Introduccin a la Microbiologa

IES Al-ndalusBiologa 2 de Bachillerato.Curso 2008-09

Esther Maguilla RosadoMriam Prado Lobato

M Carmen Amodeo ArahalLaura Ortiz Min

Mara Lpez Pedregal

Resumen

Los microorganismos forman un amplio grupo de seres vivos fundamentales para la

vida que conviven con nosotros aunque no nos percatemos de ello, debido a su pequeo

tamao.

Esta es una de las razones por las que hemos decidido realizar este trabajo.

Nuestro objetivo principal era familiarizarnos con el material y las tcnicas empleados

en el laboratorio, adems de introducirnos en el mundo de la microbiologa.

Los procedimientos que hemos seguido durante el desarrollo de nuestro trabajo han

consistido en una bsqueda de informacin previa y una serie de prcticas de

laboratorio que incluan la siembra de microorganismos, un seguimiento de su

crecimiento, preparaciones y observaciones en el microscopio.

Finalmente, podemos decir que el trabajo nos ha aportado adems un aprendizaje de

forma prctica y una mayor capacidad para trabajar en grupo.

Summary

Microorganisms form a large group of living beings fundamental for life which live

with us although we dont realize because of their little size.

This is the reason why we have decided to make this work.

Our principal objetive was to get familiar with the equipments and techniques employed

in a laboratory, appart from getting immersed in the microbiology world.

The technics we have followed during the development of our work have consisted on a

reseach o previous information and severals laboratory practices which included the

carring out of sowing of microorganisms monitoring their growth, preparations and

observations in the microscope.

Finally, we would like to say that this work has provided us whit a practical learning as

well as a huge abilily to work in group.

PALABRAS CLAVE

(1)

Agar: Polisacrido proveniente de algas rojas que posee la

caracterstica de no ser digerido por las bacterias (generalmente). Es

utilizado para preparar medios de cultivo slido, entre otras cosas.

(2)

Alga: un grupo de organismos eucariotas auttrofos pertenecientes al reino de los

protoctistas con capacidad para realizar la fotosntesis.

(3)

Archaea: conjunto de organismos unicelulares procariotas parecidos a las bacterias pero

diferentes gentica y bioqumicamente.

(4)

Asa de siembra: material de laboratorio que se

utiliza para el transporte de microorganismos de un

medio a otro. Consta de un mango y de un filamento,

el cual originalmente era de platino, pero ha sido

sustituido por materiales ms baratos como puede ser

el acero. Este filamento termina en forma de aro,

mediante el cual se extrae la muestra de

microorganismos necesaria para cualquier

preparacin.

Existen varios tipos de asa de siembra: de plstico,

metlicas

(5)

Autoclave: es una forma de esterilizar los materiales empleando vapor de agua, creando

una alta presin y temperatura elevada en un recipiente cerrado durante unos 15- 20 minutos.

(6)

Bacilo: tipo de bacteria de forma cilndrica.

(7)

Bacterias: microorganismos unicelulares de tamao microscpico que carecen de

membrana nuclear y por lo tanto su ncleo no se encuentra diferenciado.

(8)

Balanza: instrumento utilizado para pesar determinadas cantidades de sustancias. Formado

por unas pesas y un platillo donde se coloca la sustancia a pesar.

(9)

Bombona: envase cerrado que contiene gases a presin.

(10)

Coco: tipo de bacteria de forma esfrica.

(11)

Cubre: relacionado con el porta, es un utensilio de forma

cuadrada que se coloca sobre la preparacin realizada en el porta

para fijar la preparacin y poder verla a microscopio.

(12)

Cuerpo fructfero: estructura reproductora que produce el hongo sobre el sustrato, cuya

funcin es dispersar las esporas que contiene.

(13)

Diplococos : Cocos asociados en parejas

(14)

Enterobacterias: bacterias aerbicas.

(15)

Erlenmeyer: recipiente de cristal de forma cnica (con una base

ancha y una boquilla estrecha). Los hay de diferentes capacidades y

todos ellos contienen marcas para indicar aproximadamente el

volumen del contenido.

(16)

Espirilo: tipo de bacteria con forma espiral.

(17)

Esporas: clulas producidas por el hongo que se dispersan con el viento y el agua

generalmente.

(18)Esterilizacin: proceso mediante el cual se eliminan todos los posibles microorganismos

presentes en los materiales que se vayan a utilizar.

(19)

Gemacin: "divisin desigual consistente en la formacin de prominencias o yemas sobre

el individuo progenitor, que al crecer y desarrollarse originan nuevos seres que pueden

separarse del organismo parental o quedar unidos a l, iniciando as una colonia".

(20)

Gradilla: material que se utiliza para almacenar los

tubos de ensayo.

(21)

Hifa: filamentos que forman los hongos.

(22)

Himenforo: lugar del hongo en el cual nacen las esporas.

(23)

Hongos: microorganismos eucariticas que pueden ser tanto unicelulares como

pluricelulares, cuyas clulas se asocian formando cuerpos filamentosos llamados hifas.

(24)

Levadura: las levaduras son hongos unicelulares microscpicos y filamentosos, que

pueden aparecer aislados o unidos unos a otros formando pequeas cadenas o filamentos.

(25)

Lquenes (liquen): asociacin simbitica de un hongo y una alga microscpicos. El hongo

proporciona humedad a la alga y sta el alimento al hongo.

(26)Lupa binocular: instrumento utilizado para observar seres

microscpicos dndonos una sensacin de relieve.

(27)Medio en tubo inclinado: Se trata de un medio de cultivo

slido de forma inclinada. Para ello, se aade al tubo una

cierta cantidad de la disolucin preparada (caldo al que se

aade la cantidad suficiente de agar-agar, para que solidifique)

y se coloca de forma inclinada (apoyado sobre un soporte)

para que al solidificarse obtengamos un medio inclinado. Este

tipo de medio puede ser utilizado bien como medio selectivo,

para sembrar nuevos medios o como medio diferencial para

identificar a los tipos de bacterias.

(28)

Micelio: conjunto de hifas.

(29)

Micologa: Ciencia que se encarga de estudiar los hongos.

(30)

Microorganismos: organismos microscpicos procariotas o eucariotas, entre los que se

encuentran virus, bacterias, algas, hongos

(31)

Microscopio: instrumento ptico que contiene lentes y se utiliza para

observar sustancias microscpicas.

(32)

Organismo: llamamos organismo a cualquier ser capaz de reproducirse y de transferir su

material gentico.

(33)

Pipeta: material de laboratorio utilizado para medir

determinadas cantidades lquidas. Consiste en un tubo de

vidrio que posee ambos extremos abiertos.

(34)

Placas de Petri: recipiente de cristal de forma circular

que contiene dos partes de diferentes dimetros para que

puedan encajar.

(35)

Porta: utensilio de vidrio que posee forma

rectangular, en el cual se realizan preparaciones para

ver en el microscopio.

(36)

Tincin de Gram: Tcnica que se utiliza para diferenciar a las bacterias gram positivas de

las gram negativas, segn el color que adquieran.

(37)

Tubos de ensayo: tubos de cristal que poseen un extremo cerrado de forma

redondeada y un extremo abierto. Su contenido generalmente es lquido.

(38)

Unidad formadora de colonia (UFC): Clula bacteriana viva y aislada que en las

condiciones adecuadas da lugar a la produccin de una colonia de bacterias

(39)

Vaso de precipitado: recipiente de forma cilndrica graduados que se utilizan para

contener lquidos.

(40)

Vibrio: tipo de bacteria curva y mvil.

(41)

Vidrio de reloj: es un vidrio de forma cncava que se utiliza

para depositar en l el material que posteriormente se vaya a pesar.

ITRODUCCI 1.- Introduccin a la microbiologa La microbiologa es la rama de la biologa que se encarga del estudio de los microorganismos(30). Los microorganismos son un grupo de organismos microscpicos que pueden ser clulas aisladas o agrupaciones celulares. Tambin se encarga del estudio de organismos(32) microscpicos pero acelulares como virus, viroides y priones. Algunos de estos organismos son los causantes de enfermedades de seres humanos, animales y plantas, son las llamadas enfermedades infecciosas. La microbiologa estudia estos organismos microscpicos y su funcionamiento. Adems investiga el origen y evolucin de estos microorganismos. Tiene un papel fundamental ya que se ocupa de muchos problemas prcticos relacionados con la medicina, la agricultura e industria.

2.- Orgenes de la microbiologa La microbiologa surgi a finales del siglo XIX como una ciencia experimental con el objetivo de resolver los dos grandes problemas cientficos de la poca: contradecir la teora de la generacin espontnea, y establecer el carcter infeccioso de algunas enfermedades causadas por microbios. El desarrollo de la microbiologa est relacionado con el desarrollo del microscopio(31). Anton Van Leeuwenhoek fue el primero que observ bacterias al microscopio. Van Leeuwenhoek naci en Holanda en octubre de 1632. Se dedicaba al comercio de telas y careca completamente de formacin cientfica, sin embargo, su curiosidad le llev a aprender por s mismo leyendo libros y artculos de toda clase de ciencias. Para poder observar mejor la calidad de sus telas, fabric lupas que haca el mismo, ya que haba aprendido tcnicas de soplado y pulido de vidrio. Tambin fue mejorando en la fabricacin de lentes e invent nuevos artilugios de aumento (hasta 300 veces de su tamao, mucho ms que cualquier microscopio de lentes mltiples de la poca). Lleg a observar fibras musculares, vasos sanguneos e incluso dibuj glbulos rojos que observ con sus microscopios. Introdujo el trmino animalucos cuando observ agua de un estanque y cuestion la teora de la generacin espontnea al observar que el agua de lluvia carece de estos microorganismos. Para asegurarse de ello demostr que esta teora era incierta observando que las pulgas y los gorgojos no aparecen por s solos en las semillas, sino que proceden de huevos anteriormente depositados all. Describi tres tipos de bacterias: bacilos(6), cocos(10) y espirilos(16). Puesto que no se dedicaba oficialmente a la investigacin y careca de formacin acadmica no fue tomado muy en serio hasta que un mdico amigo suyo lo dio a conocer en la Royal Society de Londres. Una vez fue nombrado miembro, se dedic a la investigacin hasta su muerte en 1723. Adems de Leeuwenhoek, tambin hay que mencionar a cientficos como Robert Hooke quien particip en la creacin de la Royal Society de Londres, invent el microscopio y escribi el libro titulado Micrographia donde habla por primera vez de clulas, libro que inspir a Leeuwenhoek en sus investigaciones. Christian Gottfried Ehrenberg, famoso cientfico alemn y miembro extranjero de la Royal Society de Londres, se dedic al estudio de microorganismos durante la primera mitad del siglo XIX, avanzando en el conocimiento de stos y descubriendo nuevas especies como la Euglena y algunos paramecios.

