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μ-piece ヒトI型コラーゲン様リコンビナントペプチドからつくられた新規細胞培養足場材
CellSaic μ-pieceは、従来の細胞塊より遥かに生存率の高い新規三次元構造体 CellSaicの作製を可能とする。 Nakamura K, Iwazawa R, Yoshioka Y. Introduction to a new cell transplantation platform via recombinant peptide petaloid pieces and its application to islet transplantation with mesenchymal stem cells. Transpl Int 2016; 29(9): 1039-50.
μ-piece 細胞
～1mm
CellSaic の性能例
・細胞塊中に細胞の足場と隙間が最小限組み込まれることで、細胞死が抑制されます。 ・移植後には、良好な血管導入がみられます。
400μm以上
CellSaic 足場が作る隙間や足場自体が酸素・栄養・
老廃物の通り道になるのではないか？
足場
酸素・栄養
が中心部
まで拡散
排出されやすい
生存
CellSaic のメリット Cellnest μ-piece で作る三次元構造体, CellSaic には、細胞移植に適した様々なメリットがあります。
セ ル ザ イ ク
100μm
HE染色組織標本画像
CellSaic(セルザイク) : Cell and Scaffold, forming Mosaic
CellSaic μピース 細胞
混合培養
HE切片（拡大図）
μ-piece
細胞(hMSC)
50μm
細胞塊（スフェロイド）
400μm以上の厚みを持つ細胞塊は中心部
から細胞が死ぬ（セントラルネクローシス）
老廃物が 排
出されない
酸素・
栄養が
届かない
細胞
200μm以上
細胞死
400μm以上
○移植細胞の 生着率が向上 ○内部への血管 導入確率が向上
in vitro試験例
in vivo試験例
hMSCを用いた試験例において、スフェロイドと比較してCellSaicでは細胞死を抑えることで高い細胞の生存活性を示していました。
hMSCをNOD-SCIDマウスの皮下に移植した試験例。スフェロイドと比較してCellSaicで移植した場合、細胞の生着が向上し、graft中への血管導入確率も向上しました。
hMSCで作製したスフェロイドでは死細胞が散見されるが、μ-piece を用いて作製したCellSaicでは、生細胞の多いことが分かる。
LIVE : Calcein（緑） DEAD: EthD-1（赤）
■in vitro LIVE/DEAD染色 ■ in vitro ATP assay (Day7)
Spheroid 20,000 cells
Spheroid 80,000 cells
CellSaic 20,000 cells
hMSC（2X104cells)でATP量を定量化。 高い細胞生存活性を示した。
- Curr Stem Cell Res Ther. 2019;14(1):52-56 Nakamura K. - Transpl Int. 2016;29(9):1039-50 Nakamura K. et al.
- Curr Stem Cell Res Ther. 2019;14(1):52-56 Nakamura K. - Transpl Int. 2016;29(9):1039-50 Nakamura K. et al.
100μm 血管 500μm
hMSC CellSaic
μ-piece
NOD-SCIDマウス皮下移植7日後のHE染色組織標本画像
細胞死の抑制と、細胞生着率の向上。
直径～3cm
膵癌細胞周囲に間質組織が形成
Capan-1 膵癌細胞
μ-piece
CellSaic移植モデル
BMSC+μ-pieceをCapan-1と共移植した場合に間質組織の形成が認められた。
0
100
200
300
400
500
600
0 5 10 15 20 25 30
Days after transplantation
Blo
od g
lucose level (m
g/dL)
膵島のみ移植
膵島+hMSCセルザイク
糖尿病マウス
正常マウス
膵島+hMSC
移植後28日までの血糖値の推移
膵島移植後の日数 （日）
血糖値
炎症性腸疾患 膵島移植
75
80
85
90
95
100
105
0 5 10 15
体重（％）
期間（Days）
体重推移
健常
炎症
hADS
C(i.p)
CellSa
ic
hADS
C(i.v.)
DSS炎症誘導期間
投与日
CellSaic(i.p.)群
非投与群
hADSC(i.p.)群
健常群
hADSC(i.v.)群
(各群n=5)
4.5
5.5
6.5
7.5
8.5
大腸の長さ（
cm）
大腸の長さ75%値－中央値
中央値－25%値
平均値* *
健常群非投与群
hADSC(i.v.)群
hADSC(i.ｐ.)群
CellSaic(i.ｐ.)群
CellSaic の使用例
糖尿病モデルマウスを用いた膵島移植への応用例。
腸炎モデルマウス（DSSモデル）を用いた細胞移植試験例。脂肪由来幹細胞の投与においてCellSaicで投与した場合、細胞単独に比べて炎症抑制/体重回復等が促進された。
脳梗塞
担癌マウス作製
膵癌株化細胞を用いた担癌モデルマウス作製時にhBMSCを併用した実験例。
CellSaicの融合/ ボリュームアップ
CellSaicで大きな形状
CellSaic同士は細胞を糊として融合させることも可能。
CellSaicの融合ではなく、一度に大きな細胞構造体を形成させた実験例。
- Transpl Int. 2016;29(9):1039-50 Nakamura K. et al.
