الرحیم الرحمن الله بسم

Seyed Mostsfa HosseiniM.Sc. student of Medical MicrobiologyDepartment of Microbiology Hamadan University of Medical science

smhoseiny88@yahoo.com

ویبریو ها

معرفی. هستند جهان تمام در سطحی آب در موجود های باکتری ترین شایع از ها ویبریو

. باشند می قطبی فالژل یک واجد و خمیده،هوازی،متحرک های باسیلشامل :4ویبریوناسه اند خانواده

(ویبریوها- سطحی ) های آب و دریاها آب در عمده طور به

(آئروموناس- سرد ) خون حیوانات در و شیرین های آب در

باکتریوم - فتو

(پلیزیوموناس- سرد) خون و گرم خون حیوانات درsmhoseiny88@yahoo.com

خانواده این برای شده پیشنهاد دیگر های جنسنیستند زا بیماری

آلوموناسلیستونال باکتر انیدرو ویبریو سالینی ویبریو انترو

به فقط 40نزدیک که شده پیشنهاد ویبریو گونه 12گونه. باشد می زا بیماری انسان برای

. است وبا بیماری عامل کلرا ویبریو آن مهمترینبار اسنو اولین . جان کرد کشف را وبا بیماری

. باشد می متفاوت دسترس در غذایی مواد و شوری،دما به بستگی آنها تعداد. دارد وجود ها باکتری این از میزان بیشترین تابستان فصل و معتدل دمای در . باشد می آلودگی عامل بیشترین انسان مدفوع به محلی های آب شدن آلوده توسعه حال در کشورهای در . تاژک نامناسب شرایط در اما باشد می ویرگول بصورت آنها شکل دارند،مهمترین وجود مختلف اشکال به محیط در

. شوند می ناپدید سیتوپالسمی های آیند،گرانول می در کوچک و گرد صورت به و دهند می دست از را خود. دارند وجود ها صدف یا آلی مواد به متصل یا رسوبات در عمدتا سرد دمای طول در. دهند بیوفیلم تشکیل توانند می ویبریوها

گونه های بیماری زا

V. ALGINOLYTICUSV. CHOLERAV. CINCINNATIENSISV. DAMSELV. FLUVIALISV. FURNISSII

V. HARVEYIV. HOLLISAEV. MERSCHNIKOVIIV. MIMICUSV. PARAHAEMOLYTICUSV. VULNIFICUS

ویبریو کلرا

. است انسانی های بیماری مهمترین از یکی که است وبا عامل کلرا ویبریو با آلوده آبی منابع در ها ارگانیسم که گرمتر،هنگامی ماهای در عمده طور به وبا

. دهد می یابند،رخ تکثیر توانند می انسانی مدفوع دست از ساعت هر در را مایع لیتر یک بیمار که کند می ایجاد آبکی اسهال عفونت

. دهد می

مورفولوژی

میکروسکپی

طول به ای خمیده های باسیل شکل به آید می بدست بیمار از که 2هنگامیالعاده 4تا قطبی،فوق تاژک یک داشتن با و است منفی گرم و بوده میکرون

. است متحرک های باسیل صورت به است ممکن کشت تجدید و کهنه های کشت در

. دارند شباهت ای روده منفی گرم های باکتری به که شوند مشاهده کشیده. است رایج بیشتر ثابت فاز در کاما و منحنی شکل شکل به مایع های محیط .Sدر دارند بیشتری تحرک و هستند

مورفولوژیماکروسکپی

. دارند انتخابی غیر های محیط در زیادی تنوع. کنند می تولید ای خامه و محدب،صاف های بیشترکلنی. کنند می ایجاد را تری مات های کwلنی کپسول دارای های سویه اگرLPS ایجاد دار دانه های برود،کلنی بین از موتاسیون اثر بر

. کند می

کشت و احتیاجات رشدنمونه های ویبریو را باید سریع پردازش کرد و نباید در داخل یخچال گذاشت.

نمونه مدفوع را با محیط کری بلیر انتقال می دهیم.

انواع محیط کشت:محیط انتخابی( TTGAتلوریت توروکوالت ژالتین آگار)

(TCBSتیوسولفات سیترات نمک های صفراوی سوکروز آگار)مک کانکی

بالد آگارو V. ALGINOLYTICUSمیزان نمک برای جداسازی گونه ها مفید می باشد.بیشترین احتیاج به نمک را

V.AEROGENESV. MIMICUS و V. CHOLERAکمترین احتیاج

کشت و احتیاجات رشد در خوبی به ها ویبریو اغلب و کلرا کشت 37ویبریو محیط نظیر ها محیط از مختلفی انواعی روی بر و سانتیگراد درجه

. ) ( کنند می رشد نیتروژن و کربن منبع عنوان به آسپارژین و معدنی های نمک حاوی کشت محیط روی بر خوبی به کلرا رشد کرده و کلنی های زرد رنگ مشخصی را در زمینه سبز TCBSویبریو

تیره)محیط( ایجاد می کwند.TCBS می تواند محیطی برای تفریق سویه ها باشد چرا که V. CHOLERA ، V. ALGINOLYTICUSوV.

