bioquimica practica 8

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Bioquimica Practica aquí esta la introducción y todo la practica realizada en clase sobre pH

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Page 1: Bioquimica Practica 8

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Universidad Nacional Daniel Alcides Carrión

INTRODUCCION

El pH es una medida de acidez o alcalinidad de una disolución. El pH indica la concentración de iones hidronio [H3O]+presentes en determinadas disoluciones.

El término "pH" se ha utilizado universalmente por lo práctico que resulta para evitar el manejo de cifras largas y complejas. En disoluciones diluidas, en lugar de utilizar la actividad del ion hidrógeno, se le puede aproximar empleando la concentración molar del ion hidrógeno.

Por ejemplo, una concentración de [H3O+]= 1× 10-7 M (0,0000001) es simplemente un pH de 7, ya que pH = –log [10-7] = 7

En disolución acuosa, la escala de pH varía, típicamente, de 0 a 14. Son ácidas las disoluciones con pH menores que 7 (el valor del exponente de la concentración es mayor, porque hay más iones en la disolución) y alcalinas las de pH superiores a 7. Si el disolvente es agua, el pH = 7 indica neutralidad de la disolución.

En productos de aseo y limpieza se suele usar la expresión "pH neutro". En este caso la neutralidad hace referencia a un nivel de pH 5,5. Debido a las características de la piel humana, cuyo pH es 5,5 se indica neutralidad de pH en este tipo de productos que están destinados a entrar en contacto con la piel para destacar su no agresividad. Si se aplicaran productos de pH 7 a la piel se produciría una variación del pH cutáneo con posibles consecuencias negativas.

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OBJETIVOS

Determinación de pH de algunas muestras cualitativamente. Uso de indicadores.

Aprender método de calibración del pH-metro. Determinación del pH de algunas sustancias cuantitativamente.

Uso del pH-metro.

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MARCO TEORICO

MEDICION DEL PH

PH-METRO: Es un sensor utilizado en el método electroquímico para medir el eh de una disolución. PH es el potencial que se desarrolla a través de una fina membrana de vidrio que se sepa dos soluciones con diferentes concentraciones de protones.

Buffer son las disoluciones reguladoras de pH conocido.

Un potencio metro necesita (para hacer los cálculos) de unas pequeñas cositas llamadas CELDAS, estas son sumergidas en la disolución del pH que necesitamos. Lo que también necesita un pH-metro es un electrolito, son sustancias que en solución acuosa dan lugar a la formación y conducen la corriente eléctrica.

Electrolitos fuertes: totalmente ionizados

Electrolitos débiles: parcialmente ionizados representación de la disociación del agua.

METODOS PARA DETERMINAR EL pH.

A. METODOS VISUALES:

1. Indicadores: Son sustancias que pueden utilizarse en formas de solución o impregnadas en papeles especiales y que cambian de color según el carácter del pH.

2. Papel Tornasol: El papel tornasol es un indicador de pH que se colorea de rojo sumergido en un ácido o la base, más intenso será el color del indicador. 3

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B. METODOS ELECTROMETRICOS:

La actividad de iones H+ se puede determinar potencio métricamente para ello se introduce una célula electroquímica con un electrodo indicador y otro de referencia, sumergidos en la solución a la cual se le quiere determinar el pH, para generar una diferencia Potencial, que es registrada por el sistema de medición donde se transforma a la escala de pH.

El medidor de pH-metro consiste en:

Electrodo de referencia Electrodo indicador Sistema de medición.

Los electrodos, indicador y de referencia, pueden presentarse separados o bien en una misma unidad, llamándose en este caso electrodos de pH combinados.

Solución buffer es una solución compuesta por ácidos débiles y sus sales o de bases débiles sus sales.

MANTENIMIENTO.

Un electrodo es de vidrio necesita ser inmune las interferencia del color, turbieza, material coloidal, oxidante y reductor.

El electrodo no da una buena medida cuando está sucio con grasa o material orgánico insoluble en agua.

El electrodo tiene que ser enjuagados con agua destilada, este no se seca con un trapo, solo se coloca en un papel para que se seque.

Tienden a ser calibrados periódicamente para asegurar la precisión.

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PRECAUCIONES.

El electrodo siempre tiene que estar húmedo. No guardarlos o dejarlos todo el tiempo en agua destilada, ya que

este resbalaría a los iones con el bulbo de vidrio y el electrodo se volverá inútil.

No son medidas presos, todo depende del sentido de la vista de cada uno.

Existen diferentes tipos de pH-metros

CALIBRACIÓN.

Para verificar la calibración en el intervalo de pH 4.00 a 10.00, se conectó el calibrador HAN NA y se seleccionaron los pH 4.00, 5.5, 7.00, 8.5 y 10.00 y se registraron en el pH-metro los valores de potencial correspondientes en mili voltios a una temperatura ajustada a 25 °C. Una vez verificado el buen funcionamiento, se conectaron los electrodos de vidrio y de referencia, se sumergió en una solución de pH 7.00 termos atizada a 25ºC con una precisión de ± 0.1º, y se realiza lectura en mili voltios. Luego se introdujeron electrodos en las soluciones de referencias de pH 4.00 y 10.00 y se realizaron las lecturas correspondientes en mili voltios. Se hicieron 5 lecturas en mili voltios para cada valor de pH. Para verificar la calibración se realizaron las lecturas de las soluciones de referencia en el modo pH, se obtuvo el modelo de calibración y se evaluaron la pendiente y el intercepto es importante que recuerde tener suma responsabilidad con este tipo de material, mas con las cosas más pequeñas, por ejemplo las celdas de vidrio.

MEDICION DEL PH

Introducir el electrodo en la muestra, agitar brevemente y esperar que la lectura se establezca.

La pantalla mostrará la lectura del pH equilibrado con temperatura, saque el electrodo de la muestra y lave con agua destilada antes de realizar la lectura de una segunda muestra.

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INDICADORES

A. NARANJA DE METILO:

1. Agregar dos gotas de naranja de metilo a cada muestra. 2. Observar resultados.

B. FENOFTALEINA:

1. Agregar dos gotas de fenolftaleína a cada muestra. 2. Observar resultados.

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Agua potable: pH=7,98 Tº=10,4Cº Orina: pH=6,07 Tº=15,7Cº Saliva: pH=6,95 Tº=17,7Cº Leche: pH= 6,88 Tº=11,6Cº

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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Muestras:

Agua potable Sangre Saliva Orina Leche Vinagre HCl, H2SO4, NaOH

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1. Utilice el potenciómetro y determine sin agregar ningún solvente el pH de cada muestra.

2. Obtener una muestra de plasma de sangre coagulada de pollo y determina su Ph.

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Ph=6,33 Tº= 14,08Cº

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3. Determinar el Ph utilizando soluciones indicadoras.

Colocar el hígado en mortero, luego triturar y agregar 10 ml de suero fisiológico homogenizar y filtrar con gasa simple.

Observar los cambios de color que ocurre al agregar fenolftaleína, anaranjado de metilo y rojo de metilo.

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INDICADORES

MUESTRAS Fenolftaleína Anaranjado de metilo Rojo de metilo

Leche incoloro crema melón claro

Saliva incoloro anaranjado claro amarillo

Orina incoloro anaranjado amarillo

HCl rojo amarillo amarillo

NaOH rosella amarillo rojo

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