El trabajo de Louis Pasteur, qumico francs a quien se debe la tcnica de la pasteurizacin, marc por completo el desarrollo de la microbiologa. El empeo de este gran cientfico, a pesar de no destacar como estudiante, le llev a grandes descubrimientos, cuya importancia hace que algunos lo consideren el padre de la microbiologa. Descubri que en la fermentacin del vino actan dos tipos de microorganismos, ambos levaduras(24), unas que producan alcohol y otras cido lctico, que agria el vino. Para evitar esto utiliz un mtodo que eliminaba los microorganismos causantes de que se estropeen aquellos alimentos que precisan fermentacin como son, por ejemplo, el vino, la leche o la cerveza. Se trataba de aumentar la temperatura hasta los 44 C durante unos segundos. Este mtodo, la pasteurizacin, tiene en la actualidad numerosas y muy beneficiosas aplicaciones. Tambin demostr que la descomposicin orgnica se debe a la accin de microorganismos. Demostr que no era cierta la teora de la generacin espontnea probando que en un caldo de cultivo no aparecen microorganismos por s solos si este se encuentra en un medio aislado. Para ello lo introdujo en un matraz de cuello curvado que invent l mismo. (Esto supuso el comienzo de la bacteorologa moderna). Resolvi el problema de la enfermedad de los gusanos de seda, que arruinaba la industria de seda francesa, descubriendo que era un parsito de las hojas de moras el causante de la enfermedad. Gracias a l se comenz a esterilizar los tiles de laboratorio y hospitales hirvindolos antes de ser utilizados y obtuvo vacunas eficaces contra enfermedades infecciosas como el clera de los pollos, el antrax y el erisipela de los cerdos y posteriormente contra el virus de la rabia. Otros como Cohn y Koch aplicaron el estudio de la microbiologa a la medicina. Berkeley demostr por primera vez y claramente que las enfermedades contagiosas se deban a la accin de microorganismos. Ya a partir del siglo XX, la microbiologa comenz a desarrollarse rpidamente en dos direcciones, microbiologa mdica e inmunolgica y microbiologa agrcola. Durante este siglo tambin se aport el descubrimiento de los antibiticos (la penicilina descubierta por Flemming en 1929) y el desarrollo de la microbiologa acutica que propuso el suministro de agua sin contaminar para la poblacin humana. Todo esto fue una gran aportacin al fomento de la sanidad. Por su parte el descubrimiento de ADN y el ARN dejaron al descubierto relacin entre la microbiologa y la gentica que conduce a la tecnologa, la cual permite obtener anticuerpos ante microorganismos. Desde el siglo XVII hasta nuestros das, la microbiologa se ha ido desarrollando y continuar hacindolo, con el fin de mejorar nuestra calidad de vida y tambin la de todo el entorno que nos rodea.

3.-Mtodos de estudio de la microbiologa 3.1- Esterilizacin(18)

Es un proceso mediante el cual se eliminan todas las posibles formas de vida de un medio de cultivo. Se distinguen dos agrupaciones de tcnicas de esterilizacin segn se empleen mtodos fsicos o mtodos qumicos: -Mtodos fsicos: Los mtodos ms usados se llevan a cabo mediante calor que puede ser utilizado seco o hmedo. Este es el mtodo mas usado ya que los microorganismos tienen una temperatura mxima de crecimiento que cuando se supera dejan de crecer y si no pueden desarrollar esporas de resistencia, mueren.

Calor seco a alta temperatura: se utiliza en el laboratorio para la transferencia asptica (sin contaminantes de un cultivo) de un tubo a otro. Este mtodo consiste en destruir los microorganismos por oxidacin de sus componentes celulares. Se lleva a cabo mediante:

Hornos especiales que reparten uniformemente el calor en su interior. El material se expone a elevadas temperaturas durante un tiempo determinado

para cada material. Por ejemplo para la esterilizacin de material de vidrios, instrumentos quirrgicos, agujas de metal.

Flameado o llama directa: consiste en exponer el objeto a una llama hasta la incandescencia, por lo que es un procedimiento simple y eficaz. Por ejemplo se esteriliza con este mtodo asas de cultivo de siembra.

Incineracin: consiste en destruir el objeto para conseguir esterilizarlo. Es el mejor sistema para los productos que se pueden destruir. Por ejemplo el material biolgico.

Calor hmedo: es ms rpido y eficaz que el calor seco. Destruye los

microorganismos por coagulacin de sus protenas celulares. Se realiza mediante: Autoclave(5): aparatos hermticos que alcanzan presiones y temperaturas

elevadas en un ambiente hmedo. Ejemplo esterilizacin de medios de cultivos.

Tindalizacin: consiste en someter a calentamientos intermitentes. Provocando la muerte de los microorganismos.

Las radiaciones electromagnticas se utilizan en casi cualquier tipo de sustancia.

Se emplean diferentes tipos de radiacin electromagntica: microondas, radiacin ultravioleta, rayos X, electrones

Los filtros tienen poros muy pequeos lo que hace que los microorganismos no pasen a travs de ellos pero s permiten el paso de los lquidos o los gases, por ello se utilizan para esterilizar lquidos sensibles al calor y gases.

-Mtodos qumicos: Estos mtodos se utilizan para objetos no resistentes al calor. Determinados productos qumicos, naturales o sintticos, controlan el crecimiento microbiano. Pueden actuar de dos formas: -Agentes microbicidas: matan los microorganismos y segn el tipo sobre el que acten se habla de agentes bactericidas, fungicidas o viricidas. -Agentes estticos: detienen el crecimiento de los microorganismos y se distingue entre agentes bacteriostticos, fungistticos y viristticos. Algunos de estos medios qumicos son: el cido fnico, el cido cianhdrico, el xido de etileno, la clorhexidina, los derivados mercuriales, los derivados del yodo y muchas otras sustancias. El alcohol etlico no produce esterilizacin completa.

3.2- Pasteurizacin La pasteurizacin es un mtodo de la microbiologa utilizado sobretodo en la industria alimentaria y que se dedica a reducir el nmero de microorganismos presentes en los alimentos. Para ello, se eleva la temperatura de un lquido alimenticio hasta alcanzar una temperatura inferior a su punto de ebullicin durante un periodo muy corto de tiempo, 15 segundos (debido a este escaso tiempo recibe el nombre de pasteurizacin en flash), para eliminar de esta forma ciertos microorganismos que puedan estropear los alimentos pero sin llegar a alterar demasiado el sabor ni las vitaminas de dicho producto y aumentar con esto, el tiempo de conservacin de los alimentos. La pasteurizacin es muy utilizada para el almacenamiento de la leche y sus derivados. Este mtodo recibe el nombre de pasteurizacin debido al qumico y bacterilogo francs, Louis Pasteur, quien utiliz el calor para controlar el deterioro del vino.

3.3- Medios de cultivo Entendemos por medio de cultivo aquel material elaborado que contiene la cantidad suficiente de nutrientes como para que crezcan en l microorganismos, los cuales se podrn estudiar posteriormente. El crecimiento de los microorganismos es conocido como cultivo, mientras que el material en el que crecen es conocido como medio de cultivo, el cual no debe contener microorganismos que puedan contaminar el medio. En los medios de cultivo pueden encontrarse materiales de enriquecimiento como pueden ser sangre, hidratos de carbono, suero Todos ellos tienen un papel diferente, pero todos poseen un mismo fin, enriquecer el medio de cultivo; as, por ejemplo, los hidratos de carbono incrementan la cantidad de nutrientes del medio y tambin son utilizados para identificar los microorganismos a travs de un proceso mediante el cual son capaces de detectar diversas reacciones de fermentacin que tienen lugar en ellos, mientras que la sangre y el suero ayudan al crecimiento de microorganismos menos resistentes. Adems, tambin se les pueden aportar colorantes que permiten el crecimiento de la bacteria(7) que nos interese mientras que inhibe el crecimiento de las dems. - Evolucin de los medios de cultivo El inicio de la microbiologa nace con la aparicin del microscopio, pero cuando verdaderamente nace y evoluciona fue con la aparicin de los medios de cultivo y la utilizacin de agar-agar(1) para la solidificacin de estos. Brefeld fue el primer miclogo (del que tenemos constancia) que aisl y cultiv esporas(17) de hongos(23) en medios slidos, utilizando como solidificante la gelatina, pero este tipo de medios no era el adecuado para las bacterias. Posteriormente, Koch investig utilizando primeramente patatas como medio de cultivo slido, pero gracias a la idea de Loeffler, quien ide la utilizacin de caldo de carne, utiliz este tipo de medio al que le aadi gelatina para conseguir solidificarlo. Aos ms tarde, en 1882, Walter Hesse descubre el agar-agar, producto extrado de las paredes celulares de varias especies de algas(2) rojas, concretamente del gnero Gelidium, como solidificante. Petri, ayudante de Koch, en 1887 comienza a utilizar placas de cristal denominadas placas de Petri(34), las cuales son sustituidas por las utilizadas hasta el momento. Beijerinck y Winogradsky disearon un tipo de medios de enriquecimiento, de forma que se enriqueciera el medio para favorecer el crecimiento de los microorganismos. Sin embargo, fue Wrtz quien idea la incorporacin de indicadores de pH a los medios de cultivo para observar la produccin de cidos en la fermentacin de los microorganismos. - Condiciones generales para el cultivo de microorganismos El desarrollo de los microorganismos en un medio de cultivo se ven afectados por una serie de factores que describimos a continuacin:

- Disponibilidad de nutrientes adecuados: cualquier medio de cultivo debe contener ciertas sustancias necesarias para que los microorganismos sean capaces de crecer en l. Entre estas sustancias se encuentran el carbono, nitrgeno, azufre, fsforo, sales inorgnicas, ciertas vitaminas Todas estas sustancias eran suministradas en un primer momento en forma de infusiones de carne, extractos de carne o extractos de levadura. Sin embargo, actualmente se utiliza la peptona para suministrar estas sustancias necesarias. Adems, a veces tambin se le pueden aadir a los medios colorantes como ayuda para identificar los microorganismos.

