード 包 装 価格(¥)

    PiranhamRNAを細胞に導入する

    PiranhamRNA PTPD500A-1 10μg 56,000 SBI955000

    PiranhamRNA,RFP-tagged PTPD510A-1 10μg 61,000 SBI955100

    PiranhamRNA,GFP-tagged PTPD520A-1 10μg 61,000 SBI955200

    Piranha 安定発現細胞株を使用する

    PiranhaHEK293TGFP/PuromycinStableCellLine

    PTPD600A-1 1vial 187,000 SBI956000

    「Piranha 遺伝子をmRNAとして細胞に導入する製品」「Piranha 遺伝子をあらかじめ組み込み済みの細胞株」「レンチウイルスベクターで細胞に組み込む製品」の 3つの製品があります。※レンチウイルスベクターで細胞に組み込む製品についてはWebをご覧下さい。

    標的タンパク質に対する抗体

    エレクトロポレーションにより抗体を細胞内に導入

    Piranha

    抗体

    プロテアソーム

    分解

    細胞外

    標的タンパク質

    タンパク質の機能解析のため,siRNAや CRISPR/Cas9 によるタンパク質のノックダウンが行われていますが,これらの手法にはいくつか問題があります。siRNAの場合は,タンパク質のターンオーバーが遅いと,タンパク質の減少を確認できるまでに数日かかることがあります。CRISPR/Cas9 による遺伝子ノックアウトは,遺伝子によってはノックアウトすることができないことがあります。また,siRNA および CRISPR/Cas9 のいずれの手法も,オフターゲット効果を生じる可能性があります。

    M EMO

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬  TEL 03- 5684-1620 FAX 03-5684- 1775 

    [email protected]

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    16

  • オートファジー誘導ペプチド

    Tat-Beclin-1-D11/L11

    Web ページ番号検索65025

    従来の Beclin 1 に比べ,より特異的かつ効果的にオートファジーを誘導するペプチドです。Beclin-1 のオートファジー誘導領域(11 アミノ酸)と,細胞膜透過性を高めるための HIV-Tat タンパク質を 2 残基のグリシンリンカーでつないだ配列で構成されています。in vitro および in vivo の両方で使用できます。

    Web に 動画あり

    開発者:Dr. Beth Levine(University of Texas,

    Southwestern Medical Center)

    ※ 米国の特許技術を Novus 社がライセンス契約し販売しています。

    特 長� 使用例�

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Tat-Beclin 1 D11NOV NBP2-49888SS 0.1�mg�/ 13,000 NOV761924NOV NBP2-49888 1�mg�/ 33,000 NOV761926NOV NBP2-49888 5�mg�/ 111,000 NOV761925

    Tat-Beclin 1 L11NOV NBP2-49886SS 0.1�mg�/ 10,000 NOV761930NOV NBP2-49886 1�mg�/ 33,000 NOV761932NOV NBP2-49886 5�mg�/ 91,000 NOV761931

    Tat-Beclin 1 L11S - Inactive FormNOV NBP2-49887SS 0.1�mg�/ 10,000 NOV761927NOV NBP2-49887 1�mg�/ 33,000 NOV761929NOV NBP2-49887 5�mg�/ 91,000 NOV761928Tat-L11 由来の非活性型スクランブルコントロール。Tat-D11 と Tat-L11 のネガティブコントロールとして使用できる。

    HeLa 細胞における Tat-D11 量依存的な GFP-LC3b の誘導Tat-D11がTat-Beclin-1よりも強力なオートファジー誘導物質であることを示している。

    HeLa GFP-LC3b1.5 hr Induction

    Spots/Nuclei

    Spots/Nuclei

    μM μM

    Tat-Beclin 1

    Tat-D11

    Tat-L11S(コントロール)

    0

    10

    20

    30

    010 20

    10

    20

    30

    0 5 10 15 20

    HeLa�GFP-LC3b 細胞を Tat-D11,Tat-L11,Tat-L11S,Tat-Beclin-1 で 1.5 時間処理し,蛍光顕微鏡を用いてオートファゴソームを観察し(A),GFP+/LC3b+スポットの数を定量した(B)。

    A. B.

    Tat-L11S 10 μM

    Tat-L11 10 μM

    Tat-D11 10 μM

    Tat-Beclin 1 10 μM

    Tat-D11Tat-L11Tat-Beclin 1Tat-L11S(コントロール)

