اإللكتروني المجهر تقنية Electron Microscopy technique

القادر. عبد عمر د

الطرق هذه ذكر إلى نتطرق أن قبلفيما النقاط بعض على التأكيد يجب

اإللكتروني المجهر يخص

العينة المراد رؤيتها ستفحص تحت تفريغ عالىHigh vacuum لذا يجب أن ال تحتوى العينة على أية نسبة

من الماء حتى ال تعوق مرور تيار األلكترونات .

تعتمد فكرة الرؤية على المنظر المتكون على اللوحةالفوتوغرافية التي يمكن تحميضها .

القادر. عبد عمر د

1924

. األجسام ومشاهدة الخلوية التراكيب لفحص الضوء مصدر بدل االلكترونات باستخدام التفكير بدأ مرة ألول

عن عبارة أنه نيون لمبه أي خالل من نراه الذي الضوء نتخيل عندما : فمثال ذاته الضوء هي كهربائية أشعة عن صادر وسالب موجب قطبين

عن عبارة النيون األبيض الضوء ذات اللمبةاللمبة) + & - ( بينما األبيض اللون ليعطي النيون غاز بينهما يوصلفينتج ) + / - ( بعضهما مع سلكين بتوصيل شبيه األحمر الضوء ذاتهذا في لذلك منه ومستفاد معالج غير لكنه الضوء فتعطي شرارةالعالية الحرارة يتحمل : جدا خاص معدني سلك أستخدم االلتماس

الحرارة ليعطي فيه الكهرباء مرور عند ويلتهب الفولتات من ومقدارمفرغ محيط في خاصة الضوء ثم

) ليرى ) بااللكترونات يفكر برولي دي لويس العالم جعل ما وهذاالدقيقة األجسام

القادر. عبد عمر د

-له العينات تحضير وطرق بسرعة يتقدم الجهاز هذا تطور بدأون الحيوية التراكيب خبايا من الكثير لنا كبيرة عنه جتفكشفت تغيرات

الحيوية العلوم تاريخ .في الخلية ومعرفة والفيروسات واألوليات البكتريا ودراسة فاكتشاف

الكروموسومات ومعرفة والحيوان للنبات أساسية بنائية كوحدةباكتشاف ثم الله بفضل كان الوراثية الصفات نقل في ودورها

وبواسطته االلكترونية وباألخص المجاهر هذه أكتشف .E.Mوتطويرمن أكثر الدقيقة و الصغيرة الخلوية السيتوبالزمية التراكيب من كثير

مضى وقت .أي النفاذ للمجهر التحضيرات طرق تطوير في االهتمام فترة كانت

االلكتروني المجهر على الستينات نهاية حتى والتطوير العمل واستمر .النفاذ

استخدام بداية السبعينات أول في االلكتروني وكان .الماسح المجهر

القادر. عبد عمر د

1980الماسح االلكتروني المجهر تطور كان

1986ماسح الكتروني مجهر (SEM)أفضل

مثل (35JSM)أستخدم

القادر. عبد عمر د

أنواعها و المجاهر تصنيف

L.M

ضوئية E.M

إلكترونية

القادر. عبد عمر د

L.Mضوئية E.Mإلكترونية

1-Transmission Electron Microscopy

2- Scanning Electron Microscopy

3 -Energy Dispersive X-ray Spectroscope.

4 -Field Emission Scanning Electron Microscopy

5- Electron Probe Micro- Analyzer.

1 -Inverted L.M

Compound L.M

2 -Dark field L.M

3 -Phase Contrast Microscope

4 -U.V.M.

5 -Immune fluorescent I.F.L.M.