- Consistencia adecuada del medio: existen varios tipos de medio segn su estado fsico: lquido, semislido o slido. Para transformar un medio lquido en uno slido o semislido, le podemos aadir varios productos como pueden ser la albmina, la gelatina o el agar (es el ms utilizado). Sin embargo, en los medios solidificados con gelatinas muchos microorganismos no crecen adecuadamente, por ello se utiliza menos.

- Presencia o ausencia de oxgeno y otros gases: muchas bacterias pueden crecer en condiciones normales de oxgeno; pero, sin embargo, hay otros microorganismos que necesitan de unas condiciones especficas para poder crecer. Por ejemplo los microorganismos anaerobios.

- Condiciones adecuadas de humedad: es necesario un nivel mnimo de humedad para que se desarrollen los microorganismos, para ello se emplean estufas de cultivo a 35C-37C que regulen estos niveles.

- Luz ambiental: casi la totalidad de los microorganismos se desarrollan mejor en la oscuridad que en presencia de luz solar, con excepcin de los microorganismos fotosintticos.

- pH: para que se desarrollen mejor los microorganismos debe de haber una cierta

cantidad de iones hidrgeno, los cuales se desarrollan mejor en medios con un pH neutro.

- Temperatura: cada tipo de microorganismo tiene una temperatura ptima, en la cual

crecen mejor. Por ejemplo, los patgenos humanos crecen alrededor de los 37C.

- Esterilidad del medio: todos los medios de cultivo que se utilicen deben de haberse esterilizado antes, ya que si utilizamos medios de cultivo sin esterilizar, podemos provocarle a los microorganismos alteraciones, impedirles su crecimiento La forma de esterilizarlos ms tradicional es el denominado autoclave, que utiliza vapor de agua a presin para esterilizar los medios.

- Tipos de medios de cultivo Segn su estado fsico, los medios de cultivo pueden ser:

- Lquidos - Semislidos - Slidos

Podemos distinguir cuatro tipos de cultivo segn su utilidad: - Medios generales: en este tipo de medio se pueden desarrollar todo tipo de

microorganismos. - Medios de enriquecimiento: potencian el crecimiento de un determinado tipo de

microorganismo, dejando crecer el resto en menor proporcin. - Medios selectivos: permiten el desarrollo de un determinado tipo de microorganismos

impidiendo el crecimiento de los dems. - Medios diferenciales: en ellos se aprecia las propiedades que tiene un determinado tipo

de microorganismo.

4.- Clula procariota La clula procariota es aquella que no posee un ncleo diferenciado; en estas clulas, la informacin gentica (ADN) forma un anillo que se encuentra en el citoplasma celular. Las clulas procariotas se caracterizan por la diversidad de formas que pueden presentar. As, podemos clasificarlas en bacilos (forma de bastn), cocos (forma esfrica), espirilos(16) (con forma de bastn espiralado) y vibrios(40) (con forma de coma ortogrficas). Tambin pueden presentar una mezcla de varias formas llamados bacilococos, forma de racimo de uvas (estafilococos), lnea de cocos (estreptococos) o como dos esferitas (diplococos(13)) 4.1- Morfologa Las clulas procariotas estn delimitadas por una pared celular rgida compuesta por polisacridos y pptidos, que rodean a la membrana plasmtica, la cual est compuesta por lpidos, protenas y glcidos en menor medida. A travs de ella, se produce el intercambio de sustancias entre el citoplasma celular y el medio en el que se encuentra la clula. La clula procariota no posee orgnulos definidos; en el citoplasma solo se encuentran ribosomas, pero son mas pequeos que los que la clula eucariota posee (ribosomas 70s frente a ribosomas 80s), pueden presentar flagelos que permite su movilidad, pilis, relacionados con el intercambio de ADN, fimbrias, relacionados con la adherencia a sustratos y cpsulas, cubierta de naturaleza glucdica, por ello tambin recibe el nombre de glucoclix. Las clulas procariotas realizan las tres funciones vitales: - Funcin de nutricin Se distinguen dos grupos segn la forma de conseguir materia orgnica:

Procariotas auttrofas: hablamos de procariotas auttrofas cuando son capaces de producir materia orgnica a partir de materia inorgnica y energa que han captado del medio ambiente. Procariotas hetertrofas: ingieren materia orgnica extrayendo de ella parte de su energa qumica.

- Funcin de relacin Las funciones de relacin se expresan de una forma u otra dependiendo del tipo de respuesta que le de con respecto al estmulo recibido. Estas respuestas pueden modificar el metabolismo o realizar movimientos de aproximacin o de huida, que implica la utilizacin de flagelos o movimientos de reptacin. Algunas bacterias forman en su interior esporas de resistencias o endosporas, estas estructuras se encargan de proteger el ADN y el resto del contenido protoplasmtico. Son estructuras muy resistentes al calor, la radiacin, los cidos, etc. - Funcin de reproduccin Normalmente, la reproduccin de los organismos procariotas se lleva a cabo de forma asexual por biparticin y en menor medida por gemacin(19). Adems, las bacterias poseen unos mecanismos de transferencia gentica de tipo parasexual, mediante los cuales se intercambian fragmentos de ADN, esta transferencia puede ser por transformacin, conjugacin y transduccin. (Siempre la transferencia se realiza del donante al receptor):

Transformacin: mediante este procedimiento, la clula receptora capta del medio donde vive ADN libre procedente de otra clula, el cual, es incorporado en ella.

Las clulas capaces de sufrir transformaciones se las conoce como competentes. Ej: especies de bacterias y algunas pertenecientes al dominio Archaea(3).

Conjugacin: para que se produzca la transformacin, se necesita que haya contacto entre la clula donante y la receptora. Dicho contacto se realiza mediante pelos sexuales huecos o pili. A travs de ellos se transfiere un poco de ADN. Para que se produzca conjugacin es necesaria la sntesis de ADN.

Transduccin: la transformacin se produce a travs de un virus bacterifago. ste inicia un ciclo ltico durante el cual incorpora ADN de un hospedador en su propio ADN, de forma accidental y as, lo transfiere a otra clula cuando la infecta. Estos tres mecanismos de transferencia se conocen como horizontales para diferenciarlos de los verticales (gentica de padres a hijos).

4.2- Tipos

Dominio Bacteria Podemos definir a las bacterias como aquellos microorganismos unicelulares de tamao microscpico que carecen de membrana nuclear y por lo tanto su ncleo no se encuentra diferenciado. Hay dos tipos de pared celular. Segn esto, distinguimos dos tipos de bacterias: - Bacterias Gram positivas: la pared celular es muy gruesa, posee muchas capas lineales formada principalmente por peptidoglucano, y cido teicoico (polmero derivados de azcares) que va unido a estructuras lipdicas.

- Bacterias Gram negativas: presentan una pared ms fina, y ms compleja. No contiene cidos teicoicos ni lipoteicoicos pero tiene una estructura con una disposicin igual a cualquier membrana; se llama membrana externa que est ausente en la gram positiva. Entre la membrana citoplasmtica y la externa queda el espacio periplsmico donde est el peptidoglicano que se une a la membrana formando lipoprotenas. Para saber si nos encontramos ante una bacteria gram positiva o una gram negativa, recurrimos al mtodo de "Tincin de Gram"(36) que consiste en una prueba til y de fcil realizacin que permite diferenciar las dos principales clases de bacterias. Se colocan sobre un portaobjeto(35) de bacterias fijadas por calor o secado de algn otro modo y se tien con cristal violeta. A continuacin se aade una solucin yodada y luego se realiza un lavado con un agente decolorante. Luego se usa safranina para teir de rojo las clulas que no hayan retenido el cristal violeta. En las bacterias gram positiva se van a teir de purpura y el colorante queda atrapado en la capa de peptidoglucano. En cambio en las bacterias gram negativa presentan una capa delgada de petidoglucano y no retiene el color violceo. Desde un punto de vista filogentico encontramos doce reinos: -Aquifex/Hydrogenobacter: presentan caractersticas termfilas, y crecen mejor en temperaturas acuticas de 85C a 95 C normalmente crecen cerca de volcanes subacuticos o fuentes hidrotermales. -Thermotoga: crecen a temperaturas muy altas, entre otras de sus principales caractersticas podemos destacar que son extremadamente termoestables por lo que son utilizadas en procesos industriales normalmente en sectores alimenticios ya que tambin son anaerobias y son capaces de realizar fermentaciones. -Bacterias verdes no del azufre o Chloroflexi : son fotosintticos, realizan fotosntesis anoxignica ya que no producen oxigeno mediante la fotosntesis. Se llaman bacterias verdes debido a su pigmento verde que se encuentra en los clorosomas (complejo antena fotosinttico presente en este tipo de bacterias). -Deinococos y parientes: es una bacteria extremfila (vive en condiciones extremas), y es muy resistente a la radiacin. a

-Espiroquetas: es un tipo de bacterias gram negativas que tienen clulas largas y enrolladas helicoidalmente. Estas bacterias se pueden mover de distinto modo en medio lquido: rotacin alrededor de su eje, contracciones flexulosas (forma ondas) y movimiento helicoidal e incluso en ambientes altamente viscosos, y en medios slidos con un 1% de agar. -Bacterias verdes del azufre o Chlorobi: realizan la fotosntesis anoxignica. Estas bacterias se encuentran en las zonas ricas en azufre y anaerobias de los lagos. -Bacteroides-flavobacterias: Son bacilos aerobios e inmviles de tipo gram negativas. Normalmente se encuentran en agua dulce y salada, alimentos y plantas procesadoras. -Planctomyces y parientes: presentan agua dulce y marina, tienen forma de ovoide que se une a una especie de tallo y se reproducen por gemacin. -Clamydiae: produce infecciones en el tracto genital, respiratorio y ocular. -Bacterias gram positivas: se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de Gram. Constituyen uno de los grupos de bacterias junto con las bacterias gram negativas. -Cianobacterias: son bacterias azulverdosas, fotosintticas y contienen clorofila. Normalmente se encuentran en la corteza de los rboles, rocas y suelos hmedos. -Bacterias rojas, bacterias prpuras del azufre, o Chromatiales: son fotosintticas y anaerbicas. Normalmente se encuentran en manantiales abundantes en azufre o en agua estancada.

