综述,转运载体
DESCRIPTION
B0 , + H H( † , ‹ ‰ ,X4 ℃Ì ‹ ‰ ‹ ( PBS) 8 ƒ , ‹ ‰ ‹ › f † ï ¬ ½ ¬ ï ¬ ° v | œ ï ¬ L ¤ 8 3 d, ‹ v | 2~3 d ‹ ‰ ‹ ‹ ‰ ‹ 30~35℃è @ Ì Õï ¬ ½ ¬ 0.2%Ü Õï ¬ V L % b † K C apical glucose t ransport in the chicken jejunum ¤ , ‹ L 0 , ‹ X fi ‘ ‹ ‹ ‰ ï ¬ ½ ¬ , ï ¬ L Ł ø < 5 ƒ ² ¡ T a ‹ P e ‘ † ( |TRANSCRIPT
碱性氨基酸转运:肠道中存在的碱性氨基酸转运系统包括 y+,b0,+,y+L和B0,+。转运系统 B0,+在肠道不发挥主要的转运功能,其转运蛋白ATB0,+在肠道后段表达水平较高,发挥转运由肠道微生物产生的 D型氨基酸作用。肠道对于碱性氨基酸的吸收主要是通过肠道上皮细胞膜上的氨基酸转运系统 y+,b0,+和 y+L协同来实现的。系统 b0,+和 y+L的蛋白质属于异二聚体结构,是由两部分蛋白质(重链和轻链)的组合发挥其转运功能,均属于反相交换转运机制。系统 b0,+主要在肠道和肾小管上皮细胞顶端表达。主要功能为从肠腔面吸收碱性氨基酸和胱氨酸 ,
转出中性氨基酸,其重链为 rBAT,轻链为 SLC7A9。转运系统 y+L在钠离子的协同作用下,对胞外的中性氨基酸有高的亲和力 ,向细胞内转入中性氨基酸的同时 ,转出细胞内的碱性氨基酸,该系统主要定位于肠细胞和肾小管的基底膜 ,其 2个轻链(y+LAT1和 y+LAT2)分别和重链 4F2hc构成 2个不同转运蛋白。y+系统包括有4个成员,其转运蛋白分别为 CAT1~CAT4,其中 CAT1~CAT3具有很高的同源性,
相互间碱基的同源性达到 60%左右,而与 CAT4只有 40%左右的同源性[5]。y+转运系统属于细胞中典型的为数极少的单向转运系统[10],其转运驱动力主要是膜两侧的电势梯度。与系统 b0,+和 y+L不同,y+系统主要是逆着碱性氨基酸浓度梯度向细胞内聚集碱性氨基酸。动物肠道中对营养物质进行分解作用的消化酶和把营养物质从肠腔转运到体内的转运载体的表达 ,决定了动物的消化和吸收功能。不同日龄肉鸡对于氨基酸的吸收能力有差异,原因可能是因为随着动物发育成熟,
消化酶分泌增加,消化能力提高;肠腔吸收面积增加,提高了整个肠道的吸收能力;
另外,最近的研究表明,肠道粘膜细胞上转运氨基酸的载体蛋白数量增加 ,转运氨基酸的能力增强。碱性氨基酸 Lys,Arg和His均是肉鸡的必需氨基酸,在肉鸡蛋白质代谢、沉积和肌肉形成中起重要作用,且在肉鸡的理想蛋白质模型中,这些碱性
氨基酸的比例较高,因此,本试验拟研究 AA肉鸡和岭南黄肉鸡肠道不同肠段粘膜细胞单向碱性氨基酸转运载体 y+系统中的 CAT1和 CAT4mRNA在不同时期的表达丰度,从而了解肉鸡肠道碱性氨基酸转运载体的发育性变化,对肠道氨基酸的吸收有进一步的认识。系统y + 是典型的、广泛存在的非钠依赖型碱性氨基酸转运系统,也可以转运
