Rosa de BengalaEquipo 1Inmunología

FundamentosLa prueba se fundamenta en al uso de

antígenos coloreados con rosa de bengala para la identificación de aglutinas de brúcela.

El pH bajo 3,65 +/- 0,05 permite la inhibición de aglutinas inespecíficas.

La sensibilidad de la prueba permite detectar tanto a las IgG en fase temprana de la enfermedad y a las IgM en la fase crónica de la misma.

Ventajas y Desventajas

Ventajas Las pruebas serológicas son métodos

rápidos, accesibles y de un costo aceptable.

Las ventajas de estas pruebas es que son simples, presentan alta sensibilidad y bajos costos.

Desventajas La desventaja es que son subjetivas, no

permiten el corrimiento de gran número de muestras a la vez y requieren de una prueba confirmativa.

Rosa de BengalaLa prueba del Rosa Bengala o prueba del antígeno tamponado de Brucela, es una técnica rápida de aglutinación en porta para la detección de anticuerpos anti-Brucela en sueros animales y humanos

BrucelosisLa brucelosis, también llamada fiebre malta o fiebre ondulante, es una enfermedad bacteriana (infecciosa) que ataca a varias especies de mamíferos dentro de los cuales se encuentra el hombre, causando la brucelosis humana.

Algunos de los reservorios naturales son los bovinos, caprinos, ovinos, cerdos y mamíferos marinos, pero se han encontrado brucellas en una inmensa cantidad de mamíferos tan dispares como pequeños roedores, cánidos, camélidos y cetáceos.

Las vías de contagio suelen ser: mucosas, heridas en la piel y la vía digestiva. La bacteria puede incluso entrar por las vías respiratorias mediante aerosoles. Muchas infecciones provienen de la manipulación de animales contaminados, por ingesta de leche o de sus productos no pasteurizados y de carnes poco cocidas. En países desarrollados es una enfermedad típicamente ocupacional donde las personas más expuestas son veterinarios, peones de campo y trabajadores de la industria de la carne.

Síntomas La brucelosis aguda puede comenzar con síntomas seudogripales leves o síntomas como: Dolor abdominal Dolor de espalda Escalofríos Sudoración excesiva Fatiga Fiebre Dolor de cabeza Dolor articular Inapetencia Debilidad Pérdida de peso

Ag brucelar. Valor predictivo positivo muy alto, 99% en los paciente con brucelosis aguda o crónica

El Antígeno coloreado Rosa de Bengala permite una detección precoz de las aglutininas (anticuerpos) específicos que aparecen en la Brucelosis.

PRUEBA DE LABORATORIO

Rosa de Bengala Antígeno Brucelar Amortiguado para el

Diagnóstico de Brucelosis Prueba de aglutinación rápida en placa

para la detección temprana de aglutininas específicas de Brucella

(Brucella melitensis, abortus y suis).

PRINCIPIO Se utiliza un antígeno de Brucella

abortus biotipo 1 (cepa 99S o cepa 1119-3) acidificado regulado y teñido con Rosa de Bengala a un pH de 3.65 +/- 0.05 para la detección de aglutininas específicas de Brucella. Esta prueba puede ser utilizada para un diagnóstico temprano.

MATERIAL PROPORCIONADO

• Placa de prueba. (Se recomienda que siempre se utilice una placa de vidrio para una mejor observación de los resultados). • Pipetas desechables. • El gotero incluido proporciona una gota de 30-40 µL. • Se sugiere utilizar pipetas automáticas preferentemente.

REACTIVOS • Antígeno Rosa de Bengala • Control Positivo de Brucella • Control Negativo de Brucella

PROCEDIMIENTO1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo, controles y muestras de suero. 2. Utilizando la pipeta automática adicione 30 µL de la muestra del paciente en un círculo de la placa. 3. Mezcle suavemente el Antígeno Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogéneo, después coloque 30 µL en la placa de prueba, en el mismo circulo donde se coloco la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador. (usar un aplicador diferente para cada muestra). Repita este paso para cada muestra de paciente y controles.

4. Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos. 5. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado. Importante: Después de este tiempo la lectura ya no es válida. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOSEl reactivo y los controles son estables de 275-281 K (2-8°C) hasta sus respectivas fechas de caducidad.

RESULTADOSLa lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenzó a mezclar. Este es un tiempo límite óptimo en el que se da un espacio para la observación de ciertas aglutininas que se revelan lentamente y que de otra manera se pueden omitir, además de que se pueden presentar reacciones no específicas.

* No Aglutinación - Suero Negativo * Cualquier cantidad de Aglutinación - Presencia de anticuerpos específicos. Suero Positivo Esta es sólo una prueba cualitativa de screening, la cual si resulta positiva debe ser confirmada mediante otra prueba cuantitativa para brucelosis como: Aglutinación Lenta Estándar o Aglutinación Lenta en Presencia de 2-Mercaptoetanol. NOTA: El aislamiento del agente etiológico mediante hemocultivos es de suma importancia.