Dominio Archaea Al principio se crea que los Archaea pertenecan al dominio de las bacterias pero ms tarde se descubri que tienen unas caractersticas diferentes a stas. Las archaeas son genticamente ms parecidas a las eucariotas que a las procariotas, sin embargo se incluyen dentro de ellas porque no tienen un ncleo determinado por una membrana. Los Archaea pueden habitar en medios con condiciones muy extremas ya que algunas de ellas son hipertermfilas (pueden sobrevivir con temperaturas superiores a los 100C), otras son extremfilas (pueden habitar en aguas con grandes concentraciones salinas y en medios con un pH 1), o tambin pueden ser metangenas (habitar en los intestinos de otros seres vivos). La mayora son auttrofos y capaces de sintetizar azufre, aunque tambin existen archaeas hetertrofos.

-Morfologa Los archaea tienen formas y tamaos muy variados. Pueden tener un dimetro comprendido entre 0,1 y 15 m, pero pueden llegar hasta las 200 m si constan de filamentos agregados. Su membrana es una pared celular similar a la de las bacterias pero se diferencia en su composicin. Pueden clasificarse como Gram positivas o negativas. -Fisiologa Tienen una sola enzima ARN polimerasa que transcribe a todos los genes de la clula. Los archaea metangenos no pueden sobrevivir en presencia de oxgeno y obtienen energa mediante la fermentacin de otras sustancias que transforman en metano. Tambin pueden actuar en simbiosis con otros seres vivos (por ejemplo facilitando el proceso de rumiacin). Los halfilos requieren altas concentraciones salinas para vivir. Estos organismos captan la luz mediante unos pigmentos de sus membranas y lo transforman en ATP. Los termfilos requieren azufre, unas temperaturas superiores a 60C y un pH cido para desarrollarse. -Tipos Como los archaea son tan variados que los tipos son muy numerosos. Actualmente se conocen unos 100 gneros y unas 300 especies. Se distinguen tres reinos: Crenarchaeota: comprende a la mayora de las especies hipertermfilas. Muchas son auttrofas y se encuentran en mares y suelos. Euryarchaeota: Habitan en medios hipertnicos y son capaces de obtener energa en forma de ATP sin tener clorofila. Tambin pertenecen a este grupo los archaeas metangenos. - Korarchaeota: Son consideradas las ms primitivas y suponen una pequea parte de las hipertermfilas.

5.- Clula eucariota

Dominio Eukarya -Morfologa El termino eucariota deriva de dos palabras latinas eu y cario, verdadero ncleo. Por ello, se denominan eucariotas a las clulas que, a diferencia de las procariotas, "tienen el material gentico envuelto en una doble membrana", es decir, estas clulas poseen ncleo. Las clulas eucariotas pueden funcionar como organismo por si solas o formando parte de otros organismos ms complejos. Existen diferentes tipos de clulas eucariotas Clulas eucariotas animales: A diferencia de las clulas vegetales las clulas eucariotas

animales pueden adoptar diferentes formas ya que carecen de pared celular. Principalmente las clulas eucariotas estn formadas por una membrana exterior y el citoplasma. El citoplasma es un medio acuoso (que contiene aproximadamente un 85% de agua en peso) formado por el citosol (parte lquida del citoplasma) con numerosas enzimas para realizar el metabolismo celular y los orgnulos celulares. Tiene una viscosidad elevada debido a que es un coloide y a la gran concentracin de protenas.

Clulas eucariotas vegetales: Las diferencias entre las clulas vegetales y las animales es que las clulas vegetales estn envueltas por una pared celular de celulosa y protenas, unas vacuolas ms grandes y numerosas y la presencia de plastos.

Clulas eucariotas de los hongos: Bsicamente son iguales que las clulas animales, pero tienen paredes celulares de quitina y unas separaciones porosas llamadas septos.

Orgnulos celulares Ncleo: Est formado por una membrana nuclear doble y el material gentico. La

membrana nuclear es porosa y permite el paso de pequeas partculas mediante difusin. Retculo endoplasmtico: Es una agrupacin de cisternas y canales comunicados entre s

y con las membranas celular y nuclear que desempea funciones importantes en la sntesis de protenas y en el metabolismo celular. El retculo endoplasmtico puede ser rugoso si tiene adheridos ribosomas. Este tipo de retculo se encuentra rodeando al ncleo. El retculo endoplasmtico liso no tiene ribosomas y participa en la digestin de lpidos.

Ribosomas: Son pequeas estructuras supramoleculares formadas por cido ribonucleico y protenas. Se encuentran dispersos por el citoplasma o adheridos al retculo endoplasmtico. Se fabrican en el ncleo y su principal funcin es la sntesis de protenas. Los ribosomas leen el ADN mensajero y une las protenas con los aminocidos que suministra el ADN transferente.

Aparato de Golgi: Es una estructura formada por un conjunto de membranas apiladas. Se encarga principalmente de completar la fabricacin de algunas protenas, fabricar los lisosomas primarios y de transportar al exterior las sustancias de desecho de la clula.

Mitocondrias: Se encargan de suministrar la energa que necesita la clula para realizar sus funciones (sntesis de ATP). Este orgnulo consta de una membrana externa y una membrana interna plegada formando las crestas mitocondriales. En su interior se encuentra la matriz mitocondrial donde se produce el ciclo de Krebs.

Plastos: Son orgnulos celulares exclusivos de las clulas vegetales que poseen pigmentos (clorofila y carotenoides). Sirven para sintetizar y acumular sustancias de reserva. Dentro de los plastos encontramos dos grupos: los leucoplastos que carecen de pigmentos y suelen almacenar sustancias y los cromoplastos que llevan en su interior un pigmento que les da color. Si este pigmento se trata de clorofila son cloroplastos.

Lisosomas: estos orgnulos se encargan de digerir las partculas alimenticias que se encuentran en el citoplasma celular.

Peroxisomas: son orgnulos implicados en la oxidacin de cidos grasos, el ciclo del glioxilato y la fotorespiracin.

Vacuolas: orgnulos con forma de sculos de tamao variable que se encuentran fundamentalmente en las clulas vegetales (en las clulas animales, pueden existir pero se les denomina vesculas y son de tamao muy pequeo y muy poco numerosas). Las vacuolas se encargan de almacenar sustancias para alimentar a las clulas y dan turgencia y mantienen la presin osmtica.

Centrosoma: es una estructura que solo se encuentra en las clulas animales y en organismos unicelulares. Este orgnulo est formado por dos centriolos que se encuentran dispuestos perpendicularmente y se encargan de la formacin de nuevos centriolos y de los corpsculos basales de los cilios. Los centrosomas son los centros organizadores de los microtbulos.

Microtbulos: estructuras tubulares filamentosas y huecas dispersas por todo el citoplasma. Se encarga del transporte de sustancias en el interior de la clula, la emisin de pseudpodos y la formacin del huso mittico.

Cilios y flagelos: son orgnulos derivados del centriolo que se encuentran en la superficie de algunas clulas y se encargan del movimiento. Los cilios son cortos y numerosos y los flagelos son largos y generalmente solo se posee uno.

-Tipos Protozoos: Engloban a un grupo de organismos unicelulares eucariotas hetertrofos y

que no poseen pared celular. Pueden habitar muchos medios libremente o pueden estar asociados a otros organismos mediante simbiosis o parasitndolos. Como no tienen pared celular constan de un exoesqueleto si son parsitos o de una cubierta protectora si viven en el medio libre. Aunque algunos protozoos permanecen inmviles, adquieren movilidad al menos en alguna fase de su vida. La movilidad se debe a la presencia de cilios y flagelos o mediante pseudpodos (conocido como movimiento ameboide). La nutricin por fagocitosis de partculas slidas u otros organismos pueden pasar a travs de orificios de la membrana o ser acaparados por pseudpodos que rodean a la partcula y la incorporan al citoplasma. La nutricin por pinocitosis de macromolculas en disolucin se realiza mediante la ingestin de estas sustancias a travs de la membrana u originando una vacuola. La digestin se lleva a cabo en las vacuolas eliminado posteriormente las sustancias que la clula no puede digerir o las que quedan de desecho. La reproduccin es normalmente de tipo asexual, por biparticin, aunque tambin puede darse una divisin mltiple como por ejemplo en las amebas. Los protozoos pueden clasificarse atendiendo a su forma de movilidad: (Esta clasificacin no es la ms actual, pero nos servir para diferenciar a los protozoos de forma general) Esporozoos: Generalmente son inmviles en su etapa de madurez y parsitos estrictos.

