crecimiento_gus2

CRECIMIENTOCRECIMIENTO

Aumento del número de Aumento del número de célulascélulas

CrecimientoCrecimiento: Es un incremento ordenado : Es un incremento ordenado de todos los constituyentes y estructura de todos los constituyentes y estructura celular. celular.

En muchos microorganismos, este En muchos microorganismos, este incremento continúa hasta que la célula se incremento continúa hasta que la célula se divide en dos nuevas células: divide en dos nuevas células:

Fisión binaria Fisión binaria CRECIMIENTO= INCREMENTO EN EL

NÚMERO DE CÉLULAS

CrecimientoCrecimiento

CRECIMIENTO MICROBIANO

•=> CRECIMIENTO CELULAR Y FISIÓN BINARIA

CRECIMIENTO= INCREMENTO EN EL NÚMERO DE CÉLULAS

FISIÓN BINARIA = DIVISIÓN DE UNA CÉLULA EN DOS CUANDO ALCANZA UN TAMAÑO DETERMINADO

FISIÓN BINARIAFISIÓN BINARIA

Requerimientos del crecimiento microbiano

Nutrientes

Condiciones físicasde cultivo

temperaturapHluzaireaciónactividad de agua

potencial redox

agua

fuente de energía-carbono

macronutrientesmicronutrientes,

factores de crecimiento

Según la composición • definidos o sintéticos: composición química conocida

• no definidos o complejos: composición química no definida, enriquecidos con peptonas, extracto de carne, de levadura, sangre

Según la naturaleza física

líquidos

sólidos - solidificante: agar-agar, sílico-gel

semi-sólidos

Medios de cultivo

MEDIOS LÍQUIDOS Y SÓLIDOSMEDIOS LÍQUIDOS Y SÓLIDOS

CRECIMIENTO POBLACIONAL

PARÁMETROS DEL CRECIMIENTO:

TASA DE CRECIMIENTO: CAMBIO EN EL NÚMERO CELULAR O EN BIOMASA POR UNIDAD DE TIEMPO

GENERACIÓN: INTERVALO PARA LA FORMACIÓN DE DOS CÉLULAS A PARTIR DE UNA

TIEMPO DE GENERACIÓN O DE DUPLICACIÓN: TIEMPO REQUERIDO PARA QUE UNA POBLACIÓN SE DUPLIQUE.

FASEEXPONENCIAL

PODEMOS CALCULAR EL TIEMPO DE GENERACIONES GRÁFICAMENTE…


MEDIDA:MEDIDA: Se mide por cambios sucesivos en el número de Se mide por cambios sucesivos en el número de

células o por el peso de la masa de las células. células o por el peso de la masa de las células. A) Recuento de células A) Recuento de células a) Conteo de células al microscopio a) Conteo de células al microscopio

Se emplea un dispositivo graduado con 25 cuadrados Se emplea un dispositivo graduado con 25 cuadrados cuyo volumen y área es conocido. Ej: Cámara de Petroff-cuyo volumen y área es conocido. Ej: Cámara de Petroff-Hausser, cámara de Neubauer, hemocitómetro Hausser, cámara de Neubauer, hemocitómetro

Limitaciones:Limitaciones: - Es muy tedioso, no es práctico para un gran número de - Es muy tedioso, no es práctico para un gran número de

muestras muestras - No es muy sensible, se necesitan al menos 106 b/ml para - No es muy sensible, se necesitan al menos 106 b/ml para

que sean observadas al microscopio que sean observadas al microscopio - No distinguen células vivas de muertas - No distinguen células vivas de muertas

RECUENTO DE BACTERIASRECUENTO DE BACTERIAS


b) Conteo de células viables b) Conteo de células viables Viable : es aquélla que es capaz de Viable : es aquélla que es capaz de

dividirse y formar una colonia en el medio dividirse y formar una colonia en el medio de cultivo. de cultivo.

Conteo en placasConteo en placas Diseminación en placa, siembra en placa Diseminación en placa, siembra en placa

por extensión o vaciado de por extensión o vaciado de placa. . El número de colonias casi siempre es el El número de colonias casi siempre es el

número de células viables en la muestra. número de células viables en la muestra.