中性氨基酸(在钠存在的条件下) ,对碱性氨基酸有很高的亲和力(Km值在mmol 范围) ,对中性氨基酸的亲和力很低,该系统依靠与细胞质膜的化学电势耦联来转运聚集底物。在早期的研究中,认为在碱性氨基酸的跨膜转运过程中,只有系统y +
起作用;近几年利用分子研究表明碱性氨基酸的转运包括了多种系统。y+ 系统在动物体内广泛存在,但在肠道上皮细胞上的定位还不确定,推测其在刷状缘和基底膜都有表达。CAT1 , CAT2B (与CAT2A 互为剪切突变体) 和CAT3 具有类似的属性,对于碱性氨基酸具有较高的亲和力。CAT2A 对碱性氨基酸的亲和力很低且对于反向刺激敏感性低。目前对CAT4 的了解还较少。一般认为CAT1 是多种细胞中最主要的y + 系统转运蛋白,几乎在所有的组织中存在。CAT1 基因敲除的
纯合子小鼠在出生后1 d 就死亡[16 ] ,而CAT2 的表达与否对动物的影响则不是很大,有研究表明CAT2 在小肠中不存在。CAT3 主要在脑部表达.。与肠道中负责葡萄糖吸收的钠葡萄糖转运载体( SGLT1 ) [21 ] 、寡肽转运载体( PepT1) [22 ] 、钠氢交换载体( NHE2) [23 ]mRNA 表达的发育性变化也完全不同。肠道y+ 系统在氨基酸吸收中不起主要作用,而位于肠上皮黏膜细胞刷状缘的转运系统b0 , +
( rBAT) 和基底膜的系统y+ L (y +LAT2) 对碱性氨基酸的吸收起主要作用。y + 在动物体各组织中广泛存在,y + 转运系统是细胞中典型的为数极少的单向转运系统[6 ] ,其转运驱动力主要是膜两侧的电势梯度,因此y + 系统对维持细胞内碱性
氨基酸浓度起重要作用。不同基因型肉鸡肠道中CAT1 mRAN 和CAT4 mRNA 表达的发育性变化有很大差异,可能与肉鸡的生长、肉质的差异存在一些关系,但是这种关系还不清楚,值得进一步研究AA 肉鸡十二指肠和空肠钠葡萄糖转运载体(SGL T1) [ 17 ] 、钠氢交换载体(N
HE2) [12 ] 、寡肽转运载体( Pep T1) [18 ]mRNA
取样:分离肠道,沿纵向剖开,用4 ℃预冷的磷酸缓冲液( PBS) 冲洗,再用吸水纸吸干。选取遗传背景相同的同批次、发育正常的AA肉鸡。
十二指肠 U状弯曲的起始处和结束处向下取 3 cm肠段,作为十二指肠和空肠样品;从回盲韧带起始处向下取 3 cm肠段,作为回肠样品。在热应激时小肠各段损伤的发生时间和病变程度具有一定的规律性 ,十二指
肠绒毛顶端轻微肠道破裂解释:破裂发生在热应激后的 3 d,空肠和回肠的发生此病变的时间依次延后 2~3 d左右。从损伤的程度上来说,十二指肠最为严重,依次是空肠和回肠,并且病变的发生随着热应激时间的延长会逐渐加重。推测这种情况发生的原因为热应激时迷走神经活动加强,胃粘液分泌减少,肠道活动能力增强引起的肠腔内碱性程度增加有关, 随着食物的向下推进,这种碱性环境逐渐减弱,所以肠道的损伤程度和损伤防止高温:舍内气温达到30~35℃时, 应在饲料中按0.2%添加碳酸氢钠或每吨饲料添加维生素C 150~300 克, 若把碳酸氢钠用量提高时, 应相应减少饲料中氯化钠的用量。由于气温高, 鸡对维生素的需求一般要高于正常的2 倍,因而补充足量的维生素在夏季显得尤为重要。当舍内气温高于35℃时, 鸡群内