En la actualidad este grupo engloba a una gran diversidad de organismos con caractersticas similares que han sido adquiridas gracias a las adaptaciones que han sufrido para ser parsitos. (no son semejantes a nivel de ultraestructura, genes, protenas, por esta razn se cuestiona esta clasificacin.)

Con frecuencia su ciclo vital tiene lugar en diferentes individuos, pues a veces necesitan un individuo que acte como vector para terminar de desarrollarse en otro individuo diferente. En l presentan alternancia de reproduccin sexual y asexual. Su reproduccin sexual tiene lugar mediante gametos haploides que forman un cigoto diploide. Las clulas del individuo diploide resultante son capaces de reproducirse asexualmente por mitosis. El ciclo vital podemos observarlo con claridad por ejemplo en el protozoo causante de la enfermedad de la malaria.

Flagelados: Son organismos mviles gracias a la presencia de al menos un flagelo. Generalmente se reproducen asexualmente mediante mitosis. Pueden ser parsitos o no. Los flagelados parsitos suelen ser patgenos.

Ciliados: Son aquellos protozoos los cuales poseen cilios que permiten su movilidad. Pueden reproducirse asexualmente por biparticin o por gemacin. La reproduccin sexual tiene algunas particularidades puesto que poseen dos ncleos, un macroncleo y un microncleo reservado para esta funcin.

Los microncleos producen gametos que se fusionan creando un cigoto diploide. Seguidamente se genera un macroncleo a partir del microncleo. Son capaces de habitar en medios muy diferentes (en el suelo, en agua dulce o salada, o como parsitos). Amebas: Su nombre se debe a su movilidad mediante pseudpodos, que son

movimientos del citoplasma que generan prolongaciones que facilitan el desplazamiento. Su reproduccin es muy simple, se realiza mediante mitosis y posterior estrangulamiento que da lugar a dos clulas hijas.

Son capaces de habitar en diferentes medios como los ciliados. Otra caracterstica de algunos de estos organismos es la posesin de un caparazn de CaCO3 o de silicatos que les sirve para hacerlos mas resistentes a la vida en el medio exterior.

Algas: Las algas constituyen un grupo de organismos eucariotas auttrofos pertenecientes

al reino de los protoctistas con capacidad para realizar la fotosntesis (cabe destacar la importancia que actualmente tienen las algas como productoras de oxgeno). Para ello, contienen una gran variedad de pigmentos fotosintticos adems de la clorofila como por ejemplo algunos carotenoides o xantofilas, lo cual determinaran el color del alga. Es muy frecuente que las algas se presenten un tamao microscpico, ya sean organismos unicelulares o formando colonias. Algunas algas poseen capacidad de movimiento gracias a sus flagelos. Las algas pluricelulares carecen de raz, tallo y hojas. Solo poseen un talo pluricelular ms o menos complejo. Las algas pueden reproducirse asexual, sexualmente o por ciclos alternantes: Las algas pluricelulares fabrican esporas mviles en la reproduccin asexual y

gametos en la reproduccin sexual. Las algas unicelulares se reproducen asexualmente por biparticin y sexualmente

funcionando la clula entera como espora. Los lugares donde habitan deben ser acuticos, tanto dulces como salados, o tener una humedad muy elevada como por ejemplo en los bosques de zonas hmedas y umbras. Clasificacin Segn el pigmento fotosinttico que posean:

Algas verdes (pigmento verde clorofila) Algas pardas (pigmento marrn) Algas rojas (pigmento rojo) Algas diato-meas (pigmento amarillento)

Algas diato-meas Algas verdes Algas pardas Algas rojas

Segn la composicin de su pared celular: Euglenofitas (contienen quitina, celulosa o CaCO3) Crisfitas (contiene slice)

Segn si poseen ncleo o no: Procariotas: no poseen un ncleo diferenciado. En este grupo solo encontramos las

algas verde-azuladas o cianobacterias. Eucariotas: poseen un ncleo diferenciado. En este grupo existen diferentes grupos: Filo Euglenfitos (Euglenophyta). Filo Dinoflagelados (Dinoflagellata, Pyrrophyta para los botnicos). Filo Cromfitos (Chromophyta) o Heterokontfitos (Heterokontophyta) Filo Haptfitos (Haptophyta=Coccolithophoridae) Filo Criptfitos (Cryptophyta) Filo Glaucfitos (Glaucophyta=Glaucocystophyta). Filo Rodfitos (Rhodophyta) Filo Clorfitos (Chlorophyta)

Hongos: Los hongos son microorganismos eucariticos que pueden ser tanto unicelulares

como pluricelulares, y cuyas clulas se asocian formando cuerpos filamentosos llamados hifas; el conjunto de estas hifas se denomina micelio. En la asociacin de estos filamentos a veces se producen falsos tejidos. Los hongos, al carecer de clorofila, no realizan la fotosntesis, por lo cual su alimentacin es hetertrofa. La nutricin la realizan de la siguiente forma: Segregan al exterior enzimas digestivas y una vez digeridos, los alimentos son absorbidos (digestin externa). Los hongos se clasifican en tres grupos dependiendo del tipo de alimento que consuman: - Saprfitos: se encargan de descomponer la materia orgnica. - Parsitos: se alimentan de los lquidos del interior de otro ser vivo. - Simbiontes: se asocian con otros seres vivos para favorecerse mutuamente.

Tambin podemos clasificar los hongos segn el tipo de hifas y de esporas: - Ficomicetos u hongos inferiores: Presentan hifas sin membranas plasmticas que separan sus clulas. Por ejemplo moho del pan - Ascomicetos: Es el grupo ms amplio que forman los hongos. Presentan hifas (septadas) con membranas plasmticas que separan sus clulas. Sus esporas se forman en el interior de clulas especiales denominadas ascas, o formando conidios. Pueden ser unicelulares como las levaduras o pluricelulares como el Penicillium que es el productor de la "penicilina". - Basidiomicetos: Son hongos pluricelulares. Presentan hifas septadas y sus esporas se forman en el exterior de unas clulas especiales denominadas basidios. Las setas que derivan de estas esporas pueden ser comestibles, como el champin o setas venenosas como la canaleja o el boleto de Satans. - Deuteromictos: Son aquellos hongos que forman los lquenes(25).

La reproduccin de estos tipos de microorganismos se realiza de forma cclica en la que se alternan tanto la reproduccin sexual como la asexual. Partimos de un organismo diploide (2n). ste crea esporas sexuales haploides (n), que son trasladadas por el viento. Cuando llegan a un lugar propicio, crecen sin formar cuerpo fructfero(12). Una vez que se unen a otro individuo haploide del sexo opuesto, aparece el organismo diploide, a partir del cual surge el cuerpo fructfero que crear las esporas haploides, inicindose el ciclo de nuevo.

CLASIFICACI. DE LOS HO.GOS

Ficomicetos Ascomicetos Basidiomicetos

Tipos de hongos: Levaduras: En microbiologa se llama levadura a todos los hongos con predominio de

una fase unicelular en su ciclo de vida. De esta forma, las levaduras son hongos unicelulares microscpicos y filamentosos, que pueden aparecer aislados o unidos unos a otros formando pequeas cadenas o filamentos. Las levaduras son organismos anaerobios facultativos; en presencia de oxgeno, estos organismos son capaces de transformar los azcares en dixido de carbono, agua, cierta cantidad de levadura y energa, creciendo rpidamente (respiracin). En cambio, en ausencia de oxgeno, estos organismos son capaces de transformar los azcares en dixido de carbono y alcohol, obteniendo energa y creciendo lentamente (fermentacin). En cuanto a la reproduccin de las levaduras, puede ser sexual, por gemacin, o asexual, por ascosporas. Muchas levaduras siguen un ciclo de reproduccin en el cual se van alternando los tipos de reproduccin: dos clulas haploides, que actan como lamentos se unen creando una clula diploide, la cual es capaz, por mitosis, de reproducirse creando individuos genticamente iguales a ella. En determinadas condiciones, una de estas clulas diploides, por meiosis, origina clulas haploides, que actuarn de nuevo como gametos (de cada clula diploide se obtienen cuatro gametos), cerrando el ciclo. Las levaduras que no son capaces de recorrer el ciclo completo pertenecen al gnero Cndida.

Uso Se tiene constancia del uso de las levaduras desde el ao 10000 a.C, cuando se utilizaban para elaborar vinos. De aquella fecha en adelante, muchas civilizaciones han utilizado estos microorganismos para elaborar productos alimenticios, pan, vino, cerveza, productos de gastronoma En la actualidad existen algunos productos que sustituyen a la levadura biolgica, como es la levadura qumica, que nos proporciona resultados de forma ms inmediata, aunque la levadura biolgica se sigue utilizando.

Hongos mucosos: Este grupo abarca a una serie de microorganismos pertenecientes a

los protoctistas y que a pesar de ser hongos comparten una serie de caractersticas con los protozoos. Durante su vida se presentan de distinta forma: Al principio como amebas, despus como masas gelatinosas y por ltimo con un cuerpo fructfero. Se alimentan de materia en descomposicin o de bacterias y otros microorganismos mediante fagocitosis. Los hongos mucosos pueden clasificarse en dos grupos principales: Los acelulares (Myxogastrea), que no se presentan formando clulas independientes sino ms bien una masa celular con un gran nmero de ncleos rodeados por una membrana externa. Los celulares (Dyctiostelia) formando organismos independientes que solo se unen bajo condiciones adversas.

Setas: se les llama setas a los cuerpos fructferos de unos hongos pluricelulares filamentosos, los hongos pertenecientes al grupo Basidiomycetes. Estos hongos producen unas esporas sexuales haploides que crecen en forma de micelio en un ambiente adecuado, pero no producirn cuerpos fructferos hasta que no se les unan otros micelios haploides. Cuando dos micelios haploides se unen, crecen formando una hifa(21) diploide dicaritica, y aparecen los cuerpos fructferos o setas.

