ICS 65.020.30

B 41

中 国 兽 医 协 会 发 布

2018 - 10 - 24 发布 2018 - 10 - 24 实施

T/CVMA 2—2018

牦牛健康养殖蠕虫病与外寄生虫病防治

技术规范

Technical specifications for the prevention and control of

helminthiasis and ectoparasitosis in yak,s healthy raising

团 体 标 准

中国兽医协会

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I

前 言

本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。

本标准由青海省畜牧兽医科学院提出。

本标准由中国兽医协会归口。

本标准的起草单位：青海省畜牧兽医科学院、青海省牛产业科技创新平台、青海省牦牛产业联盟。

本标准主要起草人：蔡进忠、李春花、雷萌桐、李剑、蔡其健、宋永武、孙建、任宜家、方有贵、

索南多杰、才让周在、汪燕昌、李万顺。

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1

牦牛健康养殖蠕虫病与外寄生虫病防治技术规范

1 范围

本标准规定了牦牛在健康养殖中的蠕虫病与外寄生虫病防治原则、卫生管理、预防管理、药物驱虫、

其它综合防治措施、监测和控制的技术要求。

本标准适用于牦牛在健康养殖中的蠕虫病与外寄生虫病防治。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB 8978 污水综合排放标准

GB 18596 畜禽养殖业污染物排放标准

GB/T 18635 动物防疫 基本术语

GB/T 22329 牛皮蝇蛆病诊断技术

GB/T 36195 畜禽粪便无害化处理技术规范

NY/T 388 畜禽场环境质量标准

NY/T 1466 动物棘球蚴病诊断技术

NY/T 1470 羊螨病（痒螨/疥螨）诊断技术

NY/T 5027 无公害食品 畜禽饮用水水质

NY/T 5128 无公害食品 肉牛饲养管理准则

NY 5126 无公害食品 肉牛饲养兽医防疫准则

NY 5030 无公害食品 畜禽饲养兽药使用准则

NY 5032 无公害食品 畜禽饲料和饲料添加剂使用准则

DB63/T 457 棘球蚴病防治技术

3 术语与定义

GB/T 18635确定的及下列术语及定义适用于本文件。

3.1

牦牛健康养殖 yak healthy breeding

根据牦牛的生物学特性，运用生态学营养学原理来指导养殖生产，为牦牛营造一个良好的、有利于

快速生长的生态环境，提供充足的全营养饲料，使其在生长发育期间最大限度地减少疫病的发生，个体

健康，使生产的食用产品无污染，与天然鲜品相当。

3.2

抗寄生虫药物 anti-parasite drug

能够驱除或杀灭动物体内、体外寄生虫的药物。

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3.3

轮换用药 alternative application

一种抗寄生虫药连续使用一定时期后，换用另一种作用机理不同的抗寄生虫药。

3.4

穿梭用药 shuttle medication

在不同的生长阶段，分别使用不同的抗寄生虫药物，即开始时使用一种药物，到生长期时使用另一

种药物。

3.5

联合用药 combined medication

在同一饲养期内使用2种或2种以上的抗寄生虫药物。

3.6

其它综合防治措施 other measures of comprehensive Prevention and Treatment

是对牦牛药物防治以外所采取的一切技术措施的总称，包括外界环境除虫、预防牦牛感染、提高机

体抵抗力等措施。

3.7

成虫期前驱虫 pre-maturity deworm

寄生虫在宿主体内尚未发育至性成熟的时候，用药物驱除的方法。

3.8

药物喷淋 drug spray

利用喷淋装置，将配制的杀虫剂淋浴牛体，达到治疗或预防外寄生虫病目的的方法。

3.9

休药期 withdrawal period

食品动物从停止给药到许可屠宰的间隔时间。

3.10

抗药性 drug resistance

寄生虫因变异而获得了逃避某种药物杀虫作用的能力，能使驱虫药物不再达到预期效果或完全丧失

使用价值。

4 防治原则

4.1 采取药物防治为主，结合其它切断寄生虫病传播的综合防治措施。

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4.2 依据牦牛主要寄生虫病流行规律，实行定期全群驱虫或药物喷淋杀虫，重点对性成熟前的寄生期

