sem bioq desidrogenase lática

8/8/2019 sem bioq desidrogenase ltica

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BIOQUMICACASOS CLNICOS

Caio V. Taniguchi Rosa

Calim Neder NetoCeclia Oliveira Esteves


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TPICOS IMPORTANTES

PARA REVISO

Descarboxilao oxidativa dopiruvato

Gliclise e produo de

lactato/piruvatoPapel da lactato desidrogenase


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GLICLISE

a degradao da Glicose em uma srie de reaes enzimticas a2 molculas de Piruvato, durante a qual a energia liberada conservada na forma de ATP

O Piruvato ento oxidado e se transforma no Acetil-CoenzimaA. Isso ocorre em clulas sob condies aerbicas.

Na ausncia de Oxignio o Piruvato formado na via glicoltica

sofre fermentao e reduzido a Lactato ou Etanol.

O Lactadoprovoca intensa contrao na clula muscular.


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A oxidao da glicose e a produo de ATP esto associadas reduo de NAD+. Para se manter o funcionamento da gliclisedeve haver uma reoxidao do NADH.

Em aerobiose: utiliza-se o oxignio para oxidar o NADH.

Em anaerobiose o piruvato serve de aceptor dos eltons do NADH,

sendo reduzido a lactatoGlucose + 2NAD++ 2ADP+ 2Pi

2 Pyruvate + 2NADH+ 2ATP+ 2H2O


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DESCARBOXILAO

OXIDATIVA DO PIRUVATOResumidamente:

Piruvato + CoenzimaA+ NAD+ Acetil-CoA+ NADH+ CO2

O complexo poli-enzimticopiruvato desidrogenase converte

irreversivelmente o piruvato, produto final da gliclise, em acetil-CoA.

Complexo:

3 enzimas: piruvato desidrogenase, diidrolipoil transacetilase ediidrolipoil desidrogenase.

5 coenzimas: tiamina pirofosfato (TPP), CoA (derivada do cidopantotnico), nicotinamida adenina dinucleotdio (NAD+ derivada danicotinamida), flavina adenina dinucleotdeo (FAD derivada dariboflavina) e cido lipico.


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LACTATO DESIDROGENASE

Enzima responsvel pela transformao do piruvato em lactato,produto final da gliclise anaerbica de clulas eucariticas.

Formao de lactato o principal destino do piruvato nashemceas, cristalino, crnea ocular, medula renal, testculos eleuccitos.

Enzima tetramrica contendo apenas duas subunidades diferentes:H, para o corao e M, para o msculo esqueltico. Soidentificadas cinco formas dessas isoenzimas: LDH1 (HHHH) e

LDH2 (HHHM), encontradas no miocrdio e nos eritrcitos; LDH3(HHMM), no crebro e rim; LDH4 (HMMM) e por fim LDH5

(MMMM), encontrada no fgado e msculo esqueltico.


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DISCUSSODO

CASOCLNICO


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DESIDROGENASE LTICA ELESO MUSCULAR

Um trabalhador braal, de 29 anos de idade, sentiu dor agudano peito, enquanto trabalhava com uma britadeira. A dor queinicialmente era de intensidade moderada foi se intensificandocom o progredir do trabalho at tornar-se insuportvel. Levado aum pronto socorro, o paciente foi internado e submetido a vriosexames. O eletrocardiograma e a radiografia torcica estavamnormais; a desidrogenase lctica srica (LDH) apresentou nvelelevado a 450 unidades/L soro (normal: 150-360 unidades/L

soro) e que permaneceu alto durante os dias de internao.Nenhuma outra anormalidade fsica ou laboratorial apareceu, e ador no peito melhorou gradativamente com o repouso a que foisubmetido o paciente.


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1. Reao bioqumica catalisada peladesidrogenase lctica (LDH = Lactic

Dehydrogenase)

Reduo do piruvato a lactatoA dehidrogenase lctica (DHL) catalisa a converso reversvel de cidolctico muscular em cido pirvico, um passo essencial nos processosmetablicos que, em ltima anlise, produzem a energia celular

Piruvato + NADH+H+ Lactato + NAD+


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2. Isoenzimas da LDH circulante.

Identificao das isoenzimas de LDH

5 isoenzimas especficas de tecido podem ser identificadas e medidas,formadas por quatro monmeros:LDH1 e LDH2 aparecem no corao e hemcias;LDH3 encontrada no crebro e rim;

LDH4 e LDH5

so encontradas no fgado e msculos esquelticos.

Porcentagem de cada isoenzima:

LDH1: 14% a 26% do total.LDH2: 29% a 39% do total.LDH3: 20% a 26% do total.LDH4: 8% a 16% do total.LDH5: 6% a 16% do total.


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LDH Isoenzima Miocrdio Fgado Msculo Crebro Rim Eritrcitos

1 HHHH ++++ +- +- ++ + +++

2 HHHM ++++ +- +- ++ + +++

3 HHMM + + ++ ++ ++ +

4 HMMM +- ++ ++ + ++ +-

5 MMMM +- ++++ ++++ +- ++ +-


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3. Significado patolgico da elevao do nvel

plasmtico da LDH

A dosagem do Lactato desidrogenase ou Desidrogenase Lctica(LDH) no soro empregada para avaliar doenas cardacas (infartodo miocrdio), doenas hepticas (cirrose, alcoolismo, neoplasias),anemias, mononucleose, traumas musculares, distrofia muscular.