CrecimientoCrecimientoConteo en placas

MEDIO SÓLIDO:MEDIO SÓLIDO:PLACA DE PETRIPLACA DE PETRI

volver

RECUENTO RECUENTO DE DE

BACTERIAS BACTERIAS VIABLESVIABLES

RECUENTO DE LA CANTIDAD RECUENTO DE LA CANTIDAD DE DE BACTERIAS VIABLESBACTERIAS VIABLES en en

placa (UFC)placa (UFC)

((UFC:UFC: unidades unidades formadoras de formadoras de colonias)colonias)


C) Medida de la masa celular C) Medida de la masa celular Cuando interesa el peso de las células más Cuando interesa el peso de las células más que el número. que el número.

a) Peso seco.- a) Peso seco.- Se determina el peso seco o peso húmedo de una Se determina el peso seco o peso húmedo de una

alícuota de la población separada por alícuota de la población separada por centrifugación. El peso seco es por lo general el 20-centrifugación. El peso seco es por lo general el 20-25 % del peso húmedo 25 % del peso húmedo

b) Turbidimetría b) Turbidimetría A través de un colorímetro o espectrofotómetro A través de un colorímetro o espectrofotómetro

midiendo la turbidez en unidades de absorbancia. midiendo la turbidez en unidades de absorbancia. Debe prepararse curva estándar para cada Debe prepararse curva estándar para cada organismo estudiado. organismo estudiado.

RECUENTO DE LA CANTIDAD DE RECUENTO DE LA CANTIDAD DE BACTERIAS POR BACTERIAS POR TURBIDIMETRÍATURBIDIMETRÍA

(Vivas y muertas)(Vivas y muertas)

CLASIFICACIÓN DE LOS CLASIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS DE MICROORGANISMOS DE

ACUERDO A LOS ACUERDO A LOS REQUERIMIENTOS PARA EL REQUERIMIENTOS PARA EL

CRECIMIENTOCRECIMIENTO

Clasificación nutricionalClasificación nutricional

QuiQui LuzLuz OrgOrg InorInor OrgOrg InorInor

Quimiorganoheterotrofos

Quimiolitoautotrofos

Fotolitoautotrofos

Fotoorganoheterotrofos

Fuente de E Fuente de C Electrones

Requerimientos del crecimiento microbiano

Nutrientes

Condiciones físicasde cultivo

temperaturapHluzaireaciónactividad de agua

potencial redox

agua

fuente de energía-carbono

macronutrientesmicronutrientes,

factores de crecimiento

Nutrientes1- Fuente de energía luz

química2- Macronutrientes

C KO MgH NaN 95% CaS FeP

3- Micronutrientes (elementos traza)Co, Zn, Mo, Cu, Mn, Ni, Se, W

4- Factores de crecimiento•Vitaminas•Purinas y pirimidinas•Aminoácidos

Forma química

ElementoEn la naturalezaEn medios de cultivo

Carbono CO2, comp orgánicosGlucosa, malato, acetatocompuestos orgánicosextracto de levadura, peptona

Fósforo KH2PO4, Na2HPO4PO43+

Hidrógeno H2O, comp orgánicosH2O, comp orgánicos

Oxígneo H2O, O2, comp orgánicosH2O, O2, comp orgánicos

Nitrógeno NH4Cl, (NH3)2SO4, KNO3, N2, aa, purinas y pirimidinas, etc

NH3, NO3-, N2,

comp orgánicos

Azufre Na2SO4, Na2S2O3, comp orgánicos

SO44+, H2S, FeS,

comp orgánicos

Macronutrientes

Factores de crecimientoFactores de crecimiento Protótrofos : MO que sintetizan sus propios Protótrofos : MO que sintetizan sus propios

factores de crecimiento o nutrientefactores de crecimiento o nutriente1.1. sintetizan vitaminas, amino ácidos, sintetizan vitaminas, amino ácidos,

nucleótidos, lípidosnucleótidos, lípidos2.2. crecen en un medio mínimo compuesto de crecen en un medio mínimo compuesto de

sales inorgánicas (MgSO4, NH4Cl, K2HPO4 , sales inorgánicas (MgSO4, NH4Cl, K2HPO4 , FeCl3, CaCl2) con fuente de carbono orgánica FeCl3, CaCl2) con fuente de carbono orgánica

Auxótrofos: Requieren proveer en el medio Auxótrofos: Requieren proveer en el medio algún factor de crecimiento o nutrientealgún factor de crecimiento o nutriente

• purinas y pirimidinas ADN, ARNpurinas y pirimidinas ADN, ARN• aminoácidos esenciales síntesis aminoácidos esenciales síntesis

proteicaproteica• vitaminas coenzimasvitaminas coenzimas• Algunos son muy exigentes, lo cual significa que Algunos son muy exigentes, lo cual significa que

necesitan muchos factores.necesitan muchos factores.