6 -Descanting L.M attaching

7 -Camera L.M

8 -Coalesce L.M

(TEM)

(SEM)

(F E.SEM)

(EPMA( =)SEM&EDS)

Simple L.M

Single lenses

القادر. عبد عمر د

االلكتروني المجهر أهمية معرفة على يساعد ممابينه مقارنة عمل

ومن الفيزيائية الناحية من الضوئي المجهر وبينالتركيب ناحية

. المشتركة واألجزاء هذه من كل وأنواع للتصنيف أخرى ومقارنة

المستخدمة المجاهر. تستخدم وفيما

القادر. عبد عمر د

: بين تتراوح الضوئي المجهر عند التكبير قوة1500x , الجودة عالي الضوئي المجهر 25xللمجهر أو البسيط للمجهر

التشريحي

وهيMagnification power )M.P.( × الشيئية العينية ضرب حاصل وتساوي

تعطي أن إلى تصل فلن الضوئي عند التكبير قوة بلغت مهما لذلكداخل واضحة تفاصيل

غيرها و البكتريا مثل الحية الدقيقة الكائنات مع خاصة ومكوناتها الخلية التبيين و التمييز قوة على التكبير قوة وتعتمد التمييز قوة أو التبيين بقوة يعرف ما بسبب Resolution powerوذلك

)R.P.(

القادر. عبد عمر د

إلى الحين ذلك في وصلت النفاذ االلكتروني المجهر عند التكبير قوة عن أمامرة 600,000

مما جزء مائتي من جزء من أقل إلى الصفر من تصل : أجساما يظهر أن فيمكنهأحسن تظهره

قوة عن أضعاف وهي التمييز بقوة يعرف ما بفضل وذلك الضوئية المجاهرالمجهر في التمييز

ضعف ألف : تقريبا وتساوي الضوئي

- ؟: – اإلظهار التبيين قدرة أو التمييز قوة في السر هو ما إذن

التبيين قوة أو التمييز :(Resolving power)أو (Resolution power)قوةتام بوضوح نراهما أن يمكن متقاربين جسمين أصغر بين مسافة أصغر هي

: تماما مفصولينتداخل أي غير من بعضهما عن

القادر. عبد عمر د

زيادة االلكتروني المجهر اكتشاف حقق لقدالمجاهر تغلبت حيث الوضوح قوة في كبيرة

اإلظهار قوة في الضوئية على االلكترونيةالعالي التكبير إلى إضافة والتمييز والتبيين

علي يعتمد الشعاع .(R.P)الذي تمرير عندفحصه المراد الجسم خالل االلكتروني

ضوئي) ( تصوير لوحة على لنراها العينةإلى أو أفالم إلى نقلها ثم ومن حساسة

االلكتروني بالمجهر متصل كمبيوتر

القادر. عبد عمر د

1m = 1000mm 1mm = 1000µm

0,1mm = 100µm1nm = 10-3 µm 1µm = 1000nm

0,1µm = 100 nm 1nm = 1000p

القادر. عبد عمر د

و التمييز قوة على : كليا اعتمادا تعتمد التكبير قوةالتبيين

في التكبير قوة الضوئية لذلك العدسات المجاهر على تعتمد) ملموسة) زجاجية عدسات الشيئية

في- التكبير قوة االلكترونية بينما على المجاهر تعتمدملموسة ) ( غير الكترونية عدسات

تصميمها مكان في تحصل وإنما الواقع في موجودة غيرالكهربائي التيار يمر عندما

القادر. عبد عمر د

) االلكتروني ) أو الضوئي في العدسة نوع يحددها ال التبيين قوةالموجي ) الطول يحددها لندا wave length (=)وإنما

)

: الضـوئي يساوي المجهر الذي و الضوء لشعاع الموجي الطول (500 ) : تقريبا نانومتر

(0,5 µm) األزرق أو العادي للضوءالضوئي: عند التبيين قوة (µm 0,2)مثال

بعض: في البنفسجية فوق األشعة استخدام عند مثالالموجي .U.V.Mالمجاهر الطول فيكون

W.L.=0,3µm يكون R.P.=0,1µmوكلما وقصر الموجي الطول قل كلما أنه المثالين من نالحظ

أكثر والوضوح التبيين قوة كانت

: االلكتروني وهو المجهر بالنانومتر يقاس الذي و االلكتروني للشعاع الموجي الطول : جدا قصير