幼虫进行成虫期前驱虫。

4.3 重点防治幼年牛、母牛和体弱牛。

4.4 当暴发寄生虫病疫情时，按相关法律、法规的规定及时进行隔离及驱虫处置。

4.5 选择符合无公害食品的防治方法与药物。

5 集约化饲养场卫生管理

5.1 集约化饲养场的环境卫生质量应符合 NY/T 388的要求，饮用水应符合 NY/T 5027 的要求；污水、

污物处理应符合 GB 18596的规定。

5.2 饲养场工作人员应定期参加体检，建立牧工健康档案。患有人畜共患疫病者，不得从事与饲养有

关的活动。

5.3 集约化饲养场工作人员进入生产区时，应更换衣鞋和消毒。非生产区工作人员不允许进入生产区，

特殊情况必须进入的，应经过消毒，并遵守场内的制度。

5.4 限制饲养场的兽医对外诊疗疫病，限制实施配种操作人员对外承担配种工作。

5.5 限制社会各类人员进入集约化饲养场进行参观，经销等活动。

6 饲养草地卫生管理

6.1 有计划地实行划区轮牧制度，减少寄生虫感染。

6.2 饲养草地应有清洁、无污染的水源。

6.3 污染草地，特别是潮湿和森林草地，草场休牧时间应不少于 18个月。

6.4 牧民应定期参加体检，建立牧民健康档案。患有国家规定的人畜共患疫病者，不得从事与饲养有

关的活动。

7 预防管理

7.1 宜避开在低湿的地点放牧，避免清晨、傍晚、雨天放牧。防止牦牛饮用低洼地区的积水。

7.2 饲养场（圈舍）内不得饲养禽、犬、猫及其他动物。应采取灭鼠、灭蝇措施。

7.3 坚持自繁自养的原则，种用牦牛的培育按《中华人民共和国畜牧法》的规定执行。

7.4 肉用牦牛饲养兽医防疫按 NY 5126的规定执行。

7.5 在调入、调出种用牦牛时，必须引进牦牛时，按国家农业行政主管部门有关乳用、种用动物跨省

引进规定执行。从国外引入后至少隔离饲养 45d，跨省引入后至少隔离饲养 45d，省内其它地区引入

后至少隔离饲养 30d，在此期间进行观察、检疫，确认为健康者方可合群饲养。出境牦牛的隔离按国家

有关进出境动物检疫规定执行。

7.6 在牦牛出售、屠宰前应按国家农业行政主管部门有关规定进行检疫。

8 药物防治

8.1 防治对象

包括牦牛线虫病、吸虫病、绦虫病及绦虫蚴病以及虱、蜱、蝇、螨、蚤等引起的寄生虫病。

8.2 用药原则

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8.2.1 选择高效、安全、广谱、低残留和短残留的抗寄生虫药物，使用按《中华人民共和国兽药典》

和 NY 5030的规定执行。常用抗寄生虫药物及使用见附录 A。

8.2.2 为避免寄生虫产生抗药性，可采用轮换用药、穿梭用药和联合用药的方法进行驱虫。

8.2.3 按药品使用说明准确用药，喷淋药物溶液充分溶解或混悬，搅拌均匀，现用现配。

8.2.4 驱虫（药淋）给药后应跟踪观察，发现问题应及时抢救、治疗。

8.2.5 牦牛给药后宜在固定区域排虫，驱虫后粪便进行无害化处理。

8.2.6 泌乳期原则上不得使用药物。若因发病必须用药时，药物残留期间的牦牛乳不得作为商品乳出

售，按《动物性食品中兽药最高残留限量》的规定执行休药期和弃乳期。

8.2.7 对供屠宰的牦牛，应执行休药期规定。

8.3 防治次数与时间

8.3.1 线虫病实行冬季、秋季 2次驱虫。重点驱除越冬的寄生期幼虫。

8.3.2 绦虫病、吸虫病在秋季重点防治幼虫。

8.3.3 外寄生虫病在春末夏初感染高峰期进行药物喷淋处理。

8.3.4 牛皮蝇蛆病在 9月下旬至 10月底，选用有效药物进行防治。

8.3.5 牛螨病的防治以疫区或感染群为单位，对患螨病牛应及时隔离治疗，不得混群饲养，以防病原

传播。对感染牛和非感染牛全部进行药物处理。在第一次实施药物处理后 7d至 10d，再重复进行一次

药物处理。同时对畜棚舍用杀虫剂进行一次处理。

8.3.6 棘球蚴病按 DB63/T 457规定进行防治。

8.3.7 各类寄生虫病防治程序，见附录 B。

9 其它综合防治措施

9.1 圈舍灭虫处理

定期清除圈舍中粪便，进行无害化处理。对牦牛圈舍、器具及其周围环境应进行定期灭虫。

9.2 对寄生虫污染物的处理

9.2.1 对患螨病牛药物喷淋后的废药液按 GB 8978的规定处理。药淋操作方法见附录 C。

9.2.2 病牛、尸体及废弃物处理按国家农业行政主管部门《病死及病害动物无害化处理技术规范》规

定执行。

9.2.3 对牦牛粪便按 GB/T 36195的规定处理。

9.3 放牧管理

9.3.1 饲养管理按 NY/T 5128 的要求执行。

9.3.2 幼畜与成年畜应当分开放牧。

9.3.3 病牛应及时隔离治疗，不得混群放牧饲养。

9.3.4 扩大和利用人工草场，采用放牧与补饲相结合的饲养方式，按 NY 5032的规定合理补充精料和

必要的添加剂，满足牦牛对能量和营养物质的需要，增强牛体抵抗力。

9.4 犬绦虫病的防治

9.4.1 犬绦虫病防治按照 DB63/T 457规定。限制饲养场地养犬数量，建立犬的登记制度。

9.4.2 加强家畜的集中屠宰管理，发现感染有病原的脏器应全部集中按国家农业行政主管部门有关规

定执行。

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9.4.3 犬应定点栓养，每月 1次驱虫，投药前禁食 12h，投药后原地排虫不少于 3d，对排出粪便应无