    HeLa GFP-LC3b1.5 hr Induction

    Spots/Nuclei

    μM

    20

    15

    10

    5

    00

    1.25 2.5 5 10

    ●�他の細胞内経路に影響することなく,オートファジーを誘導します。ラパマイシンや飢餓環境によるオートファジー誘導に比べ,オフターゲットが起こりにくくなっています。

    ●�短時間でインキュベーションや操作を行えます。

    Tat-Beclin 1 D11・D体アミノ酸によるレトロインベルソ型ペプチドです。・�従来の Tat-Beclin�1 の 5 倍以上高いオートファジー誘導活性を示します。

    Tat-Beclin 1 L11・L体アミノ酸によるペプチドです。・特にin�vivo で,より迅速に分解されます。

    Tat-Beclin 1 L11S・Tat-L11 由来の非活性型スクランブルコントロールです。・ネガティブコントロールとして使用できます。

    Tat-D11 はオートファジー抑制作用を持つ GAPR-1/GLIPR2 に結合する。Tat-D11 はBeclin-1 と拮抗するため,GAPR-1 に結合していた Beclin-1 が細胞質にリリースされ,オートファゴソームの形成とオートファジーを誘導する。

    Tat-Beclin-1 D11 を もっと詳しく!

    本製品の使用例を�より詳細にご紹介している PDFを�Webからダウンロードできます。

     Web ページ番号

    検索65025

    More Info

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

    TEL 03 -5684 -1620 FA

    X 03 -5684 -1775 

     reagent@funako

    shi.co.jp

    掲載品はすべて研究用です

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  • オートファジー/細胞毒性測定キット

    Autophagy / Cytotoxicity Dual Staining Kit

    オートファゴソームの構造を可視化できる

    CellPainter Vector for Autophagosome Marker

    Web ページ番号検索3863

    Web ページ番号検索5081

    特 長� 使用例�

    オートファジーと細胞毒性を同時に測定できる細胞染色用キットです。

    ●�細胞膜に取り込まれる蛍光色素 Monodansylcadaverine(MDC)でオートファジーを,Propidium�iodide(PI)で死細胞を検出します。

    ●�蛍光顕微鏡での観察用,蛍光プレートリーダーでの測定用,フローサイトメトリー用のプロトコルが用意されています。

    ●�測定波長:励起 335�nm/蛍光 512�nm(MDC)      励起 536�nm/蛍光 617�nm(PI)

    オートファゴソームマーカーと tGFP/tRFP の融合タンパク質をコードした cDNA クローンを含むベクターです。

    ●�抗体や試薬を使用しない細胞オルガネラのマーキング●�タンパク質輸送のモニタリング●�オルガネラの形態と動態の研究●�濃縮/精製中の分画の追跡

    Tamoxifen による H9C2 細胞におけるオートファジー誘導青色:MDC,赤色:PI

    :Tamoxifen 処理 :コントロール

    Tamoxifen による Jurkat細胞におけるオートファジー誘導

    キット内容�●�Monodansylcadaverine(MDC)●�Propidium�iodide�solution(PI)●�Assay�buffer�tablet●�Tamoxifen(オートファジー誘導物質)※キットにプレートは付属しません。※測定には,蛍光顕微鏡または蛍光プレートリーダーが必要です。

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Autophagy/Cytotoxicity Dual Staining KitCAY300140 CAY 600140 1�kit�/ 49,600

    #RC100004ATG12-C-tGFP

    #RC100011Di-Ras3-N-tGFP

    #RC100020MAPLIC3A-N-tGFP

    #RC100021MAPLIC3B-N-tGFP

    #RC100036ATG12-C-tRFP

    #RC100043Di-Ras3-N-tRFP

    #RC100052MAPLIC3A-N-tRFP

    #RC100053MAPLIC3B-N-tRFP

    包装/価格�

    [メーカー:ORI]

    ORI629556ORI629524ORI629549ORI629517ORI629540ORI629508ORI629539ORI629507

    因 子 タグの位置商品コード

    tGFP tRFP

    ATG12 C末端 RC100004 RC100036

    Di-Ras3 N末端 RC100011 RC100043

    MAPLIC3A N末端 RC100020 RC100052

    MAPLIC3B N末端 RC100021 RC100053

    10 μg*/¥146,000

    ※本製品は精製プラスミドとして納品されるため,そのまま発現に使用できます。*PCR 約 1,000 回分,哺乳動物細胞へのトランスフェクション約 50回分に相当します。

