Грамотная трактовка спермограммы –

залог успеха преодоления мужской инфертильности

Василевская С.Е.

Фертильность – (лат. фертилис – плодородный, плодоносный) – способность организма воспроизводить потомство, репродуктивная способность

Реймерс Н.Ф. , 1991

Частота бесплодия супружеских пар детородного возраста

15% - 17%

Доля «мужской инфертильности» как причина бесплодного брака

составляет 50%, несколько десятилетий назад она

составляла 15% - 25%

Кузьмичев Л.Н.,2005

Изменения показателей спермограммы

Кузьмичев Л.Н.,2005

Дата и место исследования

Характерис-тики эякулята

США1930 - 1980

Европа1938 - 1990

Франция1989 - 1997

ДанныеВОЗ2002

Концентрация (млн./мл.)

140 60

113 66

85,6 66,6

20

Подвижность(%)

52,2 45,3

25% - А50% - А+В

морфология(%)

61,7 51,9

14%

Объем эякулята(мл.)

На 0,7 мл. уменьшилс

я объем эякулята

2 – 6 мл.

«Скорость» падения концентрации сперматозоидов в сперме мужчин Европы

составляет примерно 2% в год

Irvine S. et al, 1996

Концентрация спермиев: как изменились ориентиры в ХХ веке

0

20

40

60

80

100

120

1913 1960 1970 1980 ?

Факторы препятствующие зачатию

- мужской - трубноперитонеальный - эндокринный - инфекционный - иммунологический

Эякулят или сперма – (греч. Sperma – семя) – смесь выделяемых во время эякуляции продуктов секреции мужских половых органов: яичек и их придатков, предстательной железы, семенных пузырьков, куперовых желез, уретры.

Что мы оцениваем в нативном препарате эякулята?

•Оценка наличия спермиев•Оценка подвижности спермиев•Однородность препарата•Агглютинация и аггрегация•Предварительная оценка воспаления

•Наличие лецитиновых зерен•Кристаллы Бетхера

Сравнение показателей спермограмм клиник города и ОВРТ Мариинской больницы

Показатели спермогр.

клиники

Концентрация

(млн./мл.)

Подвижность

(А+В, %)

N морфология(%)

№ 1

Клиника

267810880

ОВРТ

21319775

Клиника

32164432

ОВРТ

62618582

Клиника

21605429

ОВРТ

4142717

№ 2 121 56 31 66 13 24

№ 3 33 68 56 69 33 16

№4 72 62 70 74 57 14

№5 104 69 88 91 49 15

Современные рекомендации по анализу эякулята для клинико - диагностических лабораторий

Объем 2-5 мл.Концентрация 20 млн./мл.Подвижность более 60%Нормальное строение более 60%

Карманный справочник по диагностическим тестам. В.С.Камышникова, 2004 г.

Нормальные показатели эякулята

Объем эякулята 2 – 6 мл. Концентрация сперматозоидов 20 – 119 млн./мл.Подвижность 25% А или 50% А+ВМорфология более 14%

ВОЗ 2002

Характеристики эякулята, новые стандарты

Объем эякулята 1,5 мл. (1,4-1,7)Концентрация сперматозоидов 15 млн./мл.(12-16)Подвижность:прогрессивноподвижных форм 32% (31-34)подвижных форм 40% (38-42)Морфологически нормальных форм 4% (3-4)

Human Reproduction Update , 2009

Заключения спермограммОлигозооспермия - снижение конценрации сперматозоидов в эякуляте менее 20 млн./мл.Криптозооспермия – обнаруживаются единичные сперматозоиды в осадке. Концентрацию подсчитать невозможно.Полиспермия – концентрация сперматлозоидов превышает 200 млн./мл.Астенозооспермия – активноподвижных форм категории А менее 25% или А+В менее 50%Тератозооспермия – нормальных морфологических форм менее 14%Азооспермия – отсутствие сперматозоидов при анализе всего осадка после центрифугированияАспермия – отсутствие эякулята (аспермия)

Алгоритм исследования нативного препарата

Есть ли сперматозоиды?