الضوئي للمجهر بالنانومتر مقارنة

R.P

القادر. عبد عمر د

105

V=

؟ رؤيته المطلوب للجسم الصورة دقة عليها يعتمد الذي والتبيين التمييز قوة لنعرف االلكتروني للشعاع الموجي الطول كم

موجة أقصر ذو الكتروني شعاع إلطالق المستخدمة الكهربائية الفولتات كم على يعتمد هذا

: التالية بالمعادلة االلكتروني للمجهر االلكتروني للشعاع الموجي الطول ويقاس

لندا ) ( حيث الموجي الطول V للمجهر الداخلة الفولتية

القادر. عبد عمر د

إلطالق الكتروني .(60K.v) فولت 60,000فعند استخدام طول موجته...........؟

نحسب:1,5

V=

تساوي تمييز قوة على (0,05µm)أو (0,5nm)نحصل

القيمتين بين الشاسع الفرق نرى الضوئي المجهر مع التبيين قيمة مع القيمة هذه مقارنة وعند

القادر. عبد عمر د

ال فإنه العادي المجهر باستخدام أنه المعروف منتبعدان نقطتين بين التمييز يمكن

نصف عن قطرها يقل بمسافة البعض بعضهما عن. للضوء الموجي الطول

أي لنا يميز ال الضوئي المجهر أن يعني هذاإلى يصل قطريهما بين البعد جسمين

من (250nm)أقل: أخرى بعبارة

تمييزهما يمكن نقطتين بين بعد أصغر إنهو الضوء هذا (250nm)باستخدام

القدرة ليس العادي للمجهر الشيئية العدسة أن أيتقل التي األشياء إظهار على

عن جزيئاتها بين نانومتر 250المسافة القادر. عبد عمر د

المجهر في التكبير لقوة المحدد العامل أن عرف لذلكهو الضوئي

ذاته للضوء الموجي الطول

حد لها الضوئي للمجهر التبيين وقوة الموجي الطول لذلكمعين

ثابت وهو للضوء الموجي بالطول مرتبطة محددة قيمة ذا

القادر. عبد عمر د

االلكتروني المجهر عليها تغلب السلبية هذهللشعاع الموجي للطول باستغالله

j بدال لإلضاءة كمصدر العالية السرعة ذات االلكترونيالمرئي الضوء من

يعتمد متغير الموجي الطول ذات االلكترونات أن حيثالفولتات قوة على

العدسات خالل االلكترونات إرسال في المستخدمةما عادة ،لذلك االلكترونيةبين يتراوح تيار فولت 60.000يستخدم

المجاهر (180K.V)إلى ( 60K.V)أي بعض وهناكشدته تيار تستخدم

فولت ( 1000K.V)مليونالقادر. عبد عمر د

بين ما التكبير قوة وصلت (600,000X)ووصلت وحتى (1,600,000X)إلى

ما تصل االلكترونية المجاهر لهذه التمييزية والقوة 0,1nm-0,2بين

المجاهر ألقوى التمييز لقدرة ضعف ألف حوالي أيالضوئية.

الذي األجزاء نفس من االلكتروني المجهر ويتركبالمجهر منها يتركب

فتيلة من هو الضوء مصدر في االختالف أن إال العاديالتنجستن

. التيار فيه يمر الذي المهبط وهومحلها فيحل والعينية الشيئية والعدسات المكثفات أما

كهرومغناطيسي ملف من كل. المهبط لشدة مساوية شدته متغير تيار فيه يمر

يتم حتى الفحص بدء قبل الشدة هذه تغيير ويمكنالجسم على االلكترونات بؤرة تركيز

اللوحة على واضحة صورة على والحصول المفحوصالفلورنسية.

القادر. عبد عمر د

اإللكتروني المجهر فكرة jإذا

أنه على الصورة تكوين تعتمدل نتيجة رتطام إيحدث

العينة بسطح اإللكتروناتمتفاوت تشتت ومنها

لإللكترونات.