    フローサイトメトリー結果

    �上記の他にもオルガネラ可視化用クローンがあります

    � Web ページ番号 検索5081

    こ ち ら も オ ス ス メ

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

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  • ●適用:IF,IHC,WB●交差性:Human,Mouse

    HeLa 細胞の染色例緑色:ATG5,赤色:Phalloidin

    オートファジー関連抗体 オートファジー関連化合物

    Web ページ番号検索26588

    抗 ATG5 抗体

    [メーカー:KOM]

    品 名 商品コード 包 装 価格(¥)

    3-Methyl adenine

    AG-CR1-3597-M025 25mg 7,000 KOM997086

    AG-CR1-3597-M100 100mg 21,000 KOM997085

    AG-CR1-3597-M250 250mg 45,000 KOM997084

    EpoxomicinAG-CN2-0422-C100 100μg 27,000 KOM997230

    AG-CN2-0422-C500 500μg 81,000 KOM997229

    Lactacystin

    AG-CN2-0104-C100 100μg 16,000 KOM999050

    AG-CN2-0104-C200 200μg 28,000 KOM997264

    AG-CN2-0104-C500 500μg 65,000 KOM999049

    AG-CN2-0104-M001 1mg 119,000 KOM999048

    Rapamycin

    AG-CN2-0025-C100 100μg 6,000 KOM999371

    AG-CN2-0025-M001 1mg 8,000 KOM999370

    AG-CN2-0025-M005 5mg 16,000 KOM999369

    AG-CN2-0025-M025 25mg 41,000 KOM999368

    Wortmannin

    AG-CN2-0023-M001 1mg 9,000 KOM999375

    AG-CN2-0023-M005 5mg 21,000 KOM999374

    AG-CN2-0023-M025 25mg 50,000 KOM999373

    3-Methyladenine強力かつ選択的な,細胞透過性 PI3K 阻害物質。オートファジーを誘導する。純度:≧98%CAS 番号:5142-23-4

    Epoxomicin強力かつ選択的で不可逆的な,細胞透過性 20S プロテアソーム阻害物質。オートファジーを活性化する。純度:≧97%(NMR)CAS 番号:134381-21-8

    Lactacystin強力かつ選択的で不可逆的な 20S プロテアソーム阻害物質。オートファジーを誘導する。純度:≧98%(HPLC)CAS 番号:133343-34-7

    RapamycinFKBP12 と複合体を形成し,mTORを阻害する。オートファジーを活性化する。純度:≧98%CAS 番号:53123-88-9

    Wortmannin強力かつ選択的な,細胞透過性 PI3K 阻害物質。オートファジーを阻害する。純度:≧98%(HPLC)CAS 番号:19545-26-7

    品  名メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥)

    Anti-APG5, Rabbit-PolyGNT947812 GNT GTX113309 25μl/ 19,000GNT113309 GNT GTX113309 100μl/ 54,000

    ●適用:IF,IHC,WB●交差性:Human,Mouse,Rat

    ラット脳の染色例(基質:DAB)

    抗 Beclin 1 抗体

    品  名メーカー 商品コード 包装 /

    通常  価格(¥)

    キャンペーン価格(¥)

    Anti-Beclin 1, Rabbit-PolyBIS672886 BIS bs-1353R 100μl/ 45,000 31,500

    ※略号:Poly(Polyclonal),FCM(FlowCytometry),IF(Immunofluorescence),IHC(Immunohistochemistry),IP(Immunoprecipitation),WB(Westernblotting)

    使用文献あり!

    使用文献あり!

    ●適用:FCM,IF,IHC,WB

    ●交差性:Human,Mouse,Rat

    マウス肺の染色例(基質:DAB)

    抗 LAMP2 抗体

    品  名メーカー 商品コード 包装 /

    通常  価格(¥)

    キャンペーン価格(¥)

    Anti-LAMP2, Rabbit-PolyBIS697566 BIS bs-2379R 100μl/ 45,000 31,500

    使用文献あり!

