病原生物学开放实验病原生物学开放实验

细菌的分布及其分离鉴定病原生物学实验室

张文卿、 丁守怡、吕锐、孟林

病原生物学开放实验病原生物学开放实验

病原生物学实验室守则1. 学生进实验室应穿好实验室专用隔离衣；与实验无关物品

不准带入实验室，所有实验材料严禁带出实验室。

2. 实验室内禁止吸烟及饮食。

3. 严格操作规程，杜绝生物安全事故。污染标本及使用过的有菌器材放于指定的消毒缸内，统一进行消毒处理。需要培养的物品做好标记，放于指定培养箱内。

4. 如在实验过程中发生有菌材料溅出、污染环境或化学药品灼伤等意外情况，应立即报告老师，以便及时处理。

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6. 爱护仪器设备，不经老师批准，不准自行接通、断开电源或拆卸仪器。对仪器设备造成人为损坏的，要酌情赔偿。实验结束后，仪器设备状态复原。

7. 实验结束后，清洁台面、所有循环使用器材复原；安排值日生打扫卫生；检查水、电、门、窗等设施，并经实验室负责人检查认可。

8. 用肥皂或消毒液洗手、脱隔离衣后方可离开实验室。

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一、细菌的分布 细菌广泛地分布于土壤、空气、水等自

然界环境和人类、动物、植物的体表及其与外界相通的腔道中。自然界中，微生物极少单独存在，各种不同的微生物种群与其周围的环境及寄生的宿主噢你共同构成生态系。

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微生态学 (microecology): 是细胞水平或分子水平的生态学，即研究微生物在细胞或分子水平上与其宿主 ( 环境 ) 相互关系的科学。

医学微生态学 : 研究寄居在人体表和腔道粘膜表面微生物与微生物、微生物与人体以及微生物、人体与外界环境相互依存、相互制约的学科。

医学微生态学研究的对象：正常微生物菌及其在特定条件下引起机会感染的条件致病菌 (conditioned pathogen) 。

医学微生态学（ Medical microecology):

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正常微生物群(normal flora of bacteria or normal flora)

正常人的体表和与外界相通的腔道黏膜中（眼结膜，口腔、鼻咽、肠道、泌尿生殖道等）不同种类和数量及对人体无害而有益的微生物称为正常微生物群。

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人体各部位的微生态系

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人体常见微生物群

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正常微生物群的生理作用正常微生物群的生理作用

正常微生物群营养作用

生物拮抗

免疫作用

抑癌作用

抗衰老作用

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机会性感染（ opportunistic infection)

机会性感染 (opportunistic infection) 或条件致病性感染 (conditioned infection) ：

由正常微生物群在机体免疫功能低下、发生定位转移或菌群失调等条件下引起的感染。

机会致病菌 (opportunistic pathogen) 或条件致病菌 (conditioned pathogen) ：

能够引起机会性感染的所有微生物。

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正常微生物群 条件致病菌特定条件

定位转移定位转移

免疫功能低下免疫功能低下菌群失调菌群失调

致病条件

感染的条件

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肉类中致病菌的分布

致病菌的分

布

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实验目的了解细菌的分布特征。建立无菌概念， 了解无菌操作的基本规范。了解细菌分离、鉴定的基本程序。初步了解科研工作的程序及论文写作要素。

病原生物学开放实验病原生物学开放实验实验程序标本采集

细菌分离

纯培养

鉴定

药敏及动物实验

血培养基普通培养基

生化、血清学、成份检测

可疑致病菌落菌落特征

G 染色

皮肤 呼吸道

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本次实验内容

血培养基

普通培养基

用力咳 2-3次

任一物品涂抹

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普通培养基

空平皿自来水 1ml

(10 -1~ -5)

土壤标本画线分离

45℃普通琼脂培养基倾注

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平板划线分离：

连续划线放射划线

分区划线

colony

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细菌在培养基上生长情况描述

大小：（大、中、小）形态：（边缘、表面、湿润度等）：颜色：溶血现象：（ α、 β、 γ ）

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细菌的形态学观察

不染色标本

染色标本

单染色

复染色

特殊染色 鞭毛、芽孢、荚膜

革兰染色、抗酸、 albert

动力观察

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革兰染色（ Gram stain)

原理：步骤：意义：

鉴别细菌选择抗菌药物研究细菌致病性

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结晶紫1min

卢戈碘 1min

95%乙醇 30s

稀释复红 30s

革兰染色

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Gram staining

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特殊染色

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Scanning microscope

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荧光显微镜

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细菌药物敏感实验

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科研论文撰写要素 引言：研究的目的和意义。 材料和方法：标本来源。

主要实验材料（试剂、仪器等）。

实验方法。

实验数据的统计处理方法。 结果： 讨论： 参考文献： 附：研究生论文参考。