الم في فإن جأما الضوئي هريرجع الصورة تكوين

ال إل للضوء . إمتصاص ختياريغزا إلى يعود التباين أن ة رأى

الفوتونات من Photonsعددطولها حيث من المختلفة

Differentالموجي wavelengths الشعاع من

للمنظر المكون

القادر. عبد عمر د

اإللكتروني المجهر فكرة jإذا

القادر. عبد عمر د

Electron microscope divided into the following Basic components-:

1 -Illumination system.

2 -Imaging system.

3 -Specimen stage.

4 -Vacuum pump system.

5 -Image recording system.

Basic structure

القادر. عبد عمر د

1 -Illumination system.

1 -Cathode housing.

Electron gun

Cathode )filament(

Anode

2 -Electromagnet Alignment system

القادر. عبد عمر د

الشعاع مصدر أو اإلضاءة نظامتكوين عن المسؤول اإللكتروني

الصورة:أوال المهبط بيت من الذي Cathodeيتكون

) ويحتوي ) العمود الجهاز أعلى يوجدعلى:-

1 -االلكترونات التي Electron gunمدفعهالفتيل على Filamentتحتوي

المهبط على Cathodeوهي وهوحرف .Vشكل

/ سلك من عادة يصنع الفتيل المهبطااللكترونات تحرير بسهولة يمتاز معدني

تسخينه عند ( سلكها تسخين عند اللمبة مبدأ تذكر

الضوء ( تعطي التنجست بمعدن خاص حيث يوهذا ن

حرارة درجة يتحمل ( من أكثر إلى مئوية ( 3000تصل درجة قوة هو الحرارة بدرجة يتحكم والذي

. االستخدام عند فيه المار التيار مقدار البيولوجي المجال في jفمثال

المستخدمة يالفولت ة بين ( 40000 – 12000وحتى K.V 40ما

K.Vفولت( فيها يصل حديثة مجاهر وهناك

. فولت ) ( مليون حتى التيار شدة الفولت

القادر. عبد عمر د

2 -المصعد(wehneltyl cylinder )Anode وهي

مخروطية معدنية قطعةصغير ثقب بها الشكل

قطره مركزها 1mm )فيDia). يمر الثقب هذا خالل من

االلكتروني الشعاع جهد فرق تيار مرور عند

تسخن الفتيل في عاليفتحرر المهبط الفتيلة

ذات االلكترونات فتجذب السالبة الشحنة

الشحنة ذو المصعد نحوالمضادة

الشعاع مصدر أو اإلضاءة نظامالمس تكوين ئاإللكتروني عن ول

الصورة

القادر. عبد عمر د

-:jثانيا Electromagnetic Alignment system

الكهرومغناطيسي المجال هوفيها يحدث التيار فيها يمر عندما كهربائية ملفات من ويتكون

مغناطيسي مجالمن ويمنعه بالوسط يتمركز االلكتروني الشعاع يجعل

الوسط مسار عن االنحرافThe electron beam can be focused by passing

trough a magnetic field

القادر. عبد عمر د

Lenses-: الصورة تكوين نظام

العدسات :-

إلكترونية عدسات أربع من النفاذ االلكتروني المجهر يتكونالمكبرة الصورة تكوين على تعمل

: هي والعدسات

) .Objective lens ) O.L- العدسة المكثفة 1

) .Projector lens ) P.L- العدسة الشيئية 2

) .Intermediate lens ) I.L - العدسة المتوسطة 3

) .Condenser lens )C.L-العدسة العارضة 4

2 -Imaging system.