    SALE SALE SALE SALE SALE SALEBioss 社使用文献のある抗体 30% OFFキャンペーン実施中!

    [期間:~2019年 10月 31日]

      Web ページ番号 検索81346

    SALE SALE SALE SALE SALE SALE

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    タンパク質分解特集

    試薬

      

    TEL 03 -5684 -1620 FA

    X 03 -5684 -1775 

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    掲載品はすべて研究用です

    19

  • 世界中で幅広く使用されています!

    ATCC® 汎用株化細胞NE

    W

    Web ページ番号検索64949

    ATCC® は,1962 年に培養細胞関連事業を開始してから現在に至るまで,多岐にわたる細胞株を確かな品質でご提供しており,世界最大級のコレクションを保有しています。今回は,ATCC® 取り扱いの幅広い細胞ラインナップの中から,各種組織由来の汎用株化細胞をご紹介します。

    [メーカー:ACC]

    細胞株名 Tissue Morphology Disease ATCC® No. 包 装 価格(¥)

    Human(Homo sapiens)ACC194914 293[HEK-293] embryonic kidney epithelial CRL-1573TM 1 ml 104,000

    ACC101819 293T embryonic kidney epithelial CRL-3216TM 1 ml 104,000

    ACC100206 A549 lung epithelial-like carcinoma CCL-185TM 1 ml 104,000

    ACC100285 HCT 116 colon epithelial colorectal carcinoma CCL-247TM 1 ml 104,000

    ACC100224 HeLa cervix epithelial adenocarcinoma CCL-2TM 1 ml 104,000

    ACC102735 Hep G2[HEPG2] liver epithelial hepatocellular carcinoma HB-8065TM 1 ml 104,000

    ACC100272 HL-60 peripheral blood myeloblastic acute promyelocytic leukemia CCL-240TM 1 ml 104,000

    ACC103189 Jurkat, Clone E6-1 peripheral blood lymphoblast acute T cell leukemia TIB-152TM 1 ml 104,000

    ACC100277 K-562 bone marrow lymphoblast chronic myelogenous leukemia (CML) CCL-243TM 1 ml 104,000

    ACC103018 MCF7mammary gland, breast;

    derived from metastatic site: pleural effusion

    epithelial adenocarcinoma HTB-22TM 1 ml 104,000

    ACC100203 MRC-5 lung fibroblast normal CCL-171TM 1 ml 104,000

    ACC103233 THP-1 peripheral blood monocyte acute monocytic leukemia TIB-202TM 1 ml 104,000

    Mouse(Mus musculus)ACC100387 3T3-L1 embryo fibroblast CL-173TM 1 ml 104,000

    ACC100740 NIH/3T3 embryo fibroblast CRL-1658TM 1 ml 104,000

    ACC100832 C2C12 muscle myoblast CRL-1772TM 1 ml 104,000

    ACC103314 RAW 264.7 Abelson murine leukemia virus-induced tumor; ascitesmonocyte/

    macrophageAbelson murine leukemia virus-induced tumor TIB-71

    TM 1 ml 104,000

    保存温度:

    ※凍結細胞株は,到着後すみやかに ATCC® 推奨の培養条件下で培養を開始して下さい。

    ATCC® 製品分譲は初回のご依頼に先立ち,MTA(Material Transfer Agreement)にご同意・ご署名いただくと共に,New Account Application(BSL1・BSL2・BSL3 のいずれか)を提出し,ユーザー登録をしていただく必要がございます(2 回目以降のご依頼時は,フナコシでユーザー登録の有無を確認させていただきます)。※MTA および New Account Application 未提出の場合は分譲をご依頼いただくことはできません。※ご依頼は New Account Application でお名前をご登録いただいた方のみに制限されます。

    ご 依 頼 に あ た っ て の 注 意 事 項

    Web ページ番号検索68657

    Web ページ番号検索68765

    ATCC® 製品ご依頼方法

    ATCC® 製品ご利用(早わかり)ガイド

    [email protected]  TEL 03-5684-1645ご依頼方法についての お問い合わせ

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    試薬

      