FLUVIALIS سوکورز موجود در این محیط را تخمیر و کلنی زرد ایجاد می کنند،در حالی کهV. VULNIFICUS، V. MIMICUS، V. PARAHAEMOLYTICUS.و.......این توانایی را ندارند و ایجاد کلونی های سبز رنگ می کنند

ی،ویبریو ها درwبه طور مشخصPH( رشد کرده و به سرعت در اسید کشته می شوند.8/5-9/5 باال ).کشت هایی که حاوی کربوهیدرات های قابل تخمیر هستند به سرعت استریل می شوند .ویبریو کلرا سوکورز و مانوز را تخمیر کرده،ولی قادر به تخمیر آرابینوز نمی باشد.تست اکسیداز مثبت اولین قدم در تشخیص افتراقی و اولیه ویبریو کلرا است گونه های ویبریو نسبت به مادهO/129( 2حساس می باشد.7و6-دی آمینو-4و )دی ایزوپروپیل پتریدین فسفات-

متابولیسم

. تولید نهایت در گلوکز تخمیر با کنند می تولید گاز کمی مقدار اما کرده تخمیر را گلوکز.پیروات،اتانول،الکتیک،استیک،فورمیک اسید کنند می

( کربانول متیل استیل و استون تولید توانند می ها گونه از .مثبتVPبعضی کنند( : کنند می آزاد بستر در و تولید زیادی های آنزیم ها ویبریو

سیتولیزین،پروتئاز،االستاز،آمیالز،ژالتیناز،نوکلئاز،لیپیداز،سولفاتاز. هستند مثبت اکسیداز ها گونه اکثر. شیمیوارگانوتروفند همه حداقل تواننددر .+ NHو D-GLUCOSEمی کنند رشد نیتروژن و کربن منبع عنوان به

اجزای سلولی وساختار آنتی ژنی

فالژل یا فالژلی حرارت به حساس ژن آنتی یک ویبریوها Hاکثر

دارند. کند حرکت مایع محیط در تا دهد می اجازه باکتری به فالژل

ونهایتا کند حرکت غذا منبع سمت به شیمیوتاکسی توسط و. کند شرکت بیوفیلم در

به نیاز قطبی تاژک بیان پاراهمولیتیکوس ویبریو ژن 60دردارد.

الزم ویروالنس برای پاراهمولیتیکوس و کلرا ویبریو در تاژک. باشد می

اجزای سلولی وساختار آنتی ژنیپیلی . کنند مwی تولید را پیلی از انواعی ها ویبریو پیلی wروی بر مطالعه شده )TOXIN COREGULATED PILUS )TCPبیشترین انجام

است.TCP تیپ پیلی .4یک شود می کد پاتوژنیسیته جزایر توسط که باشد می به پیلی . 2این دارد اهمیت باکتری ویروالنس برای مخاط -1علت به باکتری جسبیدن wبرای

. باشد می ضروری عفونت ایجاد و روده.CTXبه- 2 چسبد می کند می حمل را توکسین کلرا ژن که ،فاژی

کلرا کلرا O1ویبریو ویبریو و التور تیپ O139بیوتیپ پیلی نام 4یک به کهMSHA wثانویه را. . کنند می تولید را پیلی این ندرت به کالسیک های سویه کنند می تولید را است حساس مانوز به

نقشMSHA. است نشده wمشخص هنوز انسان زایی بیماری در

اجزای سلولی وساختار آنتی ژنیکپسول کلرا ویبریو بجز ها کلرا . O1ویبریو کلرای ویبریو کنند می تولید را ساکاریدی پلی ساکاریدی O139کپسول پلی کپسول

. کند می تولید را است شده تشکیل هگزاساکاریدی تکراری های واحد زیر از که خاصی

سلولی دیوارهLPS. دارد ها سرگروه تعین در مهمی نقش و است سلولی دیواره در مهم جزء های LPSیک باکتری سایر مانند هم ویبریو