القادر. عبد عمر د

تصنع كل عدسة من معدن قابل للتمغنط وتتكون من:- - ملف كهربائي :1

وهو عبارة عن سلك ملفوف آالف المرات يشبه األنبوب ويمر فيه تيار كهربائي تصل قوته إلى واحد أمبير

و المجال المغناطيسي الناتج من مرور التيار الكهربائي يركز بواسطة محفظة حديدية ناعمة تحيط بهذه اللفات

بالقطع القطبية وهما: ويساعد في تركيز هذه الحزم االلكترونية قطع من الحديد تعرف - قطعتين إحداهما عليا يمكن تحريكها والسفلى مبرومة في علبة العدسة 2

ويعتمد البعد البؤري للعدسة االلكترونية على قوة التيار الكهربائي الذي يصل لهذه القطع

: يصل البعد البؤري للعدسات ويمكن أن نغير البعد البؤري بتغيير شدة التيار وغالبا (5mm-3) االلكترونية إلى عدة ملليمترات

القادر. عبد عمر د

العدسات مواقع تحديدووظائفها

1 -الفلوروسنتية الشاشة من القريبة العدسة على يطلق المجسمة العارضة projector lens العدسة. الضوئي المجهر في العينية العدسة تقابل التي وهي2 -المتوسطة العدسة Intermediate lensيليها3 -الشيئية العدسة Projector lensثم بالمجهر الشيئية وتشابه منها والقريبة للعينة المباشرة العدسة وهي

الضوئي / الشيئية بالعينية سميت ولذلك4 -المكثفة العدسة : Objective lensوأخيرا المهبط إلى شيء أقرب أي العمود في عدسة أعلى Cathodeوهي من صدورها حين االلكترونية الحزم بجمع العدسة هذه تقوم حيث

) المهبط ) الفتيل . معين ومسار معينة نقطة في االلكتروني الشعاع تكثف

القادر. عبد عمر د

يوجد حاجزان متحركان من البالتين يقعان بين العدسة الشيئية والعدسة المتوسطة ۞ (Aperture)ويعرف الحاجز بـ

ويوجد على هذا الحاجز ثالث فتحات أقطارها على الترتيب:-Aperture 1=25µm, Aperture 2=50µm & Aperture 3=100µm

يستخدم حاجز العدسة الشيئية )العلوي( إليقاف األشعة االلكترونية المائلة والتي تمر من۞خالل العدسة الشيئية، وبذلك يمنع التباين في الصورة النهائية

( contrast diaphragm)لذلك يطلق عليه بعض األحيان حاجز التباين

القادر. عبد عمر د

ويستخدم حاجز العدسة الوسطى )السفلي( إليقاف األشعة االلكترونية المبعثرة ۞ حافة العدسة الشيئية ويسمح باختيار بعض األشعة الالزمة لتوضيح الصورة

(selective diaphragm) ولذلك يطلق عليه الحاجز المنتخب . I.Lوهو يقع في مستوى الصورة المتوسطة األولى فوق العدسة المتوسطة

فحصه ۞ المراد الجسم بوضع تسمح بطريقة مصممة الشيئية والعدسةالقطبيتين قطعتيها بين التباين حاجز وكذلك

القادر. عبد عمر د

تعريف جهاز التكبير Magnification instrument

التكبير §داة Magnification instrumentجهاز ا عن عبارةوبالذات : جدا الصغيرة العينات وتوضيح تكبير على القدرة لها علميةالمجردة بالعين رؤيتها يستحيل التي العينات تلك

القادر. عبد عمر د

الماسح اإللكتروني المجهر

القادر. عبد عمر د

الماسح اإللكتروني المجهر للمجهر الخطيطي الرسم توضح الصورة

الماسح المجهر في الموجود ذلك العمود يشبة

النافذ ألشعة المنتجة المواد على يحتوي

لمسح والمستعملة فقط اإللكتروناتفحصها المراد العينة

في كما المدفعه في المواد هذة تتمثلالنافذ . المجهر

تعمل التي المكثفة العدسات وجود كذلكاإللكترونات من ضيقة حزمة تكوين على

المسح لبقعة الحقيقي القطر يصل 5nmحوالي

دائرة مع الحارفة الملفات من ومجموعةالعينة يمسح الشعاع جعل في تتسبب

أم تماما مفرغ الماسح المجهر عمودوإمالة أجهزة من وملحقاته العينة مسرح

من العمود قاعدة عند فتوجد العينةالمجهر .