害化处理。驱虫药品选用吡喹酮药饵自动吞服片。

10 监测

10.1 监测对象

包括线虫病、吸虫病、绦虫病及绦虫蚴病、外寄生虫病等。评估防治效果和掌握防治后寄生虫病的

发生与流行动态。

10.2 监测次数

监测数量按国家农业行政主管部门和当地动物疫病预防控制中心的寄生虫病监测计划要求执行。

10.3 监测抽样

10.3.1 群体抽样

考核抽样时，每县依据牦牛寄生虫病的分布确定抽样点，抽样不少于 10群牛，每县抽样总数不少

于 300头。

10.3.2 单群抽样

在防治或调查牛群，不论牛群大小，抽样总量不少于30头，犊牛、周岁牛和成年牛按同比例抽检。

10.4 蠕虫病虫卵（幼虫）监测方法

10.4.1 消化道线虫病监测

按费勒鹏氏法进行虫卵检查，见附录D中D.1。

10.4.2 肺线虫病监测

按贝尔曼氏法检查粪便中肺线虫第1期幼虫，见附录D中D.2。

10.4.3 线虫病寄生阶段幼虫监测

按水浴法检查线虫寄生阶段幼虫，见附录D中D.3。

10.4.4 吸虫病监测

按沉淀法或尼龙筛淘洗法进行虫卵检查，见附录D中D.4。

10.4.5 绦虫病监测

10.4.5.1 用肉眼观察粪便中虫体或虫体节片。

10.4.5.2 按费勒鹏氏法检查粪便中绦虫虫卵，见附录 D中 D.1。

10.4.5.3 诊断性驱虫后 12h，用粪兜接粪 24h，对收集的粪便按反复水洗沉淀法检查虫体或节片。

10.5 棘球蚴病监测

按NY/T 1466执行。

10.6 犬绦虫病监测

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按粪抗原检测法与氢溴酸槟榔碱下泻法的要求进行。

10.7 寄生虫病病原检查

10.7.1 寄生虫学完全剖检法

按寄生虫学完全剖检法检查牦牛线虫、绦虫及绦虫蚴（棘球蚴、多头蚴和细颈囊尾蚴）、吸虫、外

寄生虫（包括虱、蝇、蜱、螨、蚤）的检查，见附录 E。

10.7.2 螨病监测

按NY/T 1470规定执行。

10.7.3 牛皮蝇蛆病监测

按GB/T 22329规定执行。

10.7.4 其它外寄生虫病监测

虱、蜱、蚤等在颈侧部、肩胛后部、腹侧下部、臀部各取1dm2测定感染情况，并计数，统计感染

率和感染强度。

10.8 监测指标及计算方法

10.8.1 防治密度（%）

防治密度见公式（1）。

防治密度 = 防治牛数/饲养牛总数×100% …………………………（1）

10.8.2 感染率（%）

感染率见公式（2）。

感染率 = 阳性牛数 /检查牛数×100%………………………………（2）

10.8.3 虫卵（幼虫）减少率（%）

虫卵（幼虫）减少率见公式（3）。

M = (N1－N2)/N1×100%………………………………………………（3）

式中：

M — 虫卵（幼虫）减少率（%）；

N1— 驱虫前 EPG或 LPG平均数；

N2— 驱虫后 EPG或 LPG平均数。

10.8.4 虫卵（幼虫）转阴率(%)

