第二节第二节 棒状杆菌属棒状杆菌属 ----白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌

（（ Corynebacterium diphtheriaCorynebacterium diphtheriaee ））

一、生物学性状一、生物学性状

1. 1. 形态与染色形态与染色

(1)(1) 革兰染色阳性革兰染色阳性 (2)(2) 菌体粗细不一菌体粗细不一 ,,常一端或两端膨大呈棒常一端或两端膨大呈棒

状状 ,, 排列不规则排列不规则 ,,呈栅栏状呈栅栏状 ,,

无无荚荚膜膜 ,,无鞭毛无鞭毛 ,,无芽胞 无芽胞 。。

※※ （（ 33 ））异染颗粒异染颗粒

美蓝短时间染色菌体着美蓝短时间染色菌体着色不均匀色不均匀 ,,出现深染颗粒出现深染颗粒。。用 用 Neisser Neisser 或或 Albert Albert 等等法染色 法染色 ,,这些颗粒与菌体这些颗粒与菌体着色不同着色不同 ,,称异染颗粒称异染颗粒 ,,可可用于鉴定。用于鉴定。

2. 2. 培养特性培养特性

在普通培养基虽能在普通培养基虽能生长生长 ,, 但菌体形态不典但菌体形态不典型型。。接种吕氏血清斜面接种吕氏血清斜面培养基可长出灰白色小培养基可长出灰白色小菌落菌落；；

※※ 在在 0.03%-0.04%0.03%-0.04% 亚亚碲碲酸酸钾血琼脂平板钾血琼脂平板上生长上生长时时 , , 因能利用因能利用碲碲盐并使盐并使其还原成为金属其还原成为金属碲碲 ,, 故故形成黑色菌落形成黑色菌落 ,, 具有鉴具有鉴别意别意义。义。

二、致病性及免疫性二、致病性及免疫性

( ( 一 一 ) ) 致病物质致病物质 11 ．．白喉外毒素 白喉外毒素 (diphtherotoxin)(diphtherotoxin)

2. 2. 索状因子索状因子 3. 3. K K 抗原抗原

※※ 11 ．．白喉外毒素 白喉外毒素 (diphtherotoxin)(diphtherotoxin)

白喉棒状杆菌的主要致病物质是白喉棒状杆菌的主要致病物质是白喉外毒素白喉外毒素，，有有 AA 和和 BB 两个亚单两个亚单位位：：

B B 亚单位亚单位 ---- 能与宿主靶细胞表面能与宿主靶细胞表面的特异受体结合的特异受体结合 ,, 介导 介导 A A 亚单位亚单位进入靶细胞。进入靶细胞。

A A 亚单位亚单位 ---- 具有毒性具有毒性 ,, 能抑制靶细能抑制靶细胞蛋白质的合成胞蛋白质的合成 ;; 白喉外毒素 白喉外毒素 A A 片段进入细胞后 片段进入细胞后 , , 使延伸因子 使延伸因子 2 2 (EF-2) (EF-2) 失活 失活 , , 抑制氨基酸转移至抑制氨基酸转移至肽肽链链 ,, 阻断宿主细胞蛋白质的合阻断宿主细胞蛋白质的合成成 ,, 从而引起组织坏死和病变。从而引起组织坏死和病变。

白喉毒素具有强烈的细胞毒作用白喉毒素具有强烈的细胞毒作用 ,,能抑制细胞蛋白质的合成能抑制细胞蛋白质的合成 ,, 从而破从而破坏细胞的正常生理功能坏细胞的正常生理功能 ,, 引起组织引起组织细胞的变性、坏死。细胞的变性、坏死。

ββ 棒状杆菌噬菌体棒状杆菌噬菌体白喉棒状杆菌───→ 获得白喉毒素 白喉棒状杆菌───→ 获得白喉毒素

免疫毒素免疫毒素

AbDT

tumor

2.2. 索状因子索状因子

细菌表面的一种毒性糖脂细菌表面的一种毒性糖脂 ,,

能破坏细胞的线粒体能破坏细胞的线粒体 ,, 影响细胞影响细胞

的呼吸与磷酸化。的呼吸与磷酸化。

3.3.K K 抗原抗原

（（ 11 ））细胞壁外面的一种不耐热糖细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白 蛋白 ,, 具有抗吞噬的作用具有抗吞噬的作用。。