: دارای منفی گرمCORE POLYSACCHARIDE O POLYSACCHARIDE SIDE CHAIN LIPID A

ویبریو O1در لیپیدA : بتا به 6-1شامل متصل ساکارید دی آمین .2گلوکز باشد می فسفات گروه: شامل ساکاریدی پلی گلیسرو- Lگلوکز،-Dو )KDO )KETOJ-DEO_XY-D-MANNOSE-OCTULOSONIC ACIDهسته

. است فسفات آمین اتانول مانان،فروکتوز، هپتوز. کند می فرق هم با مختلف گروهای سر در ساکاریدی پلی هسته

مکانیسم ژنتیکیکروموزوم کلرا .2ویبریو . کند ایجاد را بزرگ پالسمید یک تواند می آنها از یکی دارد حلقوی کروموزوم

. هستند باکتری برای ضروری های ژن حاوی دو هر

پالسمید . مقاومت های ژن اخیرا دارد وجود زیادی های پالسمید رایج صورت به ها باکتری این در

. ) است) شده کشف اینها در تریمتوپریم،آمیکاسین،توبرمایسین،استرپتومایسین دارویی

فاژ از که 180بیش . 10فاژ می استفاده ژن انتقال و فاژتایپینگ در کنند آلوده را ها ویبریو توانند می باشند می ای رشته آنها از تا

لیزوژنیک. فاژ توسط توکسین کلرا ژن می CTXشوند منتقل شود می اینتگره باکتری کروموزوم داخل در که ای رشته ،فاژهای. سویه در . O139و O1شود توکسین با همراه شونده تنظیم های پیلی به فاژ این دارد . TCPوجود شود می متصل

معتدل CP-T1فاژ معتدل های K139فاژ سویه پروتئین O139و O1از و باشد می کاپا خانواده فاژهای از است شده کند GLOجدا می کد را

. باشد می دخیل ویروالنس در که

طبقه بندیبیوتیپ

کلرای بیوتیپ O1ویبریو به . التورو کالسیکمیتواند شود بندی تقسیم. کنند آگلوتینه را جوجه قرمز گلبولهای توانند نمی و نیستند همولیتیک

کالسیک های .VPگونه هستند منفیمیکسین پلی .Bبه حساسند

. باشند می کالسیک عکس التور های گونه . شود بندی تیپ هم فاژها باکتریو اساس بر میتواند همچنین

طبقه بندی سروتیپ

. شود می تعیین ساختمانی اجزای با سروتیپ ژن زنجیره ) Oآنتی سوماتیک ژن آنتی (LPSدر Oیا ژن (Hآنتی فالژل ) ژن (Kآنتی کپسول ) با بندی تیپ از SAKAZAKIدر . 140بیش است شده شناسایی کلرا ویبریو برای سروتیپ

(OGAWAاگاوا ) ویبریو اصلی های (INABAاینابا )O1سروتیپ

(HIKOJIMAهیکوجیما )

طبقه بندی ها سویه سازی جدا برای جدید ملکولی های روش

: شامل ویبریو تایپینگ برای استاندارد های روش

MULTILOCUS ENZYME ELECTROPHORESIS)MLEE OR MEE( AMPLIFIED FRAGMENT LENGTHPOLYMORPHISMS )AFLP(

PULSED-FIELD GEL ELECTROPHORESIS)PFGE( RIBOTYPING

SEQUENCING

مکانیسم بیماری زایی عامل ها ویبریو

کشنده بسیار های سپتیسمی گلو آماس گوشی و چشمی های عفونت زخم اسهال

. تشخیص برنجی آب مدفوع و فراوان اسهال با را وبا دارد وبا ایجاد با کلرا ویبریو را اهمیت بیشترین . دهند می

. شود می ها مرد پیر و ها بچه در ای،مرگ دوره دردهای شوک،اسیدوز،دل باعwث وبا( کلرا ویبریو اپیدمیک های .O139و O1گونه کنند( می تولید را توکسین کلرا

ویبریو کردند می فکر پیش دهه یک سال O1تا در اما است اپیدمیک وبای جدید 1992عامل سرگروپO139 . شد دیده بنگالدش و هند در

ویبریو ویروالنس : o139و o1فاکتورهایCHOLERA TOXIN ژنهای .CtxABتوسط شود می کدZONNULA OCCLUDENS TOXIN )ZOT( ژن .Zotتوسط شود می کدACCESSORY CHOLERA ENTEROTOXIN )ACE( ژن .Aceتوسط شود می کwدTCP ویبریو توسط که باشد می حرارت به حساس انتروتوکسین یک توکسین می O139و O1کلرا تولید

