xiap 原核重组蛋白的表达和纯化
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xiap 原核重组蛋白的表达和纯化. 报告人:周光现. 日期: 09-06-01. 简介 材料和方法 结果 讨论. 简介. X 连锁凋亡抑制蛋白( X-linked inhibitor of apoptosis protein , XIAP )是一类细胞内源性凋亡抑制蛋白,它特异性的抑制 caspase 活性,通过多种途径抑制细胞凋亡。可以作为肿瘤检测的一个指标也可以作为治疗和预防肿瘤的一个靶标。 可以作为肿瘤检测的一个指标也可以作为治疗和预防肿瘤的一个靶标。 本文通过 pET151-XIAP 载体在大肠杆菌中表达, Ni-NTA 亲和层析柱纯化。 - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
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xiap09-06-01
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XX-linked inhibitor of apoptosis proteinXIAPcaspase pET151-XIAPNi-NTAOD600 0.630IPTG0.5ug/ml4hpHpH 5.4pH 4.9
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XIAP
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pET151-XIAPJMY109RossetaLB--IPTGTrisNaH2PO4SDS-PAGE30% 1.5mol/L Tris(pH8.8)10%SDS 10% TEMED 1mol/L Tris(pH6.8)
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pET1511.CaCl2 2.IPTGOD1.Ni-NTA 2.
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1.OD
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OD0.6OD37IPTG5ug/ml4hOD0.6-1.0
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2.
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OD0.6,IPTGIPTG5ug/ml4h30
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3. IPTG
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30OD600 0.64hIPTG0.5ug/ml0.5ug/mlIPTGIPTG0.5ug/ml
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4.
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30OD600 0.6IPTG0.5ug/ml4-8h10h 430OD600 0.6IPTG0.5ug/ml4h,XIAP
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Ni-NTAMMarker A B W 5.9pH4.5:pH
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Ni-NTASDS-PAGEMMarker A B W 5.9pH4.5:pH
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Ni-NTASDS-PAGEPHMMarker A B W 5.9pH4.5:pH 5.44.9pH
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pHpH4.94.5HispH
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1.2.1 2343.4.
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1. OD600 0.630IPTG0.5ug/ml4h2. pH
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Thanks
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Caspases1
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Caspases11caspase caspasescaspase 1caspase 11caspase 4caspase 2caspase 8caspase 9caspase 10caspase 3caspase 6caspase 7caspase 37PARPDFF-45DNA fragmentation factor-45DNADNAcaspase-6lamin Akeratin 18 caspase
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