（（ 22 ））有利于细菌在有利于细菌在粘粘膜表面定植膜表面定植。。

( ( 二 二 ) ) 所致疾病所致疾病

白白喉喉

随飞沫经呼吸道侵入机体或污随飞沫经呼吸道侵入机体或污染物品染物品直接接触直接接触传播。传播。

局部由于细菌和外毒素的作用局部由于细菌和外毒素的作用 ,, 粘粘膜上皮膜上皮细胞产生炎性渗出与坏死。渗出物中纤维细胞产生炎性渗出与坏死。渗出物中纤维蛋白将炎性细胞、蛋白将炎性细胞、粘粘膜坏死组织和白喉棒膜坏死组织和白喉棒状杆菌凝固在一起状杆菌凝固在一起 ,, 形成灰白色点状或片状形成灰白色点状或片状假膜假膜 (pseudomembrane), (pseudomembrane), 假膜与假膜与粘粘膜膜下组织粘连下组织粘连 ,, 不易拭去。咽、喉和气管不易拭去。咽、喉和气管粘粘膜膜水肿及假膜脱落水肿及假膜脱落 ,, 可引起呼吸道阻塞可引起呼吸道阻塞 ,, 甚至甚至窒息死亡。窒息死亡。

白喉棒状杆菌（鼻咽腔）

飞沫、污染物品 鼻 咽喉气管

局部细菌和毒素的作用

灰白色假膜

粘膜水肿及假膜脱落，引起呼吸道阻塞，甚至窒息死亡。

外毒素入血

毒血症

心肌 肝 肾上腺 外周神经内脏出血心肌炎 软腭麻痹

声嘶 肾上腺功能障碍

2-7 天潜伏期

所致疾病：白喉所致疾病：白喉

白喉假膜白喉假膜

( ( 三 三 ) ) 免疫性免疫性

白喉病后可获牢固体液免疫白喉病后可获牢固体液免疫 ,, 主主要是抗毒素中和外毒素。要是抗毒素中和外毒素。

抗毒素可阻止抗毒素可阻止 BB 片段与敏感细胞片段与敏感细胞结合结合 ,, 使使 AA 片段不能进入细片段不能进入细胞。胞。

锡克试验 锡克试验 (Schick test)(Schick test) 原理：毒素抗毒素毒素抗毒素中和反应

结果： 有红肿 阳性反应 无免疫力 无红肿 阴性反应 有免疫力

应用：检查机体对白喉的免疫力

三、三、微生物学检查法微生物学检查法

标本标本 直接涂片镜检—形态，异染颗粒，直接涂片镜检—形态，异染颗粒， 分离培养分离培养 ---- 吕氏血清斜面，亚碲酸钾吕氏血清斜面，亚碲酸钾血琼血琼

脂脂平板平板 毒力鉴定毒力鉴定

四、防治原则四、防治原则

（一）预防（一）预防1.1. 人工主动免疫人工主动免疫 注射白喉类毒素。注射白喉类毒素。 目前国内应用目前国内应用白白喉类毒素、百日喉类毒素、百日

咳咳菌苗菌苗、破伤风类毒素的混合制剂 、破伤风类毒素的混合制剂 (DPT (DPT 混合疫苗混合疫苗，，又称白百破三联又称白百破三联疫苗疫苗 ) ) 。。

2.2. 人工被动免疫人工被动免疫

与白喉病人密切接触的易感与白喉病人密切接触的易感

儿童应肌肉注射白喉抗毒素进行儿童应肌肉注射白喉抗毒素进行

紧急预防。紧急预防。

（二）（二）治疗治疗

1.1. 抗生素的抗生素的应用应用

青霉素、红霉素青霉素、红霉素 ,, 不仅能抑制白不仅能抑制白喉棒状杆菌的感染喉棒状杆菌的感染，，也能预防恢复也能预防恢复期带菌者的出现。期带菌者的出现。

2.2. 抗毒素抗毒素

应尽早注射足量白喉抗毒素应尽早注射足量白喉抗毒素 ,,

注射前作皮肤试验注射前作皮肤试验，，阳性者进行阳性者进行

脱敏治疗脱敏治疗。。

第三节 嗜肺军团菌第三节 嗜肺军团菌

（（ Legionella Legionella ppneumophilneumophilaa ））

一、一、生物学性状生物学性状

1.G1.G--杆菌杆菌 , ,

有鞭毛 有鞭毛 , , 有菌毛 有菌毛 ,, 有微有微荚荚膜膜，， 无芽胞 无芽胞 。。

2.2.专性需氧专性需氧 ※※ BCYE ( buffered charcoal-yeast BCYE ( buffered charcoal-yeast

extract) extract) 培养基 培养基 — 含— 含缓冲活性炭酵缓冲活性炭酵母浸出液 母浸出液 ,, 加上铁、 加上铁、 L L --半半胱胱氨酸和氨酸和αα--酮酮戊二酸戊二酸。。

