鶏肉からのサルモネラ属菌、大腸菌、 腸球菌の分離と薬剤耐性状 … ·...

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鶏肉からのサルモネラ属菌、大腸菌、 腸球菌の分離と薬剤耐性状況(2) 森哲也 1) ,岡村奈保子 1) ,岸野かなえ 1) ,○和田真太郎 1) 鄒碧珍 1) ,難波豊彦 1) ,伊藤武 1) 1) 一般財団法人東京顕微鏡院 食と環境の科学センター 研究報告会 平成28年8月25日

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鶏肉からのサルモネラ属菌、大腸菌、 腸球菌の分離と薬剤耐性状況(2)

森哲也1),岡村奈保子1) ,岸野かなえ1) ,○和田真太郎1) ,

鄒碧珍1) ,難波豊彦1) ,伊藤武1)

1) 一般財団法人東京顕微鏡院

食と環境の科学センター 研究報告会 平成28年8月25日

抗菌性物質の家畜等への使用により選択される薬

剤耐性菌の人の治療への影響が懸念され, 食品安全委

員会において薬剤耐性菌のリスク評価が実施されて

いる。我々はこれまで日本食品微生物学会学術総会

において牛肝臓,豚肝臓, 鶏肉中のカンピロバクター

汚染と薬剤耐性状況について報告した。

本研究では, 市販鶏肉および食鳥処理場で採取した

鶏肉から分離されたサルモネラ属菌, 大腸菌, 腸球菌

の薬剤耐性状況について検討した。

目 的

方 法/供試菌株

市販鶏肉 食鳥処理場鶏肉

Salmonella Infantis (SI) 113 18

S. Schwarzengrund (SS) 63 49

Escherichia coli (EC) 106 60

Enterococcus faecalis 87 33

Enterococcus faecium 77 25

表1 供試菌株一覧

サルモネラ属菌;上位2血清型を選択 腸球菌;E. faecalisとE. faeciumが半々となるよう選択

薬剤感受性試験;微量液体希釈培養法 サルモネラ属菌と大腸菌(12薬剤)

方 法/薬剤感受性試験①

供試薬剤 略号 濃度範囲(μg/ml) ブレイクポイント

Ampicillin ABPC 1-128 32

Cefazolin CEZ 1-128 32

Cefotaxime CTX 0.5-64 4

Streptomycin SM 0.5-64 32

Gentamicin GM 0.5-64 16

Kanamycin KM 1-128 64

Tetracycline TC 0.5-64 16

Chloramphenicol CP 1-128 32

Colistin CL 0.12-16 16

Nalidixic Acid NA 1-128 32

Ciprofloxacin CPFX 0.03-4 4

Trimethoprim-Sulfamethoxazole ST 2.38/0.12-152/8 76/4

腸球菌(13薬剤)

方 法/薬剤感受性試験②

供試薬剤 略号 濃度範囲(μg/ml) ブレイクポイント

Ampicillin ABPC 0.12-128 16

Dihydrostreptomycin DSM 0.25-512 128

Gentamicin GM 0.12-256 32

Kanamycin KM 0.25-512 128

Oxytetracycline OTC 0.12-64 16

Chloramphenicol CP 0.25-512 32

Bacitracin BC 0.25-512 -

Erythromycin EM 0.12-128 8

Lincomycin LCM 0.12-256 128

Enrofloxacin ERFX 0.12-64 4

Tylosin TS 0.12-256 64

Salinomycin SNM 0.12-32 -

Virginiamycin VGM 0.12-128 -

結 果/市販鶏肉の薬剤耐性率①

ABPC CEZ CTX SM GM KM

SI*1 9.7 8.0 5.3 54.0 0 31.9

SS*2 3.2 0 0 84.1 3.2 84.1

EC*3 36.8 3.8 1.9 32.1 2.8 27.4

*1 S. Infantis; 113株,*2 S. Schwarzengrund; 63株,*3 E. coli; 106株

表2 市販鶏肉由来サルモネラ属菌・大腸菌の 薬剤耐性率(%)

TC CP CL NA CPFX ST

SI*1 83.2 0 0 11.5 0 1.8

SS*2 90.5 1.6 0 4.8 0 58.7

EC*3 42.5 11.3 0 31.1 13.2 29.2

結 果/市販鶏肉の薬剤耐性率②

ABPC DSM GM KM OTC CP

E. faecalis 0 31.0 3.4 28.7 52.9 14.9

E. faecium 5.2 26.0 1.3 68.8 45.5 6.5

表3 市販鶏肉由来腸球菌の薬剤耐性率(%)

BC EM LCM ERFX TS SNM VGM

E. faecalis - 36.8 37.9 0 36.8 - -

E. faecium - 49.4 31.2 51.9 29.9 - -

E. faecalis; 87株,E. faecium; 77株

結 果/市販鶏肉の薬剤耐性パターン

表4 市販鶏肉由来サルモネラ属菌・大腸菌・腸球菌 の主な薬剤耐性パターン SI (113株); SM/TC (29株), TC (24株), SM/KM/TC (17株)

SS (63株); SM/KM/TC/ST (27株), SM/KM/TC (12株)