    TEL 

    03- 5

    684-

    1620

     FA

    X 0

    3-56

    84- 1

    775 

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    o.jp

    掲載品はすべて研究用です

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  • アデノウイルス / AAV 作製受託サービス

    Web ページ番号検索67538

    アデノウイルスおよびアデノ随伴ウイルス(AAV)のクローニング/パッケージングを承ります。未精製の小容量から精製済み大容量まで対応可能です。

    特 長 アデノウイルス アデノ随伴ウイルス(AAV)

    トランスフェクション効率 高い 低い

    宿主ゲノムへの組み込み なし なし

    パッケージング能力 7.5 kb 4.7 kb

    タンパク質の発現レベル 高い 低い

    様々なメッシュサイズのセルストレーナー

    pluriStrainerNEW

    Web ページ番号検索56164

    細胞の凝集を除いて単一細胞へふるいわけるセルストレーナーです。

    試料をすりつぶす際に メッシュが外れない

    目詰まりしにくい

    エンドトキシンフリー

    シリンジをセットできる同時に異なるサイズの細胞を濾せる

    別売品の漏斗をセットできる

    色々な使い方ができて便利です!

    [メーカー:PLS]

    メッシュ サイズ 商品コード 包 装 価格(¥)

    PLS702420

    40 μm

    滅 43-50040-03 25 pieces 9,000

    PLS704601 滅 43-50040-51 50 pieces 13,000

    PLS703450 非 43-50040-50 1 pack(50 pieces) 12,000

    PLS705060 NEW50 μm

    滅 43-50050-03 25 pieces 17,000

    PLS705070 非 43-50050-50 1 pack(50 pieces) 22,000

    PLS70243060 μm

    滅 43-50060-03 25 pieces 17,000

    PLS703460 非 43-50060-50 1 pack(50 pieces) 22,000

    PLS702440

    70 μm

    滅 43-50070-03 25 pieces 9,000

    PLS704611 滅 43-50070-51 50 pieces 13,000

    PLS703470 非 43-50070-50 1 pack(50 pieces) 12,000

    PLS70245085 μm

    滅 43-50085-03 25 pieces 17,000

    PLS703480 非 43-50085-50 1 pack(50 pieces) 22,000

    PLS702460

    100 μm

    滅 43-50100-03 25 pieces 9,000

    PLS704621 滅 43-50100-51 50 pieces 13,000

    PLS703490 非 43-50100-50 1 pack(50 pieces) 12,000

    滅:滅菌品  非:非滅菌品

    ※滅菌品はすべて個包装となっています。

    このほかのメッシュサイズの製品や, メッシュサイズの異なるストレーナーの セット品もあります!

    Web ページ番号検索56164

    メッシュサイズ

    1µm

    5µm

    10µm

    15 µm

    20 µm

    30 µm40µm

    60µm

    70µm

    85µm

    100µm

    200µm

    300µm

    400µm 50

    0µm

    アデノウイルス 

    アデノ随伴ウイルス(AAV) 

    遺伝子導入に用いるアデノウイルスとAAVの特長

    ● 目的遺伝子や shRNAを,アデノウイルス ゲノムにクローニングします。

    ● 低力価の一次ウイルスストックを作製します。● オプションで,「小~大スケールでの増幅・精製」「力価測定」を行います。

    ● ウイルスベクターの構築・クローニング, DNA複製を行います。

    ● 利用できるAAVセロタイプは以下の通りです。● AAV1  ● AAV6  ● AAV-DJ● AAV2  ● AAV8● AAV5  ● AAV9

    ご注文方法 

    ご依頼の内容に応じてお見積もりします。詳細は,当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい。[メーカー:VIG]

    免疫組織染色に必要な製品がこの一冊につまっています!A4サイズ,約 290ページ

    [Webページ番号:66606]

    営業担当  FAX 03-5684-1634   [email protected]

    免疫染色実験ガイド

    ラインナップに 50 μmが新登場!