توکسین. مانند توکسین این . LTشود . باشد می کالی ا در

A1

2( واحد (27/2زیر دالتونی AکیلوCHOLERA TOXIN A2

5( واحد (11/6زیر دالتونی Bکwیلو

های واحد . Aزیر شود می متصل هم به سولفیدی دی پیوند توسط های واحد . Bزیر گیرنده به شوند می استوانه یک شکل به و شده متصل هم در GMبه

. شود می متصل انسانی های سلولGM)[Galactose B1+3 n-acetylgalactosamine b1{n-acetylneuraminic

acid a2-3( +glucose-ceramide واحد پروتئین Aزیر به .Gبه شود می متصل سلول داخل در پروتئینG . کند می کنترل را سیکالز آدنیالت فعالیت سیکالز به ATPآدنیالت .CAMPرا کند می تبدیل افزایشCAMP . شیب و دهد می افزایش روده های سلول توسط را کلرید یون ترشح

. دهد می تغییر را اسمزی

اکلودنس • زونوال )ZONNULA OCCLUDENS TOXIN )ZOTتوکسیناکتین • پلیمریزاسیون روی می Fبر محکم اتصاالت پذیری نفوذ افزایش باعwث و گذاشته تاثیر

. روده. پذیری نفوذ افزایش شود

کلرا • فرعی توکسین )ACCESSORY CHOLERA ENTEROTOXIN )ACEانترو• . شود می ترشح افزایش باعث خرگوش بسته ایلئال لوپ در

درمان

. است ها الکترولیت و آب جایگزینی بیماری این در درمان بخش مهمترین مدفوع کاهش موجب که باشد می خوراکی صورت به تتراسیکلین اصلی داروی

. شود می اسهالی ظهور از - O139قبل می استفاده فورازولیدون و سولفامتوکسازول تریمتوپریم از

.O139شد، است مقاوم ها دارو این به می استفاده ها ها،کلرامفنیکل،کرباپنم تتراسایکلین،آمینوگلیکوزید از حاضر حال در

کنند.. است افزایش حال در کلرا ویبریو در دارویی مقاومت اخیرا

اپیدمیولوژی

های سال بین کلرا ویبریو پاندمی . 1817-1923شش است افتاده اتفاقکلرای ویبریو توسط ها این . O1تمام است شده ایجاد کالسیک بیوتیپ

سال در التور بیوتیپ توسط هفتم سیلیبس 1961پاندمی جزایر از. شد شروع اندونزی

. باشد می اندمیک آسیا شرق جنوب و هند در وبا

دیگر زای بیماری های ویبریو ولنیفیکوس ((V. VULNIFICUSویبریو

برای نمک به ساده،نیاز ای تغذیه های کننده،نیازمندی اختیاری،تخمیر هوازی منفی،بی گرم های باسیلرشد

. گردد می مشخص سمی سپتی و بافتی اریتم،درد،تاول،نwکروز با که کشنده بالقوه و شدید زخم عفونت باآب با تماس از بعد زخم پیشرونده سریع های عفونت عامل که است ویبریو ویwروالنت گونwه ترین شاخص

. باشد می آلوده های صدف مصرف از بعد سمی سپتی یا و آلوده ویروالنس های فاکتور

کپسول . می حفظ فاگوسیتوز و کمپلمان برابر در را باکتری دارد اهمیت خیلی عفونت ایجاد در و ساکاریدی پلی

. شوند. می سپتیک شوک بwاعث التهابی های سایتوکین تولید القاء با کندLPS آهن جذب در ارگانیسم توانای پیلی کالژناز االستاز پروتئاز سیتولیزین

. کند می تولید که هایwی سیدروفور واسطه به

دیگر زای بیماری های ویبریو پاراهمولیتیکوس (V. PARAHAEMOLYTICUS)ویبریو

نمک به نیاز و ساده ای تغذیه کننده،نیازهای اختیاری،تخمیر هوازی خمیده،بی منفی گwرم های باسیلرشد برای

می ایجاد را پوستی های عفونت و وبا شبیه ضعیف بیماری یک تا شونده محدود خود اسهال یک ایجادکند.