Las setas suelen tener forma de paraguas, y poseen diferentes partes, aunque dependiendo del tipo de seta puede carecer de alguna de ellas:

El sombrero: es la parte superior de la seta. Puede presentar diversos colores y diversas texturas.

El himenio: zona inferior del sombrero. Esta zona suele presentar lminas o poros. Es el lugar donde se producen las esporas.

El pie: puede ser hueco o macizo y puede tener diferente textura.

La volva: la volva son los restos de la membrana que envolva a la seta.

Advertencia: Las setas son muy tiles para el ser humano, pues pueden servir de alimento, pero hay que tener mucho cuidado con ellas, ya que muchas son muy txicas e incluso mortales, por lo que hay que tener amplios conocimientos sobre ellas y estar completamente seguros antes de consumirlas.

Hongos filamentosos: Los hongos filamentosos tambin son llamados micelares y representan el ms tpico crecimiento de los hongos microscpicos. Son los tpicos mohos que suelen aparecer en las frutas, queso, pan viejoy en medios de cultivo slidos. Estos hongos forman colonias algodonosas o pulvurentas muy caractersticas. Forman filamentos que se denominan hifas que se entrecruzan desordenadamente dando lugar a estructuras ms complejas denominadas micelio. En otros hongos las hifas se entrecruzan con una cierta organizacin pero nunca llegar a formar una estructura compacta.

Los hongos filamentosos se dividen en inferiores y superiores segn las caractersticas de sus hifas: Los hongos inferiores estn formados por hifas anchas (5-10 m) y forman mohos mientras que los hongos superiores estn formados por hifas finas (0.5-5 m ) y forman adems de mohos las setas que tienen tamao macroscpico y pueden ser venenosas o comestibles. A partir de estos micelios algunas hifas formarn conidios que son las hifas areas. Los conidios son esporas asexuales de fuertes pigmentos como negro, marrn o amarillo. Estas esporas germinan para dar nuevas hifas. Los hongos filamentosos son los responsables de muchas alergias adems de contaminar muchos alimentos.

Aspecto colonial de hongos que presentan

crecimiento filamentoso (F) y levaduriforme (L).

Crecimiento de hongos sobre una naranja.

Crecimiento de hongos sobre pan viejo.

* Principales caractersticas de clulas procariotas y eucariotas:

EUCARIOTAS PROCARIOTAS

Principales grupos:

Algas, hongos, protozoos, plantas, animales

Bacterias, archaeas

.cleo Membrana nuclear Sin membrana nuclear

Cromosomas Cadenas de ADN, genoma

diploide ADN nico y circular. genoma

haploide Mitocondrias Presentes Ausentes

Aparato de Golgi Presentes Ausentes Retculo

endoplasmtico Presentes Ausentes

Membrana citoplasmtica

Contiene esteroides No contiene esteroides

Pared celular Presente en hongos pero ausente

en los dems

Estructura compleja formada por protenas, lpidos y

peptidoglucano Reproduccin Sexual y asexual Asexual

Respiracin Va mitocondrial A travs de la membrana

citoplasmtica Ribosomas Grandes (80s ) Pequeos (70s)

6.- La microbiologa en la actualidad Desde principios del siglo XX hasta nuestros das la microbiologa ha ido avanzando de tal manera que en la actualidad el conocimiento microbiolgico lo dividimos en varias disciplinas especializadas. Los microorganismos se estudian en toda su complejidad fisiolgica, bioqumica, gentica, ecolgica, biologa celular

Fisiologa microbiana: estudio a nivel bioqumico del funcionamiento de las clulas microbianas.

Gentica microbiana: estudio de la organizacin y regulacin de los genes microbianos y como stos afectan al funcionamiento de las clulas. Est muy relacionada con la biologa molecular.

Microbiologa clnica: estudia la morfologa de los microbios. Microbiologa mdica: estudia los microorganismos patgenos y la posible cura para

las enfermedades que producen. La inmunologa averigua las causas de la aparicin de estas enfermedades.

Microbiologa veterinaria: estudio del papel de los microbios en la medicina veterinaria.

Microbiologa ambiental: estudio de la funcin y diversidad de los microbios en sus entornos naturales.

Microbiologa evolutiva: estudio de la evolucin de los microbios y la taxonoma bacteriana.

Microbiologa industrial: estudia la explotacin de los microbios para uso en procesos industriales. Algunos ejemplos son la fermentacin industrial y el tratamiento de aguas residuales.

La microbiologa industrial est muy relacionada tambin con la biotecnologa (la aplicacin de organismos, componentes o sistemas biolgicos para la obtencin de bienes y servicios) Aeromicrobiologa: estudio de los microorganismos transportados por el aire. Microbiologa de los alimentos: estudio de los microorganismos que estropean los

alimentos. Microbiologa espacial: estudio de los microorganismos presentes en el espacio

extraterrestre, en las estaciones espaciales y en las naves espaciales.

Subdisciplinas de la microbiologa: Bacteriologa: Estudio de los procariontes (bacterias, archaeas). Virologa: Estudio de los virus. Micologa(29): Estudio de los hongos. Parasitologa: Estudio de los parsitos Protistologa: Estudio de los protistas. Micropaleontologa: Estudio de los microfsiles. Palinologa: Estudio del polen y las esporas. Ficologa: Tambin llamada Algologa. Estudio de las algas y microalgas. Protozoologa: Estudio de los protozoos.

7.- Efectos de los microorganismos en el ser humano Efectos beneficiosos

Los microorganismos, a pesar de ser ignorados por su pequeo tamao, proporcionan numerosos beneficios a los seres vivos y en particular a los seres humanos. Hemos aprendido a beneficiarnos de ellos y a utilizarlos en una gran diversidad de campos industriales como por ejemplo en agricultura para aumentar la productividad del suelo, o en la industria alimenticia en la que se usan para obtener alimentos fermentados como por ejemplo el vino, el yogurt, el queso o la aceituna de mesa. Es tambin destacable la utilidad que estos tienen para la ecologa, ya que se usan microorganismos para la degradacin de plsticos, sin olvidarnos de aquellos que, en este caso sin la intervencin del hombre, aceleran los procesos de descomposicin de materia orgnica, teniendo por tanto un papel fundamental en la cadena alimenticia. En la actualidad tambin han adquirido gran importancia en medicina. Algunas bacterias se utilizan como medicamentos, como por ejemplo la E.Coli, que produce insulina y resulta til para los diabticos. Existen otros muchos, los cuales conviven en endosimbiosis con otros seres vivos. En el caso del ser humano, el ms destacado es el caso de los lactobacilos y las bifidobacterias que forman la flora intestinal y que colonizan los intestinos de forma natural desde la infancia.

Efectos perjudiciales Los efectos perjudiciales de los microorganismos radican en el efecto patgeno que estos ejercen sobre el organismo. La mayora de los organismos perjudiciales para la salud son parsitos, produciendo infecciones a nivel local o general. Existen por tanto una gran diversidad de microorganismos patgenos y enfermedades causadas por estos que son capaces de transmitirse de unos seres a otros mediante el contacto de ambos seres, generalmente a travs de la sangre o de la saliva entre otras secreciones. Actan de forma negativa sobre las plantas y los animales causando enfermedades en la piel, en las vas respiratorias o en el aparato digestivo. A continuacin referiremos algunos efectos negativos causados por microorganismos 1-. Hongos: Las infecciones producidas por hongos se denominan micosis que pueden ser cutneas, profundas o superficiales. Suele afectar a la piel, al cabello y a las uas, afectando ms gravemente a personas con problemas inmunolgicos. Los ms comunes son la tia y el pie de atleta. 2-. Protozoos: Afectan al ser humano a travs del agua, alimentos, picaduras de insectos portadores o mediante relaciones sexuales. Una de las enfermedades causadas por protozoos ms extendida en el mundo es la malaria, transmitida al ser humano mediante el mosquito que acta como vector de la enfermedad. 3-. Bacterias: Son causantes de las enfermedades ms comunes en el ser humano. Las ms comunes son las que producen conjuntivitis (Chlamydia trachomatis), neumonas (Staphylococcus aureus), diarreas e infecciones de las heridas (Aeromonas hydrophila).

MATERIALES Y MTODOS a) Materiales

Cmara de fotos

Kodak EasyShare CX7525 (5.0 mega pixels)

Mvil Samsung E250V

Para esterilizar:

Gradilla

Placas de petri

Papel transparente

Tubos de ensayo

Caldo

Olla a presin

Olla especial para microondas

Piedras

Algodn

Jeringa

Para preparar los medios:

Placas de petri esterilizadas

Caldo

Mechero

Para realizar las preparaciones:

Porta

Cubre

Glicerina

Agua

Asa de siembra

Mechero

Agar

Balanza

Para realizar las observaciones:

Microscopio binocular

Lupa binocular

Para la tincin de Gram:

Cristal violeta

Agua destilada

Safranina

Lugol

Agua destilada

Agua

Mechero

Asa de siembra

Porta

Balanza

Para tomar las capturas de pantalla:

Microscopio monocular cuyo objetivo ha sido sustituido por una cmara de video

conectada a un ordenador.

Programa Microsoft paint

Programa AMcapture

b) Mtodos

1.- Preparacin del caldo y esterilizacin de los materiales

1.1-Preparacin del caldo

Tras la preparacin de un caldo, lo filtramos en fro, lo hervimos de nuevo y le aadimos

azcar (para nutrir ms el caldo).

1.2-Preparacin de los materiales para la esterilizacin. * Materiales:

- Placas de Petri

- Papel transparente

- Tubos de ensayo

- Caldo

- Olla a presin

- Olla especial para microondas

- Piedras

- Algodn

- Jeringa

Esterilizacin de las placas de petri:

Para esterilizar las placas de petri primero las lavamos y secamos bien. Posteriormente las

introducimos en una olla a presin (que contiene una cierta cantidad de agua) sobre un

soporte y la ponemos al fuego hasta que lleve unos cinco minutos hirviendo. Finalmente

sacamos las placas de la olla y las dejamos enfriar un poco para envolverlas en papel

transparente.