    フナコシニュース2019年 9月 1日号(No.687)funakoshi news

    胞-遺

    受託

      

    TEL 03-5684-1645  jutaku@

    funakoshi.co

    .jp試

    薬 

     TEL 03 -5684 -1620 

     reagent@funako

    shi.co.jp

    掲載品はすべて研究用です

    21

  • Dharmacon カスタム siRNA合成受託サービスNEW

    お客様ご自身で配列デザインした siRNA や,各種修飾(蛍光標識や in vivo 導入用の siSTABLE 修飾)を導入したsiRNA の合成を承ります。

    siRNA 合成受託サービス検索67994

    ご注文方法の詳細検索81062

    製品のご注文は Horizon / Dharmacon のWeb サイトにて承ります

    Dharmacon 独自の化学修飾センス鎖由来のオフターゲット効果を低減ON-TARGET 修飾

    ON-TARGET 修飾はセンス鎖に対する独自の化学修飾です。センス鎖と RISC の相互作用を妨げる修飾を行うことにより,RISC はセンス鎖を取り込むことなく,アンチセンス鎖とのみ複合体を形成するようになります。センス鎖が RISC に取り込まれることに起因するオフターゲット効果が抑制されます。

    センス鎖,アンチセンス鎖由来のオフターゲット効果を低減ON-TARGETplus 修飾

    RISC との相互作用を妨げる修飾により,センス鎖が RISC に取り込まれることに起因するオフターゲット効果が抑えられます。

    RISC に取り込まれたアンチセンス鎖がターゲット mRNA を認識する際に,より厳密な相補性が必要となる化学修飾により,ターゲット遺伝子に対する特異性が高められます。

    ON-TARGETplus 修飾は,センス鎖とアンチセンス鎖の両鎖に対する独自の化学修飾です。オフターゲット効果を抑えるとともに,ターゲット遺伝子に対する特異性を高めます。

    センス鎖

    アンチセンス鎖

    ON-TARGETplus 修飾によるオフターゲット効果の低減各ターゲット遺伝子について,未修飾,センス鎖修飾,ON-TARGETplus 修飾した siRNA を用い,発現抑制(2 倍以上)が確認されたオフターゲット遺伝子の数を示す。

    in vivo 実験用に安定性を向上siSTABLE 修飾

    siSTABLE 修飾は,ヌクレアーゼに対する安定性を高める化学修飾です。通常の siRNA は血清中での安定性が不十分なため in vivo 実験には不向きですが,siSTABLE 修飾された siRNA は血清中での安定性が大幅に向上するため,in vivo 実験に適しています。同時にセンス鎖に対する修飾が施されるため,センス鎖由来のオフターゲット効果が低減され ます。

    そのほかの化学修飾

    トランスフェクション試薬を使わずに細胞へ導入Accell 修飾

    Biotin / Cy3 / Cy5 / Cy5.5 / DY547 / Fluorescein / TAMRA など色素修飾

    mA / mC / mG / mU / dA / dC / dG / dT / S-S / 5’-P など化学修飾

    トランスフェクション試薬を使わずに細胞へ導入できる独自の化学修飾です。Accell siRNA を専用培地(#B-005000,Web ページ番号:63972)と混ぜ,培地と置き換えて細胞を培養するだけで,従来導入が難しかった細胞でも RNAi 実験を可能にします。

    お客様ご自身で siRNA の配列をデザインいただく際はオンラインツール siDESIGN Center をご活用下さいhttps://dharmacon.horizondiscovery.com/jp/design-center/

    siSTABLE 修飾による安定性の向上ヒト血清(100%)中における siSTABLE 修飾siRNA と未修飾 siRNA の安定性の比較を示す。

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    受託

      

    TEL 

    03-5

    684-

    1645

     FA

    X 0

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    539 

     jut

    aku@

    funa

    kosh

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    .jp

    掲載品はすべて研究用です

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  • 長鎖ペプチドの完全化学合成もお任せ下さい!

    ペプチド合成受託サービスNE

    W

    Web ページ番号検索64967

    Smart Bioscience 社は,お客様のご希望に応じた 2~120アミノ酸残基までのペプチド受託合成を承ります。長鎖ペプチドの化学合成,複数のジスルフィド結合の導入など,難易度の高いペプチドの合成実績があり高い技術力を持っています。

    サービスの概要�●�幅広いスケール(1�mg~g単位まで可能)の合成が可能です。●�超高純度ペプチド(99%以上)の合成も承ります。●�HPLC および質量分析データを添付しています。●�ペプチドの可溶性テストを行い,推奨溶解条件を添付しています。