虫卵（幼虫）转阴率见公式（4）。

虫卵（幼虫）转阴率 = 虫卵（幼虫）转阴牛数/抽检阳性牛数×100%……………（4）

10.8.5 粗计驱虫率（%）

虫卵（幼虫）转阴率见公式（5）。

粗计驱虫率 = 阳性对照组荷虫数-驱虫组荷虫数/阳性对照组荷虫数×100………（5）

10.8.6 驱净率（%）

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驱净率见公式（6）。

驱净率 = 完全驱虫牛数/检查牛数 ×100%………………………………（6）

11 监测管理

饲养场（户）所应按照动物防疫法律、法规及配套规章的要求，结合当地实际，制定牦牛蠕虫病与

外寄生虫病监测方案，并进行防治监测记录，记录表格见附录F。

12 记录

12.1 建立牦牛调出、调进档案，及时完整记录种用牦牛的来源、特征、主要生产性能和育种等；调出

种牛发运目的地等。

12.2 建立发病及防治档案，及时记录防治数量、用药品种、使用剂量、放牧管理措施、补饲、发病率、

病死率及死亡原因、诊治、环境与粪便无害化处理等情况。

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附 录 A

（规范性附录）

常用抗寄生虫药物及使用规定

表A.1 给出了常用抗寄生虫药物及使用方法。

表 A.1 抗寄生虫药物及使用

类别 名 称 制 剂 用 法 与 用 量 休药期（天）

抗

寄

生

虫

药

伊维菌素

Ivermectin

片剂 内服，一次量，0.3mg/kg 体重 18

注射液 皮下注射，一次量，0.2mg/kg 体重 35

浇泼剂 沿背中线浇泼，一次量，0.5mg/kg 体重 42

埃谱利诺菌素

Eprinomectin

注射剂 皮下注射，一次量，0.2mg/kg 体重 1

浇泼剂 沿背中线浇泼，一次量，0.5mg/kg 体重 0

莫西克汀 Moxidectin 浇泼剂 沿背中线浇泼，一次量，0.5mg/kg 体重 0

芬苯达唑 Fenbendazole 片剂 内服，一次量，5mg/kg～10mg/kg 体重 21

阿苯达唑 Albendazole 片剂 内服，一次量，10mg/kg～15mg/kg 体重 14

奥芬达唑 oxfendazole 片剂 内服，一次量，5mg/kg～7.5mg/kg 体重 7

盐酸左旋咪唑

Levamisole

Hydrochloride

片剂 内服，一次量，7.5mg/kg 体重 2

注射液 皮下、肌肉注射，一次量，5mg/kg～7.5mg/kg 体重 14

三氯苯达唑

Triclabendazole

片剂 内服，一次量，6mg/kg～12mg/kg 体重 56

吡喹酮 Praziquantel，

或英语：Biltricide

片剂

内服，一次量，10mg/kg～30mg/kg 体重 28

氢溴酸槟榔碱

Arecoline hydrobromide

粉剂 犬内服，一次量，1.5mg/kg～2mg/kg 体重 —

氯硝柳胺 Niclosamide 片剂 内服，一次量，50mg/kg 体重 28

碘醚柳胺

rafoxanidum;Flukanide;

Ranide

片剂 内服，一次量，7.5mg/kg～12mg/kg 体重 28

氯氰碘柳胺钠

Closantel Sodium

(Patented); closantel

sodium sal

片剂、

混悬液

内服，一次量，5mg/kg 体重

28

注射液 皮下、肌肉注射，一次量，2.5mg/kg～5mg/kg 体重 28

二嗪哝 Dimpylate 溶液 药淋，浓度应为 250×10-6 14

溴氰菊酯 Deltamethrin 溶液 药淋，浓度应为 50×10-6～80×10

-6 28

消

毒

药

石灰 Lime 粉剂 干撒消毒 —

喷洒，配成浓度 10%～20% 石灰乳 —

漂白粉

Calcium hypochlorite

粉剂 喷洒，配成浓度 10%～20% 乳剂 —

草木灰 plant ash 粉剂 喷洒，30%的草木灰煮沸，过滤取上清 —

火碱 Sodium hydroxide 粉剂 喷洒，配成浓度 2%～5% 的水溶液 —

注：表中未规定者表明该药暂未规定休药期或无需休药期。

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附 录 B

（规范性附录）

牦牛蠕虫病与外寄生虫病防治用药程序

表 B.1 给出了牦牛蠕虫与外寄生虫病防治用药程序。

表 B.1 牦牛蠕虫病与外寄生虫病防治用药程序

类别 防治时间 选用药物

线虫病

应进行2次驱虫，第1次在12月至翌年2月份冬季重点驱除

寄生期幼虫。

第2次在8～10月份进行秋季驱虫。

伊维菌素、乙酰氨基阿维菌素、莫西克汀。

阿苯达唑（丙硫苯咪唑）

芬苯达唑

奥芬达唑

盐酸左旋咪唑

肝片吸虫病

在吸虫病流行区，应进行2次驱虫，第1次在10～11月份重

点驱除肝片吸虫幼虫及成虫。

第2次在2～4月份重点驱除成虫。

阿苯达唑（丙硫苯咪唑）

芬苯达唑。

奥芬达唑

三氯苯达唑

氯氰碘柳胺

绦虫病

在绦虫病流行区，8～9月份重点驱除绦虫幼虫。 阿苯达唑（丙硫苯咪唑）

芬苯达唑

奥芬达唑

吡喹酮

氯硝柳胺

氢溴酸槟榔碱（犬绦虫驱虫与感染调查)