在在 BCYEBCYE 培养基中加入 培养基中加入 0.01 % 0.01 % 溴溴甲甲酚酚紫和 紫和 0.001% 0.001% 溴酚溴酚蓝蓝 ,, 可可以鉴定军团菌科的细菌 以鉴定军团菌科的细菌 ,, 在这种培在这种培养基上生长的嗜肺军团菌菌落平养基上生长的嗜肺军团菌菌落平坦坦 ,, 呈浅绿色呈浅绿色 ,, 非典型军团菌的菌非典型军团菌的菌落呈亮绿色。落呈亮绿色。

二、二、 致病性 致病性

引起军团病引起军团病

夏秋季流行夏秋季流行

主要通过呼吸道吸入带菌飞沫、主要通过呼吸道吸入带菌飞沫、气溶胶污染的尘埃而感染。气溶胶污染的尘埃而感染。

临床类型临床类型

1.1.流感型流感型 表现为发热 表现为发热 , , 全身不适 全身不适 ,, 头痛及肌头痛及肌肉疼痛等 肉疼痛等 ,, 预后良好 预后良好 ;;

2.2.肺炎型肺炎型 发病急 发病急 ,, 寒战高热、咳嗽、胸痛、出寒战高热、咳嗽、胸痛、出

现以肺部感染为主的多器官损伤现以肺部感染为主的多器官损伤 ,, 最后最后发展为呼吸衰竭 发展为呼吸衰竭 ; ;

3.3.肺外感染型肺外感染型

继发性感染继发性感染

引起菌血症引起菌血症

三、三、防治原则防治原则

无有效的预防方法无有效的预防方法 ,, 无无可用的军团菌可用的军团菌疫苗。疫苗。

预防措施预防措施中，中，特别强调水源管理特别强调水源管理 ,, 加加强室内空调系统和饮水系统的卫生管强室内空调系统和饮水系统的卫生管理理 ,, 加强对人工管道系统的消毒处理。加强对人工管道系统的消毒处理。

适 应 症：军团菌病、肺炎支原体肺炎、肺炎衣原体肺炎、沙眼衣原体结膜炎、厌氧菌所致口腔感染、空肠弯曲菌肠炎、百日咳等。

治 疗治 疗

首选红霉素首选红霉素 ,,对治疗反应对治疗反应迟缓的患者迟缓的患者可合用利福可合用利福平等其他药平等其他药物。物。

第四节第四节 百日咳鲍特菌百日咳鲍特菌

(Bordetella(Bordetella pertussis)pertussis)

1.1. 生物学性状生物学性状

革兰染色阴性革兰染色阴性 短小杆菌短小杆菌 ,, 两端浓染两端浓染 单个或成对、短链排列单个或成对、短链排列 光滑型菌株有光滑型菌株有荚荚膜膜 无无芽胞芽胞

专性需氧专性需氧

营养要求较高 营养要求较高 , , 血琼脂和巧血琼脂和巧

克力色琼脂平板上均不能生长克力色琼脂平板上均不能生长

※ ※ 鲍鲍 -- 金 金 ( Bordet-Gengou, B-G) ( Bordet-Gengou, B-G) 培养培养基基，，内含血液、甘油和马铃薯。内含血液、甘油和马铃薯。

菌落特征：菌落特征： 3-53-5 天，形成细小、光滑、隆天，形成细小、光滑、隆起、有珠光色泽的菌落，周围有不明显的起、有珠光色泽的菌落，周围有不明显的溶血环。溶血环。

ⅠⅠ 相菌有毒力相菌有毒力，，新分离的菌株有新分离的菌株有荚荚膜和菌膜和菌毛毛，，为光滑型为光滑型 ,, 称为称为ⅠⅠ相菌。相菌。

传代培养后能发生变异传代培养后能发生变异

Ⅱ Ⅱ 相、相、ⅢⅢ相为过渡相 相为过渡相

Ⅳ Ⅳ 相为粗糙型菌落的无毒株。相为粗糙型菌落的无毒株。

2. 2. 致病性致病性

（（ 11 ））致病致病物质物质

致病物质有致病物质有荚荚膜、菌毛、内毒膜、菌毛、内毒

素以及一些生物学活性物质。素以及一些生物学活性物质。

本菌的生物活性物质有 本菌的生物活性物质有 ::