- Cell Transplant. 2018;27(9):1390-1400. Iwazawa et al.
脳梗塞モデルラットを用いた骨髄由来幹細胞移植試験にCellSaicを用いた実験例。
ラット中大脳動脈閉塞により右脳に脳梗塞を起こしたモデルラットにCellSaic (BMSC+μ-piece) を梗塞部位に局所移植。簡易的な症状改善として、左旋回行動を数値化して評価した。
細胞懸濁液のみの投与と比較して、左旋回行動の改善効果が認められた。
CellSaic
BMSC CellSaic 移植 右脳・脳梗塞モデルラット
右脳梗塞なので、 左回り行動となる傾向を示す
脳梗塞発症 日数
健常時 7日 14日 21日 28日 35日
- WO/2015/194494, 特許6330042
Capan-1 膵癌細胞
間質組織が形成されない
スフェロイド移植モデル
BMSCをCapan-1と共移植しただけではヒト病態のような間質組織は形成されない。
Volume up of CellSaic in vitro
500
700
900
1100
1300
1500
1700
1900
2100
2300
2500
0 10 20 30in vitro culture period （days）
Dia
mete
r of
CellS
aic（μ
m） ブロック追
加追加無し
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
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16
17
18
19
20
21
22
23
24
μ-piece追加
追加なし
μ-pieceを追加しながら培養することでCellSaicをボリュームアップさせることも可能。
直径3cm×厚さ0.5mm程度のシート形状として、セルザイクが得られた。
底面形状が特殊なEZSPHERE®(AGCﾃｸﾉｸﾞﾗｽ)を鋳型にセルザイクシートを作成した。 hBMSC 2×107cells+μピース20mgをType903 35mmディッシュに播種し4時間培養。
- WO/2017/022613 - WO/2017/057547
様々な細胞移植実験へ応用例。
- Curr Stem Cell Res Ther. 2019;14(1):52-56 Nakamura K. - Transpl Int. 2016;29(9):1039-50 Nakamura K. et al.
μ-piece によるCellSaic作成方法 ：
CellSaic作製プロトコールの概要 μ-piece(0.1mg/mL)と細胞（1.0×105cells/mL）
の懸濁液を、96well U字底低吸着プレートに
200uL/wellずつ播種。プレート遠心機で遠心
（600g× 5分）し、CO2インキュベータ（37℃）へ。
1～2日培養して完成する。
μ-piece：0.02 mg/well
細胞：2.0×104 cells/well
培地：200 uL/well
プレート遠心機で
遠心（600g×5分）
37℃, CO2
インキュベータで
１～２日
①
μ-piece（0.1 mg/mL）と 細胞
（1.0×105 cells/mL）の 懸濁液
を200 uL/wellずつ播種
②
完成
自然落下での代替
も可能
和光コード / メーカーコード
品名 容量 粒径 保管温度・条件 希望納入価格
(税別)
633-44791 / 16629004
cellnest μ-piece セルネストマイクロピース
>10mg 50～
100 μm 室温 1℃～30℃ 高温多湿を避ける ¥22,000
・本製品は研究用試薬であり、それ以外の目的には使用できません。 ・人体への投与実績は無く、安全性は保証されていませんが、一部の動物試験における安全性データがご提供できる場合がございます。 ・滅菌処理済み・原料材料エンドトキシン規格（<10 EU/g)・掲載情報は2019年3月現在のものです。
■cellnest マイクロピースの論文・文献リストを、富士フイルムウェブサイトで公開中！
・下記のサンプルサイズ（>10mg)以上は、ご要望に応じた容量にて納品可能です。納期等お問合せください。
開発・製造元
総販売代理店
培養Q&A Q. どのような細胞種でCellSaicが作れますか？
Q. CellSaic がきれいに球形にならないのですが・・・？
A. 間葉系幹細胞、血管内皮細胞、骨格筋芽細胞、心筋細胞、線維芽細胞、平滑筋細胞などの接着細胞で作成例があります。
A. 細胞腫によってはスフェア形成しにくい為にCellSaicが扁平上に形成される細胞や、細胞のみでスフェア形成してしまう細胞などもあります。そのような場合は、CellSaicを形成しやすい細胞（間葉系幹細胞や線維芽細胞など）を適量混ぜる（20%～等量）ことで、球状のセルザイクを形成出来る場合が多いです。
※10mgのμ-pieceには 10mLの細胞懸濁液を加えます。