外寄生虫病

在暖季选用杀虫剂，采用喷淋或涂擦的方法按产品使用说

明书杀灭虱、蜱、螨、蚤等。

冷季选用口服、注射或浇背的方法杀虫。感染严重时应间

隔 7～10 天第 2 次给药。

牦牛皮蝇蛆病防治在 9～10 月份，选用有效药物采用口

服、注射或浇背的方法杀虫。

伊维菌素、埃谱利诺菌素、莫西克汀。

螨净

溴氰菊酯

混合感染

混合感染线虫病和外寄生虫病。 伊维菌素、埃谱利诺菌素、莫西克汀。

混合感染线虫、吸虫、绦虫和外寄生虫病。 芬苯达唑+伊维菌素，阿苯达唑+伊维菌素等

复方制剂进行驱虫。

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附 录 C

（规范性附录）

牦牛药物喷淋杀虫方法

C.1 喷淋场地选择

C.1.1 地势平坦，交通方便。

C.1.2 应修建在夏季牧场，喷淋地基应避免有泉水或流砂。

C.2 喷淋场地规格

C.2.1 喷淋场地为喇叭形，长20m，宽5m（约容纳牦牛60～80头），喷淋通道两旁围栏高1.6m，入淋

圈进口宽1.6m。地面向外倾斜，坡度为2%，用水泥抹平，并划防滑小方格。

C.2.2 喷淋液不能排入河流，排水沟坡度为5%，一端设深污井。

C.3 所需器械

背负式电动喷雾器、农用智能电动喷雾器、背负式机械喷雾器。

C.4 喷淋时间

C.4.1 应在6、7月喷淋。1头牛喷淋1次，蟎病患牛隔7d～10d重复喷淋1次。

C.4.2 药物喷淋宜在上午11点钟左右开始至下午3点种左右停止。阴天、雨天、大风天或气候突变均不

宜喷淋。

C.5 药物选择

可选用二嗪哝、氰戊菊酯、溴氰菊酯类等杀虫剂，应交替使用不同类型的杀虫剂。使用前应了解掌

握每种药物的性状、药理作用、作用与用途、用法与用量、不良反应、注意事项、休药期规定等。如选

用新药，应在预实验的基础上使用。

C.6 药液配制

C.6.1 有效浓度 按药物使用说明书进行配制，现配现用。避免使用碱性水。

C.6.2 药液的温度 在药淋时，中午前后温度一般在18℃～25℃之间，配置药液的水温控制在10℃～1

2℃左右。

C.7 喷淋方法

从牛体前部至后部，自上到下喷淋，喷淋药液要均匀周到，保证每头牛都喷淋完全。

C.8 效果检查

C.8.1 喷淋前的检查 喷淋前观察临床症状，检查外寄生虫感染情况。

C.8.2 药物喷淋效果检查 喷淋后至少检查3次杀虫效果，第1次在喷淋后7d，第2次在喷淋后28d，第3

次在喷淋后90d。

C.8.3 每次检查都作详细记录，检查结束后，统计喷淋杀虫效果。

C.9 喷淋前后注意事项

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C.9.1 根据当地牛数、抓绒时间及交通情况，统一安排各户牛群的喷淋次序。组织人力。准备药品及

人畜中毒的解救药品。

C.9.2 当地最近1个月内未发生过牛的严重传染病时可集中牦牛喷淋。

C.9.3 喷淋前2h给牦牛饮足水，防止喷淋时药液中毒。

C.9.4 喷淋时，有专人看护，防止挤压、踩踏。

C.9.5 喷淋后牦牛在干燥台上稍停留。使牛体的药液流入深污井。

C.9.6 喷淋后至少当天内不赶牛过河。

C.10 人畜中毒的处理

C.10.1 喷淋后的牦牛如发生哆嗦、咬牙、眼神发愣、精神不好、中流白沫，应按药物中毒解救方法进

行解毒处理。

C.10.2 喷淋时皮肤受伤浸入药水，应用上述药物清洗治疗。

C.10.3 工作人员注意做好防护，如发热、呕吐、头晕等中毒症状，及时进行解毒。

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附 录 D

（规范性附录）

粪便虫卵（幼虫）检查法

D.1 费勒鹏氏法

D.1.1 原理

又称为饱和盐水漂浮法，是利用盐水比重大于虫卵的原理，将粪便中比重小的虫卵漂浮于比重较大

的溶液表面。

主要用于检查线虫卵、绦虫卵及球虫卵囊等。

D.1.2 所需器械

各种型号平皿、天平、剪刀、镊子、烧杯、40～60目铜筛网、中试管、70%酒精、福尔马林、标本

缸、显微镜、盖玻片、载玻片、吸管等。

D.1.3 饱和盐水的制备

D.1.3.1 在1 000ml 沸水中加入380g食盐，或逐渐加入食盐到析出结晶为止，然后将溶液用纱布过滤

后备用。此溶液的比重应为1.180。

D.1.3.2 清洁水中加入足够的盐，煮沸后有结晶析出，即达饱和，冷却后备用。

D.1.4 操作

D.1.4.1 用天平定量称取粪便1g～5g，置于小烧杯或中试管内，加入适量清水浸泡。

D.1.4.2 待粪便泡软后，倒入一金属杯内用镊子充分捣碎搅匀。

D.1.4.3 加水通过40～60目铜筛网过滤于中试管中，静置沉淀1h，弃去纱网上的粪渣。

D.1.4.4 弃去上清液，加入适量饱和盐水摇匀，再加入饱和盐水至液面达管口水平，加盖玻片并使与

液面平接触（勿产生气泡），静置30min，取下盖玻片，置于载玻片上进行镜检，分类计数。也可用硫

代硫酸钠、硝酸钠、硫酸镁、硫酸锌和糖饱和溶液来代替饱和盐水，可提高费勒鹏氏法的效果，操作方

法相同。但须注意溶液的比重加大，漂浮到液面的杂质更多，虫卵浮起的速度减慢，盐类的饱和溶液应

保存于不低于13℃的条件下，以保证较高的比重。

D.2 贝尔曼氏法

D.2.1 原理

主要用于牦牛的肺线虫病肺线虫幼虫的分离检查。

D.2.2 所需器械

各种型号平皿、漏斗、橡胶管、金属夹、纱布、沉淀管、天平、70%酒精、福尔马林、标本缸、显微

镜、恒温培养箱、沉淀缸、载玻片、吸管等。

D.2.3 操作

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从动物直肠采集新鲜粪便15g～20g，带回实验室置4℃冰箱中待检。称取3g～5g粪便放在直径