EC (106株);感受性 (38株)

TC (5株), NA (4株)

ABPC/SM/KM/TC/CP/ST (4株) E.faecalis (87株);感受性 (33株)

OTC (14株), DSM/KM/OTC/EM/LCM/TS (7株)

E. faecium (77株); KM/EM (9株), KM/OTC (7株), ERFX (7株)

結 果/食鳥処理場鶏肉の薬剤耐性率①

ABPC CEZ CTX SM GM KM

SI*1 27.8 11.1 5.6 50.0 0 44.4

SS*2 0 0 0 67.3 0 79.6

EC*3 58.3 3.3 0 41.7 6.7 36.7

*1 S. Infantis; 18株,*2 S. Schwarzengrund; 49株,*3 E. coli; 60株

表5 食鳥処理場鶏肉由来サルモネラ属菌・大腸菌の 薬剤耐性率(%)

TC CP CL NA CPFX ST

SI*1 66.7 0 0 5.6 0 5.6

SS*2 75.5 0 0 6.1 0 40.8

EC*3 73.3 15.0 0 41.7 6.7 33.3

結 果/食鳥処理場鶏肉の薬剤耐性率②

ABPC DSM GM KM OTC CP

E. faecalis 0 60.6 12.1 51.5 66.7 15.2

E. faecium 8.0 24.0 8.0 84.0 76.0 8.0

表6 食鳥処理場鶏肉由来腸球菌の薬剤耐性率(%)

BC EM LCM ERFX TS SNM VGM

E. faecalis - 48.5 48.5 0 48.5 - -

E. faecium - 36.0 44.0 64.0 20.0 - -

E. faecalis; 33株,E. faecium; 25株

結 果/食鳥処理場鶏肉の薬剤耐性パターン

表7 食鳥処理場鶏肉由来サルモネラ属菌・大腸菌・ 腸球菌の主な薬剤耐性パターン SI (18株);感受性 (5株)

SM/TC (3株), SM/KM/TC (3株)

SS (49株); SM/KM/TC/ST (16株), KM (10株), SM/TC (8株)

EC (60株);感受性 (7株)

TC (4株), ABPC/TC/CP (4株)

E.faecalis (33株);感受性 (7株)

DSM/KM/OTC (5株), DSM/KM/OTC/CP/EM/LCM/TS (4株)

E. faecium (25株); KM/OTC (3株), KM/OTC/LCM/ERFX (3株)

KM/OTC/EM/LCM/ERFX/TC (3株)

結 果/鶏肉と盲腸便由来株の比較

ABPC CEZ CTX SM GM KM

Salmonella属菌

鶏肉*1 7.4 4.5 2.9 64.2 0.8 60.0

盲腸便*2 22.9 5.9 5.1 84.7 0 42.4

大腸菌

鶏肉* 44.6 3.6 1.2 35.5 4.2 30.7

盲腸便 35.5 7.8 4.8 38.6 1.8 24.1

*1 243株; 市販鶏肉及び食鳥処理場鶏肉由来S. InfantisとS. Schwarzengrund *2 118株; と畜場及び食鳥処理場における家畜由来細菌の薬剤耐性モニタリング結果(H25年度農水省) *3 166株; 市販鶏肉及び食鳥処理場鶏肉由来 *4 166株; と畜場及び食鳥処理場における家畜由来細菌の薬剤耐性モニタリング結果(H25年度農水省)

表8 サルモネラ属菌・大腸菌の薬剤耐性率(%)

TC CP CL NA CPFX ST

Salmonella属菌

鶏肉*1 82.3 0.4 0 8.2 0 24.7

盲腸便*2 82.2 0.8 0 19.5 0 48.3

大腸菌

鶏肉 53.6 12.7 0 34.9 10.8 30.7

盲腸便 44.0 11.4 0.6 36.1 5.4 31.9

結 果/鶏肉と盲腸便由来株の比較

ABPC DSM GM KM OTC CP

腸球菌

鶏肉*1 2.7 32.9 4.5 52.3 55.0 11.3

盲腸便*2 1.6 31.9 3.7 41.0 61.7 9.6

*1 222株; 市販鶏肉及び食鳥処理場鶏肉由来E. faecalisとE. faecium) *2 188株; 家畜由来細菌の抗菌性物質感受性実態調査結果(H26年度農水省)

表9 腸球菌の薬剤耐性率(%)

BC EM LCM ERFX TS SNM VGM

腸球菌

鶏肉*1 - 42.8 37.8 25.2 34.2 - -

盲腸便*2 - 28.2 29.8 41.0 23.9 - -

まとめ

本研究では,鶏肉から分離されたサルモネラ属菌,

大腸菌, 腸球菌の薬剤耐性状況について検討した。

サルモネラ属菌;TC,SMやKMの耐性率が高い

大腸菌;TCの耐性率が高い

腸球菌;OTCやKMの耐性率が高い

健康家畜糞便を対象として実施されている農林水産

省の調査結果と同様の傾向であった。なおCL耐性の

サルモネラ属菌や大腸菌は認められなかった。

謝辞;本事業は, 平成27年度内閣府食品安全委員会

事務局の食品安全確保総合調査事業で実施された。