Центрифугирование эякулята, исследование осадка.Появились спермии?

АзооспермияСтандартная спермограмма

Исследование центрифугата посторгазменной мочи.

Появились спермии?

Подвижные они?

Исследование концентрации спермиев в камере Горяева

без разведения

Тест с эозином.Живые есть?

Исследование окрашенногомазка эякулята. Клетки

сперматогенеза найдены?

АспермияРетроградная

эякуляцияНекроспермия

+

+

+

-

+

++

-

- -

-

-

Изменения концентрации спермиев у одного индивида

Типы подвижности спермиев

• Отличия

• наличие поступательного движения

• скорость спермия 25-50мкм/с

• наличие поступательного движения

• скорость спермия < 25мкм/с

• Феномен качания• Манежные спермии• скорость спермия <

3мкм/с

• d) Отсутствие любой подвижности

• Нормы:

• а > 25%

• а + b > 50%

• c < 3%

• d) нет своей нормы

• Репродуктивная группа ВОЗ различает

• а). Сперматозоиды с активно поступательным движением

• b). Сперматозоиды с поступательным движением

• c). Сперматозоиды без поступательного движения

• d) Неподвижные сперматозоиды

МАР - тест. Микроскопия

Спермий человека

«Строгие критерии» морфологии по T. Kruger

• Головка• длина 4,0-5,5 мкм• ширина 2,5-3,5• длина/ширина = 1,50-1,75• Площадь акросомы = 40-70%

площади головки

• Шейка• толщина менее 1 мкм• длина 1,5 длины головки• прикреплена к головке вдоль

оси• Цитоплазматические капли

не более 1/2 размера головки

• Хвост• прямой• не закрученный• одинаковой толщины на всем

протяжении• уже шейки• длиной около 45мкм

Микроскопия мазка

Зависимость оплодотворения ооцитов in vitro от показателей

морфологической нормы сперматозоидов.

N морф. меньше 4% - оплодотворялось

7,6% ооцитов

N морф. от 4-14% - оплодотворялось

63,9% ооцитов

N морф. более 14% - оплодотворялось

85-88% ооцитов, при этом 99% эмбрионов имплантиравалось.

Генетические патологии

ГенныеХромосомныеНарушение компактизации хроматина ядраФрагментация хроматина ядра

• бесплодие неясной этиологии• привычное невынашивание• варикоцеле• половые инфекции• возраст более 45 лет, курение,

токсические агенты• перенесенные воспалительные

заболевания• отбор доноров спермы

Показания к анализу фрагментации ДНК

Методы определения фрагментации ДНК

Tunel ( terminal deoxynucleotidye transferase (tdt) mediated dUTP nick end labeling) – выявляет дефекты и разрывы в ДНК с помощью уридина на 3 он конце.

SCSA (sperm chromatin structure assay) – выявляет ss и ds ДНК с помощью акридинового оранжевого и позволяет определить индекс фрагментации

Comet – электрофорез фрагментов ДНК, полученных в нейтральных условиях ( ds разрывы ДНК) и с помощью алкалина ( ss разрывы ДНК).

- ядра сперматозоидов с фрагментированной ДНК не развивает ореол дисперсии или ореол минимален

набор Halosperm

- денатурация ДНК, с удалением ядерных белков (кислотная обработка и лизис с DTT и Triton X100)

- петли ДНК формируют ореол дисперсии хроматина

Компания Halotech DNA

ВЫВОДЫ-В отсутствии национального стандарта оценки эякулята , необходимо пользоваться стандартами ВОЗ

-В выборе тактики лечения, по данным спермограммы , необходимо взаимодействие с клиниками ВРТ (урологами – андрологами, клиническими эмбриологами)

-Своевременно принимать решения о переходе к методикам IVF – ICSI - IMSI

СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