10cm～15cm漏斗内的金属筛或纱布上，漏斗下端套以长10cm～15cm的乳胶管，用金属夹夹住乳胶管，

然后置漏斗架上，加入37℃～ 40℃的温水于漏斗中，直至淹没粪便为止，置恒温箱中37℃培养3h～

5h，取出漏斗架，开动夹子将漏斗里的液体接入沉淀管中静置1h，虫体沉于管底；或2500 r/min 离心

5min～10 min，用吸管吸弃上层液体，再吸取管底沉淀物于载玻片上镜检计数。

D.3 寄生期幼虫水浴法分离技术

D.3.1 原理

由于重力作用和线虫寄生期幼虫有趋水性及趋热性，线虫幼虫游走于水中，并沉于平皿底部，便于

收集分离幼虫。主要检查组织和胃肠内容物中的第 4、5期幼虫。

D.3.2 所需器械

幼虫分离装置（见附图 D.1）、各种型号平皿、沉淀管、天平、70%酒精、福尔马林、标本缸、显

微镜、恒温培养箱、沉淀缸、载玻片、吸管等。

D.3.3 备检材料的采取及处理

D.3.3.1 器官组织

分别采取反刍动物真胃、十二直肠（4m）、回肠（4m）盲肠、结肠，剪开冲洗干净，刮取黏膜；采

取肠系膜淋巴结、纵隔淋巴结、气管，撕碎，充分混匀待用；

D.3.3.2 胃肠内容物

分别收集真胃、小肠前段、小肠后段、盲肠、结肠内容物，用 40℃0.5%氯化钠溶液反复沉淀，每

次静置 1h～1.5h，直至上清液清亮为止，弃取上清液，挑出沉渣中的全部成虫，然后将沉渣充分搅匀

待用。

D.3.4 线虫寄生阶段幼虫的培养

D.3.4.1 将备检材料移入分离装置

D.3.4.1.1 器官组织

将处理好的器官组织材料平摊在一块脱脂纱布中央，厚度不超过 3mm～4mm，折起纱布四边覆盖材

料表面，平整移入分离装置的纱布网上。

D.3.4.1.2 胃肠内容物

先在分离装置的纱布网上铺一块脱脂纱布，再将处理好的胃肠内容物均匀倾布在纱布表面，厚度不

超过 5mm，折起纱布四边覆盖材料表面。

D.3.4.2 培养

D.3.4.2.1 沿培养皿壁加入40℃0.5%氯化钠溶液至淹没材料表面。

D.3.4.2.2 将整个分离装置移入42℃水浴箱内培养5h，然后慢慢取出纱布网和被检材料，收集分离液。

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D.3.5 培养液收集、幼虫分离与检查

D.3.5.1 将培养液收集后在沉淀管中反复沉淀，每次1h～1.5h，使虫体沉于管底，直至上清液清澈，

虹吸弃去上清液，留下沉淀物。

D.3.5.2 用吸管吸取沉淀物镜检分类计数。

a) 幼虫分离装置 b) 四耳防锈金属圈及纱布网

说明：

1——培养皿；

2——四耳防锈金属圈；

3——纱布网；

4——备检材料；

5——四耳；

6——防锈金属圈；

7——针孔。

反刍动物线虫寄生阶段幼虫的分离装置主要由培养皿、四耳防锈金属圈、纱布网组成。四耳防锈金属圈是由金属圈

和四耳组成的一个整体结构，金属圈外圈直径小于培养皿直径，四耳高度低于培养皿的深度，可架在培养皿上，金属圈

上有针孔，纱布网通过针孔用棉线缝制在金属圈上。使用时，先将纱布网通过针孔用棉线缝制在金属圈上，再将缝好纱

布网的四耳防锈金属圈通过四耳托架在培养皿上。

图 D.1 幼虫分离装置

4

2

1

3

7

5

6

3

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D.4 沉淀法

D.4.1 原理

其原理是虫卵比水重，可自然沉于水底。适用于检查吸虫卵。

D.4.2 所需器械

各种型号平皿、天平、剪刀、镊子、烧杯、40～60目铜筛，260目尼龙筛、玻璃棒、沉淀管、天平、

70%酒精、福尔马林、显微镜、载玻片、吸管等。

D.4.3 方法

D.4.3.1 自然沉淀法

又称为彻底洗净法。取 5 g～10g 粪便捣碎后，放于一容器内，加 5～10倍量清水搅匀，经 40～60

目铜筛过滤后，让滤液自然沉淀约 1h～1.5h，吸去上清液；反复 2～3 次，至上清液清亮为止。吸去

上清液，留取沉淀物，用吸管吹吸均匀后，吸取少量于载玻片上，加盖玻片镜检。

D.4.3.2 离心沉淀法

取 5g～10g粪便捣碎后，放于一容器内，加 5～10 倍量清水搅匀，经 40～60 目铜筛过滤后，将粪

便滤液倒入离心管内 1 000rpm 离心沉淀 5min，然后吸去上清液，再加清水，混匀，如此反复多次，

至上层液体透明为止，吸去上清液，用吸管吸取粪便渣，涂于玻片上镜检。其优点省时。

D.4.3.3 尼龙筛淘洗法

D.4.3.3.1 方法 1

取 5g～10g 粪便于杯中，加少量水，用镊子或玻棒搅碎，加水混匀，用上层为 40～60目的铜筛下

层为 260目的尼龙筛进行过滤，然后取出铜筛，将尼龙筛依次浸在 2只盛水的盆内，用光滑圆头的玻棒