    ●�オプションにて様々な修飾を承ります。

    納品時の試験成績書(Certificate�of�Analysis)の例

    化学式

    推奨 溶解 条件

    純度

    HPLCデータ

    形状

    モル 質量

    質量 分析

    データ

    各種データが�そろっています

    複数のジスルフィド結合を狙った部位に導入Smart Bioscience 社の強み その 1

    R R’S S

    長鎖ペプチドの化学合成Smart Bioscience 社の強み その 2

    SP.G4 S

    P.G4

    1)Deprotection 1

    2)Oxidative folding

    1)Deprotection 2

    2)Oxidative folding

    1)Deprotection 3

    2)Oxidative folding

    SP.G2

    SP.G2

    SP.G3

    SP.G3

    S S SP.G2S

    P.G2

    SP.G3

    SP.G3

    S SSS

    SP.G3

    SP.G3

    S SSS

    S S

    1. ペプチドの固相合成時に保護基を導入したシステインを用い,システイン残基が保護されたペプチドを合成する。この時にジスルフィド結合を導入したいシステイン残基のペアごとに異なった複数種の保護基を用いる。

    2. それぞれのペアに特異的な脱保護反応を行い,続いてジスルフィド結合を導入する。

    3. 上記反応を繰り返し,複数のジスルフィド結合をもつペプチドを合成する。

    一般的に 50アミノ酸残基程度以上の長鎖ペプチドは化学合成が困難とされ,Smart�Bioscience 社以外の多くのメーカーではバクテリアを用いて長鎖ペプチドを発現,精製しています。しかし,このような組換え体(リコンビナント)ペプチドにおいては,バクテリア由来の成分による汚染が問題となる場合があります。一方で,Smart�Bioscience 社では,独自に改良を加えた Native Chemical Ligation 法を用いて複数の化学合成ペプチドを連結することで長鎖ペプチドも化学的に合成することができます。完全化学合成品のため,バクテリア成分による汚染の心配がありません。

    追加料金で,10営業日以内に Smart�Bioscience 社からペプチドを出荷するサービスです*。ペプチドの配列にもよりますが,基本的に35アミノ酸残基以内かつ10�mg以内までの合成が難しくないペプチドが対象となります。*10営業日以内に Smart�Bioscience 社から出荷ができなかった場合には,通常料金となります。

    ご注文方法/価格などの詳細は,当社受託・特注品業務担当までお問い合わせ下さい。� [メーカー:SMR]

    TEL�03-5684-1645  FAX�03-5684-6539    [email protected]受託・特注品担当

    エクスプレス合成サービスSmart Bioscience 社の強み その 3

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi�news

    ド・タ

    受託

      

    TEL 03-5684-1645 FA

    X 03-5684-6539 

     jutaku@funako

    shi.co.jp

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  • pET ベクターと発現用コンピテントセルのセット

    pET Expression Packキャンペーン実施中:~2019 年 9 月 30 日

    Web ページ番号検索3877

    T7 プロモーター系 E. coli 高発現ベクター(1 種類,15 μg)と,ヒートショックや培養が不要のコンピテントセル(#DS255,100 μl×3 本)のセットです。

    40%OFF

    BamSmaKpnSacEcoSalHinNot

    HⅠⅠⅠⅠRⅠⅠdⅢⅠ

    MCS(共通)

    pUC Ori

    Amp/Km

    DynaVector Zip Competent Cell BL21(DE3)

    ヒ-トショック不要Mix & Plate!

    [メーカー:BDL]

    ベクター名 pETUA pETBA pETIA pETUK pETBK pETIK

    商品コード DS255UA DS255BA DS255IA DS255UK DS255BK DS255IK

    薬剤耐性遺伝子 アンピシリン(Amp) カナマイシン(Km)

    BDL220255 複製起点(Replicon) pUC pMB1 pUC pMB1

    BDL230255 6×His tag の付加(N 末端) ○ ○ ○ ○ ○ ○

    BDL240255 非誘導時発現抑制 - - ○ - - ○BDL250255 包 装 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set 1 set

    BDL260255 通常価格(¥) 23,000 23,000 23,000 23,000 23,000 23,000

    BDL270255 キャンペーン価格(¥) 13,800 13,800 13,800 13,800 13,800 13,800

    関連製品 タンパク質発現用コンピテントセル 40%OFF  [Web ページ番号:8342]

    [メーカー:BDL]