Os valores encontrados na neoplasia se sobrepem com valoresem doenas benignas. No tem nenhum valor como um marcadortumoral de triagem, entretanto, tem utilidade limitada namonitorizao da terapia em malignidades hematolgicas

As alteraes da LDH no so especficas, porm, quando

elevadas na presena de cnceres linfocticos, podem refletir aextenso do tumor e a velocidade de crescimento do mesmo


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4. Interpretao do significado dos valores

aumentados de LDH

Os resultados laboratoriais e clnicos do paciente, como mostra nocaso, descartaram a possibilidade de alguma doena grave.

O paciente foi submetido a um esforo fsico intenso, o queproporcionou uma gliclise anaerbica.

A elevao da taxa de LDH no sangue reflete a intensatransformao de piruvato em lactato, na obteno de

energia necessria.


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5. Ensaio de isoenzimas: utilidade na anlise

de determinadas patologias

A alterao de uma certa isoenzima pode levar a deduo de

qual rgo do paciente est acometido:LDH1 e LDH2 podem indicar infarto do miocrdio

LDH3 - problemas pulmonares ou renais

LDH4 e LDH5 cirrose heptica, leses musculares


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6. Identificao da(s) possvel(eis) isoenzima(s) de

LDH aumentada(s) no paciente

Provavelmente a isoenzima LDH5 pois a queapresenta ismeros do tipo MMMM, mostrando suamaior atividade na musculatura esqueltica.


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7. Para dosar a LDH, lactato e NAD+ foram adicionadas a uma amostrade soro do paciente. Justificar de tais adies e explicar se o lactato e

o NAD+ devem ser adicionados em quantidades muito pequenas ou emexcesso, e se O NADH poderia substituir o NAD+ neste ensaio

O lactato e NAD+ devem estar em excesso para que a reao possuacomo fator limitante a enzima. Dessa forma pode ser medida o LDHlevando em conta a formao de piruvato, NADH,H+

Sim, a reao do tipo reversvel. Logo, basta criar um ambiente favorvelpara a reao ocorrer em qualquer sentido que ser possvel determinar onvel de LDH.


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8. Diferenas no ensaio de dosagem de LDH

utilizando-se como substrato lactato ou piruvato

H dois tipos de ensaios:Mtodo Piruvato-Lactato (Metodologia Cintica no Ultravioleta):determina o decrscimo da absorbncia em 340nm, que proporcional atividade de LDH na amostra.

Referencial: 25 30 37105-210U/L 140-280U/L 207-414U/LMtodo Lactato-Piruvato (Metodologia Cintica Colorimtrica deTempo Fixo): utilizao de um transportador de eltrons, o quefornecer uma leitura fotomtrica da dosagem. A absorbncia dacor vermelha a 50nm diretamente proporcional a quantidade deLDH.Referencial: Soro: 80-240 U/L

Lquor: 5-33 U/L


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9. Identificao do produto final da

gliclise anaerbica

Na gliclise anaerbica, o piruvato oriundo daglicose pode ser reduzido pelo NADH para formar

lactato. (Fermentao Lctica)

Em alguns seres, como bactrias e fungos, o

piruvato pode ser transformado em etanol.(Fermentao Alcolica)


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10. Idem , da gliclise aerbica

O piruvato o produto final da gliclise

Aps isso, o piruvato ir se transformar em acetil-CoA atravsda descarboxilao oxidativa

Dando continuidade ao processo da respirao celular, irocorrer o Crculo de Krebs e a Cadeia Respiratria.


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GlicliseAerbica

GlicliseAnaerbica


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11. Significado da Lanadeira do glicerol

3-fosfato

So responsveis pela transferncia de eltrons resultantes

do processo NADH/NAD+ no citossol para a matrizmitocondrial.

So necessrias pois a membrana mitocondrial impermevel a NADH e NAD+.


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a, glicerol 3-fosfato desidrogenase citoslica oxida NADH, reduzindo di-hidroxiacetona a glicerol 3-fosfato;

b, glicerol 3-fosfato desidrogenase localizada na superfcie externa da membranamitocondrial interna reduz FAD, que usado pela cadeia de transporte de eltronsmitocondrial


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12. Empregando-se as estruturas correspondentes, explicar a reao:piruvato p acetil-CoA

a sua denominao descarboxilao oxidativa, e o papel bioqumico detodas as vitaminas envolvidas na reao.

Descarboxilao Oxidativo: em presena de oxignio, o grupoCOO- do piruvato liberado em forma de CO2.

As vitaminas atuam como coenzimas no complexo poli-enzimtico piruvato desidrogenase:

TPP catalisa a descarbolixao do piruvato at

acetaldedo

FAD e NAD+ - transportadores de eltrons

CoA transportador do grupo ocila


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CONCLUSO


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BIBLIOGRAFIAhttp://www.biocristalografia.df.ibilce.unesp.br/valmir/bioquimica/glicolise/piruvato.htmlhttp://www.labes.com.br/desidrogenase_l %C3%A1ctica.htmhttp://www.bioquimicaqui11601.ucv.cl/unidades/glicolisis/metglic3fid.htmlhttp://www.abrale.org.br/glossario/index.php?letra=Dhttp://recursos.cnice.mec.es/biologia/bachillerato/segundo/biologia/ud04/figuras1/fig12.gifhttp://www.biochem.arizona.edu/classes/bioc462/462b/glycolysis.htmlhttp://www.ufmt.br/bionet/conteudos/01.01.05/Fermentacao.htmhttp://www.oboulo.com/dosagem-de-lactato-desidrogenase-34815.htmlhttp://www.ufpe.br/dbioq/portalbq0 4/adendo_diagnostico.htmBioquimica Ilustrada,Pamela C Champe e RichardAHarvey

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