القادر. عبد عمر د

Resolvingقدرة التبيين

من العادي الضوئي المجهر يتكونمن أطقم وثالثة اإلضاءة مصدر

العدسات . المكثفة Condenser) فالعدسة

lens) الضوء تجميع على تعملتكبير بينما المفحوص الشئ على

طريقة عن يكون المفحوص الشئالشيئية العدستين بين التكاتف

والعينية (Objective & eye Piece lens)

موضح . هو كماالنسبة بأنها عنها التكبيريعبر وقوة

الجسم وطول الصورة طول بينالمجاهر , تكبير ويتراوح المفحوص

مابين عادة x1500و x25بأنهاالنقاب كشف على المجهر وقدرةللجسم jجدا الدقيقة التفاصيل عنبقدرة تعرف التي هى المفحوص

مسافة , أصغر بأنها وتعرف التبيينأن يمكن متقاربين جسمين بين

بعضهما عن مفصولين تراهماالبعض .

القادر. عبد عمر د

Resolvingقدرة التبيين

العدسات انواع التحدها هذه التبيين وقدرةالذي . ولكن التكبير في jدورا تلعب التي

موجة طول هو فيها الرئيسي الدور يلعبوكذلك , لإلضاءة jمصدرا المستخدم الضوء

الشيئية . العدسة فتحة العددية القيمة

إستخدام هو المجهر تبيين قدرة ولزيادةقصير موجة طول ذو . ضوء

القادر. عبد عمر د

الماسح اإللكتروني المجهر

في تستخدم أنة المجاهر من النوع هذا هفيلتمسح اإللكترونات من ضيقة حزمة

لألمام تتحرك اإللكترونات أن أى العينةالعينة سطح ماسحة والخلف

تتسب العينة اإللكترونات بكذلك عكس فيويمكن ثانوية الكترونات عليها يطلق

الصورة إ إلنتاج ستخدامها

وتجاري واسع نطاق على الماسح المجهر أستخدم هذا وعلىاألبحاث 1965 عمل في بارز دور لة أصبح الوقت ذلك ومنذ م

الماسح . المجهر ويعتبر والصناعية والجيولوجية الحيويةالنافذ لعمل مكمل

القادر. عبد عمر د

الماسح المجهر في التبيين قدرة وتعتمدResolving Power

أشعة نقطة حجمتمسح التي اإللكترونات

العينة

المفحوصة العينة طبيعةتتداخل التي والطريقة

اإللكترونات أشعة فيها

المسح خطوط. سرعة وعددالمتكون الخيال

إلى تصل الماسح في التبيين قدرة بأن العموم وعلى10nm

القادر. عبد عمر د

القادر. عبد عمر د

Tissue Processing

التثبيتFixation العينات Washingغسيل الماء Dehydrationنزع الحرجة بالنقطة Critical Pointالتجفيف

drying التجفيف بعد ما عملياتProcessing Specimens after drying العينات الحوامل على Specimen stubs التحميل

القادر. عبد عمر د

Fixation التثبيت

مرحلتين على يكون األول Primary Fixationالمثبت

الج Buffered% 3-2الدهيد ولتربمحلولglutraaldhyd

لمد الغرفة حرارة درجة ليلة – 3-2عند أو ساعاتالثالجة في .كاملة

مادة تثبيت في مهم في glycogen & proteinوهووالخاليا النسيج

القادر. عبد عمر د

Fixation التثبيت

الثانوي Secondary Fixationالمثبت

األوزميوم حمض Buffered Osmic acid% 1باستخدام

Osmium tetroxid –OsO4

الغرفة حرارة درجة عندفي مهم وهو

الدهنية- 1 المادة والخاليا Lipidتثبيت النسيج فيالكيمياء- 2 وعينات اإللكتروني المجهر لعينات أولية كصبغة