    品 名Competent E. coli Cell

    BL21Zip Competent E. coli

    Cell BL21 (DE3)Competent E. coli Cell

    BL21 (DE3)Competent E. coli Cell

    BL21 (DE3) pLysSElectroCompetent

    E. coli Cell BL21 (DE3)

    BDL200240

    BDL200255 商品コード DS240 DS255 DS250 DS260 DS258

    BDL200250 包 装 10×100 μl 10×100 μl 10×100 μl 10×100 μl 5×50 μl

    BDL200260 通常価格(¥) 20,000 20,000 20,000 20,000 16,000

    BDL200258 キャンペーン価格(¥) 12,000 12,000 12,000 12,000 9,600

    E. coli 株 BL21 BL21 (DE3) BL21 (DE3) pLysS BL21 (DE3)

    形質転換効率(cfu/μg)(pUC19) ≧5×10

    7 ≧2×106 ≧5×107 ≧5×107 >2×109

    操作時間 約 80 分 約 5 分 約 80 分 約 80 分 -

    ヒートショック 必要 不要 必要 必要 -

    回復培地 必要 不要 必要 必要 必要

    誘導発現 λ ファージ CE6 の感染が必要 IPTG 添加

    ■セット品:BL21(DE3)Expression Competentcell Pack

    上記コンピテントセル BL21(DE3)株と BL21(DE3)pLysS 株(100 μl×各 5 本),SOC medium(1 ml×10 本)のセット品です。

    品  名メーカー 商品コード 包装 /

    通常  価格(¥)

    キャンペーン価格(¥)

    BL21(DE3)Expression Competentcell PackBDL DS265 1 set / 20,000 12,000 BDL000265

    BDL の 月 替 わ り キ ャ ン ペ ー ン 今月でラスト!

    4月 6月 8月5月 7月 9月 40%OFFさら

    に! キャンペーン対象製品をご購入いただいた方の中から抽選でフナコさんロゴ入り白衣をプレゼント!

    フナコシニュース 2019 年 9 月 1 日号(No.687)funakoshi news

    ド・タ

    試薬

      

    TEL 

    03- 5

    684-

    1620

     FA

    X 0

    3-56

    84- 1

    775 

     rea

    gent

    @fu

    nako

    shi.c

    o.jp

    掲載品はすべて研究用です

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  • 短時間に高感度でタンパク質を染色

    QuickBlue Staining Solutionキャンペーン実施中:~2019 年 9 月 30 日

    N 末端 6×His タグに対する抗体キャンペーン実施中:~2019 年 9 月 30 日

    Web ページ番号検索908

    Web ページ番号検索389

    40%OFF

    40%OFF

    電気泳動したポリアクリルアミドゲル中のタンパク質を短時間かつ高感度(≧8 ng)に染色できる試薬です。

    N 末端 6×His タグ融合タンパク質の検出市販されている発現ベクターを使用して産生した N 末端 6×His タグ融合タンパク質

    (レーン 3~7)を,本抗体を用いてウェスタンブロッティングにより検出した。レーン 1,8 は分子量マーカー。レーン 2 は N 末端 6×His タグを持たないタンパク質を泳動した。

    品  名メーカー 商品コード 包装 /

    通常  価格(¥)

    キャンペーン価格(¥)

    Anti-6-His, Mouse-Mono (H21-5) 〈Anti-6×Histidine〉BDL F008 100 μg / 25,000 15,000 BDL000800N 末端側に His タグを有するタンパク質を認識する。性状:APu,適用:ELISA, WB

    ※略号:APu(Affinity Purified),WB(Western Blotting)

    1 2 3 4 5 6 7 8

    本製品

    A 社 染色液

    (操作時間) 0 分 20 分 80 分 120 分

    約90分

    品  名メーカー 商品コード 包装 /

    通常  価格(¥)

    キャンペーン価格(¥)

    QuickBlue Staining SolutionBDL200500 BDL DS500 500 ml / 11,000 6,600

    ミニゲル約 20 枚分。

    迅速,高効率なセルフリー,in vitro 無細胞タンパク質合成キット

    RTS 無細胞タンパク質合成キット

    Web ページ番号検索4031

    [メーカー:BRG]

    タンパク質発現系・製品カテゴリ 品 名 最大収量*

    /反応液量使用可能な

    テンプレート 反 応 反応数 商品コード 包 装 価格(¥)

    E. coli High Yield Kits大腸菌細胞ライセート