TEMPERATURATEMPERATURA

Tipo de microorganis

mo

Temperatura

mínima

Temperatura

óptima

Temperatura

máxima

Mesófilo 5 - 15 30 - 45 35 – 47

Psicrófilo -5 + 5 12 - 15 15 – 20

Psicrótrofo

-5 + 5 25 - 30 30 – 35

Termófilo 40 - 45 55 - 75 60 - 90

CONCENTRACIÓN DE SALESCONCENTRACIÓN DE SALES

COMPORTAMIENTO FRENTE AL COMPORTAMIENTO FRENTE AL OO22

AEROBIOS ESTRICTOSAEROBIOS ESTRICTOS ANAEROBIOS ANAEROBIOS

ESTRICTOSESTRICTOS AEROBIOS/AEROBIOS/

ANAEROBIOS ANAEROBIOS FACULTATIVOSFACULTATIVOS

AEROBIOS AEROBIOS MICROAERÓFILOSMICROAERÓFILOS

ANAEROBIOS ANAEROBIOS AEROTOLERANTESAEROTOLERANTES

Formas tóxicas del oxígeno

[O2-] [O2

-]+ +2 H+superóxido

dismutasaO2 + H2O2

2 H2O

H++NADH NAD+

peroxidasa

catalasa H2O2

O22 H2O+

• H2O2 (peróxido), O2- (superóxido), OH.

(radical hidroxilo)• Se producen fotoquímica y durante la respiración

• Capa más externa de electrones son altamente reactivos.

• Oxidan macromoléculas y demás componentes orgánicos

• Enzimas que destruyen las forma tóxicas del oxígeno:

AEROBIOS ESTRICTOSAEROBIOS ESTRICTOS

CRECIMIENTO EN PRESENCIA DE O2CRECIMIENTO EN PRESENCIA DE O2 NO FERMENTA NI RESPIRA NO FERMENTA NI RESPIRA

ANAEROBIAMENTEANAEROBIAMENTE CADENA DE TRANPORTE DE CADENA DE TRANPORTE DE

ELECTRONES Y FOSFORILACIÓN ELECTRONES Y FOSFORILACIÓN OXIDATIVAOXIDATIVA

MICROAERÓFILOSMICROAERÓFILOS

NO SOPORTAN UNA PRESIÓN PARCIAL DE NO SOPORTAN UNA PRESIÓN PARCIAL DE O2 MAYOR DE 10 O DE 12 %O2 MAYOR DE 10 O DE 12 %

RESPIRACIÓN CELULARRESPIRACIÓN CELULAR

ANAEROBIOS FACULTATIVOSANAEROBIOS FACULTATIVOS

FERMENTACIÓN OFERMENTACIÓN O RESPIRACIÓN AERÓBICA (CADENA RESPIRACIÓN AERÓBICA (CADENA

DE TRANPORTE DE ELECTRONES)DE TRANPORTE DE ELECTRONES) CRECEN EN AUSENCIA O CRECEN EN AUSENCIA O

PRESENCIA DE O2PRESENCIA DE O2

ANAEROBIOS ESTRICTOSANAEROBIOS ESTRICTOS

NO VIVEN EN PRESENCIA DE O2NO VIVEN EN PRESENCIA DE O2Fermentación o respiración Fermentación o respiración

anaeróbicaanaeróbicaAusencia de fosforilación oxidativaAusencia de fosforilación oxidativaAusencia de determinadas

enzimas•superoxido dismutasa, catalasa, peroxidasa

ANAEROBIOS ANAEROBIOS AEROTOLERANTESAEROTOLERANTES

• METABOLISMO ANAERÓBICOMETABOLISMO ANAERÓBICO• NO SON AFECTADAS POR EL O2NO SON AFECTADAS POR EL O2

MEDIOS DE CULTIVO SOLIDOS: MEDIOS DE CULTIVO SOLIDOS: AISLAMIENTOSAISLAMIENTOS

selectivos o inhibitorios: contienen sustancias que inhiben el desarrollo de algunos microorganismos permitiendo el crecimiento de otros o cuya composición permite el desarrollo de un grupo determinado

antibióticos; agua, sales, luz, para algas, alta concentración NaCl

diferenciales: contienen indicadores para diferenciar los distintos tipos de microorganismos que puedan crecer en él.

Ej. azúcar fermentecible: lactosa, indicador:rojo neutro

Medios de cultivo

MEDIOS SELECTIVOSMEDIOS SELECTIVOS

MEDIOS DIFERENCIALESMEDIOS DIFERENCIALES

MEDIOS DEFINIDOS Y MEDIOS DEFINIDOS Y NO DEFINIDOSNO DEFINIDOS

INHIBICIÓN DEL CRECIMIENTOINHIBICIÓN DEL CRECIMIENTO

crecimiento_gus2

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