موجب مطالعه یک .70در باشد می ژاپن در ها ویبریو از ناشی اسهال درصد. شود می منتقل میگو و خرچنگ جمله آلوده،از های ماهی و صدف خوردن طریق از بیشتر

ویروالنس های فاکتور ) ( پیلی و کwاناگاوا همولیزین مستقیم حرارت به مقاوم همولیزین

دیگر زای بیماری های ویبریوآلژینولیتیکوس[ )• (V. Alginolyticusویبریو

. باشد می دریا آلوده آب با تماس اثر در سطحی های زخم عفونت عامل. - شود می wگزارش ندرتا هم گوارشی ای معده مجاری و گوشw،چشم عفونت

میمیکوس )• فلوویالیس( )V. Mimicusویبریو فورنیسی( )V. Fluvialis،ویبریو (V. Furnissii،ویبریوزخم،باکتریمی گاستروانتریت،عفونت ایجاد عامل

مچنیکوف )• (V. Merschnikoviiویبریوباکتریمی

سیناتینسیس )• سین (V. Cincinnatiensisویبریومننژیت

Aeromona

DefinitionAeromonads are gram-negative, oxidase- and catalase

positive,facultcitively anaerobic rods. Most species and Subspecies are motile by means of a single polar

Flagellum. Some strains also produce numerous lateral Flagella. Nitrates are reduced and anaerogenic fermentation Of many common monosaccharides, disaccharides, Glycosides, and some alcoholic sugars )o-mannitol, Glycerol( occurs.

Aeromonads are resistant to both 10 and 150 pg of the vibriostatic agent o/l29.

Nutritional requirements are simple. Salt Supplementation is not required for growth; high salt Concentrations )6-7 percent( are inhibitory.

DefinitionMany extracellular enzymes are produced

including:Cytolytic toxinsProteaseNucleaseLipasesSulfataseLecithinaseAmylaseStapholysin

Definition

There are presently 17 species in the genus , Aromonas .At least ten of these have been implicated in human disease, but:

A. Hydrophila A.Caviae A. Veronii biovar sobria have been most commonly isolated from human infections. The type species is A.hydrophila.

Cell StructuresS-layer The outermost surface of some strains of aeromonas species including A. Salmonicida , A. Hydrophila, A. Schubertii, And A. Veronii is the s-layer, or paracrystalline Surface layer )formerly termed A-layer(.The s-layer can Be detected by electron microscopic analysis )thin Section( of uranyl acetate Stained cells.

The structural genes for the S-layers of A. Salmonicida )vapA(,

A. Hydrophila )ahsA( And atypical A. Salmonicida )vapAo,ro( have been cloned And sequenced.• .

Cell Structures

Capsule

Capsules have been detected in several Aeromonas Species using light microscopy of india ink preparations And electron microscopy of ruthenium red-stained thin Sections.

The Capsule of A. Salmonicida has been shown to be Composed: glucose, mannose, rhamnose, mannuronic Acid, and n-acetylmannosamine.

Cell Structures

FlagellMesophilic aeromonads usually possess a single, polar Flagellum, but can also express multiple lateral flagella.The constitutively expressed polar Flagellum is unsheathed, and allows motility in liquid Environments

PiliAeromonas pili fall into two major morphological types:Short, straight or rigid pili that are numerous on the cell SurfaceLong, flexible pili present in lower numbers

CulturaOn nonselective agar media Aeromonas isolates typically appear as tan to

buff-colored, smooth, convex colonies 3-5 mm in diameter after overnight incubation at 35-37"C. Most A. Salmonicida strains involved in fish infections produce a brown water-soluble pigment on tyrosine-containing agar

And rare Strains belonging to other groups, in particular some Biotypes of A. Media, A. Bestiarum, and A. Euuenophila Elaborate a similar pigment on media such as trypticase Soy agar.

Most Aeromonads can grow in media containing up to 4 Percent Nacl and over a ph range of 5-9.

Aeromonas species are distinguished from the enteric Gram-negative rods by finding a positive oxidase reaction In growth obtained from a blood agar plate.Aeromonas species are differentiated from vibrios by Showing resistance to compound 0/129 and Lack of growth on media containing 6% NACL.

However, none of these characteristics have been clearly Shown to be associated with diarrheal disease in Humans. Koch's postulates have not been satisfied, Largely because there is no suitable animal model that Reproduces human aeromonas-associated diarrhea.

Aeromonas strains are susceptible to tetracyclines, Aminoglycosides, and cephalosporins.

PlesiomonasPlesiomonas shigelloidesis a gram-negative rod with polar flagella. Plesiomonas is

most common in tropical and subtropical areas. It has been isolated from freshwater fish and many animals. Most isolates from humans have been from stool cultures of patients with diarrhea. Plesiomonas grows on the differential media used to isolate salmonella and shigella from stool specimens.

Some plesiomonas strains share antigens with shigella sonnei and cross-reactions with shigella antisera occur. Plesiomonas can be distinguished from shigellae in diarrheal stools by the oxidase test: plesiomonas is oxidase-positive and shigellae are not. Plesiomonas is positive for DNase; this and other biochemical tests distinguish it from aeromonas.

ReferencTopley and Wilson's

Jawetz Melnick and Adelberg’s medical microbiology

Bacteriology )T.Stuart Walker(