①①百日咳毒素 百日咳毒素 ( pertussistoxin) ( pertussistoxin) 系外系外毒素毒素 , , 与附着纤毛上皮和阵发性咳嗽有与附着纤毛上皮和阵发性咳嗽有关。关。

②②腺腺苷苷酸环化酶毒素 酸环化酶毒素 (adenylate (adenylate cyclase toxin) cyclase toxin) 催化真核细胞内 催化真核细胞内 ATP ATP 转化为 转化为 cAMP, cAMP, 抑制白细胞的趋化抑制白细胞的趋化 ,, 吞吞噬及杀伤作用噬及杀伤作用 ;; 抑制巨噬细胞的氧化活抑制巨噬细胞的氧化活性性 ,, 抑制 抑制 NK NK 细胞的杀细胞作用。细胞的杀细胞作用。

③③气管细胞毒素 气管细胞毒素 (tracheal cytotoxin)(tracheal cytotoxin)对气管纤毛上皮细胞有特殊亲和力对气管纤毛上皮细胞有特殊亲和力 ,, 低低浓度抑制纤毛的活动浓度抑制纤毛的活动 ,, 高浓度使其坏死。高浓度使其坏死。

④④丝状红细胞凝集毒素 丝状红细胞凝集毒素 (filamentous (filamentous hemoagglutinin) hemoagglutinin) 具有促进细菌对纤具有促进细菌对纤毛上皮细胞毛上皮细胞粘粘附的作用。附的作用。

（（ 22 ）所致疾病）所致疾病

传染源传染源 ---- 患者或带菌者。患者或带菌者。

传播途径传播途径 ---- 主要经飞沫传播。主要经飞沫传播。 病原菌经呼吸道进入易感儿童体病原菌经呼吸道进入易感儿童体内内 ,, 粘附于呼吸道纤毛上皮细胞粘附于呼吸道纤毛上皮细胞 ,,产生活性致病物质引起的百日咳病。产生活性致病物质引起的百日咳病。

病 程 病 程 ①①卡他期 卡他期 类似普通感冒类似普通感冒 ,, 症状主要是微热、轻度咳症状主要是微热、轻度咳嗽等。此期传染性强嗽等。此期传染性强 ,, 随飞沫排随飞沫排出出大量细大量细菌。菌。

②②痉痉咳期 咳期 阵发性阵发性痉挛痉挛性咳嗽伴有特殊的高音调鸡性咳嗽伴有特殊的高音调鸡鸣样吼声鸣样吼声 ,, 呼吸道有大量呼吸道有大量粘粘稠分泌物稠分泌物 ,, 排排出困难。出困难。

③③恢复期 恢复期 咳嗽逐渐减轻咳嗽逐渐减轻 ,, 鸡鸣音消失。鸡鸣音消失。

3.3. 免疫性免疫性

愈后及接种疫苗均可获持久且愈后及接种疫苗均可获持久且

较强的免疫力 较强的免疫力 , , 再次感染本菌的病再次感染本菌的病

例少见。例少见。

4.4. 微生物学检查法微生物学检查法 取鼻咽拭子或咳碟法接种取鼻咽拭子或咳碟法接种鲍鲍 -- 金培养基金培养基，，

菌落特征：菌落特征： 3-53-5 天，形成细小、光滑、隆起、天，形成细小、光滑、隆起、有珠光色泽的菌落，周围有不明显的溶血有珠光色泽的菌落，周围有不明显的溶血环。环。

取可疑菌落做染色镜检、生化反应、荧光取可疑菌落做染色镜检、生化反应、荧光抗体检查等。抗体检查等。

55.. 防治原则防治原则

我国使用我国使用““白百破白百破””三联疫苗 三联疫苗 (DPT) (DPT) 对儿对儿童主动免疫效果好童主动免疫效果好。。““ 白百破白百破”” 三联疫苗系选用 三联疫苗系选用 I I 相百日咳鲍特相百日咳鲍特

菌死疫苗与精制白喉类毒素菌死疫苗与精制白喉类毒素 ,, 精制破伤风类精制破伤风类毒素混合。毒素混合。

治疗首选红霉素、氨治疗首选红霉素、氨苄苄青霉素等。青霉素等。