反复搅拌筛内粪渣，直至粪便中的有色杂质干净为止，最后用清水洗筛壁四周与玻棒，使粪渣集中于筛

底，用吸管吸取粪便渣，涂于玻片上，加盖片镜检。

D.4.3.3.2 方法 2

取 5g～10g 粪便于杯中，加少量水，用镊子或玻棒搅碎，加水混匀，先用 40～60目的铜筛过滤，

滤下液再通过 260目的尼龙筛过滤，并在尼龙筛中继续加水冲洗，直至洗出液清澈透明为止，滤干尼龙

筛中的水，用少量的水沿网壁淋洗收集沉渣于烧杯中，静置 1h～1.5h 或将粪便滤液倒入离心管内 1

000rpm 离心沉淀 5min，吸去上清液，吸取沉淀物镜检。

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附 录 E

（规范性附录）

全身性寄生虫学剖检法

E.1 一般原则

全身性寄生虫学剖检法先检查牦牛体表有无寄生虫，有则收集之。然后将皮剥下，检查皮下组织，

再剖开腹腔和胸腔，分别结扎食道、胃、小肠和大肠，摘除全部消化器官、呼吸器官、泌尿器官、生殖

器官、心脏和相连大血管。同时仔细检查胸腔和腹腔，并收集其中的液体。取下头部、膈脚供检查。

E.2 体表寄生虫检查

E.2.1 一般原则

对于体表寄生的蜱、螨、虱、跳蚤可采用肉眼观察和显微镜观察相结合的方法进行检查。蜱寄生于

动物体表，个体较大，通过肉眼观察即可发现。螨个体较小，常需刮取皮屑，于显微镜下寻找虫体或虫

卵。

E.2.2 螨的检查

E.2.2.1 直接检查法

可将刮下的皮屑，放于载玻片上，滴加50%甘油溶液，覆以另1张载玻片。搓压玻片使病料散开。

E.2.2.2 刮取检查法

E.2.2.2.1 器械

外科凸刃小刀或骨刮勺。

E.2.2.2.2 部位

在宿主皮肤患部与健康部交界处。

E.2.2.2.3 刮取方法

器械在酒精灯上消毒，在疑似病牛皮肤患部与健康部交界处用外科凸刃小刀或骨刮勺沾上甘油或甘

油与水的混合液刮取皮屑，使刀刃与皮肤表面垂直，反复刮取表皮，直到稍微出血为止。刮下的皮屑，

放于载玻片上，滴加50%甘油溶液，置显微镜下检查。

E.2.2.2.4 样品的携带

将刮下的皮屑集中于培养皿或试管内，带回供检查。

E.2.3 蠕形螨的检查

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在牦牛四肢的外侧和腹部两侧、背部、眼眶四周、颊部和鼻部的皮肤上按摸，如有砂粒样或黄豆大

的结节，用小刀切开挤压，看到有脓性分泌物或淡黄色干酪样团块时，将其挑在载片上，滴加生理盐水

1～2滴，均匀涂成薄片，上覆盖片，在显微镜下进行观察。

E.2.4 虱和其它吸血节肢动物检查

虱、蜱、蚤等吸血节肢动物寄生虫在牦牛的腋窝、鼠鼷、乳房和趾间及耳后等部位寄生较多。可手

持镊子进行仔细检查，采到虫体后放入有塞的瓶中或浸泡于70%酒精中。注意从体表分离蜱时，切勿用

力过猛。应将其假头与皮肤垂直，轻轻往外拉。以免口器折断在皮肤内，引起炎症。

E.2.5 皮蝇蛆检查

在9～10月份剖杀牦牛，逐头检查食道浆膜、黏膜、瘤胃浆膜、大网膜、肠系膜、脊椎内部、背部

皮下等部位的皮蝇幼虫；3、5月份触摸牛背部皮下，检查有无皮下瘤疱或皮肤虫孔，检出皮蝇3期幼虫，

分类鉴定，统计感染率和感染强度。

E.2.6 外寄生虫的保存

无翅的蜘蛛昆虫一般用70%的酒精保存。有翅昆虫防腐处理后制成干制标本。干燥保存，注意防潮、

防霉、防蛀。

E.3 体内寄生虫检查

E.3.1 消化系统

先将肝胰取下，再将食道、胃、小肠、大肠、盲肠分别双重结扎后分离。同时注意观察腹腔脏器、

网膜及肠系膜表面及腹腔内有无寄生虫。

E.3.1.1 食道

沿纵轴剪开，检查粘膜表面、粘膜下和肌肉层有无虫体，尤其应注意筒线虫、皮蝇幼虫和肉孢子虫。

E.3.1.2 胃

第1胃剪开，检查胃壁粘膜上有无同盘吸虫。第2、3胃一般不检查。

第4胃放在搪瓷盆内沿大弯剪开，用生理盐水冲洗胃壁上的虫体，必要时刮取胃粘膜检查。

胃内容物加生理盐水稀释，搅匀，沉淀1h～1.5h，倒去上层液体，再加满生理盐水，搅匀沉淀，30min

左右。如此反复多次，直至上层液体透明为止。最后将沉淀物分若干次倒入玻璃平皿中检查，挑出所有

虫体，并分类计数。

胃内容物量多时，不能在短时间内检查完毕，可在反复沉淀之后，于沉淀物中加入甲醛，使成3%

的浓度，保存以后检查。

E.3.1.3 肠

应分别进行检查，先用生理盐水在盆内将肠管冲洗后剪开。其内容物用反复沉淀法检查，必要时刮

取肠粘膜检查。

肠内容物量多时，不能在短时间内检查完毕，可在反复沉淀之后，于沉淀物中加入甲醛，使成3%

的浓度，保存以后检查。

E.3.2 肝和胰脏

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肝脏先剥离胆囊，放在平皿内单独检查，然后用剪刀沿胆管剪开，检查其中有否虫体，尔后肝组织