Esterilizacin de los tubos de ensayo

Para esterilizar los tubos de ensayo, primero los lavamos y secamos bien. Posteriormente, con

la ayuda de una jeringa introducimos el caldo en los tubos (llenamos los tubos hasta la mitad

aproximadamente) y los tapamos con algodn. Una vez colocados en la gradilla, la ponemos

en una olla especial para microondas, que introducimos en otra olla a presin la cual contiene

una cierta cantidad de agua, ayudndonos con pequeas piedras para que no se desestabilice.

Al igual que con las placas, colocamos la olla en el fuego hasta que lleve unos cinco minutos

hirviendo. Finalmente sacamos la gradilla y los tubos ya esterilizados.

2.- Preparacin de los medios de cultivo Una vez que las placas de petri estn esterilizadas, procedemos a crear un medio slido en

ellas, en el cual poder cultivar. Para ello calentamos el caldo preparado y le aadimos el agar-

agar suficiente (15g/l) para conseguir un medio slido. Cuando tenemos preparada esta mezcla

la vertimos en las placas de petri y las cerramos para evitar que se contaminen (siempre bajo

un medio estril, el cual se crea al encender una llama).

Dejamos una de las placas abiertas para que se contamine y a partir de la cual poder sembrar

los diferentes microorganismos en las placas y tubos preparados.

2.1 Cultivando en las placas Para sembrar en las placas, necesitamos diversos utensilios como son: un asa de siembra, una

bombona, un mechero y las placas de petri.

En primer lugar encendemos una llama, a la cual acercaremos el asa de siembra y lo

quemamos (hasta ponerse al rojo vivo) para poder coger los microorganismos que deseamos

cultivar en la placa sin contaminar sta. Una vez quemado el asa de siembra lo dejamos cerca

de la llama para que se enfre un poco y evitar matar a los microorganismos.

Posteriormente acercamos el asa de siembra a la muestra que vamos a sembrar, lo rozamos

por ella y lo acercamos a la placa en la que vamos a sembrarlos, la cual hemos abierto un

poco. Con el asa de siembra seguimos un camino en zig-zag desde el centro al exterior de la

placa, luego la giramos, hacemos lo mismo y volvemos a repetir el proceso dos veces ms.

2.2 Cultivando en los tubos de ensayo Para sembrar en los tubos, necesitamos diversos utensilios como son: un asa de siembra, una

bombona, un mechero y los tubos de ensayo.

En primer lugar encendemos una llama, a la cual acercaremos el asa de siembra y lo

quemamos (hasta ponerse al rojo vivo) para poder coger los microorganismos que deseamos

cultivar en el tubo sin contaminarlo. Una vez quemado el asa de siembra lo dejamos cerca de

la llama para que se enfre un poco y evitar matar a los microorganismos. Posteriormente

acercamos el asa de siembra a la muestra que vamos a sembrar, lo rozamos por ella, lo

introducimos en el tubo (el cual hemos destapado) hasta que el asa de siembra haya tocado el

lquido; una vez sembrado, le colocamos de nuevo el tapn para que no se contamine.

2.3 Cultivando en medio inclinado

2.4 Sacando el medio slido del erlenmeyer

3.- Tincin de Gram Es una prueba til y de fcil realizacin que permite diferenciara las dos principales clases de

bacterias. El modo de realizar una tincin de gram es el siguiente:

1.- Fijar un frotis: tomamos una muestra de la colonia a analizar con la ayuda del asa de siembra previamente esterilizada y la colocamos en un porta realizando movimientos en

espiral.

Para fijar las bacterias utilizamos un mechero y pasamos el porta por la llama teniendo en

cuenta que no debe estar expuesto directamente en ella mucho tiempo porque esto podra

afectar a la forma de las bacterias.

2.- Tincin: para teir a las bacterias podemos utilizar distintos colorantes que debemos preparar de la siguiente forma:

1-. Cristal violeta

Cristal violeta (violeta de genciana)....................................................0,5 g

Agua destilada.................................................................................100 ml

2-.Lugol:

Yodo...................................................................................................1 g

Yoduro potsico..................................................................................2 g

Agua destilada.................................................................................300 ml

3.- Safranina: Colorante de contraste para tincin Gram (preferible a la fucsina) y esporas.

Safranina.........................................................................................0,25 g

Agua destilada..................................................................................100 m

- Agregamos azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperamos 1 min. Este tinte

dejar de color morado las bacterias Gram positivas.

- Enjuagamos con agua.

- Agregamos lugol y esperamos 1 min

- Enjuagamos con agua.

- Agregamos acetona y esperamos 15 s

- Enjuagamos con agua.

- Agregamos safranina (proporciona un color violeta ms intenso a las gram positivas y tie a

las gram negativas de rosa) y esperamos 30 s.

- Enjuagamos con agua.

- Fijamos la muestra

4.- Preparaciones con glicerina

- Porta

- Cubre

- Glicerina

- Mechero

- Asa de siembra

En el porta de vidrio bien limpio depositamos unas gotas de glicerina que hemos tomado con

el asa de siembra, previamente esterilizada. Seguidamente, pasamos el asa de siembra por la

colonia que queremos observar y mezclamos la muestra con la glicerina. Por ltimo,

colocamos el cubre sobre la muestra para protegerla y conservarla.

RESULTADOS

Antes de realizar nuestro trabajo hemos hecho una serie de prcticas; entre ellas la preparacin del

caldo y del material que necesitamos. Para ello esterilizamos los materiales en los cuales

cultivaremos posteriormente y estudiaremos la evolucin de los microorganismos que aparezcan.

A continuacin exponemos las prcticas realizadas en varias semanas (estas semanas son

consecutivas pero entre ellas no ha ocurrido el mismo periodo de tiempo puesto que han coincidido

con periodos vacacionales)

SEMANA 1

En primer lugar, ponemos el erlenmeyer al fuego, para calentar el caldo que hemos fabricado.

Basndonos en una receta encontrada en internet, pesamos 5g de agar-agar que utilizaremos para

crear medios slidos.

Vertimos los 5 g de agar-agar con los 250 ml de caldo que tenemos en el fuego y lo disolvemos en

l. Posteriormente, vertimos esta mezcla en las cuatro placas de petri y en un tubo de ensayo de

mayor grosor que los preparados en medio lquido.

Una de estas placas junto con el resto que queda en el erlenmeyer, la dejamos sin tapar para que se

contaminen y as estudiar los organismos que queden en ellas.

El tubo de ensayo que ha sido llenado por la mezcla obtenida lo colamos en posicin inclinada

(apoyndolo sobre un soporte), para obtener un medio slido inclinado.

A diferencia de los otros tubos utilizados anteriormente este tubo no est esterilizado. Finalmente,

dejamos las placas y el tubo solidificar.

SEMANA 2

-Observaciones:

Placa 1: esta placa, la cual habamos dejado abierta para que se contaminara, observamos a simple

vista tres tipos de colonias distintas: una de color naranja, otra de color blanco y otra verde.

Las colonias naranjas son pequeas ms grandes que las anteriores y poseen una especie de fibras

o vellosidades del mismo color.

Las colonias verdes tienen alrededor unas fibras blancas parecidas a las de las colonias blancas.

Erlenmeyer: se observan el mismo tipo de colonias aunque se observa que las colonias naranjas

son de mayor tamao.

-Prcticas:

Cogemos un asa de siembra y con la ayuda de una bombona quemamos el extremo para esterilizarlo. Esperamos un poco a que se enfre cerca de la llama (dentro de la zona estril).A continuacin, cogemos una muestra de una colonia naranja, abrimos una placa estril dentro de la

zona estril y rozamos el asa contaminada por la superficie de agar .De esta forma conseguimos sembrar un tipo de microorganismo de forma aislada.

Repetimos el mismo proceso con los otros dos tipos de colonias. Por ltimo volvemos a hacerlo en

un medio inclinado. En este medio, tras sembrar los microorganismos (en nuestro caso las colonias

naranjas), acercamos la boca del tubo a la llama para esterilizarlo.

SEMANA 3

-Observaciones:

Placa 1: Observamos que las colonias han crecido considerablemente. Adems a simple vista

podemos diferenciar otro tipo de colonia de un verde ms oscuro.

Erlenmeyer: en este medio tambin han crecido las colonias considerablemente y observamos una

fibra blanca que ocupa una gran parte del recipiente.

Para sacar el medio de agar del erlenmeyer lo calentamos para derretir los bordes y separarlos del

cristal. A continuacin lo sacamos y lo introducimos en una placa de petri.

Placa 2: (colonia naranja). En ella observamos cmo los microorganismos se han desarrollado por

la zona la cual rozamos con el asa de siembra. Adems en el centro vemos una colonia circular que

parece diferente por tener un color ms claro.

Placa 3: (verde). Se observan cmo se empieza a desarrollar los microorganismos que hemos

aislado, de un solo tipo.

Placa 4: (blanco). No observamos crecimiento, posiblemente porque no se haya sembrado bien.

Medio inclinado: tambin se observa el crecimiento de los microorganismos pertenecientes a la

colonia naranja.

SEMANA 4

-Observaciones

Placa 1: los microorganismos se han extendido y ocupan toda la superficie de agar .Se observa

como las colonias verdes tienen un crecimiento ms rpido.

Placa 2: en ella se observa que los microorganismos han crecido, tanto la colonia de color naranja

(sembrada por nosotras) como la que reencuentra en la zona central que probablemente haya sido

causado por una posible contaminacin

Placa 3: los microorganismos se han extendido de forma continuada (sin seguir la lnea por la cual

se sembr) y ocupan ms de la mitad de la placa. Adems, se observa un crecimiento por niveles.