النسيجية الحزم- 3 وشعاع العينة بين الكهربائي التوصيل عملية من يزيد

زيادة بسبب التباين زيادة إلى يؤدي وذلك اإللكترونيةالكهربائي التوصيل

القادر. عبد عمر د

العامة : التثبيت أهمية

. والتفسخ التفتت من العينة على الحفاظ بفعل الذاتي التحلل من العينة على الحفاظ

والبكتيريا . اإلنزيمات وتحويل والقسوة الصالبة من شئ العينة إعطاء

صلب . إلى السائل النسيج محتوى . االنكماش عيوب من النسيج حماية . والكحول المثبتات بين كوسيط يعمل . مصدرة في وحالته طبيعتة على النسيج بقاء

القادر. عبد عمر د

التثبيت على تؤثر هامة عوامل

العينة أخذ قبل األولي المثبت تركيز ) ( صغيرة تكون العينة حجم مصدرها من العينة نقل سرعة العينة حجم مع تتناسب أن يجب التثبيت مدة التثبيت كمية – – – – ( لون بدون ال أم متأكسد قديم جديد المثبت جودة

أسود – ( أصفر المنظم المحلول نوع الحموضة درجة اإلسموزية

القادر. عبد عمر د

العينات Washingغسيل

بعد خاصة هام أمر وبعدها المثبتات بين العينة غسيلالثاني لفترة , O.Aالمثبت آثاره أو بقائه حيث

النسيج على يؤثر طويلةتليها التي المادة مع المثبت مكونات تتغلغل قد وكذلكالنسيج مكونات في تغيرات التفاعل هذا عن فينتج

والخلية .: التالية الطرق بأحد الغسيل إلى نحتاج لذلك

القادر. عبد عمر د

dehydrationالتجفيف

العينة من الماء نزع عملية الماء جزيئات من التخلص عملية النسيج H2Oهي من

انواع احد بواسطة وذلك والنباتية الحيوانية والخاليانول واإليثا نول الميثا فقط الكحوالت

األقل من بالتركيز التدرج بشرط االسيتون مادة بواسطة أوىلألعل

ذات للمادة الالحقة للخطوة النسيج تقبل اجل من مهم وهذاالمتصلبة العالية الكثافة

لمادة العينة تعرض وقت زاد كلما التالي الجدول وحسبالصالبة زادت كلما الماء نزع

االنكماش سلبية زادت كلما الماء نزع مدة قلت وكلما

القادر. عبد عمر د

الكحول تركيزالمستخدم

المرات الفترة عدد حلول

30% ETHANOL2X10 MIN

50% ETHANOL2X10 MIN

70% ETHANOL2X10 MIN

90% ETHANOL2X10 MIN

95% ETHANOL2X10 MIN

100% ETHANOL3X10 MIN

القادر. عبد عمر د

الماء نزع لعملية هامة عوامل

من 1. والبداية للكحوالت العينة تعريض الخفيف % 30التدرجمن نبدأ النباتات عينات بعض في بل الحيوانية % 5للعينة

لها% 100وحتى% 10ثم السيتوبالزم مكونات ان حيثقد التدرج عدم وكذلك الخلية خدران عن لالنفصال القابلية

للخلية والتشوه اإلنكماش الى يؤديبالترتيب- 2. االلتزام التتابعالماء 3. مع تحضيره يتم الذي الكحوالت احد على االستقرار

المقطر.4) العينة ) نوع علي تعتمد والفترة الوقت

← وقت أقل الخاليا. ) - - وقت ) اكثر قاسية طرية كبيرة االنسجة

القادر. عبد عمر د

اإلحت بعض بالمجهر يهناك العينات تحضير عند أخذه الواجب اطاتاإللكتروني

العينة حجمكبيرة تكون ال أن

التثبيت في أطول زمنالسوائل نزع صعوبة

العينة تنظيفالمحاليل في بغمرها وذلك

مناسبة التثبيتفسيولوجيةمباشرة التثبيت تتم أن البد

تنظيفها بعد

القادر. عبد عمر د

مجموعة من المسطبة الخاصة بحمل العينات النعدة للفحص بالمجهر اإللكتروني الماسح

القادر. عبد عمر د

القادر. عبد عمر د

القادر. عبد عمر د

القادر. عبد عمر د

القادر. عبد عمر د