用手撕成小块，用手挤压，反复沉淀法检查沉淀物。也可用幼虫分离法对撕碎组织中的虫体进行分离。

胰脏用剪刀沿胰管剪开检查，其后与肝的检查方法相同。

E.3.3 脾

用肉眼观察，先观其表面，然后用手撕开看有无虫体。

E.3.4 呼吸系统

用剪刀剪开鼻腔、喉、气管和支气管，先用肉眼观察，然后刮取粘膜检查，将分泌物和刮取物涂于

载片上，在解剖镜或显微镜下观察。肺组织按肝胰处理方法进行检查。

E.3.5 泌尿系统

切开肾脏，先将肾盂用肉眼观察，再用刮搔法检查，然后将肾组织切成小薄片，压于两玻片之间，

在低倍镜下检查。输尿管和膀胱放于瓷盘中，开用刮搔法检查粘膜，用反复沉淀法检查尿液。

E.3.6 生殖系统

先剪开检查有无虫体，并刮取粘膜进行压片检查。

E.3.7 头部

剖开鼻窦、付鼻窦、额窦等检查。打开口腔，检查舌、咽喉等。检查眼结膜腔内容物，并剥出眼球，

切开将前房水收集于皿中，反复冲洗沉淀后，在放大镜下检查沉淀物，并从眼睑的内面和结膜取得刮下

物在镜下观察；最后打开颅腔，检查脑组织，先用肉眼观察，然后切成薄片压片镜检。

E.3.8 血液循环系统

先用肉眼观察心脏，然后将心脏剖开，观察心室和心肌，先涂片染色镜检。将内容物洗于生理盐水

中，用反复沉淀法检查。大血管也采用此法。注意观察肠系膜静脉、门静脉血管。心肌压片镜检，检查

有无住肉孢子虫。

E.3.9 淋巴结

先切开用手挤压检查有无虫体，然后触片染色镜检。

E.3.10 肌肉组织

对唇、颊和膈脚及全身有代表性肌肉进行肉眼观察。当发现囊状或小白点状、线状可疑物时，应剪

下肌肉样本制做压片，在解剖镜或显微镜下检查；对膈肌脚也可用消化法进行检查。

E.3.11 蠕虫标本的采集和保存

E.3.11.1 采集

注意采集标本的完整性。采集的虫体，如附有杂物或不干净，可将虫体装入生理盐水的瓶中加以摇

荡洗涤，有些线虫口囊发达，常附有杂物，妨碍检查口囊内部的构造，因此，在固定之前用毛笔把口囊

内的杂物先刷出去。

E.3.11.2 保存

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线虫常用巴氏液固定，其配方为：福尔马林3ml，食盐0.75g，蒸水100ml。固定时，巴氏液加热到

60℃～80℃，可使虫体伸展，仍保存在此液内。

吸虫、绦虫和棘头虫用70%的酒精固定保存。为使吸虫或绦虫的组织较快松弛，还可以把它们放入

0.5%薄荷脑热水中。松弛后的虫体，为以后制作玻片标本方便，可将虫体压于两玻片之间，两端用线绳

扎上，加压时间依虫体大小而定，约为30min至12h。此后将虫体取出，装入70%酒精保存。

E.3.11.3 虫体的固定

对于寄生虫学剖检所获得的虫体或畜体自然排出的虫体, 当虫体新鲜时能鉴定的就当时鉴定。特别

是线虫结构较为清晰，将其放在载片上，滴加适量生理盐水并覆以盖片，就可进行观察鉴定。当时难以

鉴定的虫体要及时清洗，用70%的酒精或巴氏液(3％福尔马林生理盐水)固定。吸虫和绦虫为了将来做鉴

定，需在固定之前， 进行压薄加工。即把吸虫和选择出的绦虫节片(头节、成熟节片、孕卵节片)放于

两张载片之间，适当加以压力，二端用线或橡皮绳扎住，投入固定液中固定。然后投入标本瓶中保存。

E.4 寄生虫学剖检时的记录

当进行寄生虫学剖检时，应及时填写剖检记录，包括动物种类、性别、年龄、解剖编号、虫体寄生

部位、初步鉴定结果、虫体数量、地点、解剖日期、解剖者姓名等。

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附 录 F

（资料性附录）

防治监测记录表

表F.1 给出了防治监测记录表格式。

表 F.1 防治监测记录表

填表人：

采

样

日

期

畜

主

姓

名

监测群

体

数

采样数

量

监测项

目

监测单

位

监测方

法

监测

结果 处理

情况

备

注 感染

率

感 染

强 度

发病

率

病死

率

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