bioquimica practica 4

6
Investigue los pH y las temperaturas óptimas de otras enzimas importantes. Temperatura: Todas las enzimas conocidas poseen temperaturas óptimas situadas dentro del intervalo entre 20º C y 40º C. La temperatura óptima para una enzima es independiente del tiempo que dure la reacción de medida. Las enzimas de muchos mamíferos tienen una temperatura óptima de 37 0 C, por encima de esa temperatura comienzan a inactivarse y se destruyen Sin embargo existen especies de bacterias y algas que habitan en fuentes de aguas termales y en el otro extremo ciertas bacterias árticas tienen temperaturas óptimas cercanas a 0 0 C. pH y enzimas: ENZIMA pH OPTIMO Pepsina 1,5 Tripsina 7,7 Catalasa 7,6 Arginasa 9,7 Fumarasa 7,8 Ribonucleasa 7,8 Ureasa 7 Fosfatasa alcalina 12 Fosfatasa acida 5

Upload: iris-rodriguez-milachay

Post on 30-Jul-2015

66 views

Category:

Documents


2 download

TRANSCRIPT

Page 1: Bioquimica Practica 4

Investigue los pH y las temperaturas óptimas de otras enzimas importantes.

Temperatura:

Todas las enzimas conocidas poseen temperaturas óptimas situadas dentro del intervalo

entre 20º C y 40º C.

La temperatura óptima para una enzima es independiente del tiempo que dure la reacción

de medida.

Las enzimas de muchos mamíferos tienen una temperatura óptima de 370 C, por encima de

esa temperatura comienzan a inactivarse y se destruyen Sin embargo existen especies de

bacterias y algas que habitan en fuentes de aguas termales y en el otro extremo ciertas

bacterias árticas tienen temperaturas óptimas cercanas a 00 C.

pH y enzimas:

ENZIMA pH OPTIMO

Pepsina 1,5

Tripsina 7,7

Catalasa 7,6

Arginasa 9,7

Fumarasa 7,8

Ribonucleasa 7,8

Ureasa 7

Fosfatasa alcalina 12

Fosfatasa acida 5

Así tenemos:

Temperatura óptima (ºC)

pH óptimo

inhibidores activadores

Malta -Amilasa 55-65 4.5-5.5Iones metálicos, bases y contaminantes del

almidónIones calcio

Amilasas pancreáticas 40-55 6.5-7.0Iones metálicos,

ácidos-

Page 2: Bioquimica Practica 4

Amilasas de hongos 50-55 4.5-5.5Iones metálicos,

bases, secuestrantesIones calcio

Amilasas baterianas convencionales

60-75 5.5-7.0Secuestrantes,

surfactantes aniónicosIones calcio

Amilasas baterianas termoestables

85-110 5.0-7.5 Aniones surfactantesIones calcio en aguas blandas

solamente

Defina que es estabilidad enzimática y explique la pH estabilidad y termoestabilidad

de una enzima.

Estabilidad enzimática:

Medida en que una enzima mantiene su actividad o conformación estructural cuando es

sometida al almacenamiento, aislamiento y purificación o varias otras manipulaciones

físicas o químicas incluyendo enzimas proteolíticas y calor.

En una serie de estudios con una preparación enzimática es esencial ensayar su actividad en

intervalos regulares de tiempo en condiciones estándar para chequear que ésta permanezca

constante. Si una enzima es inestable y pierde la actividad en el tiempo, es posible corregir los

valores obtenidos en relación al inicial si se han realizado una serie de ensayos estándar a

diferentes tiempos; esto permite construir una curva de calibración de actividad en el tiempo.

De todas maneras es mucho mejor buscar condiciones bajo las cuales la solución stock de la

enzima pueda ser almacenada sin pérdida apreciable de actividad en el tiempo.

PH estabilidad

Es el pH al que la enzima es estable tanto en actividad y conformación.

Termoestabilidad

Temperatura a la cual la enzima se encuentra estable tanto en actividad y conformación.

CONCLUSIONES

La temperatura juega un papel importante en la velocidad de reacción, esta puede ayudar a aumentar la velocidad, pero hasta un punto máximo el cual es la temperatura optima, si se rebasa este valor, la enzima se desnaturaliza ocasionando que la velocidad de reacción disminuya.

Page 3: Bioquimica Practica 4

temperatura

Todas las enzimas conocidas poseen temperaturas óptimas situadas dentro del intervalo entre 20º C y 40º C.