La parte central contiene mayor nmero de capas.

Placa 4: sigue sin observarse crecimiento, con lo cual sabemos que no est contaminada

Medio inclinado: se observa como la colonia naranja ha ido creciendo, pero en la zona inferior se

ha desarrollado otra especie de color verde oscuro. Probablemente haya sido causado porque el

tubo utilizado no estaba esterilizado. (Medio lquido +*)

SEMANA 5

-Observaciones:

Placa 1: todas las colonias siguen creciendo, han ocupado totalmente el agar.

Placa 2: no observamos ningn cambio destacable.

Placa 3: observamos que la colonia ha ocupado todo el medio, pero el crecimiento de la zona

externa (la reciente) es diferente al anterior, y existe una lnea de separacin entre los dos

crecimiento.

Placa 4: no observamos ningn cambio destacable.

Medio inclinado: las colonias no sembradas estn ocupando gran parte del medio y los

microorganismos sembrados han sido tapados por estas colonias.

-Prcticas:

Observacin a travs de la lupa binocular de las placas 2 y 3.La colonia de la placa 2 se observa

igual que a simple vista pero con un mayor tamao. En la placa 3 se observa los diferentes niveles

de crecimiento y adems encontramos cuerpos fructferos.

Realizamos una preparacin en glicerina de la placa 1 para observarla al microscopio.

Sembramos una nueva colonia en la placa 4 (a partir de la placa 1) puesto que est sin contaminar.

Realizacin de bocetos de la placa 2 y 3 a simple vista y a travs de la lupa binocular, adems de

otro boceto visto al microscopio de la preparacin de glicerina.

SEMANA 6

-Observaciones

Placa 1: no se observan cambios.

Placa 2: no se observan cambios.

Placa 3: no se observan cambios.

Placa 4: observamos el crecimiento de varios tipos de colonias.

Medio inclinado: ya no se aprecian los microorganismos sembrados ya que los microorganismos

no sembrados estn ocupando todo el medio.

-Prcticas:

Sembramos en medio lquido a partir de la placa 3. Esterilizamos el medio lquido encendiendo

una llama y acercando el tubo a ella y sembramos con el asa de siembra.

Realizamos ms preparaciones en glicerina de las placas 2,3 y 4 para observarlas al microscopio.

Observamos al microscopio las preparaciones realizadas.

SEMANA 7

-Observaciones:

Placa 1: no se observan cambios.

Placa 2: como hemos abierto la placa para obtener muestra se nos ha contaminado. Para intentar

que los nuevos microorganismos que han crecido no cubran a los que habamos sembrado

cortamos con un cter la parte contaminada y la eliminamos.

Placa 3: no se observan cambios.

Placa 4: no se observan cambios.

Medio inclinado: no se observan cambios.

-Prcticas:

Cogemos una muestra de la placa 2 y la depositamos en el porta mezclndola con unas gotas de

agua. La secamos pasndola por una llama y la observamos en el microscopio.

Tras esto cogemos de nuevo la muestra y le aadimos azul de metileno para comprobar si serva

para la tincin de la muestra. Esperamos unos segundos y la enjuagamos con agua corriente. A

continuacin la observamos al microscopio.

SEMANA 8

-Observaciones:

Placa 1: no se observan cambios.

Placa 2: aun habiendo cortado la porcin contaminada, apreciamos que los microorganismos no

sembrados se han extendido.

Placa 3: no se observan cambios.

Placa 4: observamos un crecimiento de cuerpos fructferos.

Medio inclinado: no se observan cambios.

Semana 1

Semana 2

Erlenmeyer Placa 1

Medio slido inclinado Medio slido placas

Medio lquido

Semana 3

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

Placa 1

Erlenmeyer

Placa 2

Placa 3

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

Semana 4

Placa 4

Placa 1 Erlenmeyer

Medio inclinado

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

Placa 2

Placa 3

Placa 4

Medio inclinado

Medio lquido

Semana 5

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

Placa 1

Placa 2

Erlenmeyer

Placa 3

Semana 6

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

Placa 1 Erlenmeyer

Placa 2

Placa 3

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

Semana 7

Placa 1 Erlenmeyer

Medio inclinado

Placa 4

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

Placa 2

Placa 3

Placa 4

Semana 8

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

Placa 2

Medio inclinado

Medio lquido

Placa 3

SECTOR 1

SECTOR 2

SECTOR 3

SERTOR 4

SECTOR 5

SECTOR 6

Tincin de Gram y observacin al microscopio

Nos dedicamos a realizar tinciones de gram de muestras de las placas 2 (tanto de la colonia naranja

como de la colonia del centro), 3 y 4. Para realizar estas tinciones seguimos los pasos que

propusimos anteriormente en la tincin de gram.

Placa 4

Medio slido

Medio lquido

Observacin 2 Observacin 3

Primera observacin: colonia naranja (de la placa 2) teida con Azul de Metileno.

10:1

60:1

Segunda observacin: colonia naranja (de la placa 2) tras la Tincin de Gram.

10:1

45:1

60:1

100:1

Tercera observacin: colonia blanca que apareci en la placa 2.

10:1

45:1

60:1

100:1

DISCUSI Con respecto a los resultados obtenidos, podemos observar que el crecimiento de los microorganismos de las distintas placas es desigual. La especie de color verde ha experimentado un crecimiento ms expansivo, ocupando la totalidad de la superficie de la placa que contamina. Intuimos que la reproduccin de esta especie es por esporas, debido a que al tener que cortar la parte visiblemente contaminada de la placa 2, dicha especie volvi a aparecer en esta placa. Por el contrario, la reproduccin de la colonia naranja no tiene lugar por esporas, puesto que solo crece alrededor de la zona donde ha sido plantada. Hemos observado cuerpos fructferos en las placas 3 y 4, por lo que suponemos que son hongos. En algunas preparaciones de glicerina al microscopio, hemos observado la presencia de cocos, bacilos por lo que se trata de bacterias. OBSERVACIONES AL MICROSCOPIO (TINCIN DE GRAM) - Observacin 1 Esta preparacin realizada a partir de la colonia naranja ha sido fijada por calor y teida con un colorante llamado azul de metileno. En el aumento 60:1 observamos unos pequeos puntos que podran ser los seres unicelulares que estamos estudiando. -Observacin 2 Esta preparacin realizada a partir de la colonia naranja ha sido tratada con la tincin de Gram. Tras verla al microscopio a diferentes aumentos creemos que se trata de una muestra contaminada, pues posee zonas gram positivas (presenta un color violeta) y zonas gram negativas (presenta un color rosado). -Observacin 3 Esta preparacin realizada a partir de la colonia blanca que se encontraba en la placa 2 ha sido tratada con la tincin de Gram. Tras verla al microscopio a diferentes aumentos suponemos que se trata de un tipo de bacteria gram negativa, pues se observan varias zonas de un color rosa plido.

ANEXO I MATERIALES Y MTODOS Para que los microorganismos se desarrollen necesitamos un medio de cultivo. Los medios de cultivo pueden ser:

Medios naturales: constituidos por sustancias naturales que pueden ser de origen animal o vegetal complementadas con otras sustancias de las cuales no estn cuantificadas de forma exacta.

Medios sintticos: Tienen una composicin qumica definida. Pueden clasificarse dependiendo de su uso: -Medios de enriquecimiento: Se utilizan para criar algn microorganismo que necesite sustancias especficas -Medios selectivos: Son parecidos a los medios de enriquecimiento pero suelen ser slidos para facilitar la seleccin. -Medios diferenciales: Contienen sustancias que nos permiten averiguar caractersticas fisiolgicas de los microorganismos.

Materiales - Placas de petri - Agar-Agar -Microscopio -Pinzas -Asa de siembra -Estufa -Olla a presin -Botes de cristal -Esptula -Caldo de cultivo*

(*) Ejemplo de receta de caldo de cultivo:

Observaciones: -Utilizar agua destilada -Los materiales de vidrio deben estar bien lavados y enjuagados. -El tiempo y la temperatura deber estar controlados durante la esterilizacin. -Deben almacenarse a una temperatura de entre 15-25 C, con poco humedad y protegidos de la luz solar.

Receta: Ingredientes: -2g de tri-sodiocitrato -1g de amonio di-hidrogenosulfato -008g de azul de bromotimol -02g de sulfato de magnesio -1g de fosfato bipotsico -5g de cloruro de sodio -15g de agar-agar -1L de agua - el pH del medio debe ser 69

Procedimiento: Antes de preparar el caldo los materiales deben ser esterilizados introducindolos durante unos minutos en una olla a presin en la cual se coloca una rejilla para sostenerlos y se aade agua para que hierva. Una vez esterilizados ponemos los 1000ml de agua a hervir y aadimos todos los ingredientes. Por ultimo debemos esperar a que la mezcla hierva de nuevo.

ANEXO II PREPARACIN DEL CALDO

Para preparar el caldo utilizamos los siguientes ingredientes: - Carne - Corteza - Tocino - Garbanzos - Sal - Azcar - Agua - Filtro

Elaboracin: Mientras que se limpia la carne y se lava el tocino y la corteza, introducimos agua en una olla donde se hierven todos estos ingredientes. Posteriormente, se quita la espuma que se crea en el caldo, se le aaden los garbanzos y la sal y se cierra la olla. Dejamos la olla al fuego durante una hora aproximadamente. Pasada esta hora, sacamos la cantidad de caldo que vamos a necesitar. A continuacin, filtramos el caldo obtenido, lo hervimos de nuevo, ya que necesitamos que tenga una temperatura adecuada al introducirlo en las placas y los tubos de ensayo y le aadimos azcar (para nutrir ms el caldo).

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Libro de 2 de Bachillerato de Biologa. Ed. Sm, autores: J. ALCAM, J.J. BASTERO, B. FERNNDEZ, J.M. GMEZ DE SALAZAR, M. JESS MNDEZ, A. OGAYAR, M. SNCHEZ