Kostný metabolizmus β-CrossLaps (β-CTx)

4.10.2017 BRATISLAVA Mgr. Anita Ráczová

2

15-20 % celkovej hmotnosti tela Funkcie: Zaisťujú homeostázu Spolupracujú pri úprave porúch acidobázickej

rovnováhy Vytvoria priestor pre kostnú dreň Sú pevnou oporou tela

Bunky

Medzibunková hmota

3

Medzibunková hmota: Organická 90% kolagén typu I (III, V) Nekolagénové proteíny (osteokalcín, sialoproteín,

osteonektín, fosfoproteín)

Anorganická Hydroxyapatyt Ca10(PO4)6(OH)2 Hydrogénfosforečnan vápenatý CaHPO4 Hydrogénfosforečnan horečnatý MgHPO4 Uhličitan vápenatý CaCO3

Voda

~65%

~25% ~10%

Anorganická

Organická

Voda

4

Bunky: Osteoblasty - kostná tvorba

Osteoklasty – kostná resorpcia

Osteocyty – zrelé kostné bunky, zabudované do kostnej hmoty

Neustála remodelácia

kostného tkaniva Trvá 4 mesiace Za rok sa obnovuje 10% kostry

5

Do 25-30r. -> PBM (peak bone mass) -> ↑ novotvorba

Rovnovážny stav -> novotvorba=resorpcia

Cca. po 50.r -> ↑ resorpcia

6

↑ riziko zlomenín

Postihuje → >200 miliónov ľudí na svete

→ 400 tisíc ľudí na SK

V nasledujúcich 20 rokoch

- zdvojnásobnenie počtu pacientov - strojnásobnenie počtu zlomenín

7

Primárna osteoporóza Súčasť starnutia

I.typ – U žien v postmenop. štádiu

(↓ tvorba estrogénu)

II.typ – U mužov, žien po 70 r.

–senilná osteoporóza –hladina ♂ pohl.hormónov klesá pomalšie ->

80% seniorov s osteoporózou sú ♀

8

Sekundárna osteoporóza spôsobená Známym ochorením (štítnej žľazy, vnútorných orgánov, vstrebávanie Ca, VitD, astma, reumatické, nádorové ochorenia)

Neznámym (asymptomatickým) ochorením

Dlhodobou liečbou

Dlhodobá nepohyblivosť

Idiopatická – mladí, bez známej príčiny

Juvenilná – v prepuberte, adolescencii, bez inou základnou chorobou

9

10

Rodinná anamnéza

Klinické symptomy

Zobrazovacie metódy (denzitometria) Laboratórne vyšetrenia

Stanovenie markerov metabolizmu kosti

LEN na posúdenie stavu remodelácie NIE pre stanovenie konkrétnej

diagnózy kostnej choroby Stav minerálov (Ca), hormónov

(PTH, TSH, FT3, FT4), ukazovateľov kostného metabolizmu

Monitorovanie účinnosti liečby

11

Markery kostnej novotvorby

Alkalická fosfatáza – bALP – aktivita osteoblastov

Propeptid kolagénu Typu I – tvorba kolagénu N-terminálny propeptid prokolagénu typu I – PINP C-terminálny propeptid prokolagénu typu I – PICP

Osteokalcín – OC – syntéza nekolagénových proteínov a mineralizácia

12

Markery kostnej resorpcie Deoxypyridinolin – DPD , Pyridinolin - tvorba priečnej väzby medzi kolagénovými

vláknami

Telopeptid kolagénu typu I - degradácia kolagénu

N-terminálny telopeptid kolagénu typu I – NTX C-terminálny telopeptid kolagénu typu I - CTX C-terminálny telopeptid kolagénu typu I tvorený metaloproteinázami – ICTP,

CTX-MMP

Tartarát-rezistentná kyslá fosfatáza – TRACP – aktivita osteoklastov

Hydroxyprolin – degradácia kolagénu a neorganickej zložky kosti

13

↑ degradácia kolagénu typu I (navzájom pripojené vlákna s priečnymi väzbami v N-, C-terminálnych koncoch -> cross-links)

Osteoklasty vylučujú kyslé a neutrálne proteázy (katepsín K) degradujú vlákna na fragmenty (N a C-terminálne telopeptidy) priečne väzby sa oddelujú vzniká degradačný produkt CTx (C-terminálny telopeptid)

14

Lineárna 8 AMK (EKAHDGGR) sekvencia C-terminálneho telopeptidu reťazca α1

Izomerizácia - L-aspartyl (αL) peptid so starnutím sa premení na L-isoaspartyl (βL)

15

Osteoporóza, osteopénia, Pagetova choroba, hypertyreodizmus, hyperparatyreodizmus

Na detekciu skorých zmien kostnej hmoty

Na monitorovanie efektívnosti antiresorpčnej terapie (bisfosonáty, substitučná hormonálna terapia - HRT)

16

ECLIA – elektrochemiluminiscenčná imunoanalýza

Sérum

18 min.

Elecsys β-CrossLaps/serum – 2 monoklonálne protilátky pre lineárne oktapeptidy β-8AA

Kvantifikácia degradačných fragmentov kolagénu typu I obsahujúceho zdvojený izomerizovaný oktapeptid β-8AA

17

Odber ráno nalačno

Sérum do štandardných odberových skúmaviek

Stabilita v sére: 6 hodín pri 20-25 °C, 8 hodín pri 2-8 °C

Stabilita K2- a K3-EDTA plazmy: 24 hodín pri 20-25 °C, 8 dní pri 2-8 °C.

Referenčné hodnoty

Muži • 30-50 rokov <0.584ng/ml • > 50-70 rokov <0.704 ng/ml • > 70 rokov <0.854 ng/ml Ženy • premenopauzálne <0.573 ng/ml • postmenopauzálne <1.008ng/ml

18

Interferencie Hemolytické vzorky (Hb > 0.5 g/dL) spôsobujú nameranie

znížených koncentrácií β-CTx.

Od pacientov s liečbou s ↑ dávkami biotínu neodobrať vzorky skôr ako po 8 hodinách od posledného podania biotínu

Neužívať vitamin B7 12h pred odberom

Pacienti so zníženou renálnou funkciou, ↑ hladina β-CTx v sére

19

Švajčiarsko – Nyone

Prevencia, diagnostika, liečba

Aktivity na spoznanie rizikových faktorov OP

Odporúčanie vyšetrenia kostných markerov

20