Las curvas de actividad frente a temperatura suelen tener formas acampanadas. La temperatura óptima para una enzima es independiente del tiempo que dure la

reacción de medida. Las enzimas de los organismos termófilos carecen de sensibilidad hacia la

temperatura. En los países fríos, la temperatura óptima de las enzimas humanas es unos diez

grados inferior a la de las enzimas de los habitantes de países tropicales.

Ph

1. Al incrementarse el pH la actividad de una enzima siempre se eleva algo.

2. Al bajar el pH todas las enzimas incrementan su estabilidad.

3. Al llamado pH óptimo se produce un debilitamiento de los enlaces de la enzima con el sustrato.

4. A pH neutro se produce la desnaturalización inmediata de las enzimas.

Laura esto encontré en internet revsialo por favor

DISCUCION

Al realizar la práctica se tuvo mucho cuidado especialmente en la parte donde se extrae la enzima, ya que de lo contrario los resultados no hubieran sido satisfactorios. Al no haber tenido fallas en los procedimientos y al haber comprobado los objetivos, entonces no parece haber mucho que discutir.

Se pudiera pensar que el objetivo que se trazo para la realización de esta practica se logro casi satisfactoriamente. Ya que se observaron los cambios que se llevan a cabo con el cambio del pH y el cambio de temperatura.

La teoría nos indica que a temperaturas bajas la enzima pudiera llegar a perder la actividad, esto seria momentáneamente; entonces a temperaturas altas, la enzima se desnaturalizaría, pero, a una temperatura media (entre unos 30°C y 40°C) la enzima funciona casi perfecta.

El pH es otro factor que influye en la manera de accionar de la enzima, pues, como se menciona en la teoría, cuando el pH es demasiado ácido la enzima trabajaría menos, pero, a comparación de un pH demasiado alcalino, la enzima muestra actividad mayor que en la actividad mostrada a pH alcalino.

Los datos mostrados no dicen que de un pH 5 hacia abajo la enzima empieza a perder actividad, y de pH 10 hacia arriba hace lo mismo, empieza a dejar de trabajar. Esto nos lleva a pensar que al haber variaciones de aunque sean décimas, se puede afectar la manera de

Page 4: Bioquimica Practica 4

trabajar de la enzima. Por tanto, se piensa que la practica estuvo bien realizada, al haber comprobado los objetivos propuestos.

CONCLUSION

Con la realización de esta práctica pudimos darnos cuenta de los cambios que puede sufrir la actividad enzimática a causa de la variación de pH y los cambios de temperatura.

Podemos decir que el aumento de la actividad enzimática, observado a 50°C o por encima de esta temperatura, es de corta duración, ya que la enzima a temperaturas muy altas como esta, tiende a perder sus propiedades y desnaturalizarse, posteriormente se coagula la parte de la proteína enzimática. Todo esto hace que desaparezca la actividad enzimática.

Quizá a temperatura de 4°C no tiene actividad la enzima, ya que a esta temperatura la enzima se inhibe, al igual que las proteasas. Se puede pensar que si las proteasas no trabajan a esta temperatura, entonces las Transaminasas tampoco debieran trabajar, pues, también son enzimas.

Creemos que la mejor actividad enzimática que se pudo haber obtenido hubiera sido a una temperatura de 37°C, ya que a esta temperatura la enzima tiene una actividad optima. Ya que teóricamente esta temperatura es la adecuada para el funcionamiento de la enzima, nos hubiera dado un punto más de comparación con las otras temperaturas. Así, se podría ver en cual de las temperaturas se llevo a cabo una mejor actividad enzimática.

Al igual que los efectos causados por la temperatura, el pH tiene los suyos que pueden alterar o favorecer la actividad de la enzima.

Esto se debe a que cuando el pH tiene tendencias alcalinas, la enzima muestra una disminución de la actividad. Caso contrario se observa a pH ácido, pues, la enzima se vio favorecida en su actividad, esto gracias al medio ácido en que se encontraba.

Podemos decir que nuestras observaciones nos llevan a decir que la actividad enzimática se vio disminuida en medios muy alcalinos, pero quizá hubiera dejado de trabajar a un pH mucho mas alcalino; en cambio los resultados obtenidos a un pH ácido fueron de una mejor actividad, aunque quizá, si hubiera sido un pH todavía mas ácido, la enzima hubiera dejado de funcionar.